黑白花奶牛

黑白花奶牛（共5篇）

黑白花奶牛 篇1

产后瘫痪又名产后风、胎风。因母牛产前营养不良、钙磷缺乏、时间太长、失血过多、气血两亏所致。

1 治疗

1.1 乳房送风

升高乳房血压, 刺激末稍神经, 反射性地兴奋大脑神经。方法是挤空乳房内乳汁, 用乳房送风器或用乳房注射针头接一般打气筒向乳房送入空气, 待乳房基部胀满后用纱布条扎住乳头, 经2~4h解开。

1.2 乳房注射新鲜消毒牛乳

挤空乳房, 取煮沸消毒过的新鲜牛乳, 候温用注射器 (接乳房注射针头) 注入。前乳头各注入150~200m L;后乳头各注入200~250m L。注后用纱布条扎住乳头, 经1~2h解开, 挤出乳汁。此法一般在不具备乳房送风条件时采用。

1.3 西药治疗

10%葡萄糖注射液2000m L、10%氯化钙80~120m L、维生素C 40m L, 一次缓慢静脉注射;20%安乃近注射液40m L, 一次肌肉注射。

1.4 中药

独活35g、桑寄生35g、防风30g、秦艽30g、细辛6g、牛膝30g、杜仲30g、熟地35g、白芍30g、当归40g、川芎30g、党参40g、茯苓30g、甘草20g、桃仁25g、香附25g、桂枝30g, 热象者加黄芩20g, 共研细末, 开水冲调, 待温一次胃管灌服。

1.5 对症治疗

血压下降, 肌肉注射肾上腺素3~5m L。

2 护理

牛舍宜温暖干燥, 铺厚垫草以防褥疮, 有食欲者喂给营养丰富的饲料。

3 预防

加强妊娠期饲养管理, 改变饲草饲料单一状况, 适当增加妊娠期饲料的钙、磷比例 (鱼粉、骨粉、贝壳粉) , 补充少量维生素添加剂, 做好分娩准备和助产工作。

治黑白花奶牛产后瘫痪经验谈 篇2

1.多年来，笔者应用以下方法，治愈39例，效果显著。

①乳房送风。升高乳房血压；刺激末梢神经，反射性地兴奋大脑神经。方法是：挤空乳房内的乳汁，用乳房送风器或用乳房注射针头按一般打气筒向乳房送入空气，待乳房基部胀满后用纱布条扎住乳头，经2～4小时解开。

②乳房注射新鲜消毒牛乳。挤空乳房，取煮沸消毒过的新鲜牛乳，待牛乳变温后用注射器（用乳房注射针头）注入。前乳头各注入150～200毫升；后乳头各注入200～250毫升。注射后用纱布条扎住乳头，经1～2小时解开，挤出乳汁。此法一般在不具备乳房送风条件下采用。

③西药治疗。用10%葡萄糖酸钙750～1500毫升，或5%葡萄糖氯化钙750～1200毫升静脉注射，维生素C40毫升，一次缓慢静脉注射；20%安乃近注射液40毫升，一次肌肉注射。

④中药。独活35克，桑寄生35克，防风30克，秦艽30克，细辛6克，牛膝30克，杜仲30克，熟地35克，白芍30克，当归40克，川芎30克，党参400克，茯苓30克，甘草20克，桃仁25克，香附25克，桂枝30克，有热象者加黄芩20克，共研成细末，开水冲调，待水变温后一次灌服。

⑤对症疗法。血压下降，肌肉注射肾上腺素3～5毫升。心脏功能不好，肌肉注射安呐咖10毫升。防瘤胃臌气，向瘤胃注入制酵剂。直肠积粪时，可掏粪灌肠。膀胱积尿时及时导尿，防止破裂。

2.护理：牛舍宜温暖干燥，铺厚垫草以防褥疮，有食欲者喂给营养丰富的饲料。

3.预防：加强妊娠时饲养管理，改善饲草饲料单一状况，适当增加妊娠期饲料的钙、磷比例（鱼粉、骨粉、贝壳粉），补充少量维生素添加剂，做好分娩准备和助产工作。

黑白花奶牛的前胃弛缓诊治 篇3

1 病因

长期饲料单一, 或饲喂适口性差的饲料, 如稻草等未经合理加工的饲料。饲料配合不平衡, 糟渣类饲料过高, 如酒糟、豆腐渣等。粗饲料供应不足。突然改变饲料, 多见于由品质差的饲料突然改变为适口性强的饲料, 牛只过度采食而胃负担加重。饲料保存不当, 饲喂发霉变质冰冻饲料。继发性前胃弛缓乳牛更多见, 传染病如布病、结核病、传染性胸膜炎和口蹄疫等都有前胃弛缓症状。

