少精子症（精选4篇）
少精子症 篇1
无精子因子(azoospermia factor,AZF)的微缺失是无精子和严重少精子男性常见的基因改变之一,15%～20%的不育男性发生AZF微缺失。AZF基因位于Y染色体Yq11上,在Yq11的5～6间隔中,有许多位点与精子发生有关,被命名为AZFa、AZFb和AZFc[1]。本研究通过应用多重聚合酶链反应(PCR)技术,对84例无精子症及严重少精子症患者进行了A Z F检测,现将结果报道如下:
1 材料与方法
1.1 对象
不育患者来自我院男科门诊,年龄在25～30岁。连续2次精液分析并经离心沉淀均未发现精子者为无精子症,精子密度<5×106/mL者为严重少精子症,其中无精子症30例,严重少精子症54例,均通过临床检查排除生殖道梗阻、精索静脉曲张等其他泌尿生殖系统疾患,所有患者均抽取外周血进行细胞遗传学及Y染色体检查。
1.2 方法
1.2.1 染色体核型分析
取外周血淋巴细胞培养,常规制备染色体标本,最后吉姆萨常规染色,显微镜检查,每例计数30个分裂相,G显带分析3～5个核型,结果分析按照人类细胞遗传学国际命名体制进行。
1.2.2 AZF因子检测
1.2.2. 1 DNA的提取
常规蛋白酶K消化,酚-氯仿抽提法从外周静脉血中提取人基因组D N A。
1.2.2. 2 PCR引物设计
共8对引物,包括AZFa区的sY84和sY86、AZFb区的sY127和sY134、AZFc区的sY254和sY255,覆盖了从AZFa～AZFc的主要已知突变热点,以SRY(sY14)为内对照。
1.2.2. 3 PCR的扩增
PCR反应体积50μL,含1.5mmol/L MgCl2,10 mmol/L Tris2HCL,pH8.0,50 mmol/L KCl,200μmol/L dNTP,taqDNA聚合酶1U。PCR反应参数为94℃预变性4 min后,94℃30s,58℃45s,72℃45s,共完成35个循环,72℃延伸3min,最后置4℃保温。产物检测用1.0%琼脂糖凝胶电泳,60V恒压电泳30min,溴乙锭染色后在紫外线灯下观察结果。
2 结果
2.1 细胞遗传学结果
84例无精子症和严重少精子症患者中共检出遗传缺陷19例,占22.6%(19/84),其中最常见的异常核型是克氏综合征(47,XXY),总发生率为7.1%(6/84),占所有异常的31.6%(6/19)。另外还发现其他少见异常核型,结果见表1。
2.2 AZF检测结果
84例无精子症和严重少精子症患者中共检出AZF微缺失9例,总缺失率为10.7%。无精子症患者中检出4例,缺失率13.3%(4/30),严重少精子症患者中检出5例,缺失率9.3%(5/54)。9例AZF微缺失中sY86缺失(AZFa片段中)1例,占1.2%;sY127缺失(AZFb片段中)1例,占1.2%;sY254缺失(AZFc片段中)2例;sY255缺失(AZFc片段中)1例,AZFc区缺失率共占3.6%,高于AZFa区和AZFb区缺失率。AZFb、AZFc区双重缺失3例,占3.6%;AZFa、b、c 3个区域同时缺失1例,占1.2%。
3 讨论
近年来,越来越多的证据表明,男性不育尤其是无精子症和严重少精子症的发生与遗传因素有关。在本实验中,无精子症与严重少精子症患者中染色体异常的发生率达22.6%,其中克氏综合征(核型4 7,X X Y)最为常见,与国外报道相似,提示在细胞遗传学水平上,可以认为染色体结构与数目异常是男性不育的重要病因。
Y染色体是人类所有染色体中最小的一条,仅30Mb长,约占人类基因组的1%。早在1976年Tiepoio等提出拉在Y染色体长臂远端Yq11存在着控制精子发生的基因。由于这些基因失去者大多数表现为临床上的无精子症,因此将这些基因统称为AZF[2]。随后,Vogt等将AZF定位于Y染色体长臂远端第五、六区并将其划分为AZFa、AZFb、AZFc 3个区域。Kent-First等[3]认为在AZFb和AZFc之间还存在着1个AZFd区域,但目前尚未找到该区域的基因。
