胶原蛋白的简介

胶原蛋白的简介（共12篇）

胶原蛋白的简介 篇1

欧菲丽胶原蛋白简介-含有鱼鳔的胶原蛋白

Ophélie是一家法国食品化妆品添加剂的原料供应商，总部在巴黎，为法国及欧洲众多化妆品企业提供原料供应，欧菲丽始创于1989年，是Joly Ophélie 博士已自己名字命名的品牌，Ophélie 是目前欧洲十大原料供应商之一，欧菲丽有自己的独立品牌Ophélie系列口服营养素，主要用于医疗美容领域，服务于全欧洲高档美容机构及医院，同时Ophélie研究机构为众多演艺人士私人提供定制营养品，目前已有2000余位欧美人士享受定制服务，量身打造适合您皮肤的完美组合。

品牌简介

北欧挪威是块令人充满幻想的领域，挪威港口、峡湾颇多，其中特隆赫姆Trondheim、奥斯陆OSLO、松恩峡湾等颇负盛名，挪威鳕鱼也是世界一大特色，挪威有世界上吞吐量最高的鳕鱼港口，法国，德国多数都是从挪威进口鳕鱼，鳕鱼也为许多国际顶级护肤品原料，来自法国的欧菲丽鱼鳔胶原蛋白原料即来自于挪威港。挪威位于斯堪的纳维亚半岛西部，东与瑞典接壤，西邻大西洋，蜿蜒曲折的海岸线构成了挪威特有的峡湾景色。除了特有的峡湾风景，挪威鱼港也是很多人向往的地方。

品牌特色

1.鱼鳔鱼胶原蛋白粉：鱼鳔=鱼泡

1鱼鳔本身是由生物小分子胶原蛋白质构成的，是人体补充合成高级蛋白质顶级的原料

2.极易于被人体吸收和利用，并且主动参与并影响人体新陈代谢过程，这是它独有的功能 因此比同类产品见效更快

3.深海鳕鱼鱼鳔较厚，受水压力大活性强，更能强劲锁住30倍水分，因此“>”15°的冷水中可以迅速崩解，天然生物蛋白质中最优的亲水性，最强的锁水能力。.人类食用历史超过4000年，天然燕窝，海参，鱼鳔，被誉为天然女性滋补极品

5.医学领域内鱼鳔被做为补精益血的良药6.鱼鳔价格不菲，每千克鱼鳔冻干粉约10000元 欧菲丽胶原蛋白粉每100克含15克鱼鳔胶原蛋白

6、.欧菲丽鱼鳔胶原蛋白含有五胜肽（peptide）促进胶原蛋白、弹力纤维和透明质酸增生，提高皮肤含水量，增加皮肤厚度和减少细纹，与A酸相似。胜肽是欧美近几年掀起的保养热潮，胜肽即肽链

7.顶级护肤大牌都选用鱼鳔胶原成分当做原料，HR的胶原系列，DIRO逆时空面霜等产品，一分价钱一分货，产品效果才是爱美的你最终的追求吧。

8.护肤只是让我们的皮肤看起来更健康，尽量延缓皮肤衰老，但老化一旦发生，单靠护肤品是无法逆转的，内部补充肌肤必须的营养才是关键要做到的，欧菲丽天然医学护肤的探路者，致力于为您创造更科学，更优质的产品

9.关于鳕鱼原料，很多人都有误解，欧洲捕鱼业比较发达的国家是北欧国家挪威，挪威有世界上吞吐量最高的鳕鱼港口，法国，德国多数都是从挪威进口鳕鱼。挪威鳕鱼港每年出产和加工鳕鱼产品占世界总量的%35左右，欧菲丽胶原蛋白粉原料均来自挪威S...法国欧菲丽营养机构提供技术支持

品牌理念

挪威饮食离不开鱼类和水产品，首屈一指的是新鲜鳕鱼、熏鲑鱼、鲱鱼等。鳕鱼属冷水

性底层鱼类，为北方沿海出产的海洋经济鱼类之一。挪威鳕鱼肉质白细鲜嫩，清口不腻、世界上有不少国家都把鳕鱼作为主要食用鱼类。在挪威鳕鱼除鲜食外，还加工成各种化妆品，鳕鱼富含大量的维生素、胶原蛋白，鳕鱼鱼泡被世界许多著名护肤品作为原料，也因此素有顶级护肤品原料之称。

挪威是目前世界上最大的鳕鱼港口，据了解，来自法国的欧菲丽胶原蛋白原料即来自于挪威的深海鳕鱼鱼鳔萃取而成，鱼鳔加工成的胶原蛋白肽链属于5胜肽，营养成分与实际功效远超普通胶原蛋白，是欧洲女性青睐的明星级养生护肤保健品。

领略美丽神秘充满幻想的峡湾风景，体验具有历史蕴含的岛国风情，品味世界顶级护肤品欧菲丽胶原蛋白原料鳕鱼鱼鳔制成的美味，一趟挪威之旅，必定完美尽兴。

胶原蛋白的简介 篇2

1. 仪器及实验材料和试剂

1.1 仪器

UV300紫外-可见分光光度计以及工作站 (美国热电) ;SIMS50000个人型纯水器 (美国MILLIPORE) ;BP211D分析天平 (德国Sartorius) ;HWS26型电热恒温水浴锅 (上海一恒科技有限公司) ;ZH-2自动漩涡混合器 (天津药典标准仪器厂) ;5ml具塞纳氏比色管。

1.2 实验材料和试剂

硫酸铜 (Cu SO4·5H2O) (天津市化学试剂三厂分析纯) 、酒石酸钾钠 (C4H4O6KNa·4H2O) (中国·郑州派尼化学试剂厂分析纯) 、氢氧化钠 (Na OH) (中国医学科学院天津协和医学科技公司分析纯) ;胶原蛋白对照品由陕西巨子生物技术有限公司提供;胶原蛋白贴敷料由陕西巨子生物技术有限公司提供 (批号:20101011、20101113、20101215) 。

2. 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 双缩脲试剂的制备

称取1.50g硫酸铜 (Cu SO4·5H2O) 和6.0g酒石酸钾钠 (C4H4O6KNa·4H2O) , 用500m l纯化水溶解, 在搅拌下加入300ml10%Na OH溶液, 用纯化水稀释至1000ml, 摇匀, 即得。

2.1.2 空白溶液的制备

在5ml具塞纳氏比色管中加入1ml纯化水, 加双缩脲试剂至5ml, 用自动漩涡混合器充分摇匀后, 在37℃水浴下恒温放置30min, 作为空白溶液。

2.1.3 胶原蛋白系列标准溶液的制备

精密称取胶原蛋白适量, 用纯化水做溶剂稀释成每1ml含10mg的胶原蛋白标准储备溶液。分别精密量取标准储备液2ml、4ml、6ml、8ml、10ml、15ml、20ml加入100ml容量瓶中, 纯化水定容, 配制成0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/m l、1.0mg/m l、1.5mg/m l、2.0mg/m l的胶原蛋白标准系列溶液备用。分别精密吸取上述标准溶液各1ml, 移入5ml具塞纳氏比色管中, 加双缩脲试剂至5ml, 用自动漩涡混合器充分摇匀后, 在37℃水浴下恒温放置30min。

