丙二酸二醛（通用8篇）
丙二酸二醛 篇1
摘要：以厚皮型甜瓜 (久红瑞、2-64) 、薄皮型甜瓜 (久青蜜、002) 和厚薄皮中间型甜瓜 (久脆蜜、久仙) 3种类型6个甜瓜品种为材料, 研究了夜间持续亚低温 (815℃) 和白天大棚常规管理条件对不同生态型甜瓜苗期丙二醛 (MDA) 含量的影响。结果表明, 久青蜜品种对持续亚低温有较好抗性, 而久红瑞抗性相对最差。
关键词：甜瓜幼苗,亚低温,丙二醛,含量
甜瓜 (Cucumismelon L.) 是喜温植物, 对温度的要求较高。在中国长江中下游地区的早春大棚生产中, 夜间常会遇到亚低温胁迫, 对甜瓜的幼苗生长非常不利。目前, 关于甜瓜受低温胁迫研究的报道较少。孙玉宏等[1]对人工模拟气候条件下甜瓜耐冷性指标的筛选进行了研究。武雁军等研究了厚皮甜瓜在低温胁迫下抗寒生理的反应[2]。和红云等研究了低温胁迫对甜瓜幼苗叶绿素的影响[3]。对低温中的亚低温胁迫的报道主要在黄瓜上[4,5], 在甜瓜上的报道很少。为此, 笔者研究了3种不同生态型6个甜瓜品种在夜间持续亚低温 (8~15℃) 、白天正常温度条件下的丙二醛 (MDA) 含量变化情况, 旨在探讨亚低温对甜瓜MDA含量的影响, 为亚低温对甜瓜生理生化的影响研究提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 试验场地与供试品种
试验于2008年3~5月在安徽农业大学园艺学院蔬菜实验室和校外甜瓜基地进行。选用了3种类型共6个品种的甜瓜材料, 分别为厚皮型甜瓜久红瑞和2-64、薄皮型甜瓜久青蜜和002、厚薄皮中间型品种久脆蜜和久仙。种子均由合肥久易农业开发有限公司提供。
1.2 试验设计
供试材料于50~60℃热水中搅拌10min左右, 自然冷却, 浸种3h, 置于28℃恒温箱中催芽, 当90%以上种子露白时即播种于营养钵。2008年3月13日, 6个甜瓜品种各取180株于大棚中常规育苗, 待到2片子叶平展、第1片真叶0.3~0.5mm时, 每个品种取100株进行夜间连续偏低温处理, 白天常规管理。其余80株继续在大棚中常规育苗, 作为对照 (CK) 。3月21日开始连续偏低温处理, 10d、20d、30d后分别取甜瓜幼苗叶片测定MDA含量。
1.3 测定方法
MDA含量的测定参照张煜星等[6]的方法, 其计算公式为:
式中, A为OD532nm与OD600nm之差;N为上清液的体积;155为1mmo L三甲川在532nm处的吸光系数;d为比色杯光程;W为样品鲜重。
2 结果与分析
由表1可知, 处理后10d、20d、30d, 6个甜瓜品种的MDA含量基本上均高于CK (处理后20d、30d的久青蜜和处理30d的002除外) , 但含量多少存在一定的差异。这说明6个甜瓜品种均受到低温的胁迫, 但受胁迫程度不同。
处理后10d, 久仙的MDA含量最高, 2-64次之, 002、久青蜜、久红瑞和久脆蜜依次降低;其中, 久仙和2-64的MDA含量明显高于其他处理, 但久青蜜、久红瑞和久脆蜜之间的MDA含量差别不大。
处理后20d, 2-64的MDA含量最高, 久脆蜜最低, 002、久红瑞、久仙和久青蜜介于中间, 且依次降低;其中, 2-64、0 0 2 明显高于久青蜜、久脆蜜。
处理后30d, 久红瑞的MDA含量最高, 2-64、久脆蜜、002、久青蜜和久仙依次降低;其中, 久青蜜和久仙的MDA含量差别较小。总体上, 随着处理时间的延长, 不同甜瓜品种的MDA含量与CK的差异均越来越小, 其差异程度:厚皮型甜瓜久红瑞、2-64>厚薄皮中间型甜瓜久脆蜜、久仙>薄皮型甜瓜久青蜜、002。这说明不同类型品种对亚低温的抗性为:薄皮型>厚薄皮中间型>厚皮型。
3 结论与讨论
MDA是膜脂过氧化产物, 其含量多少是反映植物抗冷性的一个重要指标。测定MDA的含量可以反映膜脂过氧化的程度。且MDA也会导致脂类、糖类、蛋白质与核酸的多聚化, 因此其值越高, 说明细胞自由基增多, 氧化损伤程度高, 反之值越低, 说明氧化损伤程度轻[7]。试验结果表明, 3个类型甜瓜品种的抗性以薄皮型抗持续亚低温性最强, 厚薄皮中间型次之, 厚皮型最差。该研究仅讨论了亚低温抗性的一个指标, 至于在其他低温抗性指标是否有同样的结果, 还有待于进一步研究。
参考文献
[1]孙玉宏, 徐跃进, 彭金光, 等.甜瓜耐冷性指标的筛选[J].中国蔬菜, 2004 (4) :7-10.
[2]武雁军, 刘建辉.低温胁迫对厚皮甜瓜幼苗抗寒性生理生化指标的影响[J].西北农林科技大学学报 (自然科学版) , 2007 (3) :139-143.
[3]和红云, 薛琳, 田丽萍, 等.低温胁迫对甜瓜幼苗叶绿素含量及荧光参数的影响[J].北方园艺, 2008 (4) :13-16.
[4]熊作明, 袁伟, 陈学伟, 等.亚低温对黄瓜生长发育的影响[J].中国蔬菜, 2007 (11) :19-20.
[5]李长缨, 朱其杰.光照对黄瓜光合特性及亚适温下生长的影响[J].园艺学报, 1997, 24 (1) :97-99.
[6]张煜星, 肖璐.基础生物化学实验[EB/OL]. (2008-12-24) .http://www.docin.com/p-5294468.html.
[7]HEATH R L, PACKER L.Photoperoxidation in isolated chloroplasts:I.Kinetics and stoichiometry of fatty acid peroxidation[J].Archives of Bio-chemistry and Biophysics, 1968 (125) :189-198.
丙二酸二醛 篇2
摘要:采用盆栽试验法研究了干旱胁迫对海姆维斯蒂木旬子(Cotoneaster hjelmqvistii)生长及叶片中丙二醛和脯氨酸含量的影响。结果表明,新梢生长量随干旱胁迫程度加深而减小,但处理与对照的差异未达显著;叶片中游离脯氨酸的含量和丙二醛的含量均随干旱胁迫程度的加深而增加,但处理与对照间的脯氨酸含量差异不显著,丙二醛含量在45%干旱胁迫处理时与对照差异不显著,在25%时差异极显著。综合各项测定指标认为,海姆维斯蒂木旬子具有较强的抗旱能力。
关键词:海姆维斯蒂木旬子;干旱胁迫;新梢生长量;丙二醛;脯氨酸
中图分类号:Q945.78文献标识码:A文章编号:1006-6500(2009)01-0001-04
Effect of Drought Stress on Growth and MDA and Proline of Cotoneaster hjelmqvistii
LUO Jian-xia1,MA Li1,CHAI Ci-jiang1, WANG Dan1, ZONG Jing-ying2,LU Xing-xia1, HU Yan-yan1,
ZHANG Jin-hua3
(1.Department of Horticulture,Tianjin Agricultural College,Tianjin 300384,China; 2.Tianjin Forestry Bureau,Tianjin 300203,China;3.Greening Management Station of Hongqiao District in Tianjin, Tianjin 300131 ,China )
Abstract:Effect of drought stress on growth and MDA and proline content in the leaves of Cotoneaster hjelmqvistii grown in pats were studied in the experiment.45% and 25% relative water contents in the soil were prepared as two drought stress treatments, regular watering as control. A completely randomized design was used in the experiment and five replicates were arranged. Growth, free proline and MDA content in the leaves were analyzed after treatment. The results showed that the shoot growth increment was declined with increased degree of drought stress, but had no significant difference with CK. Both proline and MDA content in the leaves increased with strong drought stress, proline content had no significant difference between treatments and CK, MDA content had no significant difference between treatments and CK after 45% relative water contents in the soil and very significant difference after 45%.According to comprehensive analysis, Cotoneaster hjelmqvistiicould be considered as ground cover plant with higher drought-tolerance.
