灯盏花

2024-11-13

灯盏花(共10篇)

灯盏花 篇1

灯盏花素注射液与注射用灯盏花素说明书修订要求

一、应增加警示语,内容如下:

警示语:

1.本品不良反应包括过敏性休克,应在有抢救条件的医疗机构使用,使用者应是具备治疗过敏性休克等严重过敏反应资质或接受过过敏性休克抢救培训的医师,用药后出现过敏反应或其他严重不良反应须立即停药并及时救治。

2.脑出血急性期或有出血倾向的患者禁用。

二、【不良反应】项应当包括:

1.过敏反应:潮红、皮肤瘙痒、皮疹、呼吸困难、喘息、憋气、心悸、紫绀、喉头水肿、血压下降、过敏性休克等。

2.全身性损害:寒战、发热、高热、乏力、多汗、疼痛等。

3.呼吸系统:呼吸急促、气短、咳嗽等。

4.心血管系统:心悸、胸闷等。

5.中枢及外周神经系统:头晕、头痛、抽搐等。

6.消化系统:恶心、呕吐、腹痛、腹泻、肝脏生化指标异常(如转氨酶上升)、消化道出血等。

7.其他:静脉炎、血尿等。

三、【禁忌】项应当包括:

1.对本品或含有灯盏花素制剂及成份中所列辅料过敏或有严重不良反应病史者禁用。

2.脑出血急性期或有出血倾向的患者禁用。

3.新生儿、婴幼儿禁用。

4.孕妇禁用。

四、【注意事项】项应当包括:

1.本品不良反应包括过敏性休克,应在有抢救条件的医疗机构使用,使用者应是具备治疗过敏性休克等严重过敏反应资质或接受过过敏性休克抢救培训的医师,用药后出现过敏反应或其他严重不良反应须立即停药并及时救治。

2.胸痛剧烈及持续时间长者,应作心电图及心肌酶学检查,并采取相应的医疗措施。

3.严格按照药品说明书规定的功能主治使用,禁止超功能主治用药。

4.严格掌握用法用量。按照药品说明书推荐剂量、调配要求使用药品。不可超剂量、过快滴注和长期连续用药。

5.用药前和配制后及使用过程中应认真检查本品及滴注液,发现药液出现浑浊、沉淀、变色、结晶等药物性状改变以及瓶身有漏气、裂纹等现象时,均不得使用。

6.严禁混合配伍,谨慎联合用药。本品应单独使用,禁忌与其他药品混合配伍使用。如确需要联合使用其他药品时,应谨慎考虑与本品的间隔时间、输液容器的清洗以及药物相互作用等问题。

7.本品与pH值低于4.2的溶液使用时,可使药物析出,故不得使用pH值低于4.2的溶液稀释。

8.用药前应仔细询问患者情况、用药史和过敏史。过敏体质者、肝肾功能异常患者、凝血机制或血小板功能障碍者、老人、哺乳期妇女、初次使用中药注射剂的患者应慎重使用,并加强监测。

9.目前尚无儿童应用本品的系统研究资料,不建议儿童使用。

10.静脉滴注时,严格控制滴注速度和用药剂量。建议滴速小于40滴/分,一般控制在15~30滴/分。首次用药,宜选用小剂量,慢速滴注。

11.禁止使用静脉推注的方法给药。

12.加强用药监护。用药过程中,应密切观察用药反应,特别是开始30分钟。如发现异常,立即停药,采用积极救治措施,救治患者。

13.文献显示灯盏花素(主要含野黄芩苷)具有减少血小板计数、抑制血小板聚集、抑制内凝血等作用,为降低出血风险,建议本品与抗凝药或抗血小板药等可能增加出血风险的药物同时使用时应加强监测。

灯盏花 篇2

一直以来, 由于缺乏对灯盏花素有关物质的研究, 《中国药典》2010版在一部植物油脂和提取物章节“灯盏花素”项下, 仅有有关物质总峰面积要求, 而有关物质的组成物质和药物不良反应则缺乏。因此, 为了提高灯盏花素制剂的用药安全性, 本实验对灯盏花素的有关物质进行分离和含量分析。

1 仪器与材料

Shimadzu, LC-8A制备高效液相色谱仪;Megres C18制备色谱柱 (30mm×300mm, 10μm) ;Agilent 1200Series高效液相色谱仪;Agilent C18分析色谱柱 (4.6mm×250mm, 5μm) ;Agilent 1200LC/MSD质谱仪;Bruker AV-600MHz型核磁共振仪 (TMF内标) , 所用试剂为分析纯或色谱纯。灯盏花原料药 (3个不同厂家, 共6个批次, 市场购买) , 灯盏花片 (7个厂家, 共7个批次, 市场购买) , 灯盏花素有关物质 (自制) 。

2 色谱条件

将厂家1的灯盏花素原料药溶于N, N-二甲基甲酰胺中, 用制备型高效液相色谱仪对其有关物质进行分离, 色谱条件为26%甲醇等度洗脱, 流速为40mL·min-1, 最大吸收波长为335nm, 进样量为2mL。

3 结构鉴定

化合物2:黄色无定型粉末。HR-ESI-MSm/z447.0942;1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) 和13C-NMR (100MHz, DMSO-d6) , 与文献报道的数据一致[4], 因此鉴定化合物2为灯盏甲素。

化合物3:黄色无定型粉末。HR-ESI-MS m/z287.0540;1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) 和13C-NMR (100MHz, DMSO-d6) , 与文献报道的数据一致[5], 因此鉴定化合物3为野黄芩素。

化合物4:黄色无定型粉末。HR-ESI-MS m/z271.0615;1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) 和13C-NMR (100MHz, DMSO-d6) , 与文献报道的数据一致[6], 因此鉴定化合物4为芹菜素。

4 方法

4.1 供试品溶液配制

精密称取灯盏花素原料药20mg, 加入N, N-二甲基甲酰胺5mL溶解, 摇匀, 过滤, 取续滤液, 制成灯盏花素原料药的供试品溶液, 浓度为4mg·mL-1。

取灯盏花素片1片 (每片含灯盏乙素20mg) , 研细, 加入N, N-二甲基甲酰胺5mL溶解, 摇匀, 过滤, 取续滤液, 制成灯盏花素片的供试品溶液, 浓度为4mg·mL-1。

4.2 对照品溶液配制

精密称取分离得到的6-羟基山奈酚-7-O-β-葡萄糖醛酸 (纯度95.4%) 0.5mg、灯盏花甲素 (纯度98.7%) 0.5mg、野黄芩素 (纯度98.2%) 0.5mg、芹菜素 (纯度96.3%) 0.5mg、灯盏乙素 (纯度97.8%) 4.0mg, 加入N, N-二甲基甲酰胺1mL溶解, 摇匀, 制成对照品溶液, 对照品溶液的浓度为0.5mg·mL-1。

4.3 色谱条件

Agilent C18分析色谱柱 (4.6mm×250mm, 5μm) ;流动相采用甲醇 (A) -1%的磷酸水溶液 (B) 梯度洗脱, 0~30min, 30%~50%A;30~40min, 50%~65%A;40~45min, 65%A;45~55min, 30%A。进样量为10μL, 流速为1mL·min-1, 检测波长为335nm, 柱温为30℃。样品色谱见图1。

(1.6-羟基山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖醛酸;2.灯盏花甲素;3.野黄芩素;4.芹菜素)

