杂交1代（共4篇）
杂交1代 篇1
在湟中县种鸡繁育推广中，既要考虑高原地区气候特点，商品鸡的适应性、增重、产蛋量，同时又要考虑降低生产成本、增加经济效益。在繁育推广红宝×罗曼，海星101×海赛克斯肉蛋杂交鸡的基础上，繁育推广父母代安卡红肉鸡公鸡×商品代尼克红蛋鸡母鸡杂交鸡，获得了很好的成绩。现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 试验鸡来源
2005年10月从上海华禽家禽有限公司引进父母代安卡红肉鸡公鸡500羽，从山东佳牧家禽有限公司引进商品代尼克红蛋鸡母鸡4 400羽。
1.2 饲养管理
孵出苗鸡育雏20日龄左右向农户推广，严格按免疫程序接种疫苗，测试其生产性能及经济效益情况。并在等同条件下与红宝×罗曼，海星101×海赛克斯肉蛋杂交鸡进行比较。
2 结果与分析
2.1 商品肉蛋杂交鸡生产性能
测试安卡红×尼克红肉蛋杂交鸡30日龄内育雏成活率、70日龄商品公鸡重、杂交母鸡56周龄产蛋量。并与红宝×罗曼，海星101×海赛克斯肉蛋杂交鸡在同等饲养条件下进行比较(见表1)。
从表1可知，在同等饲养条件下，安卡红×尼克红肉蛋杂交鸡30日龄育雏成活率96.3%，分别比红宝×罗曼和海星101×海赛克斯杂交鸡高2.6%(P<0.05)和低0.40 (P>0.05)。商品公鸡70日龄重3.56 kg，分别增加0.71 kg、0.42 kg;商品母鸡56周龄产蛋156枚，分别增加28枚、12枚。
2.2 经济效益分析（见表2)
从表2可知，在饲料营养、饲养周期、饲养条件同等的10户专业户中测试商品代安卡红×尼克红、红宝×罗曼和海星101×海赛克斯杂交鸡。其结果，20周龄成活率97.1%，分别高6.28%(P<0.01)和0.7%(P>0.05);平均每只入舍饲养鸡创毛利润14.63元，分别增加6.22和4.22元，效益显著。
3 小结
(1)选择以父母代安卡红×尼克红肉鸡为父本，商品代尼克红蛋鸡为母本杂交，其商品公鸡增重基本与父系一致，产蛋量接近母系水平，分别比红宝×罗曼、海星101×海赛克斯肉蛋杂交鸡公鸡70日龄重增加0.71 kg、0.42 kg;商品母鸡产蛋分别增加28枚、12枚，具有显著的杂交优势。
(2)安卡红×尼克红杂交鸡分别比红宝×罗曼、海星101×海赛克斯杂交鸡全期平均成活率高6.28%和0.7%，经育肥后在同等饲养条件下每只鸡分别多创收6.22元和4.22元，经济效益显，其商品鸡苗健雏率高，育雏成活率高，增重快，深受广大养殖户喜爱。
(3)在高原地区农村推广优良的商品肉蛋杂交鸡，既要适应性强，又要生产性能好。其关键问题要选择父系的增重速度、适应性，母系的产蛋量，才能推广群众喜爱的商品鸡苗。
杂交1代 篇2
（编号：）
甲方：（债权方）乙方：（债务方）联系电话：
丙方：（买方）
丁方：（卖方、代还款方）
联系电话： 鉴于：
甲方拥有乙方的债权，在本协议书中甲乙丙丁四方一致同意由丁方代替乙方偿还乙方尚欠甲方之部分货款。
经甲乙丙丁四方友好协商，就丁方代替乙方偿还部分货款给甲方，达成如下协议内容，共同遵守：
一、乙方确认甲方持有乙方合法债权，截止本协议签订日尚欠甲方货款共计 元（大写：人民币），在此过程中，乙方保证持续归还甲方剩余货款。
二、丙方做为路灯购买协议的买方，按照本协议书丁方即卖方的要求，将部分货款支付给甲方，对此丁方保证不撤销、更改本协议约束丙方货款的支付方式和对象，不因本协议书的履行情况中止或解除终止路灯买卖合同的履行。
三、甲方有权在任何支付节点上要求丙方将路灯款项共计： 元（大写：人民币）一次性支付至甲方，对此丁方无任何异议。
四、本协议一式捌份，四方各执贰份，同具法律效力。
五、自甲乙丙丁四方签字或盖章之日起生效。甲方： 乙方： 法定代表人： 法定代表人： 委托代理人： 委托代理人： 丙方： 法定代表人：委托代理人：
丁方： 法定代表人： 委托代理人：
杂交1代 篇3
关键词：张氏红山茶；SSR分子标记；杂交一代鉴定
中图分类号：Q37 ；S688
文献标识码：A
文章编号：1671-2641（2014）02-0000-00
