冰冻切片术（精选9篇）
冰冻切片术 篇1
近年来, 妇科肿瘤患者数量及行手术治疗的比例均明显增加, 较多妇科肿瘤手术采用腰-硬联合麻醉。患者术中清醒, 又因女性特有的柔弱与敏感, 术中应激反应更为强烈, 尤其在术中冰冻切片病理结果等待期间, 患者对肿瘤性质良性结果的期望以及对恶性结果的恐惧几乎达到了顶峰, 心理压力极其巨大, 极易产生不良后果, 甚至影响手术的治疗效果[1]。为此, 我们在患者冰冻切片结果等待期间对其进行心理干预治疗, 取得良好效果。报道如下:
1 资料与方法
1.1 一般资料及分组
选取2010年1-12月间行围术期护理干预并有完整参数资料记录的100例妇科肿瘤患者设为对照组, 该组患者在术中冰冻切片等待期均未行相应心理干预。另按年龄、病情、文化程度、家庭背景及术前焦虑评分进行匹配, 选取2011年1-12月间在我院住院手术的妇科肿瘤患者100例设为观察组, 该组患者除常规围术期护理干预外, 术中冰冻切片等待期还进行包括语言交流、肢体接触、背景音乐等多种方法全方位的综合心理干预[2]。手术均采用腰-硬联合麻醉, 术中患者清醒, 麻醉效果满意。两组患者均排除合并精神疾病及内分泌疾病。
1.2方法
两组患者入手术室后, 均受到热情接待并常规进行心理护理, 使患者处于较好的心理状态。
1.2.1对照组
仅采用常规的围术期护理干预, 术中冰冻切片等待期嘱其安静休息等待结果。
1.2.2观察组
围术期护理干预同对照组。术中冰冻切片等待期患者因期盼确定肿瘤的性质是良性或恶性而大多焦虑不安, 此时巡回护士关闭手术室内无影灯并播放舒缓优美的音乐, 以减轻患者的心理恐惧, 使其调整放松心情, 解除不良情绪。医护人员应主动守护在患者身旁, 与患者耐心交谈, 给予其社会性心理支持、安慰、鼓励。巡回护士可握住患者的手, 让其放松、深呼吸、咳嗽等, 增加信心, 给予鼓励, 使患者达到从生理、心理接受病理结果的最佳状态。
1.3观察指标
麻醉前测量并记录两组患者的心率、血压、呼吸等, 在医护人员指导下填写焦虑自评量表 (SAS) 进行自评。肿瘤切除后送冰冻期间观察组患者进行心理干预护理。30min后 (冰冻结果报告前) 再测患者的心率、血压、呼吸等生命体征值, 再次填写焦虑自评量表 (SAS) 进行自评, 得分越高说明焦虑越重。另选取相应时间段中对照组患者麻醉监护记录单上生命体征记录数据及焦虑评分数据资料与观察组进行对比分析。
1.4统计学方法
采用SPSS 13.0统计软件进行处理, 计数资料采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者不同时段心率、血压、呼吸等比较
入手术室后麻醉前两组患者的各项生命体征测定值接近, 差异无统计学意义;而冰冻切片病理结果等待期观察组患者的心率、收缩压、呼吸等数值低于对照组, 差异有统计学意义。详见表1。
2.2 两组患者不同时段焦虑情况比较
入室后麻醉前两组患者的焦虑状态接近, 差异无统计学意义;而冰冻结果等待期观察组患者的焦虑值明显低于对照组, 差异有统计学意义。详见表2。
3 讨论
手术作为一种应激源, 能使患者产生较强烈的应激反应, 出现紧张、恐惧等心理, 从而引起生命体征及情绪的变化, 甚至影响麻醉和手术的正常进行[3]。适宜的围术期护理干预可减少手术应激反应的强度, 对保证手术安全、加快术后恢复、节省医疗费用、取得良好的社会效益意义重大[4]。
术中快速冰冻切片病理检查是临床医师在实施手术过程中为了解病变切除组织的性质, 明确肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤残留, 以及确定恶性肿瘤的扩散范围等情况而要求病理医师快速进行的紧急会诊。由于该时期患者肿瘤性质待定, 产生负性情绪是很自然的, 虽然仅有半小时左右, 但患者对良性结果的期望以及对恶性结果的恐惧几乎达到了顶峰, 悲观、焦虑不安、精神紧张、抑郁和无助感等使机体处于一种高度的应激状态[5]。
本文结果表明, 妇科肿瘤手术患者在冰冻切片等待期进行心理干预后, 患者的心率、收缩压、呼吸以及焦虑评分均显著低于对照组, 提示心理干预在一定程度上有助于减轻患者交感神经系统的过度兴奋, 可有效降低应激反应的强度。我们认为, 冰冻切片等待期的心理干预为围术期护理干预不可或缺的部分, 对于能够稳定患者情绪, 使之能以平和的心态面对病理结果, 积极配合治疗, 它对于整个围术期的护理干预效果以及患者术后生理和心理的痊愈, 都将起到非常积极的作用。
参考文献
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冰冻切片术 篇2
郑则钦
庞瑾昱
陈斌
【摘要】 目的 探讨冰冻切片技术在临床病理诊断中的应用。方法 收集外科手术中冰冻诊断病例，应用快速冰冻切片法、快速冰冻染色法等对冰冻诊断病例进行分析。结论 冰冻切片技术中常见的问题及改进；影响冰冻切片质量的因素；冰冻切片在病理诊断中的作用。
【关键词】 冰冻切片； 病理诊断
