免试剂离子色谱法测定肉制品中的多聚磷酸盐（共2篇）
免试剂离子色谱法测定肉制品中的多聚磷酸盐 篇1
免试剂离子色谱法测定肉制品中的多聚磷酸盐
目的:建立肉制品中的正磷酸盐、焦磷酸盐和三聚磷酸盐的分析方法.方法:用免试剂离子色谱(RFIC)带电导检测器进行分离测定,色谱柱:IonPac AS11-HC Analytical(4×250 mm),保护柱:IonPac AG11-HC Guard(4×50 mm),流动相为KOH水溶液,进行梯度洗脱.样品经水超声提取后,用免试剂离子色谱电导检测进行分析检测,结合保留时间和电导检测值进行定性分析.结果:该法正磷酸盐的回收率为98.8%～102.1%,精密度RSD为1.24%,以原样计方法检出限为4 ug/g,焦磷酸盐的回收率为89.8%～91.5%,精密度RSD为0.65%,以原样计方法检出限为4 ug/g,三聚磷酸盐的回收率为92.6%～94.4%,精密度RSD为0.82%,以原样计方法检出限为10 ug/g.结论:该方法具有前处理方便、分析速度快、结果准确等优点.能够满足检测不同的.肉制品中多聚磷酸盐含量的要求.
作 者：许迪明 杨娟芬 任飞 Xu Di-ming Yang Juan-fen Ren Fei 作者单位：宁波出入境检验检疫局,浙江宁波,315012 刊 名：中国卫生检验杂志 ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF HEALTH LABORATORY TECHNOLOGY 年，卷(期)： 18(12) 分类号：O657.7+5 关键词：肉制品 多聚磷酸盐 免试剂离子色谱
免试剂离子色谱法测定肉制品中的多聚磷酸盐 篇2
1 材料与方法
1.1 原理
乳制品经乙腈沉淀蛋白, RP柱去除脂肪后, 用离子色谱分析, 电导检测器检测, 以保留时间定性, 外标法定量。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 仪器
DIONEX ICS-3000离子色谱仪;Chromelen色谱工作站;RFIC在线电解淋洗液 (氢氧化钾) ;AS40自动进样器;ASRS 300 4 mm抑制器;IonPacAS16 (4×250 mm) 阴离子分析柱;IonPacAG16 (4×50 mm) 阴离子保护柱;KDC-80低速离心机;Millipore超纯水仪。
1.2.2 试剂
乙腈:色谱纯;固相萃取小柱:OnGuard RP柱, 使用前依次用5 ml甲醇和10 ml水活化;溶剂过滤器:0.20μm一次性过滤器;硫氰酸钠标准储备液:将硫氰酸钠标准品于80℃烘箱内烘干2 h。准确称取干燥后的硫氰酸钠1.396 6 g于1 000 ml容量瓶中, 定容, 混匀, 即得1 000 mg/L硫氰酸根标准储备液;硫氰酸标准使用液:取硫氰酸根标准储备溶液1 ml, 置于100 ml容量瓶中, 加水至刻度, 此溶液含硫氰酸10 mg/L;试验用水:电导率<1.0μs/cm的超纯水。
1.3 色谱条件
淋洗液:30 mmol/L KOH;流速:1.0ml/min;进样量:25μl;电导检测池温度:30℃;色谱柱温度:35℃;流动相瓶加压:40 kPa;抑制器抑制模式:自动再生模式;抑制器电流:87 mA
1.4 样品测定
取5.00 g液体奶样品 (固态奶取1.00 g, 加水至5 ml) , 加入7 ml乙腈沉淀蛋白, 定容到100 ml, 用KDC-80低速离心机以4 000 r/min离心10 min, 取上清液过RP柱去除脂肪后, 再经0.20μm滤膜过滤后, 按仪器工作条件上机进行测定。在上述仪器条件下测定标准溶液及样品溶液, 并同时测定空白, 使用外标法定量。
1.5 计算
式中:X-样品中硫氰酸盐含量, mg/kg;C-由标准曲线查得的试样测定液中硫氰酸盐含量, mg/L;V-样品定容体积, ml;M-取样量, g。
2 结果
2.1 线性范围
实验结果表明, 硫氰酸钠在0.1~2.0mg/L浓度范围内, 与峰面积呈良好的线性关系, 回归方程为y=0.051 7 x-0.001 1, r=0.999 8。见表1。
2.2 检出限与测定下限
根据全程序空白值测试结果来估算检出限。按照样品分析的步骤对空白样品连续测定8次, 计算8次平行测定的标准偏差, 按公式计算得方法检出限为0.007 5 mg/L。以此实验测定计算出的最低检出限的3.3倍作为测定下限, 结果为0.025 mg/L。若取5.00 g样品测定, 则最低检测质量浓度为0.5 mg/kg。