Abstract： Camellia changii， a emerging and rare germplasm resources of the genus Camellia， has very high scientific research value in the research field of hybridize breeding. In order to establish a verity identification method of hybrid from Camellia changii， ten F1 hybrids derived from Camellia changii were identified by Simple Sequence Repeat （SSR） markers. The results showed that hybrid derived from combination of C. changii × C. gigantocarpa only merged specific band as female parent， it might be self –bred progeny；hybrid derived from combination of C. changii and C. japonica ‘Dixie Knight Supreme’ showed no similar band as parents， it might be exogenous consanguinity ， all the other F1 hybrids merged specific bands as parents， it indicate hybridization is successful. Based on the result， verity identification of hybrids could be conveniently carried out by SSR molecular makers.
Key words： Camellia changii； SSR molecular makers； identification of hybrid F1
山茶属植物是著名的茶叶和食用油料资源，也是国际园艺界公认的著名木本花卉，本属的山茶Camellia japonica即为我国的十大名花之一，目前，世界上山茶属植物种类已有280个左右，其中80%以上产于我国，可是作为观赏植物栽培的种类并不多，最常见的有山茶C.japonica、滇山茶C.reticulata、茶梅C.sasanqua、西南红山茶C.pitardii、怒江红山茶C.saluenensis等，并由此选育出上万种观赏茶花品种，在众多育种方法中，杂交育种最重要，据统计，全世界80%以上的茶花品种是通过授粉获得的。寻觅更加与众不同、具有观赏价值的茶花原种来培育新的品种，是茶花育种工作者目前的主要研究工作之一。我国作为山茶属的现代分布中心，茶花植物种质资源相当丰富，其中张氏红山茶Camellia Changii是新近受到重视的珍稀种质资源，它树形优美，枝密花繁，叶光亮全缘，花色鲜红，一年多次开花，不同于其他的茶花品种，成为茶花园艺界热烈追捧的新栽培对象。通过杂交育种改造张氏红山茶花型花色的工作已经开始，对其杂种后代的真实性进行鉴定和评价就显得非常重要。
传统常采用形态学鉴定方法进行杂种鉴定，依靠植株的表型性状来鉴别不同的个体比较直接简便，但有些性状要在特定的生育期才能观测到，时间周期长，有些性状易受环境条件影响，且在对亲缘关系较近的个体的检测上存在不足。近年来广泛应用的分子标记鉴定方法弥补了这方面的不足。合理利用分子标记技术，对品种的真实性进行鉴定，从分子水平上获得最直接的证据，具有准确、快捷、可靠的优点。SSR（Simple Sequence Repeat） 又称微卫星DNA，是目前优秀的遗传标记技术之一，其以信息含量高、显共显性遗传、扩增带型易区分、重复性好等优点，已被广泛用于玉米[1]、棉花[2]、月季[3]等品种纯度和真伪性的鉴定中。在山茶属相关植物研究中，RAPD[4-5]、ISSR[6-7]、AFLP[8-9] 等分子标记已成功应用于亲缘关系鉴定、遗传分析等，然而SSR分子标记技术的成功应用则鲜有报道。