Key words: Cotoneaster hjelmqvistii; drought stress;shoot growth;MDA;proline
天津及北方许多城市水资源匮乏,因此,引进、利用抗旱性强的地被植物具有极强的实践意义。而目前在天津地区园林实践中可应用的绿化植物种类相对较少,优良的木本地被植物更是缺乏。海姆维斯蒂木旬子(Cotoneaster hjelmqvistii Flinck and Tylmö)是蔷薇科木旬子属落叶或半常绿低矮灌木,是从英国爱丁堡皇家植物园引进的一种优良木本地被植物。经过几年的试验研究,该木旬子表现出较强的耐盐碱及抗旱能力,具有很高的推广应用价值[1]。
目前,在国内园林绿化中对木旬子的应用种类较少,多集中于平枝木旬子、水木旬子、小叶木旬子和匍匐木旬子等[2-4],而除了柴慈江、史燕山等人[5]对海姆维斯蒂木旬子的组培快繁、引种栽培的相关报道外,尚未见到其它有关海姆维斯蒂木旬子研究内容的报道。本试验对海姆维斯蒂木旬子进行干旱胁迫处理,对该木旬子在干旱胁迫下的生长及叶片中游离脯氨酸及丙二醛含量等指标的变化进行研究,以了解其抗旱能力,为海姆维斯蒂木旬子的推广应用,制定栽培管理措施提供理论参考依据。
1 材料和方法
1.1 材 料
以海姆维斯蒂木旬子(Cotonester hjelmqvistii Flinck and Tylmö)一年生扦插苗为材料。选择生长良好,大小基本一致的植株为试材。
选用规格一致的塑料花盆装入等量培养土(1 400 mg,园土与草炭1∶1配比),将植株移栽入盆中。待缓苗并生长一段时间后,即苗木生长到能基本表现该植物特征时,选择生长发育基本一致的植株用于土壤干旱胁迫处理。
1.2 方 法
本试验采用盆栽法,设置2个干旱胁迫处理,即土壤相对含水量分别为45%和25%,浇足水后,处理不浇水使土壤含水量持续下降,当土壤含水量达到所设置的处理要求时进行各项指标测定。以正常浇水为对照(土壤相对含水量一直保持在70%～80%),用称质量法监控土壤水分含量。对照和处理均进行相同的养护管理。试验采取完全随机设计,5次重复。
1.3 试验指标测定
1.3.1 植株生长量的测定 进行干旱胁迫处理前测定全部植株(处理及CK)的新梢总长度,当土壤含水量达到所设置干旱胁迫处理的要求时再次测定新梢总长度,计算各处理及CK的生长量,并计算处理的相对生长量[6,7]:
生长量(cm)=处理后的新梢平均长度-处理前新梢平均长度
相对生长量=(处理生长量/对照生长量)×100%
1.3.2 叶片中丙二醛含量及游离脯氨酸含量的测定盐胁迫处理后,取各处理及对照的代表性叶片进行丙二醛含量和脯氨酸含量的测定。采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量[8];采用磺基水杨酸提取、酸性茚三酮染色法测定游离脯氨酸含量[8]。对试验数据进行统计分析。
2结果与分析
2.1 干旱胁迫对海姆维斯蒂木旬子新梢生长量的影响
对干旱胁迫处理前用于处理和对照的植株的新梢生长量进行测定分析,结果显示(表1),各处理和对照的新梢平均生长量差异不显著,说明用于试验的植株生长发育一致。
由表1可知,干旱胁迫处理后,植株生长受到抑制,新梢生长量和相对生长量都呈下降的趋势。土壤相对含水量为45%时,新梢生长量较对照下降了0.25 cm,含水量为25%时,较对照下降了1.038 cm,说明随着干旱胁迫程度地加深,对植物生长的抑制作用增强。显著性测验结果则表明:两个干旱胁迫处理下,对照与处理新梢生长量间的差异均未达显著水平(但t值随干旱胁迫程度加深而增大,也反映了干旱对新梢生长的胁迫作用加大),这个结果在一定程度上反映了海姆维斯蒂木旬子比较耐旱,如在土壤相对含水量为25%时,该木旬子的相对生长量还达到了68.667%。
2.2 干旱胁迫对海姆维斯蒂木旬子叶片中游离脯氨酸含量的影响
不同干旱胁迫程度下海姆维斯蒂木旬子叶片中游离脯氨酸含量的分析结果见表2。由表2可知,干旱胁迫下海姆维斯蒂木旬子叶片中游离脯氨酸的含量增加,而且随着干旱胁迫程度的增加,脯氨酸含量的增加值升高。t测验结果显示,干旱胁迫处理与对照叶片中的游离脯氨酸含量差异不显著(t0.05=2.306)。
2.3 干旱胁迫对海姆维斯蒂木旬子叶片中丙二醛含量的影响
不同干旱胁迫程度下该木旬子叶片中丙二醛含量的结果分析见表3。由表3可看出,当土壤相对含水量45%时,对照与处理叶片内的丙二醛含量差异不显著(t0.05=2.306),处理组植株叶片内丙二醛含量与对照组相比增加了2.77%,但随着干旱胁迫程度的加深,叶片内丙二醛含量的增加幅度加大,当土壤相对含水量为25%时,处理比对照增加了42.70%,二者的差异达到极显著水平。丙二醛是细胞膜受破坏的一种产物,其含量的多少标志着细胞膜受破坏程度的大小,此试验结果说明在高度干旱胁迫时,该木旬子植物的组织细胞膜受到了一定程度的破坏。
2.4 植株外部形态观察
自干旱胁迫处理后,每天观察海姆维斯蒂木旬子植株的外部形态表现。结果显示:在土壤相对含水量为45% 时,植株外部形态与对照无明显区别。当土壤相对含水量为25%时,与对照相比只是叶面光泽度有些减退、发暗。土壤相对含水量降到17%左右时,叶片才表现出轻度萎蔫现象。在土壤相对含水量降到15%以下时,表现出明显的萎蔫现象,但复水后植株恢复状况和程度较好。由此可以看出,该木旬子是一种较为耐旱的地被植物。
3讨论与小结
逆境胁迫会影响植株的生长[6,7,9,10 ],干旱胁迫对植株的影响最直观的表现就是引起叶片、幼茎的失水萎蔫、抑制植株的生长。植株生长量及相对生长量的大小可以反映其抗性的强弱,相对生长量越大忍受逆境的能力愈强[6,7]。海姆维斯蒂木旬子在土壤相对含水量为45%和25%时,新梢生长量减小,与对照相比差异均未达到显著水平,且在土壤相对含水量为25%时,相对生长量还达到了68.667%。这说明干旱胁迫对该木旬子的生长影响较小,其抗旱能力较强。
逆境下植物体内游离脯氨酸含量增加是一种普遍现象,关于脯氨酸含量在逆境下产生积累的生理效应以及与抗逆性的关系有许多不同的观点[10-16]。本试验中,不同干旱胁迫程度下,海姆维斯蒂木旬子叶片中游离脯氨酸含量均有增加,但增加幅度较小,与对照相比均未达到显著水平,若结合该木旬子在干旱胁迫下外部形态变化,可以说明干旱胁迫对海姆维斯蒂木旬子的生理代谢影响较小,耐旱性较强。这一试验结果与马宗仁[11]、史燕山等人[10]有关脯氨酸积累速度与抗旱性强弱关系的研究结果一致。因此,本试验结果分析认为,逆境下植物组织内游离脯氨酸含量的变化作为干旱胁迫下的一种响应特征比较合理,此看法支持了束怀瑞[13]、卢少云等人[15]的研究观点。
MDA是膜脂过氧化过程中的分解产物,MDA含量越高,则细胞膜损伤程度越大[8]。本试验中,不同干旱胁迫处理下海姆维斯蒂木旬子叶片中的MDA含量均较对照增加,但增加的幅度不一样。在土壤相对含水量45%时,MDA比对照增加了2.77%,二者间差异不显著;而在土壤相对含水量为25%时,木旬子叶片中MDA含量的增加幅度加大,比对照增加了42.70%,二者间差异达到极显著,说明此时细胞膜遭受到了一定的破坏,这与外部形态观察的表现结果一致。