冰冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法，是手术过程中采取活体标本，进行快速的组织学诊断的方法，其便捷的优点，利于术中确诊病变性质，决定手术范围，但由于各种原因，影响冰冻切片的质量，拖延病理报告发出的时间，直接影响着病理诊断的及时性、准确性，间接影响病人的预后。
材料与方法
1.材料：收集外科手术中冰冻诊断病例
2.方法：应用快速冰冻切片法、快速冰冻染色法等
结
果 组织取材大小要适宜，约为1.5×1.5㎝,厚2㎜。2 坏死组织影响冰冻切片的完整性。3 冰冻时间根据组织的大小及性质所决定。4 冰冻温度一般设置在－18～－20℃。5 染液的酸碱度要适宜。1 组织取材对制片的影响 组织取材大小：组织块大小要适宜，冷冻切片机内切片刀移动的范围有一定的限制，超出其范围时，易致切片不全。一般情况下，冰冻切片的组织大小为1.5×1.5㎝,厚2㎜。但卵巢肿瘤及脂肪组织可稍微大些。组织块过大，切片时阻力过大，易产生皱折，刀痕，组织易崩碎，增加制片难度，影响诊断。如需在同一标本托上放大于两块组织时，应尽量冻成一个平面，与刀锋平齐，以防切片不完整，发生漏诊。若送检组织过小，请预先速冻一冷台面，再行包埋，利于制片。另外，包埋时，应将组织平放在冻头的中央。组织内含过多的脂肪或坏死组织：脂肪或坏死组织较一般的组织冷冻的温度要低些，当活组织达到所需的温度时，其还比较软，从而影响切片的完整性和拖延冷冻报告发出的时间。组织块过冷：组织冷冻过度易致切片破碎或呈粉沫状，不能制作一张完整的切片。组织块冷冻不均匀：在配合使用液氮时，组织块放入液氮时不能保持水平状态且液氮量不足的情况下，可产生此现象。冻头的温度不足：冷冻切片时要求冻头的温度保持在－25℃～－30℃左右，冻头的温度达不到要求时，组织很快回软，也不能保证切片的完整。冷冻时间对制片的影响：根据组织块的大小、性质，确定冷冻时间，一般13～17s（使用液氮者），若组织较大或脂肪组织时间可适当长些，而甲状腺、脑组织和淋巴组织等冷冻的时间相对要短些。冷冻时间要严格掌握，时间过长，切片易脆碎，其处理方法是：切出完整平面后用戴乳胶手套的拇指按压回温，直到切片完整为止，反之，时间过短，则需继续冷冻，直到组织不粘刀片出现完整切片为基准。冷冻箱体工作温度对制片的影响：一般组织设定为－18～－20℃。但对一些较特殊的组织标本，温度应适当调整，如脂肪成分较多的组织以－30～－35℃为宜，纤维腺瘤，子宫等为－20℃，淋巴结，甲状腺为－18℃，切片时，表面玻璃机器盖子不要打开过大，以免箱体回温过快，影响制片。保持冻箱的温度，做到每次做完冷冻切片应关好冷冻箱的盖子。染色对制片的影响：尤以细胞核的染色最为关键，在寒冷的冬季，室温过低时，影响核的着色，可适当加温，用以增色，苏木素的酸碱度应适宜，经常观察其染液的ph值，过碱时应及时更换，盐酸酒精分化适度，时间控制到位，否则易造成核着色不佳，染色质不清晰，影响诊断的准确性。冰晶的形成对制片的影响：此原因主要取决于组织含水量的大小，尤以组织细胞水肿，淋巴结，纵隔肿瘤，卵巢肿瘤为甚，送检取材过程中接触水源，速冻过程中使用的液氮时间尚未控制好，同是造成冰晶形成的原因，其解决方法为，使用液氮时间上控制到位，保证一次冻透标本，组织送检取材时，尽量避开水源，如遇含水量高的标本时，应尽量用干纱布吸干水分后再行冷冻，避免由于冰晶形成出现诊断上的失误。操作者的动作应迅速。6 切片皱缩或卷缩：这也是影响切片质量的重要因素之一。常见的原因有：①刀锋变钝。② 防卷板粘有异物，防卷板的作用是防止切片卷缩，但若粘有异物，切片时组织会被挤压而缩在一起。③ 防卷板与刀锋的位置不平行、不协调。④ 组织块包埋不完全，缺乏支撑作用。
预防与处理的方法：① 注意检查刀具，及时更换刀口，定期磨刀。② 保持防卷板的清洁，每做一例冷冻切片，均应将刀口及防卷板拭擦干净，防止切片的污染和切片皱缩。③ 调整刀、防卷板的位置，保证两者平行，且防卷板比刀锋前0.2㎜左右。④ 包埋组织应完全，没法切片者再滴加包埋胶。7 切片脱落：冷冻切片是利用温度差（即玻片与组织切片的温度差）将切片粘贴在玻片上，然后进行固定、染色。下面几种情况下可影响切片粘贴的牢固程度，而导致切片脱落：① 组织内含过多的坏死组织。组织细胞坏死崩解后，局部的渗透压升高，吸收水分，切片一经固定，水分逸出，坏死组织失去支撑作用，染色时组织容易脱落。② 固定液浓度过低，这是最常见的原因。③ 载玻片不干净。④ 切片太厚。
预防及处理方法：避免组织内带有坏死组织，条件允许者重新取材；若没有组织可代替，切片固定时间长些，经95％乙醇双重固定后，用电吹风将切片吹干（温度不能过高，以防破坏组织结构）然后再进行染色且动作应轻柔。② 定期更换固定液。一般每周更换一次，例数较多者，适当增加次数；另外，每次做完冷冻，应及时将盛固定液的瓶盖盖好，以防固定液挥发而降低其浓度。③ 保持载玻片干净，平时应将玻片盖好，防止灰尘或其它异物的污染。若新购买的玻片较脏，洗涤过后才使用。④ 调好切片的厚度，切片厚度以5～7um较为合适（脂肪组织可稍为厚些）。组织块脱落：冷冻切片一般要求在30min内发出病理报告，以便手术医生能尽快选择手术方式。但若组织块脱落，会拖延病理报告发出的时间，而耽误病人的手术时间。常见原因有：① 冻头在冷冻机内放置时间过长，致使包埋胶还来不及渗到冻头的底部便凝固了，导致包埋胶与冻头粘连不紧，稍受外力的作用便脱落；② 冻头上的包埋胶冲洗不干净。
