山楂中黄酮提取

山楂中黄酮提取（精选7篇）

山楂中黄酮提取 篇1

0 引言

黄酮类化合物在自然界中普遍存在, 呈现弱酸性。在双子叶植物的叶、根、茎以及果实中大量存在。而山楂叶所含的活性组分大多为黄酮苷, 它们的极性不同, 可根据相似相溶原理, 用水、丙醇、正丁醇等提取。黄酮类化合物能使心肌的耗氧量减少, 在预防动脉硬化方面有良好的作用;同时黄酮化合物还能延缓人体衰老过程, 增强人体免疫力, 对人体的内分泌系统具有良好的调节作用;而且黄酮还具有防癌的作用, 对一些冠状动脉心脏疾病相关的症状有一定的预防作用。因此这些化合物能够广泛应用在医药、保健食品添加剂和杀虫剂等领域, 于是在国内外越来越成为人们研究的热点。

PEG是聚乙二醇英文名polyethylene glycol的简称, 无毒、无刺激性, 具有良好的水溶性, 并与许多有机物组分有良好的相溶性。

1 实验

1.1 仪器、试剂与材料

紫外分光光度计 (龙尼柯有限公司) 、离心机 (北京离心机厂) 、恒温水浴锅 (上海仪器有限公司) 、干燥箱 (江苏曙峰企业) 、分析天平 (莱阳化工有限公司) 。

芦丁对照品 (批号100080-200707) 购自中国食品药品检定研究院, 山楂购自国药控股福建有限公司中药部。

所有试剂均为分析纯。

1.2 山楂粗提液的制备

准确称取山楂碎末5g, 放到烧杯中, 向烧杯中加入60%乙醇120mL, 混合5min, 然后将溶液转移至250mL容量瓶中, 补加蒸馏水至刻度, 摇匀, 充分混合, 静置4h后, 减压过滤得到暗红色的山楂粗提液。

1.3 芦丁标准溶液的配制

用分析天平称取5 mg芦丁, 加60% 乙醇溶解, 定容到100mL, 得到50μg/mL的芦丁标准品溶液。

取6只容量瓶, 标号1、2、3、4、5、6号, 用移液管移取0mL芦丁标准品加入到1 号容量瓶中, 然后加入5% NaNO2溶液0.7mL混合均匀, 5min后再加入10% Al (NO3) 3溶液0.7mL, 混合均匀, 过5 min之后, 向混合液中加入5% NaOH溶液0.7mL, 然后用30% 乙醇定容, 混合均匀。 分别向2 号加入1mL、3号加入2mL、4号加入3mL、5号加入4mL、6号加入5mL芦丁标准品, 其他步骤与前面一致, 静置10 min左右在512nm处测定芦丁标准品的吸光值, 以1号容量瓶中的溶液作为空白对照, 分别测量各组的吸光度, 把芦丁标准品浓度作为横坐标, 各组得到的吸光度A作为纵坐标, 做出芦丁标准曲线为A=18.611C+0.007 7, r=0.999 1, 芦丁浓度在1~6μg/mL范围内, 线性关系良好。

1.4 双水相体系的配制

将一定量的聚乙二醇、硫酸铵、3 mL粗提液, 加入一部分蒸馏水, 用0.1mol/L的NaOH和0.1mol/L的HCl调节pH, 使双水相系统的总质量为10g。摇匀使两相充分混合, 在离心机中离心, 使之快速分相, 5min后取出。用胶头滴管分别吸取上、下相溶液进行分析, 分别测定上、下相体积, 双水相中山楂总黄酮的含量。

1.5 山楂中总黄酮含量的测定

取6个试管, 标号1、2、3、4、5、6号, 向2号管中加入对照液1.0mL、3号管中加入2.0mL、4号管中加入3.0mL、5号管中加入4.0mL、6号管中加入5.0 mL, 分别加入50% 乙醇使成5mL;精密加入5% NaNO2溶液0.3mL, 摇匀, 放置6min;加入10% Al (NO3) 3溶液0.3mL, 摇匀, 放置6min;加入1mol/L NaOH溶液4mL;用50%乙醇加到10mL处, 混合均匀。

向1 号管中加入5% NaNO2溶液0.3 mL, 摇匀, 放置6min;加入10% Al (NO3) 3溶液0.3mL, 摇匀, 放置6min;加入1mol/L NaOH溶液4mL;用50%乙醇定容到10mL处, 混合均匀, 作为对照溶液, 在512nm波长处测定待测液的吸光度, 代入标准方程, 分析计算样品中总黄酮的含量。

2 结果与分析

2.1 PEG/ (NH4) 2SO4双水相体系相图

将用浊点法计算出来的PEG800、1000、2000 的质量浓度和 (NH4) 2SO4质量浓度在一个坐标系中作出相图, 得到PEG的平均分子量不同, 相图中双接线位置与形状也不同, PEG分子量增大, 曲线越接近坐标轴。

2.2 PEG平均分子量对双水相体系的影响

以相图为依据, 选择质量浓度20%的PEG800和质量浓度20%的 (NH4) 2SO4混合, 分析计算山楂中黄酮的分配系数K和萃取率, 然后继续改变PEG的分子量, 使硫酸铵的质量浓度不变, 分别测定在PEG1000和PEG2000的情况下黄酮的萃取结果, 实验结果如表1所示。从表1可以看出, 黄酮在双水相中的分配系数和萃取率和PEG的变化成反比, 这可能是因为当PEG分子量变大时, 上、下两相界面间的张力变大, 从而影响了传质效率, 导致分配系数和萃取率减小。PEG平均分子量越低, 水溶性越好, K值和萃取率在PEG800 时达到最大。根据相似相溶原理, 山楂中可能含亲水性的黄酮类化合物较多, 所意选择PEG800较好。

考虑成相的条件, 由于靠近临界点位置的系统不容易形成两相系统, 而距离临界点位置较远的系统, PEG的质量分数比较大, 黏度比较大, 两相分离的时间比较长, 因此选择PEG和 (NH4) 2SO4的质量分数要适中, 既要使双水相系统的形成时间尽可能缩短, 同时又不会有晶体析出。

2.3 PEG800的质量分数对双水相体系的影响

选择不同质量分数的PEG800 和质量分数为20% 的 (NH4) 2SO4分别组成双水相体系, 分析山楂中总黄酮的分配系数和萃取率 (表2) 。

从表2可以看出, 随着PEG800质量分数增大, 相比R、分配系数K和萃取率Y也在升高, 在PEG800 的质量分数为25%时, 达到最大, 所以PEG800的合适质量分数为25%。

