染色体异常核型

染色体异常核型（精选7篇）

染色体异常核型 篇1

染色体异常是染色体病中患者表现正常的一类,是不孕症和自然流产患者重要的遗传原因,据人类遗传学家夏家辉等人统计每106~107对夫妇中就有1位染色体异常携带者,也有报道中国一般人群中染色体异常率为0.5%~1.0%[1],在不孕与流产夫妇中,染色体异常携带者占3%~6%[2]。染色体异常中的异染色区多态性与不孕和流产的相关性在目前的相关研究报道中存在不同的观点。该研究对该院2012年1月—2015年12月行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者416例进行染色体核型分析检查,以探讨染色体核型异常患者染色体核型分布、染色体异常与不孕症和自然流产的相关性以及异染色区多态性与不孕症和自然流产的相关性,为遗传咨询提供参考,以达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标,现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

整群收集在该院就诊并进行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者病例,同时对患者进行孕产史、接触史、家族史等可能引起染色体改变的相关信息详细采集。

1.2方法

1.2.1 G显带无菌操作抽取肘静脉血2~3 m L,在超净工作台中种植于10 m L培养基中,放置37℃恒温培养箱培养每日混匀1次,培养70~72 h后加入20 ug/m L秋水仙素100 u L混匀后,再继续培养2.5 h,1 500 r/min离心10 min吸取掉上清,培养物中加入0.075%KC1溶液10 m L低渗处理30 min,加入2 m L固定液预固定10 min离心去上清,加入10 m L固定液固定3次,42℃烤片1 h,隔日进行显带和染色。核型分析:每例至少计数20个核型,分析5个核型,异常者加大计数到60个核型,嵌合型病例计数到100个核型。

1.2.2 C显带新滴玻片42烤片1 h。隔日,60℃的1~5%(过饱和)氢氧化钡液10~15 min,在60℃的2×SSC液中处理90 min时,用自来水冲洗干净,5%Giemsa染液染色10 min。

1.2.3 N显带新滴玻片42烤片1 h。隔日,玻片用4层干净擦镜纸(略小于玻片大小)盖好,置于一干燥培养皿漂于60℃水浴箱水面上,新鲜配制的Ag NO3溶液慢慢滴于玻片纸上,直至擦镜纸呈棕黄色(黑色)为止,轻轻启开擦镜纸,将玻片用自来水冲干净,6%Giemsa染色液染色5 min。发现异染色区、着丝粒和随体异常时进行C显带或N显带分析,根据ISCN 2013人类细胞遗传学国际命名体制进行核型命名。

2结果

不孕症和自然流产患者416例病例核型分析,共检出51例染色体异常核型和2例性腺发育异常病例,异常率为12.26%。

51例染色体异常核型中常染色体结构异常有34例,占66.67%,其中平衡易位25例,占总异常率的49.02%;倒位6例,占总异常率的11.76%,其中9号染色体倒位3例。异染色区多态性例,占总异常率的,其中1 qh+,2例;9 qh+,2例;16 qh+,1例,Yqh+,1例;Yqh-,3例。性染色体结构异常4例,占总异常率的7.84%,其中X染色体臂间倒位2例,X长臂等臂1例;环状X染色体1例。染色体数目异常4例,占总异常率的7.84%,均为性染色体数目异常,其中46,XXY,2例;46,XYY,1例;1例核型为45,X[17]/46,XX[83]的嵌合体。染色体结构异常核型包括性染色体结构异常共38例占到总异常率的74.5%。

3讨论

染色体异常无论是男方或女方都可能导致不孕症及流产,不孕症及流产染色体异常常见得结构异常主要有平衡易位、罗氏易位、倒位等。染色体数目异常导致不孕症及流产常见于性染色体数目异常常见类型如:45,X;47,XXY;47,XYY以及一些嵌合型病例。常染色体数目异常导致不孕症及流产可见于嵌合型染色体核型患者[3]。该文416例患者中共检出51例异常核型,检出率为12.26%,与李亚丽等报道检出率12.6%一致[4]。从检测结果可以看到结构异常病例包括性染色体异常共38例占到74.5%说明染色体结构是引起流产、不孕症的主要细胞遗传学因素,与相关报道结果一致[5],这是由于染色体结构异常患者在生殖细胞减数分裂过程中染色体联会时产生异常联会结构,平衡易位染色体在联会时可形成4射体能够产生18种配子,其中只有1种配子核型正常,1种平衡易位携带配子,还有16种染色体结构异常配子,这16种异常配子都可导致流产;而倒位核型在联会时可形成倒位环可产生4种配子其中只有1种配子核型正常。由于染色体结构异常患者产生异常配子几率较大,所以可能发生不孕和自然流产的概率增大。检测结果中发现9例异染色区多态性,占到异常的17.6%,异染色区多态性是指在正常人群中超过1%携带这类异常,多态性与不孕症及流产的相关性在业内存在2种不同的观点,从报道中也可看出[6,7,8]。该文认为这与染色体检测的分辨率相关,染色体检测在320~400条带阶段分辨率在5~10 MB,即染色体检测是检测不出小于5 MB变异,甚至一些特殊病例由于缺失或重复的染色体带纹处于浅带区,可能超过10 MB的变异也无法检测出来。所以染色体检测中发现的异染色区多态性病例中可能一部分存在微小结构异常,需要更进一步进行分子水平的检测如芯片或高通量测序。随着技术发展染色体检测的优势转变为检测分子技术无法检测的染色体结构异常如倒位和易位。而染色体检测未发现异常患者又排除其它原因导致的不孕不育患者应建议行分子水平的遗传学检测。