冰冻切片术 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2011年8月至2012年8月于我院妇科诊断为卵巢肿瘤并进行手术治疗的患者100例, 收集临床资料, 进行回顾性研究。患者术中均采用冰冻切片病理检查。术后对所取组织剩余部分进行石蜡切片病病理检查。比较两种检查方式的检查结果以及冰冻切片检查的准确率。
1.2 病理检查方式
①冰冻切片:患者手术过程中病理检查采用冰冻切片的方式诊断。对于所选取的病例组织OCT包埋, 进行冰冻切片, HE染色、脱水;镜下观察[4]。②石蜡切片:患者手术后, 对于所取病理组织剩余部分采用石蜡切片的方式诊断。
1.3 评价指标
比较两种病例检查方式的检查结果, 以及冰冻切片检查与石蜡切片检查的符合率。完全符合, 两种检查方式结果肿瘤来源于良恶性均一致;基本符合, 肿瘤良恶性诊断一致;不符合, 肿瘤来源及良恶性均不一致。
1.4 统计学处理
采用SPSS19.0统计学软件完成。两种检查方式比较计量资料采用t检验, 计数资料采用方差分析χ2检验, 以P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 两种方式诊断结果
冰冻切片与石蜡切片诊断结果总体符合率为95.0%。其中完全符合率为89.0%, 基本符合率为6%, 诊断错误的概率为5.0%。
2.2 两种方式检查组织学结果比较
见表1。可见卵巢肿瘤患者冰冻切片与石蜡切片检查结果, 性索间质来源肿瘤符合率为100.0%, 体腔上皮来源符合率为93.8%, 生殖细胞来源符合率为93.1%, 其他来源符合率为100.0%。
2.3 两种方式对于肿瘤良恶性检查结果比较
见表2。可见, 冰冻切片与石蜡切片相比在卵巢肿瘤诊断中, 良性肿瘤的诊断符合率为98.6%, 恶性肿瘤的诊断符合率为87.5%, 交界性肿瘤的诊断符合率为66.7%。
3 讨论
术中冰冻切片是临床用于术中判断病理组织性质的常用方式。冰冻切片的优点为, 可以在较短时间内得到病理结果, 有利于手术方式以及手术范围的确定[5];同时, 冰冻切片诊断的准确率较高, 误诊率较低[6]。卵巢肿瘤是妇科常见的肿瘤, 手术方式及手术范围极大的影响了患者术后生活质量、生育能力等[7], 因此, 对于肿瘤性质及组织来源的判定十分重要。准确的术中病理诊断, 在临床医生选择手术方式时提供了重要依据, 减少了过度治疗以及治疗不足对患者的不良影响。
本次研究中, 冻切片与石蜡切片诊断结果总体符合率为95.0%, 完全符合率为89.0%, 基本符合率为6%, 诊断错误的概率为5.0%。卵巢肿瘤组织来源复杂, 且卵巢肿瘤常合并出血、坏死等, 在病理取材、诊断等过程中, 容易出现错误[8], 因此, 卵巢肿瘤冰冻切片的误诊率常较其他肿瘤高。本次研究中体腔上皮来源的卵巢肿瘤误诊率为6.2%。卵巢肿瘤中上皮性来源的肿瘤形态复杂多样, 容易误诊。本次研究中交界性肿瘤的诊断误诊率为33.3%, 因交界性肿瘤组织来源复杂, 且具有一定的浸润性, 与恶性肿瘤难以区分[9]。因此在临床工作, 对于肿瘤性质的判断, 不可单纯依据病理检查, 医生需结合患者临床症状, 实验室、影像学等多方面检查做出判断。临床医生在手术过程中应对于质地不同的病理组织, 分别取材[10];取材部位应准确;若有腹水, 也需送检, 有利于判断肿瘤的良恶性以及组织来源。病理诊断医师对于选取的病理组织, 应进行多层面切片, 全面的检查。
综上所述, 冰冻切片在卵巢肿瘤术中病理切片诊断中, 具有较高的准确率, 且可迅速判断肿瘤性质, 符合手术中病理检查的需要, 值得临床推广应用。
摘要：目的 探讨冰冻切片在卵巢肿瘤手术中的病理诊断价值以及临床价值, 寻求较为准确的诊断方法。方法 选取2011年8月至2012年8月于我院妇科诊断为卵巢肿瘤并进行手术治疗的患者100例, 收集临床资料, 进行回顾性研究。患者术中均采用冰冻切片病理检查。术后对所取组织剩余部分进行石蜡切片病病理检查。比较两种病例检查方式的检查结果, 以及冰冻切片检查与石蜡切片检查的符合率。结果 冰冻切片与石蜡切片诊断结果总体符合率为95.0%。其中完全符合率为89.0%, 基本符合率为6%, 诊断错误的概率为5.0%。卵巢肿瘤患者冰冻切片与石蜡切片检查结果, 性索间质来源肿瘤符合率为100.0%, 体腔上皮来源符合率为93.8%, 生殖细胞来源符合率为93.1%, 其他来源符合率为100.0%。冰冻切片与石蜡切片相比在卵巢肿瘤诊断中, 良性肿瘤的诊断符合率为98.6%, 恶性肿瘤的诊断符合率为87.5%, 交界性肿瘤的诊断符合率为66.7%。结论 冰冻切片在卵巢肿瘤术中病理切片诊断中, 具有较高的准确率, 且可迅速判断肿瘤性质, 符合手术中病理检查的需要, 值得临床推广应用。