干旱胁迫对植物的影响是多方面的,判断植物耐旱性的强弱应从多方面给予综合分析,本试验结合干旱胁迫下的新梢生长量、叶片中游离脯氨酸和MDA含量的测定结果以及结合植株的外部形态表现,可初步认为:海姆维斯蒂木旬子受干旱胁迫影响较小,抗旱能力较强。
参考文献:
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丙二酸二醛 篇3
秋水仙素是诱变多倍体效果最好的药剂之一。秋水仙素 (C22H25O6N) 在1937年发现, 是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶, 易溶于冷水、酒精和氯仿, 难溶于热水、乙醚等, 熔点155℃。一般多使用其水溶液[1,2,3]。试验证明, 有效的诱变浓度是0.000 6%~1.600 0%, 以0.2%的浓度诱变效果最好。
丙二醛 (MDA) 是膜脂过氧化的最终分解产物, MDA从膜上产生的位置释放出后, 可以与蛋白质、核酸反应, 从而丧失功能, 还可使纤维素分子间的桥键松驰, 或抑制蛋白质的合成, 从而对膜和细胞造成一定的伤害。丙二醛 (MDA) 是常用的膜脂过氧化指标, 在酸性和高温度条件下, 可以与硫代巴比妥酸 (TBA) 反应生成红棕色的三甲川 (3, 5, 5—三甲基恶唑-2, 4.二酮) , 其最大吸收波长在532 nm。
香蕉是广西的重要热带水果, 在广西水果生产中占有很重要的地位。在这个趋势下, 出现新品种或者是新技术, 对香蕉生产具有极大的作用。而多倍体植物常表现出新陈代谢旺盛、酶活性提高、合成能力增强、品质好的特点。多倍体对不良环境有更好的适应性, 其抗病性、抗逆性显著增强, 容易适应改变了的环境。香蕉已是3倍体, 用秋水仙素处理能否使它的染色体进一步加倍, 进而使它的产量、质量或抗逆性得到提高, 这个问题值得进一步研究。由于秋水仙素有毒, 秋水仙素处理后往往会造成植物伤害, 甚至死亡。该研究采用秋水仙素不同剂量对香蕉组培苗进行处理, 观察记载香蕉组培苗生长情况, 并对叶片中的丙二醛含量进行测定分析, 并初步探讨秋水仙素对香蕉组培苗的作用效应。
1 材料与方法
1.1 供试材料
试验用香蕉苗为威廉斯蕉组培苗;供试药剂:MS培养基、6-BA、秋水仙素 (浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%) 、p H值6.8的磷酸缓冲液、反应液 (p H值6.8的磷酸缓冲液100 m L+愈伤木酚0.5 m L+30%H2O21 m L) 、10%三氯乙酸 (TCA) 、0.6%硫代巴比妥酸 (TBA) 。
1.2 试验设计
分别采用0.1%、0.2%、0.3%、0.4%浓度的秋水仙素对香蕉进行不同时间 (1、2、3、4、5 d) 的诱导处理, 并对诱变处理后再生植株的生长情况和丙二醛含量进行检测。
1.3 试验方法
丙二醛含量参考李柏林等1761方法中的双光光度计测定。称取剪碎的试材1 g, 加入TCA 2 m L和少量石英砂, 研磨至匀浆, 再加入TCA 8 m L进一步研磨, 匀浆4 000 r/min离心10 min, 上清液为样品提取液。吸取离心的酶上清液2.0 m L, 加入0.6%TBA 2.0 m L。混匀, 沸水浴15 min后, 快速冷水浴, 然后在4 000 r/min离心10 min, 取上清液在400、532、600 nm处测定消光度。采用双组分分光光度计法C (μmol/L) =6.45 (D532-D600) -0.56D450。D450、D532、D600分别代表在450、532、600 nm波长下的消光度值。计算MDA含量, MDA含量 (μmol/g) =MDA浓度 (μmol/L) ×提取液体积 (m L) /植物组织鲜重 (g) 。
此次试验采用SPSS for Windows软件中的邓肯 (Duncan) 即新复极差法 (SSR) 检验法比较。
2 结果与分析
2.1 同一浓度不同处理天数香蕉叶片中丙二醛含量
从图1可以看出, 香蕉组培苗在没有经过秋水仙素处理下, 其叶片中的丙二醛含量, 并没有随着时间的增加有明显的变化, 几乎呈直线的趋势。
在0.1%浓度的秋水仙素处理下, 香蕉叶片中的丙二醛含量在第2天上升达到最大值, 与第1天相比上升了10%;然后随着处理天数的继续增加, 叶片中的丙二醛的含量又缓慢下降, 到第5天时, 下降到最小值。
0.2%浓度的秋水仙素处理下, 随着处理天数的增加, 香蕉叶片中的丙二醛含量一直下降, 直到处理的第5天下降到最小值。
0.3%浓度的秋水仙素处理下, 随着处理天数的增加, 香蕉叶片中的丙二醛含量呈下降的趋势, 其中第2天比第1天下降了10.7%, 之后则随着天数的增加, 丙二醛含量有较小的下降趋势, 但到第5天时, 丙二醛含量呈直线下降, 比第4天下降了41.0%。
在0.4%浓度的秋水仙素处理下, 随着处理天数的增加, 香蕉叶片中的丙二醛含量, 第2天比第1天增长了7.2%, 但随后第3天又下降了49.6%, 到第4天又上升了19%, 随后又下降。
2.2 相同处理天数不同秋水仙素浓度之间的比较
从表1可以看出, 0.1%浓度处理香蕉叶片中丙二醛含量极显著高于0.4%、0.3%、0.2%浓度处理, 也极显著高于对照;0.4%浓度处理与0.3%浓度、对照及0.2%浓度处理间香蕉组培苗叶片中丙二醛含量都有极显著的差异;0.3%浓度处理香蕉叶片中丙二醛含量也极显著地高于对照和0.2%浓度处理[4]。
注:大、小写字母分别为1%、5%水平下的差异显著性。
从第2天测得的丙二醛含量可以看出, 第2天香蕉叶片中丙二醛含量的变化情况与第1天的相同。
从第3天测得的丙二醛含量可以看出, 0.1%浓度处理的香蕉叶片中的丙二醛含量极显著高于0.3%浓度处理、对照、0.4%浓度、0.2%浓度处理。
第4天, 香蕉叶片中丙二醛含量相比于前几天都有不同程度的下降, 但不同浓度处理间仍然存在极显著的差异。总体上看, 0.1%浓度处理下丙二醛含量仍然最大, 其次是0.4%浓度处理, 0.2%浓度处理的含量最低。
第5天时, 香蕉叶片中丙二醛含量在不同浓度处理下的变化规律与第4天的相同, 但各浓度下的丙二醛含量比第4天都有所下降。
3 结论与讨论
该试验研究表明, 在不同浓度的秋水仙素处理中, 0.2%秋水仙素处理的香蕉叶片中的丙二醛含量是最低的, 即使是随着处理天数的增加, 0.2%浓度处理的MDA含量在各浓度之间一直处于最低, 且比对照还要低, 这可能是因为有机酸的体外解毒效果使得体内各种抗氧化酶活性相对较高, 有利于清除活性氧自由基, 减弱膜脂过氧化作用, 减少了MDA在体内的累积;0.1%秋水仙素处理, 其丙二醛含量最高, 说明0.1%秋水仙素处理对香蕉的伤害最大, 可能是秋水仙素在作用于纺锤丝, 抑制有丝分裂, 引起染色体加倍的同时, 对于细胞膜也产生作用;0.3%秋水仙素处理对香蕉的影响不是很大;0.4%秋水仙素处理, 其丙二醛含量先是上升到最大值, 然后下降到最小值, 这有可能是香蕉先受到了秋水仙素的毒害致使丙二醛含量在香蕉体内累积, 但随着处理时间的增加, 丙二醛含量急剧下降, 香蕉对0.4%秋水仙素产生了抗体;其中, 3.745μmol/g的丙二醛含量很有可能是香蕉的伤害极限。