5 含量测定

5.1 灯盏花素原料药含量分析

3个不同厂家的6批灯盏花素原料药中的相关化合物含量测定, 结果见表1。

5.2 灯盏花素片剂含量分析

7个不同厂家的7批灯盏花素片中的化合物含量测定, 结果见表2。

6 讨论

6-羟基山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、灯盏花甲素、野黄芩素和芹菜素4个有关物质均属黄酮类化合物, 该4个化合物为灯盏花素中的固有物质。

在灯盏花素及其片剂的有关物质中, 6-羟基山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖醛酸和灯盏花甲素含量较多, 野黄芩素次之, 芹菜素含量最低。前两者为主要有关物质, 这可能是由于两者的化学结构与主成分灯盏乙素极为相近, 在提取分离过程因极性过于接近难以除去。

4个化合物的指认使灯盏花素中未知成分的含量从16.24%降低至2.39%, 提高了用药安全性, 为灯盏花素原料药及其制剂的质量控制和不良反应研究提供了坚实的物质基础。

(%)

注:1.6-羟基山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖醛酸;2.灯盏花甲素;3.野黄芩素;4.芹菜素。

参考文献

[1]巢艳红, 徐希明, 余江南.灯盏花素新剂型及其质量控制的研究进展[J].中国药事, 2011, 24 (7) :711-715.

[2]丁润芳, 李正翔.灯盏花素制剂的临床应用[J].天津药学, 2009, 21 (2) :60-62.

[3]DERYA G, OZGEN A C, CANAN K, et al.Phenolic Glycosides with antiproteasomal activity from Centaurea urvillei DC.Subsp.urvillei[J].Carbohydrate Res, 2010 (345) :2529-2533.

[4]张人伟, 张元玲, 王杰生, 等.灯盏花黄酮类成分的分离鉴定[J].中草药, 1988, 19 (5) :7-11.

[5]周荣光, 晏泽宇, 赵加强, 等.野黄芩素的制备、纯化与结构表征[J].光谱实验室, 2011, 28 (5) :2404-2406.

灯盏花的种植及缓释剂型研究进展 篇3

【关键词】 灯盏花;种植;活性;制剂

【中图分类号】R282

【文献标志码】A

【文章编号】1007-8517(2015)24-0031-03

云南是资源大省、道地药材之乡,中药、民间民族药资源丰富多样;是我国居住民族最多的省份,除汉族外有25个少数民族。在历史长流中,各民族在抵御疾病和追求健康的过程中,积累了丰富的防病治病的经验。

灯盏花最早记载于《滇南本草》,花似灯盏、根似细辛,又名灯盏细辛,是当地苗族、彝族群众习用草药,传统采用全草入药。1980年,云南省卫生部门证实从灯盏花(Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.)中提取分离得到的黄酮类活性成分——以灯盏乙素为主,含有少量灯盏甲素为治疗脑血管疾病所致瘫痪的有效成分‘1'21。

1 灯盏花的种植条件及GAP

灯盏花种植以年平均气温为5.4℃- 18.6℃.海拔1630-3280m的坡地条件为宜,各坡向均有灯盏花分布,但阴坡多于阳坡,光照促进灯盏花总黄酮的合成与积累,超过50%的遮光植株体内总黄酮量明显下降;不同光质下,植物的总黄酮量有所差异,蓝光较为有利于总黄酮的合成与积累。

由于多年盲目采挖致使野生灯盏花资源日益减少和破坏,加上野生灯盏花混有无药效的飞蓬植物,不能保证品质纯正,规范化人工种植显得尤为重要。人工种植灯盏花和野生灯盏花在植株大小等形态特征上差异不大,难以识别,但灯盏乙素含量有明显的差别:人工种植灯盏花中灯盏乙素含量明显多于野生灯盏花中的灯盏乙素含量(灯盏花素的范围是:种植0.2%~0.5%,野生0.085%-0.15%)。

矿质营养元素是植物生长、产量形成的物质基础,赵峥等研究表明氮是对灯盏花营养生长影响最大的元素,合适的供氮水平可提高光合色素的含量,促进植株生长;较高的磷素水平可以促使灯盏花提早进入初花期,从而缩短其生育期;增加钾的用量则可以明显促进根的生长。苏文华等研究发现N、P和K施肥提高灯盏花药材生物产量时将会导致黄酮等次生代谢有效成分量下降,但可提高其产量。因此,合理施肥对其大田生产至关重要。

灯盏细辛各部位中灯盏乙素含量以叶最高,花、茎次之,根部最少,因此灯盏细辛药材质量应以含叶多者为佳,采摘时可以以叶为主,避免灯盏花遭受毁灭式破坏。

国家食品药品监督管理局(SFDA)对药材的种植做出了详尽的强制性的规定,红河千山生物工程有限公司通过与相关部门合作,对灯盏花引种驯化种植,完成了灯盏花规范化种植标准操作规程-SOP,并于2004年通过国家GAP认证,成为全国唯一灯盏花规范化种植(GAP)认证基地。

2 灯盏细辛的药理作用

2.1 心脑血管方面灯盏花素具有降低血管阻力、增加脑血流量、提高血脑屏障通透性,改善微循环、缓解胃动脉痉挛、拮抗心肌缺血再灌注损伤等作用;对心血管的作用主要表现在阻断心肌细胞Ca2通道,减少Ca2内流,促进K+通道开放、外流,减少心肌耗氧量,抵抗心律失常,从而保护心脏;其机制可能与其抑制血小板同中性粒细胞之间相互作用有关。

2.2 脑血管方面临床研究表明,灯盏细辛注射液能通过降低血黏度,增加红细胞变形能力;扩张微细动脉和毛细血管,提高脑组织供血,改善脑供血不足。同时还能很好地抑制蛋白激酶C,限制梗死范围。

林毅等研究发现,灯盏花素能通过减少外周血小板和的含量,降低血小板的聚集性和活化程度,从而治疗心绞痛、冠心病。

刘宏发现灯盏花素可以拮抗超氧化自由基,减少脑组织缺血及再灌注损害,减轻脑水肿,从而保护脑组织。

2.3 肝、肾方面 陈小夏研究发现,灯盏花素能减轻蛋白代谢异常和转氨酶代谢异常,从而对肝脏进行保护作用,其原理与它能清除自由基有关。杨秀芬研究发现,灯盏花素对肝硬化的微循环和纤维化指标有显著的影响,对大脑中动脉闭塞的实验大鼠肝细胞也有保护作用。

灯盏花素能够扩张肾脏的微血管,从而有效的增加肾小球滤过率和肾血流量从而改善肾脏微循环,降低尿白蛋白排泄率,调整肾脏组织代谢,提高肾脏抗氧化能力,降低氧化应激,从而保护肾脏组织。

3 灯盏花素的抗氧化作用

生物体在正常生理条件下进行的氧化还原反应的过程中自由基的生成与清除处于一种动态平衡,且一定数量自由基有利于维持生物体正常功能,但在病理条件下通过往往会产生过多的活性氧,如果细胞内的氧清除能力不足会造成细胞结构、功能和代谢紊乱,甚至细胞死亡。