本研究采用SSR分子标记技术对来自张氏红山茶的杂交F1代的真实性进行鉴定分析，以期为张氏红山茶选育种及深入研究张氏红山茶生殖遗传和分子机制提供科学依据和技术支持。
1材料与方法
1.1 材料
供试材料为广东棕榈园艺股份有限公司培育的F1代幼苗。用于本研究的植物材料及其来源见表1。
1.2 方法
1.2.1 DNA提取 新鲜材料经变色硅胶充分干燥后采用改进的CTAB法[15]进行总DNA提取。
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1.2.2 PCR 扩增 经筛选获得两对引物分别为：引物MSCjaH38（5 → 3）：F： TATTGCCTACGACCATTTCCA，R： TTTGAGTTCGTTGCCTTCTCT，引物MSCjaH46（5 → 3）F：AAGAAGAGCAGAGCAACAAGTG，R：CCACACACTTTCCACACTTTTG。扩增程序为：94℃ 30s，58℃ 30s，72℃ 1min，30个循环，72℃ 5min。PCR反应在PTC-200仪器上完成。
1.2.3 PCR产物的检测 以10%的聚丙烯酰胺凝胶电泳，在800V电压下电泳6～7 h检测PCR扩增产物。电泳结束后聚丙烯酰胺以10%的冰乙酸固定10 min，双蒸水漂洗一次，0.2%的硝酸银银染10 min，经双蒸水漂洗一次，以30%的NaOH和5mL37%甲醛显影，至条带清晰为止，最后用10%冰乙酸固定液终止显影，凝胶以双蒸水漂洗两次，过夜风干后进行扫描。
1.2.4 SSR带谱中F1代真实性鉴定标准 母本来自张氏红山茶的杂交组合后代，在某一引物的SSR带谱中，如果所出现的条带具有父本的特征带，判断为真杂种；如果所出现的条带没有父本的特征带只具有母本的特征带，判断为自交种；如果出现父本和母本均没有的杂带，则认为有外来血缘，判断为假杂种[11～12]。
2结果与分析
由引物MSCjaH38对各亲本和杂交一代的样品进行PCR扩增的结果可以判断：张氏红山茶与红花瘤果茶的F1代、张氏红山茶与浙江红山茶的F1代、媚丽与张氏红山茶的F1代这3个为其真实后代，电泳图谱上显示其子代具有父母双亲的特征带；张氏红山茶与博白大果油茶的F1代和母本带型大小都一致，且不具有父本特征带，有可能为自交种；张氏红山茶和超级南天武士的后代出现了父母本均没有的杂带，认为可能有外来血缘；其他组合父母本与子代仅有数个碱基的差别（图1～2）。
由引物MSCjaH46对各亲本和杂交一代的样品进行PCR扩增的结果可以判别：张氏红山茶与博白大果油茶的F1代仅具有母本的特征带，判断为自交种；张氏红山茶与超级南天武士的F1代出现了父母本均没有的杂带，判断可能有外来血缘；其他组合均可以从电泳图谱上看出其F1代具有父母双亲的特征带，为其真实的杂交后代（图3～4）。
引物MSCjaH38和引物MSCjaH46结果的相互印证表明：大部分杂交后代具有双亲的特征带，为其真实的后代；而张氏红山茶与博白大果油茶的杂交后代无论从引物MSCjaH38还是引物MSCjaH46的扩增结果来看，均显示与母本相同的条带，因此判断其为自交种，杂交没有成功；张氏红山茶与超级南天武士的杂交后代从引物MSCjaH38和 MSCjaH46的扩增结果来看均出现了父母本所不具有的条带，即出现所谓的“新带”，原因可能是在减数分裂形成配子体过程中，染色体减数分裂时同源染色体发生配对与交换，或者染色体复制过程中存在碱基发生突变等。因此，出现一些新的条带，并不必然意味着杂交没有成功，而应通过多对引物的联合分析进一步判断。
3 讨论
3.1 分子标记技术及引物的筛选
