化学发光免疫分析仪

化学发光免疫分析仪（精选10篇）

化学发光免疫分析仪 篇1

化学发光免疫分析仪

我只听说在研究分子表面蛋白质时会用到，最近还有一个华裔科学家因为发光蛋白得了诺贝尔奖的。

具体的应用有：

细胞检测中的应用

脂质过氧化物检测的应用（自由基、活性氧分析）

生物传感器的研究应用

分子生物学研究的应用

卫生学检测中的应用

环境检测应用

药物筛选

医学应用

应用化学发光免疫分析法可用于对甲状腺素类、肿瘤标记物、生殖-孕激素类、血清抗原抗体类、心脏指示类等项目检测。

Abbott：Architect i1000/i2000/i4000 SR

AxSYM、AxSYM PLUS

Siemens：（原Bayer）ADVIA Centaur CP、ADVIA CentaurXP

（原DPC）IMMULITE 2000

Beckman Coulter：ACCESS/ACCESS II

DiaSorin：LIAISON

Ortho Clinical Diagnostics：VITROS ECi Immunodiagnostic System

Roche（ECLIA）：Elecsys2010、Cobas E

威海威高生物：全自动AutolumiS2000

深圳新产业生物：MAGLUMI 2000 Plus

上海蓝怡：全自动免疫发光系统AIA-2000

郑州安图生物：AutoLumo A2000

市场占有率具体数据不能给，在化学发光免疫产品中Roche最大，Abbott与Siemens差不多并列排二，

化学发光免疫分析仪 篇2

1 化学发光免疫分析方法类别

1.1 化学发光免疫分析

化学发光免疫分析方法主要是由化学发光剂, 对抗原或者抗体进行直接标记的免疫测定方法之一。当前比较常见的化学发光免疫分析方法主要有吖啶酯类化学发光剂和鲁米诺类化学发光剂。一般情况下, 吖啶酯以及吖啶磺酰胺类的化合物均属于化学发光免疫分析方法, 能够在加入适量的CTAC后, 大大的增强发光效果。其次, 鲁米诺类物质的发光原理主要为氧化发光。含有鲁米诺类物质的碱性溶液, 能够在催化剂的辅助下实现基态, 进而发出光子。

1.2 化学发光酶免疫分析

化学发光酶免疫分析主要采用没进行生物活性物质的标记, 以此判断其免疫反应。出现免疫反应后, 复合物上的酶便会再次对发光底物产生作用, 利用信号试剂等进行发光。当前, 化学发光酶免疫分析当中比较常见的标记酶应该为碱性磷酸酶, 以及辣根过氧化物酶。其中, 碱性磷酸酶主要在酶联免疫分析、核酸杂交分析当中得到了广泛的应用。具有反应速度较快, 分析时间较短, 结果较为正确可靠等优点。而辣根过氧化物酶主要将鲁米诺及其相应的衍生物作为主要的发光底物, 在使用过氧化酶的情况下, 对抗体进行标记。在此基础桑, 通过过氧化酶将发光试剂启动, 将能够起到一定的发光标记作用。金茂俊等 (2012) 在其研究中认为, 该种方法比较传统, 发光强度比较低, 且测量不便。但是, 在长时间的研究下, 已经能够长时间的保证发光新高增强, 分析灵敏且准确[1]。

1.3 电化学发光免疫分析

电化学发光免疫分析主要有电化学原理产生的反应, 引起了一定的化学发光过程。国外著名学者Leland曾在其研究中, 对三联必定钌体系当中所存在的电化学发光机理进行比较全面的且深入的研究。经过研究发现, 当三联吡啶钌作为发光的底物, 三病案作为激发光反应物质时, 阳极的表面会出现两种物质同时失去电子的情况。若三联吡啶钌出现了衰减, 并在衰减的过程中能够发出比较长的, 例如波长为620mm的光子, 其将能够重新恢复成为基态的三联吡啶钌。在此过程当中, 电极的表面将能够产生比较连续的、稳定的、高效的、增强的发光现象。

2 化学发光免疫分析方法的应用

2.1 食品安全检测中的应用

在当前食品安全问题十分严重的情况下, 必须采用有效的方法对食品安全进行检测。洪亮 (2015) 在其研究中表示, 当前化学发光免疫分析方法已经能够在食品安全检测当中得到良好的应用[2]。不仅能够有效的对生物毒素进行检验, 防止人们食入病毒而引起中度时间, 及时发现有毒因素。亦能够对病原微生物等进行检测, 既节省操作时间, 有具有良好的灵敏度。此外, 对于兽药、农药等环境污染物亦能够有效检测, 防止因农药、兽药等药物残留引起中度事件的发生。

2.2 临床诊断中的应用

临床诊断中亦对化学发光免疫分析方法进行了有效的、广泛的应用。尤其在对甲状腺疾病患者进行甲状腺球蛋白浓度的检测当中, 更能够通过该方法有效的提升假阳性和假阴性的检测率。例如, 刘洪玲等 (2015) 在其研究当中, 采用化学发光免疫分析方法对甲状腺患者的假阴性、假阳性检测结果、以及灵敏度、特异性等, 与放射免疫法进行了对比分析[3]。结果发现化学发光免疫方法的检测效果更佳。由此可见, 化学发光免疫分析方法能够在临床诊断中发挥比较良好的效果, 为临床诊断提供有力依据, 值得临床应用并推广。

3 结语

综上所述, 近年来, 化学发光免疫分析方法及其应用的研究逐渐增多, 发展非常迅速。化学发光免疫分析方法的类别主要有化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、电化学发光免疫分析等。同时, 该方法凭借其自身的优势广泛应用于食品安全检测、临床诊断当中。但是, 未来的研究更应该致力于在降低成本、提高质量、扩大应用范围等方面。以此促进化学发光免疫分析方法获得更加良好的、快速的发展和应用。

参考文献

[1]金茂俊, 邵华, 金芬, 等.化学发光免疫分析方法的研究及应用[J].农产品质量与安全, 2012, 05 (02) :42-46.

