药物敏感（共7篇）
药物敏感 篇1
皮肤敏感试验又称皮试, 是借助极少量药物在皮肤内或皮肤上的反应进行免疫学检测的方法, 目的是为了防止一些容易发生过敏反应的药物在临床使用过程中发生严重过敏反应。在不受患者使用的其他药物 (如抗过敏药物) 干扰的情况下, 皮试阴性的药物可以给患者使用, 皮试阳性的则禁止使用。试验方法可分为皮内试验、刺痕试验和斑贴试验, 但临床以皮内试验为主。导致的过敏反应有皮疹、荨麻疹、皮炎、发热、血管神经性水肿、支气管痉挛、哮喘、低血压、过敏性休克等, 其中以过敏性休克最为严重, 甚至可致死亡。因此, 全面及时地掌握药物导致过敏反应的信息, 对于提高医疗机构的合理用药水平, 保障患者安全合理地使用药物具有重要意义。为此, 对比《临床用药须知》 [1], 对本院2008年度在临床使用的1415种药物的说明书进行了统计分析。
1资料与方法
1.1 资料来源
《临床用药须知》以及本院2008年度在临床使用的1415种药物的说明书。
1.2 方法
查阅了《临床用药须知》和本院2008年度在临床使用的1415种药物的说明书, 统计其中规定必须做皮试的药物, 并进行对比分析。
2结果
2.1 《临床用药须知》及本院2008年度在临床使用的1415种药物的说明书中规定必须做皮试的药物的构成情况, 见表1。
2.2 《临床用药须知》和本院2008年度在临床使用的1415种药物的说明书中均规定必须做皮试的药物, 见表2。
注:括号中的数字为《临床用药须知》的页码
2.3 本院2008年度在临床使用的1415种药物的说明书中规定必须做皮试、但《临床用药须知》未收录或未作规定的药物, 见表3。
2.4 《临床用药须知》规定必须做皮试、但本院未有的药物, 见表4。
注:括号中的数字为《临床用药须知》的页码
3讨论
3.1 从表1-表4可见, 必须做皮试的药物中90%以上是注射剂, 而且大部分是抗生素注射剂。其次, 生物制品注射剂也占一定比例。因此临床应用这些种类的药物前, 应仔细询问患者是否过敏体质, 包括有无药物过敏史、食物过敏史以及过敏性疾病史等, 并且在用药过程中严密观察患者反应, 以便及时发现和处置过敏反应。若出现过敏反应或改用口服剂型。
3.2 《药品说明书和标签管理规定》第九条:药品说明书应当包含药品安全性、有效性的重要科学数据、结论和信息, 用以指导安全、合理使用药品。药品说明书的具体格式、内容和书写要求由国家食品药品监督管理局制定并发布。由此可见, 药物说明书具有法律效力。药品出现的不良反应未在说明书中充分说明的, 由此引起的不良后果由该生产企业承担[2]。因此, 各药品生产企业对药物说明书越来越重视。
大多认为, 青霉素类抗生素使用前必须做皮试, 而头孢菌素类抗生素虽然有交叉过敏反应, 只是对青霉素过敏者不宜使用头孢菌素类抗生素, 但未强调所有患者在使用头孢菌素类抗生素前要做皮试。本文统计到的药物说明书中规定必须做皮试的头孢菌素类抗生素, 大多都是生产企业近年来不断完善修改了药物说明书的。而且这种完善修改药物说明书的工作不断地在持续进行。除了本文对本院所用的药物说明书的调查统计外, 可能还有若干药物在说明书中规定使用前必须做皮试, 如头孢噻肟钠 (特依宁, 广药天心药业股份有限公司) 。这就需要医药工作者及时掌握药物信息, 安全合理用药, 避免患者的损失和医疗纠纷。
3.3 《临床用药须知》中规定必须做皮试的药物, 如青霉胺片剂、玻璃酸酶注射剂等, 虽然该药的说明书没有明确要求必须做皮试, 但也值得在使用中警惕过敏反应的发生。
3.4 皮试液一般应采用原药物 (同批号) 配制, 如头孢菌素类抗生素药物皮试液不宜用青霉素或其他头孢菌素类抗生素代替。因为某一种头孢菌素类抗生素药物的皮试结果并不能真实反映另一种头孢菌素类抗生素药物应用安全性的情况[3]。同时, 由于各种因素的影响, 如服用抗过敏的药物等, 皮试有时会出现假阳性或假阴性结果, 所以即使皮试结果为阴性, 在使用这些药物时仍需严密监测, 做好药物过敏的抢救准备。