关键词：卵巢肿瘤,手术,冰冻切片
参考文献
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冰冻切片术 篇4
诊断不一致时的 追踪与讨论的规定与程序
在手术中快速冰冻病理诊断病例中，当出现术中快速冰冻切片检查病理报告与术后病理报告诊断不一致时，相关科室应开展追踪、讨论的程序。
一、病理科主任组织科内相关人员进行相关病例的讨论(2周内)，分析两者诊断报告不一致的原因和存在问题，主要从以下几方面查找原因并准确记录：
（一）术中快速冰冻切片送检标本手术医师取材是否准确;
（二）申请冰冻切片诊断的病例是否符合进行冰冻切片诊断的要求;
（三）病理取材是否规范，有无遗漏病变;
（四）病理技术员制片是否优良，有无影响切片诊断的因素；
（五）诊断中是否存在假阴性或假阳性；
（六）有无请高级职称病理医师复诊；
（七）术中病理医师与临床手术医师是否进行信息交流沟通等。
二、明确存在的问题后，对发生的原因进行讨论分析，提出针性的改进措施，同时针对相同科室、送检相同部位术中冰冻切片诊断的病例进行复查、追踪，落实改进措施，避免类似情况再次发生。
三、病理科应与临床科室进行交流，讨论出现诊断结果不一致的原因以后需要改进的地方。
乳腺疾病冰冻切片的病理分析 篇5
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集病例530例, 年龄23~65岁, 其中男性2例
1.2 方法
送检新鲜组织, 取材置Leica恒温冷冻切片机内冰冻切片, 乳腺肿块病变直径<2.5 cm全部取材, 直径>2.5 cm的肿块根据肿瘤情况酌取2~3块, 所送切缘及前哨淋巴结全部取材冰冻切片、HE染色、光镜诊断。
2 用途及注意事项
2.1 乳腺冰冻切片的用途
确定病变性质, 确定间质浸润, 确定手术切缘有无肿瘤, 确定淋巴结有无肿瘤转移, 辨认组织类型。不适于冻切冰片诊断的乳腺病变穿刺组织, 导管内乳头状瘤 (<0.5 cm) , 某些导管内乳头状瘤与导管内乳头状癌, 某些纤维腺瘤与良性分叶状肿瘤, 淋巴造血系统肿瘤。
2.2 冰冻切片诊断的注意事项
仔细阅读病史资料, 大体标本的观察及取材, 保证切片质量, 全面的镜下观察, 组织结构—细胞特点—病变背景, 低倍—组织结构, 高倍—细胞特点, 恰当的诊断及报告, 综合判断分析, 得出结论。大体标本观察: (1) 边界清楚的病变并非总是良性, 放射状病变不总是恶性。 (2) 浸润性小叶癌可表现为弥漫性组织增厚而不是清楚的肿物。 (3) 瘢痕或放射状的病变。良性:脂肪坏死, 放射状瘢痕/复杂性硬化性病变, 微管腺病, 颗粒细胞瘤。恶性:乳腺癌, 囊性病变。 (4) 良性:纤维囊性病变等。恶性:囊内乳头状癌, 罕见的浸润性癌 (鳞癌) 。 (5) 边界清楚或分叶状病变, 良性:纤维腺瘤及亚型, 良性分叶状肿瘤, 导管内乳头状瘤。恶性:导管内乳头状癌, 髓样癌, 粘液癌, 恶性分叶状肿瘤, 肉瘤。
3 结果
530例标本阳性切缘131例, 前哨淋巴结阳性320例, 良性病变76例, 3例延迟诊断。
良性乳腺病变的鉴别诊断, 见表1。
4 讨论
1818年兰解剖学家Pieter de Riemer首先创造了冰冻切片技术。1891年, 美国Johns Hopkins医院外科医生William Halstead和病理医生William Welch第1次将冰冻切片用于临床病理诊断[2,3]。类型不易确定时先明确病变性质, 描述性和倾向性的报告, 良恶性难以确定的病变, 延期诊断 (待石蜡切片确诊、待免疫组化确定诊断等) , 临床诊断与病理诊断严重分歧要与临床医师联系, 疑难病例进行科内会诊讨论, 可疑肿瘤, 难以确诊, 再次切片或重取组织, 延迟报告的原则, 缺乏足够的组织学改变依据时, 病理诊断与临床诊断存在原则性分歧时。乳腺冰冻切片诊断的陷阱细胞的假异型性;细胞体积大, 切片厚, 细胞密集, 染色模糊, 如浆细胞—癌细胞, 细胞膜界限不清, 细胞膜不清楚, 细胞界限不清, 如多核巨细胞, 细胞浆均质化, 细胞内空泡, 细胞排列的假结构, 炎细胞—条索状排列—癌细胞, 血管腔—腺管[4]。冰冻切片易误诊的乳腺病变放射状硬化性病变—浸润性癌, 硬化性腺病—浸润性癌, 纤维化腺病—小管癌, 硬化性乳头状瘤—乳头状癌, 导管内乳头状瘤并梗死—导管内乳头状癌, 导管上皮旺炽性增生—导管原位癌, 炎症—浸润性小叶癌, 导管原位癌伴小叶癌化—微浸润癌, 乳头腺瘤—浸润性癌, 颗粒细胞瘤—乳腺癌。微浸润灶形态特点:与原位癌分离的癌细胞灶, 位于非特化的小叶间质内, 腺体形态不规则, 伴周围炎细胞浸润, 纤维组织增生反应, 提示微浸润, 肿瘤病灶较大 (>2 cm) 多灶性DCIS。良性肿瘤, 预后良好, 中心部位的小灶坏死, 不考虑恶变。但坏死位于较深的部位时, 提示恶性病变可能, 男性的乳头腺瘤可看作癌前期病变, 肿块切除或乳头切除[5]。1905年, Louis B.Wilson发表了第1篇有关冰冻切片的文章, 开启了手术中病理诊断的新纪元。坚实的组织病理学基础及全面的医学知识 (了解临床手术方式, 诊断结果对病人的影响) , 有效地经验积累, 良好的沟通能力, 良好的心态和自信心, 善于学习, 不断总结提高。