丙二醛 (MDA) 及自由基都是对细胞生命活动极为有害的集团。MDA含量的增加与细胞膜脂质发生过氧化作用分不开, 事实上, 膜脂质过氧化作用是一个连锁反应。膜脂分子碳氢侧链的亚甲基上氢原子的解离能较低, 它在活性氧的作用下容易解脱而形成不稳定的脂质自由基 (lipid radical, R·) , 并在氧参与下进一步形成脂质过氧化物自由基 (ROO·) 脂质过氧化物自由基一方面夺取邻近膜脂分子的氢原子而形成脂质氢过氧化物 (ROOH) 和一个新的R·使反应连续不断发生;另一方面ROO·可自动转化为膜脂内过氧化物, 并进一步降解成丙二醛及其类似物, 而丙二醛 (MDA) 是长期以来用于检测膜脂过氧化程度的一个公认指标, 其积累在一定程度上反应了植物体内自由基活动的状态。李成琼对6个甘蓝材料叶片38~47℃高温胁迫30 min后植株叶片MDA含量测定表明, 耐热性强的材料在受胁迫后, 其MDA含量较低。
摘要：探讨秋水仙素对香蕉组培苗的作用效应, 结果表明:在不同浓度的秋水仙素处理中, 0.2%秋水仙素处理的香蕉叶片中的丙二醛含量最低。
关键词：香蕉,秋水仙素,丙二醛
参考文献
[1]周朴华, 何立珍, 刘选明.组织培养中用秋水仙素诱发黄花菜同源四倍体的研究[J].中国农业科学, 1995, 25 (l) :49-55.
[2]刘庆忠.秋水仙素处理离体叶片获得皇家嘎拉苹果四倍体植[J].果树学报, 2001, 18 (1) :7-10.
[3]唐薇, 李维江, 张冬梅, 等.干早对转基因抗虫棉苗期叶片POD.MDA和光合速率的影响[J].中国棉花, 2002, 29 (2) :23-24.
丙二酸二醛 篇4
关键词：二氧化硅,N-乙酰半胱氨酸,丙二醛
矽肺是我国危害面最广和最严重的职业病, 其重要特征是肺纤维化,目前治疗方法非常有限。近年来研究发现N-乙酰半胱氨酸(NAC)不仅具有黏液溶解作用,而且具有较强的抗氧化和促肺表面活性物质生成等作用。研究表明,NAC能够明显减轻博莱霉素所致的肺损伤,通过抗氧化作用抑制肺纤维化的发展,对肺纤维化具有较明显的保护作用[1], 但其对矽肺抗氧化的作用及机制相关报道较少。我们采用非气管暴露法建立大鼠矽肺模型,通过胃内灌入NAC对矽肺大鼠模型进行干预, 检测血清及肺组织中氧化损伤相关指标丙二醛(MDA)的变化,探讨 NAC对矽肺患者肺部的保护作用。
1 材料与方法
1.1 材料
雄性 Wistar大鼠90只, 平均体重180～240 g, 由中南大学动物部提供[动物合格证号SCXK(三相2009—004)]。
1.2 主要试剂与药品
含游离性SiO2>98% , 粒径≤ 5 μm的微粒占99%;NAC泡腾片0 .6 g/片,由浙江京华康恩贝公司提供; MDA试剂盒购自上海研谨生物科技有限公司。
1.3 实验动物分组及方法
随机分为对照组、染尘组、预防治疗组,每组30只。染尘组:模型制备同染尘组 ,于染尘前 1 周及此后每日NAC[ 500 mg/ (kg·d)]灌胃。对照组:以等剂量生理盐水气管注入。3组动物8周后经腹主动脉放血处死,解剖动物取肺脏称重, 每份标本定量称取少量肺组织按重量体积比加生理盐水在冰浴下制成 10 % 匀浆, 按照试剂盒操作,并检测各项指标。造模8周后用硫代巴比妥法检测血清及肺组织中MDA含量。
1.4 统计学处理
用 SPSS 17.0软件进行统计,各组数据以undefined表示 ,两组均数间差异的显著性采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 大鼠肺组织的变化
肺病理组织学结果显示,对照组的肺组织肺泡间隔无增厚,结构清晰,少量炎性细胞浸润;染尘组可见肺泡间隔增厚,肺泡结构紊乱,肺泡腔及间质内有大量炎性细胞浸润,肺组织病理切片可见纤维性矽结节形成;预防治疗组炎性细胞浸润较染尘组明显减轻,纤维性矽结节明显减少。
2.2 大鼠血清及肺组织中MDA的水平
染尘组及预防治疗组大鼠血清及肺组织中 MDA 的含量均明显高于对照组;预防治疗组MDA的含量明显低于染尘组,差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。
注:与染尘组比较,at=15.57, P<0.01; bt=23.72,P<0 .01。
3 讨论
近几年在矽肺发病机制的研究中发现,自由基起着非常重要的作用。石英粉尘进入机体后可产生活性氧自由基[2], 引起肺泡巨噬细胞和成纤维细胞的脂质过氧化损伤,从而促进矽肺的形成和发展。体外实验结果表明SiO2可作用于巨噬细胞,导致大量MDA 的产生[3]。张中兴等[4]的实验也显示染尘组大鼠肺组织中MDA 含量显著增加。本研究显示尘染大鼠血清及肺组织中MDA水平明显高于对照组,与以往研究结果相一致,从而再次对揭示矽肺的发病机制提供了实验依据。
一方面,NAC具有较强的抗氧化作用,能发挥还原型谷胱甘肽(GSH) 的前体即半胱氨酸的功能间接抗氧化;另一方面,NAC本身也是一种直接的抗氧化剂, 能通过自身-SH 氧化还原干扰活性氧,清除体内自由基。已有研究表明,小剂量NAC 具有一定的抗炎作用,使应用大剂量NAC ( > 400 mg/ kg) 可能对胶原沉积起到保护作用[5]。MDA为脂质过氧化反应的最终产物,而抗氧化剂NAC能够降低MDA的活力,抑制MDA的生成,保护细胞膜[6]。本实验结果也表明,大鼠染尘后,血清及肺组织中MDA含量明显高于同期对照组,而用NAC [500 mg/(kg·d)]的预防治疗组MDA 的含量明显低于尘染组, 差异有统计学意义(P<0.01)。这进一步证实了NAC有效地抑制了尘染大鼠MDA的异常升高, 减弱氧化损伤的效应,减轻了细胞损伤, 从而干预了肺纤维化的进程,提示抗氧化剂能有效抑制石英粉尘启动的脂质过氧化反应 ,对尘染大鼠肺纤维化的发生、 发展也有一定的抑制作用。另外,本实验 肺病理组织学结果显示,NAC治疗组炎性细胞浸润较尘染组明显减轻,纤维性矽结节明显减少。从而证明了NAC 可抑制矽肺间质纤维化和矽结节的形成,减轻肺组织的损伤, 维护肺组织的正常结构与功能,促进组织修复,最终达到对抗矽肺、 防止纤维化、 改善呼吸功能的作用。这为NAC 用于防治尘肺提供了理论研究依据,但NAC 对尘肺患者的临床使用仍需进一步研究。
参考文献
[1]Teixeira KC,Soares FS,Rocha LG,et al.Attenuation of bleomycin in-duced lung injury and oxidative stress by N-acetylcysteine plus defer oxamine[J].Pulm Pharmacol Ther,2008,21:309-316.
