金黄色葡萄杆菌论文

金黄色葡萄杆菌论文（共7篇）

金黄色葡萄杆菌论文 篇1

1 发病情况

郑州市中原区罗寨村一蛋鸭养殖户饲养的“江南一号”青年鸭3 480只，放养于人造水池中。鸭群饲料为自配的混合料。经查，该饲料无发霉、变质现象。鸭棚为砖木结构，仅设有两扇小窗，舍内地面潮湿，鸭粪积有5 cm厚。进入鸭棚内顿感臭味扑鼻、刺眼。该鸭群在2日龄时曾注射过鸭瘟疫苗和禽霍乱菌苗。

2 主要病状

病鸭精神萎靡不振，采食和饮水均减少，少数病鸭采食废绝，羽毛松乱，喜卧，不愿活动。少数病鸭拉稀并很快死亡。最明显的症状是多数病鸭出现单侧全眼球炎，眼睑肿胀，闭目、流泪，翻开眼睑发现结膜发红、出血，角膜混浊，呈灰白色，失明，行走无目的;少数病鸭跛行，翅膀拍地。

3 剖检变化

先后共剖检病死鸭18只，病变基本一致，归纳如下：剖开病死鸭的腹腔，可闻到难闻的腐败气味，气囊浑浊、增厚，表面散布黄绿色、凝乳状渗出物;盲肠呈现出血性炎症;而食道、腺胃和泄殖腔均未见异常。病死鸭心包腔积液，心包膜增厚、粗糙，心外膜出血;肝脏肿大、发黑。

4 定性诊断

挑选几只重病将死的病鸭和刚死不久的病死鸭，送至河南省兽医防治站进行了定性检验，分离出了大量的致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。根据现场调查、病鸭临床症状和剖检变化，结合上述实验室定性诊断。该群“江南一号”青年鸭突发的是一种以急性败血症死亡和全眼球炎为临床主要特征的传染病，因此确诊为青年鸭为大肠杆菌病并发金黄色葡萄球菌病混合感染症。

5 措施及效果

(1)针对传染源。首先立即严密隔离病鸭，并及时淘汰无治疗价值的病鸭，以绝后患;然后挑选病鸭选用氟哌酸灌服，每只40 mg，每日2～3次，连用5～6 d。

(2)针对传播途径。一是及时清除鸭棚内的积粪;二是选用20%的石灰乳进行消毒，并对饲养用具及其周围环境进行彻底清洗和消毒;三是改造鸭棚，使之通风透光，以消灭病原，切断流行链条。

(3)针对易感鸭群。选用氟哌酸按0.02%拌料饲喂，连用5～6 d。

采用以上综合措施3 d后，鸭群停止死亡，鸭病得到了有效控制，病鸭采食饮水恢复了正常。但是，大部分病鸭的眼疾难以根治。

金黄色葡萄杆菌论文 篇2

1 材料与方法

1.1 药品和菌种

实验所用野菊花、泽漆、蛇莓、地黄、紫苏、荔枝草均采购至河南省药材公司；实验研究所用的试剂均为分析纯标准；实验所用的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为采购于中国食品药品检验所。

1.2 方法

1.2.1 水煎液的制备

分别称取6种中草药，每种30g，分别加入到300mL蒸馏水中，大火煮沸后继续小火煮1h左右，过滤并收集滤液，再重复1次操作，将2次水煎液合并后浓缩至30mL。所得的水煎液浓度为1.0g/mL。然后分别将水煎液稀释为浓度50.00%、25.00%、12.50%以及6.25%的水煎液稀释液备用，保存于4℃冰箱。

1.2.2 菌悬液的制备

菌悬液的制备必须严格遵守无菌操作，将采购的休眠状态的菌种分别接种于试管斜面，于37℃恒温培养箱进行24h的活化培养。使用无菌生理盐水对活化好的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌进行洗脱，然后将洗脱液转移至含有液体培养基的培养瓶中，于恒温振荡器中进行2h的震荡培养，得到大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的菌悬液备用。