2.1.4 供试品溶液的制备

取胶原蛋白贴敷料, 挤压贴膜, 汇集挤出液于25ml烧杯中, 精密吸取挤出液5ml至10ml量瓶中, 加纯化水稀释至刻度, 摇匀。精密量取1ml, 移入5ml具塞纳氏比色管中, 加双缩脲试剂至5ml, 用自动漩涡混合器充分摇匀后, 在37℃水浴下恒温放置30min。

2.2 线性关系考察

以空白溶液为参比, 依据紫外-可见分光光度法, 在540nm对7个浓度的胶原蛋白标准溶液测定吸光度。以对照品溶液吸光度为纵坐标 (y) , 对照品溶液浓度为横坐标 (x) , 绘制工作曲线, 计算回归方程。结果见表1, 标准曲线见图1。

2.3 精密度试验

取0.6mg/ml的对照品溶液, 重复测试6次, 测定吸光度, 结果RSD为2.3%, 表明仪器的精密度良好。

2.4 稳定性试验

取20101011批样品, 在0、2、4、8、24小时分别按供试品溶液制备方法制得供试品溶液, 测定吸光度。结果RSD为1.9%, 表明样品溶液在24小时内基本稳定。

2.5 重复性试验

取20101011批样品, 按供试品溶液制备方法制得供试品溶液, 平行6份, 测定胶原蛋白含量。结果RSD为2.8%, 表明该方法的重复性良好。

2.6 加样回收率试验

取20101011批样品5ml至10ml量瓶中, 加纯化水稀释至刻度, 摇匀, 再精密量取0.5ml, 移入5ml具塞纳氏比色管中, 平行6份, 分别加入浓度为1.0mg/ml胶原蛋白对照品溶液0.5ml, 加双缩脲试剂至5ml, 用自动漩涡混合器充分摇匀后, 在37℃水浴下恒温放置30min, 依据前文的方法测定, 计算回收率及其RSD。结果见表2。

3.样品测定

分别测定胶原蛋白贴敷料3批样品中胶原蛋白含量, 平行操作, 取平均值。结果见表3。

4.讨论

比色法测定胶原蛋白贴敷料中胶原蛋白含量的原理是:在强碱性溶液中, 蛋白质与Cu2+形成紫色络合物, 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比, 利用标准胶原蛋白溶液作对照, 采用比色法测定样品胶原蛋白质含量。试验结果表明该方法准确、快速, 实验仪器简单、操作方便, 测定数值重现性好, 可用于胶原蛋白贴敷料中胶原蛋白含量的控制。

参考文献

胶原蛋白与胶原蛋白肽 篇3

随着年龄的增长，人体内的胶原蛋白会逐渐流失。女性从25岁开始进入胶原蛋白流失的高峰期，40岁时，含量不到18岁时的一半。胶原蛋白的流失导致支撑皮肤的胶原肽键和弹力网断裂，其螺旋网状结构随即被破坏，皮肤组织被氧化、萎缩、塌陷，肌肤就会出现干燥、皱纹、松弛无弹性等衰老现象。老年人脸上深深浅浅的皱纹，正是因为胶原蛋白和水分流失而造成的。所以，要保持年轻体态，补充胶原蛋白是十分必要的。

猪蹄、鸡爪、鱼皮、软骨中都属于胶原蛋白含量丰富的食物，然而，胶原蛋白是一种大分子的蛋白质，分子量约为30万，进入人体之后，必须被消化、分解为游离氨基酸才能被人体吸收、利用。所以，如果靠吃脂肪含量较高的猪皮、鱼皮这种食补的方法来补充胶原蛋白，不仅利用率低，还只会越吃越胖。

为了提高胶原蛋白在人体中的利用率，必须将大分子的胶原蛋白进行热变性后提炼成明胶，再用蛋白分解酶对明胶进行加水分解，形成分子量在数百至数千范围内（小分子）、易溶解的胶原蛋白肽。因此，对胶原蛋白产品来说，其原料来源是判定产品优劣的首要指标。

研究表明，鱼鳞是生产优质胶原蛋白肽的最佳来源。采用先进的酶解技术生产出来的鱼鳞胶原蛋白肽不含任何脂肪和嘌呤，其灰分、脂肪、糖分等均低于鱼皮胶原蛋白肽，且对人体的亲和性最好。

胶原蛋白肽在医疗领域中，广泛应用于人工角膜、烧伤的敷料、手术时预防粘连的薄膜、止血剂、手术用线、人工血管等产品。目前市面上可食用的胶原蛋白产品中，大部分都使用的是经酶解的小分子的胶原蛋白肽，但大家仍将其称为“胶原蛋白”。

近些年，人们主要关注胶原蛋白在皮肤美容方面的作用，不少化妆品和功能性食品都将含胶原蛋白作为卖点。实际上，随着对胶原蛋白认识的不断深入，人们发现，胶原蛋白肽对增加骨密度、减轻关节疼痛、减少紫外线伤害、改善脆甲症等方面都有着很重要的作用。

日本的胶原蛋白肽市场发展迅速，据统计，2003年日本的胶原蛋白肽在各领域的总使用量为1 300吨。之后市场急速扩大，到2010年总使用量达到5 400吨，其中5 100吨用于食品领域，占绝大部分，80吨用于医疗领域，80吨用于工业领域，出口量为130吨。

（本文内容由日本日皮株式会社胶原蛋白研究所提供）

胶原蛋白人工肠衣的制造方法 篇4

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怎样补充胶原蛋白 篇5

很多的食物中都含有丰富的胶原蛋白，像大家都知道的猪蹄、猪皮等等都是胶原蛋白丰富的食物，大家在日常饮食中不妨可以适当的多摄取一点，日常生活中还要减缓胶原蛋白的流失。

如何减缓胶原蛋白流失由“预防”做起，减缓胶原蛋白流失和变性是很必要和有效的方法。我们还可以通过提高皮肤细胞的新陈代谢，来达到自身补充和修护胶原蛋白的目的。

首先是防晒，皮肤医学专家认为，90%以上的皮肤提早老化都是不当的阳光曝晒造成的。其次，要注意饮食均衡，尤其要多摄取含抗氧化物质的蔬果，如胡萝卜、西红柿、葡萄等，还要适量喝点红酒和茶，以保护皮肤内的胶原蛋白。