[2]贺小春,董发勤.矿物粉尘释放自由基的研究进展[J].中国公共卫生,2003,19(17):884-885.
[3]薛一雪.SiO2体外培养大鼠肺泡巨噬细胞MDA生成研究[J].中国医科大学学报,1998,18(4):276-277.
[4]张中兴,吴开国,杨莉.等.矽尘染毒大鼠体内脂质过氧化与抗氧化的水平[J].工业卫生与职业病,2006,32(2):74-75.
[5]Hagiwara SI,Ishii Y,Kitamura S.Aerosolized administration of N-ace-tylcysteine attenuates lung fibrosis induced by bleomycin in mice[J].Am J Respir Crit Care Med,2000,162:225-231.
丙二酸二醛 篇5
关键词：动脉硬化,脂餐负荷,氧化应激,新西兰大白兔
高脂血症是心脑血管疾病最重要的危险因素之一, 其过氧化作用与动脉硬化的成因密切相关[1]。氧化应激相关因子丙二醛 (MDA) 和超氧化物歧化酶 (SOD) 分别是脂质过氧化作用的终产物及体内重要的抗氧化活性物质。本实验在动脉硬化进展的不同阶段, 给予实验兔高脂餐负荷, 研究负荷前后兔血清中MDA、SOD的变化及其与动脉硬化关系。
1 材料与方法
1.1 实验材料
选用健康新西兰雄性大白兔10只, 体重3.0kg~3.5 kg, 由山西省畜牧研究所提供, 饲养于山西医科大学法医实验中心。在动物房普通清洁环境下单笼饲养, 温度 (18~23) ℃, 湿度 (50±5) %。高脂 (含1%胆固醇, 10%蛋黄, 89%基础饲料) 连续喂养12周, 并于初始及第4周、8周、12周给予脂餐负荷 (含2%胆固醇, 20%蛋黄, 78%基础饲料) 。胆固醇购于北京索莱宝科技有限公司, 蛋黄为新鲜生鸡蛋煮熟后直接喂饲, SOD试剂盒购于上海西唐生物公司, MDA试剂盒购于南京建成生物工程研究所。
1.2 SOD及MDA检测
实验初始及第4周、8周、12周时禁食禁水8 h后给予脂餐负荷, 于负荷前及负荷后2 h、4 h、6 h、8 h经耳缘静脉每次取血约3 mL (真空抗凝管) , 3 000 r/min离心15 min, 分离血清, 血清放置于EP管中冻存 (-70℃冰箱) 。全部实验结束时, 测定SOD活性 (羟胺法) , 测定MDA水平 (硫代巴比妥酸法) 。
1.3 统计学处理
应用SPSS13.0软件, 计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 采用双时间因素重复测量法分析。P<0.05为有统计学意义。
2 结果
研究结束时, 10只动物均出现了腹主动脉粥样硬化。动脉硬化过程中, 脂餐负荷前后血浆MDA、SOD变化情况。详见表1、表2。
nmol/L
同周不同时间点餐后与空腹相比, 1) P<0.05;不同周同时间点与初始相比, 2) P<0.05。
U/mL
同周不同时间点餐后与空腹相比, 1) P<0.05;不同周同时间点与初始相比, 2) P<0.05。
3 讨论
高脂血症是公认的动脉粥样硬化发生发展危险因子, 是致动脉粥样硬化发生、发展的重要机制之一[2]。既往对血脂异常即高血脂的注意力一直集中在空腹阶段。20世纪70年代末Zilversmit[3]提出了“餐后阶段是致动脉粥样硬化的关键时期”这一假说, Karpe等[4]证实餐后高血脂代谢紊乱是动脉硬化发生发展的重要因素。
高脂血症和动脉硬化患者的过氧化脂质水平增高发生、发展关系十分密切。高脂血症可诱发氧化应激, 产生大量活性氧和自由基、脂质过氧化物, 这些产物在动脉硬化发生、发展中具有重要的致病作用[5,6]。MDA是氧自由基氧化细胞膜上磷脂形成的脂质过氧化物的稳定存在形式, 其可直接对血管壁造成损伤, 可以反映体内脂质过氧化的程度。
本实验结果显示, 高脂饲料喂养新西兰大白兔12周后血清MDA含量升高, 尤其在8周末时升高最为明显, 8周后开始降低, 表明随着动脉硬化的进展, 脂质氧化程度增高。SOD是体内氧自由基清除的主要酶, 可以将超氧阴离子歧化为过氧化氢和水, 对抗自由基损伤[7], 即阻止自由基攻击生物膜中多不饱和脂肪酸以防止脂质过氧化物及其中间代谢产物对机体的损害, 对机体的氧化与抗氧化平衡起着重要作用[8]。故检测高脂血症机体SOD水平可间接反映机体抗氧化的能力和动脉硬化的受损程度。林庆斌等[9]证实动脉硬化时可以导致血清中SOD水平降低。本实验结果显示, 在动脉硬化形成过程中, SOD水平呈下降趋势, 至8周时达到最低, 表明在动脉硬化形成过程中机体氧自由基清除能力减弱, 氧化反应增强。8周后SOD活性增高, 而MDA含量8周后开始降低, 提示高脂血症机体自由基增加, 促使SOD代偿性增加。Frisard等[10]证实高脂血症人群体内自由基增加, 代偿性SOD活力高于血脂正常人群。脂餐负荷后2 h MDA含量增加最明显, 此后逐渐降低, 6 h后略有升高。而脂餐负荷前后SOD活性总体呈下降趋势, 2 h最低, 此后逐渐上升。MDA与SOD水平皆于脂餐负荷后2 h末变化最大, 此后逐渐恢复, 提示脂餐负荷后早期对脂质过氧化影响较大。SOD水平于初始、第4周时脂餐负荷后4 h出现最低值, 8周、12周脂餐负荷后2 h出现最低值, 提示随着动脉硬化进展, 脂餐负荷后过氧化反应时间更为提前。
反映机体内脂质过氧化程度的MDA在动脉硬化过程中趋势与SOD相反, 表明SOD与MDA在机体中起相互平衡作用。长期高脂饮食使活性氧和脂质过氧化物增多, 平衡被打破, 造成氧化应激, SOD通过清除自由基, 由此减少MDA的生成来间接抑制脂质过氧化的反应。
本实验由于实验兔之间差异性以及例数的限制, 脂餐负荷后对氧化应激指标及动脉硬化的具体影响还需进一步研究。
参考文献
[1]Suzuki M, Yamamoto D, Suzuki T, et al.Effect of fructose rich highfat diet on glucose sensitivity and atherosclerosis in nonhuman primate[J].Methods Find Exp Clin Pharmacol, 2006, 28 (9) :609-617.
