农残速测技术（共3篇）
农残速测技术 篇1
摘要：介绍蔬菜农残速测仪检测原理、方法以及使用的注意事项, 以为农残速测仪的使用提供参考。
关键词：农残速测仪,蔬菜,检测原理,速测方法,注意事项
1 检测原理
农残速测仪检测原理是采用酶抑制法, 在一定条件下, 有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制胆碱酯酶的活性, 其抑制率与农药的浓度呈正相关[1,2]。在正常情况下, 酶催化代谢产物水解, 其水解产物与显色剂反应, 产生黄色物质, 用分光光度计在410 nm处测定吸光度随时间的变化值, 计算出抑制率, 通过抑制率的大小可以判断样品中是否有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
2 农残速测方法
2.1 试剂配制与保存
2.1.1 缓冲液。
用量筒量取500 m L蒸馏水, 先用少量 (100~150 m L) 的蒸馏水缓缓倒入放有缓冲剂干粉的量杯中, 用玻棒搅拌至完全溶解后将量筒中剩余的蒸馏水倒入量杯中充分搅拌 (摇匀) , 待用。
2.1.2 显色剂。
用刻度吸管吸5.2 m L缓冲液注入显色剂瓶中, 盖上盖摇匀, 置于0~5℃环境中备用, 切勿冷冻。
2.1.3 底物。
用刻度吸管吸5.2 m L蒸馏水注入底物干粉瓶中, 盖上盖摇匀, 置于0~5℃环境中备用。
2.2 样液制备
取干净的蔬菜, 用天平准确称取2 g, 叶菜取叶片部分, 果菜横截削下一片, 叶片、瓜肉等剪成1 cm2, 置于100 m L小烧杯内;用吸管吸10 m L缓冲液注入小烧杯中, 振荡提取2 min左右;提取结束后静置2~3 min, 取上层清液作为样液。
2.3 仪器操作与样品测定
2.3.1 仪器预热。接通电源, 仪器自检, 自检结束后待机预热10 min, 仪器工作稳定后进行测量[3,4,5,6,7]。
2.3.2 对照测定。
向检测板最左排比色孔中用专用的移液枪分别加10μL酶试剂, 再用250μL移液枪吸取250μL缓冲液于比色孔, 按上下键选择“启动振板”菜单后按“确认”键启动振板10 s, 振板结束后, 让酶试剂和缓冲液混合液静置反应10 min, 用专用的移液枪向比色孔分别加入10μL显色剂和10μL底物, 立即将检测板放入托盘, 按“对照”键测量 (反应时间设为1 min) 。测试结束, 按“确认”键显示对照吸光度变化值。待空白对照值的吸光度变化值在0.15~0.30, 才可测定样品, 否则要重新做空白测定。测量结束后仪器自动保存当前的对照值, 下一次测量样品时就可以不用继续进行对照测量。
2.3.3 样品测定。
若已完成各通道的对照测试, 将检测板上所有比色孔作为样品测量。用不同移液枪分别给比色孔加酶液10μL/孔, 加注样品液250μL/孔, 显色剂10μL/孔。操作步骤同对照测试, 最后按“样品”键测量, 测试结束后, 显示当前测量的样品抑制率结果和吸光度变化值。可根据需要打印被测样品抑制率。
2.3.4 测试结果的判定。
测定结果以抑制率表示。根据GB/T5009.199-2003判定要求, 当样品对酶的抑制率≥50%时, 表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在, 样品为阳性结果。阳性结果的样品需重复检测2次以上。