综上所述,染色体核型异常与不孕症和自然流产密切相关,也是出生异常胎儿的重要原因。对不孕症及流产患者进行遗传咨询和染色体核型分析是必不可少的,而携带有染色体多态性的患者需要得到足够的重视,应建议进行分子水平的检测。为达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标应进行必要的遗传学咨询、产前筛查、产前诊断。

摘要：目的 分析评价不孕症和自然流产患者染色体核型分布的关系。方法 整群收集该院2012年1月—2015年12月行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者416例进行G显带染色体核型分析,发现异染色区异常病例进行C显带确认,发现随体及随体柄异常进行N显带确认。结果 在对该院就诊的不孕症和自然流产患者核型分析检查的416例样品中,共检出的51例染色体异常核型和2例性发育异常病例,总异常率为12.26%。51例染色体异常核型中常染色体结构异常有34例;异染色区多态性9例;性染色体结构异常4例。染色体数目异常4例,其中1例为嵌合型数目异常。结论 染色体核型异常与不孕症和自然流产密切相关,也是出生异常胎儿的重要原因,为达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标应进行必要的遗传学咨询、产前筛查、产前诊断。

关键词：不孕症,自然流产,染色体核型

参考文献

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[6]秦胜芳,魏萍,曾兰,等.581例多态染色体的临床表现综合性分析[J].中国优生与遗传杂志,2014,22(4):50-53.

[7]王桂玲,任春娥,姜爱芳.染色体多态性qh+与复发性流产关系的探讨[J].中华医学遗传学杂志,2015,32(4):591-592

[8]刘念,阎炯,宋婕萍,等.染色体多态性与复发性流产的关系研究[J].实用妇产科杂志2015,31(1):75-77.

染色体异常核型 篇2

对1月～12月来我们省妇保所进行遗传咨询者888例患者做了外周血染色体检测及核型分析。

1.1 咨询对象 888例受检者均来自贵阳医学院附属医院遗传咨询门诊、男性科、儿科、妇产科等科室。其中男433例，女455例，年龄从新生儿到50岁不等，而40岁以下患者占98.51%，以生育年龄及16岁以下儿童为主，其就诊原因包括不良孕产史、智力低下、原发闭经、无精症及其它。

1.2 方法 针对每个受检者的情况，我们分别进行常规询问病史、体检、抽取外周血，在含25%小牛血清的1640培养基中培养68～72h，低渗、固定、制片、G显带，每例镜下观察30个分裂象，分析3个核型，对异常者加大计数及分析量。

2 结果

888例中检出染色体异常74例，异常核型检出率8.33%，其咨询原因及异常核型检出率情况见表1。

表1 888例咨询原因及异常核型检出情况略

在888例遗传咨询患者中，发现异常染色体13类，其类型分布见表2。

3 讨论

优生遗传咨询是检测遗传病的一种有效手段，通过细胞遗传学的检查发现染色体异常者，提供诊断依据和生育指导。对提高人口素质有较深远的社会效益。

表2 异常染色体核型分布略

3.1 智力低下与染色体异常 本资料在智力低下者中检出染色体异常29例，异常核型检出率为27.88%，居异常核型高位，大部分为21-三体综合征，这主要说明染色体异常特例是21-三体，是引起智力低下的重要原因。因此由于智力低下而就诊者应先进行染色体检查。染色体是遗传物质的载体，不论其结构或数目的改变均会引起智力发育障碍或疾病。国内报道染色体异常引起智力低下约占10%～15% [1～3] ，本资料检出率为27.88%，大大高于国内平均水平，这可能与检测的选择条件不同有关。从染色体畸变类型观察，国内报道是以21-三体综合征为主，占90%，与本资料全部为21-三体综合征，基本相符。

21-三体综合征是最常见的染色体疾病。它以先天性智力低下为主要表现，存活后生活不能自理，且无法治疗。若已婚，生育同样的患儿的几率为50%～100%，严重影响人口素质，给社会及家庭造成沉重的精神及经济负担。 关于21-三体产生的机理，一般认为是由于双亲之一的配子在减数分裂是发生染色体不分离的结果。有资料表明21-三体和罗伯逊易位绝大多数是染色体核突变的。普遍认为造成突变的主要原因首先是环境因素(物理、化学、感染)，另外，与高龄孕妇(>35岁者)的卵子老化有关。在如何减少染色体畸变所造成的先天愚型儿是今后预防中值得重视的问题。

然而，对所有孕妇建立有效的无创伤性产前筛查方法，防止21-三体综合征患儿出生就显得尤为重要，同时，检出及发现21-三体综合征的意义在于，确立异常核型、类型及其家系检查，追踪异常染色体的来源，为推测再生愚型儿的风险提供产前诊断的依据，控制愚型儿的再出生。

3.2 男性不育与染色体异常 引起男性不育的病因很多，染色体异常是其重要原因之一。据国内外资料报道，男性不育患者染色体异常在2.2%～25%之间 [4] 。本资料在男性不育者中检出染色体异常16例，异常率为27.11%，高于上述文献报道，这可能与病例选择有关。16例核型均为47，XXY，体征表现为:身材高大，皮肤细白，睾丸小，无精子，无胡须，无喉结等典型克氏综合征。这类患者因睾丸发育受多条X染色体影响，曲细精管上皮细胞玻璃样变核纤维化，造成生精上皮死亡，故无精子生成 [5] 。