通过杂交选育新品种，必须对杂交后代进行真实性的鉴定，这是进一步研究的基础。分子标记是DNA水平上的遗传多态性，受外界环境影响较小，广泛应用于植物种质鉴定、遗传图谱构建、目的基因定位、分子标记辅助育种等领域，并发挥着重大的作用。目前已经发展了几十种标记技术，各标记具有不同的优缺点。本研究首先考虑到ISSR分子标记技术通用引物的优点，采用ISSR分子标记技术对杂交后代的真实性进行鉴定，并挑选出10对扩增良好的引物，但由于其扩增条带数目较多，且呈显性标记，不能鉴定出杂合基因型，而不利于比较分析。因而选择了呈共显性、具有丰富的多态性、且重复性和稳定性好的SSR分子标记技术。SSR的最大优点在于它通过简单的PCR反应即可直接检测到已知的DNA特定染色体位点，而避免使用放射性同位素[13～14]。从相关文献中查到的20对引物中筛选到两对扩增良好的引物[15～17]，能同时扩增出父本和母本的特征带，可用于本研究的杂种鉴定。
3.2 SSR分子标记技术在张氏红山茶杂种真实性鉴定中的应用前景
本研究通过筛选的2对SSR引物，对以张氏红山茶为亲本的F1代杂种进行了鉴定，结果表明：除2个组合外，其余均为真杂种。此外，通过形态观测发现，真杂种在形态特征上更接近于父本，但叶的宽度和锯齿特征明显受到母本的影响，由此可见，形态学性状可对杂交后代进行初步鉴定；但对于自交的假杂种，因其形态性状与母本完全一致，无法准确判断其杂种真实性，必须通过分子标记来进一步鉴定。至于鉴定为真杂种的后代是否在花色上兼具了亲本的优良性状，则有待进一步实验研究。
本文应用SSR分子标记技术成功鉴定了来自张氏红山茶的杂种真实性，这是该技术首次在山茶属种质鉴定中的成功运用。从SSR分析结果中可以看出，SSR分子鉴定的结果条带清晰、稳定、可靠。可为张氏红山茶选育种及深入研究张氏红山茶生殖遗传和分子机制提供科学依据和技术支持，也将为山茶属植物中杂种的鉴定及其遗传分析应用奠定良好的基础。
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新加坡：1.5代新移民 篇4
今年开始，新加坡政府为招揽中国人才，将其全球揽才机构“联系新加坡”开设进了上海，并抛出了高薪和居留权两大“橄榄枝”，吸引熟练的专业工人和技师。同时，新加坡放宽投资移民转入资金投资条件，资金到位后3个月全家及主申请人的父母可获得新加坡永久居民，无学历、语言及居住要求。
从清代末年颠沛流离的开拓者，到如今拥有高学历的新移民，新加坡的华人社会是中国人谋求全球发展的一个缩影。
牛车水的新客
新加坡的牛车水原貌馆是华人在新加坡奋斗的最完整纪录。
原貌馆是位于宝塔街上的一座经过翻新的三层裁缝店屋。原貌馆的灯光，就像从店屋狭小的天窗里挤进来的，昏黄而迷离。
19世纪中叶，天灾人祸使得中国境内动荡不安，而在南洋采矿与园丘正需要大量劳力，为了谋生，成千上万的老百姓远赴东南亚“闯南洋”，寻找新生活。
根据城市规范计划，中国移民被分配到一个名叫牛车水的华人村里。祖籍福建的孙崇瑜是牛车水的原住民。他说：“我刚抵达这里的时候，还以为‘牛车水’是一个载着大桶水，用来喷水防止马路尘埃飞扬的牛车。后来，我才知道以前的房子没有水管供应自来水，就用牛车把水运到人家里去。这就是牛车水地名的来源。”
刚来的移民，俗称新客。这些新客在牛车水，第一次接触到这么多种不同的方言，第一次看到印度人、马来人、阿拉伯人、欧洲人及犹太人。新客们就在这个炎热又陌生的地方，开始他们的新生活。
过番到南洋拓荒的新客当中，大多数是没有一技之长的苦力。其他的人有的是商人、教师、学者、戏伶和工匠。新客们最大的梦想就是在南洋发迹，以便能衣锦还乡。但受骗沦为苦力或娼妓的也不少。
“红头巾”是当时独身卖苦力妇女的统称。红头巾卢亚桂19岁从香港坐船，颠沛了7天抵达新加坡。途中，她看着水手把病童的尸体丢进海里：“我们刚到这里时，只是想赚点钱，然后回乡去。但是，到了之后，就想多留一会儿，做久一点。这样一天又一天地拖延下去，过了一阵就完全忘了回乡。”
建于1810年至1900年间的牛车水传统店屋，一般有两三层楼高。一楼和二楼各分成七八个小房间，出租给房客。每层只有二三十平方米，但住户最多时达40人。屋内最主要的陈设就是床，吊床、地板、床板，只要是能容身的地方就住人。