3 注意事项
(1) 定期校正调试、科学使用移液枪。选用250μL和10μL可调移液枪, 将枪嘴先用清水冲洗再用纯净水冲洗, 在电子天平上进行吸液量校正。移液器使用时, 必须遵循器具专用原则:吸取酶、显色剂、底物的移液器贴上专用标签, 移取试剂时一一对应使用。
(2) 检测室温度要控制在20~25℃, 否则会影响酶的活性, 影响结果[3,4]。若完成对照测量后, 仪器关机重启, 则需重新测量对照。进行对照测量时, 1 min后对照吸光度变化值应在0.15以上, 否则该酶试剂不能继续使用。
(3) 样液制备过程中, 浸提要充分, 缩短时间对结果影响较大。酶试剂和样品液或缓冲液的混合液静置反应时间为10 min, 反应时间不同, 结果不同。试剂从冰箱取出, 先恢复至室温, 摇匀后再使用。酶、显色剂和底物不能漏加或多加, 否则对结果影响大。试剂使用时, 必须遵循只出不进原则:从酶、显色剂、底物试剂瓶中移取出的试剂, 不得返回原试剂瓶中, 以免污染原试剂[5]。若被测比色杯中有气泡产生, 应排除, 以免影响测量结果。
(4) 测量结果抑制率A%为“----”, 表示测量结果无效。可能由以下几个原因造成:试剂从冰箱取出后, 未恢复到室温进行对照测试;对照测试时间与样品测试时间相隔太久, 导致光照与样品测试温度条件相差较大;被测样品色素干扰较严重;反应试剂取用量是否准确。另外, 其他非测试孔空白的孔位可能也会出现“----”[6,7]。仪器操作时, 注意托盘上的孔位不能有头发、棉丝等其他异物, 如有污物或液体可用过滤纸擦干净, 以免影响光路测量。应做好抽样单、检测结果等原始记录的整理并保存好。
(5) 抑制率≥50%的样品, 至少要重复检测2次, 才能确定此样品是否合格。葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、蘑菇及番茄汁液中, 含有对酶有影响的植物次生物质, 容易产生假阳性。处理这类样品时, 可采取整株 (体) 浸提, 避免次生物质干扰。若浸提液色素干扰严重, 将浸提液移到另一个烧杯中, 加入0.1~0.5 g活性炭, 振荡3 min, 用吸管吸取上层液至离心管, 离心到上层液清澈后取出, 放在离心管架上作为样液。
参考文献
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[2]潘德宏.使用NC-800农残速测仪检测蔬菜农药残留步骤及应注意的事项[J].科技信息, 2010 (12) :339.
[3]周和喜.农残速测方法及GNSPR-8D农残速测仪[J].食品安全导刊, 2010 (4) :28-29.
[4]新型农残速测仪问世[J].饲料世界, 2003 (3) :59.
[5]刘辉.福州22个市场配备蔬菜农残速测仪[J].中国果菜, 2003 (1) :13.
[6]吴鹏, 秦智伟, 周秀艳, 等.蔬菜农药残留研究进展[J].东北农业大学学报, 2011 (1) :138-144.
[7]徐剑, 镇召国, 周建华.南通市通州区蔬菜农残例行监测的做法与分析[J].农业环境与发展, 2010 (5) :45-48.