摘要：目的调查分析本院必须做皮肤敏感试验的药物, 指导临床安全合理地使用药物。方法对比《中华人民共和国药典临床用药须知》 (化学药与生物制品卷, 2005年版) (以下简称《临床用药须知》) , 调查本院2008年度在临床使用的1415种药物的说明书, 统计必须做皮肤敏感试验的药物, 并对结果进行分析。结果《临床用药须知》中必须做皮肤敏感试验的药物有26种, 其中抗生素12种, 占46.15%;而本院临床使用的必须做皮肤敏感试验的药物有23种, 其中抗生素13种, 占56.52%。必须做皮试的药物中90%以上是注射剂。结论必须做皮肤敏感试验的药物以注射用抗生素为主。同时, 医务工作者应该特别注意药物说明书及其更新, 保障患者安全合理地使用药物。
关键词：皮肤敏感试验,皮试,说明书,调查分析
参考文献
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药物敏感 篇2
资料与方法
试验用品:手提式压力蒸汽消毒器 (北京市朝阳区将台医疗设备厂) , JJ-CJ-IFD洁净工作台 (吴江市净化设备总厂) , 恒温培养箱 (上海跃进医疗器械一厂) , 电子天平 (上海菁海仪器有限公司) , Vitek 2 Compact (法国生物梅里埃公司) , Mueller-Hinton琼脂 (青岛高科园海博生物技术有限公司) , 培养皿 (扬州市光华医疗器械厂) , 量筒, 烧杯, 三角瓶, 涂布棒, 镊子, 酒精灯, 酒精, 接种环。
药敏纸片 (20片/瓶) :链霉素10μg/片、红霉素15μg/片、氧氟沙星5μg/片、阿米卡星30μg/片、头孢曲松30μg/片、青霉素G 10 IU/片、林可霉素2μg/片、氨苄青霉素10μg/片, 均购自北京天坛药物生物技术开发公司。
实验方法: (1) 分离菌株的分离培养:将该褥疮患者感染部位提取标本接种于MH培养基中, 置37℃培养箱中培养18~24 h, 之后取单菌落再次活化。 (2) 菌悬液的配置:挑分离菌株的单菌落用无菌生理盐水制成菌悬液, 调菌悬液浓度0.5麦氏标准浊度。 (3) 涂布平板:用无菌棉拭子蘸取上述调好的菌悬液, 挤出多余菌液后均匀涂布于MH琼脂平板中, 放置室温干燥3 min。 (4) 贴药敏纸片:用镊子将链霉素、红霉素、氧氟沙星、阿米卡星、头孢曲松、青霉素G、林可霉素、氨苄青霉素的药敏纸片贴在涂好菌的平板上, 并轻压纸片使其紧贴琼脂表面, 每个平板贴4种药敏纸片, 各纸片相距至少24 mm, 纸片距平板边缘>15 mm, 并设阴性对照, 将平板置35℃培养箱中培养16~18 h观察结果。 (5) Vitek 2系统对分离菌株的测试:通过法国生物梅里埃公司的Vitek 2系统对分离菌株进行鉴定和药物敏感性分析。
结果
褥疮分离菌株的培养:本例褥疮患者收治入院时, 为了选择有效的抗生素, 减轻患者的痛苦, 使患者能够早日痊愈, 我们用无菌棉拭子采集了其溃疡处标本, 分离到一株细菌, 显微镜观察呈球形, G-。
K-B纸片琼脂扩散法结果:分离菌株对红霉素、链霉素、氧氟沙星、阿米卡星敏感, 对头孢曲松、青霉素、氨苄青霉素、林可霉素不敏感。
Vitek 2系统检测结果:为了确保结果的可靠性我们同时用法国生物梅里埃Vitek 2系统对分离菌株进行了菌种的鉴定和药物敏感性试验, 分离菌株被证实是肺炎克雷伯菌, 同时, Vitek 2系统结果显示, 该菌对阿米卡星、链霉素、妥布霉素、庆大霉素、氧氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星等抗生素敏感。
褥疮感染患者药物的选择:根据以上试验结果, 通过综合分析患者的肝肾情况、药物的不良反应, 选用左氧氟沙星对患者的感染进行了治疗, 收到良好效果, 患者的感染得到控制。
讨论
褥疮一旦发生, 即给患者带来躯体和经济的双重痛苦, 褥疮易导致细菌感染继而引发骨膜炎或骨髓炎[4], 感染若得不到及时有效控制, 往往危及生命[5]。
抗生素的问世使得人类感染性疾病得到了有效的控制, 但是由于其不正规的使用, 目前微生物出现的耐药性, 甚至现在还出现了超级细菌[6]。又成为人类不得不面对的一个很头痛的问题, 所以, 面对微生物严重耐药的现状, 通过药物敏感性试验选择有效的药物显得尤为重要, 磨刀不误砍柴工, 不仅能够选择有效的药物使患者得到及时的救治, 减轻患者的痛苦, 而且避免了药物滥用带来的微生物的耐药性, 其为临床用药的选择具有举足轻重的作用。
