卫星搭载(精选3篇)
卫星搭载 篇1
冰草(Agropyron cristatum)属植物为多年生禾本科牧草,具有很强的抗寒、抗旱性,适应范围广,且能够适应极端气候,绿期长,有良好的饲用价值[1]。利用返回式卫星搭载冰草种子,受到各种空间诱变因素的作用,冰草种子后代会出现各种变异。中国自1987年开始利用返地卫星搭载植物种子,涉及蔬菜、花卉、牧草等多种植物,育成了一批优质、高产、多抗、早熟的作物新品种或品系[2,3]。研究对卫星搭载冰草种子植株进行抗旱生理特性分析,以期为筛选抗旱性强的冰草品系提供理论依据,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 种子处理
将精选种子分为两份:一份作地面对照(CK),另一份用于搭载。将选好的蒙农杂种冰草(A.cristaum×A.desertorum cv.Mengnong)种子(封入布袋),利用返回式科学与技术试验卫星于2008年10月15日—11月2日进行空间诱变处理。
1.2 材料的种植及选择
2009年5月下旬,将卫星搭载和对照的冰草种子分单株种植在处理试验基地,出苗4周时进行胁迫试验,在自然干旱胁迫7 d后随机选择27个株系进行冰草的抗旱性研究。取材编号为A1、A3、A4、A7、A8、A9、A12、A13、A14、A15、A16、A18、A19、A20、A21、A23、A24、A25、A26、A27、A28、A30、A31、A32、A33、A34、A35,另设CK(对照)。
1.3 生理指标的测定
采用酸性茚三酮法测定脯氨酸含量,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量,采用丙酮乙醇混合液法测定叶绿素含量,采用鲜重法测定叶片相对含水量[4]。各项生理指标均重复测定3次。
1.4 抗旱性综合评价
抗旱性综合评价,采用隶属函数法对各测定指标进行转换和综合分析评价[5]。指标隶属函数计算公式:Z(Xij) = (Xij-Ximin) /(Ximax-Ximin)(正相关);丙二醛含量与抗旱性为负相关,用反隶属函数计算其抗旱隶属函数值,计算公式:Z(Xij) =1- (Xij -Ximin) /(Ximax-Ximin)(负相关)。其中:Z(Xij)为i种类j指标的抗旱隶属函数值,Xij表示i种类j指标的测定值,Ximin和Ximax分别表示各种类指标的最大、最小测定值。
1.5 数据统计
所有测定数据均采用SPSS17.0软件进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 空间环境对冰草生理特性的影响(见表1)
2.1.1 相对含水量
由表1可知,受过空间环境处理的蒙农杂种冰草A3、A4、A7、A9、A12、A13、A14、A15、A25、A27、A28、A31、A32、A34叶片相对含水量高于CK(对照);其他株系明显比对照低。说明空间环境对冰草叶片相对含水量的影响是不定向的。部分处理株系的叶片相对含水量高于对照,空间环境作用后细胞或者组织受损较对照轻,保水能力强,则抗旱能力强。数据统计分析结果显示,A3、A4、A9、A12、A13、A14、A15、A25、A28、A31、A32、A34的相对含水量极显著高于对照组(P<0.01),A7、A27与对照差异不显著(P>0.05)。
2.1.2 叶绿素含量
从表1可知,受过空间环境处理的蒙农杂冰草A16、A18、A19、A23、A24、A25、A28、A31、A33的叶绿素含量高于对照;A27基本保持不变,其他株系明显比对照低。大多数处理冰草的叶绿素含量都比对照低,只有少数比对照高。数据统计分析结果显示,A19、A24、A25、A28、A31的叶绿素含量极显著高于对照 (P<0.01),A18、A33显著高于对照(P<0.05),A16、A23与对照差异不显著(P>0.05)。
注:与对照(CK)相比,**表示差异极显著(P<0.01),*表示差异显著(P>0.05)。