农残速测技术 篇2
农残速测卡法及酶抑制率法的适用范围
便携式农残速测仪是根据国家标准方法 (GB/T5009.199-2003) 速测卡法 (纸片法) 专门设计的仪器, 主要用于果、蔬、茶、粮食、水及土壤中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测, 特别适合农产品质量检测站用于快速检测, 果蔬生产基地和专业农户用于采摘前在田间地头进行检测, 农贸批发销售市场进行现场检测以及酒楼、食堂、家庭果蔬茶加工前的安全检测。
农残速测仪是以酶抑制率法为基础的仪器, 可以快速检测样品中的农药残留量;广泛用于蔬菜、水果、粮食、茶叶以及土壤中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留的快速检测;适用于各级农业检测中心、生产基地、农贸市场、超市、卫生、环保、宾馆酒店等领域。
农残检测卡法与酶抑制率法的检测限比较
厦门绿安分析仪器有限公司采用基于速测卡法的GNSPR-10N便携式农药残留速测仪和基于酶抑制率法的GNSPR-8D农药残留快速测试仪, 分别对30多份阳性样品中的几种农药进行检测, 速测卡法及酶抑制率法的检测限按中华人民共和国国家标准GB/T 5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测 (见表1和表2) 。
通过气相色谱法进行确证试验, 发现速测卡检测法和酶抑制率法的阳性符合率均达90%以上。
GNSPR-8D农残速测仪特点及应用
目前, 国内专注于农残速测产品生产的公司有十多家, 不同公司的产品类别相差不大, 但是在检测条件和结果方面还存在一定差别。厦门绿安分析仪器有限公司拥有GNSPR-10N和GNSPR-10P两个型号的便携式农药残留速测仪, GNSPR-8D (见图1) 、GNSPR-16D、GNSPR-48D、GNSPR-96D和多功能食品快速分析仪, 不同通道的农药残留速测仪及多参数水质快速分析仪等, 并且拥有国家发放的计量生产许可证书 (目前有很多非专业公司无此证书) , 严格按照企业标准《计量生产许可证书》生产出厂。
GNSPR-8D农药残留速测仪
GNSPR-8D是厦门绿安分析仪器有限公司的典型农残速测仪。在室温条件下, 无需恒温即可进行显色反应, 并且检测时间短;采用最新的检测方法, 有效克服了果蔬内源物质的干扰, 可测试葱、姜、蒜、韭菜等辛辣样品及胡萝卜等有色样品;酶试剂有优良的热稳定性, 方便了高温酷暑季节的运输和保存。
农残速测卡是以色板为标准, 依靠视觉对颜色进行判断;农残速测仪则是通过基于的酶抑制率法, 计算出抑制率, 再按《国家标准G B/T5009.199─2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量》进行判断, 从而得到农药残留量。所以, 一般在大型超市, 都是先采用农残速测卡筛选, 再用农药残留快速分析仪GNSPR-8D进行检测, 然后将结果进行比对。
基层农残速测仪的选购 篇3
农残速测原理
在一定条件下, 有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用, 其抑制率和农药的浓度呈正向关系。正常情况下, 酶催化神经传导代谢物 (乙酰胆碱酶) 水解, 其水解产物与显色剂反应产生黄色物质, 用分光光度计在412nm测定吸光度随时间的变化值, 计算出抑制率, 通过抑制率可判断出样品是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯农药。
几种农残速测仪介绍
1.吉大小天鹅GDYN-106SD农残速测仪。该仪器特殊之处在以下四点。一是仪器在空白测量前自动进行光路校准。二是仪器设定了10分钟培养时间, 将加入酶和显色剂的样品提取液放入通道后盖上盖子培养, 给酶创造了充分反应的机会。三是在仪器设定上可以方便的选择测定平行样模式, 可选模式有1×6、2×3、3×2。四是比色部分采用了比色瓶和定位器的结构。使得比色瓶放入通道时不需要考虑瓶放入的方向, 仅需将定位器小三角对准缺口即可。
