蟾蜍红细胞（精选8篇）
蟾蜍红细胞 篇1
多发性骨髓瘤(muhiple myeloma,MM)是浆细胞的恶性肿瘤,随着治疗过程变长出现耐药而导致高死亡率,国内外大量研究寻找新的治疗方式和有效药物[1]。蟾蜍灵(elemene)是中药蟾酥提取出的主要有效成分之一。研究证实蟾蜍灵对体内外多种肿瘤细胞具有较强的抑制和杀伤效应[2,3]。本研究室已经证实蟾蜍灵可有效抑制人骨髓瘤细胞增殖,但其具体作用生物学机制尚不清楚。IL-6的表达与MM的发病关系密切,IL-6是肿瘤细胞体内、外的主要生长因子,也是其重要的药物作用靶点[4]。我们以人MM细胞系U266为对象,研究了蟾蜍灵对MM细胞的IL-6表达的影响,以期初步探讨蟾蜍灵抗MM的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
人MM细胞系U266来自ABROUN S教授(University of Tehran)赠予,目前为本实验室常规传代保存;蟾蜍灵试剂购自Sigma 公司;RPMI1640 培养液购自Gibco公司;胎牛血清购于中国医学科学院血液研究所。IL-6酶联免疫检测试剂盒购自Bender Medsystems GmbH公司。
1.2 方法
1.2.1 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定IL-6基因表达 应用RT-PCR方法检测IL-6的基因水平。0、25、100nmol/L浓度蟾蜍灵药液作用U266细胞48h,以Trizol试剂提取其总RNA后进行cDNA合成,以合成的cDNA为模板进行PCR扩增。内参照为3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)。引物序列见附表。
1.3 统计学处理
采用SPSS 10.0软件进行统计分析处理。数据以均数±标准差undefined表示,均数间进行独立样本t检验,P<0.05为有显著性差异。
2 结果
2.1 IL-6基因表达降低 RT-PCR结果显示,不同浓度的蟾蜍灵作用U266细胞48 h后,IL-6基因表达明显降低,且表现为浓度依赖性,提示蟾蜍灵降低IL-6基因表达水平(见附图)。
1,2,3分别代表对照组,25以及100nmol/L浓度的蟾蜍灵处理组。
3 讨论
多发性骨髓瘤(又称浆细胞瘤)是起源于骨髓中浆细胞的恶性肿瘤,是一种较常见的恶性肿瘤。MM是由具有合成和分泌免疫球蛋白的浆细胞发生恶变,大量单克隆的恶性浆细胞增生引起易累及软组织,晚期可有广泛性转移,较多见于脊椎、肋骨、颅骨、胸骨等。好发年龄多在40岁以上,男性与女性之比约2∶1。多发于40岁以上男性[1]。尽管放化疗对于MM有一定效果,但患者生存期短,如何解决是学术界亟待解决的重要课题之一。基于MM的发病机制,从传统中草药中寻找高效的抑制MM活性成分具有重要意义。蟾蜍灵(bufalin)是我国传统中药蟾酥中蟾毒的主要成分之一,大量报道证实其对多种癌细胞具有抑制生长的作用,而且其为非细胞毒性药物,因此更为安全[2,3]。本研究室已经证实蟾蜍灵在体外抑制人MM细胞株U266的生长,确切机制的探讨具有重要意义。IL-6作为MM生长因子,近年来受到研究者广泛重视[4]。为探讨蟾蜍灵抗MM的作用机制,IL-6基因表达将被检测。RT-PCR结果表明,蟾蜍灵在25至100nmol/L浓度范围内,IL-6基因表达也受到显著抑制,与对照组相比具有显著性差异(P<0.01)。
蟾蜍灵通过促进凋亡等多种机制抑制肿瘤生长而达到抑癌效果[3]。但其通过降低IL-6表达而抑制MM生长目前为止尚无报道。由于其具有安全、副作用小和不易耐药优点, 临床应用前景将非常广阔[3]。从而可以推测蟾蜍灵作为传统中药将成为一种新的治疗MM的方法。
摘要：目的 探讨蟾蜍灵(bufalin)对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的白细胞介素-6(interleukin-6I,L-6)表达的影响,以期证实蟾蜍灵抗MM的分子生物学机制。方法 人MM细胞系U266与不同浓度的蟾蜍灵作用,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6基因表达。结果 不同浓度的蟾蜍灵作用U266细胞48h后RT-PCR检测结果表明:U266细胞的IL-6基因表达与对照相比均明显降低;差异有显著性意义(P<0.01)。结论 蟾蜍灵能抑制U266细胞的IL-6基因表达。提示降低IL-6的表达是蟾蜍灵抗MM的机制之一。
关键词：多发性骨髓瘤,蟾蜍灵,白细胞介素-6
参考文献
[1]MoreauP.Advances in multiple myeloma[J].Oncologie,2011,13(9):548-552.