2.3 方法的精密度和准确度
在液体乳中按4、10、20 mg/kg的量加入硫氰酸钠标准品, 按样品测定方法平行测定6次, 由测定结果计算回收率和精密度, 结果见表2。
2.4 实际样品分析
利用上述方法对市售15个品牌生鲜乳、6个品牌乳粉中的硫氰酸钠进行了监测, 所选样品品牌均为知名度较高、消费者经常购买食用的主流乳品。其中9个品牌生鲜乳、6个品牌乳粉中均检出硫氰酸盐, 含量为0~6.294 mg/kg。
3 讨论
3.1 乙腈用量的选择
我们采用乙腈5、6、7、8、10 ml来进行实验, 实验表明增加乙腈用量可以更好地沉淀蛋白, 且乙腈用量的增加不影响硫氰酸根的回收率。但乙腈具有中等毒性, 为了尽量少地使用乙腈并保证沉淀效果, 乙腈用量7 ml是最优的选择。
3.2 淋洗液浓度的选择
我们采用25、30、35 mmol/L KOH 3种浓度进行实验, 实验表明, 选择30 mmol/L KOH作为淋洗液能使各离子分离效果最好, 硫氰酸根出峰附近干扰最少, 分析时间较短, 硫氰酸根的保留时间为13.830 min, 整个分析时间为20 min。见图1。
3.3 进样量的选择
我们采用10、25、50μl进行实验, 结果表明10μl的进样量无法使浓度低于0.1mg/L的硫氰酸根被准确有效地识别和积分, 25、50μl均能达到要求, 考虑到样品成分比较复杂, 为延长分析柱使用寿命, 故采用25μl的进样量。
2.4检测结果分析
含量最高的样品中硫氰酸盐检测浓度为6.294 mg/kg, 低于CAC使用指南[1]中硫氰酸钠作为保鲜剂添加的浓度15 mg/kg的要求。据相关文献[3-4], 硫氰酸盐是动植物体内正常存在的阴离子, 乳中硫氰酸盐来源于奶牛本身、摄取的饲料、代谢合成及环境影响等, 其正常生理浓度在5 mg/kg左右。据此判断, 15份市售乳制品中检测出的硫氰酸盐应不是人为添加的, 是原料生乳中带入的, 对人体健康影响较小。
4 结论
我们建立了离子色谱测定乳制品中硫氰酸盐的方法, 优化了样品处理、离子色谱分离条件, 操作简单易行, 相对标准偏差在2.4%~3.7%之间, 回收率在90.7%~108.6%之间, 检出限低于分光光度法, 重现性好, 是较为理想的方法, 值得推广。
摘要：目的 建立离子色谱测定乳制品中硫氰酸盐含量的方法。方法 乳制品经乙腈沉淀蛋白, RP柱去除脂肪后, 采用ICS-3000型离子色谱仪, 以AS16柱分离, 30 mmol/L KOH为淋洗液, 在流速1.0 ml/min、进样量为25μl、电导检测条件下进行检测。结果 测定的硫氰酸盐含量在0.12.0 mg/L范围内, 浓度与其峰面积呈良好的线性关系, 相关系数r=0.999 8, 检出限为0.1 mg/L, 方法回收率90.7%108.6%, RSD<3.7%。结论 方法操作简单易行, 精密度好、回收率高, 检出限低, 重现性好, 值得推广。
关键词：离子色谱,乳制品,硫氰酸盐
参考文献
[1]CAC/GL13-1991.Guidelines for the Preservation of Raw Milk by Use of the Lactoperoxidase System[S].
[2]顾欣, 黄士新, 李丹妮, 等.乳中硫氰酸盐对人类健康的风险评估[J].中国兽药杂志, 2010, 44 (9) :45-49.
[3]许东海.市售乳制品中硫氰酸盐检测结果分析[J].职业卫生与病伤, 2012, 27 (2) :105-108.
[4]杨大进, 李宁.国家食品污染和有害因素风险工作手册[M].北京:中国质检出版社, 中国标准出版社, 2013:332-335.
[5]杨一刚.离子色谱测定乳制品中硫氰酸钠含量[J].食品工程, 2012 (2) :55-57.
[6]姚敬, 朱杰民, 陈明, 等.在线渗析-离子色谱法测定牛奶中的硫氰酸盐[J].中国卫生检验杂志, 2011, 21 (4) :824-826.
[7]许海东.异烟酸-吡唑啉酮分光光度法测定乳及乳粉中的硫氰酸盐[J].中国卫生检验杂志, 2012, 22 (6) :1277-1280.
[8]陈惠珠, 宣栋梁, 潘璐, 等.乳及乳制品中硫氰酸盐含量的分光光度法测定[J].中国卫生检验杂志, 2012, 22 (8) :1774-1776.
[9]宣栋梁, 朱震海, 蔡嵘.顶空气相色谱测定牛奶中的硫氰酸盐[J].中国卫生检验杂志, 2012, 22 (8) :1754-1756.