2.1.3 脯氨酸含量
游离脯氨酸含量是在干旱胁迫下研究植物体内积累的渗透物质的指标。从表1可知,与对照相比,A7、A16、A23、A24、A25、A28的脯氨酸含量较高,其他各株系均较低。数据统计分析结果显示, A16、A23、A25、A28的脯氨酸含量极显著高于对照(P<0.01),A24显著高于对照(P<0.05),A7与对照差异不显著(P>0.05)。
2.1.4 丙二醛含量
从表1可知,A8、A19、A24、A26、A34的丙二醛含量高于对照,其他各株系均比对照低。说明大多数株系经过空间环境作用后细胞或者组织受损较轻。数据统计分析结果表明,A19、A24、A26的丙二醛含量极显著高于对照(P<0.01),A8和A34与对照差异不显著(P>0.05)。
2.2 模糊隶属法评价各株系的综合耐旱力
以相对含水量和叶绿素、脯氨酸、丙二醛含量4个指标为依据计算各指标的隶属函数值,并进行综合评价,结果见表2。
将各株系的隶属值进行计算,取平均值,平均值越大抗旱性就越强,结果高于对照的有3株,分别为A24、A25、A28,其平均隶属值较大,分别为0.73,0.87,0.89,说明经过卫星搭载后的这些株系的抗旱能力增强了。
3 讨论
植物的抗旱反应是一个非常复杂的过程,其抗旱能力的大小是多种代谢的综合表现。本试验采用的生理指标中,叶片相对含水量的变化可以代表植物的渗透调节能力,被认为是植物在水分亏缺条件下是否维持生长的一个重要指标。在相同的干旱胁迫条件下,抗旱性强的株系叶片相对含水量较高,能保持较好的水分平衡。多数研究者证实,脯氨酸积累同植物的抗旱性存在密切的关系,当植物受到干旱胁迫时水分亏缺使蛋白质分解加快,植物体内发生大量的脯氨酸积累[6]。在本试验中,由脯氨酸积累量的大小可以初步鉴定各株系抗旱性的强弱。植物器官在逆境环境下遭受伤害,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛是膜脂过氧化的最终分解产物之一,通常利用丙二醛作为脂质过氧化指标,表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境反应的强弱。叶绿素作为重要的光合色素之一,在植物的生长发育过程中起着重要作用。而叶绿素含量的多少受水分、光照、温度等多种因素制约。由表1可以看出,叶绿素在抗旱性强的株系中含量高。研究只选用了4个与抗旱性较为密切的生理指标进行了综合评价,选取的指标较少,这对卫星搭载冰草的抗旱性评价的系统性、全面性有一定的影响。在以后的研究中应选取更多的生理生化指标并结合形态学指标,进一步提高冰草抗旱性评价结果的科学性和准确性。不同的理化指标反映植株生理活动的不同侧面,而且不同植株的抗旱机理也不尽相同,必须将多项指标综合、系统地进行分析,才能得出相对客观的鉴定结果。
4 结论
运用模糊隶属函数法对卫星搭载冰草的抗旱性进行综合分析,结果表明,空间搭载对种苗生长的4项生理指标表现出正负两种效应;对不同株系抗旱性隶属值的综合评价结果表明,空间环境处理A24、A25、A28株系的冰草抗旱能力均优于对照。
摘要:为了比较卫星搭载冰草种子苗期的抗旱性,试验在土壤干旱胁迫条件下,测定了植株叶片的相对含水量、叶绿素、脯氨酸和丙二醛含量,并且运用模糊隶属函数法对卫星搭载的27份材料的耐旱性进行了综合分析。结果表明:空间搭载对种苗生长的4项生理指标表现出正负2种效应;4项生理指标综合评价结果显示,空间环境处理的冰草抗旱性在A24、A25、A28株系的抗旱能力均优于对照。说明空间诱变可获得有价值的变异材料。
关键词:卫星搭载,冰草,生理指标,模糊隶属函数,耐旱性
参考文献
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[5]韩瑞宏,卢欣石,高桂娟,等.紫花苜蓿抗旱性主成分及隶属函数分析[J].草地学报,2005,14(2):142-146.