参考文献
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药物敏感 篇3
1 检测装置
1.1 检测装置组成
电阻抗法细菌药物敏感快速检测装置由微生物电阻抗传感器、恒温培养箱、信号发生器、电阻抗检测电路、时间程序分配控制器、计算机系统和实验废弃物处理单元等组成,如图1所示。
1.2 微生物电阻抗传感器
1.2.1 微生物电阻抗传感器结构
将普通细菌培养皿改造,保留细菌培养功能,加装电极,制成微生物电阻抗传感器,如图2所示。该传感器由测量电极片、特制培养皿、胶盖、专用培养基和接线柱等组成。测量电极片镶嵌在两根绝缘棒中,长度30 mm,直径2.5 mm。绝缘棒固定在胶盖上,其上端有接线柱。测量电极和胶盖部分能耐高温消毒。特制培养皿容积约25 ml,是一次性使用,使用过后销毁。传感器的功能要求是能进行需氧和厌氧细菌培养检测。
使用时,先将液体培养基注入特制培养皿内,再挑取需要的细菌接种到液体培养基中,随即将测量电极放入其中,盖紧胶盖。如是厌氧菌培养还需封闭胶盖上的通气孔,后传感器插入培养箱插槽架中。最后将电线与胶盖上部的接线柱相连接。
1.2.2 微生物电阻抗传感器使用方法
(1)细菌接种
按细菌接种的要求和操作规程[3],首先将专用液体培养基(SM1H)注入各传感器的特制培养皿内,挑取需要检测的菌种到专用液体培养基中。本实验分别挑取了纯培养的大肠杆菌、沙门氏菌和金黄葡萄球菌各约直径2 mm的一个菌落,将它们分别接种到专用液体培养基中。
(2)细菌培养
将测量电极放入特制培养皿中,盖紧胶盖。如是厌氧细菌培养,还需封闭胶盖上的通气孔,再将微生物电阻抗传感器放入专用恒温培养箱中。然后,将箱内各连线接口按顺序分别与微生物电阻抗传感器上部的接口相连接,在37℃环境下连续培养。
(3)采集数据
细菌在微生物电阻抗传感器内培养期间,时间程序分配控制器每间隔5或10 min分别对每一个微生物电阻抗传感器顺序检测采集数据一次,直至培养结束。
(4)传感器用后处理
微生物电阻抗传感器在每次使用后,特制培养皿连同培养物在实验废弃物箱(干热箱)中灭菌消毁。测量电极要进行彻底的消毒杀菌后再用。
1.2.3 专用液体培养基的制备
筛选和配制专门适用于电阻抗测量要求的液体培养基。现已通过试验,筛选出了SM1H型和SM2H型两种液体培养基。
(1)SM1H型液体培养基基础配方
牛肉膏0.5g,蛋白胨1.0 g,氯化钠0.5 g,蒸馏水100 m L,p H7.2~7.5。
(2)SM2H型液体培养基基础配方
蛋白胨10g,乳糖10g,伊红γ0.4g,美蓝0.065g,磷酸氢二钾(K2HPO4)2g。
1.3 其它装置
1.3.1恒温培养箱,将普通恒温培养箱内部进行改造而成,内设5层传感器插槽架,可供安放传感器之用,每层可插30支,5层共可安放150个传感器。在培养箱顶部通气孔处,传感器测量电极片连线由此处汇集引出,如图3所示。
1.3.2信号发生器,使用交流1 KHz恒流,作为测量电极的信号源。
1.3.3时间程序分配控制器,可以分配交流信号源在规定时间按顺序将所有传感器检测,如5 min或10 min等。
1.3.4信号放大器,作交流检测信号放大之用。
1.3.5实验废弃物处理箱,实际是一个干热灭菌箱。微生物电阻抗传感器在每次使用后,特制培养皿连同培养物在实验废弃物处理箱中灭菌销毁。测量电极要进行彻底的消毒杀菌后再用。
1.4 检测装置电气原理
电阻抗法细菌药物敏感性检测装置电气工作原理如图4所示。用时间程序分配控制器控制多路输入控制器的工作过程,如检测时间,信号宽度、时间间隔和测量次数等条件。检测时,信号发生器提供稳定的电流、电压和1 KHz信号,对微生物电阻抗传感器进行间歇测量。150个传感器安装在5层传感器插槽架上,同时顺序接受检测信号,所取得的培养基阻抗信号汇集在信号放大器进行放大,放大的信号进行A/D转换后输入计算机处理。通过专用软件处理,结果以图形显示及打印,给出检测报告。
2 检测原理
2.1 电阻抗法检测细菌原理