2.4 (NH4) 2SO4的质量分数对双水相体系的影响

选择不同质量浓度的 (NH4) 2SO4和质量分数为25% 的PEG800组成双水相体系, 分别分析计算山楂中黄酮的分配系数K和萃取率Y (表3) 。

从表3中可以看出, (NH4) 2SO4质量浓度越大, 相比R值越小, 制作相图可以得到萃取率Y和分配系数随 (NH4) 2SO4质量浓度的变化不一致, 分配系数先增大, 达到一个极值点然后下降, 而黄酮的萃取率却一直在减小。因而选择质量浓度为12%的 (NH4) 2SO4。

2.5 影响山楂中黄酮萃取的因素

2.5.1 pH的影响

将质量分数为25% 的PEG800 和质量分数为12% 的 (NH4) 2SO4作为双水相体系, 用盐酸和氢氧化钠调节pH值, 得到结论在pH=9时, 分配系数和萃取率最大, 为最佳pH。

2.5.2 样品加入量的影响

在25% PEG800和12% (NH4) 2SO4、pH=9时, 加入不同体积的粗提液进行实验, 结果得出, 当粗体液的体积超过3mL时分配系数K和萃取率Y都下降, 萃取率在3 mL时达到最高, 因此确定粗提液体积最佳值为3mL。

3 结语

经过实验, 萃取分离山楂中总黄酮的最佳双水相体系条件是25% PEG800和12% (NH4) 2SO4, 样品加入量3mL, pH=9。在此条件下, 黄酮的萃取率能达到95%以上。因此, 实验中采用PEG/ (NH4) 2SO4双水相体系萃取分离山楂中总黄酮的方法是可行的, 可以作为黄酮类化合物萃取分离的一种有效方法。

柑橘皮中黄酮提取工艺研究 篇2

随着我国人民生活水平的提升, 罐头和果汁等产品受到越来越多人们的欢迎, 果汁和罐头产业的发展带来了大量柑橘皮等副产物, 这些柑橘皮为黄酮类物质提取产业的发展提供了丰富的原料基础。然而, 在我国很多罐头或果汁生产厂家产生的橘皮未做任何处理就直接作为垃圾处理掉, 这样不仅会破坏当地的环境, 而且浪费了大量的黄酮资源。因此, 研究柑橘皮黄酮成分的提取将为有效利用黄酮资源、保护环境、提高柑橘产业的效益提供重要的技术支持。

有机溶剂浸泡法提取柑橘皮黄酮工艺简介

在实际操作中, 有机溶剂浸泡法是最常用的方法, 它是利用橘皮中化学成分的溶解性, 选用对黄酮成分溶解性强而对其他成分溶解性弱的溶剂, 研究利用科学的方法和合适的环境条件将有效化学成分最大程度地从柑橘皮中溶解出来。有机溶剂浸泡法提取柑橘皮黄酮的基本原理是利用化学成分渗透、扩散的特性, 溶剂扩散到柑橘皮细胞内部, 溶解内部的黄酮成分, 细胞的内外因浓度差而产生渗透压, 黄酮溶剂在渗透压的作用下继续进入细胞溶解内部的黄酮物质, 直到细胞内外浓度达到一致, 溶剂停止扩散即完成一次提取。

对黄酮类物质来说, 用有机溶剂浸泡法提取一般有三种:有机溶剂提取法、水浸法和碱提法。黄酮类物质的易溶有机溶剂有甲醇、乙醇、丙酮等, 但是甲醇和丙酮都具有极强的挥发性, 且对人体有毒, 因此一般不选用。乙醇具有渗透性强、渗透效率高、成本低、可与水以任意比例互溶等优点, 且黄酮类物质在水中也具有一定的溶解度, 因此在实际应用中常用乙醇-水的混合物作为浸提剂。

提取柑橘皮黄酮实验准备

实验原料处理

原料处理:选取新鲜的柑橘并剥皮, 将剥下来的橘皮放在烘干箱中低温 (50度以下) 烘干, 烘干后将干燥柑橘皮碾碎备用。

标准曲线建立

取定量的黄酮 (即芦丁) 标准样品100 mg, 将其放入50 m L的容量瓶中, 并将容量瓶中注入少量乙醇, 略微加热将黄酮全部溶解, 然后冷却至常温后加乙醇, 定容并混合均匀。上述操作完成后取其中10 m L溶液放在100m L的容量瓶中, 加入蒸馏水定容, 这样就得到了0.2 mg/m L的标准黄酮乙醇-水溶液。取此乙醇-水溶液0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0 m L, 分别注入25 m L的容量瓶中。首先加入1 m L浓度为5%的亚硝酸盐溶液, 混合均匀后在室温下放置6min后, 分别加入1m L浓度为10%的硝酸铝, 摇匀后再次静置6min, 然后各瓶中分别加入10m L浓度为40 g/L的氢氧化钠后, 定容, 静置。15分钟后, 在波长为510纳米处分别测量每个瓶中溶液的吸光度, 测量中将第一瓶浓度为零的溶液作为空白, 使用1cm的比色杯进行比对。测量完成后, 以黄酮浓度为横坐标, 以各瓶溶液吸光度为中坐标简历平面直角坐标系, 建立标准曲线如图1所示, 对测量数据进行回归分析, 得回归方程为Y=0.3527x+0.082, 相关系数为R2=0.9991, 具有很好的相关性。

影响黄酮提取因素分析

下面我们主要通过对浸泡法中影响黄酮提取的几个因素进行实验分析。

乙醇浓度:取7份烘干碾碎的柑橘皮末, 每份准确称取2g;准备7份体积分数分别为20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%的乙醇溶液, 每份40m L;将准备好的7份相同的柑橘皮粉末分别放入不同浓度的乙醇溶液中, 在80℃的温度下浸提两小时。两小时后对溶液进行过滤后离心处理、定容。处理完后在每份溶液中取10m L样液, 并根据建立标准曲线的方法测量溶液的吸光度, 从而计算出黄酮的得率。为保证实验的可靠性, 此实验重复三次, 取平均值作为最终结果, 实验结果如图2所示。

在上图可以发现, 当乙醇浓度低于60%时, 随着乙醇浓度的增加, 柑橘皮中黄酮的提取率逐渐增加;但是当当乙醇浓度高于60%后, 随着乙醇浓度的增大, 柑橘皮中黄酮的提取量却逐渐减小, 分析可知, 当乙醇浓度为60%左右时, 黄酮的提取效果最好。

2.料液比:取6份烘干碾碎的柑橘皮末, 每份准确称取1g;分别准备6份浓度为60%、体积为20 m L, 30m L, 40 m L, 50 m L, 60 m L, 70 m L的乙醇溶液, 将准备好的7份相同的柑橘皮粉末分别放入不同体积的乙醇溶液中, 形成料液比分别为1:20, 1:30, 1:40, 1:50, 1:60, 1:70的6种实验条件。同样, 此实验重复三次, 取平均值作为最终结果, 实验结果如图3所示。