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卫星搭载 篇2
利用卫星搭载技术, 通过植物组织培养技术, 筛选苜蓿耐低温和干旱突变体, 对进一步的品种资源改良和生产应用、提供抗寒抗旱种质资源具有重要的现实意义。
1 材料与方法
1.1 供试植物
卫星搭载和未搭载的龙牧801苜蓿种子, 黑龙江省畜牧研究所提供, 种植于齐齐哈尔大学学生园, 取苜蓿叶为试验材料。
1.2 愈伤组织的诱导和继代培养
取卫星搭载和未搭载的苜蓿的叶, 流水冲洗2 h, 经0.1%升汞消毒10 min后, 用无菌水冲洗4~5次。将处理后的叶切成大小为1 cm2左右小块, 接种到MS培养基+0.5 mg/L 6-丙烯酸丁酯 (BA) +1 mg/L2, 4-二氯苯氧乙酸 (2, 4-D) +30 g蔗糖琼脂培养基中, 于25℃条件下培养, 每日漫射光照12 h[3]。
选取培养20 d左右的愈伤组织, 选取其中白色、新鲜、松嫩的部分切成0.5 cm3小块, 转入继代培养基中 (培养基同上) , 愈伤组织需要继代2次。
1.3 愈伤组织低温和干旱胁迫
将愈伤组织切成1.0 cm3小块, 接种到固体培养基 (同前) , 设置低温胁迫的温度梯度分别为4, 8, 12, 16, 20℃, 培养7 d, 观察愈伤组织的长势, 确定半致死温度。
将愈伤组织切成1.0 cm3小块, 接种到含聚乙二醇 (PEG) 6000梯度分别为0、5%、10%、15%、20%和25%的液体培养基, 胁迫处理24 h后转入固体培养基 (同前) , 7 d后观察愈伤组织的长势, 确定半致死浓度。
1.4 低温和干旱胁迫后愈伤组织的继代培养
将上述对照愈伤组织和卫星搭载愈伤组织切成1.0 cm3小块, 分别接种到半致死温度和半致死PEG浓度的固体培养基中, 培养10 d左右。
1.5 生理生化指标的测定
过氧化物酶 (POD) 活性采用愈创木酚法测定, 丙二醛 (MDA) 和可溶性糖的含量采取硫代巴比妥酸法测定, 游离脯氨酸含量采用茚三酮法测定, 相对电导率采用张志良[4]的方法测定。各指标重复3次。
1.6 数据统计分析
试验数据采用SPSS19.0统计软件进行分析。
2 结果与分析
2.1 不同浓度及不同温度和干旱胁迫对苜蓿愈伤组织生长的影响 (见表1、表2)
%
%
搭载组和对照组的苜蓿愈伤组织在不同温度和PEG浓度的MS培养基上的生长状况不同。从表1和2可以看出, 对照组和搭载组都具有一定的抗逆性, 且搭载组抗低温和干旱性能高于对照组。半致死温度和半致死浓度分别为4℃和20%。在半致死温度和半致死浓度下苜蓿愈伤组织的存活率对照组分别为47.14%和45.72%, 搭载组分别为52.67%和51.67%, 搭载组在低温和干旱胁迫下生长能力均高于对照组。
2.2 低温和干旱胁迫对苜蓿愈伤组织生理生化的影响
2.2.1 MDA含量的变化
植物组织在逆境胁迫条件下膜脂通常会发生过氧化, 它的产生物就是MDA, 这种物质对生物膜会造成比较严重的损伤。通常把它作为细胞膜过氧化的一种指标, 能够在一定程度上反应植株抗逆性的强弱。
低温和干旱胁迫对苜蓿愈伤组织MDA含量的影响见图1。
在半致死温度胁迫条件下, 搭载组MDA的含量为16.87μmol/g, 对照组为18.05μmol/g, 低温胁迫下搭载组愈伤组织的MDA含量比对照组降低6.54%;在PEG半致死浓度的胁迫条件下, 搭载组MDA的含量为18.53μmol/g, 对照组为19.72μmol/g, 干旱胁迫下搭载组愈伤组织的MDA含量比对照组降低了6.03%;2种胁迫条件下, 搭载组比对照组的MDA含量均降低, 经统计分析可知差异显著 (P<0.05) , 说明太空环境使膜脂过氧化程度降低了, 提高其对逆境的抵抗能力。
2.2.2 相对电导率的变化
当植株处于逆境胁迫条件下时, 细胞质膜透性会逐渐增大, 伴随着细胞外电解质的增加, 相对电导率也因此随之增大, 但抗逆性强的品种相对于抗逆性弱的品种原生质膜的稳定性较强, 因此, 在研究苜蓿抗寒性和抗旱性时, 相对电导率的变化可作为一项生理鉴定指标[5]。
低温和干旱胁迫对苜蓿愈伤组织电导率的影响见图2。