用电阻抗法检测细菌的原理是因细菌在生长繁殖过程中会将培养基中的糖、脂和蛋白质等营养物质,通过细菌的代谢活动,转变成各种胺类、丙酮酸、无机盐类、尿酸和各种有机酸成分等尾产物,使培养基中原来的化学成分发生了改变,尤其是各种盐离子的含量增加3~12倍[4]。生物电子学认为糖、脂和蛋白质等有机成分导电性较差,而胺类、丙酮酸、各种无机盐类和尿酸等导电性较好,这会使得培养基的导电性能大大的提高[5]。这意味随着细菌的生长繁殖,其培养基的电阻抗值会发生变化,电阻抗值逐渐降低。
2.2 电阻抗法细菌药物敏感性检测原理
用阻抗曲线图判断细菌药物敏感性的原理,是将培养基分成接种细菌实验组、接种细菌对照组和不接种细菌对照组;接种细菌对照组因在培养基中未滴加任何抗菌素,细菌正常生长繁殖不受影响,其培养基电阻抗值降得最低,反映以时间为横坐标,以电导率值(S值)坐纵标的图上阻抗曲线上升最高;不接种细菌对照组因是培养基中未接种任何细菌,培养基内无细菌生长繁殖,培养基成分不发生改变,电阻抗值在这段时间内基本没有变化,所以其阻抗曲线基本没有上升,近似一条平行于X轴的直线;接种细菌实验组是滴加各种抗菌药物于培养基内,抗菌药物对细菌有杀抑作用会使电阻抗曲线形态不同于不接种细菌对照组和接种细菌对照组,它是介于它们之间的一种曲线。如果某种抗菌药物对细菌有很好的杀抑效果,说明细菌在其培养基中能几乎不能生长繁殖,其阻抗曲线应与不接种细菌对照组阻抗曲线形态相似并靠近,越靠近说明杀抑效果越好;如果抗菌药物无效,说明细菌在培养基中生长繁殖不受抑制,其形成的阻抗曲线与接种细菌对照组阻抗曲线形态相似并靠近,越靠近说明杀抑效果越差;如抗菌药物杀抑作用一般,说明细菌在其培养基中能部分或局部生长繁殖,其阻抗曲线是介于对照组和接种对照组之间的一种曲线。依此用这些阻抗曲线图的差别进行细菌药物敏感性判断[5.6]。
3 实验结果
3.1 细菌特征阻抗曲线图
图5所示,是用该检测装置通过测量培养基电阻抗值的变化,描记出以时间为横坐标,以电导率值(S值)坐纵标的大肠杆菌、沙门氏菌,金黄葡萄球菌三种细菌特征阻抗曲线图[5]。
从图5中可以看出,接种大肠杆菌、沙门氏菌,金黄葡萄球菌3个培养基在培养期间所形成的曲线各不相同,其电导值(S值)都明显升高,这种升高与细菌在培养基内的生长繁殖有直接关系,但不同种类细菌的阻抗值所形成曲线形态是不相同的。这是因为不同种属细菌在相同的培养条件下,在单位时间内细菌的适应性和生长繁殖速度以及尾产物是不相同的,所以形成了各自不相同的阻抗曲线。对照组在培养6 h后,曲线基本是一条平行于X轴的直线,说明其培养基的阻抗值在这段间内基本没有变化,培养基内基本无细菌生长繁殖。在0~2 h内该曲线有上升,是由培养基的温度从室温升高至37℃时引起的。
3.2 细菌药物敏感性检测图
在细菌特征阻抗曲线图的基础上,以金黄葡萄球菌药物敏感试验为例,用百虫杀、头孢菌素、氨卞青霉素、青霉素和庆大霉素5种抗菌药物进行药物敏感试验。图6是金黄葡萄球菌药物敏感杀抑阻抗曲线图。
比较5种抗菌药物杀抑细菌阻抗曲线可以看出,在4h加药时间点后5种抗菌药物的阻抗曲线在纵坐标上的阻抗值都比未滴加抗菌药物的正常金黄葡萄球菌阻抗曲线低,但比对照组高;5种抗菌药物形成的5条曲线形态上也有明显差异。这说明5种抗菌药物均有不同程度的抑制或杀灭细菌的作用,其中百虫杀消毒剂对金黄葡萄球菌有最强的杀灭效果,曲线基本是一条直线,最靠近对照组;而另外4种药物杀抑效果则各不相同,庆大霉素和普通青霉素对金黄葡萄球菌的杀抑效果最差。5种抗菌药物对金黄葡萄球菌的杀抑效果排序如下。
百虫杀>头孢菌素>氨卞青霉素>青霉素>庆大霉素
4 讨论
我们研制的药物敏感试验检测装置样机,可同时作10~50个细菌样品的药物敏感检测试验。几种药物同时作药物敏感检测,已作近百次,重复性较好。同时,也可用于作细菌有无的检测和阻抗特征曲线区别少数菌种等工作。各种细菌药物敏感试验都可在4~8 h内得出试验结果。
传统的药物敏感性试验需时间约24~36 h[7],而电阻抗法进行细菌药物敏感试验时间可缩短至4~8 h,显示出这种方法的优越性;一次能检测150个传感器,同时可作多个人次多种抗菌药物的药物敏感性试验,大大的提高了检测效率,为医生正确用药和快速救治病人提供了检测手段。