1.2.3 药敏纸片的制备

将普通滤纸制作成直径为7mm左右的滤纸片，在121℃下高压灭菌25min，将滤纸烘干后，加入到中草药的水煎液中10min备用。

1.2.4 抑菌试验

抑菌试验选择滤纸片扩散法，操作过程要求严格执行无菌操作，用移液器精确吸取0.2mL的菌悬液，均匀的涂于含有培养基的平皿内，然后分别取浸有中草药的水煎液的滤纸片置于培养基上，每个平皿放4个，并进行标记。将平皿放入37℃恒温培养箱中进行48h的培养，并测量每个平皿中的抑菌圈直径。计算抑菌圈直径与滤纸片直径的比值。

1.3 统计学方法

采用SPSS17.0软件进行数据的统计与分析，全部数据资料用采用t检验，χ2检验，P<0.05为差异有显著性，具有统计学意义。

2 结果

不同浓度的中草药水煎液具有不同的抑菌效果，见表1、2。

3 讨论

野菊花、泽漆、蛇莓、地黄、紫苏、荔枝草均对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌效果，多数药物的最佳抑菌浓度均为1.000g/mL，并且抑菌效果随药物浓度的增加而增强。同时，相同浓度的不同药物，由于药物的有效成分不同，抑菌效果也具有明显的差异[2]。6种中药中，荔枝草对大肠杆菌的抑菌效果最佳，蛇莓对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最佳。

综上所述，6种中草药对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的单方均具有明显的抑菌效果，值得临床推广。

参考文献

[1]苏振霞, 肖辉, 单娟娟.十六种中草药提取物对鳗弧菌体外抑菌作用研究[J].淡水鱼业, 2008, 38 (06) :73-75.

金黄色葡萄杆菌论文 篇3

关键词：白花蛇舌草,叶下珠,土牛膝,飞机草,马樱丹,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌

大肠杆菌和金黄色葡萄球菌是医学和兽医临床上常见的两种病原菌[1]。金黄色葡萄球菌是引起化脓性疾病的致病菌,并且是一种毒力很强的致病菌, 可引起局部化脓感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等, 甚至败血症、脓毒血症等全身感染[2]; 大肠杆菌是人和动物肠道中一种正常肠道菌群,主要寄生在大肠中,常引起流行性婴儿腹泻和成人肋膜炎、腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎等[3]。随着抗菌药物在医学临床上的广泛应用,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的耐药水平越来越高,出现了多重耐药菌株,给人类和动植物的健康带来极大危害[4,5]。白花蛇舌草、叶下珠、土牛膝、 飞机草和马樱丹是中药方中十分常见的野生中草药[6],具有作用靶位多、不易产生耐药的优点。因此,研究和开发抗菌中草药对解决耐药菌株的产生和抗生素短缺问题具有重要意义。本试验研究了白花蛇舌草、叶下珠、土牛膝、飞机草和马樱丹的不同浓度水提液和酯提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用,以便为这5种中草药的应用及发展提供一定的理论基础。

1材料与方法

1.1中草药、菌株及主要试剂

白花蛇舌草( Hedyotis diffusa) 、叶下珠( Phyllanthus urinaria ) 、土牛膝 ( Achyranthes aspera ) 、飞机草 ( Eupatorium odoratum) 和马樱丹( Lantana camara) , 采自海南 大学校园; 大肠杆菌 ( 菌株编号 为ATCC25922) 和金黄色 葡萄球菌 ( 菌株编号 为ATCC25923 ) ,购自中国兽医药品监察所; 营养肉汤 ( 批号为022010 ) 、营养琼脂 培养基 ( 批号为022021) 、MH琼脂培养基 ( 批号为028050 ) ,购自广东环凯微生物科技有限公司。

1.2试验药液的制备

1. 2. 1水提液采用煎煮法[7]。将白花蛇舌草、叶下珠、土牛膝、飞机草和马樱丹晒干,然后研磨切碎, 称取50 g加500 m L纯化水,煮沸30 min,过滤; 药渣再加纯化水500 m L,煮沸30 min,过滤; 合并2次滤液,加热蒸发浓缩至50 m L,使每毫升含中药1 g ( 浓度为1. 00 g /m L) ; 然后稀释成浓度分别0. 75 g /m L、 0. 50 g / m L、和0. 25 g / m L的中药制 剂,高压灭菌15 min后于4 ℃ 冰箱中保存,备用。