由图3可见, 随着料液比的增加, 柑橘皮中黄酮的提取量越来越大, 但是当料液比超过1:40后, 随料液比的升高黄酮提取率变化较为缓慢, 考虑到生产的经济性, 料液比去1:40较为合适。

3.提取温度:准备5份相同的柑橘皮粉末加入浓度为60%的乙醇溶液中, 分别置于40, 50, 60, 70, 80℃的条件下两小时, 其它步骤同上, 实验结果如图4所示。

随着温度的升高, 提取剂的扩散速度加快, 黄酮的提取率逐渐升高。但是由图4可知, 当温度高于80℃时, 黄酮的提取率迅速下降, 这是由于黄酮是不耐高温的物质, 超过80℃的高温时黄酮容易氧化分解, 因而80℃为黄酮的最佳提取温度。

4浸提时间:配置5份料液比、乙醇浓度相同的实验材料, 在80℃下分别放置3, 8, 13, 18, 23, 28, 33h, 其它步骤同上, 实验结果如图5所示。可以看出, 提取时间在20小时之前, 随着时间的延长黄酮的提取率增加较为明显, 超过20小时后, 随温度的增加黄酮的提取量增长缓慢, 考虑生产效率, 提取时间20h为最佳。

正交试验

正交试验就是在单因素分别试验的基础上, 对影响黄酮提取率的乙醇浓度、料液比、温度和反应时间四个因素综合分析, 以得到最佳的工艺参数。正交试验水平设计如表1所示。

正交试验结果如表2所示。

根据试验数据分析可知, 对实验结果的影响因素的主次顺序为乙醇浓度>料液比>温度>时间。实验结果表明, 最佳实验条件为乙醇浓度70%, 料液比1∶50, 金体温度为70℃, 浸提时间为25h, 此时黄酮提取率为1.827%。

结束语

本文研究了柑橘皮黄酮浸泡法提取试验的影响因素, 在单因素试验的的基础上进一步完成了正交试验和数据分析, 并得出了柑橘皮黄酮的最佳提取条件。

杜仲叶中黄酮不同提取方法的比较 篇3

1 仪器与试药

高效液相色谱仪:721紫外分光光度计SC202-00型电热恒温干燥器 (上海医疗器械五厂) ;超级恒温水浴锅 (上海医疗器械五厂) KQ5200DB型数控超声波清洗器 (超声工作频率40k Hz, 江苏省昆山市超声仪器有限公司) 。

芦丁对照品 (中国药品生物制品检定所提供) 。亚硝酸钠、氢氧化钠、硝酸铝均为分析纯。

2 提取方法

2.1 酶解法

取30克粉碎的杜仲叶, 加入百分之五的果胶酶溶液四毫升处理后, 加入pH4.5的缓冲溶液, 80℃回流提取3次, 每次lh, 合并提取液, 浓缩至100ml。

2.2 水提取

取30克粉碎的杜仲叶, 加八倍水, 100℃回流提取3次, , 每次l h, 合并提取液, 浓缩至100ml。

2.3 超声提取

取30克粉碎的杜仲叶, 分别加入八倍80%乙醇超声提取2小时, 抽滤, 滤渣再分别加入80%乙醇, 超声波提取1h, 抽滤, 合并两次滤液, 减压回收乙醇至滤液为100ml。

2.4 乙醇回流提取

取30克粉碎的杜仲叶, 加八80%乙醇, 100℃回流提取3次, , 每次l h, 合并提取液, 浓缩至100ml。

2.5 索氏提取

取30克粉碎的杜仲叶, 加六倍80%乙醇, 索氏提取提取2.5 h, 合并提取液, 浓缩至100ml。

3 含量测定

3.1 供试品溶液的制备:

精密称取提取膏2克, 加甲醇100ml, 密塞, 称定质量, 超声处理 (功率220 W, 40Hz) 30 min, 放冷, 再称定质量, 用甲醇补足缺失的质量, 摇匀, 滤过, 取续滤液, 即得。

3.2 对照品溶液的制备:

精密称取干燥至恒重的芦丁对照品5mg, 于50 mL量瓶中, 加甲醇适量, 超声使溶解, 放冷, 用甲醇定容至刻度。

3.3 波长的选择

取样品液适量, 置于25m L量瓶中, 加适量甲醇, 摇匀, 先加百分之五亚硝酸钠溶液一毫升, 摇匀, 放置六分钟;加百分之十硝酸铝一毫升, 摇匀, 放置六分钟;再加百分之四氢氧化钠十毫升, 用甲醇稀释至刻度, 放置15 min, 以试剂为空白参比液在420~700 nm波长范围测定络合物的吸光度, 络合物于500 nm波长处有最大吸收, 故测定时选用此波长。

3.4 标准曲线的制备:

精密吸取对照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 m L, 分别置于25m L量瓶中, 加适量甲醇, 摇匀, 先加百分之五亚硝酸钠溶液一毫升, 摇匀, 放置六分钟;加百分之十硝酸铝一毫升, 摇匀, 放置六分钟;再加百分之四氢氧化钠十毫升, 用甲醇稀释至刻度, 放置15 min, 用第一管作空白对照, 在500 nm处测吸光度, 以吸光度 (A) 为横坐标、浓度 (C) 为纵坐标, 绘制标准曲线。其回归方程为:C=71.53A+0.7019, r=0.99997。线性范围为0.1~0.7 mg。

3.5 精密度试验:精密吸取上述对照品溶液一毫升, 重复测定6次, 结果总黄酮的RSD为0.67%。

3.6 稳定性试验:精密吸取供试品溶液一毫升, 每2h测定一次吸光度, 共测定6次, 结果总黄酮的RSD为0.89%, 表明供试品溶液在10 h内稳定。

3.7 重现性试验:取同一样品6份, 制备供试品溶液, 按测定方法测定总黄酮质量分数, RSD为1.21%。

3.8 回收率测定:精密吸取已知含量的供试品溶液5份, 分别置25 m L容量瓶中, 加入不同量的芦丁对照品, 按样品测定项下方法测定, 依回归方程计算质量分数, 结果平均回收率为98.99%, RSD=1.9%。

3.9 含量测定采用上述实验方法测定不同提取方法的提取物中黄酮含量, 结果见表1。

4 讨论

简单的介绍了不同提取方法对黄酮的影响。从表1可以看出酶解法提取含量最高。黄酮类化合物易溶于乙醇、甲醇、醋酸乙酯等有机溶剂中, 所以乙醇提取效率明显高于水提取。实验表明索氏提取效率高于单纯回流, 主要因为提取索氏提取为连续回流提取。超声提取可以破坏细胞壁, 使细胞内的有效成分大量溶于有机溶剂, 所以提取效率也较高。试验结果表明酶解法优于水提、超声提取、索氏提取、乙醇回流提取, 酶解法未使用有机溶剂对人体较为安全, 因此适于大规模生产。

参考文献

[1]谭建国.骨质增生治验[J].湖北中医杂志, 1997, 5 (18) :38.