电阻抗法用于临床细菌药物敏感试验是新生事物,各国都刚刚开始,有许多试验研究要做,还很不成熟。但用物理学方法或电子学方法替代传统的化学方法和生物方法是生物医学工程学的发展方向[8]。阻抗法因其装置构成简单,操作方便,便于用微机控制,特别是因它具有可同时检测多个样品,测定速度快和检测值不受死菌影响等优点,所以它是大有发展前途的细菌快速自动检测方法。该种检测装置对实现医学临床快速药物敏感试验,药敏检测自动化和智能化有一定的实际意义。
摘要：报告利用细菌在生长繁殖过程中的代谢产物可使培养基电阻率降低的特性,研制一种电阻抗法细菌药物敏感快速检测装置,该装置主要由微生物电阻抗传感器、计算机系统、信号发生器、电阻抗检测电路、时间程序分配控制器、恒温培养箱和辅助电路等组成。它可测量培养基电阻抗,并将细菌在培养期间内取得的阻抗值描记成阻抗曲线图,利用这种阻抗曲线的形态差别判断细菌的药物敏感性。该检测装置缩短了细菌药物敏感检测的时间,对实现医学临床快速药物敏感试验、药敏检测自动化和智能化有一定的实际意义。
关键词：阻抗法,细菌药物敏感,阻抗曲线,检测装置
参考文献
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盐敏感性高血压患者药物治疗选择 篇4
1 资料与方法
1.1 一般资料
将我院2010年12月~2012年12月通过急性盐水负荷试验所筛查出来的180例盐敏感性高血压患者作为研究对象。其中男120例, 女60例, 年龄24~65 (48.6±8.1) 岁, 78例为2级高血压患者, 102例为1级高血压患者。病程1~23年。通过影像学检查、体格检查以及病史询问, 所有患者均不存在其它的一些疾病, 所有患者在试验前2w均服用了降压类药物。
1.2 方法
(1) 盐敏感性判断:上午9:00开始对患者给予急性盐水负荷试验, 让患者静卧20min后, 对其血压进行多次测量, 取其平均值作为试验前的血压值。在4h后对患者给予2000ml 0.9%氯化钠静脉注射, 2h后对患者给予40mg速尿口服, 从试验开始到服用速尿后的2h, 每间隔1h, 对患者给予1次血压检测。如果患者的平均血压在盐负荷试验后有所升高与在口服速尿后2h比服用前下降的总和≥1.33千帕, 则可以将其判定为盐敏感者。 (2) 治疗方法:对照组患者早晚各给予1次依苏片 (5mg/次) 和硝苯地平缓释片 (10mg/次) 治疗, 观察组患者早上给予1次武力都 (1片/次) 治疗。
1.3 统计学分析
采用SPSS 12.0软件对本研究的数据进行统计学的分析, 计数资料对比应用χ2检验, 计量资料对比应用t检验, P<0.05说明差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者服药前后血压参数变化
见表1、2。
注:与给药前相比, P<0.05
注:与给药前相比, P<0.05
2.2 两组患者的日均药费
对照组患者的日平均药费为3.513元, 观察组为0.725元, 两组存在较大的差异, 具有统计学意义, P<0.05。
3 讨论
有研究资料表明, 盐敏感性高血压患者的发病机制主要表现在细胞膜的功能以及结构的改变, 使得信息传导以及离子运转出现异常的情况, 过多的盐分摄入就会对细胞膜的主动运转产生一定的抑制作用[2]。
本研究结果表明, 对照组与观察组患者在治疗前后血压均出现了明显的下降, 其降压效果没有明显差异, 不具备统计学意义, P>0.05。但两组患者的日平均药费存在较大的差异, 具有统计学意义, P<0.05[3,4]。
从本研究的结果我们可以看出, 每天对患者给予1次武力都治疗, 不仅可以达到降低盐敏感性高血压患者血压的目的, 而且还具有费用低廉、服用方便、安全性好等优点[5,6]。因此, 在对盐敏感性高血压患者进行临床治疗时, 首先要对其盐敏感性进行判断, 对于盐敏感性过高的患者, 最好选择武力都来对其进行治疗。这样做不仅可以达到较好的治疗效果, 而且还可以降低治疗过程中所需的费用[7]。
参考文献
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药物敏感 篇5
1 药敏纸片的制备