1. 2. 2酯提液采用乙酸乙酯浸泡法[8,9]。称取白花蛇舌草、叶下珠、土牛膝、飞机草和马樱丹粉末10 g,加5倍量的乙酸乙酯,浸泡24 h,过滤; 药渣再加5倍量的乙酸乙酯,浸泡24 h,过滤; 合并2次药液,用鼓风吹干机吹干,加入甲醇10 m L,使每毫升甲醇中含生药1 g,即为1. 00 g /m L的酯提液原液; 然后稀释成 浓度分别0. 75 g /m L、0. 50 g /m L、和0. 25 g / m L的中药制剂,过滤灭菌15 min后于4 ℃ 冰箱中保存,备用。

1.3菌悬液的制备

在无菌条件下,在无菌室用接种环蘸取大肠杆菌和金黄色葡萄球菌接种于营养肉汤中,做好标记,置37 ℃ 恒温培育箱中培养18 h。加热溶解营养琼脂培养基,灭菌,在无菌条件下倾注于10 cm平皿中,厚度约4 mm,静置凝固。用接种环蘸取活化好的细菌,划线接种于营养琼脂培养基上,置37 ℃ 恒温培育箱中培养24 h; 再用接种环蘸取单个菌落至营养肉汤中扩增细菌,培养12 h; 最后用生理盐水稀释到0. 5麦氏比浊管,相当于5 × 107~ 5 × 108cfu / m L; 编号,大肠杆菌为1号菌,金黄色葡萄球菌为2号菌。

1.4药敏纸片的制备

选用新华1号定性滤纸,用打孔器打成直径为6 mm的圆形纸片,高压蒸馏灭菌,烘干后分别放入配制好的药液中浸泡40 min,备用。

1.5抑菌试验

将加热溶解、高温灭菌后的MH琼脂倾注于直径为10 cm的平皿中制成厚度为4 mm的MH琼脂培养基,静置凝固。用灭菌棉拭子分别蘸取1. 3中准备好的1号、2号菌液,在平板表面涂布3次,每次旋转60°,最后沿平板内缘涂抹1圈使细菌布满整个平板, 置室温干燥5 min。用灭菌镊子将1. 4中的药敏纸片紧贴于平板表面,每个平皿贴4张纸片,其中3张为含药液的纸片,另外一张是对照组,大肠杆菌组贴的是10 μg /片庆大霉素药敏纸片,金黄色葡萄球菌贴的是10 μg /片头孢拉定药敏纸片。将有药敏纸片的平皿置37 ℃恒温培育箱中培养24 h,观察药敏纸片外周抑菌圈直径的大小并测量。

1.6数据处理

采用DPS v3. 01软件进行 分析,以2014年CLSIM100 - S24为标准,当抑菌圈直径小于10 mm时,说明相应药物有轻度的抗菌作用; 若抑菌圈直径在10 ~ 15 mm时,说明相应药物有中度抗菌作用; 当抑菌圈直径大于15 mm时,说明相应药物高度抗菌。

2结果与分析

2.1白花蛇舌草不同提取方法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用(结果见表1)

由表1可知,白花蛇舌草的水提液和酯提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用。随着白花蛇舌草水提液浓度的降低,对大肠杆菌的抑菌效果越好,但都只是轻度抑菌,而对金黄色葡萄球菌的抑菌效果在0. 75 g /m L时最好,为中度抑菌效果。白花蛇舌草酯提液对大肠杆菌的抑菌效果在0. 75 g /m L时最高,为中度抑菌效果,而对金黄色葡萄球菌的抑菌效果在0. 50 g /m L时最好,为轻度抑菌效果。两种提取液的抑菌效果远远小于庆大霉素和头孢拉定。

注: - 表示无结果; + 表示轻度抑菌; + + 表示中度抑菌; + + + 表示高度抑菌。抑菌结果为药物抑菌圈直径减去阴性对照抑菌圈。

2.2叶下珠不同提取方法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用(结果见表2)

注: - 表示无结果; + 表示轻度抑菌; + + 表示中度抑菌; + + + 表示高度抑菌。抑菌结果为药物抑菌圈直径减去阴性对照抑菌圈。

由表2可知,叶下珠的水提液和酯提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用。叶下珠水提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好的浓度均为0. 75 g /m L,且对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显优于大肠杆菌。叶下珠酯提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最佳抑菌浓度分别是0. 50 g /m L和0. 75 g / m L,均为轻度抑菌效果。两种提取液的抑菌效果远远小于庆大霉素和头孢拉定。