[2]洪亮.化学发光免疫分析技术在食品有害因素检测中的应用[J].化学工程与装备, 2015, 10 (11) :216-218.

化学发光免疫分析仪 篇3

[关键词] 化学发光免疫分析技术；研究进展；应用

章编号：1004-7484（2014）-03-1787-01

化学发光免疫分析起源于1977年，化学发光免疫分析主要利用了化学发光测定技术和免疫反应，化学发光测定技术有着非常高的灵敏性同时免疫反应有着非常高的特异性，通过两者的结合使得化学发光免疫技术成为现今最新的免疫分析技术。化学发光免疫分析技术较其他免疫分析技术而言拥有着高灵敏度、价格低以及操作简便等多种优点，正因为这些优点使得化学发光免疫分析技术被广泛的运用。

1 化学发光免疫分析技术的基本原理

化学发光免疫分析最关键的步骤就是化学发光以及免疫，免疫分析技术就是对分析的抗原进行标记，而化学发光分析技术就是对所产生的微观反应进行检测，以此来达到分析的目的。免疫分析就是利用抗原与抗体之间的特异性结合所产生的明显现象来检测所检测物质，而采用标记免疫分析就是通过对抗原进行放射性的标记，这样就能够更好的检测微观物质所发生的化学反应[1]。化学发光技术则是化学反应中的一种现象，化学反应必然伴随着能量的迁移，而具备能量的分子为了達到稳定的状态就要释放多余的能量，能量则是通过光形式释放出来，对所发出的光和能量迁移进行分析便可以知道内部所发生的化学变化。

2 化学发光免疫分析技术的应用

由于化学发光免疫分析技术不仅拥有较好的灵敏度以及较高的自动化程度，而且其还有较高的精密程度，所以得到了较多的应用。化学发光免疫分析技术在兽医学、临床医学以及食品分析中都得到了相当多的应用，下面将进行详细介绍。

2.1 化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用 化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用还处于早期阶段，因此没有得到较多的应用。主要原因则是化学发光免疫分析技术在兽医学的应用中会跨越化学、兽医以及生物学科方面的知识，而这样加大了化学发光免疫分析技术的应用难度，因此没有在兽医学中得到较多的应用。但是化学发光免疫分析技术仍然是兽医学中一项疾病快速检测的方法，即通过化学发光免疫分析技术可以精准快速的判定动物所发生疾病的原因，而且通过这项技术的运用还可以监测动物体内的疾病发生概率[2]。化学发光免疫分析技术在我国没有较多的应用到兽医学中，而且技术也没有国外先进，这进一步制约了化学发光免疫分析技术在我国的应用。国外化学发光免疫分析技术在兽医学中的应用较多，比如国外利用化学发光免疫分析技术来进行动物肠道病毒检测试验、猪肉中沙门菌抗体检测以及评价胰岛素浓度对奶牛繁殖性能的影响，并且取得了较好的成果。

2.2 化学发光免疫分析技术在临床医学中的应用 化学发光免疫分析技术在临床医学中有较多的应用，比在兽医学中的应用要更加广泛，而且在临床医学的应用中非常重要。美国通过对化学发光免疫分析技术进行改进，使得其具备更好的灵敏性以及精准性，现今化学发光免疫分析技术在临床医学中主要用来检测甲状腺系统、性腺系统、血液系统以及心血管系统中激素浓度。后来有科学家利用金刚烷衍生物在碱性磷酸酶的条件下可产生长时间辉光的特性将其运用到化学发光免疫分析技术中，即通过碱性磷酸酶来作为标记物，完善后的化学发光免疫分析技术科用来检测心脏病、传染病、糖尿病以及过敏症状，另外还可以用于血液系统和胰岛素的检测中。现今将化学发光免疫分析技术运用的最好的就是Roche公司，其所创造的ECL分析系统可以检测到及其细微的反应信号，并且特异性反应极为强烈，操作过程也非常快捷。

2.3 化学发光免疫分析技术在食品分析上中的应用 现今食品安全已成为人们越来越关注的问题，检测食品中含有的违规成分也有一定的难度。但是通过化学发光免疫分析技术的运用可以快速精确的测定食品中违规成分的含量，使得食品检测部门可以更好的测定食品中含有成分的含量。化学发光免疫分析技术可以用于鸡肉样品中CAP的检测以及牛奶中黄曲霉毒素的检测，国外科学家还利用化学发光免疫分析技术来测定牛奶、牛肉以及鸡蛋中肉毒梭菌毒素A的含量，由于化学发光免疫分析技术有着较高的灵敏度，所以所测定的结果非常准确，而且极大的节省了测试所需要的时间[3]。Yang M等科学家将增强型化学发光免疫检测技术以及电荷耦合器件结合起来创造了检测食品中葡萄球菌肠毒素B的技术，其灵敏度非常高、方法实用而且检测成本非常低。