[2]肖诚.治疗痹症用药经验拾零[J].湖北中医杂志, 1997, 6 (19) :40.

[3]孙凌峰.杜仲树叶资源的开发利用[J].林产化工通讯, 1998, 32 (4) :33~55.

[4]李稳宏, 李多伟, 张阿鹏等.杜仲叶中有效成分提取工艺的研究[J].西北大学学报, 1996, 26 (6) :511~514.

[5]钱骅, 赵伯涛, 张卫明.杜仲叶有效成分提取工艺的研究[J].中国野生植物资源, 1999, 18 (1) :32~33.

[6]汪洪武, 汤敏燕, 孙凌峰等.杜仲叶中绿原酸类物质的提取研究[J].江西师范大学学报, 1997, 21 (4) :339~341.

[7]马希汉, 张康健, 王蓝等.富含生理活性物质的杜仲叶提取物的研究[J].西北林学院学报, 1997, 12 (3) :86~89.

小麦麸中黄酮的乙醇提取工艺研究 篇4

小麦是世界上种植最早、种植面积最广泛的粮食作物之一, 麦麸, 即麦皮, 片状或粉状, 是小麦干磨加工面粉过程中的副产品, 约占小麦的14.5%[1], 富含膳食纤维和B族维生素等多种人体必需的营养元素, 现代研究表明麦麸中有效成分可改善大便秘结, 同时促进脂肪及氮的排泄;麦麸高纤维成分还可以降低粪便中类固醇的排泄, 使血清胆固醇下降, 动脉粥样硬化的形成减慢;可有助于预防结肠、直肠癌等多种肠道疾病[2,3]。

黄酮类物质 (简称类黄酮) 是存在于自然界的一大类化合物, 属植物次级代谢产物, 至今已分离鉴定出4000多种, 是自然界药用植物中主要活性成分之一[4]。天然黄酮类物质多以苷类形式存在, 并且由于糖的种类、数量、联接位置以及联接方式的不同可以组成各种各样黄酮苷类, 组成黄酮苷类的糖类包括单糖、双糖和酰化糖[5]。黄酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等极性强的溶剂中;但难溶于或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。天然植物中提取出的黄酮类物质, 经研究证实具有消炎、消肿、降压;降血脂以及清除自由基的功能;抗氧化、抗肿瘤, 增强免疫力及延缓衰老等多种生理药理功能[6,7,8,9]。在食品工业上可用作天然着色剂、抗氧化剂和功能性保健食品的原料, 在医药及化妆品工业有广泛的应用。

目前黄酮提取的方法主要有溶剂提取法、超临界流体萃取法、酶提取法、超声波提取法、高速逆流色谱技术提取法、微波提取法[10,11,12]。六者相比较, 溶剂提取法具有成本低, 适用性强, 简便快捷的优势, 本文选用乙醇作为提取溶剂对麦麸中的黄酮进行提取。通过正交试验设计考察了乙醇体积分数, 提取时间, 料液比这3个提取条件对提取率的影响, 确定了此条件下的最佳提取工艺。

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 原料

东北小麦麦麸干燥样品

2.1.2 试剂

芦丁标准品生化试剂, 供含量测定使用, 标号为0080-9705, 中国药品生物制品鉴定所;无水乙醇 (分析纯) ;Al (NO3) 3﹑Na NO2及Na OH均为分析纯。

2.1.3 仪器

2.2 实验方法

称取麦麸10g左右3份, 用粉碎机粉碎并过60目筛, 精确量取1.50g麦麸粉末, 加入不同体积分数的乙醇溶液在50℃条件下浸提, 均匀搅拌, 过滤, 将滤液定容至250ml, 测定吸光度值。结合芦丁对照品-浓度曲线求出浸提液的黄酮浓度。

2.2.1 标准溶液的配制和建立标准曲线

取1.0m L芦丁标准液于10 m L容量瓶中, 添加60%乙醇至4 m L, 加入0.4 m L 5%Na N02溶液, 摇匀静置6 min, 加入0.4 m L 10%A1 (NO3) 3溶液, 摇匀静置6 min, 再加入4 m L4%Na OH, 同时用60%乙醇定容至刻度, 摇匀静置15 min, 参照文献的方法[12], 确定最大吸收波长。在波长485~530nm区间范围内, 每隔5nm测定一次吸光度, 并以波长 (nm) 为横坐标, 吸光度 (A) 为纵坐标作图, 从图中即可确定最大吸收波长。

吸取0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8、2.1 m L芦丁标准液于10 m L容量瓶中, 按照确定最大波长的方法, 添加各种药品, 静置15 min后测定吸光度, 以质量浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标, 绘制标准曲线, 并求出回归方程。

2.2.2 黄酮提取率计算方法

黄酮提取率按下式计算:

黄酮提取率 (%) =Y×V/1000/M

式中:Y—黄酮浓度

V—250ml

M—麸皮质量

2.3 单因素试验

2.3.1 乙醇体积分数对黄酮提取率的影响

准确称取1.50g研磨好的麦麸皮粉末, 分别加入100ml体积分数分别为50%, 60%, 70%, 80%, 90%的乙醇, 50℃下浸提3h, 间隔一定时间搅拌, 经过滤后取滤液测定吸光度值。

2.3.2 浸提时间对黄酮提取率的影响

准确称取1.50g研磨好的麦麸粉末, 加入100ml体积分数为65%的乙醇溶液, 50℃下分别提取2h, 3h, 4h, 5h, 6h, 间隔一定时间搅拌, 经过过滤后取滤液测定吸光度值。

2.3.3 料液比对黄酮提取率的影响

准确称取1.50g研磨好的麦麸粉末, 分别按照1:10, 1:20, 1:30, 1:40, 1:50的料液比加入体积分数为65%的乙醇溶液, 50℃下提取3h, 间隔一定时间搅拌, 经过过滤后测定吸光度值。

2.4 正交试验

为系统考察乙醇提取法的工艺参数, 根据已有的资料及实际情况, 选用乙醇体积分数, 提取时间和料液比作为考察因素, 选用L9 (34) 正交表设计, 固定实验温度条件为50℃, 各因素及水平见表2-1。

3 结果与分析

3.1 标准曲线的绘制

结果确定在波长510nm处吸光值最大, 在此条件下测不同浓度芦丁标准液的吸光度, 绘制标准曲线, 结果如图3-1。经分析得回归方程:A=0.0104 C+0.0024, R2=0.9996。

3.2 单因素试验

3.2.1 乙醇体积分数对黄酮提取率的影响

准确称取1.50g研磨好的麦麸粉末, 分别加入100ml体积分数分别为50%, 60%, 70%, 80%, 90%的乙醇, 50℃条件下浸提3h, 间隔一定时间搅拌, 经过滤后取滤液测定吸光度值。得到乙醇体积分数与吸光值的曲线, 如图2。