2.3土牛膝不同提取方法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用(结果见表3)

注: - 表示无结果; + 表示轻度抑菌; + + 表示中度抑菌; + + + 表示高度抑菌。抑菌结果为药物抑菌圈直径减去阴性对照抑菌圈。

由表3可知,土牛膝的水提液和酯提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用。土牛膝的水提液和酯提液对大肠杆菌的抑菌效果均以0. 50 g /m L浓度最好,水提液为中度抑制,酯提液为轻度抑制,从整体对比情况来看,水提液的抑菌效果比酯提液的要好。土牛膝的高浓度水提液对金黄色葡萄球菌的抑制效果比酯提液要好; 低浓度酯提液的抑菌效果反而要比水提液要好; 且0. 25 g /m L浓度时没有抑菌效果,其他浓度均为轻微抑制。两种提取液的抑菌效果远远小于庆大霉素和头孢拉定。

2.4飞机草不同提取方法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用(结果见表4)

由表4可知,飞机草的水提液和酯提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用。飞机草水提液浓度为0. 50 g /m L时对大肠杆菌的抑菌效果最好,为轻度抑菌; 随着飞机草水提液浓度的减小,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果逐渐降低。飞机草酯提液浓度为0. 50 g /m L时对大肠杆菌的抑菌效果最好,为轻度抑菌; 浓度为0. 75 g /m L时对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好,为中度抑菌,且对金黄色葡萄球菌的抑菌效果比对大肠杆菌好。两种提取液的抑菌效果远远小于庆大霉素和头孢拉定。

注: - 表示无结果; + 表示轻度抑菌; + + 表示中度抑菌; + + + 表示高度抑菌。抑菌结果为药物抑菌圈直径减去阴性对照抑菌圈。

2.5马樱丹不同提取方法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用(结果见表5)

注: - 表示无结果; + 表示轻度抑菌; + + 表示中度抑菌; + + + 表示高度抑菌。抑菌结果为药物抑菌圈直径减去阴性对照抑菌圈。

由表5可知,马樱丹的水提液和酯提液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用。无论是采取酯提还是水提的方法,马缨丹药液浓度越高对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果越强,其中原液的效果最好,且酯提取物抗菌作用大于水提取物,达到了中度抗菌作用。两种提取液的抑菌效果远远小于庆大霉素和头孢拉定。

3讨论与结论

近年来,在细菌性感染疾病的治疗中,抗生素的应用使人类许多严重的细菌感染性疾病得到有效控制,但由于抗生素的不合理使用导致大量耐药性细菌的出现,耐药性细菌感染严重威胁着人类的健康。而细菌对抗菌中药产生耐药较少,且中药来源广泛,价格低廉[10]。故传统中药在现代预防和控制细菌性感染疾病方面发挥了积极作用[11]。因此,研究和开发抗菌中药对解决耐药菌株的产生和抗生素短缺问题具有重要意义。

白花蛇舌草对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抑菌作用,酯提液的抑菌效果比水提液更明显,这与边才苗[12]的试验结果相同。叶下珠对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,郑秀青[13]采用打孔法也进行了类似的试验,试验结果表明叶下珠的水提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,这与本试验结果相似。郭靖科等[14]研究发现,土牛膝对金黄色葡萄球菌有抑菌作用,这与本试验结果一致。 飞机草的提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,这与池水晶等[15]的试验结果相似。B. V. Pradeep等[16]研究发现,马樱丹对大肠杆菌、假胞绿脓杆菌均有抑菌作用,酯提物对大肠杆菌的抑菌圈直径为6. 8 ~ 8. 0 mm,这与本试验结果相似。

金黄色葡萄杆菌论文 篇4

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源:

2006-2011年从神经外科临床感染标本分离获得鲍曼不动杆菌252株、铜绿假单胞菌530株、金黄色葡萄球菌514株。

1.1.2 标准质控菌株:

大肠埃希菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923,绿脓杆菌ATCC27853,产酶大肠埃希菌ATCC35218,每周用于药敏纸片的质量控制。

1.1.3 仪器、培养基和药敏纸片:

细菌鉴定分析仪,包括VITEK(法国Bio-Merieux公司)、Microscan(美国BD公司)和Phonenin-100(美国BD公司)系统。Mueller-Hinton琼脂培养基和营养肉汤购于法国生物梅里埃公司和北京奥博星生物技术有限公司。药敏纸片购于英国Oxoid公司。

1.1.4 抗菌药物:

头孢吡肟(FEP),阿米卡星(AK),头孢哌酮/舒巴坦(SCF),哌拉西林/他唑巴坦(TZP),头孢西汀(FOX),头孢他啶(CAZ),环丙沙星(CIP),亚胺培南(IPM),美罗培南(MPM),头孢唑啉(CZO),左氧氟沙星(LEV),复方新诺明(SXT),红霉素(E),克林霉素(DA),利福平(RD),万古霉素(VA),替考拉宁(TEC),呋喃妥因(F),米诺环素(MNO),利奈唑胺(LNZ),多黏菌素(PL)购于英国OXOID公司。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定和药敏实验:

细菌鉴定应用半自动或全自动细菌鉴定分析仪鉴定菌种;药敏试验采用K-B纸片法和琼脂平板稀释法,按CLSI M100-S11标准解释结果。

1.2.2 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)确定:

以头孢西丁纸片法判定。

2 结 果

2.1 标本中病原菌来源

2006-2011年神经外科临床分离细菌主要标本来源为痰及呼吸道标本、脑脊液、分泌物、血液,分别占93.2%、3.8%、2.1%、0.4%。

2.2 耐药情况分析

2.2.1 鲍曼不动杆菌耐药情况分析:

神经外科临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药性总体上高于其他临床科室[1]。共分离出鲍曼不动杆菌252株,其中对IPM、MPM、CAZ、SCF、MNO、AK、CIP的耐药率分别为32.1%、37.2%、87.3%、21.4%、49.2%、73.8%、79.1%。其中SCF按头孢哌酮判定标准计算;鲍曼不动杆菌头孢哌酮参考铜绿假单胞菌折点。鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药情况见表1。

2.2.2 铜绿假单胞菌耐药情况分析:

临床分离的铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性总体较高。共分离出铜绿假单胞菌530株,其中对IPM、MPM、CAZ、SCF、AK、CIP的耐药率分别为50.9%、41.3%、74.4%、50.0%、45.1%、22.9%。其中SCF按头孢哌酮判定标准计算。铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药情况见表2。

2.2.3 金黄色葡萄球菌耐药情况分析:

共分离出金黄色葡萄

球菌514株。MRSA的分离率为89.9%明显高于2010年度Mohnarin西北地区监测数据的55.1%。未发现对VA、TEC及LNZ耐药的金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药情况见表3。

3 讨 论

鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌广泛分布于自然环境中,常定植于正常人的皮肤、黏膜、呼吸道和胃肠道等部位,在机体免疫力低下时,可引起严重的化脓性感染,是引起院内获得性感染的常见条件致病菌。本结果显示,我院神经外科临床分离病鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌耐药情况普遍,多药耐药菌较为常见。

3.1 鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌

由于临床大量广谱抗生素的应用,特别是碳青霉烯类抗生素的大量使用,非发酵菌对碳青霉烯类耐药趋势进一步恶化,铜绿假单胞菌对MPM的耐药率达41.3%;鲍曼不动杆菌对MPM的耐药率达37.2%。鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的耐药机制极为复杂,对不同的抗生素存在着不同的耐药机制。而且对同一种抗生素常是几种耐药机制共同作用的结果。随着临床新型抗菌药物的研发使用,还可能不断发现新的耐药机制。体外研究表明MPM比IPM更易诱导铜绿假单胞菌耐药[2],临床需加强碳青霉烯类药物的监控,减少其使用强度。及时监控和研究鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的耐药情况变化,可指导临床合理使用抗菌药物。