灯盏花素是一种有效的抗氧化剂,具有结合自由基和抗脂质过氧作用,可使超氧化物歧化酶(SOD)活性增高,降低脑缺血再灌注损伤。实验表明灯盏花素对硒过量引起的肝中毒及脑组织缺血一再灌注引起的肝细胞受损有一定的作用,其机制与提高细胞抗氧化能力和抗脂质过氧化有关。此外,灯盏细辛中的另一大类活性物质咖啡酰类化合物具有抗炎、肝细胞保护、抑制血小板聚集等作用,动物研究表明3,5-二咖啡酰奎宁酸对脑缺血一再灌注损伤有较好的保护作用,其作用机制可能与抗自由基生成有关。

叶立研究发现,灯盏花素能够明显的保护用谷氨酸所致的原代培养的损伤,作用机制与其增强细胞抗氧化能力有关,抗氧化作用要比维生素强。

4 灯盏花成分研究和制剂分析

30多年的研究,我国学者从该植物分离出了黄酮、二咖啡酰基的酚类化合物、咖啡酰奎尼酸、γ一吡喃酮、香豆素、木脂素、萜类、甾醇、芳香酸、脂肪酸及其他类型化合物,其中的酚酸类成分,特别是黄酮和咖啡酰奎尼酸类被普遍认为是灯盏花的抗氧化和心脑血管活性成分。

目前在临床上使用的主要为灯盏乙素的片剂和注射液,以灯盏花总黄酮成分制成的片剂和注射液临床用于治疗脑血栓形成、脑栓塞、多发性神经炎、慢性蛛网膜炎等脑血管意外所致的瘫痪症,总有效率为95.8%。

灯盏花素存在半衰期短、生物利用度低、稳定性受pH影响、配伍时易沉淀等问题,使得目前的针剂稳定性差,产品保存期短,批合格率低,难以大规模投入生产,为临床上的广泛应用带来不便,灯盏花素的新剂型研究近年来成为热点。利用缓控释制剂、纳米技术等技术具有稳定体内血药浓度,生物利用度高、不良反应小,提减少给药次数,方便患者服用等优势,日益引起灯盏花研究者的关注。

平其能等制备的灯盏花素脂质体冻干粉针剂能显著提高灯盏花素贮存稳定性,在冻干粉针剂中在加入注射用水重新溶散后,能以任意比例与输液稀释给药而不产生沉淀和降解产物,其药代动力学显示生物利用度是普通注射剂的10倍。任杨帆采用气流冷冻粉碎法制备了粒径小于25μm、含量均匀灯盏花素微囊,通过加入氨基酸、磷脂或脂肪酸等方式,使产品达到速释、易吸收的效果;但人体生物利用度初步试验表明,其生物利用度仅比颗粒剂高5%。

解军波等采用凝聚法制备了灯盏花素壳聚糖一海藻酸钠微囊。以药物的包封率和载药量作为制备工艺优化指标。

刘思明用单体聚合在微乳液体系中制备了中药灯盏花素聚丙烯酸酯纳米粒,载药后灯盏花素纳米粒平均包封率高达87.57%,最高载药量可达16.96μg/mg,方法平均回收率90.61%。何燕用HPMC、2% PVP乙醇溶液制备了缓释14h的灯盏花素亲水凝胶缓释片。洪正飞以包衣和灯盏花素、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素纳、乳糖及硬脂酸镁制备而成的片芯压制而成口服脉冲迟释片,制备出体外延迟释药的时间约为4h,服药5h后其累计释放百分率在90%以上的灯盏花素口服脉冲迟释片,提高患者治疗的顺应性。

张彦青用乙基纤维素和硬脂酸为疏水性材料采用挤出——滚圆法制备的缓释微丸,通过对健康家兔试验测定了灯盏花素的药效动力学过程,在测定时间范围内时效曲线较平稳,可维持体内药效达12h左右,相对生物利用度为149.2%。

此外,药物经鼻吸收后可绕过血脑屏障(BBB)直接进入脑脊液或脑组织,具有生物利用度高、吸收快、给药方便,且能向脑内递药等优点,石森林等27以狗为研究对象,证实了灯盏花素可经鼻吸收,适合制备成经鼻给药的新制剂。与口服给药相比吸收快,还因避免了首过效应而生物利用度较高;与注射给药相比给药方便,不良反应少,并具一定的脑内靶向分布特性,使鼻粘膜给药成为向脑内输送药物的新途径。

5 存在问题与展望

目前临床上使用的均为灯盏花素混合物制剂,大量研究表明,灯盏乙素并非灯盏细辛的唯一活性成分,如富含灯盏乙素的唇形科植物高黄芩并未显示与灯盏细辛同等功效。中药作用特点是多靶点、多途径整合,因此考察灯盏细辛的药理活性特点应多方位进行考察研究。孙汉董院士等通过对灯盏细辛化学成分进一步系统研究,发现了灯盏细辛中含有的咖啡酰基酯衍生物在抗氧化方面表现出与灯盏乙素相当的生物活性。随着对灯盏花素研究的逐渐深入,希望能够明确灯盏细辛的确切的作用成分、加强在构效关系及配伍药效方面的研究,这也是中药现代化所追求的目标。

点亮心灵的灯盏 篇4

离下课还有十分钟,我去办公室拿手机和钥匙,从我班教室过,我班正在上英语,一组走后排,小娥睡得可香了,我当时很气愤,心想老师在前面那么大声讲,她竟然能睡着。

第二天,她没有来学校,也没给我请假,我问了我班平时和她很好的学生,才知道,她头疼没来,这时我才恍然大悟,她昨晚英语自习为什么睡觉了,应该是身体不舒服吧。第三天早上,她也没来,我又让那个学生问她。那个学生说:“老师,她说她不上了,她出去打工,东西都收拾好了。”过会,小娥给我发了一条短信说,老师,我不上了,在学校给你添了不少麻烦,让你操心,对不起。短信收到后,我就给她打电话,她不接,发短信,她不回。我很担心,让学生跟她联系,她也不接电话。从学生那里,我了解到,这个周末,她和几个没有读书的学生在一起玩,并且还有个在黑社会上混的学生。此时,我更担心,但就是联系不上她,也联系不上她的父母。

晚上,我查宿舍时,那个学生告诉我说,老师,小娥说了,让我们不用担心她,她说她去西安,去她父亲那,父亲把工作都给她找好了。

一个周过去了,我接到一个陌生电话,是小娥的父亲打来的说:“老师,我想让小娥回来上学,我已经把她送回来了。”“那行吧,你明天把她带到学校来,我们再谈谈。”

第二天,大概十点多,他们来了。和他父亲交流中才知道,小娥出去根本都没有和她父亲商量过,她父亲在西安找了两天才在一家餐厅找到她。她父亲没有马上让她回来上学,而是给了她两天的思考时间。结果是小娥自己想通的要回来上学。

小娥很胆怯的走到我身边说:“老师,我想好了,我想回来继续学习,一定要坚持到最后。”说完了后,她好像在等着我批评她,而我却笑着说“好啊,既然来了,就要坚持到底,以后不管干啥事,主要是态度问题,结果不重要。”她慢慢的抬起头,神奇的看着我,我微笑的点点头。她向我鞠了个九十度的躬说:“谢谢,老师,害你担心了,我保证以后在学校尽最大努力学习,不让老师担心。”说完,我让她回教室了。