摘要：目的 探讨冰冻切片对乳腺肿瘤性质及边缘和前哨淋巴结的检测来提高乳腺冰冻的意义。方法 用冰冻切片机对术中所送标本快速冷冻及切片, 固定HE染色。结果 显示530例标本阳性切缘131例, 前哨淋巴结阳性320例, 良性病变76例, 3例延迟诊断。结论 随着保乳手术的开展, 国外乳腺冰冻切片主要目的是用于手术边缘的确定和前哨淋巴结的检测。目前, 国内冰冻切片在临床病理诊断中的应用越来越普及, 冰冻切片在病理诊断病例中的比例有逐年增高的趋势
关键词：冰冻切片,乳腺疾病,诊断及鉴别诊断
参考文献
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乳腺疾病冰冻切片病理诊断分析 篇6
1 资料与方法
1.1 一般资料
研究对象为该院所收治的344例术中冰冻冰冻切片乳腺病变患者, 其全部为女性, 其年龄在21~64岁之间, 平均年龄为 (37.5±2.6) 岁, 其中良性肿瘤166例, 恶性肿瘤178例, 患者有着完整的临床资料。采取组织学最后诊断为标准, 以统计学分析患者的性别、年龄、病情等资料, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 具备代表性。
1.2 诊断方法
当乳腺肿物标本收到之后, 将肿块仔细检查, 并从最大面剖开肿物或病灶, 在取材1~3块于可疑处并以OCT包埋, 以美康恒温冰冻切片机切片厚4~5μm并以HE染色, 再以10%中性甲醛液固定冰冻剩余组织, 等待后与石蜡切片进行对照。本送检组织判断的最终标准可为石蜡切片结果。将术中快速冰冻切片诊断结果进行对比, 可分为3类, 即: (1) 确诊类为完全或基本相符的快速冰冻切片术中诊断与常规石蜡诊断[3]; (2) 延诊类为不确定的术中诊断不确定, 需与常规石蜡切片诊断对照后判断[4]; (3) 误诊类为结果相反的最后诊断性质, 也就是存在把良性病变误诊为恶性的假阳性或把恶性肿瘤误诊为良性的假阴性[5]。当发出来冰冻报告之后, 就把原来的剩余组织冰冻之后再做成石蜡的切片, 对原来的冰冻切片与石蜡切片进行复习之后, 然后接着对比分析两者的诊断结果情况。
1.3 统计方法
以SPSS10.0统计软件统计分析所有数据, 以χ2检验计数资料。
2 结果
在该组病理诊断的344例冰冻切片之中, 快速冰冻切片诊断的333例的准确率为96.80%。有285例为良性病变, 所占比例为82.8%, 见表1;有59例病理诊断为恶性病变, 所占比例为17.2%, 属于浸润性导管癌的在恶性病变患者中有40例, 在其中所占比例为67.8%, 见表2, 这些属于比较普遍的。
3 讨论
冰冻切片的病理诊断这一术中快速诊断法是通过外科医生与病理医生一起完成的治疗方法。决定如何采取新的治疗方案是实施冰冻切片的病理诊断的主要动机, 其诊断的结果能够决定手术所采取的方式和多大范围需要切除, 尤其是被女性特别看重的乳腺这样的器官, 若诊断不准其后果将十分严重[6]。根据国内外文献研究的结果来看[7]乳腺疾病在冰冻切片的病理诊断中所占的比例很大, 而冰冻切片能够运用到乳腺疾病病理诊断过程中, 就充分说明冰冻切片病理诊断的社会认可度比较高[8]。在用途方面, 冰冻切片的用途为: (1) 为诊断乳腺病变提供重要依据, 并可将手术性质与切除的范围根据肿块的大小来决定; (2) 对于肿瘤的具体范围给予确认, 决定手术是否成功的关键就在于能够顺利切除掉肿瘤的边缘。
通过对该组的上述研究结果可以看出, 采取乳腺疾病冰冻切片病理诊断方法的有着很高的诊断准确率, 这与准确率为94.0%~97.0%的相关文献的准确率报道基本一样[8], 也与准确率为98%~99%的国外文献报道也大体相同[9]。很多因素影响到术中冰冻切片的实施, 这包括取材部位、冰冻条件以及受诊时间等等一些限制性因素, 在很大程度上影响着乳腺疾病冰冻切片病理诊断方式的开展, 这就需要病理诊断医师, 切实提高自身的病理诊断技术, 并注重术前查房会诊环节的工作, 认真了解好患者乳腺病变的病发过程怎样, 其周围组织有何变化, 及其肿块性质如何等, 对检查结果高度重视, 为诊断奠定良好基础[10]。这就要求对于冰冻切片组织要采取真确, 并做好过个平行切面工作, 对于其中明显硬的组织部分要认真探摸。不仅如此, 仔细的肉眼观察对病理医师来说, 也很重要, 是关系到病理诊断结果正确与否的关键性环节, 通常病理医师基本都有着比较长的临床相关业务知识和业务实践经验, 有着冰冻切片比较充分的认识, 通过定期回顾对于误诊率的有效降低非常有用。