由图2可知, 随着乙醇体积分数的增加, 黄酮的浸提浓度越高, 黄酮浸提效果与乙醇体积分数成正比例。乙醇浓度的提高增加了提取剂对物料的渗透能力, 也提高了黄酮类化合物的溶解度, 但同时也会增加杂质的溶出。试验中发现, 当乙醇浓度超过80%时, 提取液颜色明显加深, 说明各种杂质的溶出也增多, 这与王军[12]等的报道相一致。结合单因素试验的结果和经济因素, 选择乙醇体积分数60%, 70%和80%作为正交试验中乙醇体积分数这一水平的3个因素。

3.2.2 浸提时间对黄酮提取率的影响

准确称取1.50g研磨好的麦麸粉末, 加入100ml体积分数为65%的乙醇溶液, 50℃条件下分别提取2h, 3h, 4h, 5h, 6h, 搅拌, 经过过滤后取滤液测定吸光度值。得到提取时间与吸光值的曲线, 如图3。

由图3可知, 随着提取时间的增加, 黄酮提取率也随着增加, 但提取率上升缓慢, 变化范围不大, 综合考虑选取2h, 4h, 6h作为正交试验提取时间这一因素的3个水平。

3.2.3 料液比对黄酮提取率的影响

准确称取1.50g研磨好的麦麸粉末, 分别按1:10, 1:20, 1:30, 1:40和1:50的料液比加入体积分数为65%的乙醇溶液, 50℃条件下提取3h, 搅拌, 经过过滤后测定吸光度值, 经计算得到料液比与黄酮提取率的曲线, 如图4。

由图4可知, 黄酮的提取率与液料比值的增长成正比, 溶剂量的增加提高了物料体系与提取剂体系间黄酮类化合物的浓度差, 并减少了物料中有效成分的残留量, 从而提高提取率。综合考虑因素, 选取料液比1:10, 1:30, 1:50作为正交试验料液比的3个水平。

3.3 正交试验

影响麦麸中黄酮提取率的主要因素为乙醇体积分数, 浸提时间和料液比。根据表2-2列出的试验条件组合搭配进行试验, 试验结果及统计学结果见表3-1。

从表2中可以得出结论:由极差R的结果可知:各试验因素及因素水平对麦麸黄酮提取率大小的影响不完全相同。在正交设计表的试验条件下, 各因素影响的次序依次为:料液比>浸提时间>乙醇溶液浓度。料液比对黄酮提取率有显著影响, 乙醇体积分数影响较小。在所选因素和所选水平范围内3种因素的最佳组合应为:用80%的乙醇溶液, 料液比1:50, 在50℃条件下浸提2h, 在该条件下总黄酮提取率最高, 为1.29%。

4 结论

本试验采用乙醇提取方法提取麦麸中黄酮, 考察了乙醇浓度、料液比、提取时间3个因素, 对麦麸黄酮提取率的影响。经试验结果表明, 各因素影响的次序依次为:料液比>浸提时间>乙醇溶液浓度。最佳提取工艺为:乙醇溶液浓度80%, 料液比为1:50, 在50℃条件下浸提2h, 黄酮提取率最高为1.29%。

摘要：本文采用有机溶剂乙醇提取法, 从麸皮中提取黄酮。通过单因素以及正交试验, 研究乙醇体积分数, 料液比, 提取时间对黄酮提取率的影响, 并对提取条件进行了优化, 结果表明:乙醇浓度80%, 料液比1:50, 温度在50℃条件下浸提2h, 提取效果最好, 黄酮提取率为1.29%。

关键词：麦麸,黄酮,提取

参考文献

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[6]程秋月, 郭菁, 张成义.黄酮类化合物药理作用的研究[J].北华大学学报, 2011, 12 (2) :180~183.

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[8]张利燕, 常虹, 周家华, 等.植物花中黄酮类化合物的提取技术及其生物活性研究现状[J].食品工业, 2012, 32 (5) :96~99.

[9]王倩, 常丽新, 唐红梅.黄酮类化合物的提取分离及其生物活性研究进展[J].河北理工大学学报, 2011, 33 (1) :110~115.

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[11]方芳, 黄卫东.食品中黄酮醇的组成、性质及其检测方法[J].核农学报, 2011, 25 (2) :313~316.

山楂中黄酮提取 篇5

柑桔是我国著名果品之一, 属芸香科中的植物桔, 广泛———种植在广东、湖南、浙江、福建等地, 随着柑桔加工业的发展, 产生大量的柑皮、橘渣等加工副产物, 为柑桔类黄酮物质的提取提供了丰富的原料, 可以实现工业化生产, 得到大量的产品。在我国, 大部分柑皮未做任何处理就作为废物弃入环境中, 既污染了环境又浪费了资源, 如果将这一资源加以综合利用则能大大提高果品商品性, 提升产品科技含量, 增加柑桔产业的经济效益, 同时还可以减少环境中废弃物的污染, 对保护生态环境也具有积极的意义。

近年来对柑桔的研究发现柑桔皮中除了水分、纤维素、木质素外, 还含有丰富的香精油、色素、果胶、橙皮苷等, 而类黄酮作为一种新的营养保健素正引起研究人员的关注。它是一大类具有“黄烷核”基本骨架 (结构) 的低分子量多酚类物质的总称, 是植物次级代谢的产物, 是一组存在于植物的叶、花、果中的天然色素, 有自然界中广泛存在, 因多呈黄色面被称为类黄酮。

柑桔属中的类黄酮含量丰富, 易于分离、提取, 具有独特的芳香性和显著的药理学作用。它可以作为天然着色剂、抗氧化剂和功能性食品的原料。现在它们已经成为抗氧化剂和中药效能研究的一个热点, 也是评价食品营养价值, 开发新的食品资源的一个重要指标[1]。现代医学证明黄酮类化合物对人体具有多种医疗保健作用, 具有降血糖、降血压、抗菌和抗病毒等作用。因此深度开发柑桔中极其丰富的类黄酮资源, 研究其生理及药理学作用, 对于柑桔的深加工及其在医药、食品领域的应用, 具有重大的经济效益和社会效益。

本试验探索、分析了柑桔中黄酮的最佳提取条件, 希望能为分光光度法测定柑桔中黄酮含量的前处理提供依据。

2 实验

2.1 实验材料

2.1.1 原料:绿色柑桔、红色柑桔、柑、焦柑、蜜桔

2.1.2 仪器设备:

Lambda-20型紫外可见分光光度计 (美国Pekin-Elmer公司) 、Sartorious BS 223S型电子天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公司) 、HHS-4型电热恒温水浴锅。