3.3 不良孕产史及染色体异常 本资料以受检者居多的习惯性流产作为代表，因不明原因的流产1/6异常孕产史检出率1.75%，说明异常孕产史，特别是有不明原因流产史是育龄期妇女进行咨询的常见原因。在习惯性流产患者中，检出异常核型8例，均为平衡易位，由于平衡易位没有遗传物质的丢失，虽然本人表型正常，但可以遗传，起生殖细胞在减数分裂中所产生的配子除一种为正常，一种为携带者外，其余均为不平衡配子，故与正常配子结合后可引起流产、畸胎、死胎、生育异常儿等遗传效应，而且生育染色体异常儿的机率达50%～100% [6] ，以上观点表明对于不明原因流产史者或先兆流产史者，进行染色体检查，对寻找病因，指导优生具有重要意义。

3.4 原发闭经及不孕与染色体异常 本文在原发闭经及不孕患者中检出染色体异常7例，异常检出率为3.95%，全部为Turner’s综合征，具有体格娇小，幼稚外阴，子宫小，卵巢萎缩，原发闭经。均为已婚者伴不孕的临床表现，5例核型为45，X，1例嵌合体核型为46，XX/45，X0。就Turner’s综合征患者，1例为46，XX，[X p+ ]，有文献记载:两条完整的X染色体对性腺发育是必须的，Turner’S综合征患者的性腺为条囊状，一般为无功能，雌激素不足，致性器官发育不良，原发闭经及不孕。45，X和以45，X为主的嵌合体核型的发 生，主要是由于早期合子X染色体丢失或有丝分裂不分离所致 [7] ，X长臂染色体的形成可能是双亲之一的生殖细胞在减数分裂Ⅱ期，X染色体发生着丝粒横裂或姐妹染色体单体交换的结果 [8] 。决定身高的基因位于染色体的短臂上 [9] ，本文7例患者表型均符合文献所述。

染色体异常核型 篇3

关键词 男性不育 染色体 核型

造成男性无精子症的原因很多，染色体异常是其中重要原因之一。在此，对珠海市妇幼保健院生殖中心121例男性不育患者进行外周血染色体分析，以明确病因，辅助临床诊断及治疗，并进行生育指导。

资料与方法

2010年1～12月收治男性不育患者121例，均已排除泌尿生殖道感染、精索静脉曲张、输精管发育不良、隐睾、女方不孕等原因造成的男性不育，取外周血进行淋巴细胞染色体分析。年龄25～40岁，精液常规分析方法及诊断参考WHO国际标准。

方法：抽取受检者的外周静脉血2.0ml，采用EDTA抗凝，用含有小牛血清的RPM培养基做体外淋巴细胞培养，收获细胞制片，染色体常规胰酶消化G显带分析，必要时做C显带，银染。计数25个中期分裂相核型，分析3个显带良好的核型，嵌合体计数100个或200个核型以确定其比例。大Y是指Y≥18号染色体，小Y是指Y≤21号染色体。

结 果

121例男性不育患者中染色体异常21例，占全部检查者的17.4%。其中性染色体异常15例，占全部检查的12.4%。检查核型结果，见表1。

男性不育患者中，染色体异常所占比例2.2%～48.3［1］，本次检查有异常核型患者21例，异常率17.4%，结果与报道相符。

讨 论

有学者调查在男性不育患者中，常染色体异常3%～5%，性染色体异常(以Y为主)约10.5%，本组男性不育病例中，性染色体异常12.4%，性染色体异常发生率明显高于常染色体异常，其中以克氏综合征多见。

性染色体异常：⑴性染色体数目异常：本组病例以克氏综合征多见，核型为47，XXY，或嵌合体46，XY/47，XXY。患者智力基本正常或略显迟钝，身材高大，四肢细长，阴茎短小，睾丸发育不良，无精子生成，有男性乳房发育，胡须、腋毛、阴毛稀少。克氏综合征多余的X染色体来自于父亲或者母亲减数分裂时染色体的不分离，X染色体的数目越多其表现型越接近女性。多数患者的阴茎发育较小或有隐睾史，这说明X染色体对男性性腺的发育有着重要影响，X和Y染色体的平衡性对于早期胚胎的发育极其重要。⑵核型为46，XX的男性：身材矮小，临床表现似克氏综合征，超声波检查未见女性生殖器官，对此目前有四种解释：①它是一种性嵌合体，但含Y的细胞是隐匿的，不易被检出。②Y染色体和常染色体或X染色体之间在减数分裂时有染色体片段交换，使含SRY基因的染色体片段易位到常染色体或X染色体上。③常染色体基因突变，突变基因导致H-Y抗原的表达。④一条X染色体的短臂上能抑制睾丸发育的片段丢失或失活［2］。⑶核型为46，XY，大Y或46，XY，小Y个体：Y染色体产生的临床效应一直以来都有争议，有人认为大Y属染色体多态变异，是一种正常的遗传，无临床意义。据表1结果和临床表现相结合，笔者认为大Y地临床意义是不可忽略的，大Y不能视之为正常的核型。小Y得临床表现为小睾丸，小阴茎，与正常Y染色体对比，除了大小不同外，形态和分带均没有变化，导致小睾丸的可能性是Y染色体减少的染色质成分影响了基因的正常表达，从而导致性器官的发育不全［3］。⑷倒位Y染色体：患者表现为表型正常，但精液检查为精子数量明显减少。患者的表型正常有可能是因为倒位并不引起遗传物质的丢失。患者生育能力异常的原因可能是倒位造成染色体结构畸形，配子基因缺失和重复。倒位Y染色体的携带者，在生殖细胞的减数分裂过程中，根据配子形成中同源染色体节段相互配对规律，将形成特有的倒位圈。一般来说，倒位片段越短，其重复和缺失的部分越长，形成配子和合子正常发育的可能性越小，临床表现早期流产，死产的可能性相对较低。相反，倒位片段越长，其重复缺失部分越短，早期流产，死产的可能性相对较高。