综上, 冰冻切片作为术中快速病理组织学诊断乳腺疾病的方法, 准确率比较高, 有着重要的临床诊断价值。
摘要：目的 对乳腺疾病冰冻切片病理诊断进行分析。方法 选取的研究对象344例均为2012年3月—2013年3月我院患者的冰冻切片相关资料。结果 在该组病理诊断的344例冰冻切片之中, 有着99.2%的冰冻切片良性病变准确率和95.1%的恶性病变准确率。结论 冰冻切片作为术中快速病理组织学诊断乳腺疾病的方法, 准确率比较高, 有着重要的临床诊断价值。
关键词：乳腺疾病,冰冻切片,病理诊断
参考文献
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术中快速冰冻切片的点滴经验 篇7
1材料与方法
1.1 材料
德国莱卡CM1900冰冻切片机、组织托、 OCT包埋剂、 一次性刀片、 95%乙醇固定液、铜陵市人民医院手术室所送检的冰冻标本 (2002-2011年5 000余例) 。
1.2 方法
取新鲜组织放置在组织托上置于冰冻台上, 滴加OCT在组织周围, 冷冻2min, 待组织块冷冻变硬时切片, 切片厚度4～6μm, 迅速置入95%乙醇固定液中30s, 苏木素染色, 水洗, 盐酸分化, 返蓝, 伊红, 梯度酒精脱水, 二甲苯透明, 封片。
2结果
切片质量较好, 厚薄均匀完整, 镜下组织结构完整, 无裂纹, 细胞形态清晰, 细胞核、细胞质染色佳, 显示鲜明。
3体会
因为快速冰冻切片有时间限制, 所以提前做好准备工作很重要。首先刀要锋利, 提前按在刀架上, 并调试合适角度, 防止刀温而使切片粘连。其次, 清洁防卷板和调整防卷板, 防止污染及切片皱折。在实际切片过程中, 影响切片质量的因素有很多, 现就常见的主要原因及对策介绍如下。
3.1 切片不全或不能切片
(1) 脂肪和坏死组织过多。 这就要求在取材过程中尽量剔除脂肪和坏死 ; (2) 组织块过冷。组织冷冻过度将导致切片破碎或呈粉末状, 这时可以将手指轻放在组织块上数秒, 然后切片; (3) 组织块过大。组织块应大小合适, 包埋时将组织块放在冻台中央; (4) 冻头的温度。冰冻切片时要求冻头的温度要保持在-25℃左右, 冻头的温度达不到要求, 组织回软快, 将不能保证切片的完整性; (5) 切片机的温度要适应。根据不同的组织设置适合的温度, 如淋巴结、肝、脾、肾在-18～-20℃;甲状腺、肺、前列腺在-20～-22℃;乳腺、子宫、胃肠在-23～-26℃;脂肪-30℃左右。组织脆, 质地细嫩冷冻时间要短, 质地坚韧或脂肪组织要求时间长。
3.2 皱缩或蜷缩
(1) 刀钝。要保持切片刀的锋利; (2) 防卷板有异物。要注意清洁, 同时可以防止切片污染; (3) 防卷板与刀锋的位置不平行。
3.3 结晶水现象
细胞在冷冻过程中, 冷冻时间长, 其蛋白质与水形成的胶体状态受到破坏, 水分从胶体状态的蛋白质中分离出组织所造成的。 在取材时, 如组织本身水分较多, 可以用滤纸把水吸干。其次冷冻时间要短, 只有速冻, 才能减少组织内的冰晶形成
3.4 微小组织的切片
组织托上先放入OCT等包埋剂, 冷冻之后再加入组织, 迅速置入冷冻台上。
3.5 包膜剂
要适量, 可以用普通胶水代替。
3.6 固定
切片后应立即放入甲醇液中固定, 不能等到干后再固定, 这样易造成细胞蜕变, 染色模糊不清。95%乙醇效果好, 作用快, 染色较清晰。
乳腺癌冰冻切片的病理诊断探究 篇8
1 乳腺癌冰冻切片病理诊断的方法
通常情况下, 对乳腺癌患者均是采用常规的影像学进行检查, 倘若对患者有着高度怀疑的情况, 那么则采用FNAC进行辅助诊断, 患者在通过FNAC进行辅助诊断时则应该在术中观察组织的冰冻切片, 确保能够及时地选择手术方式以及手术位置[2]。FNAC辅助诊断的方式主要是通过0.7~0.8mm外径的注射针头以及10ml的针管, 采用常规的方式麻醉患者, 对乳腺肿块的位置进行消毒处理后, 通过负压针吸标本采集法采集患者病变位置的细胞。在完成细胞的采集后进行5~8张的材料涂片, 在95%浓度的乙醇溶液中固定湿片大概5~10min后则应该给予HE染色处理。通过两位以上的病理医生对病理进行诊断, 倘若病理医生在冰冻切片中均发现有癌细胞的存在, 则为乳腺癌疾病的诊断。倘若病理医生的意见不统一, 那么则应将患者当成怀疑的对象。在患者同意的情况下, 于手术过程中检查患者冰冻切片的病理, 大体的检查患者的松紧标本后对病变的重要位置进行选取, 通过冰冻切片确认患者的病理, 一般切片厚度大概为5μm左右, 通过甲醇进行固定后, 采用HE染色进行处理。通过两名病理科主治医生检查乳腺癌患者的冰冻切片。
2 鉴别乳腺癌病理的重要性