在半致死温度胁迫条件下, 搭载组相对电导率为14.01%, 对照组为17.04%, 低温胁迫下搭载组愈伤组织的相对电导率比对照组降低了17.78%;在PEG半致死浓度的胁迫条件下, 搭载组相对电导率为16.96%, 对照组为20.00%, 干旱胁迫下搭载组愈伤组织的相对电导率比对照组降低了15.20%;2种胁迫条件下, 搭载组与对照组相比相对电导率均降低, 且统计分析结果表明差异均达到极显著水平 (P<0.01) 。说明空间环境使原生质膜稳定性提高了, 使其对逆境的抵抗能力增强。
2.2.3 游离脯氨酸含量的变化
植株在处于逆境胁迫状态时, 其体内的游离脯氨酸具有一定的保护作用, 它能维持细胞结构、细胞运输和调节渗透压等, 使植株表现出抗性, 植物的抗逆性与脯氨酸含量存在相关性。
低温和干旱胁迫对苜蓿愈伤组织脯氨酸含量的影响见图3。
在半致死温度胁迫条件下, 搭载组脯氨酸含量为635.11μg/g, 对照组为532.08μg/g, 搭载组比对照组的游离脯氨酸含量提高了19.36%;在PEG半致死浓度的胁迫条件下, 搭载组脯氨酸含量为628.06μg/g, 对照组为537.17μg/g, 干旱胁迫下搭载组愈伤组织的脯氨酸含量比对照组提高了16.92%;2种胁迫条件下, 搭载组与对照组相比游离脯氨酸含量均提高, 且差异均达到极显著水平 (P<0.01) , 说明空间环境能使体内增加游离脯氨酸的含量来提高对逆境的保护作用。
2.2.4 可溶性糖含量的变化
在逆境胁迫条件下植物体内的可溶性糖会大量积累, 一方面作为能量储备, 另一方面作为植物体内主要的渗透调节物质, 用于减少外界对植物造成的伤害。因此, 这一生理指标可在一定程度上反映品种抗寒性和抗旱性的强弱。
低温和干旱胁迫对苜蓿愈伤组织可溶性糖含量的影响见图4。
在半致死温度胁迫条件下, 搭载组可溶性糖含量为101.85 mg/g, 对照组为93.47 mg/g, 低温胁迫下搭载组愈伤组织的可溶性糖含量比对照组提高了8.97%;在PEG半致死浓度的胁迫条件下, 搭载组可溶性糖含量为100.31 mg/g, 对照组为89.68 mg/g, 干旱胁迫下搭载组愈伤组织的可溶性糖含量比对照组提高了11.85%;2种胁迫条件下, 搭载组与对照组相比可溶性糖含量均提高, 且差异达到显著水平 (P<0.05) 。说明空间环境条件下, 植物体内通过积累大量渗透调节物质来减少对逆境的伤害。
2.2.5 过氧化物酶活性的变化
POD可以清除生物体内氧自由基, 避免组织细胞受到伤害, 在生物抗逆境胁迫、抗衰老中起很重要的作用。POD在细胞内含量的升高能够证明细胞在逆境中的活力增强。
低温和干旱胁迫对苜蓿愈伤组织POD活性的影响见图5。
在半致死温度胁迫条件下, 搭载组POD活性为124.68Δ470/ (min·g) , 对照组为86.37Δ470/ (min·g) , 低温胁迫下搭载组愈伤组织的POD活性比对照组提高了44.36%;在PEG半致死浓度的胁迫条件下, 搭载组POD活性为121.47Δ470/ (min·g) , 对照组为77.39Δ470/ (min·g) , 干旱胁迫下搭载组愈伤组织的POD活性比对照组提高了56.96%;2种胁迫条件下, 搭载组与对照组POD活性均提高, 且差异均达到极显著水平 (P<0.01) 。说明空间环境条件下使植物体内大量积累POD而避免组织细胞受到伤害。
2.3 卫星搭载苜蓿愈伤组织抗逆性的比较 (见表3)
由表3数据对比可知, 在PEG胁迫下苜蓿愈伤组织的MDA含量和相对电导率高于在低温胁迫, 而其可溶性糖含量、游离脯氨酸含量和POD活性则低于在低温胁迫, 卫星搭载后的龙牧801苜蓿愈伤组织的抗寒性强于其抗旱性。
3 结论
苜蓿愈伤组织半致死温度为4℃, 半致死PEG浓度为20%。对卫星搭载苜蓿愈伤组织进行低温和PEG干旱胁迫, 搭载的苜蓿愈伤组织POD活性、可溶性糖含量和游离脯氨酸含量显著提高;而MDA含量和相对电导率显著降低。说明卫星搭载提高了苜蓿愈伤组织对低温和干旱的抵抗能力。
参考文献
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[4]张志良.植物生理学实验指导[M].3版.北京:高等教育出版社, 2003.