[2]Calderon JC, Fernandez AZ, Mariade, et al.Atherosclerosis, oxidative stress and physical activity[J].Invest Clin, 2008, 49 (3) :397-410.
[3]Zilversmi DB.Atherogenesis:A postprandial phenomenon[J].Circulation, 1979, 60:473-483.
[4]Karpe F, Steiner G, Uffelman K, et al.Postprandial Lipoproteins and progression of coronary atherosderosis[J].Atheroclersis, 1994, 106 (1) :83-97.
[5]Spiteller G.Is atherosclerosis amultifactorial disease or is it induced by a sequence of lipid peroxidation reactions[J].Ann NY Acad Sci, 2005, 1043 (1) :355-366.
[6]Yokoyama M.Oxidant stress and atherosclerosis[J].Curr Opin Pharmacol, 2004, 4 (2) :110-l15.
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[8]张杰, 李兴琴, 王素敏.车前子对高脂血症大鼠血脂水平及抗氧化作用的影响[J].中国新药杂志, 2005, 14 (3) :299-301.
[9]林庆斌, 廖升荣.SOD的研究进展[J].化学世界, 2006, 5:378.
丙二酸二醛 篇6
传统治疗TBI的方法是早期实施外科手术,同时结合药物、亚低温手段。随着神经外科技术的发展和重症医疗救护能力的提高,绝大多数患者都能得到及时救治,特别是早期实施开颅减压能减轻脑水肿对正常脑组织进一步损害,挽救患者的生命。但后期TBI患者神经功能的缺失却一直是无法解决的问题,患者无法生活自理,甚至一些患者呈永久植物状态生存。经多中心临床研究表明,药物及亚低温治疗对重型TBI患者功能恢复并无太多益处[1,2,3,4]。而高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)作为一种新生的治疗手段,经研究证实,不仅可以在早期起到降低颅内压[5,6,7]、减轻脑水肿[8]的“内科减压”治疗作用,同时在细胞及亚细胞水平上阻断脑水肿病理过程的进一步发展,防止二次损伤[9,10,11],对后期神经功能改善起到积极的治疗作用[12,13],但HBO是否增加氧化损伤一直存在争论。
本实验通过比较脑损伤组、HBO治疗组及空白对照组大鼠脑血清谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力、丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量的差别,寻找TBI模型大鼠氧化-抗氧化指标在HBO治疗干预下的变化规律,为临床HBO治疗TBI患者提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与材料
液压撞击仪系统(HPD-1700,31.28 m V/psi,美国Dragenfly有限公司生产),电子天平(YP1200,上海第二天平仪器厂生产),电动牙科打磨机(90型,佛山市安友伴医疗器械有限公司生产),电动离心机(KA100,上海安亭科学仪器厂生产),单人纯氧舱(NG90-ⅢBd单人医用高压氧舱,宁波高压氧舱总厂生产),分光光度计(ultrospec 3000 pro分光光度计,由海军总医院中心实验室提供)。GSH-Px活力、MDA含量测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.2 实验分组及HBO治疗方案
雄性Wistar大鼠80只随机分为8组,每组10只,其中1~4组为脑损伤组,分别于建模后24 h内、第5天、第10天、第15天处死;5~7组为HBO治疗组,5组建模当天开始行HBO治疗至第5天处死,6组建模后第5天开始行HBO治疗至第10天处死,7组建模后第10天开始行HBO治疗至第15天处死;8组为空白对照组。按损伤后阶段划分,2组(脑损伤组)与5组(HBO治疗组)、3组与6组、4组与7组相对应。脑损伤组与HBO治疗组大鼠都进行液压撞击建立模型,治疗组大鼠行HBO治疗,治疗压力2.0 ATA,氧气洗舱时间5 min,加压时间5 min,减压时间5 min,稳压吸氧45 min,舱内温度(23.3±2)℃。1次/d,共5次。
1.3 TBI模型的建立
采用侧位液压撞击(lateral fluid percussion,LFP)法建立TBI大鼠模型[14,15],清洁级雄性Wistar大鼠(中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供,批号:SCXK-(军)2007-004,共80只,体重(276±26)g。大鼠术前均禁食12 h,禁水6 h[16],称重后以10%水合氯醛(按3.5 g/kg麻醉剂量)[17]腹腔内注射麻醉后,俯卧位于固定板上固定,去除大鼠头部正中线处毛发暴露皮肤,安尔碘常规消毒。沿正中线由颅底部向鼻部剪开头皮,钝性分离头皮下筋膜直至右侧冠状缝至人字缝之间颅骨完全暴露。使用电动牙科打磨机于矢状缝右侧4 mm、冠状缝后侧4 mm交点处钻孔,钻孔直径约4 mm,穿透颅骨,硬脑膜完整[18]。以37℃生理盐水注入撞击仪储液装置内,连接大鼠露骨钻孔处,按电压-力量换算公式计算打击力度的电压值[19,20],使用相同重锤下落高度,液压撞击仪撞击1次,经示波器读取电压值,换算为打击力度。撞击结束后安尔碘常规消毒切开皮肤,缝合头皮。
根据文献选择打击力度,通过调节重锤下落距离调整打击力量,调节至示波器显示(1.24±0.023)v[(273.27±5.07)k Pa,中~重度损伤][20]。
1.4 指标测定
GSH-Px活力测定采用比色法,MDA含量测定采用硫代巴比妥酸法。
1.5 统计学方法
采用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析,计量资料统计学描述采用均数±标准差。表示。多组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组总体GSH-Px活力、MDA含量比较
结果显示,GSH-Px活力损伤组显著低于空白对照组(P<0.01),治疗组显著高于损伤组(P<0.01);MDA含量损伤组显著高于空白对照组(P<0.01)。见表1。
注:与空白对照组比较,aP<0.01;与脑损伤组比较,b P<0.01
2.2 各组不同阶段GSH-Px活力、MDA含量比较
GSH-Px活力不同阶段治疗组均高于相应时期损伤组,其中6组(建模后第5天开始行HBO治疗至第10天处死)显著高于3组(建模后第10天处死)(P<0.01),损伤组1至4组呈时间相关性升高;MDA含量损伤组1至4组呈时间相关性下降,其中1、2组均显著高于空白对照组(P<0.01)。见表2。
注:与空白对照组比较,aP<0.01,bP<0.05;与3组比较,c P<0.01
3 讨论