通过两个周的观察,小娥确实变了许多,我慧心的笑了,因为我唤醒了一颗心灵。作为老师,我们的职责不是去改造他们,而是去唤醒他们,唤醒他们本来沉睡状态的良知和潜质,将他们从低落中解放出来。

关于灯盏的作文七年级 篇5

依稀记得刚入初中时自己还是个胆小怕黑的小女孩。而夜自修下课后那条回家必经的小胡同,每每都会让我起鸡皮疙瘩。为了早早回家不让父母担忧,我只能硬着头皮壮着胆走过胡同,常常被胡同里的砖块瓦石摔个鼻青脸肿,四脚朝天。

那天下课,星空仿佛失去了色彩,月亮也仿佛披上了一层薄纱,寂静得令人恐惧。胡同里更是漆黑得像锅底,伸手不见五指。

为了给自己壮胆,我唱起了歌。可是那颤微的歌唱声并没有增加勇气,反而给原本漆黑的夜增加了几分恐怖,我感觉到自己握着自行车的手在发抖,手心的冷汗不断渗出。突然自行车像断了线的风筝失去了控制,随着一阵剧烈的碰撞声,我被狠狠地摔在了地上。

“哎呀,是哪个不长眼的东西,连本大爷也敢撞!”黑漆漆的胡同里传来一声咒骂。我回过神来,听这声音好象是村里那个出了名的张三。他游手好闲、偷鸡摸狗,什么坏事都干过,村里的人都讨厌他,见了他就躲着走。我见情形不妙,扶起自行车就想跑。谁知张三一个箭步把我拉了回来,失去重心的我又一个踉跄摔倒在地上。“撞了就想跑啊你!你得赔我医药费!”我呆呆地站在那里不知所措,泪水在眼窝里打转,恐惧极了。

“我,我……”我哽咽得说不出话来。“你什么你啊!我告诉你,你要不赔我钱今天你就别想走了!”

可能是张三的呵斥声太大,惊动了住在这附近的王二爷。王二爷今年五十多岁,为人仗义,在村中很有威望,虽然平时言语不多,可吐个唾沫都是个钉儿,没几个人不服的。

王二爷问:“咋回事?”张三见了王二爷,更是觉得自己有理,大声嚷道:“这小东西撞了人就想走,你来评评有没有理啊!”王二爷用手电筒朝我这边照了照,扭转头朝张三厉声呵斥道:“撞你一下咋了?你没伤没残把一个小姑娘吓得这样,良心安吗?你要不服,跟我到居委会去说去!还不快滚!”张三平日里谁都不怕,就怕王二爷,连声说:“是,是。”就消失在胡同深处。

王二爷走到我身边,柔声说:“快回家吧孩子,这么晚了,你爸妈该担心了。”我傻傻地点点头,扶起自行车朝家走去。

第二天放学经过那个胡同时,我惊讶得发现那个低矮的洞口中来挂着一个小灯泡。明亮的灯光把胡同照得有如白昼。

随后,不论刮风下雨,四季更替,那盏灯仍然在那里摇曳着金灿灿的光芒。我那胆小孤寂的心也逐渐变得明亮起来。

有趣有灯盏活动记叙文 篇6

过了一会儿,我期待以久的彩灯亮了,一闪一闪的令人目不暇接,但我只能在近处看,似乎一叶障目,不见森林那是多么令人遗憾的事!我寻思着到哪里看夜景比较合适。我抬头仰望天空,一轮又圆又大的明月挂在天上,不知怎么,心里忽然又诵起亿恐琼楼玉宇,高处不胜寒的诗句。哦,我一拍脑袋,对了,高处我连忙三步并作两步,一口气登上了建光楼顶,这可是我们县城最高的地方了。我放眼望去,到处是灯的海洋。红色、黄色、粉红色、橘红色。闪烁着迷人的光芒,身下烟雾缭绕,让我总得仿佛置身于仙境之中,我不禁觉得有些飘飘然了。

你看那一串整齐的橘红色的是路灯,闪烁不定的是霓虹灯,忽明忽暗的是满天星。我忽然想起了一句诗来天上的明星现了,好像闪烁着无数的街灯,远远的街灯明了,好像闪着无数的明星。今天晚上,我置身此处,真是富有诗意。

一阵锣鼓的喧闹声惊醒了沉醉在诗意中的我,我急忙探下身子,往远处看,呵,好有特色的龙艺来了!一条美丽的五光十色的长龙从烟火的深处街道的尽头蜿蜒逶迤而来!我揉揉眼睛想看更仔细一些,无奈

游龙处于弥漫的硝烟之中,若隐若现,仿佛游走在云雾之中,看来这样的意境多了些许虚幻和喧闹声一浪高过一浪,一条条烟火从我脚下升起,又在我头顶高空炸开,有如惊雷,我感到脚底下微微颤动,天空布满了形色各异的花朵,绚丽多彩,缤纷夺目。

在这美妙的充满节日的气氛的夜色中,我深深陶醉了,我想用我最美的语言也表达不出最美的感受,这的确是一件引以为憾的事情。

灯盏花素的药理作用研究进展 篇7

1 对脑部的药理作用

1.1 改善脑血流变和甲襞微循环

刘伟东等[1]随机选择急性脑梗死患者100例, 入院后立即静滴灯盏花素结果使用灯盏花素后全血粘度、血浆粘度、红细胞压积等血液流变学指标均较用药前明显降低。甲襞微循环的输出支管径、管袢顶内径、流速等均有显著改善。李年贵等[2]应用灯盏花素治疗9例急性脑梗死患者, 结果表明灯盏花素治疗前后全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、血沉、纤维蛋白原和甲襞微循环积分改善均有显著意义。提示灯盏花素对急性脑梗死患者血液流变性和甲襞微循环有明显的改善作用, 是治疗急性脑梗死的一种有效方法。

1.2 对脑缺血损伤保护作用

郭泽云等[3]通过夹闭沙土鼠双侧颈总动脉20min后再灌流模型, 观察灯盏花素对沙土鼠脑缺血再灌流损伤的保护作用。结果表明灯盏花素能降低缺血后脑组织钙含量, 减少海马CAI区神经元的死亡数量, 增加神经元的密度。揭示灯盏花素对沙土鼠脑缺血再灌流损伤具有保护作用。张焰等[4]采用沙土鼠脑缺血再灌注模型, 观察灯盏花素对海马ATP含量和ATP酶活性变化的影响。结果表明灯盏花素能明显增加脑缺血及再灌注后ATP含量和ATP酶的活性, 可减轻脑缺血-再灌注损伤。陈小夏等[5]还发现灯盏花素能不同程度地降低MDA含量, 提高SOD、CAT和GSH-Px活性, 保护Na+-K+ATP酶活性。提示灯盏花素可通过保护脑组织抗氧化酶的活性, 抑制脂质过氧化反应, 减轻自由基对脑组织的损害, 对缺血再灌注脑组织产生保护作用。

1.3 改善记忆力及延缓衰老作用

王丽娟等[6]观察灯盏花素对小鼠学习、记忆能力的影响, 结果发现灯盏花素能明显改善东莨菪碱所致的小鼠学习记忆获得障碍, 以及乙醇所致的记忆再现障碍, 能明显加强学习能力。丁钰熊等[7]研究发现大鼠服药3个月后脑衰老性组织学改变得到改善, 神经递质多巴胺也有所恢复, 大鼠在迷宫测试中学习能力和记忆能力都有明显提高。尹明华等[8]研究也发现灯盏花素对缺血再灌注小鼠学习记忆有保护作用。