卫星搭载 篇3
1 材料与方法
1.1 苜蓿种子处理
卫星搭载和未搭载的龙牧801苜蓿种子,由黑龙江省畜牧研究所提供。卫星搭载苜蓿种子于2008年10月15日—11月2日经返回式科学与技术实验卫星搭载,经17 d的空间诱变处理后返回地面,于2009年5月份将搭载和未搭载的种子种植于齐齐哈尔大学植物园。
1.2 试验设计
1.2.1 愈伤组织的诱导和继代培养
取种子经卫星搭载和未搭载的苜蓿叶片,流水下冲洗1~2 h,用0.1%Hg Cl2消毒8~10 min,用无菌水冲洗4~5次,用无菌滤纸吸取叶片上的水分,切割成0.5 cm2小块,接种于MS+l.0 mg/m L 2,4-D+0.5 mg/m L6-BA+30 g蔗糖+8.5 g琼脂(p H值为5.8)愈伤组织诱导的培养基中,于25℃恒温培养箱中培养。培养20 d后,选取黄白色、新鲜、松嫩的愈伤组织,切割成0.5 cm3小块,转接到继代培养基(培养基同上)中,继代2次后的材料就可作为试验材料。
1.2.2 愈伤组织的聚乙二醇(PEG)诱导胁迫
取种子经卫星搭载和未搭载的苜蓿叶片愈伤组织,分别接种到含有20%和30%聚乙二醇(PEG)的半致死浓度液体培养基中,胁迫处理10 d后转接到MS固体培养基中,对存活的愈伤组织继代培养3~4次。
1.2.3 酶活性的测定
对4份材料(未搭载1、搭载2、PEG胁迫未搭载3、PEG胁迫搭载4)进行酶活性的测定。过氧化物酶(POD)活性的测定采用愈创木酚法,超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法[2,3],均重复测定3次。
1.2.4 同工酶的分析
参照吴少伯[4]的方法,对各处理苜蓿叶片愈伤组织进行聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳。POD染色采用醋酸联苯胺法染色;SOD参照罗广华等[5]的方法将凝胶片进行染色,采用氮蓝四唑(NBT)与吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)法进行分析。
1.3 数据的统计分析
采用SPSS17.0统计软件对数据进行统计分析,对同工酶谱带采用Band Scan软件进行分析。根据酶谱计算迁移率(Rf),绘制酶谱模式图。
Rf=r/R。式中:Rf为酶带迁移率,r为从“电泳泳道”点样点到电泳酶带的距离,R为从“电泳泳道”点样点到溴酚蓝指示剂的距离。
2 结果与分析
2.1 酶活性的变化
见图1、图2。
注:1~4分别代表未搭载、搭载、PEG胁迫未搭载、PEG胁迫搭载;字母不同表示差异显著(P<0.05)。
由图1、图2可以看出:与对照组相比,搭载苜蓿愈伤组织POD活性和SOD活性显著高于未搭载对照组(P<0.05),搭载的POD活性和SOD活性也显著高于PEG胁迫未搭载(P<0.05)。说明卫星搭载提高了苜蓿愈伤组织POD和SOD活性,增加了苜蓿叶片对干旱环境的抵抗能力。
注:1~4分别代表未搭载、搭载、PEG胁迫未搭载、PEG胁迫搭载;字母不同表示差异显著(P<0.05)。
2.2 POD酶谱带分析
见279页彩图3。