3.2 金黄色葡萄球菌

MRSA已成为世界范围引起医院内感染的首要病原菌。目前MRSA耐药严重,通常对多种抗生素同时耐药。本数据显示葡萄球菌中MRSA的分离率为89.9%明显高于2010年度Mohnarin西北地区监测数据[3],可能与神经外科患者的特殊性密切相关,应当引起临床高度关注[1]。未发现对VA和LNZ耐药的葡萄球菌。目前药物单纯治疗MRSA,VA、去甲万古霉素被确认有效。但由于其价格较昂贵,不能长期使用,且存在耐药菌株出现的威胁,因此防止MRSA的传播至关重要。另外,一些不常用药物,如MNO、F对葡萄球菌具有较好抗菌活性,可供临床轻中度感染患者使用。

4 小 结

神经外科与一般外科相比,手术操作较为复杂,住院患者多,具有病情重、侵入性操作多、手术创伤大、住院时间(特别是术后卧床时间)长、免疫功能低下等特点,因此发生医院感染机会多,感染控制亦相对困难,且对预后影响重大[4]。神经外科病房由于其自身的特性,感染率及耐药率均偏高,常成为医院感染的监控重点。数据显示,本院神经外科检出的鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌,主要分布于呼吸系统和中枢神经系统的感染标本,耐药形势严峻,且存在多耐药现象。临床应在经验性用药同时进行病原学检查,根据药敏结果适当调整抗菌药物,以逐步降低细菌耐药状况,避免院内感染和暴发流行。

参考文献

[1]徐修礼,周珊,杨佩红,等.卫生部全国细菌耐药监测网2010年西北地区细菌耐药监测[J].中国临床药理学杂志,2011,27(12):25-31.

[2]王进,王喆,刘健,等.碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌体外抗菌行为比较[J].中国临床药理学与治疗学,2009,14(12):1356-1360.

[3]徐修礼,杨佩红,樊新,等.Mohnarin2009年度报告:西北地区细菌耐药监测[J].中国临床药理学杂志,2011,27(7):1-11.

金黄色葡萄球菌的分析与检测 篇5

该事件发生后, 民众对金黄色葡萄球菌的关注度明显提高, 它也由一个“不为人知”的小生物变成社会焦点。可是大家知道的只是它的“名字”和“劣迹”, 并未看到它的全貌, 这期《分析与检测》栏目特邀李蓉、陈敏、姜培珍等行业专家, 以及知名企业, 从其检测技术、标准和预防控制等方面分析介绍金黄色葡萄球菌。

特邀嘉宾

李蓉

中国疾控中心公共卫生处副处长, 中国疾控中心全国12320管理中心副主任, 国家食品药品监督管理局保健食品审评专家, 中华预防医学会卫生检验分会委员, 中国微生物学会人兽共患病病原学专业委员会委员, 二级教授, 博士生导师。

曾任黑龙江省预防医学会常务理事, 黑龙江省卫生检验学会主委, 黑龙江省化妆品评审委员会委员。

姜培珍

上海市疾病预防控制中心主任医师, 从事营养与食品安全工作。目前担任食品安全国家标准审评委员、中华预防医学会食品卫生分会委员、上海市食品学会副秘书长等职。

陈敏

金黄色葡萄杆菌论文 篇6

概念说明

HM43葡萄球菌乳胶凝集, 是金黄色葡萄球菌检测发展中产生的新的检测方法。

血浆凝固酶试验是《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》 (GB 4789.10-2010) 中, 金黄色葡萄球菌检测的确证实验。

VITEK®2 Compact系统专用于细菌和酵母菌鉴定和重要临床细菌的药敏试验, 是当前细菌生化鉴定最权威的仪器。

实验过程

样品:本次实验样品来源于同一批次的熟肉制品, 共51个样品。

方法:该实验中所有样品的增菌, 平板分离在同一实验室内完全相同的条件下, 由相同人员按《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》 (GB 4789.10-2010) 规定的检验方法进行。

样品的处理:称取25 g样品至盛有225 m L 7.5%氯化钠肉汤的无菌均质袋中, 用拍击式均质器拍打1~2 min.