2.2 桔中黄酮的提取方法及含量测定

2.2.1 主要试剂

a.黄酮标准储备液 () ;

b.5%溶液;

c.5%溶液;

d.4%溶液。

2.2.2 柑桔中黄酮提取最佳条件的选择

a.提取温度对黄酮提取效果的影响

准确称取10.0柑桔样品于三角瓶中, 分别加入50m L90%的乙醇, 在50、60、70、80、90℃下在水浴锅中提取30min, 过滤, 定容至10m L容量瓶中, 分别测其吸光度A值。由表1可知, 在提取时间和乙醇浓度相同的情况下, 用不同的温度进行提取, 温度为70℃时测得的吸光度值最大, 因此得到最佳的提取温度为70℃。

b.提取时间对黄酮提取效果的影响

准确称取10.0柑桔样品于三角瓶中, 分别加入50m L90%的乙醇, 60℃下在水浴锅中分别提取5、10、20、30、40min, 过滤, 定容至10m L容量瓶中, 分别测其吸光度A值。由表2可知, 在提取温度和乙醇浓度相同的情况下, 提取时间为20min时测得的吸光度值最大, 因此得到最佳的提取时间为20min。

c.乙醇浓度对黄酮提取效果的影响

准确称取10.0柑桔样品于三角瓶中, 分别加入60%、70%、80%、90%的乙醇50m L, 在60℃下在水浴锅中提取30min, 过滤, 定容至10ml容量瓶中, 分别测其吸光度A值。由表3可知, 在提取温度和提取时间相同的情况下, 用不同的乙醇浓度进行提取, 乙醇浓度为80%时测得的吸光度值最大, 因此得到最佳的乙醇浓度为80%。

从以上试验可以得到, 柑桔中黄酮提取的最佳条件为:温度70℃、乙醇浓度80%、提取时间20min。

2.2.3 柑桔中黄酮含量的测定

a.柑桔样品黄酮的提取

准确称取柑桔样品各10.0g于三角瓶中, 加50m L80%的乙醇在70℃提取20min, 转移至100m L的容量瓶, 定容, 待测。

b.标准曲线的绘制

准确吸取黄酮标准储备液2.5mL到25mL容量瓶中, 用80%的乙醇定容, 摇匀, 得到浓度为的标液, 分别准确移取标液0.0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8于10mL容量瓶中, 依次加入少量80%乙醇, 然后加0.3mL5%的溶液, 摇匀, 静置6min, 再加入0.3m L5%的溶液, 摇匀, 静置6min, 最后加入4的溶液, 摇匀, 用的乙醇定容。放置10min, 在波长为508nm处进行比色测定, 其结果用最小二乘法作线性回归, 得吸光度值A与标准溶液体积 (m L) 的关系曲线。

c.样品含量测定

准确吸取黄酮提取液1于10的容量瓶中, 同标准曲线相同的测定步骤处理样品, 在508nm处测得吸光度, 由回归方程计算其含量。

样品测定结果见表5。

3 结论

由试验表明, 提取柑桔中黄酮的最佳条件为:温度70℃, 时间20min, 乙醇浓度80%。用最佳条件进行提取, 在波长为508nm下进行黄酮含量测定, 得到表5的结果, 由表5可以看出, 柑桔皮中的黄酮含量是其果肉中的10倍左右, 因此, 深度开发柑桔特别是柑桔皮中的黄酮资源, 将具有重大的经济效益和社会效益。

参考文献

[1]苏东林, 单杨, 李高阳.比色法测定柑桔皮中总黄酮含量的研究[J].中国酿造, 2008, (3) :69-74

[2]黄锁以, 罗燕, 张婧萱等.柑桔皮总黄酮的提取及鉴别[J].时珍国医国药, 2006, (8) :1495-1496

山楂中黄酮提取 篇6

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

KUDOS SK2510HP超声仪,SHB-B95 真空泵,FA1004 电子天平,Human Power Ⅱ + 超纯水器,SHIMADZU UV-2401PC紫外可见光分光光度计等。

芦丁标准品(AR),铁甲草(梅州市蕉岭县),乙醇(AR),硝酸铝(AR),亚硝酸钠(AR),氢氧化钠(AR)等。

1.2 实验方法

1.2.1 芦丁标准溶液的配制

准确称取经真空60℃干燥至恒重的芦丁标准试剂0.02g,用60%( 体积比) 乙醇于60℃水浴中溶解,并定量转入100m L容量瓶中,用60% 乙醇定容,摇匀,记录数据。

1.2.2 测定波长的确定

准确移取芦丁标准溶液10.0m L于50m L容量瓶中,加入60% 乙醇定容至25.0m L,然后加入5% Na NO2溶液1.5m L,摇匀,放置6min。再加入10% Al(NO3)3溶液1.5m L,摇匀,再放置6min。加1.0mol·L-1Na OH溶液20.0m L,用去离子水稀释定容至50.0m L,摇匀,放置10~15min后,以空白试剂作参比,使用分光光度计对工作溶液在波长350~600nm区间进行连续方式扫描[1,2,3],读取吸光值,确定最大吸收峰,从而可以确定本实验的测定波长为508.80nm。

1.2.3 芦丁标准曲线的绘制

分别取1.2.1 项芦丁标准溶液2.5、5.0、10.0、15.0、20.0m L于5 个50m L容量瓶中,分别准确加入60% 乙醇稀释成25.0m L。先加入5% Na NO2溶液1.5m L,摇匀,放置6min;再加入10% Al(NO3)3溶液1.5m L,摇匀,再放置6min;加1.0 mol·L-1Na OH溶液20.0m L,用水稀释至50.0m L,摇匀,放置10~15min后,在最大吸收波长处测定吸光度A,并对数据进行处理,作芦丁溶液浓度- 吸光度图(图1),得出标准工作曲线y=11.407x+0.0140。

2 结果与讨论

采用超声波法提取铁甲草中黄酮,具体实验步骤为:取铁甲草,捣碎,烘干磨成粉末( 过0.42mm筛),准确称取1.0g于100m L圆底烧瓶中,以乙醇为溶剂按一定液固比浸润,将圆底烧瓶置于超声仪中用59k Hz超声波处理一定时间后抽滤,得铁甲草中总黄酮提取物的样品溶液,用所对应浓度的乙醇定容至50m L,放置一段时间后,取上层清液5.00m L于50m L容量瓶中,按1.2.3 项下所用的方法,以空白试剂为参比,用1cm比色皿在最大吸收波长处测其吸光度,并计算样品溶液的浓度及黄酮含量。

因超声波法提取铁甲草中黄酮类化合物,受到乙醇浓度、液固比、超声时间、超声温度等几个重要因素的影响,为此,先进行单因素实验,然后再采用L9(34) 正交表设计实验,从而探讨最佳实验条件以获得最大提取率。