该仪器缺点在于采用比色瓶加定位器的结构通用性较差, 比色瓶加定位器的价格较一般使用的比色皿结构要昂贵。无法输入样品信息。
2.厦门信仪科技PR-203-6T农残速测仪。该仪器使用1厘米比色皿结构, 通用性强。有液晶屏显示, 但不支持触控操作, 需通过按键进行操作。使用时添加试剂过程无提示, 需要操作者自己把握。该仪器配套试剂一套能完成500批次农残的检测, 试剂成本折合约1元/批次。
3.上海复博CL-BⅢ型残留农药测定仪。这里主要介绍上海复博的CL-BⅢ型的8通道和32通道农残速测仪。
CL-BⅢ8通道农残速测仪在东阳市农业综合检测站开放农残实验室有配置。该仪器通道呈两行放置。仪器采用1厘米比色皿结构, 通用性强。仪器操作前需选择联机或脱机操作模式, 并勾选测定的通道。笔者使用后觉得该机更适合联机操作, 单机使用时设置内容较多, 操作需要小心。
CL-BⅢ32通道农残速测仪在浙江省东阳市重点种植业基地统一配置。该仪器32个通道呈4行、每行8个排开。仪器配备大型液晶屏, 所有操作都在液晶屏上完成。
CL-BⅢ32通道农残速测仪采用1厘米比色皿结构。该仪器特色之处在于一是仪器自动提示添加试剂;二是全部操作液晶屏触控完成;三是可以通过输入特殊编码使样品信息显示其蔬菜品种。
CL-BⅢ8通道农残速测仪和CL-BⅢ32通道农残速测仪采用相同的农残速测试剂, 每套试剂可以完成250批次农残速测, 试剂成本折合约1元/批次。
选购建议
1.包含必要的附件。要完成农残快速检测, 需要一些必要的附件, 如0.1g精度电子天平、移液枪、切样的剪刀和小刀、用于提取样品的塑料或玻璃器皿。
如果附件中含有恒温振荡器, 将大大提高农残提取的效率。在不采用恒温振荡器时, 多数农残速测仪建议农残提取时间为10-15分钟, 使用恒温振荡器后, 提取时间可降低为1-2分钟。
2.通道数选择。对于农残速测仪的通道数, 一般要选择适合于检测任务。目前市场上产品的通道数有单通道、6通道、8通道、12通道、16通道、24通道、32通道等。笔者以为, 单通道因为效率太低, 所以不适合采购。12通道以上的产品以为操作时间过长也不适合采购, 因为添加底物后需要迅速放入仪器比色, 通道数过多, 第一个和最后一个通道的反应时间差距会比较大。比较适合的通道数为6-10个。笔者知道的东阳市重点种植业基地配备的CL-BⅢ32通道农残速测仪, 基本仅使用第一行的8个通道。
3.比色皿规格。目前市场上最通用的为采用1厘米比色皿的产品。农残速测仪采用的波长为412nm, 为可见光区域, 原则上玻璃比色皿和石英比色皿都可以使用。建议使用石英比色皿获得更准确结果。禁止在测定过程中混用石英比色皿和玻璃比色皿。
不建议使用比色瓶作为比色容器, 通用性差。
4.带提示功能的仪器。选择仪器带添加试剂自动提示功能, 显色自动倒计时功能的仪器。这类仪器使用起来更加方便。
5.带电池功能及联网功能。目前主流的仪器都带电池和具有联网功能。带电池, 使仪器能够带到田间地头使用, 仪器更适合现场快速检测。
上面提到的几个仪器都能通过数据线与电脑进行连接, 通过电脑软件进行仪器功能操作, 输入样品信息等。在建立数据库方面, 复博的CL-BⅢ系列农残速测仪更具优势。浙江省已经建立了统一的农残快速检测数据库, 复博的机器原生支持该数据库。吉大小天鹅的GDYN-106SD通过开发兼容软件也已经能够接入该库。厦门信仪的机器尚不能入库。
联网功能还使得仪器检测信息能与二维码打印机协作, 对建立农产品溯源平台有很重要意义。浙江省目前正在推广使用农产品二维码溯源体系。
6.可以输入样品信息。在仪器端输入样品信息并不是一个有效率的方法。CL-BⅢ32通道农残速测仪具有该功能, 但该功能其他机型通过联机后都可以获得。选购仪器时不必过于考虑该点。
7.试剂比较。目前各仪器厂家都提供了配套试剂。试剂使用成本在0.8元/批次到1元/批次之间, 比农残速测卡使用成本略低。吉大小天鹅仪器的配套试剂做到了0.8元/批次。
农残速测中存在一些干扰物质, 一些公司提了应对干扰的试剂, 这是农残速测领域的一个进步, 使农残速测仪可检测作物增加。
试剂使用中需要注意保存, 其中缓冲液可以常温保存, 酶试剂、显色剂和底物都需要冷藏保存, 且开封后不能长久保存, 使用中需要注意。