(1)选用质地均匀、吸水力强的滤纸 (如国产新华1号滤纸) ，印上药物名称，然后用打孔机打成直径6mm的圆纸片，置于干净的小西林瓶内，压线后瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅20min高压灭菌，置于超净工作台内，将灭菌纸片倾倒于灭菌90mm培养皿，均匀铺开，然后置于60℃干燥箱内充分干燥。
(2)在超净工作台内，将纸片倾斜于培养皿一角，然后按每100张纸片加入一种抗菌药物1ml，用灭过菌的小镊子翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片搅烂。同时在培养皿上记录药物名称，浸泡0.5h后，将培养皿放平后，用小镊子将纸片在培养皿内均匀铺开，置37℃温箱内干燥，干燥后即可在超净工作台内装瓶，密塞，如有条件可真空干燥。置阴暗干燥处存放，避免受潮，有效期3～6个月。
(3)各种抗菌素纸片的制备：青霉素：用无菌生理盐水稀释成10000u/ml，吸取1ml加甲醇9ml即成。每片含药量10IU。链霉素：称取原药10mg，加无菌生理盐水1ml混匀，再加75%的甲醇9ml，即成。每片含药量10µg。四环素、土霉素、金霉素：称取原药10mg，加0.9%甘氨酸钠1ml，再加p H3.6甲醇9ml即成。每片含药量10µg。新霉素、新生霉素、庆大霉素、多粘菌素、呋喃西林：称取原药10mg，加无菌生理盐水1ml，再加甲醇9ml混匀即成。氯霉素、合霉素、红霉素：称取原药10mg，加甲醇10ml即成。每片含药量10µg。卡那霉素：称取原药10g加无菌生理盐水1ml混匀再加50%的甲醇9ml混匀即成。每片含药量10µg。粘菌素：用无菌生理盐水稀释成1000000IU/ml取1ml加甲醇9ml混匀即成。每片含药量10IU。磺胺类药物：称取原药10mg加甲醇10ml混匀。每片要含量100µg。
2 药敏试验操作步骤
2.1 涂菌
用灭菌棉花棒蘸取试验菌涂布于培养基表面，倒置37℃温箱中20min，使培养基表面干燥。
2.2 放纸片
将各种抗菌素纸片放置于培养基表面，用灭菌小镊子轻压，使其紧贴于培养基上，置4℃冰箱中放置2～4h，再取出置37℃温箱内培养16～24h。
2.3 测抑菌圈直径
取出培养皿，测量各纸片周围的抑菌圈直径，准确到0.1mm。
3 影响药敏结果的因素
3.1 培养基
应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时，厚度合适 (约5～6mm) ，不可太薄，一般90mm直径的培养皿，倾注培养基18～20ml为宜。培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸 (PABA) 能拮抗磺胺药和TMP的活性。
3.2 细菌接种量
细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。
3.3 药物浓度
药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制。商品药应严格按照其推荐治疗量配制。
3.4培养时间
一般培养温度和时间为37℃8～18h，有些抗菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2～4h，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推迟细菌的生长，而得到较大的抑菌圈。
4 应用
药物敏感 篇6
为了搞清病因, 我们于2009年开始与内蒙古农业大学动物医学院合作研究了病原学、药敏试验、提纯副结核菌素皮内变态反应诊断等研究工作, 现将敏感药物防治试验情况报告如下:
1 材料与方法
1.1 材料
(1) 乳酸环丙沙星氯化钠注射液:产品批号:I1005FI;有效期:2012.04;含量:100ml:0.2g;生产日期:2010.05.20;黑龙江科龙制药有限公司生产。
(2) 硫酸阿米卡星注射液:0.2g (20万单位;2 ml×10支) ;产品批号:100528;有效期:2012.04;生产日期:2010.05.28。
(3) 试验用羊:选自传染性腹泻病较严重的敖龙布拉格镇西尼乌素嘎查刘福德羊群。