所有人共用一间厨房、冲、凉房和厕所。公用厨房不到10平方米，却支了8家房客的炉子。食物与餐具只能存放在各自的小房间里，洗刷碗碟时，大家必须共用一个水龙头。厨房最里端还要隔出2间各 1平方米大小的冲凉房和厕所，人一多起来，做饭的各自喧嚣，争用冲凉房和厕所的争执声盖过油烟。
原貌馆里布置了一间灵堂，像卢亚桂这样的红头巾和自梳女们终身不嫁，直到老死都把辛苦挣到的每一分钱寄回中国家乡。为了给他们送终，牛车水里还有专门提供孝子哭灵的服务。
原貌馆是新加坡旅游局大中华区首席代表蔡永兴的创意，也是他操作最成功的项目之一。他说：“我是华裔第二代，直到做了这个项目，才真正领悟到第一代移民身上‘牺牲小我，完成大我’的精神。原貌馆使现代的新加坡人领会早年移民的精神，这在现今的社会已经很难找到。对于中国游客来说，在这里更能深切体会中国与新加坡一个多世纪的渊源。”
1．5代新移民
“过去第一代移民和现在新移民追求的角度和起点已经完全改变了，过去是为生存而战，现在是为发展而打拼。”新加坡新传媒电台主持人张劲东一口纯正的普通话，标准的新移民。
在新加坡完成MBA学业后，张劲东留下来寻求二次发展。从小就梦想过在小小的收音机匣子里讲话的他，面试时从 500人中脱颖而出。移民10年，新加坡的工作及生活空间都令他满意。在新加坡能够凭努力、才干而获得应有的回报，他说这是很多新移民最看重的地方。
高学历、年轻化，咸为这一批新移民最大的特征。
新加坡的媒体对新移民也越来越重视，《联合早报》、《联合晚报》、《新明日报》等华文报章都开设专版，专门报道新移民在新加坡的生活、工作、学习、创业等情况，同时推出法律信箱、活动介绍等服务性栏目，以吸引新移民读者。
留学英国、并在上海就业半年后，宋娓最终选择了新加坡，并创办了新加坡海外华人的第一份文化生活杂志——《扬时代》。
“随着中国经济起飞，中国新移民形成了新加坡社会新关注点，这种由经济带来的人力资源趋势，正在逐渐改变新加坡人对新移民的接受态度。”
宋娓认为，第二代移民在新加坡出生并成长，已经彻底本土化，而新移民应被称作“第1．5代移民”——处于两代的夹层中，利用新加坡的平台，加上中国经济腾飞的时机，具有前后两代人不具备的优势。
新加坡中华总商会企业管理学院的崔东红正是这样的新移民。在国内，她曾是河北理工大学老师，又在新加坡国立大学读完了MBA课程。
管理学院面向在职人员提供各种培训，崔东红现在最忙活的是组织类似于中小型企业常年大会一般的中新两国企业交流合作。
她告诉《瞭望东方周刊》：“中国经济的发展使新移民在海外扮演的角色越来越重要，因为相互的商贸交流和文化交流过程中，有双边社会背景的新移民发挥空间比较大。”
游走中的“跨国华人”
在新加坡，中国新移民已经成为全民热议的话题。
新加坡人曾对中国新移民心存顾虑。“中国孩子读书太厉害，抢了我们孩子的好前程。”一位新加坡母亲在当地一家英文报纸上这样写道。
随着中国经济的腾飞和新加坡政府力推多元文化和多元种族和睦相处，甚至连时间也调整为北京时间，顾虑逐渐演变成接纳，
中国社会科学院民族研究所副研究员曾少聪是国内为数不多的东南亚新移民研究者。他指出，较之第一代移民，新移民有强劲的经济实力和较高的文化素质，更愿意加入所在国国籍，同时他们对强化华人族群意识起着重要作用。
在新加坡国立大学小文系任教的刘宏也是新移民。他把新移民称为“跨国华人”，因为新移民对移居国和原居国都有贡献。
“和上个世纪初的老一代移民相比， 1990年以来的新一代中国移民，已经跳脱了‘落叶归根’和‘落地生根’这两种情感归属，而是游走在两者之间，试图在民族国家的情感和全球化趋势下取得一种平衡。”刘宏解释道。
也许国家经济和实力的发展，正在使人们逐渐忘却国界，按自己想要的方式生活。
在新加坡中国新移民越来越多的同时，一部分移民却正在“回流”。崔东红的一位朋友是跨国公司IT工程师，在新加坡取得永久居住资格，有房有车，去年回了一趟上海就再也不想回来了。他说：“在上海我才找到了生活，和这里相比在新加坡只是生存。”