3 化学发光免疫分析技术的新研究进展

3.1 新的标记物 化学发光免疫分析技术运用的重点就是检测内部微观化学反应的情况，而为了达到更好的检测效果就需要发光物质发光时间更加持久发光更加明亮，而这可以通过标记新的标记物来得以实现。各国科学家都致力于研究标记物的发光时间以及发光强度，标记物发光需要特定酶的催化，这需要科学家通过长时间的实践才能够证明哪一种标记物在哪一种酶的催化下才能够达到长时间的发光以及高强度的发光，另外对于标记物发光过程还需要较高的稳定性。目前科学家通过大量实验得到luminol-H2O2在HRP2A的催化下可以发出高强度而且长时间的光，而且发光的稳定性非常好。化学发光免疫分析技术能够快速、灵敏、精准的测定非常细微的物质含量，对于医学检测以及食品安全检测都有着较多的应用，通过不断的研究会使得该技术得到更广泛的运用。

参考文献

[1] 魏光伟，余永鹏，魏文康.化学发光免疫分析技术及其应用研究进展[J].动物医学进展，2010-03-20.

[2] 农天雷.常用化学发光免疫分析技术及其特点[J].现代医药卫生，2011-07-30.

[3] 吴建伟.化学发光免疫分析技术的临床应用及研究进展[J].中国实用医药，2010-12-10.

化学发光免疫分析仪 篇4

行业报告的用途：

国统调查报告网目前涉及的行业报告、市场分析报告、调研报告、预测报告等众多报告课题的主要用途是辅助业内企业、经理人、专家学者、投资类等企业与个人的重要市场参考文献。是各界了解市场、掌握市场动态、深入了解业内竞争对手、整体市场环境、市场发展潜力、投资前景等多方多角度性分析材料。在实时变化的经济环境中通过多种不同报告掌握市场核心发展价值的重要文献。

各类报告课题数据调研简析：

一、通过对市场整体运行态势监测与相关政策环境的深入解读，形成了国统调查报告网市场研究报告中对市场整体运行及政策环境的整体概述与实际运行数据的整体展现。

二、中金企信国际咨询（国统调查报告网）市场研究报告中以市场现状、重点区域与重点城市市场、竞争格局与企业竞争力、未来发展与投资前景预测、细分产品市场数据分析、上下游产业链运行数据、相关政策导向等多方面进行了细致数据分析及文字性叙述。为业内企业提供清晰细致的市场数据分析。

三、中金企信国际咨询（国统调查报告网）市场研究报告的整合思路，通过自身实调数据与其他渠道的相关数据，我方自身项目组通过跟业内企业管理层（注：为我方外聘顾问）、业内相关专家学者（为我方外聘顾问）、相关高校院所等进行数据的整理及审核后最终完成整份市场研究报告课题。

报告案例如下：

报告简析：

该报告主要围绕市场现状（包含区域市场）、市场竞争与供需格局格局（包含区域市场）、市场规模（包含区域市场）、市场前景（包含区域市场）、上下游产业链分析、价格分析、进出口分析、消费者调查、企业竞争力与主要财务数据分析、技术研发、相关政策法规与环境分析、投资策略、投资风险、风险规避、营销战略选择等多方面进行科学细致的分析，为业内企业提供准确及时的市场数 网 址：

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据分析，是业内企业重要的参考依据。（注：由于多用户报告的各类客户信息关注点不同，上述所涉及的内容可根据具体需求进行调整）