不合格的饲养条件作用于机体, 首先能引起瘤胃的机能紊乱。瘤胃兴奋需要一定的维生素饲料刺激, 长期饲喂单一粗硬饲料, 可引起瘤胃过度兴奋, 继而由兴奋转为抑制。饲喂含水性饲料过多, 可使牛的兴奋性降低, 使食物的混合和推送发生困难。精料饲喂过多, 由于胃内容物中氢离子浓度显著增加, 瘤胃p H值下降, 正常的微生物区系发生改变, 原虫消失, 导致瘤胃正常发育受到破坏, 异常发酵引起前胃机能紊乱, 消化障碍, 阻止瘤胃微生物生长繁殖, 并能损伤瘤胃上皮, 提高对有机酸的吸收, 可引起瘤胃弛缓和阻止系统的酸中毒。

2 症状

病牛食欲降低或废绝, 表现为只吃青草、干草而不吃精料, 或吃料不吃草。重者上槽后呆立于槽前, 精神沉郁, 目光无神, 步态缓慢, 乳量下降。体温和心跳正常, 瘤胃触诊质度正常, 听诊瘤胃蠕动音异常。一种蠕动音频繁, 但蠕动力量减弱, 波峰短而小, 强度减弱。一种蠕动和次数同时减少, 隔较长时间才能听到一次微弱的蠕动。反当次数减少, 咀嚼次数不定, 有的为20~30次, 有的多达80~90次。瘤胃弛缓时间较长者, 左肷部凹陷腹部下降, 消瘦明显。

原发性前胃弛缓, 及时治疗多在1~2天痊愈。继发性前胃弛缓, 则多以原发病程和病性的长短而定。原发病治愈, 则前胃弛缓症状消除, 逐渐康复。

3 诊断

根据食欲异常、瘤胃蠕动减弱、全身变化明显等特征即可确诊。但因乳牛病后大多有前胃弛缓症状的表现, 因此在诊断时应根据具体情况判定。

4 治疗

黑白花奶牛 篇4

1材料与方法

1.1材料

兰州黑白花奶牛耳缘组织采自兰州花庄奶牛繁殖场出生的新生小牛公母各两头。DMEM (Gibco, 货号:02-5062EJ) 、0.2%胰蛋白酶 (兰州百灵生物, 批号:20140425) 、胎牛血清 (兰州民海生物, 批号:20140715, 添加比例为10%) 、DMSO (ThermoF isher, 货号:20688) 、无菌和支原体检查培养基 (北京三药) 、病毒荧光抗体结合物 (VMRD) 、病毒检查用细胞 (本室保存) 、鸡和豚鼠红细胞等。主要仪器设备有CO2培养箱 (Thermo, 3111型) 、倒置相差显微镜 (Olympus, CK40-32PH型) 、荧光倒置相差显微镜 (Olympus, IX71型) 和液氮罐 (乐山东亚) 等。

1.2方法

1.2.1原代培养新生小牛刚采集完血液后剪下耳朵, 标记个体性别后, 放入装有冻袋的泡沫箱中6 h内带到实验室。先用纯净水流水反复搓洗表面污垢, 在75%酒精中完全浸泡5~10 min。浸泡结束后在无菌PBS中用眼科镊反复刮洗, 期间不断更换清洗器皿和PBS使表面彻底消毒。剪弃边缘部分, 留约2 cm大小的组织, 剥去皮肤连同软骨剪成1 mm3大小的组织块, 每间隔2 mm均匀辅在细胞瓶的生长面, 反转细胞瓶使生长面朝上加入含血清的培养液, 置37℃5%CO2培养箱培养, 过夜后轻轻翻转细胞瓶, 使组织块完全浸泡在培养液中, 从培养的第3天起观察细胞的生长情况。原代培养标记为P0代, 传代后按P1、P2……标记。

1.2.2传代培养和冻存显微镜下观察有较多地组织块边缘见细胞长成单层后, 用胰蛋白酶消化细胞在原培养瓶中传代培养 (即传代比例1∶1) 。此后细胞生长成致密单层后按1∶3比例传代, 到培养P3时扩大培养数量, 在该代次对数生长期末期消化后按1.0×106/ml左右密度在液氮中 (-196℃) 冻存, 冻存保护液为10%DMSO+20%胎牛血清+70%DMEM。每个个体的耳缘细胞冻存30支, 每支装量1 ml。

1.2.3细胞鉴定按文献方法检查复苏活力[3]、观察细胞形态、绘制生长曲线[4]、检查无菌和支原体[5]以及致细胞病变病毒、血细胞吸附病毒和特异的病毒因子[6]。