从279页彩图3可以看出:苜蓿愈伤组织经不同处理后,POD同工酶酶谱电泳图谱存在着明显的差异,苜蓿愈伤组织中POD酶带大多数集中在迁移率为0.08~0.49的范围内,此区的酶带比较集中、活性较强。未搭载和PEG胁迫搭载的苜蓿愈伤组织有相同的酶谱带,即A1=0.08、A2=0.16、A3=0.28、A4=0.36、A5=0.49。卫星搭载的苜蓿愈伤组织POD同工酶较未搭载增加1条酶带,即B2。在0.51~0.91范围内,PEG胁迫搭载的苜蓿愈伤组织酶带较未搭载的酶带数多2条;PEG胁迫搭载的愈伤组织出现了新的酶带,即B2=0.71和B3=0.91,但酶活性较弱。
2.3 SOD酶谱带分析
见279页彩图4。
如279页彩图4可以看出:不同处理苜蓿愈伤组织SOD酶谱中存在着明显差异,苜蓿愈伤组织中SOD酶带大多数集中在迁移率为0.07~0.54的范围内,此区的酶带比较集中、活性较强;未搭载和PEG胁迫搭载的苜蓿愈伤组织有相同的酶谱带,即A1=0.07、A2=0.27、A3=0.42和A4=0.54,此区域内酶的活性较强。卫星搭载的苜蓿愈伤组织SOD同工酶较未搭载的增加2条酶带,即B2、B4。在0.61~0.93范围内,PEG胁迫搭载苜蓿愈伤组织的酶带数较PEG胁迫未搭载的多2条,PEG胁迫搭载的酶谱中出现了新的酶带B3和B4,但酶活性较弱。
3 讨论
植物组织器官内的各种保护酶类主要有SOD和POD等。其中SOD是植物体内清除活性氧自由基等的第一道防线,在植物内发挥着十分重要的作用。POD同样也是一种植物体内具有保护性的酶类,它可以分解植物体内超标的过氧化物,减少对生物的氧化伤害,通过催化H2O2与一些底物发生氧还反应。研究显示,POD和SOD活性越高,植物的抗逆能力随之增强[5,6]。
苜蓿愈伤组织对干旱环境的适应能力主要取决于愈伤组织中POD和SOD活性的强弱。苜蓿愈伤组织POD和SOD同工酶谱带的变化可能是空间环境激活了某些相关酶基因表达的结果。本试验中,PEG胁迫的苜蓿愈伤组织中POD和SOD活性显著高于未胁迫,搭载的苜蓿愈伤组织中的POD和SOD活性明显高于未搭载。说明PEG胁迫和卫星搭载提高了苜蓿愈伤组织的抗旱性。
注:1~4分别代表未搭载、卫星搭载、PEG胁迫未搭载、PEG胁迫搭载。
注:1~4分别代表未搭载、卫星搭载、PEG胁迫未搭载、PEG胁迫搭载。
摘要:为了进一步研究卫星搭载对苜蓿同工酶的影响,试验对卫星搭载和未搭载的苜蓿愈伤组织进行聚乙二醇(PEG)胁迫,测定过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及同工酶酶谱的变化。结果表明:卫星搭载和PEG胁迫均显著提高了苜蓿愈伤组织POD和SOD活性(P<0.05)。卫星搭载的苜蓿愈伤组织POD和SOD同工酶比未搭载分别增加1,2条酶带;经PEG胁迫后,卫星搭载的苜蓿愈伤组织酶谱带均增加1条。说明卫星搭载和PEG胁迫可以提高苜蓿愈伤组织的抗旱性。
关键词:紫花苜蓿,太空搭载,聚乙二醇(PEG),抗旱性,过氧化物酶(POD),超氧化物歧化酶(SOD)
参考文献
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