TBI发生后,损伤局部脑血流量减低、氧弥散功能障碍导致损伤局部脑组织缺血缺氧,有氧代谢减少、无氧代谢增加,结果是酸性产物增多、细胞能量消耗增加。能量供给不足,细胞膜转运功能失调,发生细胞内钙离子超载等细胞内水、电解质紊乱。异常的细胞内环境导致兴奋性氨基酸及大量自由基释放。大量自由基释放作用于生物体膜结构,导致细胞膜及亚细胞膜(如线粒体)结构及功能损害,进而引发以脂质过氧化反应(lipid peroxidation,LP)为主要机制的病理生理变化过程[4]。所以,TBI发生后机体发生氧化应激(oxidative stress,OS)损伤是一个必然的病理过程,其实质是氧化-抗氧化不平衡[21],即活性氧过量生成和/或抗氧化防御系统受损,导致超氧阴离子(O2)、过氧化氢(H2O2)等氧自由基及其相关代谢产物过量聚集,而对细胞产生多种毒性作用。在这个过程中,GSH-Px作为清除自由基主要组成部分,反映机体的抗氧化能力;MDA为膜结构发生脂质过氧化反应的代谢产物,间接反映氧化损伤的程度。
HBO作为TBI治疗的一种重要手段已得到一致认可,它可以改善损伤后局部组织缺氧、减轻水肿,而目前HBO治疗是否增加氧化损伤仍存在争议。本实验中,脑损伤组与空白对照组比较,GSH-Px活力显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01),说明TBI模型大鼠损伤后存在明显的氧化-抗氧化失衡,氧化损伤明显。同时,脑损伤组GSH-Px呈时间相关性升高,且均低于空白对照组;MDA含量呈现时间相关性降低,直至第15天仍高于空白对照组,说明TBI模型大鼠氧化应激在1~2 d达到高峰后,机体自身的抗氧化能力缓慢提高,但仍处于氧化-抗氧化失衡状态。
丙二酸二醛 篇7
1 材料
1.1 动物及饲料
SPF级健康雄性Wistar大鼠, 体重 (200±20) g, 由湖北省防疫站提供。。
1.2 药物及试剂
补阳还五汤 (黄芪、归尾、赤芍、地龙、川芎、桃仁、红花, 源自《医材改错》) 中药均购自湖北省中药材公司, 为免煎剂, 使用前用蒸馏水配制, 最终浓度2g/ml。盐酸二甲双胍片:华北制药集团制剂有限公司产品, 批号:0709705, 临用时以蒸溜水为溶剂制成混悬液, 其终浓度为2mg/ml。链脲佐菌素 (STZ) :美国Sigma公司产品, 临用时以0.1mol/L/p H4.4柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液配成STZ溶液;血糖试剂盒:中生北控生物科技有限公司;胆固醇 (TC) 、甘油三酯 (TG) 、丙二醛 (MDA) 试剂盒:南京建成生物工程研究所有限公司。
2 方法
2.1 模型的建立及分组给药
60只Wistar雄性大鼠, 适应性喂养1周后, 随机分为正常对照组 (8只) 和造模组 (52只) 。造模组大鼠禁食12小时后, 尾静脉注射STZ溶液 (30mg/kg) , 用普通饲料喂养2周, 高糖高脂饲料 (蔗糖、猪油、奶粉、鸡蛋、普通饲料按30:20:4:2:63比例配制) 喂养1周, 然后作OGTT试验, 血糖值>16.7mmol/L确定为模型成功。筛选大鼠共46只, 随机分组, 模型组:12只, 按10g/kg体重剂量给大鼠灌服蒸馏水, 每日灌胃1次;二甲双胍组:12只, 灌服二甲双胍混悬液0.75g/kg·d-1;补阳还五汤高剂量组:11只, 灌服补阳还五汤液22.5g/kg·d-1;补阳还五汤低剂量组:11只, 灌胃补阳还五汤5.4g/kg·d-1连续6周;以上4组在治疗期间喂高脂高糖饲料。如上干预用药, 正常对照组给予注射等量枸椽酸缓冲液, 以普遍饲料喂养。
2.2 观察指标及测定方法
大鼠禁食空腹12小时, 戊巴比妥腹腔注射麻醉下行腹主动脉取血, 离心后取血清保存于-70℃冰箱中。采用葡萄糖氧化酶法测定血糖, 酶学方法检测TC、TG;以上均上全自动生化分析仪检测。MDA根据试剂盒说明书检测。
2.3 统计分析
所有数据均以均数±标准差表示, 采用SPSS 11.0 for Windows软件处理, 用One-Way ANOVA (单因素方差分析) 方法, 方差齐性用Fisher LSD检验, 方差不齐用Tamhane's T2检验。
3 结果
见表1~2。
与模型组比较*P<0.05, **P<0.01
与模型组比较*P<0.05, **P<0.01
4 讨论
糖尿病属于中医“消渴”范畴, 多以虚为本, 燥热为标, 且久病入络, 以致络脉瘀滞, 治当补气活血通络。大量临床和实验研究表明活血化瘀药能够改善胰岛功能, 改善胰岛素抵抗, 益气活血法可降低实验性糖尿病大鼠空腹血糖[2,3]。本实验结果表明补阳还五汤可对高脂血症糖尿病大鼠血糖有不同程度降低作用。痰瘀互结是糖尿病高脂血症的病理基础, 痰毒、瘀毒蕴积日久, 阻滞血脉, 深积于血脉对人体各脏腑组织造成广泛损害, 活血化瘀是治疗糖尿病脂代谢紊乱的重要方法。本研究观察表明, 补阳还五汤可以改善糖尿病大鼠血糖、血脂紊乱状态。
糖尿病患者存在氧化和抗氧化之间的平衡失调[4]。有研究表明糖尿病患者血中的抗氧化指标水平下降, 氧化应激产物的水平升高, 证实高血糖可以诱导氧化应激。丙二醛 (MDA) 是脂质代谢终末产物, 是测定脂质过氧化物方便而敏感的指标。本实验研究证实糖尿病高脂血症大鼠MDA水平明显增高, 表明糖尿病大鼠体内氧化应激产物明显增加, 与既往研究相一致。在给予补阳还五汤干预后, 糖尿病大鼠MDA水平明显下降, 表明补阳还五汤的抗氧化作用可能是改善糖脂代谢紊乱的作用机理之一。
参考文献
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丙二酸二醛 篇8
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取本院2015年3月‐2016年3月期间收治的颅脑损伤患者96例纳入研究对象,所有患者经计算机断层扫描(computed tomography,CT)、磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)等检查和诊断均符合颅脑损伤诊断标准[6]。纳入标准:①颅脑损伤12 h内入院的患者;②未合并其他脏器及器官损伤的患者;③格拉斯哥昏迷评分(glasgow coma scale,GCS)≤8分。排除标准:①排除低血压患者;②排除有感觉异常等精神疾病的患者。按随机数字表法分为对照组和观察组,每组患者各48例。对照组患者,男26例,女22例;年龄20~78岁,中位年龄44.1岁;GCS评分3~8分,平均(5.6±1.3)分;颅内出血22例,脑挫裂伤3例,硬膜下血肿15例,硬膜外血肿8例。观察组患者,男28例,女20例;年龄21~75岁,中位年龄43.9岁;GCS评分3~7分,平均(5.5±1.2)分;颅内出血21例,脑挫裂伤2例,硬膜下血肿18例,硬膜外血肿7例。两组患者一般资料(性别、年龄、GCS评分和损伤类型等)比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
对照组患者给予神经外科常规治疗,包括止血、降颅压、脱水、抗感染以及营养治疗等。观察组患者在对照组患者治疗的基础上给予高压氧治疗,采用由杭州新颖氧舱厂生产的WWC-G8S-4医用氧舱治疗,单人加压空气舱(参数调节:压力0.2 MPa)。每次进行2次吸氧治疗,30 min/次,间隔10 min,1次/d,10 d为一个疗程,开始下一疗程前间隔5 d,共治疗3个疗程。
1.3 观察指标