2 对心血管系统的药理作用

2.1 舒张血管作用

陈一岳等[9]用苯肾上腺素及氯化钡引起血管收缩, 并测定5种扩张血管药对这两种激动剂缩血管拮抗作用的比值。结果表明灯盏花素的作用与三氟拉嗪相似, 是以抑制细胞内钙离子释放为主。在去除血管内皮的实验中发现, 灯盏花素的松弛血管平滑肌的作用与三氟拉嗪、脑益嗪及硝吡啶均相似, 即并不依赖血管内皮的完整性, 但从量效曲线来看, 灯盏花素与前两者 (尤其是与三氟拉嗪) 相平行。然而, 灯盏花素对5-HT的缩血管作用无任何拮抗作用, 这些结果说明灯盏花素的作用可能与拮抗钙调素的作用有关。郑广华等[10]采用雄性大鼠胸主动脉环研究灯盏花素舒张血管的机制。结果表明灯盏花素对去甲肾上腺素的收缩反应呈剂量依赖性的松弛作用, 与内皮无关, 也不受普萘洛尔影响。灯盏花素能拮抗去甲肾上腺素诱发的依外钙与依内钙的双相反应, 而且对后者的抑制作用较强。提示灯盏花素诱发血管舒张可能与受体操纵性钙通道和细胞内Ca2+释放的抑制有关。

2.2 抗心律失常作用

王丽娟等[11]观察灯盏花素对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流 (ICa) 的影响。发现灯盏花素在不同的电压下对ICa的阻断作用不同, 在峰电压下作用最明显, 而对其反转电位无明显影响, 此作用可逆, 且具有明显的剂量依赖性。灯盏花素以电压依赖的方式阻断心肌细胞膜上的钙离子通道, 使Ca2+内流减少, 从而产生抗心律失常作用。王勇等[12]以静脉缓慢恒速注射肾上腺素诱发大鼠发生多种心律失常, 观察并比较灯盏花素、普萘洛尔及利多卡因对心律失常的保护作用。结果发现灯盏花素 (8 mg/kg) 和普萘洛尔 (1mg/kg) 均可使肾上腺素诱发的大鼠心律失常发生时间延迟、严重程度减轻、死亡率降低, 灯盏花素与普萘洛尔的效果相近, 优于利多卡因。

2.3 降低肺动脉高压作用

陈少贤等[13]电镜下观察灯盏花素对慢性低氧引起的肺动脉中膜和外膜胶原纤维沉积具有明显的抑制作用, 它可明显减少慢性低氧所致肺动脉壁I型前胶原mRNA的增加, 从而抑制I型胶原含量的增加, 但对Ⅲ型胶原无显著影响。可见灯盏花素可预防慢性低氧引起肺动脉壁胶原的生成和沉积, 从而减轻慢性低氧所致肺动脉高压的形成。周浩等[14]研究发现灯盏花素能明显抑制低氧肺动脉高压大鼠肺组织PKCt、PKCm、PKCc、PKCm/PKCt的百分比及肺细小动脉壁PKC的表达, 推测灯盏花素抑制PKC的活化和表达可能是其抑制慢性低氧肺动脉高压的重要机制之一。丁毅鹏等[15]研究发现灯盏花素可能是通过增加血清NO含量、降低ET-1含量来发挥降低大鼠慢性低氧性肺动脉高压作用的。

2.4 抗凝血作用

研究证明灯盏花素有减少血小板计数、抑制血小板聚集、抑制内凝血及促进纤溶活性的作用。谢淑英等[16]发现灯盏花素能提高血浆组织型纤溶酶原激活物 (t-PA) 的活性及降低其抑制物 (PAI) 的活性, 而血浆血栓素B2 (TXB2 ) 降低, 6-酮-前列腺素F1α也有所提高。提示该药有扩张血管、抗凝、促进纤溶、抗血栓作用。林毅等[17]研究发现灯盏花素能减少冠心病患者外周血小板CD63和CD62p含量, 可有效降低血小板活化程度及聚集性, 从而发挥治疗冠心病心绞痛的作用。

2.5 降血脂作用

临床上用灯盏花素片治疗血甘油三酯 (TG) 、血胆固醇 (TC) 增高症, 发现其有较好疗效, 并有预防动脉硬化的作用。孙淑英等[18]观察了灯盏花素对63例缺血性脑血管病血清脂蛋白、载脂蛋白及血流变的影响。结果用药1个疗程后, 治疗组甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白 (LDL-C) 、极低密度脂蛋白 (VLDL-C) 、载脂蛋白B100水平较治疗前均显著降低;高密度脂蛋白 (HDL-C) 、载脂蛋白A1水平均 显著升高;血流变各项指标也有显著改善。提示灯盏花素能有效地抑制缺血性脑血管病患者的脂蛋白代谢异常及高粘滞血症。

3 抗氧化作用

陈小夏等[19]采用3种自由基生成体系诱导的红细胞膜脂质过氧化作为模型, 研究灯盏花素对细胞膜脂质过氧化损伤的作用。结果表明它对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统、H2O2及UV照射3种方法引起的细胞膜硫代巴比妥酸反应物生成增加均有抑制作用, 其作用呈剂量依赖性, IC50分别为21.11μmol/L、12.77μmol/L和33.26μmol/L, 提示灯盏花素对自由基引起的细胞膜脂质过氧化损伤有保护作用。

4 对肝脏的保护作用

张转等[20]观察了灯盏花素对小鼠肠缺血再灌注肝损伤病理及生化指标的影响, 发现不同剂量灯盏花素对缺血再灌注肝损伤小鼠有明显的保护作用。陈咏萍等[21]观察静脉滴注灯盏花素注射液对38例肝炎后肝硬肝纤维化指标的影响。灯盏花素治疗后血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘蛋白较对照组低, 且差异显著。说明灯盏花素能改善肝炎后肝硬化患者肝纤维化指标。杨秀芬等[22]观察灯盏花素对大脑中动脉闭塞大鼠肝细胞也有保护作用。

5 促进溃疡愈合作用

林宇、王丽娟等[23,24]以乙酸或吲哚美辛致大鼠慢性或急性胃溃疡模型, 观察并比较灯盏花素、西咪替丁对胃溃疡的保护作用。结果灯盏花素可使溃疡 (出血点) 面积明显减少, 溃疡抑制率分别为61.1%和70.7%, 西咪替丁的溃疡抑制率为71.9%和85.3%, 两者相比差异无显著性。说明灯盏花素可有效促进溃疡愈合, 疗效与西米替丁类似。

6 对泌尿系统的作用

6.1 抗肾缺血再灌注损伤

石少慧等[25]采用复制大鼠肾缺血再灌注模型, 观察灯盏花素对缺血再灌注肾组织过氧化物酶体中SOD、GSH-PX、CAT活力及MDA含量的影响。发现灯盏花素在肾缺血再灌注中对过氧化物酶体的损伤有明显保护作用。

6.2 抗肾病综合征作用

王剑虹等[26]应用灯盏花素与激素合用治疗肾病综合征, 结果发现可以提高激素的疗效, 促进疾病的好转。

综上所述, 灯盏花素的药理作用非常广泛, 对心、脑、肝、肾等具有明显的保护作用, 临床上常用于高血压病、冠心病、心肌梗死、脑梗死、肝炎、糖尿病肾病等疾病的治疗, 具有疗效确切、副作用小、临床应用优势明显。可以预见, 随着对灯盏花实验研究及临床研究的不断深入, 这味传统中药必将具有更加广阔的应用前景。