一些高品质的超音波美容仪，可形成每秒一百万次的细胞振颤，其穿透力可达皮下5-6公分，利用这种按摩，能刺激皮肤深处的细胞，使皮下深部温热，皮下毛细血管血流顺畅、淋巴组织免疫功能增强，代谢状态得以改善，细胞被活化，促进胶原蛋白的生成，维持弹力纤维的良好状态，使皮肤恢复活力。

胶原蛋白的简介 篇6

温度对鱼鳞胶原蛋白二级结构的影响

摘要：从草鱼鱼鳞中提取酶溶性胶原蛋白(PSC),通过SDS-PAGE电泳分析为典型Ⅰ型胶原蛋白且达到电泳纯.在此基础上利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、拉曼光谱(Raman)和圆二色谱(CD)研究了温度对鱼鳞胶原蛋白二级结构的影响.FTIR分析表明:鱼鳞胶原蛋白具有典型的胶原蛋白特征吸收带,酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ和酰胺Ⅲ带的`特征吸收频率分别出现在1 658,1 552和1 238 cm-1处.随温度升高,酰胺A和酰胺B峰位向低波数移动,1 658 cm-1处吸收峰裂解成多个吸收峰;1 552 cm-1处的吸收峰在35℃微略红移,随后发生明显蓝移;1 238 cm-1处吸收峰随温度升高向低波数移动.在拉曼光谱中,胶原蛋白的酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ和酰胺Ⅲ带的特征吸收频率分别出现在1 669,1 557和1 245cm-1处,都较红外光谱的波数高;此外,921和855 cm-1处脯氮酸的特征谱峰在拉曼光谱中体现出来.圆二色谱分析表明,胶原蛋白溶液在221.6和204.4nm分别有一正、负峰,具有典型胶原蛋白三螺旋结构的特征圆二色谱峰型.胶原蛋白冻干品的FTIR光谱和Raman谱线大都在35～60 ℃时发生波数和强度改变,而胶原蛋白乙酸溶液的CD谱线在20～35 ℃之间发生剧烈改变.由此可以判断胶原蛋白在固态和溶液状态下,变性温度存在一定差异,胶原蛋白冻干品比其乙酸溶液更稳定. 作者： 钟朝辉李春美顾海峰窦宏亮周丽明 Author： ZHONG Zhao-huiLI Chun-meiGU Hai-fengDOU Hong-liangZHOU Li-ming 作者单位： 华中农业大学食品科技学院,湖北,武汉,430070 期 刊： 光谱学与光谱分析 ISTICEISCIPKU Journal： SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS 年，卷(期)： ,27(10) 分类号： Q518.1 关键词： PSC 温度 FTIR Raman CD 二级结构 机标分类号： U45 S71 机标关键词： 温度升高鱼鳞胶原蛋白溶液蛋白二级结构酰胺圆二色谱吸收峰拉曼光谱特征傅里叶变换红外光谱乙酸溶液吸收频率波数分析表冻干品三螺旋结构移动溶液状态谱线色谱峰 基金项目： 湖北省科技攻关重大专项基金，农产品加工关键技术研究与开发项目

胃蛋白酶提取猪皮胶原的研究 篇7

长期以来,从动物皮中提取胶原备受人们的关注,已成为研究热点。迄今为止,胶原蛋白的提取方法主要有酸法、碱法、酶法和结合法[6]等。酸法是采用低离子浓度的酸性条件,破坏胶原多肽键间的盐键和Schiff键,引起纤维的膨胀、溶解,其溶解量很少。碱法则容易造成肽键水解,所得到的水解产物分子质量较低,同时可能会产生具有毒副作用的DL氨基酸消旋混合物。酶法水解则具有水解快、无污染以及产量高等优点。前人所做的对比研究表明,酶法是比较理想的胶原提取方法,其提取产物可应用于生物医学领域。胃蛋白酶作为酶法提取胶原的主要酶制剂,其p H值为1.5~2.5时活性最强,酶用量为底物的1%~5%较为合适[1]。

过去,医用胶原的研究主要集中在牛腱、人的尸体皮、鼠尾腱等原料上。这些原料不仅来源有限且有感染重大疾病病毒的危险[7]。然而,猪皮作为我国资源最为丰富的一种动物皮,其一些天然优势却被忽视,未受到应有的重视。同时以猪皮为原料制备医用胶原的报道也十分有限。因此,以猪皮为原料提取胶原蛋白的研究,具有重要的实际意义[1]。

1 试验部分

1.1 主要试剂与仪器

胃蛋白酶(1∶3000),Sigma公司;

对二甲氨基苯甲醛,上海三爱思试剂有限公司;

三羟甲基氨基甲烷,成都科龙化工试剂厂;

氯胺T,上海佘山化工试剂厂;

纯化猪皮,实验室自制;

其它试剂无特殊说明均为市售分析纯。

酸度计pHS-3B,上海雷磁仪器厂;

磁力搅拌器RCT-basic,广州仪器实验室技术有限公司;

高速离心机LG10-24A,北京医用离心机厂;

真空冷冻干燥机Free Zone 6,Labconco公司;

紫外可见分光光度计UV751GD,上海分析仪器总厂;

电泳仪Powerpac basic,美国Bio-Rad公司;

凯式定氮仪399Distillation,瑞士BüCHI公司。

1.2 研究思路与方法设计

酶法是目前普遍采用的胶原提取方法之一。对于酶促反应,不同底物的影响是十分明显的。采用胃蛋白酶水解猪皮制备胶原的过程亦是如此。前期的探索试验表明,影响胃蛋白酶水解反应的因素主要有水解温度、pH值、酶用量、液比及水解时间[8]。同时,由于胶原具有较低的热稳定性,温度超过其稳定值后即发生变性。虽然各文献报道的胶原变性温度因来源不同而略有差异,但都不超过40℃。因此,猪皮胶原的提取要保持在较低温度下进行。有文献报道[9],整个过程应保持在低于10℃下进行。因各因素的影响交错,难以将某个条件抽离出来。于是为了方便起见,且根据前期研究的成果,在本项研究中主要以胃蛋白酶的用量、水解pH值、水解温度以及液比4个因素为考察对象,且根据本实验室前期研究的成果,确定了每个影响因素的水平数为3个,采用正交设计法得到酶法水解的正交试验安排一览表(详见表1、表2),然后,按照表2进行试验,并对结果进行了统计分析,从中找出了酶法提取猪皮胶原蛋白的最佳条件[8,10]。最后根据正交试验的结果,再设计试验对胃蛋白酶水解猪皮胶原蛋白的过程进行研究,以获得更多的水解过程信息,从而为优化工艺提供数据基础。根据酶促单底物反应的动力学原理,特定反应条件下的反应速率仅与底物浓度有一定的函数关系,而与酶的用量、酶的浓度无关,即米氏方程:v=Vmax×[S]/(Km+[S]),其中Vmax为最大反应速度,Km为米氏常数,[S]表示底物浓度[10]。因此,以酶用量为主要参数(酶用量分别为1.5%、2.0%、2.5%)安排试验,同时对水解过程进行跟踪检测,以统计学的方法进行数据处理得出最佳水解时间,同时用数学方法对该过程进行了模拟分析。