乳腺癌患者在术中为了避免出现因为手术不足或者过度出现二次手术的情况, 在患者的手术过程中对乳腺癌肿块的位置通过冰冻切片进行固定有着非常重要的作用。余鹏飞等[3]研究资料表明, 乳腺癌疾病类型在冰冻切片病理诊断中有着较高的确诊率, 但还是存在没能确诊的患者。所以乳腺癌患者的临床治疗中, 应该重视以下几个方面的病理鉴别: (1) 鉴别乳腺癌以及不典型增生症状。通常情况下, 不典型增生主要是指乳头呈现瘤样增生的状态, 有着腺样、筛状以及实性增生等情况。需要判断小管样癌、粉刺样癌、导管原位癌以及乳头装囊腺癌等疾病, 主要判断依据为肌上皮细胞是否存在以及机体内的基底膜是否处于完整状态。 (2) 判断炎性乳腺癌以及炎性病变主要是判断患者的炎性病变纤维组织是否出现增生的情况、淋巴细胞是否出现大量侵润的情况。由于在判断浸润性导管癌之间是否存在炎细胞以及腺上皮团是否存在残留等情况上有着一定的难度。所以在鉴别时需要注意几个方面, 首先要对患者的病史全面考虑, 对患者X线、B超检查的结果进行分析;其次, 从不同方面选取标本, 检查冰冻切片的病理, 全面查找相对明显的病变原因;最后, 通过超过两名的病理医生对切片进行观察, 查看是否存在肌上皮以及腺上皮细胞的症状。 (3) 判断硬癌以及硬化性腺病。由于硬化性腺病患者的纤维组织会出现硬化增生的情况, 患者的腺导管呈现变形、萎缩等情况, 特别是在较为严重的受压组织时, 均需要判断是否是硬癌疾病。具体的判断依据是:首先要查看腺上皮细胞的来源情况以及相同情况, 并且检查是否存在上皮细胞。其次, 通过低倍镜对患者的病情情况进行观察, 查看是否存在向外侵润的情况。
3 乳腺癌冰冻切片的病理诊断要点
通常情况下, 乳腺疾病患者的肿块类型在采用常规方式以及体检进行检查时均无法进行确定, 目前, 可以通过细针穿刺细胞学对患者的病理情况进行检查, 因为这种类型的检查方法受到乳腺取材、操作者水平以及技术检验标准等原因的约束, 造成乳腺癌患者在病理检查中出现较高假阴性率、假阳性等情况。目前, 乳腺癌在手术过程中采用冰冻切片等方式对患者的病理情况进行诊断, 有着非常明显的作用, 通过分析患者的治疗情况得知, 采用冰冻切片对患者的病理情况进行诊断能够将术中无法对良恶性肿瘤进行判断的情况全面解决, 同时还避免出现诊断延迟以及误诊等情况。为了能够将良恶性肿瘤的检出率有效提高, 应该重视四个方面的要点: (1) 乳腺癌患者的手术过程中将乳腺肿块的活检组织取出后, 为了能够全面观察以及诊断乳腺癌患者的病理学, 防止患者的肿瘤细胞出现种植扩散的情况, 因此在送检标本中, 尽可能的全面取出肿块, 同时确保取出的肿块组织有少量正常的情况, 防止癌细胞在其他器官组织溢出发生种植生长等情况。标本在送检过程中, 应该尽可能的送检腋下淋巴结组织, 检查是否出现淋巴管转移等情况。 (2) 林艳丽等[4]研究资料显示, 倘若通过冰冻切片对乳腺癌患者的病理进行诊断时, 活检组织出现较为细小的情况, 会在很大程度增加漏诊以及误诊等情况, 因此在送检组织中应该要尽可能的不要选择较为细小的活检标本, 防止在修片过程中出现破坏病灶以及丢失病灶的情况, 造成在诊断乳腺癌疾病的病理上有着不确定性, 对患者手术方式的选择以及预后有着较为严重的影响。 (3) 诊断乳腺癌患者的病理情况时, 为了能够将乳腺冰冻切片的整体质量提高, 取材对检出质量的提高有着非常重要的作用, 因此在观察方面需要非常认真, 取材上有一定的准确性。
通过分析检查病理时间得知。由于乳腺癌患者手术过程中采用冰冻切片方式对患者的病理类型进行诊断, 有着较高的确诊率。医生在乳腺癌患者的手术过程中将乳腺肿块切除后在最快的时间内采用冰冻切片等方式进行处理, 有着较高确诊率以及较短诊断时间等基本特点, 能够给患者选择最优的手术方案提供一定的依据[5]。检查病理有着较短的时间主要是因为:乳腺癌患者的送检标本无需通过透明、脱水以及溶剂等处理方式, 不会出现收缩的情况, 能够将细胞组织原本的样貌保持在较为完好的状态下, 这样就将检查病理的时间在很大程度上缩短, 能够良好的指导以及帮助患者选择最优的手术方式。倘若对漏检的患者采用冰冻切片的方式进行检查, 那么则需要通过临床经验进行辅助才能够对良恶性进行判断, 将患者的手术停止, 采用石蜡切片的方式处理剩下的活检组织, 确诊患者的病情后才能够继续手术, 确保患者的治疗能够获得良好的效果。
4 讨论
随着我国医疗技术的快速发展, 采用冰冻切片等方式对乳腺肿瘤病理情况进行检查有着非常重要的作用, 其有着较短时间、较为简单的操作以及较高确诊率等基本特征。另外, 患者在手术过程中还应该确保选材的正确性, 确保能够使切片鉴别能力以及诊断正确性得到提高, 促进漏诊率以及误诊率得到明显减少。
参考文献
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冰冻切片术 篇9
我科采用德国Leica CM1850冰冻切片机,使用时提前将温度设置为-15~18℃(甲状腺组织不宜温度过低)。该机操作简单,温度设置合理,冷冻速度快,冷冻温度范围大,还可根据需要调整,能满足不同组织的最佳切片温度,制备出高质量的切片。本文将在甲状腺组织冰冻切片制作过程中的一些体会总结如下。
1取材