近年来大量研究表明,Y染色体对性发育和精子发生是必需的,在对原发性无精子症和严重少精子症患者的病因分析中均发现存在着Y染色体的微缺失[4],提示Y染色体微缺失可能是男性生精障碍的一个重要遗传学因素,某些基因片断的丢失甚至可造成男性不育。其中如果AZFa缺失,可导致青春期精子发生阻滞,表现为病理上的“唯支持细胞综合征”和临床上的小睾丸症;如果AZFb缺失则表现为减数分裂前的生精上皮细胞正常而减数分裂后的细胞缺乏,提示在青春期减数分裂前或减数分裂期间精子发生的中断;AZFc的缺失其睾丸组织学表现为多样化,可以有与唯支持细胞综合征相似的表型,也可以有精子发生停滞于不同阶段生精上皮细胞的表型,因此会有无精子症和严重少精子症的不同临床表现。
从本次实验结果中,提示:(1)无精子症患者缺失率13.3%高于少精子症患者9.3%,无精子症患者Yq11微缺失的频率大于少精子症患者。(2)不育患者最常见的Yq11微缺失是AZFc缺失,约占Y染色体微缺失的60%,因此AZFc区的基因缺失可作为原发性无精子症和严重少精子症患者的主要筛查基因。(3)有2个细胞遗传学检查Y染色体有Yq12缺失及邻近部位Yq11.23缺失的病例没有检测到AZF的缺失,由于Yq12是异染区,即DNA高度重复的区域,这进一步证明了AZF位于Y染色体Yq11区域内。因此,细胞遗传学检查不能反映Y染色体上AZF微缺失的情况,Y染色体有缺失,不一定就有AZF的缺失;染色体核型正常,也不排除有AZF的缺失。(4)6例克氏综合征患者均没有检测到AZF的缺失,因此,克氏综合征患者的无精子与Y染色体的微缺失无关。
绝大多数Y染色体AZF基因缺失的男性除精子发生异常外,身体的其他方面均表现正常。由于人类只有1条Y染色体,所以Y染色体AZF基因的微缺失可传递给男性后代,但AZF基因缺失的男性因不能正常生育须通过辅助生育技术如睾丸穿刺取精子行精子卵胞质内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)而受孕,可能使AZF基因缺失人为的遗传给男性后代,Cram等[5]利用荧光原位杂交技术已在ICSI新生儿诊断出精子AZFc缺失。因此,对生精障碍患者行ICSI治疗前有必要筛选AZF基因缺失,避免遗传缺陷的垂直传播[6]并为患者的诊断及遗传咨询提供重要依据[7]。
目前AZF的研究还是在开始阶段,由于AZF本身是一个多基因大家族,其对生精的调控机制尚不很清楚,但是AZF的研究已使男性不育症的诊断向前迈进了一大步,它使一部分临床上原因不明的无精子症和少精子症患者明确病因,减少无谓的治疗,同时也有利于ICSI的开展,使ICSI获得更高的成功率与安全性。因此,对原发性无精子症和严重少精子症患者进行AZF基因缺失的检测具有十分重要的意义。
摘要：目的评估无精子症和严重少精子症患者中核型异常及Y染色体微缺失发生的频率,并探讨无精子因子(AZF)检测的临床意义。方法运用染色体G显带及多重聚合酶链反应技术(PCR)对84例无精子症(30例)和严重少精子症(54例)的不育患者进行外周血染色体检查及Y染色体基因检测。结果84例无精子症和严重少精子症患者中核型异常者19例,占22.6%,异常核型中最常见的核型是克氏综合征(47,XXY),总发生率为7.1%,占所有异常的31.6%。AZF区域微缺失9例,总缺失率为10.7%。其中30例无精子症患者AZF缺失率13.3%(4/30),高于54例严重少精子症患者AZF缺失率9.3%(5/54)。AZFc区微缺失率3.6%高于AZFa区(1.2%)和AZFb区(1.2%)。结论AZFc基因缺失是导致男性无精子及少精子的重要原因之一,细胞遗传学检查与AZF微缺失无相关性,不能反应Y染色体上AZF缺失情况。
关键词：Y染色体,核型异常,AZF微缺失
参考文献
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少精子症 篇2
1 资料与方法
1.1 一般资料
我科门诊就诊的男性不育患者120例, 均符合WHO《男性不育标准化诊疗手册》的标准, 年龄25～40 (平均28.9±4.5) 岁, 病程1～11 (平均2.4±5.0) 年, 其中原发性不育68例。经有关检查均除外女方原因。排除如下情况: (1) 逆行射精或不射精等; (2) 细菌性前列腺炎、近期发热等; (3) 服用有碍精子生成及精子活力的药物者; (3) 阴睾、睾丸发育不良及精索静脉曲张者; (4) 合并心血管、肝、肾和造血系统严重疾病者; (5) 精神病患者; (6) 近期采用其他方法治疗者。