1.3 提取猪皮胶原的工艺过程

参考本研究室前期提取胶原的方法[10]提取猪皮胶原。

(1) 预处理与浸酸：

准确称取一定质量的干燥皮块(质量记为M0,约5g),用大约20倍质量的pH值7.4的Tris-HCl缓冲液浸泡2h,低温保存(4℃),间隔搅拌。2h后皮块稍有膨胀感,细小颗粒悬浮物能明显地看到。然后倒去清液。加入一定量的0.5mol/L的HAC溶液,检测调节pH值并保证一定的液比后静置浸泡2h。

(2) 酶水解:

准确加入相应质量的进口胃蛋白酶(1∶3000),于设定温度下连续搅拌26h(在水解过程中,每隔4h取样离心,用来测定羟脯氨酸变化和电泳)。

(3)盐析:

酶消化完成后,离心分离(8000r/min,15min),小心吸取上清液,用NaOH溶液调pH值为弱碱性(7.50左右),根据试样体积,以(NH4)2SO4最终浓度为1.5mol/L计,在10~15min内缓慢加入(NH4)2SO4,然后连续搅拌使之溶解,此后,静置过夜(10~12h)。

(4) 酸溶解:

盐析后，在8000r/min条件下离心15min，取沉淀，弃上清液，用适量0.5mol/LHAC溶液将沉淀洗脱下来，在4℃下搅拌30min后，得到胶原蛋白溶液母液。

(5) 透析与干燥

将试样倒入透析分子质量为8~10kDa的透析袋中,先用0.04mol/L和0.02mol/LNa2HPO3溶液透析2d,然后用蒸馏水透析3d。紧接着,将试样冷冻干燥,得到固体胶原蛋白,包装称重(质量记为M1)后密封

(6)纯化(在优化条件下完成):

在得到胶原蛋白母液后,将母液的pH值缓慢调为2.2左右,在转速为8000r/min时离心15min,取上层清液,根据溶液体积,在10~15min内边搅拌边缓慢加入一定量的(NH4)2SO4。然后将试样清液的pH值调为7.00左右,低温(4℃),静置过夜(10~12h),离心分离取沉淀(8000r/min,15min)弃上清液,将沉淀用适量0.5mol/LHAC溶液洗脱,低温(4℃)搅拌30min,最后将胶原蛋白如上步骤透析干燥[8]。

1.4 酶法水解提取胶原蛋白的评价指标

(1)胶原蛋白的水分含量测定[11]:

采用烘箱法,准确称取适量胶原蛋白海绵,于100~105℃干燥至恒重,由此计算其水分含量。

(2)羟脯氨酸的测定[10]:

采用标准曲线法检测,试样经浓盐酸高温条件水解,与氯胺T作用后对二甲氨基甲醛显色,于558nm条件下测定吸光值,再由标准曲线求羟脯氨酸含量。

(3)分子质量分布的测定:

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析胶原蛋白试样,胶原蛋白溶液与含有β巯基乙醇的样品缓冲液混合后,于沸水中煮沸3~5min,可以使胶原蛋白的α-、β-等异构体分离[12]。由于样品缓冲液中十二烷基磺酸钠(SDS)的影响,胶原蛋白在电泳凝胶中的移动只与其分子质量相关,且由于胶原蛋白-SDS复合物总电荷呈阴性而往阳极移动,据此测定分子质量的分布。

(4)蛋白质含量的测定[11]:

采用凯式定氮法定量检测试样中的总氮含量,是一种在行业中采用的蛋白质含量标准测定方法[13]。蛋白质作为一种含氮的有机化合物,当蛋白质与浓硫酸和催化剂一起加热时,其所含的氮能转化为铵盐,在碱性条件下可蒸馏分离为氨气,经硼酸吸收可采用标准硫酸滴定,根据标准酸的浓度和消耗量,推算出样品的含氮量,乘换算系数以此计算蛋白含量。

(5)统计学处理:

采用Mean±standard error的形式表示。

2 结果与讨论

2.1 酶法提取猪皮胶原的正交试验

以产率为评价指标,对正交试验结果进行分析评价。胶原酶法提取的正交试验结果如表3所示,各因素效益曲线图如图1所示。

从中可以看出:酶用量的极差值最大,说明酶用量对产率的影响程度最大,pH和温度的影响程度次之,而液比的影响程度是最小的。就酶用量而言,适量的胃蛋白酶用量可以使酶促反应朝正反应方向移动,太少的酶用量不足以使底物深入反应;而当酶浓度较高时,随着反应的进行,反应液中水解出的胶原蛋白的量、非胶原蛋白的量等逐渐增多,这些大分子物质的存在,阻止了酶分子向皮中的扩散或需要更长的时间,表现在水解效果上即胶原产率在较高酶浓度的条件下降低。在较低pH值时产率较低,这可能有2点原因,一是因为pH值过低,使胶原过度水解生成较多的小分子多肽,这些小分子多肽在操作过程中易损失掉,使得产率降低;二是由于pH值太低,酶的活力受到抑制。而当pH处于较高水平时,可能还不足以使胃蛋白酶发挥最大水解能力,产率也受到抑制。温度对胃蛋白酶的活力影响很明显,这也直观地反应到其产率上。然而,在较高温度条件下提取胶原有较大的变性风险,不利于高质量胶原的制备。液比对产率的影响在4个因素中虽然是最小的,但也是不可忽视的。随着水解反应的进行,反应液的黏度会逐步增加,因此小液比情况下酶作用的传递也急剧减慢,而液比较大时一方面降低酶和底物的浓度,使两者接触作用的几率变小,另一方面大液比使搅拌的机械作用受到削弱,从而影响最终的产率。

不难看出单就产率而言,胃蛋白酶提取猪皮胶原的pH值2.2、16℃、2.0%的酶用量以及50倍的液比,可得到较高的产率。

2.2 提取胶原的分子质量及其分布

胃蛋白酶提取猪皮胶原正交试验所得试样的SDS-PAGE电泳如图2所示。由图2可知,不同温度条件下提取胶原的分子质量水平是有差异的。在低温条件下制备的胶原试样浓度较低但分子质量分布较窄(图中条纹2和条纹3),温度较高时试样中胶原蛋白浓度有一定的提高但分布明显加宽(图中条纹1、4、5、6)。因此,选择低温条件进行水解反应,将更有利于控制和获得高质量的产品。