(4) 试验时间:2010年9月7日~12月29日;试验地点:阿左旗敖龙布拉格镇西尼乌素嘎查刘福德羊群。
(5) 药敏制片:19种抗生素。
2 方法
2.1 敏感药物试验方法
方法分为乳酸环丙沙星氯化钠注射液和硫酸阿米卡星注射液;将60只羊分为3组, 每组30只, 第一组为乳酸环丙沙星氯化钠注射液组, 第二组为硫酸阿米卡星注射液试验组, 第三组为对照组。
2.2 试验过程
第一组静脉注射乳酸环丙沙星氯化钠注射液100ml, 每天一次, 连用5天。
第二组肌肉注射硫酸阿米卡星注射液4ml, 每天两次, 连用5天。
第三组不用任何药物, 作为对照组。
2.3 临床观察
试验期每天观察羊的行为、运动、姿势、腹泻情况、精神状态、饮食欲情况等, 记录有关情况。
2.4 药敏实验方法
在无菌条件下, 将分离到的副结核杆菌改良的Dubos培养基中加入1m灭菌的生理盐水, 得到纯培养物用微量移液器吸取200μl, 用涂菌棒均匀涂布于改良的Dubos培养基上。室温放置待表面的菌液充分干燥后, 再用无菌镊子将19种药物纸片, 按6片/平皿均匀贴于培养基表面。将平皿倒置于37℃温箱中持续培养48~60, 观察结果。用游标卡尺测量抑菌圈直径。
3 结果
3.1 药敏试验结果
详见附表。
3.2 敏感药物试验结果
用药后观察至11月15日, 未见复发而对照羊还在腹泻。
第一组观察至2010年12月29日未发病, 而对照组有13只羊发病。
第二组观察至2010年12月29日发病6只, 复发6只, 复发率达20%, 死亡率达33%, 而对照组发病11只。
4 讨论与小结
(1) 羊副结核病由副结核分枝杆菌引起, 是一种以羊间歇性腹泻和进行性消瘦为特征的慢性接触性传染病。该病广泛分布于英国、法国、西德、荷兰、加拿大、美国、以及前苏联等世界各地[1]。该病主要发生于牛, 偶见于羊、骆驼、和鹿, 本病的特性是病畜表现慢性、卡他性肠炎, 呈长期性腹泻, 致使畜体极度消瘦, 肠粘膜增厚形成皱褶[2]。病原菌主要存在于病羊的肠道粘膜和肠系膜淋巴结中, 通过粪便排出, 污染饲料、饮水等, 经过消化道感染健康羊。羊多在幼龄时感染, 经过很长的潜伏期, 到成年时才出现临床症状, 特别是在机体抵抗力减弱等条件下容易发病。该病呈散发或地方性流行。
(2) 阿拉善左旗羊传染性腹泻病已流行近30年, 旗兽医站及各苏木镇兽医站的广大兽医科技人员做了大量防治等试验工作, 但是受技术、设备、资金等种种因素的影响, 没有搞清其病因, 使防治工作进入盲区, 近两年有关苏木镇及受侵害的牧民意见很大, 强烈要求搞清病因, 早日解决腹泻问题。我们于2009年开始与内蒙古农业大学动物医学院合作研究了病因, 从阿拉善左旗采集腹泻病羊肠淋巴结分离到抗酸染色呈红色, 革兰氏染色为阳性的副结核分枝杆菌。两份血清ELISA检测结果为阳性。所以羊腹泻的致病菌为副结核分枝杆菌, 该病诊断为羊副结核病。
(3) 副结核病是我国《动物防疫法》法定的第二类动物疫病, 是指可能造成重大经济损失, 需要采取严格控制、扑灭等措施, 防止疫病的扩散, 同时世界动物卫生组织 (OIE) 也将其列为B类动物疫病, 是指在动物和动物产品的国际贸易中重要的, 其传播将造成社会和生态危害的可传播动物疾病。
(4) 到目前为止, 副结核病没有特效疗法, 但从药敏实验结果来看, 此副结核杆菌对环丙沙星和卡那霉素敏感, 对头孢呋肟中度敏感, 对其他药物均产生不同程度的耐药性。所以环丙沙星、卡那霉素和头孢呋肟对羊副结核病有较好的疗效, 对今后的治疗有重要的意义。
(5) 环丙沙星是第三代喹诺酮类抗菌药物中活性较强的一种, 目前在我国已被广泛应用于人医和兽医临床实践[3], 从这次的试验情况来看, 环丙沙星的效果优于卡那霉素, 在110天的观察, 没有复发, 在今后的防治工作中应作为首先药物。
(6) 在免疫方面没有有效的免疫疫苗, 该病在治疗方面没有有效的治疗方法, 曾试用链霉素、异烟肼进行治疗, 效果不理想。
参考文献
[1]甘肃农业大学主编.兽医微生物学[M].北京:农业出版社出版社, 1980:262.
[2]南京农学院等主编.家畜传染病学[M].上海:上海科学技术出版社, 1998:259-260.