2结果

2.1原代培养

兰州黑白花奶牛耳缘组织原代培养时在第4天可见部分组织块的边缘有细胞长出, 多为不规则形分散生长 (如图1a) 。到第6天时大多数植块边缘有成片的单层细胞, 以成纤维形细胞为主, 细胞相互间隙较大, 细胞并不致密 (如图1b) 。

2.2传代培养

对原代培养的细胞首次传代以后细胞生长速度变快, P1代在48 h成致密单层细胞, 此后按1∶3比例传代时均在72 h成致密单层细胞, 细胞间连接紧密, 以不规则成纤维状细胞为主, 也见有规则扁平的上皮样细胞, 视野中漂浮的死细胞极少 (如图1c) , 说明细胞活力高长势好。

2.3细胞冻存

对P3代细胞在液氮中冻存的平均密度为1.24×106/ml, 平均活力为97.5%。

2.4细胞鉴定

2.4.1复苏活力耳缘细胞平均复苏活力为95.2%, 比冻存前略有下降。

2.4.2细胞形态复苏的细胞培养48 h时长成较致密单层, 按1∶3比例传代后72 h长厉致密单层细胞, 形态与冻存前的P3代相似。

2.4.3生长特征兰州黑白花奶牛耳缘细胞的生长曲线呈“S”型, 如图2所示。可以看出, 前24 h为潜伏期, 细胞增殖较慢, 说明低密度接种时潜伏期长。48~120 h为对数生长期, 144 h进入平台期直到216 h才进入衰退期, 细胞维持培养时间较长。平均最大增值浓度为3.36×105/ml, 群体倍增时间较长为41.8 h, 而对数生长期的倍增时间较短只有24 h。

2.4.4无菌检查培养细胞的培养基检查细菌和真菌培养7 d均没有菌生长。

2.4.5支原体检查培养细胞的培养基在支原体液体基中培养14 d颜色没有变化, 在固体培养基中培养14 d也没有菌落生长;细胞冻融处理的上清液接种Vero细胞上荧光染色后, 只观察到细胞核有蓝色荧光其他部位没有荧光, 如图3。

2.4.6内、外源病毒因子检查细胞培养直接观察和血吸附试验细胞形态正常, 无血细胞吸附现象;细胞冻融处理的上清液接种Vero和MRC-5细胞培养观察和血凝试验的两种细胞形态均正常, 血凝试验均为阴性;用荧光抗体结合物检查BVDV、REO和BPV, 均没有病毒的特异性荧光产生, 说明保存的细胞没有被内、外源病毒污染, 如图4。

3结论

畜禽种质资源是以物种为单元的遗传多样性资源, 是关系到畜牧业可持续发展和生物多样性以及人类社会可持续发展的重要物质基础。动物的体细胞包含物种的全部遗传信息, 构建畜禽种质资源细胞库, 可实现对种质资源的永久保存[7]。兰州黑白花奶牛是甘肃省优良地方品种, 用植块法培养的新生小牛耳缘组织细胞生长良好, 没有细菌、真菌、支原体和内、外源病毒污染, 使这一重要物种的种质资源在细胞水平上得以保存, 也为相关学科研究提供理想的生物材料。

摘要：目的:通过耳缘组织细胞的分离培养和保存, 在细胞水平上保存兰州黑白花奶牛的种质资源。方法:采用植块法培养兰州黑白花奶牛的耳缘组织原代细胞, 经传代扩大培养后在液氮中冷冻保存, 并对保存的耳缘组织细胞系进行了复苏活力、形态、生长特性、微生物和内、外源病毒因子检查。结果:兰州黑白花奶牛耳缘组织植块培养时第4天可见细胞从植块边缘生长, 第6天消化传代后生长变快, 形态以上皮型为主。冷冻保存的兰州黑白花奶牛耳缘细胞系复苏活力达95%, 生长良好, 生长曲线呈近“S”型, 最大增殖浓度3.36×105/ml, 对数生长期倍增时间为24 h, 无菌、支原体和内、外源病毒因子检查为阴性。结论:成功建立了兰州黑白花奶牛耳缘组织细胞系, 使这一物种的种质资源在细胞水平上得以长期保存。

关键词：兰州黑白花奶牛,耳缘组织,细胞系

参考文献

[1]赵国琳.甘肃省地方畜禽品种资源[M].兰州:甘肃科学技术出版社, 2013.

[2]孙连科.兰州黑白花奶牛泌乳规律及其分布[J].甘肃畜牧兽医, 1988, (06) :7.

[3]乔自林, 冯玉萍, 李明生, 等.兰州大尾羊耳缘组织成纤维细胞系的建立[J].黑龙江农业科学, 2012, (10) :64-68.

[4]李玲, 李雪峰.细胞生物学实验[M].长沙:湖南科学技术出版社, 2003.