常染色体异常：①常染色体畸变：本组病例中常染色体畸变有3例，包括异位2例，倒位1例。本组病例中常染色体畸变比例少，且常染色体畸变包括46，XY，inv(9)。以前很多学者认为9号染色体倒位是正常的多态现象，没有遗传物质的丢失不影响表型。但近年来，越来越多得学者提出了不同意见，大量资料表明很多的不育、胎儿畸型、自然流产等与9号染色体臂间倒位有着一定的关系［4］。②常染色体变异：本组病例中有2例46，XY，9qh+，1例46，XY，13s+。对于此类染色体次缢痕增加及随体的增粗，很多学者认为与男性不育无直接关系，但临床上又无法忽略此方面因素所造成的影响。

其他因素导致的生育障碍：本组病例中常染色体变异核型100例，即这些患者的不育不是由染色体变异造成的，可能存在需要分子生物学技术才能确定的基因突变所导致的精子产生障碍或非遗传学因素造成。Y染色体长臂上存在着控制精子生成的基因位点AZF，它的缺失或微缺失可导致严重的少精、弱精甚至无精。而AZF中最常见的缺失因子是DAZ基因。DAZ基因缺失是造成无精子症的一个重要原因［5］。

综上所述，染色体的异常已严重影响男性不育，这些患者精子的生成与精子的质量均受到不同程度的影响。因此，在临床上对无明确原因的少精、弱精、无精症，或体检怀疑染色体疾病，應进行染色体核型分析，及早查清病因，减少缺陷儿的发生，为进一步的治疗提供依据。

参考文献

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4 何春娜,张海瑞,等.9号染色体臂间倒位对生育影响的研究.中国优生与遗传杂志,1996,4(5):99.

5 余小平,等.男性不育症的细胞遗传学与基因诊断研究.中国优生与遗传杂志,2005,13(2):40.

染色体异常核型 篇4

ALL是一种起源于B系或T系淋巴祖细胞的肿瘤性疾病, 其细胞遗传学表现对于临床治疗方案的确定具有重要的指导意义[2]。检测白血病患者细胞遗传学异常的传统方法为染色体核型分析, 但急性白血病患者的染色体制备较难, 尤其是ALL患者的染色体易成团、不易辨别且显带不清, 导致常规细胞遗传学分析常出现困难[3]。间期荧光原位杂交技术 (fluorescence in situ hybridization, FISH) 能够在很大程度上避免上述问题, 尤其是八探针FISH联合系统可由一次操作完成对八种细胞遗传学异常的观察[4], 优势明显, 对ALL的分层诊断及指导个体化治疗具有实际意义。

1 对象与方法

1.1 对象

2008年1月至2011年5月在南方医院初诊为ALL且行ALL八探针检测与染色体核型分析的儿童病例39例, 其中男21例、女18例, 年龄1~13岁、中位年龄5.2岁。所有病例诊断符合《血液病诊断和疗效标准》。

1.2 方法

39例均行八探针FISH分析及染色体核型分析。

1.2.1 染色体核型分析

采用直接培养法和短期培养法制备骨髓细胞染色体, 采用G显带技术按国际细胞遗传学命名标准 (ISCN 2009) 进行核型分析, 每例患者每次核型分析数均>20个。

1.2.2 八探针FISH

ALL八探针包括针对MYC断裂基因、P16缺失、E2A/PBX1融合基因、TEL/AML1融合基因、BCR/ABL融合基因、MLL断裂基因、IGH断裂基因及多倍体检测共8组探针, 按设计组合标记固定于一张检测玻片, 按试剂盒操作说明进行标本处理、变性、杂交、杂交后洗脱等操作。

1.2.3 荧光显微镜检查

在Nikon E600荧光显微镜下通过三色滤光块 (DAPI/TRITC/FITC) 观察杂交信号, 用Macprobe4.0荧光图像处理系统 (美国PSI) 进行图像分析, 每份间期核标本计数500个细胞并记录杂交信号。

1.2.4 统计学分析

率间比较采用四格表卡方检验, 以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 骨髓细胞染色体核型分析检测