由图3可以看出:试样在电泳凝胶上主要有3条分子质量谱带,与标准蛋白的带相比,其中2条谱带的分子质量在116.0kDa附近,另一条谱带在205k Da附近,这与文献中报道的I型胶原蛋白分子质量水平基本一致[14]。

2.3 酶法水解过程的分析

当胃蛋白酶用量分别为1.5%、2.0%、2.5%时,对水解过程进行实时取样,以研究溶液中羟脯氨酸含量随水解时间的变化规律。检测得到的羟脯氨酸含量随时间的变化值如表4所示,图4为与之相对应的羟脯氨酸含量随时间的变化曲线。

从图4可知:随着水解时间的增加,3组试样中羟脯氨酸的含量随之增加。且在0~8h内,羟脯氨酸含量急剧增加,此后增速明显减缓。而在8~28h内,3组平均增幅只有13%左右,综合考虑,提取时间控制在8h左右较为合适,该结论也可在后续图表中得到佐证。同时,发现3组试样中羟脯氨酸的含量并非一直随着酶用量的增加而增加,相反酶用量最高的第3组试样(2.5%)出现了和第1组试样(1.5%)曲线部分重叠、交错的现象,这可能是第1组的酶用量只有1.5%,太低的酶用量难以对底物进行充分水解,从而使得水解过程进行缓慢。而第3组由于酶的浓度过高,导致了酶促反应的发生[10]。由此可以推测,第2组的酶用量(2%)更为接近实际最佳的酶用量,这也再一次证明了正交试验所得到的结论。

注:1st为1.5%;2nd为2.0%;3rd为2.5%。

对水解过程的羟脯氨酸含量用一阶Hill方程进行了拟合[8],从表5和图5可以发现:拟合后方程的曲线与3组试样中羟脯氨酸随时间的变化趋势趋于一致。因此可以证明,用一阶Hill方程对该过程进行模拟是较为合适的。

注:1st为1.5%;2nd为2.0%;3rd为2.5%。

再者,我们知道Chyp(溶液中羟脯氨酸含量)=∫vdt[10](v:水解速率,t:水解时间),因此,在求出Chyp(溶液中羟脯氨酸含量)随t变化曲线的微分之后,即可得到v随t变化的函数关系,进而找出酶法提取猪皮胶原蛋白的最为合理的水解时间,图6即为3组试样中相应的v随t变化的曲线图。从中可以看出,反应初期酶的反应速率较大,然而随着时间的进行迅速减慢直至基本丧失活力,这与传统的酶促反应理论是一致的[8,10]。3组试样的水解速率对水解时间变化曲线的具体参数如表6所示,同时利用软件计算出速率降为最大值20%(即反应进行到80%)的时间。

从表6可以看出:试样二的理论水解速率最大,而其它2组相对较低,因此反应时间也是第2组最少。所以,用2.0%的酶提取时效率是最高的。经过计算可以知道,约7h过后,反应基本上达到总反应的80%。所以在实际生产中,我们应该将水解时间定为8h,这样可以提高生产效率。

3 结论

本研究可以得出以下结论:

(1)优化的工艺条件为温度4℃,pH值2.2,酶用量2.0%,液比50。

(2)胃蛋白酶是一种十分有效的提取猪皮胶原的酶制剂。采用一阶Hill方程能够很好地模拟胃蛋白酶水解提取猪皮胶原蛋白的过程,且拟合程度较高(R2>0.95)。对溶液中羟脯氨酸含量对时间的变化曲线进行微分处理后,用一阶指数衰减方程能够很好地模拟胃蛋白酶水解提取猪皮胶原蛋白过程的速率变化。再者,通过方程拟合后的试验结果表明,2.0%的胃蛋白酶用量,水解作用8h较为理想。

(3)通过分析检测,所提取的胶原海绵的水分含量为(7.98±1.26)%,总蛋白质含量为(80.62±2.03)%,羟脯氨酸含量为8.65%±0.76%,这与报道的I型胶原的特征指标相符。

注:1st为1.5%,2nd为2.0%,3rd为2.5%;t80为反应进行到总反应的80%所需的时间。

摘要：采用酶法提取猪皮胶原,找出最佳工艺条件。在此基础上,以酶用量为主要参数设计试验,对水解过程进行了在线检测,同时用数学方法对该过程进行了模拟分析。结果表明,酶法水解的最佳条件是:酶用量2.0%、pH值2.2、液比50及4℃条件下水解作用8h最为理想。所得到的胶原海绵的总蛋白质含量为(80.62±2.03)%,羟脯氨酸含量为(8.65±0.76)%。

无痕商品胶原蛋白评价总结报告 篇8

2.前段时间就收到货了，朋友很喜欢，我也试了一袋，比我之前买的的松本清的要腥好多哦，也许这就是真正的深海鱼身上提取出来的胶原蛋白吧，各有各的不同吧，因为是活动价，我也用了一张优惠劵，所以就更便宜了一点，希望快乐购以后多点活动，总之朋友很喜欢的。

3.试了试用装，和着牛奶喝得，因为同时买啦松本清的胶原所以这个就先腾着先。相信长期服用是有好处的！

4.产品包装精美、高档，组合丰富，胶原蛋白在冷水的情况下也可以溶解很快，倒在杯里一下全部沉到杯底，然后像火山喷发一样迅速溶解，不需要搅拌，全部溶解后呈淡黄色的透明状，几乎闻不到腥味。

5.买了好几次了，这次在网站买的有优惠哦，胶原蛋白吃了几套了，皮肤比以前好了，最重要是免疫力增强了，现在都不感冒了，就算偶尔感冒也一两天就好了，不会像以前拖一个月才好，效果很好的。非常满意。

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7.东西很快就收到了。首先就价格来讲，很划算。345元限时抢购抢到的。因为刚生完小孩，感觉自己的皮肤很不好，一直都想着要买些胶原蛋白的。快乐购，有好几款，正不知要买哪一款呢，正好有这个机会就买来放着吧。又在网上一查，还是来源于法国的大品牌。值得信赖。打开箱子一看，东西好多，除了胶原蛋白，还有手工皂和面膜，真的是好丰富呀。不过最主要的是主品好，会一直支持快乐购的。

8.这是第二次购买。第一次购买的那些妈妈按照服用方法服用后胖得非常快，难道激素太多？后来干脆一天只吃一条，妈妈年龄大了，希望能补充些脸部脂肪。希望这个产品对身体没有副作用。第二次送的赠品没有第一次的好，这次送了美白莹润矿物泥面膜和手工皂，还是更喜欢之前送的抗皱面膜，9.已经吃了三个月了，这个溶解很快，而且用凉水就可以化开了，我是每天用四包，一天两次，每次两包，现在感觉皮肤比以前水润了，细腻紧致些了，而且睡眠也有改善，除了吃胶原蛋白，还每天吃葡萄籽，还会再吃下去的，希望能得到更好的效果吧 10.试了一个星期才来评价，总体说效果还是有的，睡眠改善了，包装很精美，很高档，还送了面膜跟手工皂，超值划算，喝起来感觉很好，味道也能接受加点牛奶更好，倒入水中迅速下沉溶解，然后自动升腾，几分钟后底部是一层金色原液，轻轻搅拌后变成无色，携带也方便，希望一直喝下去有看到自己想要的效果，支持快乐购！！