1.2 治疗方法
120例患者均口服左卡尼汀 (东维力, 东北制药总厂生产) 1g/次, tid, 用餐时服用, 疗程3个月。治疗过程中, 每周排精1～2次。治疗前及疗程结束时 (均禁欲2～7天) 手淫取精, 行精液分析。
1.3 统计学处理
数据以
2 结果
治疗前后患者精子密度、活动率及前向运动比率的变化见附表。
注:与治疗前比较, ﹡:P<0.01
3 讨论
精浆是由附睾及附属性腺分泌物组成的混合物, 其中10%来自于附睾。精浆与精子接触时间短暂, 但对精子活动、代谢、获能及受精都起至关重要的作用, 而其中主要来自于附睾的左卡尼汀对精子的成熟和运动有直接的影响。哺乳动物附睾组织中具有丰富的左卡尼汀, 人体左卡尼汀主要来自食物和体内生物合成。左卡尼汀参与脂肪酸氧化过程, 可转运长链脂肪酰辅酶A进入线粒体内膜进行氧化。作为脂肪酸代谢的重要辅助因子, 左卡尼汀为精子在附睾内成熟提供必要的能量来源[2]。左卡尼汀在精浆中有很高的浓度, 其不仅参与精子的能量代谢还与精子的质量有关[3]。
少弱精子症是男性不育的重要原因。近年来, 补充左卡尼汀治疗少弱精子症受到广泛关注, Costa等[4]对弱精子症进行的一项多中心的研究显示, 在连续服用左旋肉毒碱3g/d 4个月后, 精子活动率、快速前向运动精子率、精子平均运动速度、前向性指数及每次射精中精子总量均明显增加 (P<0.001) 。李铮等[5]研究结果表明, 左卡尼汀治疗前后精浆左卡尼汀浓度及患者的精子密度、前向运动率有明显差异 (P<0.01) 。本研究显示, 左卡尼汀治疗少弱精子症患者能明显提高精子密度、活动率及前向运动率, 且未见明显不良反应。尽管肉毒碱在弱精子症治疗中具有重要作用, 但必须强调的是, 肉毒碱并非对所有的弱精子症患者均有效, 当线粒体鞘结构已受损时, 补充肉毒碱不能起到改善精子活力的作用。
摘要：120例少弱精子症患者接受左卡尼汀治疗3个月 (1g/次, tid) , 结果患者的精子密度、活动率及前向运动比率均有显著提高 (P<0.01) 。左卡尼汀治疗少弱精子症安全、有效, 值得推广。
关键词：少精症,弱精症,左卡尼汀
参考文献
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少精子症 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
整群选取2012 年2 月—2014 年5 月在云南省第一人民医院收治的72 例男性不育症的患者, 将其作为临床研究对象, 采用随机的方式分为实验组36 例和对照组36 例。 实验组男性36 例, 年龄23~47 岁, 平均 (35.34±6.31) 岁, 不育时间 (4.3±1.3) 年, 女方36 例, 年龄22~42 岁, 平均年龄 (32.65±6.46) 岁;对照组男性36例, 年龄20~46 岁, 平均年龄 (36.44±5.36) 岁, 不育时间 (4.7±1.8) 年, 女方36 例, 年龄23~41 岁, 平均年龄 (32.68±6.43) 岁。 男性外周血染色体与Y染色体微缺失基因无异常, 根据世界卫生组织推荐的诊断依据:行两次精液检查, 进行质量检测, 无精子的诊断必须至少经过3 次精液离心沉淀检查, 经诊断性睾丸穿刺见活动精子, 所有女性配偶均排除排卵障碍、内分泌因素等所致的不孕, 可伴有或不伴有输卵管因素存在。 两组患者的年龄等一般资料比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。
1.2 治疗方法
实验组:实行ICSI治疗前, 前2 个月男方左旋肉碱2 g/d和乙酰左旋肉碱1 g/d (商品名:勃锐精, 美国西格玛托 (Sigma-tau) 制药有限公司, 以下简称复方左旋肉碱, 产品厂家厂名:西格玛, 厂址:意大利, 商品条形码:74574910005, 产品标准号:FDA, 5 g/包, 主要成分左旋肉碱、乙酰左旋肉碱、果糖、柠檬酸、维生素B12、硒、辅酶Q10、维生素C、锌、叶酸等) , 饭后凉水冲服, 早晚2 次, 连续服用2 个月。