行染色体核型分析的39例儿童ALL患者t (9;22) 0例、多倍体6例、其它数目异常3例、染色体其它结构异常4例。染色体核型异常阳性率为33.33%。

2.2 八探针FISH系统检测结果

39例ALL患者八探针FISH检测成功率为100%。八探针系统检测到ALL患者的MYC易位2例、P16缺失9例、E2A/PBX1重排3例、TEL/AML1重排9例、BCR/ABL易位0例、MLL重排1例、IGH易位2例、超二倍体8例。基因异常阳性率为87.18%。

a表示与染色体核型分析相比P<0.05

3 讨论

ALL以BCR-ABL最为常见, 此外, 儿童ALL还可见E2A-PBX、BCR-ABL[5]等融合基因, 为预后不良的标志。本研究中采用的八探针FISH系统基本上囊括了急淋患者常见的异常基因类型, 通过1次预处理、变性、杂交、杂交后洗脱等操作即能够检测出预设的8种基因是否异常, 方便、快捷、经济, 明显减轻了临床检验实验室的工作量。

本研究结果表明, 对于ALL儿童患者, 应用八探针FISH系统检测细胞遗传学异常的阳性率高于染色体核型分析的阳性检出率, 即八探针FISH系统在急淋儿童患者细胞遗传学检测方面的优势较为明显, 且八探针FISH检测系统可通过不同颜色、不同种类的探针, 一次性对ALL可能出现的多种细胞遗传学进行联合检测, 在操作方面有了明显提高, 也更为经济实用。但值得注意的是, 染色体核型分析与八探针FISH检测这两种方法各有侧重、互为补充, 在ALL白血病患者细胞遗传性异常的检测方面可以有效互补, 两种方法的联合使用可明显提高ALL患者细胞遗传学检测的效率, 是一种省时、高效、灵敏的细胞遗传学检测手段, 对于指导临床治疗及预后意义重大。

参考文献

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宽翅曲背蝗染色体核型研究 篇5

1 材料与方法

1.1 材料

研究材料宽翅曲背蝗雄性个体于2011年7月采自子午岭中湾林场。

1.2 实验方法[9]

1.2.1 活体的预处理

活体腹腔注射0.05%秋水仙素5ul, 经8h后用解剖剪从蝗虫腹腔左侧剪开, 用镊子取出精巢, 放入0.08%的生理盐水中低渗15min, 再浸入固定液内固定12h, 然后移入70%酒精内常温保存备用。

1.2.2 取材

将保存在70%酒精中的精巢小管用镊子夹出置于培养皿中, 放在解剖镜下, 滴加3-4滴固定液, 用解剖针去除精小管表面的结缔组织, 切取其末端膨大部分。放在干净的载玻片上, 通常情况下, 每一载玻片上放3-5个材料。

1.2.3 压片

将取好材料的玻片平放于桌面, 给材料滴上1-2滴45%的冰醋酸溶液软化10-20分钟, 加盖片, 在盖片上覆以2-3层滤纸施压, 使染色体分散良好。

1.2.4 冰冻揭片

压好的片子放置液氮罐中冰冻处理3-5min, 取出后迅速揭片, 室温下干燥或放入恒温箱老化2-7d以备用。

1.2.5 染色

用5%吉姆萨染液倒扣染色1.5-2h, 然后用蒸馏水洗净玻片表面的染液。将染完色的玻片标本于室温下无尘处自然干燥后, 以中性树胶封片, 制成永久玻片标本, 以供镜检及照相。

1.2.6 镜检及拍照

在光学显微镜下进行观察挑选染色好、分散好、染色体形态典型的分裂相, 用显微照相设备进行显微摄影。

2 结果

2.1 染色体数目

选择30个染色体数目清晰的分裂相对染色体进行计数, 染色体数目为2n (♂) =23=22+X, 染色体臂数为NF=41, 性别决定机制为XO型。

2.2 染色体形态类型

染色体组式为3L+7M+1S+X, 包括大型染色体 (L) 3对, RL值为:10.51~15.38;中型染色体 (M) 7对, RL值:5.47~9.42;小型染色体 (S) 1对, RL值为:4.28;X染色体为小型染色体, RL值为2.85。染色体核型为2n (♂) =23=7m+2sm+3t, 染色体可分为三种类型:中着丝粒染色体 (m) 有7对 (L1~L6及L8) , 亚中着丝粒染色体 (sm) 2对 (L7和L9) , 端着丝粒染色体 (t) 有2对 (L10和L11) , 性染色体X为端着丝粒染色体 (如表1、图1, 2) 。

注:染色体相对长度大于10%为大型染色 (L) , 染色体相对长度在5%~10%之间的为中型染色体 (M) , 染色体相对长度小于5%为小型染色体 (S) .染色体的绝对长度 (AL) 为各条染色体的实际测量长度.染色体的相对长度 (RL) 为各条染色体的绝对长度与染色体组的总绝对长度的比值.

3 讨论

1) 良好的染色体制片受多种因素影响, 预处理和取材均是关键环节, 对于得到大量中期分裂相至关重要。其中秋水仙素的注射量和低渗时间是主要因素, 秋水仙素注射量过大, 染色体凝缩, 甚至可呈点状;注射量过小, 则无法起到阻断细胞分裂的作用。每只虫体注射5μL0.05%秋水仙素处理8h, 效果最好。低渗时间也会影响染色体形态, 低渗时间过短, 染色体伸展不好, 呈紧缩状;时间长染色体疏松, 崩解, 甚至出现灯刷染色状外观, 若继续低渗会导致细破裂, 染色体丢失。0.08%的生理盐水中低渗15min可达到较好的效果。取材时切取精小管末端膨大部分 (约是精小管1/4-1/3处) , 适宜作核型分析的细胞较多。染色时, 采用扣染的方法, 可减少杂物沉积在玻片上, 有利于染色体的观察和计数。