11.这已经是我买的第三组无痕商品的胶原蛋白了，服用后真的能感觉到皮肤变得有光泽了，变白了，以前的痘痘印变浅了，周围的朋友都觉得我皮肤变好了，非常棒的商品。

12.相比起以前在淘宝网上订购的胶原蛋白BellaColla实在是优惠一半都不止哦,太开心了,味道跟之前吃过的也是差不多,淡淡的鱼骨味,溶化也快速,不过因为以前都习惯了吃一大塑胶勺子呢,感觉现在吃一小包一次的会不会量太小啦?不知道是心理作用还是真的一吃就马上见效,昨天晚上是第一次吃快乐购送回的就觉得睡得很好,其实脸上的效果就慢慢的等啦,能让我睡得好,我觉得就是一大喜迅了,本人的睡眠是一大大的问题,因为以前总是晚上睡两到三个小时就不能再入睡了,昨晚却不是,居然半夜没醒来,实在是太好了,以前吃的都没达到这个效果哦,以后就买快乐购的胶白蛋白了,淘宝的就不购了.13.已经是第二次购买了，这个东西要一直喝才会有效果，三两盒是看不出效果的，所以不能心急，我的皮肤底子还可以，就是容易过敏，属于敏感肤质，特别现在夏季容易流汗，更是刺激皮肤发痒，脸上会有一块块的红斑。电视上出现“无痕尚品胶原蛋白”的时候，拿起电话就订购了。刚开始喝的时候，没什么感觉，口感说不上来，有点腥的感觉，我吃的量很少，不像大家那样3,4袋的喝，我是一天一袋睡前喝，随着年龄的增加，再慢慢的加量，这个产品会一直吃下去的

14.东西受到有段时间了，因为还在哺乳期，所以就没有吃，屯货中，前几天给妈妈了一组，妈妈说吃过后什么美白之类的没感觉，可能是吃的太短了，但是睡眠比以前好了，以前睡眠很浅，一点声响我妈就会醒，醒了就睡不着了，吃了这个产品后，我妈睡眠比以前要好，我想产品应该还是有效果的吧，睡眠好了皮肤就会好！身体也会好！

15.之前买过胶原蛋白，但是没能坚持服用，这次又买胶原蛋白，并且打算长期服用。说说服用的感觉，首先胶原蛋白有点腥味，但是还能接受，和蜂蜜水一起喝味道会比较好，还可以和酸奶一起喝，感觉更棒！服用后睡眠很好，我想睡眠好了自然皮肤就好了。最后本身自己皮肤底子比较好，效果不会那么明显，但是相信长期服用一定会有不错的效果，女人就应该对自己好一点！

16.已经购买多次，感觉很好，溶解很快，口味很淡。已经用了快一年了，效果也是看得见的，用了那么长时间，觉得皮肤水润度提高了，还有就是睡眠好了很多，人也精神了。但皮肤变白之类还没看到，一直坚持服用下去，希望可以看到更明显的效果。17.这已经是我第二次订购这个牌子的胶原蛋白了，第一次是原价买的，所以有点小心疼，这次搞店庆，减免20，再抵用我的优惠卷和积分，价格到达362，哈哈，赚到了！然后说说这款胶原蛋白，因为我没有服用过其他牌子的胶原蛋白，所以没法做比较。第一次订购的胶原蛋白，只剩下一盒了，不知道是不是我的错觉，感觉皮肤细腻了点，睡眠很好，抬头纹有点浅了，但不是很明显，毕竟我才26岁，也许年纪稍大点，会特明显吧。吃着第一次的，感觉良好，看到这次店庆，又立即订了一组合，这次的赠品跟上次的不一样了，刚好，互补，谢谢快乐购，一直是她的忠实粉丝，希望快点达到白金会员

18.已经是两次购买“无痕尚品”多肽胶原蛋白了，一直以来都非常满意，大家评价很高，这次还加赠了欧洲古典玫瑰仿红宝石饰品套组，感觉更实惠。这款产品溶解速度非常快，虽然分子量不是最小的，但是很透亮，感觉很纯，喝完后真的对睡眠有帮助，见效快，每天服用2袋简便、容易，服用一段时间后，头发光亮了，皮肤亮白度明显提高，希望产品能一如既往的好，也希望自己使用效果好，能保持年轻。

19.已经购买多次，感觉很好，溶解很快，口味很淡。已经用了快一年了，效果也是看得见的，从来没有上来评价过，有了效果，觉得应该上来说说，跟爱美的姐妹分享一下了。用了那么长时间，觉得皮肤水润度提高了，最明显是法令纹真的真的浅了很多现在几乎可以说一点都不明显，还有就是睡眠好了很多，人也精神了。但遗憾是还没看到皮肤变白之类，一直坚持服用下去，希望可以看到更明显的效果。

20.台庆时购买的，比平时实惠很多，不过要配合面膜一起用才好点，吃了十天吧皮肤问题没什么变化可能是要长期坚持使用吧，不知道是自己的原因还是怎么的感觉自己胖了，难道这里面含有。不是说是纯的，吃了不会发胖的么？如果再越吃越胖就有问题了，祈祷不要出现这种情况，希望皮肤问题能改善，看到有LUMI家的希望哪天能组合来卖，实惠点就好咯

21.无痕尚品胶原蛋白早就收到了，很忙，不好意思现在才做评价，口感很好，效果也很不错，如电视上播出的一致。多喝点这款胶原蛋白，真的对女性很有好处的！大家快来试试吧！自己亲身体会了就更清楚了！我还会继续支持与购买的！很信任快乐购的商品！

22.第二次选购此商品、原本之前吃完后想再次选择“无痕尚品”。但是，电话专属导购员推荐我买“松本清”服用之后，彻底的后悔了，效果看上去没有想象中的那么好，让我很是失望…！！而且，又那么那么的贵！！旦 这也不是绝对的！！只能说适合自己的才是最好的吧！！这次看是搞活动，所以，毫不犹豫的网上下单，再次订购一组。并且，送的赠品还是泥浆面膜，满心欢喜！！以后，我会继续关注“无痕尚品”！！