对照组:男方不服用任何药物。
两组女性的超促排卵方案相同, 均实行Gn RHa/FSH ( 或HMG) 方案控制性超排卵, 获成熟卵4~6 h内行ICSI治疗, 经18~20 h后观察受精的情况, 24~48 h再检查卵裂的情况, 选择最优质的胚胎2~3 枚72 h后移植宫腔。 术后15 d后行尿和血h CG的检查, 若为阳性者, 3~4 周后B超检查宫腔内有妊娠囊、 胎芽及胎心者为临床妊娠。
1.3 统计方法
采用SPSS 17.0 统计学软件进行数据分析。 计量资料采用t检验, 以均数±标准差表示;计数资料采用 χ2检验, 以百分比 (%) 表示, 以P<0.05 表示差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 实验组治疗前后的精液的比较
实验组治疗前后的相比, 在精子浓度、精子向前运动百分率、精子活率方面, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。
2.2 两组受精率、优质胚胎率、临床妊娠率的比较
经统计分析, 实验组的受精率、优质胚胎率、临床妊娠率均比对照组的高, 差异具有统计意义 (P<0.05) 。
3 讨论
随着现代科技的不断进步, 辅助生殖技术亦有了很大的发展与突破[1,2], 具有代表性的ICSI技术的临床使用, 使不育的男性的治疗有了重大的突破。 ICSI是绕过了女性阴道子宫颈等对精子的自然选择, 直接将精子注射入卵子, 在这个过程中极有可能影响了精子的完整, 包括遗传物质等, 从而影响到以后的胚胎的发育及妊娠成功率等。
该研究选用了不育的男性患者在进行ICSI前3 个月口服左旋肉碱, 进而提高临床ICSI技术及妊娠的成功率, 结果显示:在进行ICSI前3 个月口服左旋肉碱的实验组的受精率、优质胚胎率、临床妊娠率均明显高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。牛玉森[3]对国内外的文献进行了Meta分析, 发现应用左旋肉碱后, 治疗组的精子浓度、精子活率、前向运动精子率、妊娠率均高于对照组。 左旋肉碱是1905 年由俄国科研者在肌肉中提取, 主要存在人体的心肌、附睾、骨骼肌中, 有研究显示, 左旋肉碱不仅在男性的生育方面有着密切的关系, 在心脏、肝肾疾病的发病和治疗中亦起着重要的作用[4,5]。 左旋肉碱在附睾中以游离左旋肉碱和乙酰左旋肉碱形式存在, 通过转运脂肪酸和磷脂等功能, 从而促进精子的发育, 有研究表明[6], 服用左旋肉碱后的男性精子运动百分率与活率都明显的提高 (P<0.05) 。资料表明, 30%左右的男性不育的精液活性氧比较高, 活性氧可以导致精子DNA线粒体的损伤, 使睾丸组织内的氧化与抗氧化系统失衡, 进而影响精子的质量, 左旋肉碱可以保护精子的细胞膜与DNA与活性氧引起的损伤对抗[7]。 ICSI只是单纯的把精子注入卵子, 但是对精子的质量等不能有改善, 因此, 在进行ICSI技术时服用左旋肉碱可以增加双链DNA精子, 保护了精子的DNA完整, 增加了正常精子的受精成功率, 利于优生优育[8,9]。
综上所述, 口服左旋肉碱与卵胞浆内单精子注射可明显提高男性精子的受精率与临床妊娠率, 可以选择性作为临床辅助治疗男性不育症, 值得临床推广应用。
参考文献
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少精子症 篇4
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取本院2008年1月～2011年6月收治的特发性少弱精子症男性不育患者94例,年龄为22～42岁,平均(29.1±5.7)岁。入选标准:患者婚后性功能正常,未采取避孕措施,女方经妇科检查生育能力正常,患者经精液检查符合特发性少弱精子症诊断标准。排除标准:夫妻双方婚后不能长期同房,不能将精液排入女方阴道,生殖激素异常,精液液化时间异常,存在感染性疾病,精索静脉曲张,肝肾功能异常。将所有患者随机分为两组,采用口服葡萄糖酸锌片和维生素E胶丸治疗的患者47例为对照组,在对照组口服药物治疗基础上联合使用尿促卵泡素肌内注射治疗的患者47例为观察组。两组患者间一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