2) 本文研究的宽翅曲背蝗隶属于网翅蝗科曲背蝗属, 目前已研究的网翅蝗科种类染色体数目以2n (♂) =17种类为最多, 其次为2n (♂) =23, 而宽翅曲背蝗染色体数目属于后者。染色体数目可以反映属的特征, 相同属的种类具有相同的染色体数目, 不同属之间的染色体数目一般不相同。宽翅曲背蝗在染色体数目和核型上具有属的特征, 但在常染色体相对长度和性染色体形态上表现出物种独有的特性。近些年来, 随着分子生物学的发展, 昆虫系统学研究也已进入分子水平。只有在形态学、细胞分类学和分子系统学三个层次上都进行深入的研究, 建立物种之间的联系, 才能构建更加科学合理的物种亲缘关系。

摘要：用常规染色体制片法对宽翅曲背蝗Paracyptera microptera meridionalis (Ikonn.) 染色体核型进行分析, 结果表明:宽翅曲背蝗的性别决定机制XO型, 染色体数目为2n (♂) =23=22+X;染色体组式为3L+7M+1S+X;染色体核型2n (♂) =23=7m+2sm+3t;染色体臂数为NF=41。

关键词：宽翅曲背蝗,染色体,核型分析

参考文献

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染色体异常核型 篇6

关键词：染色体异常,不孕不育,不良妊娠

染色体的数目异常和结构异常均可导致一系列生理或发育异常, 严重影响生育功能, 男性可发生无精子症、少精子症等;女性可发生原发闭经、原发不孕、反复自发流产和性发育异常等。本研究运用G显带染色体核型分析研究了196对有不良妊娠史夫妇细胞遗传学的变化, 探讨可致不良妊娠结局的各类染色体畸变, 染色体异常对后代的影响, 并对可能涉及到的其它细胞遗传学改变作进一步深入分析。

1 资料与方法

1.1 研究对象

2004年9月～2009年3月来本院就诊的196对夫妇, 均具有不明原因的不孕不育、反复自发流产、死胎、畸胎史。患者年龄为25～39岁, 平均年龄29.3岁。女方行妇科体格检查及辅助检查, 男方行生殖系统及精液化验检查, 对每个患者认真询问其有无流产家族史、放射线或有毒理化因素接触史等。

1.2 染色体培养与分析

常规抽取患者外周血0.5ml, 用1640培养基常规培养72h, 收获细胞, 制片, G显带, 吉姆萨染色, 显微镜下镜检, 分析20个细胞分裂相, 检出染色体核型异常的患者, 必要时行家系调查及部分直系亲属染色体分析。

2 结果

在196对夫妇中, 检出异常染色体核型28例, 占受检夫妇人数的14.28%。男18例, 发生率9.18%, 占异常总数的64.28%;女10例, 发生率5.10%, 占异常总数的35.72%。平衡易位13例, 发生率6.63%, 占异常总数的46.43%, 其中相互易位10例, 发生率5.10%, 罗伯逊易位3例, 发生率1.53%;倒位9例, 皆为臂间倒位, 发生率为4.59%, 占异常总数的32.14%;性染色体异常7例, 发生率为3.57%, 占异常总数的25.00%。28例染色体异常病例的检查结果及临床表现, 见附表。

3 讨论

国内外文献对不孕不育、反复流产、死胎、畸胎等不良妊娠史夫妇染色体畸变率报道不一, 高者达14.5%, 低者仅1.8%, 可能与各自选择的对象、染色体异常识别的水平以及染色体检查指征的设置有关。Fryns[1]综述了1743对不良妊娠史夫妇染色体异常率的平均值为5%～7%, 较普通人群 (1.8%) 显著增高。

相互易位是不良妊娠中的最主要的染色体异常类型。由于平衡易位携带者无遗传物质丢失, 其表型及智力一般正常, 但其生殖细胞在减数分裂过程中可产生18种不同配子, 1种正常, 1种为相同类型染色体平衡易位, 另有16种均为不平衡重组的配子, 当它们与正常配子结合后同样有16/18的机会形成染色体不平衡重组合子, 导致子代发生严重的遗传效应, 临床表现为不孕不育、反复自发流产、 死胎、 畸胎等。易位染色体还干扰正常染色体在减数分裂中的配对或分离, 并产生杂合体, 临床表现为严重的生精阻滞及无精子症。因此对检出的平衡易位携带者, 再孕时进行产前诊断以避免异常胎儿出生是非常必要的措施。本文中13例平衡易位携带者有自然流产史共28次, 畸形儿生育史5次 , 再次为上述理论提供了新的佐证。罗伯逊易位是平衡易位的一种特殊形式。同源罗伯逊易位携带者只能产生单体或三体胚胎, 不能生育正常儿, 应绝育或采用合适的辅助生殖医学技术。非同源罗伯逊易位携带者可产生6种类型的配子, 有孕正常儿、易位携带者、三体或单体胚胎的多种可能。本组检出3例涉及13号、14号和Y染色体臂间倒位携带者。

一般认为, 臂间倒位片段的长短关系到子代胚胎的存活, 倒位片段越短, 则配对交换的机会越少, 一般不会形成新的组合。但是, 一旦发生了配对和交换, 因非倒位片段较长, 交换后重复或缺失的部分较多, 将会导致胚胎死亡。根据遗传规律, 倒位有1/4几率生育正常儿, 但其遗传效应主要取决于重复、缺失片段的长短及其所含基因的致死效应。从本组9例妊娠结局均是多次流产其染色体核型分析结果来看, 应着重考虑后种可能。