增菌:将上述样品匀液于36℃±1℃培养18~24 h。金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长。

分离培养:将上述培养物, 分别划线接种到5%的血平板, 血平板36℃±1℃培养18~24 h。金黄色葡萄球菌在血平板上, 形成菌落较大, 圆形、光滑凸起、湿润、金黄色 (有时为白色) , 菌落周围可见完全透明溶血圈。挑取上述菌落进行HM43葡萄球菌乳胶凝集试验, 血浆凝固酶试验, VITEK®2 Compact检测。

鉴定:选取1~2个金黄色葡萄球菌的典型可疑菌落, 先用HM43葡萄球菌乳胶凝集做初步筛选, 共有32个样品金黄色葡萄球菌检测呈阳性结果, 对初步筛选呈阳性的样品, 再做血浆凝固酶试验, 同时做VITEK®2 Compact上机检测得到的检测结果见表1。

结果分析

在32个HM43葡萄球菌乳胶凝集初步筛选呈阳性的样品中:血浆凝固酶阳性确证的比率为:7/32=21.87%;HM43葡萄球菌乳胶凝集假阳性比率为:1-21.87%=78.13%;VITEK®2 Compact阳性确证的比率为:6/32=18.75%;血浆凝固酶确证阳性和VITEK®2Compact阳性确证的相似度为:6/7=85.71%, 这两种方法的检测结果高度相似, 检测结果基本相同, 可以推断结果是可靠的。

《食品安全国家标准食品微生物学检验总则》中规定, 相同细菌用不同方法检测得到不同结果时, 以国标方法的检测结果为准。

结论

HM43葡萄球菌乳胶凝集在食品中金黄色葡萄球菌的检测中, 虽然操作简单、方便、快速, 但是假阳性结果偏高, 金黄色葡萄球菌的确证率低, 同时也没有被纳入国标方法, 在检测中只能起初步筛选的作用, 金黄色葡萄球菌最终的确证, 还要依靠血浆凝固酶试验或者VITEK®2 Compact生化鉴定。

讨论

HM43葡萄球菌乳胶凝集在食品中金黄色葡萄球菌的检测中, 高假阳性结果的原因分析。

凝集原理

因为乳胶颗粒表面包被有纤维蛋白原 (与凝固酶相结合) 和免疫球蛋白 (与A蛋白相结合) 。与金黄色葡萄球菌悬液混合后, 乳胶颗粒可迅速凝集。缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌不会发生明显凝集。

凝集原理可以得出的结论

(1) 如果菌落不纯, 可能造成假阳性结果。

(2) 如果培养超过30小时后, 细菌老化也可能形成阳性结果。

(3) 葡萄球菌的粗糙菌株可引起假阳性结果。

(4) 纤维状凝集可能为假阳性结果

金黄色葡萄杆菌论文 篇7

1 资料与方法

1.1 一般资料

整群选取在该院接受住院治疗,发生金黄色葡萄球菌医院感染的67例患者参与该次研究。其中男32例,女35例,平均年龄为51.2岁。67例患者的家属均同意患者参与该次研究,且在参与研究前已签署知情同意书。

1.2 研究方法

回顾67例患者的临床治疗资料,观察患者的基础疾病以及在临床治疗过程中使用抗生素的情况进而接受有创治疗的次数。

采用微量肉汤稀释法培养金黄色葡萄球菌,使用美国德零公司生产的全自动细菌鉴定仪进行鉴定,药物敏感性采用纸片扩散法(K-B法)进行检测,将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已经接种测试的琼脂表面上,随着药物在琼脂中扩散距离的增加,抗菌药物的浓度呈对数减少,在纸片的周围形成抑菌圈,抑菌圈越大说明药物敏感度越低。药物敏感度结果共分为三个阶段,分别为敏感、中介和耐药。

1.3 统计方法

采用SPSS19.0统计学软件对研究过程中所得数据进行统计学处理,计数资料采用%表示,采用χ2进行检验,P<0.05表示两者比较差异有统计学意义。

2 结果

2.1 危险因素

①基础疾病:67例患者均存在严重的基础疾病,其中包括恶性肿瘤17例,严重外伤9例,血液系统疾病13例,肾脏疾病6例,中枢神经系统疾病11例,尿毒症11例。②侵入性操作:67例患者中,59例患者临床治疗过程中实施过侵入性操作。③抗菌药物的使用:67例患者在发生金黄色葡萄球菌医院感染前,均使用过抗菌药物,其中36例患者使用过1种或1种以上抗菌药物,31例患者使用过3种或3种以上抗菌药物。