优点汇总

1.包装精美，融化速度很快

2.使用后睡眠质量好多了，皮肤也滋润些了 3.产品包装精美、高档，组合丰富

4.胶原蛋白在冷水的情况下也可以溶解很快，倒在杯里一下全部沉到杯底，然后像火山喷发一样迅速溶解，不需要搅拌，全部溶解后呈淡黄色的透明状，几乎闻不到腥味 5.皮肤比以前好了，最重要是免疫力增强了 6.对刚生完小孩的妈妈有很多好的地方，（因为刚生完小孩，感觉自己的皮肤很不好，一直都想着要买些胶原蛋白的。）7.现在感觉皮肤比以前水润了，细腻紧致些了 8.携带也方便，轻轻搅拌后变成无色，9.感觉到皮肤变得有光泽了，变白了，以前的痘痘印变浅了

10.因为以前总是晚上睡两到三个小时就不能再入睡了,昨晚却不是,居然半夜没醒来,实在是太好了,以前吃的都没达到这个效果

胶原蛋白的简介 篇9

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别对自己要求太过苛刻,试着享受生活的乐趣

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胶原蛋白的简介 篇10

胶原蛋白是由三条多肽链组成呈三股螺旋结构蛋白质,作为一种天然的高分子化合物,其特有的结构和化学组成使其在生物医学材料、药物输送载体、组织工程、化妆品和食品等领域得到了广泛应用[1]。鱼皮胶原蛋白可以作为一种安全的食品添加剂。此外,研究表明,胶原蛋白还具有抗衰老、组织修复、伤口促愈等生理功能,作为医用生物材料,具有良好的应用前景[2]。

1 材料与方法

1.1 材料:

鲜活鲤鱼宰杀后取鱼皮装于密实袋中,置于-25℃冰箱保存。

1.2 实验方法

1.2.1 鱼皮成分的测定

蛋白质测定[5]:采用凯氏定氮法。

脂肪测定[5]:采用索式抽提法。

灰分测定[5]:采用高温灼烧法。

水分测定[5]:采用105℃直接干燥法。

1.2.2 鱼皮中胶原蛋白的提取

所有操作在4℃下进行。

原料处理→洗涤→去杂蛋白→去脂肪→0.5 mol·L-1 乙酸提取→过滤→盐析→透析→冷冻干燥→鱼皮胶原蛋白

1.2.3 紫外可见光谱扫描

准确称取0.005 g胶原蛋白加入5 mL,0.5 mol·L-1乙酸,充分溶胀,振荡使之全部溶解(4℃下进行),样液经冷冻离心,取上清液在200 nm～460 nm范围内进行紫外可见光谱扫描。

1.2.4 粘度测定

取皮ASC 0.075 g溶于10 mL乙酸(0.1 mol·L-1)中,用旋转粘度计在不同温度下测定粘度值。

1.2.5 SDS-PAGE电泳[4]

0.1 mL胶原蛋白溶液与0.1 mL SDS样品处理液混合后,沸水浴加热3 min点样,开始电泳。电流开始为10 mA,至浓缩胶,分离胶界限处调整电流为15 mA,电泳结束,固定液固定30 min,染色1 h,脱色直到无底色,做成干胶,拍照。

1.2.6 酶解实验

准确称取胶原蛋白0.005 g,加入1 mL的Tris-maleate(pH7.0),沸水浴加热3～5 min。按1/500或1/800加入质量浓度为0.15 g·L-1蛋白酶K,分别在0℃,15℃酶解,达到相应时间时立即取0.1 mL样品加入0.1 mL的SDS样品处理液,沸水浴加热3 min后置于-20℃冰箱保存待用,点样时自然解冻,进行SDS-PAGE电泳。考查不同酶用量和酶解温度对胶原蛋白的分解效果。

2 结果与讨论

2.1 成分分析

2.1.1 蛋白质测定:经凯氏定氮测得鲤鱼皮中粗蛋白含量占鱼皮鲜重的20.14%。

2.1.2 脂肪测定:采用索式抽提法测定得鱼皮粗脂肪质量分数为21.55%。

2.1.3 灰分测定:通过高温灰化法测得鲤鱼皮中灰分质量分数为0.67%

2.1.4水分测定:经105℃,烘干至恒重后测得水分质量分数为52.68%。

2.2 鱼皮中胶原蛋白的提取

由表1可以看出,鱼皮在4℃下经过一次提取(48 h),得率是8.9%,随后再进行二次提取,得率增加了0.6%,说明鱼皮经过48 h提取后,大部分胶原蛋白已经提取出来,再延长提取时间,对提取率的贡献不大。

注:“-”表示未进行此步骤操作

2.3 胶原蛋白的性质

2.3.1 紫外可见光谱扫描

一般具有共轭双键的物质都具有紫外吸收,在20种基本氨基酸中,有4种具有共轭双键,Trp,Tyr,Phe和His,而这其中Trp在280 nm的紫外吸收最强,所以大多数蛋白质在280 nm处都有一个很强的紫外吸收,并可通过对280 nm的紫外吸光度的测量对蛋白质溶液进行定量分析,但胶原蛋白由于其中几乎不含Trp,所以在280 nm处没有强吸收峰的出现,这可作为一个鉴定胶原蛋白纯度的方法。由图1可知,胶原溶液在大约228～230 nm处有一个吸收峰,与资料报道的胶原蛋白吸收峰(225nm附近)位置一致[9]。

2.3.2 粘度测定

粘度测定有多种方法,如旋转粘度计测定法、圆二色谱法、DSC法等。本实验采用旋转粘度计测定法,即最大粘度值的一半值所对应的温度为变性温度,由图2可知鱼皮胶原蛋白的变性温度为27.6℃。阿拉斯加鳕鱼鱼皮的变性温度为16.8℃,鱼鳔为18.4℃,鲭鱼鱼皮变性温度为26.1℃,秋刀鱼变性温度为23.0℃,鲑鱼为19.4℃,猪皮胶原蛋白的变性温度为37℃[11],一般来讲,来自海洋鱼类胶原蛋白的变性温度比来自陆地动物胶原蛋白的变性温度低,这与生存环境和体温有关[12],鲤鱼胶原蛋白的变性温度高于一般的海水鱼,低于陆生动物。

2.3.3 胶原蛋白的电泳分析

2.3.3.1 鲤鱼鱼皮胶原蛋白与鱼鳞、鱼骨胶原蛋白电泳图谱的比较

由图3可以看出,鲤鱼的鱼皮、鱼鳞、鱼骨胶原蛋白的构型基本相似,均为Ⅰ型胶原蛋白。图3的电泳图谱中,在β肽链上方还能检测到γ链(三条α链的聚合体)。与牛皮胶原蛋白α、β链相比,鲤鱼鱼皮胶原蛋白相应的亚基分子量略低。