2.1 单因素实验

2.1.1 乙醇浓度的确定

准确称取l.0g铁甲草粉末,液固比20∶1,分别以20%、40%、60%、80%、95% 的乙醇在60℃下超声提取30min,抽滤,按1.2.3 项的方法定容到50m L容量瓶中,测定其黄酮提取率,根据实验数据作图,结果见图2。

从图2 可知,乙醇浓度在40%~80% 时, 有较高的提取率,其中,80% 乙醇下的提取率最大,当乙醇浓度大于80% 以后,黄酮提取率降低。较高乙醇浓度有利于提高黄酮提取率,但高浓度乙醇使其他醇溶性杂质的溶出增多,有效成分溶出减少。

2.1.2 液固比的确定

准确称取1.0g铁甲草粉末,液固比分别为10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1,在60℃下以60%乙醇超声波提取30min,抽滤,按1.2.3 项的方法定容到50m L容量瓶中,测定其黄酮提取率,根据实验数据作图,结果见图3。

从图3 可知,液固比在20∶1 和25∶1 时,有较高的提取率,其中,液固比在25∶1 下的提取率最大,当液固比在10∶1、15∶1、25∶1 时,有明显的上升趋势,当液固比为30∶1 时,黄酮提取率有所降低。可能是由于黄酮基本溶出完全,增加溶剂量反倒使得某些醇溶性物质溶出影响黄酮的提取率。

2.1.3 超声时间的确定

液固比20∶1,在60℃下以60% 乙醇分别超声回流10、20、30、40、50min,抽滤,按1.2.3 项的方法定容到50m L容量瓶中,测定其黄酮提取率,根据实验数据作图,结果见图4。

从图4 可知,超声时间在10、20、40、50min时对提取率的影响不大,当超声时间在30min时,提取率最大。这可能是黄酮类化合物在某一时间段细胞内外已达平衡,但是随着时间的增加,其他物质溶出从而影响黄酮的提取率。

2.1.4 超声温度的确定

准确称取l.0g铁甲草粉末,液固比20∶1,分别于40、50、60、70、80℃下以60% 乙醇超声提取30min,抽滤,按1.2.3 项的方法定容到50m L容量瓶中,测定其黄酮提取率,根据实验数据作图,结果见图5。

从图5 可知,超声温度在50℃时,有较高的提取率,当超声温度在40~50℃时,有明显的上升趋势,当超声温度超过50℃,黄酮提取率有所降低。这可能是由于温度的升高,部分黄酮类化合物被氧化,此外,温度升高,易导致其它易溶物溢出量增加,同样可导致总黄酮提取率的降低。

2.2 正交实验

设计4 因素3 水平的正交实验,选择乙醇浓度、液固比、超声时间和超声温度为实验因素,以黄酮提取率为实验指标,选用L9(34) 正交组合进行实验,具体因素水平见表1。

2.3 最佳提取工艺条件的确定

根据单因素实验中实验数据作图,得出超声波法最佳实验条件的区域,从而采用L9(34) 正交法设计因素水平表(表2)。

超声波法提取铁甲草中黄酮含量的条件实验结果记录见表2。

极差分析表明,超声波法影响黄酮提取率的主次因素为超声时间>超声温度>乙醇浓度>液固比,所以最佳提取工艺为A2B2C3D1,即60% 乙醇,液固比20∶1,时间40min,超声温度40℃。

2.4 铁甲草中黄酮含量分析

以芦丁为标样,在最佳工艺条件下独立平行测定5 次,计算黄酮类化合物的总量,得出铁甲草黄酮提取液测定结果见表3。

从表3 的数据可知,在该条件下测定的黄酮提取率基本稳定,相对平均偏差较小,可信度较高,由此可以判定,在超声波最佳工艺条件下测定黄酮的含量为12.52%。

3 结论

以芦丁为标样,采用分光光度法定量测出铁甲草中总黄酮含量,在单因素试验的基础上,用正交试验法L9(34) 对铁甲草中黄酮的提取工艺进行了优选。超声波法影响黄酮提取率的主次因素为超声时间>超声温度>乙醇浓度>液固比,其最佳工艺条件为60% 乙醇,液固比20∶1,时间40min,超声温度40℃,在最佳工艺条件下,超声波提取法对铁甲草的黄酮提取率为12.52%。分析认为,超声波技术对遇热不稳定、易水解或氧化的黄酮有效成分具有保护作用,有利于后期的分离和纯化。如今超声波技术发展较为成熟,设备的维护和保养比较方便,操作简单易行,其作为一种先进的提取方法,应用在铁甲草中黄酮的提取和纯化,具有广阔的前景[4,5]。

摘要：以芦丁为标样,采用分光光度法定量测出铁甲草中总黄酮含量,在单因素试验的基础上,用正交试验法L9(34)对铁甲草中黄酮的提取工艺进行了优选。其最佳工艺条件为:乙醇浓度60%,液固比20∶1,超声时间40min,超声温度40℃。在此条件下,黄酮提取率为12.52%。

关键词：超声波,铁甲草,黄酮

参考文献

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[4]齐丽霞,郑彦峰,谈锋.银杏叶总黄酮提取方法的比较研究[J].江西农业学报,2007,19(1):80-83.

山楂中黄酮提取 篇7

酸枣仁为中医常用安神良药,具有养肝宁心、敛汗生津之功效。其甘、酸,味平,归心、肝、胆经,用于治疗神经衰弱、失眠、多梦、盗汗、虚烦不眠、惊悸怔忡、津少口干、体虚多汗等[2,3]。近年来医学界对酸枣仁化学成分、有效成分提取、分析及其药理等方面作了大量的研究。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

本实验原料是中药炒酸枣仁:阳光大药房;无水乙醇:天津市康科德科技有限公司,分析纯;石油醚、芦丁、乙酸钾、结晶氯化铝、氢氧化钠、硫酸、丙酮,北京化学试剂有限公司,分析纯。

YLE-1000型电热恒温水浴锅:精科华瑞公司;FW135型中草药粉碎机:天津市泰斯特仪器有限公司;JH型数显电动搅拌器:常州国华电器有限公司;TU1810型紫外可见分光光度计:北京普析通用仪器有限公司;HZS-HA型水浴振荡器:哈尔滨市东明医疗仪器厂;TD5A-WS型台式低速离心机:长沙离心机仪器有限公司;RE52-98型旋转蒸发器:上海亚荣生化仪器厂。

1.2 实验方法

1.2.1 实验试剂以及样品溶液的制备

芦丁标液的配制:精密称取芦丁标准品20.00mg并记录,用70%乙醇溶解,定容至100ml,得浓度为0.2000μg/μl的标准溶液。

酸枣仁黄酮提取液的配制:将酸枣仁放入80%的乙醇溶液中,固液比=1:18,水浴40℃加热5h,将提取液离心除去酸枣仁残渣,之后将提取液蒸发回收乙醇,蒸发至提取液体积基本不再变化为止,待溶液冷却至室温出现沉淀后,再次离心除去沉淀。