[2]陈浩,师亮,王素云,等.蟾蜍灵抑制人骨髓瘤细胞增殖[J].中成药,2010,32(5):730-732.
[3]李广朝.蟾蜍灵的基础研究与临床应用[J].长春中医药大学学报,2009,25(2):185-186.
[4]Zhang XG,Klein B,Bataille R.Interleukin-6 is a potent myelo-ma-cell growth factor in patients with aggressive multiple myeloma[J].Blood,1989,74(1):11-13.
[5]MinnemaMC,Van der SpekE,Van de DonkNW,etal.New develop-ments in the treatment of patients with multiple myeloma[J].NethJ Med,2010,68(1):24-32.
蟾蜍红细胞 篇2
1 材料与方法
1.1 主要试剂
RPMI1640 培养液和胎牛血清购于Gibco 公司;蟾蜍灵购于Sigma 公司。蟾蜍灵依照说明书配置成10 mmol/L 原液。该浓度对细胞增殖无影响。
1.2 细胞培养
人骨髓瘤细胞株U266由Abroun S教授(University of Tehran)赠予。在含10% 胎牛血清的RPMI1640培养液中,37℃、5% CO2饱和湿度的培养箱内传代培养,取对数生长期细胞进行实验。
1.3 U266细胞增殖测定
U266细胞以1×105个/mL的浓度接种于24孔培养板中,实验组细胞同时分别加入12.5～100nmol/L的不同浓度蟾蜍灵药液。对照组细胞不加任何药物,经过12、24、48、72h的药物作用后分别取实验组和对照组的适量细胞,应用台盼蓝拒染法,在镜下测定活细胞数。
1.4 统计学分析
所有数据均用3次独立实验的平均值表示,统计学处理采用SPSS13.0统计软件分析,数据以面undefined表示,数据比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
蟾蜍灵抑制U266细胞增殖12.5～100nmol/L蟾蜍灵药液处理的U266细胞经过12至72 h 后,蟾蜍灵以时间、剂量依赖方式抑制U266的细胞增殖(附图)。且12.5～100 nmol/L蟾蜍灵于24h开始明显抑制U266细胞的生长(P<0.05)。
3 讨论
蟾蜍灵是从中药蟾酥中提取出来的有效成分之一,经过研究证实其具有抗癌作用。据文献报道蟾蜍灵能诱导HL-60(人急性早幼粒白血病细胞)分化及NB-40等多种髓系白血病细胞凋亡[5],蟾蜍灵通过诱导肿瘤细胞凋亡对胃癌细胞株MCG-803等人类实体瘤细胞的生长起到抑制作用[6]。JING报道髓系淋巴白血病细胞ML-1、U937细胞经过蟾蜍灵处理后,细胞出现凋亡形态学改变[5]。 综上所述,蟾蜍灵对多种白血病细胞和实体瘤细胞具有很强的抑制增殖和诱导凋亡作用。本研究首次探讨蟾蜍灵对于人多发性骨髓瘤细胞U266的抗癌作用,目前国内外尚无文献报道。经过研究发现,12.5 nmol/L以上浓度蟾蜍灵作用24 h以上可以明显抑制U266 细胞生长。本研究首次证实这种生长抑制表现为时间依赖性以及剂量依赖性。本研究局限于蟾蜍灵抑制多发性骨髓瘤生长的生物学现象的证实,至于其抗肿瘤作用的机制尚不明确。刘云鹏证实WT-1、Survivin、Bcl-2、BAX 及Smac 等凋亡基因和蛋白的表达改变是蟾蜍灵诱导肿瘤细胞凋亡的机制之一[6]。因此有关蟾蜍灵抑制U266 细胞生长的机制是否与凋亡基因和蛋白相关将被予以关注。
参考文献
[1]韩景田,陈小义,徐瑞成.蟾蜍灵的药理活性研究进展[J].中国药物与临床,2002,2(2):120-122.
[2]Masuda Y,Kawazoe N,Nakajo S,et al.Bufalin induces apoptosisand influences the expression of apoptosis-related genes in humanleukemia cells[J].Leuk Res,1995,19(8):549-556.