Y染色体异态是否与流产有关一直有争议。有学者观察到, 妻子有反复流产的男性大Y发生率明显高于正常人群[2]。研究表明, Y染色体重复的DNA在某些方面可能与合子在早期细胞分裂时有丝分裂发生错误有关, 或与基因调节及细胞分化有关。例如流产的病人都以早期流产为主, 胚胎发生阶段以脑部神经系统发生最早, 在这期间如果有大Y染色体异常基因影响, 可使胚胎发育停止在此阶段造成临床的早期流产[3]。因此, 对于反复流产大Y染色体的现象不容忽视。

在各种染色体多态类型的自发流产和胚胎死亡的发生率比较中, D、G组染色体短臂多态同样可引起一定比率的自然流产和胚胎死亡。其机制可能就是细胞分裂的同源染色体配对时, 染色体多态部分造成同源染色体配对困难, 从而影响细胞分裂而导致胚胎发育障碍, 致使流产、胚胎死亡或子女染色体异常[4]。Hassold认为, 近端着丝粒染色体短臂的结构、功能及变异均有可能在染色体不分离及三体形成中起重要作用[5]。因此, 我们建议, 对夫妇中一方有随体区变异的孕妇进行产前诊断, 可以防止及减少缺陷儿孕育或出生。

对有异常生育史的夫妇应做染色体检查, 以便查明原因对其进行指导 , 必要时利用绒毛、羊水染色体培养等产前诊断手段为优生提供可靠的依据, 最大限度地减少先天性残疾儿的出生, 以提高出生人口素质。

参考文献

[1]Fryns JP, Buggcnhout GV.Structural chromosome rearrangements in cou-ples with recurrent fetal wastage[J].European Journal of Obstetrics&Gynecology and Reproductive Biology, 1998, 81:171-176.

[2]张仕岭, 尹迎春, 王承和, 等.大Y染色体的临床效应[J].中华医学遗传学杂志, 2006, 10 (5) :599.

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染色体异常核型 篇7

1 对象与方法

1.1 对象

2015年1-12月来我院产科门诊进行产前筛查的孕妇27 335例, 经血清标志物AFP、Free-βhCG、uE3检测, 对筛查出的高危孕妇1 095例进行羊膜腔穿刺、羊水培养及染色体核型分析, 1 095例产前筛查高危孕妇预产年龄17.71~47.16岁, 怀孕15+1~20周, 羊水穿刺前均详细告知孕妇穿刺的目的及注意事项, 并按要求签暑知情同意书。

1.2 仪器与试剂

AFP、Free-βhCG、uE3试剂由芬兰Wallac Oy公司生产, 仪器为美国PE公司生产AOTU1235全自动免疫荧光分析仪, 室内质控由宝莱科技公司生产, 室间质评参加卫生部临检中心免疫组产前筛查质控。羊水培养试剂由杭州宝荣科技有限公司生产。

1.3 方法

每例孕妇在规定的孕周内抽取静脉血3ml, 严格按照说明书操作要求测定AFP、Free-βhCG、uE3含量, 采用lifeCycle软件进行风险评估。羊水培养, 取羊膜腔穿刺羊水10ml, 置无菌离心管中离心后, 于培养基中培养, 每例接种2瓶, 于37℃中培养7~9d, 收获, 制片, G显带, 每例计数20~30个分裂相, 核型分析不少于5个。

1.4 判断标准

21-三体高风险切值1∶270, ≥1∶270为21-三体高风险;18-三体高风险切值为1∶350, ≥1∶350为18-三体高风险;开放性神经管缺陷高风险切值为2.5, AFP-MoM≥2.5为开放性神经管缺陷高风险。

2 结果

2.1 高风险孕妇筛查

27 335例接受检查的孕妇中, 筛查出21-三体综合征高风险1 538例, 筛查阳性率5.63%;18-三体综合征高风险41例, 筛查阳性率0.15%;开放性神经管缺陷高风险127例, 筛查阳性率0.46%;高风险总阳性率为6.24%。

2.2 孕妇异常核型分析

1 095例高风险孕妇的羊水染色体检查, 共检出异常核型86例, 异常率为7.85%, 不同年龄组的孕妇异常核型分布见表1。86例异常染色体核型分布见表2。常染色体数目异常28例, 其中21-三体综合征19例 (其中11例年龄≥35, 8例年龄<35) , 18-三体综合征8例 (其中4例年龄≥35, 4例年龄<35) ;常染色体结构异常7例, 涉及1、2、3、5、7、13、20号染色体;性染色体数目异常4例, 性染色体结构异常1例;染色体多态性变异46例。