对照组口服葡萄糖酸锌片(70 mg/次,2次/d,广西南宁百会药业集团有限公司生产)和维生素E胶丸(100 mg/次,2次/d,广东三才医药集团有限公司生产)治疗3个月。在对照组口服药物治疗基础上,观察组肌内注射尿促卵泡素(75 IU/次,1次/3 d,商品名为丽申宝,丽珠集团丽珠制药厂生产)治疗3个月。精液检测:采用清华同方精子分析系统MX7.0进行分析,检测内容包括精液量、精子密度、精子活动力、精子形态。
1.3 疗效判定
(1)治愈:女方受孕或精液检测各指标均正常。(2)显效:女方未受孕,治疗疗程结束后精子密度>20×106个/mL,精子活动力a级>25%或a+b级>50%,精子存活率>60%。(3)治疗疗程结束后患者的精子密度、精子活动力、精子存活率至少一项提高了>30%。(4)无效:治疗疗程结束后患者的精子密度、精子活动力、精子存活率各指标均未出现明显变化。
1.4 统计学方法
所有数据资料均采用SPSS 16.0统计学软件进行处理,采用χ2检验、t检验和Fisher确切概率法进行检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者治疗前后各临床指标比较
两组患者治疗前后各临床指标比较结果显示,治疗后对照组患者精子密度、精子活动力、精子存活率明显增加,而精液量增加不明显,畸形精子率降低不明显。治疗后观察组患者精液量、精子密度、精子活动力、精子存活率明显增加,畸形精子率明显降低。治疗后观察组患者精液量、精子密度、精子活动力、精子存活率明显高于对照组,而观察组患者畸形精子率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
注:与对照组治疗后比较,*P<0.05
2.2 两组患者治疗后临床疗效和妊娠情况比较
两组患者治疗后临床疗效和妊娠情况比较结果显示,治疗后观察组患者总有效率和妊娠发生率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
2.3 两组患者用药安全性比较
两组患者不良反应情况比较结果显示,所有对照组、观察组患者并未出现明显的不良反应。
3 讨论
男性精子的产生是一个连续的分化过程,是由机体基因严密调控完成的,过程涉及了细胞分裂、细胞分化、细胞间相互作用等各个方面,一旦在精子产生过程中内部遗传因素或外界环境因素受到了影响,均可导致机体精子发生异常或死亡。机体下丘脑、垂体、睾丸性腺轴对精子的生成均具有重要的调节作用,它们共同调节了机体的生殖激素水平。有研究表明,人体精液中FSH水平的异常变化将严重影响精子质量[4,5,6]。FSH作用于机体生精和启动生精过程以及治疗性功能异常也有报道[7]。锌作为人体所需的微量元素,可以影响机体的性腺发育和生精功能,还可以很好的维持精子的活动力,进而影响着患者精子酶的组成和活性[8,9],适量的锌补充有助于精子质量的改善。精液中过多氧自由基可通过氧化应激作用导致脂质过氧化而损伤精子,维生素E是一种抗氧化剂,可以作为机体某些酶系统的辅助因子,维持机体正常生物膜生成的运作,调节性腺分泌和生精功能,具有良好的保护作用。3种药物的联合使用相辅相成,可以大幅改善患者的生精状况。
使用尿促卵泡素肌肉注射可以直接作用于机体,促进精原细胞的分裂和精细胞的早期发育,还可以有效改观患者精子的倍数和形态[10]。尿促卵泡素不仅加速了精子细胞的分裂和精子的生成,还对生殖细胞凋亡起着至关重要的作用,通过改善精子的超微结构和线粒体DNA的聚合状况而大幅改善机体精子的运动能力,提高了精子存活率,进而降低了精子畸形的发生。由于患者精子膜功能得到了大幅改善,可明显增加女方的自然受孕成功率,比单独的口服药物治疗可以明显提高受孕率,治疗成本也不高,操作简单易行。综上所述,采用尿促卵泡素治疗男性特发性少弱精子症不仅可以明显改善患者的精液量和提高精子密度,还可以增强患者精子的活动力和提高精子存活率,进而提高了患者配偶的妊娠发生率,是一种有效的治疗方法。
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