灯盏花 篇8

[关键词]奥扎格雷钠;灯盏花素;急性脑梗死

[中图分类号] R743.3   [文献标识码] B   [文章编号] 2095-0616(2011)24-91-02

急性脑梗死是内科的常见病、多发病之一,具有发病率高、复发率高、致残率高及致死率高的特点,目前临床治疗急性脑梗死主要为溶栓、抗凝、脑保护、降纤、抗血小板聚集等,因此,如何提高临床疗效以及选择合适的药物治疗成为近年来的研究的方向之一[1]。本研究旨在观察应用奥扎格雷钠联合灯盏花素治疗急性脑梗死的疗效,现总结分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

入选的60例患者为2010年1月~2011年1月笔者所在医院神经内科住院患者,均经头CT或MRI检查证实。随机分为观察组及对照组各30例,其中观察组男19例,女11例;年龄45~78岁,平均(67.2±3.1)岁;神经功能缺损程度评分(18.2±4.7)分;伴高血压18例,糖尿病9例。对照组男18例,女15例;年龄44~76岁,平均(66.7±2.9)岁;神经功能缺损程度评分(18.2±4.7)分;伴高血压18例,糖尿病9例。两组患者的年龄、性别、病程、神经功能缺损程度评分等临床资料方面比较,差异无统计学意义(P >0.05),具有可比性。

1.2 入选及排除标准

所选病例均符合1995年中华医学会第四届全国脑血管病学术会议所制定的脑梗死诊断标准[2],排除脑出血、脑肿瘤等其他颅内疾病,排除合并心、肺、肝、肾功能不全及近期有过大手术、活动性出血者。

1.3 治疗方法

两组均根据病情给予脱水剂、脑细胞保护剂及降压、降糖、降血脂等常规对症处理,观察组在上述基础上给予奥扎格雷钠注射液80 mg,加入0.9%氯化钠溶液500 mL静脉滴注,1次/d,灯盏花素注射液50 mg,加入0.9%氯化钠溶液250 mL静脉滴注,1次/d,连用14 d。

1.4 疗效评价标准

依据第四届全国脑血管病学术会议修订的标准[3],对两组患者进行神经功能缺损程度评分及疗效评定。基本治愈:神经功能缺损评分减少91%~100%,病残程度0级;显著进步:神经功能缺损评分减少46%~90%,病残程度1~3级;进步:神经功能缺损评分减少18%~45%;无变化:神经功能缺损评分减少<18%;恶化:功能缺损评分增加18%以上;死亡。

1.5 统计学处理

采用SPSS12.0软件包进行统计学处理,计量资料结果以()表示,组间比较采用t检验,计数资料比较采用x2检验,以P <0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗14 d后两组疗效比较

治疗14 d后对两组的疗效进行比较,观察组的总有效率为93.33%,明显高于对照组的总有效率(76.67%),差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 不良反应

两组患者治疗期间均未出现颅内出血,消化道出血,且两组治疗前后肝肾功能未见明显异常,对血小板,红细胞等无明显影响。

3 讨论

急性脑梗死是临床内科常见病、多发病之一,其发病主要是因脑部血液黏滞度增高,血流缓慢,血小板增多,动脉粥样硬化,血栓形成所致。目前临床治疗的目的主要为降低病死率和致残率,促进神经功能恢复。奥扎格雷钠是一种血栓素合成酶抑制剂,能有效地抑制血栓合成酶,减少TXA2的生成。同时促进PGI2的产生,使血栓形成过程受到抑制。奥扎格雷钠还可以扩张脑血管、降低血黏度、升高血流作用,有利于阻塞的血管再灌注,加速缺血病变的恢复,从而改善患者的临床症状[4]。灯盏花素注射液系中药制剂,具有扩张血管、改善微循环、增加脑血流量,提高血脑屏障通透性;降低血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白原,对抗二磷酸腺苷引起的血小板聚集,改善红细胞变形能力;从而改善血流动力学及局部供血,减轻细胞水肿;是临床上治疗脑梗死的常用药。宗士刚等[8]将76例急性脑

地方美食作文:外婆家的灯盏糕 篇9

地方美食作文:外婆家的灯盏糕

浙江省温州市乐成公立寄宿学校初一(22)班 秦渝植

每当在去往外婆家的路上,总感觉鼻腔里头沁满了灯盏糕的香味。

做灯盏糕,是外婆的一个业余爱好,一有客人来访,外婆的煎锅就难以停歇。我从不买菜场卖的灯盏糕,那是一个外地人煎的,多少有一些乌焦。听外公讲,这种乌焦物有致癌成分,所以,我从来不会光顾那里,尽管听说那里的灯盏糕很好吃,名声远扬。

而外婆做的灯盏糕,看上去黄澄澄的,没什么黑色斑迹,在那一层鲜亮的脆皮里面,是一根又一根晶莹透彻的白萝卜和烧得很嫩的猪肉,偶尔还会加上这么一两只小蚕虾。小心翼翼地咬上一口,入口听得“咔哧咔哧”响,那油炸后的脆香以及白萝卜特有的香气溢满口腔,虽被烫得呼哧呼哧响,却依然不肯停一口,左手换右手不停地送往嘴里,还含糊不清地连呼:“好吃!”

这灯盏糕,真不愧是“外皮松脆,圆边酥软,内馅爽口”啊!

直到前些天,才听妈妈说,灯盏糕只有温州这一带的地方才有呢。听了之后,我心中瞬间升起了一种自豪之感:这么珍贵的历史文化遗产,还这么好吃,竟然就在我的家乡!真够荣幸的!

记得今年的大年初一,那天下着雨,因为姨妈姨夫们在后几天都没空,所以就把分岁酒在初一给摆了。按往年来看,我们一家子总是最后一个到外婆家,而今年,却是出乎意料地早,我们是第一个到的。一进门,没来得及站稳,便闻到了那熟悉的香味――灯盏糕散发出的气味,我迫不及待地冲进厨房,顺手便拿来一个,真是好吃!