[5]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典三部2010年版[M].北京:中国农业出版社, 2011.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典三部2010年版[M].北京:中国医药科技出版社, 2010.

黑白花奶牛 篇5

1 不孕原因分析

根据调查, 主要有以下几个方面。

1.1 先天性不孕

子宫发育不良, 子宫角过细、过长, 形似鸡肠盘在一起, 也有整个子宫角呈直筒状, 子宫颈口闭锁不开, 直至3岁时用药仍闭锁不开;卵巢过小, 如黄豆粒大小。

1.2 体质性不孕

母牛两胎以后, 出现过肥, 导致卵巢囊肿, 频频发情;母牛过瘦, 大多数不排卵, 发情不明显, 多发生于老龄牛。

1.3 营养不全面饲料单一

粗饲料全年基本是麦秸, 其他饲料很少, 精料补充青稞、麸皮、豆类饲料很少又缺乏青饲料。由于饲料单一, 营养不全面, 缺乏蛋白质、维生素、矿物质等微量元素, 破坏了母牛的正常机能代谢, 致使母牛出现卵巢静止, 变硬或囊肿。

1.4 疾病性不孕

经产牛, 胎衣不下, 难产, 死胎以及不正确的助产所引发的子宫内膜炎。小母牛, 配种过早引起的阴道炎, 阴道创伤, 感染发炎;体质过肥, 过瘦老牛, 卵巢囊肿, 黄体囊肿, 排卵期延迟或不排卵, 生理性宫颈口闭锁。

2 综合防治措施

2.1 加强饲养管理

加强饲养管理是增强牛体健康, 减少营养性不孕的基本方法。因为母牛喂过多的精饲料而运动量又不足, 容易使奶牛过肥, 发现异常, 妨碍生育。尤其高产母牛精料过多, 更易引起代谢疾病, 进而造成不孕。犊牛生产期营养不良, 发育受阻, 会影响生殖器的发育, 易造成初情期推迟, 初产时出现难产或死胎, 既影响繁殖性能, 也影响生产性能。另外, 运动与阳光浴对防止奶牛不孕也有重要作用, 如牛舍通风不好、空气污浊、过度潮湿、夏季闷热、冬季酷寒等恶劣环境, 不仅危害母牛健康, 还能造成母牛停止发情。因此, 在饲养管理上要保证全价的蛋白质, 充足的维生素及钙、磷等矿物质饲料, 还要保证饲料多样化, 青绿多汁饲料和优质干草满足供应。同时在环境上还要保持牛舍通风干燥、阳光充足, 控制交配次数, 每天最多不超过2头, 小母牛达不到1.5岁时不配。老龄母牛发情时持续期短, 要适当早配。小母牛性欲旺盛, 发情持续期较长, 要适当推迟配种时间, 做到“老配早, 少配晚, 不老不少配中间”, 不断提高受胎率。

2.2 不孕症的治疗

2.2.1 子宫内膜炎

采用中西医疗法, 效果较好。

中药方剂:白术 (土炒) 50g、苍术50g、山药50g、陈皮40g、酒车前20g、酒白芍30g、党参50g、柴胡40g、甘草25g, 共研为末, 黄酒半斤为引, 开水冲, 侯温服。

西药用青霉素160万单位, 链霉素100万单位, 注射用水15～20ml一次注入子宫, 一日一次连用2～3次同时配合子宫冲洗。

2.2.2 子宫炎

采用中西医治疗, 效果较好。中药方剂学:山茶60g～90g、龙骨60g、牡蛎60g、海漂肖60g、白术60g、茜草30g、小茴香50g、鹿角霜30g, 水煎服。西药用青霉素160万单位, 链霉素100万单位, 注射用水15mL～20mL一次宫内注入, 轻者用药后1h～2h配种, 重者每日1次, 连用2次～4次, 同时配合子宫冲洗。

2.2.3 阴道炎

用高锰酸钾水冲洗子宫, 而后放入洗必泰3～5粒, 每日一次连用3～5次。

3.2.4卵巢囊肿

用绒毛膜促性腺素1000单位一次静注, 同时肌注黄体酮10mg连用15d。如症状减轻或有效果, 可继续用药, 直至好转为止。

2.2.5 排卵迟缓

卵巢滤泡发育缓慢, 在发情中期肌肉注射促黄体素100单位～200单位或用绒毛膜促性腺激素500单位静脉注射或1000单位肌肉注射。

2.2.6 黄体囊肿

母牛排卵期间要免受被打、惊吓、饲料变质等不良因素的刺激。一旦发生黄体囊肿, 肌注促卵泡成熟素100～200单位, 使黄体分泌的孕酮不起作用, 隔3～4天注射1次, 连注2～3次, 或注射前列腺素3～5毫克, 1次即可。