1.2.2 大孔树脂的预处理[4,5,6,7,8,9]

首先使用饱和食盐水(工业用),用量约等于被处理树脂的2倍,将树脂置于食盐中浸泡18～20h,然后放尽食盐水,用清水漂洗净,使排出的水不显黄色,再用2%～4%氢氧化钠(或5%盐酸)溶液(其量与上同)浸泡2～4h(或小流量清洗),放尽碱或酸液后冲洗树脂直至水接近中性待用。实验室常用大于95%的乙醇。

1.2.3 标准曲线测定

精密吸取芦丁标准溶液0μl,500μl,1000μl,1500μl,2000μl,2500μl,3000μl于25ml容量瓶中;向每个容量瓶中依次加入加0.2mol.L-1三氯化铝溶液2.5ml、1mol·L-1醋酸钾溶液5.0ml、用70%乙醇加至刻度,摇匀,放置10min;用分光光度计在272±1nm波长处测量吸光度值A并记录,将结果作统计分析得到回归方程y=722.26x+0.4242,R2=0.9992。

1.2.4 样品溶液的测定

取0.1ml和0.2ml浓缩的提取液,依次加入三氯化铝溶液2.5ml、醋酸钾溶液5.0ml,用70%乙醇加至25ml,摇匀,放置10min。在272±1nm波长处测量吸光度值A,将吸光值代入到下面公式就可算出提取液的浓度C1(mg/ml),C1=(k*A+b)*100%/[0.99*0.1(或0.2)*1000](mg/ml)其中k—标准曲线的斜率、A—样品溶液的吸光度值、b—标准曲线的截距。计算两次浓度的平均值得出酸枣仁提取液的浓度是2.243mg/ml。

1.2.5 各种树脂吸附容量的测定

精确称取每种树脂0.2g左右,并记录树脂质量ml(g),量取体积为V1=25ml的已知浓度为C1(mg/ml)的酸枣仁提取液后,逐个向每个装有树脂的烧杯中加入;用保鲜膜将烧杯口封好后,将烧杯放入水浴恒温振荡器后在常温下振荡2h。到时间后将烧杯从振荡器中取出,测定上清液中的酸枣仁黄酮浓度C2(mg/ml)(方法见1.2.4样品溶液的测定),将提取液的初始浓度C1(mg/ml)和提取液吸附后的浓度C2(mg/ml)代入到公式计算各种树脂的操作吸附容量CA,CA=(C1-C2)*V1/m (mg黄酮/g树脂),其中V1—量取提取液的体积、m—量取树脂的质量。

1.2.6 树脂的解吸得率的测定

各称取每种树脂0.2g左右,并测定各种树脂对酸枣仁黄酮的吸附容量CA (mg黄酮/g树脂)(方法见1.2.5各种树脂吸附容量的测定)。吸附完成后将上清液倒出,用去离子水洗涤两三遍树脂后,量取体积为V1=20ml的90%丙酮溶液加入烧杯中,用保鲜膜将烧杯口封好后放入水浴恒温振荡器在常温下振荡2h。到时间后测定上清液中的酸枣仁黄酮的浓度C3 (mg/ml)(方法见1.2.4样品溶液的测定),将吸附容量CA (mg黄酮/g树脂)和解吸后的溶液浓度C3(mg/ml)代入公式计算各种树脂的解吸得率t,t=(C3*20)/(m*CA)*100%,其中m—量取树脂的质量。

1.2.7 树脂解吸条件的比较

称量筛选出的大孔吸附树脂2.00g;加入40ml酸枣仁黄酮提取液在30℃下在摇床上吸附2h。吸附结束后,测定提取液的平衡浓度(mg/ml)及树脂的吸附容量(mg/g),将2.00g吸附后的树脂洗涤干净,按照0.5g每份分称为四份,向每份树脂中加入不同的20ml洗脱液,分别为90%乙醇,90%丙酮,pH2.0的90%酸性乙醇,pH12.0的90%碱性乙醇。在30℃下于摇床上进行解吸试验(方法见1.2.6树脂的解吸率的测定);解吸结束后从瓶中取样0.5ml用乙醇定容至25ml,测定每瓶样液中酸枣仁黄酮的浓度(mg/ml);依据树脂在解吸后溶液中酸枣仁黄酮溶液的浓度值,计算出解吸率。

2 结果与讨论

2.1 各种树脂操作吸附容量的测定

通过表2可以看到,ZGSD201、安徽三星AB-8、三菱SP207、三菱SP700的吸附容量分别是74.598mg/g、76.489mg/g、113.780mg/g、114.954mg/g,吸附容量性能良好,故对以上4种树脂进一步进行树脂解吸得率的测定。

2.2 树脂的解吸得率的测定

从表3可见,三菱SP700树脂在酸枣仁黄酮的静态吸附试验中解吸率是最高的,解吸率达到了95%,是理想的吸附酸枣仁黄酮的大孔树脂。

2.3 树脂解吸条件的比较

从表4可以看出90%丙酮在酸枣仁黄酮的解吸试验中解吸率是最高的,解吸率达到了1.012,所以90%丙酮是最理想的解吸液。

3 结论

25种不同型号的树脂经过振荡吸附、紫外可见分光光度法的测定后进行数据处理,测定结果如表2所示,选出4种吸附性能优秀的树脂,它们分别是ZGSD201、安徽三星AB-8、三菱SP207、三菱SP700。之后把90%丙酮溶剂当作解吸液,分别对4种树脂进行解吸容量的测定,测定结果见表3,选出最理想树脂进行解吸条件实验,测定结果见表4。

由表3可知,分别采用70%乙醇吸附,90%丙酮解吸振荡的方法,通过紫外分光光度法测定,得出解吸得率最高的大孔树脂是三菱SP700树脂,吸附容量为114.954 (mg黄酮/g树脂),解吸得率为95%。

由表4可知,90%丙酮在酸枣仁黄酮的解吸实验中解吸率是最高的,依次是90%酸性乙醇、90%乙醇、90%碱性乙醇,所以90%丙酮是最理想的解吸液。

摘要：筛选出较优的纯化酸枣仁黄酮的大孔吸附树脂。通过静态实验,根据树脂的吸附容量,从25种大孔树脂中筛出四种树脂,根据解吸得率,从四种树脂中进一步筛出一种大孔树脂确定最佳解吸条件。三菱SP700的吸附容量是1 14.954(mg/g),90％丙酮的解吸率最大,达到了 1.012。三菱SP700树脂对酸枣仁黄酮有较好的解吸和吸附的效果,最佳解吸液是90％丙酮。

关键词：大孔树脂,吸附,解吸,黄酮

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