3 讨论

在提高产前诊断的准确率、降低盲目性方面, 可以采用对孕中期孕妇血清标志物联合筛查作为有力的检测技术。这种联合筛查因为有效、简单、无创, 所以孕妇容易接受, 而通过对筛查出的高危对象进行羊膜腔穿刺、羊水培养和染色体核型分析是确认胎儿是否存在染色体异常的最终方法。本文共筛查了27 335例孕妇的血清标志物, 筛查出的高危孕妇有1 095例, 进行了羊膜腔穿刺、羊水培养及染色体核型分析, 一共检出异常染色体核型86例, 检出率为7.85%。86例中确诊常染色体数目异常28例, 其中21-三体19例, 18-三体8例, 均建议孕妇选择终止妊娠。21-三体和其他染色体病患儿风险、染色体异常检出率, 呈上升趋势, 并且随着孕妇妊娠年龄的增长而明显增加。根据本文分析结果, 孕妇年龄>35岁的异常染色体核型检出率为10.8%。有报道[1]21-三体综合征患儿的孕妇年龄有年轻化趋势, 这与环境因素如空气污染等, 不健康的生活方式如吸烟、饮酒等, 现代化生活节奏快、压力大以及妊娠期病毒感染等有一定关系。美国妇产科医师协会 (ACOG) 2007年在指南中提出, 不论孕妇年龄大小都应对所有孕妇提供产前筛查, 因此有必要将产前筛查作为孕妇产前常规检查项目。然而, 就现有的技术和设备, 还不可能实现100%准确筛查, 总会有漏诊现象。石祖亮等[2]曾报道唐氏儿漏筛的现象。因此, 对产前筛查应严格规范, 让孕妇知晓筛查不等于确诊, 并签订孕妇知情同意书, 避免医患纠纷的发生。

本文统计数据中还有性染色体数目异常4例, 性染色体结构异常1例, 这些都可能产生无法预估的临床后果, 因此都建议孕妇放弃继续妊娠。性染色体异常中有1例为嵌合体。羊水细胞中, 不仅包含有胎儿自身脱落细胞, 还可能存在来自胎盘等胎儿附属物, 也可能有母体细胞污染, 所以在产前诊断时发现嵌合体, 应该鉴别是否是细胞外培养异常还是胎儿外非重要组织细胞的增生、是真性嵌合体还是假性嵌合体等。出现这种情况, 在进行染色体核型分析时, 可将分裂相计数的个数增加, 计数正常核型和异常核型的比例, 异常核型比例越高, 胎儿异常的临床表现通常会越严重。

本文86例染色体异常核型中, 常染色体结构异常7例, 占8.14%, 主要为倒位和易位。染色体核型分析时易位和倒位还是比较常见的, 但是在临床工作中对于易位及倒位的咨询要十分严谨, 应对患儿父母双方的染色体检查, 以确定其遗传是来自父母还是新增的, 然后再作出是否终止妊娠的建议。本文中有3例倒位胎儿确定其遗传来自母亲。患儿父母一方有染色体平衡易位和倒位者, 如果胎儿的染色体是遗传于母亲或父亲, 且表型正常, 则可建议孕妇继续妊娠保留胎儿, 但此类胎儿成年后仍会面临生育风险。因此, 在染色体核型分析时遇到此类染色体异常, 对其潜在的风险应向孕妇及家属充分说明, 结合孕妇的实际情况, 与临床医生一起做出最合适的遗传咨询。不平衡易位的染色体必须建议终止妊娠, 同时建议下次怀孕时必须进行产前诊断[3]。

本文数据统计中, 染色体多态性异常共计46例, 说明多态性变异在产前诊断羊水核型分析中有一定比例, 如染色体臂间倒位、随体柄长度增加、次缢痕长度增加等属于正常变异, 对此类变异基本可考虑选择继续妊娠。但近年来研究[4]表明多态性变异与异常妊娠有关, 如9号染色体臂间倒位等等。生殖细胞减数分裂过程会受到染色质不平衡的影响, 引起胚胎发育异常。遇到此类结果的咨询时, 必须建议对患儿父母双方外周血的染色体检查, 以明确多态的来源, 向孕妇及其家庭成员分析多态可能出现的表型、潜在的风险及患儿成年后可能发生的生育风险。

随着人民对生活水平、生活质量的要求提高, 特别是放开二孩政策以后, 高龄产妇明显增加, 能否生育健康婴儿更是成为每个孕妇及其家庭的希望, 而如何避免生育风险则对医务工作者提出了更高的要求。本文结果显示, 产前筛查高风险孕妇进行羊膜腔穿刺、羊水细胞培养和染色体核型分析, 可以安全、有效地检出胎儿染色体异常, 对降低缺陷胎儿出生率、提高胎儿生命质量、指导优生优育方面具有重要意义。

摘要：目的:探讨羊水细胞染色体核型分析在防止异常染色体患儿出生方面的作用。方法:对龙岩地区27 335例妊娠15~20周的孕妇血清标志物AFP、Free-βhCG、uE3进行检测, 对筛查出的高危孕妇1 095例进行羊膜腔穿刺、羊水培养及染色体核型分析。结果:27 335例孕妇中, 筛查出高风险1 706例, 总阳性率6.24%。1 095例产前筛查高危孕妇, 羊水细胞染色体核型异常86例, 检出率为7.85%, 其中常染色体数目异常28例, 占异常核型的32.56%;常染色体结构异常7例, 占异常核型的8.14%;性染色体数目异常4例, 占异常核型的4.65%;性染色体结构异常1例, 占异常核型的1.16%;染色体多态性异常46例, 占异常核型的53.49%。结论:产前筛查高危孕妇进行羊水细胞培养、分析染色体核型, 可以安全、有效地检出胎儿染色体异常, 对优生优育、避免缺陷胎儿出生具有重要意义。

关键词：产前筛查,产前诊断,羊水细胞培养,染色体核型分析

参考文献

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