观察两组患者治疗效果、治疗前后红细胞红细胞还原性谷胱甘肽(reduced glutathione tablets,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平、预后情况和经颅多普勒(transcranial doppler,TCD)检查情况。治疗效果:治疗后临床症状消失,生活可以自理为显效;治疗后临床症状明显改善,生活部分自理为有效;治疗后临床症状无改善,生活不能自理为无效[7];对两组患者治疗前后进行GCS和日常生活质量评分(activities of daily living,ADL)[9];TCD检查大脑中动脉血流情况,包括收缩期血流速度(systolic blood flow velocity,Vs)、平均血流速度(mean blood flow velocity,Vm)和脉搏指数(perfusion index,PI)。
1.4 统计学方法
应用SPSS 18.0软件对数据进行统计学分析。大部分计量资料以均数±标准差(±s)表示,计量资料组间比较采用t检验;计数资料以百分比(%)表示,组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者治疗效果情况比较
观察组和对照组患者总有效率分别为95.83%(46/48)和83.33%(40/48),观察组患者总有效率明显高于对照组患者,两组患者总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05),见表1。
2.2 两组患者红细胞GSH和MDA水平比较
治疗前两组患者红细胞GSH、MDA水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者红细胞GSH、MDA水平明显优于对照组患者(P<0.05)。见表2。
2.3 两组患者预后情况比较
治疗前两组患者GCS、ADL评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者GCS、ADL评分均高于对照组患者(P<0.05)。见表3。
2.4 两组患者TCD检查情况比较
治疗前两组患者Vs、Vm、PI情况比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者Vs、Vm和PI水平均优于对照组患者(P<0.05)。见表4。
3 讨论
颅脑损伤是一种神经外科常见疾病,主要由于外力作用于脑部致使脑内组织或骨骼损伤而引起。颅脑损伤病理和生理改变较为复杂,包括能量代谢障碍、微循环障碍以及细胞凋亡等过程,而引起脑组织损伤和坏死,表现为脑组织缺血、缺氧[10]。大脑是人体最重要也是最敏感的器官,脑组织损伤缺血缺氧可引起相应部位功能障碍,导致患者生活质量下降,严重者残疾甚至致死。颅脑损伤的原发性损伤为不可逆过程,临床上主要以减少患者继发症状,尽可能防止脑损伤为主,其关键治疗为控制颅内压,防止颅内压升高,改善脑组织血流灌注情况,避免脑组织出现缺血缺氧等引起坏死[11,12]。在既往治疗过程中均以对症治疗为主,但并不能有效改善颅脑损伤的发生机制,治疗效果较差,因此探究如何治疗颅脑损伤具有重要意义。
随着临床研究的深入,人们发现氧在颅脑损伤患者的发病机制中具有重要作用[13]。在颅脑组织损伤后,氧自由基攻击细胞膜上不饱和脂肪酸,促使大量醛类产物生成,导致生物膜损伤,引起脑组织内环境紊乱、代谢障碍、蛋白合成受阻以及发生功能障碍。有学者研究发现,采用高压氧辅助治疗有助于抑制氧自由基的生成,改善脑组织代谢,提高脑组织含氧量,有助于促进颅脑损伤患者恢复。研究表示,高压氧治疗颅脑损伤有助于提高患者脑组织功能恢复的主要因素可能包括以下几点:①高压氧治疗时可收缩脑血管,减少脑血流量,消除脑水肿,降低颅内压,可避免脑组织继发性损害,促进脑功能恢复;②高压氧治疗增加了椎动脉血流量,从而激活网状系统,增加挠肝血流量,利于促进昏迷患者的苏醒;③高压氧有助于提高血流中的氧浓度,扩大血氧有效弥撒的半径和量,消除脑组织缺氧状态,提高脑功能,降低水肿等继发症状的发生;④高压氧治疗抑制氧自由基的产生,减少对脑组织的损伤,促进脑细胞和神经功能的恢复[14,15]。因此大多数学者认为采用高压氧辅助治疗对颅脑损伤患者具有较好效果。
为进一步探究高压氧治疗对颅脑损伤患者的效果及影响,本研究对96例高压氧治疗患者进行观察。GSH是自由基损害的主要防御酶,GSH水平的高低可明显表明脑组织防御自由基损害的能力;MDA是脂质过氧化物的最终产物,MDA水平越高,则表明过氧化程度越高。因此本文采用上述指标进行观察,结果显示,观察组和对照组患者总有效率分别为95.83%和83.33%,观察组患者总有效率明显高于对照组患者(P<0.05);治疗前两组患者红细胞GSH、MDA水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者红细胞GSH、MDA水平明显优于对照组患者(P<0.05)。以上结果提示,高压氧治疗能有效提高自由基防御酶的分泌,降低过氧化反应,保护脑组织功能。
GCS评分是由英国格拉斯哥研究所于1974年提出的颅脑损伤评分标准,根据患者睁眼、运动和语言3方面对患者进行评分,是临床上公认判断颅脑损伤患者损伤程度的重要标准,临床上也通常用于评价预后情况[16];ADL评分多用于评估临床患者生活质量情况,根据患者肢体功能进行评分,可有效反应患者肢体功能障碍程度,同样多用于对患者预后的评估。本该研究对颅脑损伤患者治疗前后GCS、ADL评分进行评估,结果发现,治疗前两组患者GCS、ADL评分比较差异无统计学意思(P>0.05);治疗后观察组患者GCS、ADL评分均高于对照组患者(P<0.05)。以上结果提示,根据GCS、ADL评分可直接体现出给予高压氧治疗患者预后情况优于未给予高压氧治疗的患者,同时也显示出高压氧治疗患者肢体功能及病情程度优于未给予高压氧治疗的患者。
TCD检查是临床上常见的辅助检查方式,能清晰显示脑组织血流情况。由于颅脑损伤发病机制与脑组织血流息息相关,尤其是大脑中动脉血流情况,因此本文还对两组患者治疗前后TCD检查情况进行比较,结果显示,治疗前两组患者Vs、Vm和PI情况比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患者Vs、Vm和PI水平均优于对照组患者(P<0.05)。提示治疗后观察组患者大脑中动脉血流平均速度及最大速度明显减少,进一步证实高压氧治疗有助于收缩脑动脉血管,而大脑中动脉血流速度减少也证明了高压氧治疗阻断了缺氧-水肿-颅内压升高-进一步缺氧的恶性循环,说明高压氧治疗对颅脑损伤患者治疗确实有显著效果,与目前大部分研究基本相符。
虽然高压氧治疗对颅脑损伤患者有显著效果,且术中安全性较好,但对颅脑损伤患者进行高压氧治疗时仍然需要注意以下方面[17,18]:①掌握高压氧治疗的适应证,治疗前对患者进行全面检查,防止出现患者昏迷而伴其他重要器官损伤的情况;②若患者在治疗前颅内压较高且不能得到有效控制,不易对患者进行高压氧治疗,可能引起患者脑疝的发生,危及患者生命安全;③治疗过程中对患者进行脑组织血流情况检测可进一步掌握患者治疗效果,评估预后情况,且有效避免意外的发生,尤其是对于昏迷的患者更要进行血气检测等;④在治疗时需要保持患者呼吸道通畅,配备吸痰仪器,防止分泌物过多而堵塞患者气道,引起不必要的损害;⑤高压氧治疗需要结合综合性对症治疗,以达到降低患者疼痛、镇静等目的;⑥若患者出现高热则不宜进入高压氧舱治疗;⑦严格监视患者生命体征情况,定时进行肺呼吸音的听诊。