2.3.4 酶解实验

2.3.4.1酶用量及作用温度的选择

应用蛋白酶K对鱼皮胶原蛋白进行分解,分别以1/500和1/800的酶用量 以及0℃和15℃作用温度对酶作用条件进行选择,结果见图4。

由图4可知,随着时间的延长,各样品(1～3;4～6;7～8)中胶原分子分解程度逐渐增大,大分子量肽段减少,而低分子量肽段逐渐增加。在同样用酶量的情况下(1/500),与0℃相比,15℃时的酶解速度明显加快,30 min时电泳图谱显示胶原被分解成很多小分子肽段,由于这些小分子肽段分子量接近,条带分界变得模糊。0℃时,1/500和1/800的酶量相差不大,1/500的酶用量,分解20 min 的样品条带清晰,分解程度适中,因此选用该条件作为蛋白酶K 分解条件。

2.3.4.2鱼皮、鳞、骨的酶解比较

由图5实验结果可以看出,三种来源不同的胶原蛋白经蛋白酶K分解后,条带都较清晰,主要部分条带位置几乎完全一致,说明其结构构型及氨基酸组成非常接近。但样品的酶解难易程度不同,说明胶原的完整性及结构的紧密度均不同。相比较而言,鱼骨胶原蛋白更容易被蛋白酶K分解。

样品1:鱼皮胶原蛋白;2:鱼鳞胶原蛋白; 3:鱼骨胶原蛋白酶解条件:0℃,1/500的酶用量,分解20 min

3 结论

鲤鱼鱼皮两次提取的得率高于一次提取0.6%;通过旋转粘度计测定鱼皮胶原蛋白的变性温度为27.6℃,通过紫外可见光谱扫描得出鱼皮胶原蛋白溶液在228 nm有一最大吸收峰;SDS-PAGE 电泳证明了鱼皮同鱼鳞、鱼骨的胶原蛋白相似,初步确定是I 型胶原蛋白,酶解实验进一步证实了鱼皮同鱼鳞、鱼骨的胶原蛋白在结构上具有很大的相似性。

参考文献

[1]任俊莉,付丽红,邱化玉.胶原蛋白的应用及其发展前景(续)[J].中国皮革,2004,33(1):36~38.

[2]张慧君,罗仓学,张新申等.胶原蛋白的应用[J].皮革科学与工程,2003,13(6):37~41.

[3]宁正祥主编.食品成分分析手册.北京:中国轻工业出版社,1998

[4]郭尧君.蛋白质电泳实验技术[M].北京:科学出版社,1999.

[5]大连轻工业学校,华南理工大学,郑州轻工业学院.食品分析[M].北京:中国轻工业出版社,1999.

[6]沈同,王镜岩.生物化学[M].北京:高等教育出版社,1994

[7][美]O.R.菲尼马著,王璋等编译.食品化学[M]北京:中国轻工业出版社,1991

[8]陈国梁,贺翠莲.胶原蛋白的研究进展[J].延安大学学报(自然科学版),2000,19(2):78~81

[9]李彦春,程宝箴,靳立强.胶原蛋白的应用[J].皮革化工,2001,19(3):10~14

[10]陈胜军,曾名勇,董士远.水产胶原蛋白及其活性肽的研究进展[J].水产科学,2004,6(23):44~46.

[11]Takeshi Nagai,Yoko Araki.Collagen of the skin of ocel-late puffer fish.[J]Food chemistry,78(2002):173~177

胶原蛋白的简介 篇11

微管相关蛋白tau参与了许多神经退行性疾病的发生, 其中包括一些人类可传播性海绵状脑病. 为了探讨tau与朊蛋白(PrP)之间可能存在的关系, 首先通过GST pull-down和免疫共沉淀等技术发现重组tau蛋白可通过微管结合区与来源于正常叙利亚仓鼠脑组织中的.正常细胞膜朊蛋白(PrPC)和羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织的异常朊蛋白(PrPSc)相结合. 利用免疫共沉淀实验发现在正常和羊瘙痒因子感染的仓鼠脑组织中存在tau蛋白与PrPC和PrPSc的相互作用, 并且利用激光共聚焦方法检测到PrP和tau蛋白在CHO细胞内具有共定位的关系. 为了确定PrP与tau蛋白相互作用的部位, 构建了不同区域的PrP片段, 从而证明PrP与tau蛋白相互作用的区域位于PrP的N端序列(23～91 aa). PrP与tau蛋白分子间相互作用的直接实验证据提示tau蛋白可能参与PrP的正常生理功能以及朊病毒病的病理过程.

作 者：韩俊 张瑾 姚海兰 王小凡 李锋 高晨 周伟 张宝云 董小平 作者单位：韩俊,王小凡,李锋,高晨,周伟,张宝云,董小平(中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京,100052)

张瑾(中国海洋大学食品科学与工程学院,青岛,266003)

胶原蛋白的简介 篇12

摘要：玉米根系在生长过程中向根际分泌蛋白质类大分子物质.采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳-质谱技术,一维液相色谱-质谱联用(LC/MS)和Shotgun三种不同鉴定方法对无菌条件收集的玉米根系分泌蛋白进行了分离、分析与鉴定,对3种鉴定方法在分泌蛋白分析中的.应用做了详细阐述和比较.结果表明,双向电泳通过银染可以看到200个蛋白质点,但由于蛋白量少,通过质谱无法对玉米根系分泌蛋白进行鉴定;用LC/MS鉴定得到了152个蛋白;用Shotgun技术鉴定得到了2 848个蛋白.LC/MS鉴定得到的蛋白全部出现在用Shotgun技术鉴定得到的2 848个蛋白中,后2种方法的结果可以互相验证.Shotgun技术具有更高的灵敏性,更适合对蛋白质浓度低、干扰物多的植物根分泌蛋白组进行鉴定,能够获得完整可靠的信息. 作者： 马玮[1]Frank Hochholdinger[2]李春俭[1] Author： MA Wei[1]  Frank Hochholdinger[2]  LI Chun-jian[1] 作者单位： 中国农业大学资源与环境学院,农业部植物营养学重点开放实验室,北京,100193Center for Plant Molecular Biology, Department of General Genetics, Eberhard Karls University Tuebingen, 72076 Tuebingen, Germany 期 刊： 光谱学与光谱分析   ISTICEISCIPKU Journal： SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS 年，卷(期)： 2010, 30(10) 分类号： S123 关键词： 玉米根系分泌物    分泌蛋白组    双向电泳    LC-MS    Shotgun    MudPIT    机标分类号： TP3 S51 机标关键词： 蛋白质类    分析方法    鉴定方法    玉米根系    分泌蛋白    蛋白组    比较研究    Techniques    Analyzing    Different    Identification of    Studies    Shotgun    双向聚丙烯酰胺凝胶电泳    技术鉴定    LC/MS    质谱联用    大分子物质    质谱技术    液相色谱 基金项目： 国家自然科学基金，国家自然科学基金委员会创新群体项目

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