2013-2018年中国化学发光分析产业市场研究预测报告

报告目录

第一章 化学发光分析概述

第一节 化学发光分析简介 第二节 化学发光分析原理 第三节 化学发光分析仪器

第四节 化学发光分析的应用及特点

第五节 化学发光分析的技术进展

第二章 全球化学发光分析行业发展分析

第一节 世界环境监测、临床分析、生物化学市场情况

一、全球化学发光分析行业的市场现状

二、未来全球环境监测、临床分析、生物化学市场将形成七大格局 第二节 美国化学发光分析发展分析

一、美国化学发光分析市场现状

二、美国化学发光分析技术发展情况

三、美国化学发光分析市场发展走向 第三节 欧盟化学发光分析发展分析

一、欧盟化学发光分析发展概况

二、欧盟研发新型化学发光分析

第四节 日本化学发光分析发展分析

第三章 化学发光免疫分析种类

第一节 直接化学发光

一、吖啶酯发光原理及代表仪器

二、异鲁米诺发光原理及代表仪器

三、电化学发光原理及代表仪器 第二节 酶促化学发光或持久发光

一、原理

二、特点

三、代表厂商及仪器

第三节 半自动与全自动化学发光试剂成本与年经济效益对比 第四节 国内各级医院半自动和全自动检测收费情况 第五节 目前的试剂种类及单项价格

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一、肝炎类

二、贫血类

三、糖尿病类

四、甲功类

五、肾上腺类

六、肿瘤类

七、性腺激素类

八、传染病类

九、药物临检类

第六节 主要医院检测人次及价格比较

一、甲胎蛋白（AFP）

二、癌胚抗原（CEA）

三、血清三碘甲状腺原氨酸（T3）

四、血清雌三醇测定（E3）

五、促黄体生长素（LH）

六、促卵细胞生长素（FSH）

第四章 我国化学发光分析行业发展现状

第一节 我国化学发光分析行业发展情况

一、化学发光分析在中国的发展历程

二、影响化学发光分析发展的因素 第二节 我国化学发光分析行业现状

一、我国化学发光分析产品生产状况分析

二、我国化学发光分析产品销售状况分析

三、我国化学发光分析产品进口状况分析 第三节 化学发光分析应用现状与问题

一、我国化学发光分析使用现状调查

二、主要结果分析

三、相关问题分析

第四节2008-2012年化学发光分析市场容量研究分析

一、2008-2012年中国化学发光分析市场容量分析

二、2008-2012年不同品牌化学发光分析产品市场占有率分析

三、2008-2012年不同档次化学发光分析产品市场占有率分析

四、2008-2012年不同地区化学发光分析产品市场容量

五、2008-2012年不同客户化学发光分析产品市场容量

六、2008-2012年化学发光分析市场增长率

第五章 化学发光分析技术发展概况

第一节 化学发光分析相关技术及特点 第二节 化学发光分析技术存在的问题

第三节 化学发光分析技术发展和市场的两大导向

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第六章 2008-2012年化学发光分析供给概况

第一节 国内化学发光分析市场规模

一、影响化学发光分析市场的因素

1、价格

2、质量

3、品牌

4、国内用户数量及规模

5、国内化学发光分析产品使用周期

二、主要用户化学发光分析使用情况

1、主要用户现有化学发光分析产品的品牌和数量分析

2、主要用户现有化学发光分析产品结构及功能分析

3、主要用户化学发光分析产品采购时间

第二节 我国化学发光分析区域市场保有量

一、华北区域

二、东北区域

三、西北区域

四、华东区域

五、华中区域

六、西南区域

七、华南区域

第三节 影响医院选择化学发光分析的主要考虑因素调查分析

一、产品的因素：

二、供应商的因素：

三、使用者的因素：

第七章 化学发光分析产品进出口分析

第一节 2008-2012年我国化学发光分析产品总体进出口状况 第二节 我国化学发光分析仪器进口情况分析 第三节 我国化学发光分析试剂进口情况分析

第八章 主要城市化学发光分析市场情况

第一节 2008-2012年北京化学发光分析市场情况分析

一、2008-2012年北京化学发光分析市场规模

二、主要品牌市场占有率

三、进口/国产对比情况

四、市场上占主流的化学发光分析产品的品牌、型号及价格情况

五、用户普遍采购的化学发光分析产品品牌、型号及价格情况 第二节 2008-2012年上海化学发光分析市场情况 第三节 2008-2012年深圳化学发光分析市场情况 第四节 2008-2012年成都化学发光分析市场情况 第五节 2008-2012年重庆化学发光分析市场情况 第六节 2008-2012年武汉化学发光分析市场情况

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第七节 2008-2012年郑州化学发光分析市场情况 第八节 2008-2012年西安化学发光分析市场情况 第九节 2008-2012年沈阳化学发光分析市场情况 第十节 2008-2012年南京化学发光分析市场情况 第十一节 2008-2012年广州化学发光分析市场情况 第十二节 其它城市市场情况分析

第九章 化学发光分析企业竞争策略分析

第一节 领先者市场竞争策略 第二节 挑战者市场竞争策略 第三节 追随者的市场竞争策略 第四节 补缺者的市场竞争策略

第十章 化学发光分析重点企业竞争力及关键数据分析

第一节 国外生产商进口商 第二节 国内主要生产厂商 第三节 国内主要经销商

第四节 化学发光试剂主要生产商

第十一章 中国检测仪器发展趋势分析

第一节 检测仪器市场发展趋势

一、检测仪器市场潜力和需求发展趋势

二、2013-2018年检测仪器市场增长预测

三、检测仪器配套产品的发展趋势

四、各类用户对检测仪器的需求预测 第二节 未来检测仪器需求的变化趋势

第十二章 未来化学发光分析发展预测

第一节 2013-2018年化学发光分析技术趋势 第二节 未来化学发光分析总体市场规模预测

一、2013年中国市场规模预测

二、2013年全球化学发光分析销售额预测

第一节2013-2018年化学发光分析市场容量预测分析 第二节2013-2018年化学发光分析细分市场预测分析

一、2013-2018年不同地区化学发光分析市场容量分析

二、2013-2018年不同品牌化学发光分析市场容量分析

三、2013-2018年不同级别医院化学发光分析市场容量预测分析

四、2013-2018年不同档次化学发光分析市场容量预测

第十三章 化学发光分析行业投资环境分析

第一节 2013-2018年我国经济形势分析

第二节 2013-2018年中国化学发光分析行业政策环境分析

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第三节 2013-2018年中国化学发光分析行业社会环境分析

第十四章 化学发光分析应用行业投资机会与风险

第一节 2013-2018年化学发光分析应用行业投资情况分析

一、国外环境监测、临床分析、生物化学巨头看好中国市场

二、政府投资将推动中国化学发光分析产业强劲扩张

三、2013-2018年中国化学发光分析行业投资前景分析

四、2013-2018年中国化学发光分析行业投资分析

五、2013-2018年化学发光分析产业投资机会分析 第二节 化学发光分析投资情况分析

第十五章 化学发光分析行业投资战略研究

第一节 化学发光分析发展战略研究

一、技术开发战略

二、产业战略规划

三、业务组合战略

四、营销战略规划

五、区域战略规划

六、信息化战略规划

第二节 2013-2018年我国化学发光分析投资策略

图表目录（部分）

图表 化学发光与酶免的对比 图表 化学发光与放免的对比

图表 化学发光与时间分辨荧光的对比 图表 主要医院检测人次及价格比较

图表 化学发光分析产品现有生产厂家产能一览表 图表 化学发光试剂现有生产厂家产品种类及产能

图表 化学发光分析未来五年生产厂家集中度和产能变化 图表 化学发光分析产品进口注册情况 图表 国产化学发光分析品种注册情况

图表 化学发光分析主要企业在三级医院的市场占有率 图表 用户购买进口化学发光分析统计（按厂家列表）图表 用户购买国产化学发光分析统计（按地区列表）图表 2008-2012年我国化学发光分析产品销售总计 图表 2008-2012年欧盟化学发光分析产品供货总量 图表 2008-2012年美国化学发光分析产品供货总量 图表 化学发光分析产品各品牌在我国市场占有率 图表 2008-2012年我国化学发光分析需求年增长率 图表 我国化学发光分析产品的省市销售统计