取材前保持操作台面和器械的清洁干燥,标本不经任何处理(避免接触水),直接交由病理医师进行细致的检查,将标本通过最宽处纵行切开,然后呈平行纵切数个面[2](书页式),根据冰托的大小进行取材,一般为2 cm×2 cm×0.3 cm。若标本中有较多的液体,可用滤纸或纱布轻压将其吸干,以免冷冻时产生冰晶。检查标本时,一定要将线头等异物去除,每一层次都要细致地检查,尤其是呈现出的灰白色小结节,避免遗漏微小病变。
2包埋
提前制作一个OCT(进口的冰冻包埋剂)冰托,在OCT接近凝固时,将组织迅速包入半凝的OCT中。对于有囊性变的组织尤为适合,可使扁平的组织立起来,从而在镜下很方便地观察到囊壁两侧的组织结构和细胞形态。由于OCT价格高,我们在实践中使用普通胶水,也可以起到相同的作用[4]。普通胶水要适当改良一下,在其内加入蒸馏水混匀,蒸馏水的量要适当,加入过多,胶水变稀,容易损伤切片刀;过少则太稠,黏在切片上不容易洗掉,影响切片的质量。通过实践我们总结出胶水与蒸馏水的比例应在2∶1左右。
3冷冻
将冰托直接放入恒冷箱中的冷冻台上,并用平锤把组织压平压实,速冻2 min~3 min后切片。人体细胞水分含量多,经冷冻后产生冰晶,破坏组织的形态结构,影响病理诊断的准确性[5]。导致冰晶形成的因素很多,而最主要的原因是组织在冷冻过程中,冷冻速度过慢、时间过长,导致水分慢慢析出冻成冰晶,速冻则能有效减少组织细胞内的冰晶。实践证明提前制备的OCT冰托配合平锤能明显缩短冷冻时间。
4切片
Leica CM1850冰冻切片机所使用的是一次性刀片,我们平时会备上2~3把刀片放入恒冷箱中(保证刀片的温度与组织块的温度一致),尽量做到每次都使用新的刀片,这样才能切出高质量的片子。提前调整防卷板,使其上方与刀刃在同一水平线上[6],以保证切片能从刀片与防卷板之间经过。防卷板也要提前清理干净,避免污染。粗切前要打开防卷板。
先进行粗切,修出整个切片平面,再放下防卷板,关闭冷箱盖,右手转动切片机的摇柄时力量要均匀,这样就保证了切片的厚度均匀。切出完整片子后打开箱盖,拉开防卷板,用冷箱内的小毛笔挑选最好的一张切片,手持载玻片在片子上方,向下以一个角度粘住片子的一角,在静电作用下片子会吸附在载玻片上并迅速融化(由于切片与载玻片存在很大的温差,所以能吸附得比较牢固)。
切片厚度一般为6μm~8μm,这种厚度可使染色比较饱满、层次清晰,还可以有效避免“风干”假象,同时也会减少冰晶所造成的细胞核空洞。太薄的片子容易失掉一些背景,有时组织容易冻过,切片发脆、片子破裂,这时可用干净的滤纸或纱布在组织上来回摩擦几下(要避免传染标本造成的感染),让组织稍稍升温再切;也可以将组织移出冷箱回暖一下。
通过积累经验,我们发现当“切片带”缓缓地滑过刀片时,要迅速辨认片子的厚度是否合适,若看起来像半透明的镜纸,则是片子太薄;若看起来很浑浊、没有柔性,则是片子太厚;而6μm~8μm的片子就像一张薄的书写纸。当片子上出现垂直于刀片的细条纹时,这一般是刀片缺口所致,往往是标本内的钙化组织、针头或缝线未完全取出。若病变较小时,如甲状腺微小乳头状癌,速冻后往往是一个小白点,此时当切出一点肿瘤部分时,立即贴片,避免肿物被切掉。
5固定
切片迅速置入AAF固定液中,固定时间为10 s~20 s。切片从恒冷箱中出来时便迅速固定,若组织固定延迟会出现“风干”的假象。AAF固定液是由95%乙醇85 m L、甲醛10 m L、冰醋酸5 m L组成的,不仅穿透力强,能迅速沉淀蛋白质,还能使细胞染色更清晰。
6染色
染色前先对切片进行二甲苯脱脂处理,再行梯度酒精脱苯,然后切片水洗→苏木素30 s→水洗→盐酸酒精分化数秒钟→水洗→氨水返蓝→水洗→伊红10 s→水洗→梯度酒精(从95%酒精开始)快速脱水→二甲苯透明→中性树胶湿性封固。需要注意的是:水洗切片时动作要轻柔一些,防止脱片;染苏木素时可将切片在酒精灯上加热,轻轻地来回移动,并要使染液完全覆盖组织不干枯,在室温较低时,这个办法能明显缩短染色时间;染伊红的时间要短一些,时间过长会造成整个切片的背景一片红,对比度变差;梯度酒精快速脱水后进入二甲苯前需要用滤纸吸一下,防止细胞内的水分未干而造成切片中出现“云雾”现象。
7封片、阅片
保持湿性封片,干性封片时细胞核在镜下呈黑色。制作完成后,技术员要在镜下观察切片,不断总结经验,提高技术水平。
8设备养护
Leica CM1850冰冻切片机是非常精密的设备,在平时要加强对它的保养,刀架、支撑台及切片机的旋钮都必须上紧,适时在轴承处添加低温润滑油。经常地开关机器电源容易造成压缩机损伤,而该机冷冻速度快,因此在非工作状态下可以让其保持在-10℃恒冷状态。
制作冰冻切片是一项非常重要的病理技术,合格的切片是病理医师作出正确诊断的基础,这就要求技术人员不仅要有扎实的理论基础、熟练的操作技能,而且更要有足够的责任心和耐心,避免急躁、忙乱。用以上方法制作冰冻切片,从取材到切片封固需要15 min左右的时间,而且切片完整、厚薄均匀,无明显的冰晶裂隙、无脱片,组织细胞的形态结构清晰分明,染色理想,完全满足术中病理诊断的需要。
参考文献
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