听舅舅说,外婆今天一大早起来,扫地、生火、煮粥、抹锅盖,然后用肥皂洗净手脸,系紧斜襟蓝褂子上的盘布扣儿,端出昨夜已经泡好的黄豆和米,准备磨灯盏糕的浆。黄豆是外婆平日里趁着日头好拣一些饱满个大的放进保温瓶胆内保存的。米是洗了好几道的,经过一夜水的浸泡,在缸子里一直静静地躺着,散发出温润的光泽。外婆正襟坐在一盘小石磨前,用葫芦瓢舀出少许黄豆和米,轻轻地倒进磨眼里,转动磨柄,小石磨开始旋转,一圈一圈地舞蹈着,唱着欢快的歌,磨出雪白雪白的糕浆。小石磨是外公特意从外地带来的,他曾经在长沙那边做过生意。外婆用水洗净石磨,然后端了和好葱的浆进了厨房,旺旺地生起火来,等锅里的油滚了,盛满一调羹浆,铺平在锅铲里。铲不比寻常炒菜的锅铲,通体黝黑,铲把弯成上弦月的模样,连着一块圆圆的平平的黑铁板,这锅铲也是外公专门从外地带来的,很耐用,外婆用着也很是顺手。听到这儿,我对外婆的敬意油然而生……

外婆将白色的糕浆放进热油内,一趟一趟,一阵阵“哧啦啦”的脆响,瞬间胀成了一个个巴掌大的灯盏糕,圆圆的、黄黄的、鼓鼓的,漂浮在油面上。外婆老到地将它们翻个个儿,两面都呈现出金黄色,不慌不忙地用竹筷夹起,叠放在漏勺里,待油沥尽。空气中满是诱人的香味,止不住地在我们鼻子里转,我们忍不住吃了起来。

外婆一般都不上桌,给我们端上了菜之后,就坐在一旁看着我们吃。灯盏糕是一种既好吃又顶饿的东西,大米和黄豆一经水泡磨碾油炸,完全变了一种味道。外公喝了一口米酒,再美美地嚼着灯盏糕,他一口气能吃上好些个,留一嘴的油香、全脸的笑意、满腹的.厚实。看得心满意足的外婆搭手搭脚地立在门边,眼见着我们吃香了,再回去喝粥,末了将剩下的几个灯盏糕放回饭笼里,等晚上再给大家吃。

夜已深,大家都手捂肚子,向外婆道了谢,拜了年,便回家去了……在车上,从车旁的反光镜可以看得到,外婆那佝偻着的身影,在黑夜中摇摇晃晃。

我留着满口的灯盏糕香,渐渐入眠……

说真的,这外婆做的灯盏糕,难道仅是外婆特有的吗?我想,不是这样的……

(指导老师 王敏)

【西西插嘴】

灯盏花 篇10

关键词:灯盏花素;视网膜缺血再灌注;iNOS

中图分类号:R285.5文献标识码:A

文章编号:1007-2349(2008)01-0030-04

视网膜缺血再灌注(Retinal isoeheimal reperfusion,RIR)损伤是眼科常见的一种病理过程。见于青光眼、视网膜中央动脉阻塞、视网膜静脉阻塞、缺血性视神经病变、糖尿病视网膜病变等多种眼病,造成视网膜神经组织的损伤,严重损害视功能。因此,探讨视网膜缺血再灌注损伤机制,寻找新的有效而又没有明显副作用的药物来防治视网膜缺血再灌注损伤,已成为全世界眼科专家及众多学者的研究课题。

虽然氧自由基在视网膜缺血再灌注损伤发挥的重要已明确,但大部分抗氧自由基药物仍处于临床前期。灯盏花素又名灯盏细辛,自20世纪70年代开始应用于临床多种疾病的治疗,安全可靠,并具有抗氧自由基、保护视神经及视网膜的功能。本实验旨在通过建立兔视网膜缺血再灌注的动物模型,观察不同剂量灯盏花素注射液对损伤的视网膜在自由基代谢方面的影响,为临床寻找安全、有效治疗视网膜缺血再灌注损伤的药物提供理论依据。

1材料和方法

1.1动物及分组健康新西兰兔54只,由昆明医学院动物中心提供,体重2.0~2.5kg,雌雄不限,随机分组后编号,分笼喂养,试验前裂隙灯显微镜及眼底镜检查双眼角膜透明,瞳孔等大等圆,虹膜血管清晰,眼底无异常无异常。54只随机分为正常组,灯盏花素注射液组和生理盐水对照组各18只。每组再随机地分为再灌注后1、3、7d组,每组6只新西兰兔,每组右眼为实验组眼,左眼不予处理。

1.2主要药物、仪器与设备灯盏花素注射液(云南龙津药业有限公司),直接检眼镜(苏州医疗器械厂),光学显微镜(日本Olympus公司),多聚赖氨酸,兔抗大鼠NOS-2多克隆抗体及即用性sp免疫组化试剂盒(武汉博士德生物技术有限公司),DAB显色试剂(福建新迈公司),H-600电子显微镜(日本日立公司),视网膜电生理仪(意大利安倍公司)。

1.3动物模型的建立 正常对照组不造模。生理盐水对照组和灯盏花素注射液治疗组均制造兔视网膜缺血损伤的模型,具体方法是新西兰兔经耳缘静脉注入3%戊巴比妥钠(100mg/kg)全麻后,眼局部滴用爱尔卡因眼液,1%安尔碘消毒兔眼周皮肤,氯毒素眼液消毒眼球,复方托品酰胺散瞳,将连接无菌生理盐水输液管的7号小儿头皮针沿颞侧角巩膜缘刺入前房,避免损伤虹膜及晶体,缓慢升高输液瓶与实验眼垂直距离150cm处,此高度在眼内形成110mmHg(14.46ka)的眼压。眼内压升高后,可见球结膜2min内苍白,由于眼底血管被阻断,导致眼底反光由红色变为白色,同时虹膜也因缺血而变白,直接检眼镜观察眼底,可见到眼底血管变细或呈念珠状,维持60min缓慢降低盐水瓶至动物水平,拨出针头,可见眼结膜充血,视网膜血液重新再灌注。即视网膜缺血再灌注损伤的模型建立成功。如果在穿刺中不慎损伤晶状体,则去掉该动物的数据,术后涂抗生素眼膏以防止角膜感染。

1.4给药方法在视网膜缺血再灌注损伤药物治疗组按每kg体重2mg灯盏花素注射液经生理盐水稀释后从耳缘静脉给药,生理盐水对照组和正常对照组给等剂量生理盐水,在1、3、7d处死各组兔子,每小组6只。

2观察指标和测定方法

2.1 电子显微镜标本的制作和观察再灌注3d,沿耳缘静脉注射空气40ml栓塞处死兔子,迅速摘除眼球,在冰环境中环角巩膜缘切开,弃去眼前节和晶状体,外翻眼球,解剖显微镜下剥离视网膜、冰生理盐水冲洗,浸入冷电镜固定液(10%多聚甲醛100ml,25%戊二醛50ml,0.2MPB 250ml,蒸馏水100ml,调节PH至7.4,48h,1%饿酸后固定,脱水、丙酮包埋,同上述部位制成50nm超薄切片,透射电子显微镜观察拍照。

2.2视网膜电图(ERG)的测定新西兰兔暗适应30min,新西兰兔经耳缘静脉注入3%戊巴比妥钠(100mg/kg)全麻后,眼局部滴用爱尔卡因眼液。0.5%复方脱毗卡胺散瞳,记录电极即角膜接触镜电极置于角膜接触镜上,电极尽量与角膜最大面积接触,参考电极置于两眼连线中点皮下。操作时间白光闪耀,反应持续时间200ms,光强度10cd·s/m2,每个时间点至少测量3次,间歇期点生理盐水,防止发生暴露性角膜炎,记录b波振幅与处理前b波振幅比值。

2.3 iNOS免疫组化染色石蜡切片在55~60℃的温度下烤2h。浸入7.5ml/L的H2O2液中20min,以阻断内源性过氧化氢酶物酶。行正常山羊血清封闭以清除非特异性染色。滴加iNOS特异性抗体,测量方法和步骤按说明书进行,阳性结果以胞浆及胞盒内出现棕黄色和黄色颗粒为准。每只眼球取两张切片,用医学图象分析统计进行iNOS的吸光度。