图表 2008-2012年我国化学发光分析产品进口金额统计

图表 2008-2012年我国化学发光分析产品进口金额主要国家和地区

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图表 2008-2012年我国化学发光分析产品进口金额主要企业所占比重 图表 世界主要国家拥有的化学发光分析仪器数量及增幅 图表近五年全国综合医院检测费用增长趋势

图表：2009-2012年中国化学发光分析产品进口数据 图表：2009-2012年中国化学发光分析产品出口数据 图表：不同品牌化学发光分析产品在医院使用情况比较 图表：我国各地区化学发光分析产品使用分布情况 图表：三级医院化学发光分析检测人次比较 图表：各级医院免疫检测收费现况 图表：未来化学发光分析技术展望

图表 2013-2018年化学发光分析仪器全国保有量统计及预测 图表 2013-2018年化学发光分析仪器北京市保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器上海市保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器河北省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器江苏省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器福建省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器河南省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器广东省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器重庆市保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器黑龙江保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器浙江省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器江西省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器广西区保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器四川省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器陕西省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器辽宁省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器山东省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器贵州省保有量趋势图 图表 2013-2018年化学发光分析仪器甘肃省保有量趋势图 图表 2012年主要用户采购半自动化学发光免疫分析仪数量 图表 2012年主要用户采购电化学发光免疫分析仪数量 图表 2012年注意用户采购化学发光分析耗材数量 图表：近三年化学发光分析市场增长率 图表：近期拟在建项目列举

图表：使用化学发光分析的用户中不同应用的百分比 图表：使用化学发光分析的用户中不同规模的百分比 图表：不同级别医院购买化学发光分析的平均价格水平图表：主要供应商产品价格列表

图表：国产和进口化学发光分析产品的比例 图表：不同品牌化学发光分析产品购买比例 图表：现有化学发光分析产品采购时间

图表：国内每年平均采购化学发光分析产品数量

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图表：2008-2012年国内化学发光试剂销售额 图表：用户采购渠道百分比

图表：化学发光分析产品主要采购标准 图表：用户选择品牌排序

图表：未来3年主要用户需求评估

图表 2013-2018年各类用户购进化学发光分析产品金额预测（分行业）略……

行业报告简析与用途：

中金企业国际咨询（国统调查报告网）已有十余年的调研经验，起初涉及是就业内企业的实际要求进行调研并为业内企业提供该领域整体的市场运作及市场数据的整体解决方案。经我方业务的不断延伸并结合实际市场需求、经与相关部委的密切沟通于2006年正式对方公布并销售相关报告课题，在此同时与业内企业、官方、第三方机构建立完善的数据与信息平台为该领域企业提供准确高效的市场信息与数据保证。

报告主要围绕市场现状（包含区域市场）、市场竞争与供需格局格局（包含区域市场）、市场规模（包含区域市场）、市场前景（包含区域市场）、上下游产业链分析、价格分析、进出口分析、市场消费调查、企业竞争力与主要财务数据分析、技术研发、相关政策法规与环境分析、投资策略、投资风险、风险规避、营销战略选择等多方面进行科学细致的分析。中金企信国际咨询（国统调查报告网）本着“一心一意做研究，全神贯注为客户”的基本工作理念，为业内企业提供准确及时的市场数据分析，是业内企业重要的参考依据。

项目可行性报告

国统调查报告网（即中金企信国际咨询公司）拥有10余年项目可行性报告撰写经验，拥有一批高素质编写团队，卓立打造一流的可行性研究报告服务平台为各界提供专业可行的报告（注：可出具各类项目的甲级资质）。

项目可行性报告用途

1、企业投融资 网 址：

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此类研究报告通常要求市场分析准确、投资方案合理、并提供竞争分析、营销计划、管理方案、技术研发等实际运作方案。

2、国家发改委立项

此文件是根据《中华人民共和国行政许可法》和《国务院对确需保留的行政审批项目设定行政许可的决定》而编写，是大型基础设施项目立项的基础文件，国家发改委根据可行性研究报告进行核准、备案或批复，决定某个项目是否实施。另外医药企业在申请相关证书时也需要编写可行性研究报告。

3、银行贷款申请

商业银行在贷款前进行风险评估时，需要项目方出具详细的可行性研究报告，对于国内银行，该报告由甲级资格单位出具，通常不需要再组织专家评审,部分银行的贷款可行性研究报告不需要资格，但要求融资方案合理，分析正确，信息全面。另外在申请国家的相关政策支持资金、工商注册时往往也需要编写可行性研究报告，该文件类似用于银行贷款的可研报告。