2.2 感染特征

①感染部位:67例患者共发生金黄色葡萄球菌医院感染75例次,其中54例次染部位为肺部,12例次感染部位为伤口,6例次为败血症,3例次为尿路感染。②分布特征:金黄色葡萄球菌医院感染多发生在重症监护病房、神经外科和胸外科,分别为16例、13例和12例。③细菌种类:67例患者共分离出75株金黄色葡萄球菌,其中61株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,14株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。

2.3 敏感性分析

该次研究对分离出的75株金黄色葡萄球菌进行了10种抗菌药物敏感性检测,其中共3种药物的药物敏感性大于30%,分别为复方新诺明、呋喃妥因和万古霉素,见表1。

2.4 耐药率比较

检测两种金黄色葡萄球菌对10种抗菌药物的耐药率发现,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(P<0.05),见表2。

3 讨论

李泽文[3]通过实践研究发现发生金黄色葡萄球菌医院感染的患者主要为存在严重基础疾病、免疫力低下以及临床治疗过程中实施过侵入性治疗操作的患者。参与该院该次研究的67例(100.0%)患者均存在严重基础疾病,且住院治疗时间较长,其中88.1%的患者临床治疗过程中实施过侵入性治疗操作。同时该院该次研究还发现医院感染主要发生在重症监护病房,发生率为23.9%,明显高于医院其它科室。此外抗菌药物的使用也与金黄色葡萄球菌医院感染的发生存在密切关系,该次研究对分离出的75株金黄色葡萄球菌进行了10种抗菌药物敏感性检测,其中共3种药物的敏感性大于30%。

甲氧西林是第一个应用于临床治疗的耐青霉素酶青霉素,上个世纪90年代我国临床将甲氧西林应用于治疗由葡萄球菌引起的医院感染,并取得了十分显著的治疗效果[4,5]。到目前为止耐甲氧西林金黄色葡萄球菌已成为医院感染的主要致病菌。由于该种病原菌具有传播途径广、致病性强、多药耐药性等特点,在极大程度上增加了临床治疗的难度,给患者疾病的治疗和康复造成了严重影响[6]。

总结该次研究结果得出,为有效降低金黄色葡萄球菌医院感染的发生率,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染的发生率,应从多方面进行综合控制,如尽量缩短患者住院时间,减少侵入性治疗操作等[7,8]。此外还应对重症监护室病房等易发生医院感染的科室进行重点监控,必要时做好隔离措施,努力将医院感染发生的可能性降到最低,促进患者早日康复。

摘要：目的 分析由金黄色葡萄球菌导致的医院感染的临床特点和耐药特征。方法 分析导致该院67例患者发生医院感染的危险因素及耐药特点,采用全自动细菌鉴定仪对分离的金黄色葡萄球菌菌株进行鉴定,采用纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感性试验。结果 67例医院感染患者共分离出75株金黄色葡萄球菌,其中包括61株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和14株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(P<0.05)。67例患者均存在严重的基础疾病,其中59例患者临床治疗接受过侵入性操作,发生感染的部位主要为肺部。结论 金黄色葡萄球菌医院感染的发病群体主要为病情严重,接受过侵入性操作治疗的患者,感染部位主要为肺部,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对对数抗菌药物具有高耐药性。

关键词：金黄色葡萄球菌,医院感染,耐药性,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

参考文献

[1]支丽芳.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染的临床分析及护理[J].大家健康:学术版,2014,23(6):226.

[2]孔阳英,吴宜.金黄色葡萄球菌医院感染的临床分布及耐药性分析[J].医学理论与实践,2014.,9(4):1221-1222.

[3]李泽文,史瑀.金黄色葡萄球菌致医院感染和社区感染的耐药性分析[J].检验医学与临床,2014,9(7):1225-1226.

[4]潘云军,刘慧,郭卫红,等.医院感染金黄色葡萄球菌的临床特征及耐药性分析[J].国际检验医学杂志,2014,4(3):482.-484.

[5]赵红梅,彭新国,纪冰,等.医院感染的金黄色葡萄球菌多重耐药机制研究[J].滨州医学院学报,2014,37(3):175-177.

[6]张新玲,向大伟,周珺,等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染防控效果与耐药性分析[J].中国药房,2014,34(6):3214-3216.

[7]顾有为,邵宜波,张婷,等.医院感染金黄色葡萄球菌耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2014,21(10):5233-5235.