[3]王南瑶,李苏宜,赵伟,等.华蟾素联合三氧化二砷抑制鸡胚尿囊膜血管生成的实验研究[J].临床肿瘤学杂志,2006,11(7):494-496.
[4]朱志图,金波,刘云鹏,等.蟾蜍灵增强全反式维甲酸对急性早幼粒细胞白血病原代培养细胞的诱导分化[J].中华内科杂志,2006,45(4):314-317.
[5]JING Y,WATABE M,HASHIMOTO S,et al.Cell cycle arrest andprotein kinase modulating effect of bufalin on human leukemia ML-1 cells[J].Anticancer Res,1994,14(3):1193-1198.
捉蟾蜍作文 篇3
公园里有一群老人正在集合，准备爬山。游人不多，四周很安静。池塘中长着很多香蒲，它们的叶子细长碧绿，中间夹杂着诱人的“香肠”，那是香蒲的果序、花序。水黾在池中划船，它们看似悠闲，其实一旦发现猎物，就能迅速跃起捕捉，一饱口福。不知名的草散发着清香，数不清的虫子在鸣唱。
大家最期待的捕虫行动开始啦!我低着头，眼睛像探照灯一样在地上来回搜索，想发现目标。突然，一只蚂蚱“从天而降”，我还没反应过来，它就蹦走了。正当我觉得可惜时，在河边又发现了一只蟾蜍，它正在草丛里乱跳。“我非把你捉住不可。”我暗下决心。我托着昆虫盒，蹑手蹑脚地靠近它。拿起盖子向它一罩，它行动迟缓，反应很慢，只能乖乖投降了。
透过昆虫盒上的放大镜，能看到这只蟾蜍浑身黄褐色，没什么疙瘩，像一个土坷垃。“这身保护色可真高级啊!”我在心里夸道。它趴在盒子里一动不动，两只乌溜溜的眼珠胆怯地看着我。我细细观察之后，就把它放回大自然了。
养殖蟾蜍益处多 篇4
浙江省海宁市龙头阁两栖爬行动物研究所农技师, 养殖研究蟾蜍多年, 经验丰富, 效益可观。据介绍:蟾蜍俗名癞蛤蟆, 过去在农村野生蟾蜍遍布都是, 一只母蟾蜍每年可产卵3000到5000粒, 经过人工饲养一年后, 每只蟾蜍可达75克左右。人工养殖蟾蜍采集中药材还保护了环境, 通过在稻田、水库、池塘、菜园, 荒地等场地养殖蟾蜍, 以蟾治虫, 以虫养蟾, 即降低养殖成本, 又达到经济、生态及社会效益的协调统一, 可谓一举多得。为了达到最理想的效果, 农技师采取收购完整蟾衣、推广养殖方法, 推动养殖向生态环保高效方面发展, 达到利益最大化。
养殖蟾蜍益处多 篇5
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养殖蟾蜍益处多 篇6
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养殖蟾蜍收“衣”奖励 篇7
浙江省海宁市龙头阁两栖爬行动物研究所农技师, 养殖研究_蜍多年, 经验丰富, 效益可观。据介绍:蟾蜍俗名癞給蟆, 过去在农村野生蟾蜍遍布都是, 一只母蟾蜍每年可产卵3000到5000粒, 经过人工饲养一年后, 每只蟾蜍可达75克左右。人工养殖蟾蜍采集中药材是近几年才发展起来的新兴产业, 通过在稻田、水库、池塘、菜园, 荒地等场地养殖蟾蜍, 以蟾治虫, 以虫养蟾, 即降低养殖成本, 又达到经济、生态及社会效益的协调统一, 可谓一举多得。为了达到最理想的效果, 农技师采取收购蟾衣的方法, 并且向出售人进行奖补, 推动养殖利益最大化。 (李新锦)
养殖蟾蜍收“衣”奖励 篇8
浙江省巧宁市龙头_栖断动物研籠城师, _雜·多年, 经醉富, 效益可观。·绍:·俗名癞蛤!i�过絲农村野生蟾蜍遍布都是, 一只母蟾蜍每年可产卵3000到MOO粒, 经过人工饲养-年后, 每只蟾蜍可达75克左右。人工养殖蟾蜍采集中药材是近几年才发展起来的新兴产业, 通过在稻田、水库、池塘、菜园, 荒地等场地养殖蟾蜍, 以蟾治虫, 以虫养蟾, 即降低养殖成本, 又达到经济、生态及社会效益的协调统一, 可谓一举多得。为了达到最理想的效果, 农技师采取收购蟾衣的方法, 并且向出售人进行奖补, 推动养殖利益最大化。 (李新锦)