4、申请进口设备免税

主要用于进口设备免税用的可行性研究报告，申请办理中外合资企业、外资企业项目确认书的项目需要提供项目可行性研究报告。

5、境外投资项目核准

企业在实施走出去战略，对国外矿产资源和其他产业投资时，需要编写可行性研究报告报给国家发展和改革委或省发改委，需要申请中国进出口银行境外投 网 址：

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资重点项目信贷支持时，也需要可行性研究报告。

6、政府资金项目申报

企业为获得政府的无偿资助，需要对公司项目进行策划、设计、技术创新、技术规划等，编写的可行性研究报告包含管理团队、技术路线、方案、财务预测等，是政府无偿资助的项目申报的主要依据。

项目可行性报告分类

可行性研究报告分为：政府审批核准用可行性研究报告和融资用可行性研究报告。

（1）审批核准用的可行性研究报告侧重关注项目的社会经济效益和影响；具体概括为：政府立项审批，产业扶持，中外合作、股份合作、组建公司、征用土地。

（2）融资用报告侧重关注项目在经济上是否可行。具体概括为：银行贷款，融资投资、投资建设、境外投资、上市融资、申请高新技术企业等各类可行性报告。

国统调查报告网（即中金企信国际咨询公司）以专业的服务理念、完善的售后服务体系为各界提供精准、权威的项目可行报告。

商业计划书

商业计划书撰写目的 网 址：

中金企信（北京）国际信息咨询有限公司—国统调查报告网

商业策划书，也称作商业计划书，目的很简单，它就是创业者手中的武器，是提供给投资者和一切对创业者的项目感兴趣的人，向他们展现创业的潜力和价值，说服他们对项目进行投资和支持。因此，一份好的商业计划书，要使人读后，对下列问题非常清楚：

1、公司的商业机会；

2、创立公司，把握这一机会的进程 ；

3、所需要的资源；

4、风险和预期回报；

5、对你采取的行动的建议；

6、行业趋势分析。

撰写商业计划书的七项基本内容

一、项目简介

二、产品/服务

三、开发市场

四、竞争对手

五、团队成员

六、收入

七、财务计划 商业策划书用途

1、沟通工具

2、管理工具

3、承诺工具

网 址：

加替沙星铽敏化化学发光与应用 篇5

加替沙星(Gatifloxacin, GFLX), 1-环丙基-6-氟-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-8-甲氧基-1,4-二氢-4-氧-喹啉-3-羧酸1/2水合物是一种新型的第三代氟喹诺酮抗菌药物, 与现有的`氟喹诺酮类药物相比, 增强了对金葡萄菌、肺炎菌等革兰阳性菌的抗菌活性, 对厌氧菌、支原体和抗酸菌也有抗菌活性, 拓宽了抗菌谱. 该药物的水溶性好, 易吸收, 代谢稳定, 副作用小, 具有良好的药效和安全性[1,2]. 其8位带有甲氧基, 是光毒性最小的氟喹诺酮类药物. 对此药物的分析方法的研究在临床治疗和药动学研究上具有重要意义. 目前GFLX的分析方法仅有高效液相色谱法[3]和荧光光度法[4]. 高效液相色谱法操作复杂, 仪器昂贵. 荧光光度法干扰大, 不适于生物样品的测定. 我们依据Tb3+-GFLX能极大地增强Ce(Ⅳ)-Na2SO3产生的微弱化学发光现象, 提出了Tb3+-GFLX-Ce(Ⅳ)-Na2SO3敏化化学发光测定GFLX的新方法. 此方法灵敏度高, 测定范围广, 仪器和操作简单, 不需要光源和无光散射等背景干扰的特点, 尤其与流动注射相结合, 测定简单快速, 重现性好. 线性范围为2.0×10-8～1.0×10-6 mol/L, 检出限为3.5×10-9 mol/L(3σ), 相对标准偏差为3.2%(c=1.0×10-7 mol/L, n=11). 此法用于生物体液中GFLX的测定, 不需预先分离, 适当稀释即可测定. 本文简述了发光机理.

作 者：连宁 赵慧春 孙春燕 金林培 张仲伦 郑雁珍 作者单位：连宁(青海师范大学化学系)

赵慧春,孙春燕,金林培(北京师范大学化学系,北京,100875)

张仲伦,郑雁珍(中国科学院生物物理研究所,北京,100101)

化学发光免疫分析仪 篇6

分子印迹固相萃取-化学发光测定盐酸金霉素

基于盐酸金霉素在酸性介质中能极大的增敏Ce(Ⅳ)和Rh6G的化学发光,建立了结合分子印迹固相萃取的高灵敏度的化学发光测定盐酸金霉素的方法.用于盐酸金霉素结构相似的四环素作为虚拟模板合成了对盐酸金霉素有特异吸附的`分子印迹聚合物,将填充有分子印迹聚合物的聚四氟乙烯管作为固相萃取柱,连接在八通阀上对盐酸金霉素进行萃取和预富集,用洗脱液(V(甲醇):V(0.01 moL/L HNO3)=l:4)在线洗脱吸附在固相萃取柱上的盐酸金霉素,对盐酸金霉素在检测池中与Ce(Ⅳ)和Rh6G在酸性条件下发生的化学发光强度进行测定.结果表明,盐酸金霉素的线性范围为2×10-8～1×10-6g/mL,方法的检出限为4×10-9g/mL(3σ),7次平行测定2×10-7g/mL的盐酸金霉素溶液的化学发光强度相对标准偏差为0.65%.用于鸡肝脏中盐酸金霉素含量测定,结果令人满意.