2.4统计学分析 实验结果输入计算机,运用统计软件(SPSS 11.0)进行统计分析,计算组间差异采用单因素方差分

析,组间两两比较采用LSD检验。

3结果

3.1高眼压后大鼠外眼变化情况 所有模型眼均有球结膜水肿、充血、角膜水肿、雾状混浊。球结膜水肿、充血在2~4d后消失,角膜水肿均于次日消失。

3.2ERGb波的测定 视网膜缺血再灌注损伤后随着时间的延长,兔b波波幅持续缓慢升高。经灯盏花素注射液治疗后,兔b波波幅在各段时间点与生理盐水对照组相比都有明显提高(P<0.01),与正常组相比,第7天时,b波波幅在各段时间点无明显差异(P>0.05),见表1。

3.3投射电镜观察再灌注3d正常组的视网膜神经节细胞和内外核细胞层细胞胞核大,核仁清楚,核膜光滑,胞浆中可见线粒体等细胞器,而生理盐水对照组,视网膜神经节细胞肿胀、退行性变。细胞膜部分溶解、核固缩,偏位,染色质分布不均。细胞质内多数细胞器溶解,形成空白区。仅见的少量细胞器中,线粒体高度肿胀,空泡化、嵴大部分消失,外膜破裂。粗面内质网脱颗粒,滑面内质网扩张。灯盏花素注射液治疗组视网膜神经节细胞轻度肿胀,细胞核完整,核内染色质分布均匀。细胞质内细胞器明显较模型组增加,线粒体轻度肿胀。嵴可见。滑面内质网、高尔基复合体稍肿胀,见图1~3。

3.4 iNOS的免疫组化正常视网膜内核层和节细胞层有少量iNOS表达。再灌注1d。生理盐水对照组iNOS的表达开始增高,3d时达高峰,7d后渐下降,与正常组相比,差异有显著性意义(P<0.01)。在各灌注时间点,灯盏花素治疗组iNOS的吸光度与对照组相比明显升高(P<0.01),与正常组相比无明显差异(P>0.05),见表2。

4讨论

视网膜缺血再灌注损伤的机制非常复杂,目前认为细胞内Ca2+超载、兴奋性氨基酸的神经毒性,自由基的损伤、细胞因子的作用等多种因素参与了视网膜缺血再灌注损伤的过程。其中自由基的连锁反应和细胞内CaZ+超载是造成组织损伤的中心环节。NO具有自由基的作用,结构简单,极不稳定,由一氧化氮和酶(NOS)催化L~精氨酸生成,对视网膜造成损伤。NO半衰期只有数秒钟,因此,目前多用一氧化氮和酶(NOS)的表达来代表NO的水平。

NO是半衰期很短的自由基气体,正常眼内有少量NO存在,一方面作为神经调质可以抵抗内皮素的缩血管作用,另一方面很多研究表明NO在视网膜缺血再灌注损伤和NMD介导的神经毒性中发挥着重要作用,NO能与超氧阴离子作用生成强氧化物,对组织有很强的氧化作用。引起能量缺乏,DNA损伤,合成抑制以及诱发程序性细胞死亡,破坏视网膜屏障。NO由一氧化氮和酶(NOS)催化L-精氨酸生成,一氧化氮和酶(NOS)分为3种类型,神经元型(nNOS,NOS-1),主要存在神经细胞内,内皮型(eNOS,NOS-3),主要存在血管内皮,诱导型(iNOS,NOS-2),主要存在星型细胞和胶质细胞内。生理性一氧化氮和酶由nNOS和eNOS合成,又称为结构型一氧化氮和酶,其活性依赖于钙。在视网膜缺血再灌注损伤中,nNOS和iNOS及其所产生的NO在视网膜缺血再灌注损伤中起损伤作用。NO通过与超氧阴离子反应产生过氧化氮来促进氧化损伤。NO会引起能量缺乏,DNA损伤,合成抑制以及诱发程序性细胞死亡,破坏视网膜屏障。实验证明,缺血前先眼内注射NOS抑制剂L-NAME可以改善视网膜缺血损伤。本实验中发现视网膜缺血再灌注时导致了视网膜结构和功能的破坏,并伴随着iNOS的升高,在对照组中,第1d iNOS开始升高,第3d iNOS达高峰,7d有所下降。说明iNOS参与了视网膜缺血损伤的过程。与生理盐水对照组和正常对照组相比,灯盏花素注射液能减轻视网膜组织内iNOS的生成,进一步保护了视网膜的结构和功能。

本实验不仅观察了视网膜缺血再灌注损伤时灯盏花素注射液能减少iNOS的生成,兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用,还从行态学上证实了灯盏花素能明显减轻缺血再灌注后视网膜的中期内层水肿,对视网膜缺血再灌注损伤有较好的保护作用。在实验中各个再灌注时间点,灯盏花素治疗组的ERGb波振幅显著高于生理盐水对照组,说明灯盏花素注射液对视网膜缺血一再灌注损伤具有较好保护作用,且随着时间的延长,保护作用增强。

近年来灯盏花素已经被广泛运用于临床来治疗血管性疾病,许多研究证明灯盏花素具有视神经保护作用。灯盏花素可以改善视网膜、视神经微循环,及提高大鼠高眼压状态下造成的视网膜神经节细胞细胞色素氧化酶活性。贾莉君等发现灯盏细辛具有提高和改善急性高眼压后大鼠视网膜神经节细胞的活性及活性节细胞密度的作用。有实验证明灯盏细辛其具有抗氧化,清除自由基等功能,可通过抑制NO途径对H2O2诱导的神经损伤起到保护作用。近年来灯盏花素注射液被大量用于治疗视网膜中央静脉阻塞和缺血性视神经病变等缺血性视网膜疾病,而且已被证实有确切的治疗效果。笔者的实验结果也证实了倍他洛尔保护缺血一再灌注损伤后的视网膜。

灯盏花素,又叫灯盏细辛,是以灯盏花乙素为主含少量灯盏花甲素的黄酮类混合物,是从菊科飞蓬属植物短亭飞蓬[E-rigeron briviscapine(Vant)HanolMass]全草(俗称灯盏花)中经提取、分离、精制而来。灯盏花制剂自20世纪70年代开始应用于临床,目前已有片剂、胶囊、注射剂等多种剂型,己广泛运用于临床治疗多种疾病,具有抗血栓和改善血液流变学等作用。在中医学上具有活血化瘀,通经活络的功效。

灯盏花素对视网膜缺血再灌注损伤的保护机制与其结构密切相关,灯盏花素是黄酮类化合物,清除活性氧的活性基团是酚羟基,酚羟基提供氢原子,与活性氧发生还原反应而发挥作用,灯盏花素本身具有的邻二酚羟基结构能稳定其与活性氧反应所形成的自由基[Hong Liu]。灯盏花素能以电压依赖的方式阻断细胞膜上的Ca2+通道,减少Ca2+内流,降低细胞内钙离子浓度。并直接刺激细胞内ATP依赖性钙泵,使紊乱的细胞内外钙交换趋于正常,减轻钙超载,从而打断了钙离子、氧自由基、兴奋性氨基酸毒性之间的恶性循环,减轻了细胞变性和死亡。灯盏花素能阻止血管平滑肌细胞上L-型钙通道,缓解缺血后视网膜血管痉挛,改善视网膜和视乳头局部血液的供应,保护了内层视网膜组织。

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