药物敏感 篇7
关键词：分枝杆菌,结核,药物敏感性,方法学
耐药结核病是结核病控制的重要不利因素之一。国内外关于耐药情况的报道很多, 但由于药敏方法常有差异, 耐药水平可比性仍存争议。绝对浓度法被国内很多结核病实验室采用, 但该方法与目前WHO推荐的1%比例法在药物临界浓度、试验方法和判别标准都有较大不同。本文通过同时用绝对浓度法、比例法对2946株结核分枝杆菌耐药性进行测定, 比较了两种方法耐药性的差异。
1 材料和方法
1.1 材料
菌株:2006年03月至2006年12月间, 本实验室试验的涂阳肺结核患者痰标本临床分离株2946株, 经对硝基苯甲酸 (PNB) 、噻吩-2-抗结核药物纯品:异烟肼 (INH) 、链霉素 (SM) 、乙胺丁醇 (EMB) 、利福平 (RFP) 纯粉, 为上海五洲制药厂产品。
1.2 方法
1.2.1 培养基制备 基础培养基:为无淀粉改良罗氏培养基, 制备方法按照《结核病诊断实验室检验规程》[1] (以下简称《规程》) 进行。含药培养基:RFP、EMB、SM和INH溶解、稀释浓度均参照《规程》。试验步骤:2946株结核分支杆菌分别用绝对浓度法和比例法测试其药物敏感性。菌悬液制备:刮取菌龄2～3周的结核分枝杆菌菌落, 配成1 mg/ml菌悬液。绝对浓度法:制备10-2 mg/ml菌悬液, 以灭菌吸管准确吸取菌液0.1 ml, 分别接种于含药培养基和对照培养基斜面上, 每管接种菌量为10-3 mg, 37℃培养4周后报告结果。低浓度含药培养基分支杆菌未生长者报告敏感 (S) , 生长 (1+) 以上者报告耐药 (R) 。比例法:制备1 mg/ml菌悬液, 用22SWG标准接种环将菌液逐步稀释至10-2和10-4 mg/ml。用22SWG标准接种环分别沾取1满环 (即0.01 ml) 10-2和10-4 mg/ml的菌液, 用划线法均匀接种至对照及含药培养基斜面。最终接种菌量为10-4和10-6 mg。37℃培养4周后观察结果并计算耐药百分比:耐药百分比= (含药培养基上菌落数) / (对照培养基上菌落数) ×100%。若耐药百分比>1%, 则认为受试菌对该药耐药 (R) , <1%判断为敏感 (S) 。
1.2.2 质量控制 每批药敏试验用H37RV做含药培养基质控;本实验室每年均接受一次跨国参比室分枝杆菌试验菌株做室间质控, 均达到标准。
3 结果
3.1 两种方法耐药情况见表1。
从表1可以看出, 用比例法测得的RFP耐药率略低于绝对浓度法。但SM、INH、EMB三种药用比例法测得的耐药率均明显高于绝对浓度法, 耐药率相差分别为:4.41%、6.65%、3.09%。
3.2 两种方法测试药敏符合情况见表2。
注:括号前数字为株数, 括号内数字为率 (%)
从表3可以看出, 用两种方法测得四种药物的结果一致率分别为:97.83%、96.71%、94.30%、92.33%。在两种方法测试结果不一致的菌株中, EMB、SM、INH比例法耐药而绝对浓度法敏感占绝对大的比例, 分别为:3.19%、5.06%、7.16%, 只有RFP比例法敏感绝对浓度法耐药略多于比例法耐药绝对浓度法敏感。虽然两种方法测得结果一致率都在92%以上, 但经统计学检验存在显著性差别 (P<0.05) 。
3 讨论
比例法测得的SM、INH、EMB三种药耐药率均明显高于绝对浓度法 (P<0.01) , 比例法测得的RFP耐药率低于绝对浓度法 (P<0.05) , 其中INH用两种方法测得的耐药率差别最大, 达到6.65%。因此, 此两种方法测得的耐药率之间无可比性。目前我国现行的绝对浓度法临界药物浓度是在小样本菌株分析的基础上参照国外有关标准达成的“协议”性规定, 远远高于其他国家以及WHO推荐的浓度[2], 这可能是产生差别的根本原因。比例法与绝对浓度法相比, 在药物临界浓度、试验方法和判别标准都有较大不同, 此方法虽然操作繁琐, 但其试验结果是通过计算活性单位的比值, 即耐药百分比获得的[3], 有准确、客观、直观等优点, 正逐渐被国内外更多实验室采用。这将有利于结核分枝杆菌耐药性的横向、纵向比较分析, 有利于结核病防治工作研究。
参考文献
[1]中国防痨协会.结核病诊断实验室检验规程.中国:中国教育文艺出版社, 2006:30-51.
[2]程绍基, 潘毓萱.我国结核菌耐药标准及国际现状.中国防痨杂志, 1996增刊:49-55.