作 者：杨春艳 熊艳 何超 章竹君 YANG Chun-Yan XIONG Yan HE Chao ZHANG Zhu-Jun  作者单位：西南大学化学化工学院,重庆,400715 刊 名：应用化学  ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF APPLIED CHEMISTRY 年，卷(期)：2007 24(3) 分类号：O657.3 关键词：分子印迹聚合物   固相萃取   化学发光   流动注射   金霉素  

化学发光免疫分析仪 篇7

关键词：免疫分析仪,故障维修,抓手,底物,报错

0前言

美国贝克曼公司的DXI800是目前较为先进、效率较高的全自动化学发光免疫分析仪, 用于多种体液微量物质的定量、半定量以及定性实验, 以竞争法、夹心法等免疫测定方法为基础。检测原理是根据微粒子酶促化学发光, 以金刚烷AMPPD为标记底物, 具有智能化和自动化程度高的特点。智能化的样品管理, 带有阻塞检测和纠正功能, 样品容量大, 并可连续装载和急诊优先检测。

1 工作过程简述

1. 1 抗原抗体相结合

将包被的单克隆抗体的顺磁性微粒和待测标本加入反应管中, 标本中的抗原与微粒子表面的抗体结合, 再加入碱性磷酸酶标记的抗体, 经温育后形成固相包被抗体 - 抗原 - 酶标记抗体复合物。

1. 2 洗涤、分离

在电磁场中进行3次洗涤, 快速将未结合的多余抗原和酶标记抗体洗去。

1. 3 加入底物 AMPPD 发光剂

AMPPD被结合在磁性粒子表面的碱性磷酸酶的催化下迅速去磷酸基因, 生成不稳定的中介体AMPD。AMPD很快分解, 从高能激发态回到低能量的稳定态, 同时发射出光子, 这种化学发光持续而稳定, 可达数小时之久。通过光量子阅读系统记录发光强度, 并从标准曲线上计算出待测抗原的浓度。

2 故障处理分析

2. 1 故障 1

试剂抓手运动错误。

2. 1. 1 故障处理过程

按照常规分析, 估计是相关部件需要清洁润滑, 先按照常规方法进行了处理, 将P1 /P2 /P3 /P4位置下方的弹簧进行上油润滑, P1 /P2 /P3 /P4位置用酒精清洁, 试剂抓手轴杆上油润滑, 对试剂盒的位置进行检查调校, 做当天剩余的70多个标本无相同问题出现。但次日相同故障发生。怀疑是抓手传感器存在问题, 进行更换试剂抓手传感器维修处理, 在调整抓手位置相关位置时发现其传感器的定位比较难, 期间拆装整个抓手, 微调Y方向位置, 后做3遍remap无问题, 做当天剩下的50多个标本未出现相同的故障。第三天, 继续出现了相同的报警信息。打开试剂冰箱, 将被抓歪的试剂盒手动归位后, 继续做标本, 大概1h后继续出现相关报警, 仪器暂停。重新检查试剂抓手的位置, 发现在很多位置调整工具均有晃动, 重新调整; 观察试剂舱内各个卡槽内均污垢较多, 清洁处理; 对轴杆进行润滑, 互换MMC板后, 做当天剩下的70个标本未出现相同故障。第四天, 做标本半小时后, 相同故障继续出现。现场观察发现试剂抓手位置停在P2位置, 且试剂盒已经被抓歪, 确定不是传感器信号传输, 马达及其编码盘的问题, 因为若有相关问题, 试剂抓手不可能只在P1 /P2 /P3位置出错。

观察发现P1 /P2 /P3 /P4位置存在特殊性, 有上下两组弹簧存在, 故抓手在这些位置运动时需要相对较大的力量, 遂怀疑为试剂抓手在这些位置出现暂时性的动力不足。拆下试剂抓手X轴方向的惰轮, 与另一个进行比较, 发现运动时有点生涩, 进行更换, 同时检查试剂抓手本身, 抽出Y方向上的一块薄片, 调整整体的Y方向位置, 然后再次调整各个相关位置, 但在子系统诊断下的试剂抓手模块中做关于P1 /P2 /P3 /P4位置的反复练习时, 偶然还是会出现报警。分析怀疑为P1 /P2 /P3位置上方的弹簧弹性不佳, 将P1 / P2 / P3 / P4位置的试剂卡槽彻底拆下来, 同时进行上油润滑。同时在子系统诊断下的试剂抓手模块中做关于P1 /P2 / P3 / P4位置的反复练习20遍均无报警。之后做标本无相同报警出现, 后续观察一星期未出现相同报警。证实P1 /P2 / P3位置上方的弹簧活动弹性不佳、需上油润滑为本次故障的源头所在。

2. 1. 2 故障处理分析小结

前几次的故障处理是依照常规进行处理问题, 未找到问题关键所在; 经结合对故障现象的观察, 做出了该故障与试剂抓手传感器本身、试剂抓手马达及其编码盘盘无联系的判断, 从而经过排查找到了故障源头所在。经过此案例我们可以发现, 同一个故障报警信息很可能存在着多种故障源头, 在处理故障时须结合故障当时的仪器状态, 才能做出准确的判断。另外, 在平时需多观察仪器正常运行时的状态, 为今后迅速准确排除故障打下基础。以下是抓手相关调整养护需注意的一些事项:

( 1) 抓手位置的调整: 由于V4. 4版本增加了试剂抓手在P1 /P2 /P3 /P4位置X方向的调整功能, 因此在诊断中进行调整时, 这些位置可以而且必须调整得纹丝不动; 同时在调整抓手位置的时候要注意抓手本身是否存在晃动。

( 2) 特定位置抓手出现问题时确认方法: 可以在子系统诊断下的试剂冰箱模块内进行这些特定位置的单独调整, 以及运动状态的反复确认。该方法可以与反复做remap相结合。

( 3) 试剂冰箱的保养: 在半年保养中加入对试剂冰箱内部各个卡槽的清洁情况的检查, 特别是P1 /P2 /P3 /P4位置上下两个弹簧的状态; 在日常维修中, 如果涉及到试剂冰箱方面的维修, 顺带检查各卡槽的清洁情况。

2. 2 故障 2

质控结果不好, 标本检测数据异常且复查后重复性不好。

2. 2. 1 故障处理过程

仪器上午结果和质控都正常, 下午结果出现异常, 做质控跟踪, 质控出现异常。查看质控结果, 结合定标曲线走向, 发现都是光亮值偏低造成的。查看发光底物, 在用的一瓶剩余546Test, 搜索下午标本测试数, 差不多150Test, 怀疑发光底物可能有问题。检查放于室温的发光底物, 发现是刚从冰箱拿出没多久的, 3瓶中有1瓶里面出现结冰状态, 2瓶底物颜色有差异, 到底物存储冰箱处检查, 发现冰箱内壁结冰, 发光底物盒子一侧靠着冰箱内壁, 检查靠近内壁的底物, 发现都有结冰现象。怀疑此次结果异常的原因是由发光底物结冰引起。切换仪器在用的底物, 做管路冲洗, 做标本测试结果正常。

2. 2. 2 故障处理分析

将有问题的底物集中收集起来, 拿出2瓶异常底物及1瓶正常底物放于室温, 待测试其光亮值变化。待底物温度大致达到室温后, 对异常的底物做如下处理: 分别抽取底物瓶里上层的底物200μL和下层底物200μL及摇匀后的底物200μL, 放于RV杯里。再抽取正常底物上层和下层及摇匀后200μL, 放于RV杯。

分别对这9个底物读取其光亮值。每次读取之前孵育4min, 直接读取的光亮值数据如下表。

根据以上数据, 可很好解释之前结果异常的问题。因为一整瓶底物首先吸取的是底物瓶底部的一些底物, 吸到最后剩余的应该是上层底物居多。因此, 做到最后光亮值就偏低了。结冰后复融的底物放置达到室温后, 仍旧存在异常, 且2瓶底物摇匀后光亮值差异较大。可得出结论, 经冰冻后异常的底物会造成数据不准确, 不可再使用, 需要丢弃处理。

3 其他故障

3. 1 报错信息提示发光剂管路有气泡

处理: 检查发光剂管路有无气泡, 如有, 进行管路气泡冲洗清除; 如无, 检测探测器电压, 进行相应的电压调整。

3. 2 水汽路模块漏液

处理: 将仪器断电, 打开SPU模块, 拆卸SPU下面的挡板, 将水汽路模块拉出来检查仪器废液蠕动泵泵管两头是否破裂。若破裂导致漏液则需尽快更换新的泵管, 并清洁泵马达灰尘和HOME位置传感器灰尘, 模块复原, 重新初始化仪器、执行冲洗程序一切正常后观察标本运行。

3. 3 UI 界面打不开

处理: ( 1) 数据库整理正常, DB test进不去; ( 2) 删除DRW文件夹下的event database文件夹, UI界面能够进入; ( 3) 删除DRW和AU文件夹下多余的文件; ( 4) 数据库整理, 连续性检测正常。

3. 4 报错 Device priming failed

处理: ( 1) 清洁A针, 更换鸭嘴阀; ( 2) 清洁冲洗站; ( 3) 清洁润滑滑杆; ( 4) 试剂针压力校准; 冲洗后正常。

3. 5报 错 P&P hit an unexpected vessel while attemptoy toplace vessel

处理: 故障原因是废弃井堵塞, 杯子扔不掉。疏通堵塞的废弃井, 清理固体废物丢弃仓, 做所有位置初始化, 正常。

4 总结

全自动化学发光免疫分析仪的实验室温度湿度电源配置等必须符合要求, 需注意控制室内的灰尘, 保持环境整洁。仪器工作前检查试剂等各项准备事项, 在仪器运行工作中注意观察各项指标是否正常。仪器的维护及保养也十分重要, 日常的使用保养除重点做好关键部件的清洁保养及维护以外, 还需定期对机器整体各个部位的状态都进行检查, 及时有效的做好预防性维护措施。记录常见的报警提示供以后参考。每天工作结束后进行日常保养, 并定期进行全面保养。良好的工作环境、规范的操作、及时有效的保养, 将对降低仪器故障率和保障检测数据的准确性起到较大的作用。

在日常使用和维护过程中, 我们应对DXI800全自动化学发光免疫分析仪各模块工作原理进行了解熟悉, 针对各类故障现象进行系统分析, 找到准确有效解决故障的方案, 确保仪器保持良好的运行状态, 为临床诊断提供有力的工程技术保障。

参考文献

[1]章晓.贝克曼库尔特Unicel DXI 800免疫分析仪故障处理二例[J].中国医疗设备, 2010, 25 (3) :100-101.

[2]高昌浩.贝克曼化学发光仪DXI800发光底物模块故障与处理心得[J].医疗装备, 2011, 24 (4) :73.

[3]郑传权.贝克曼DXI800发光免疫分析仪的系统原理解析与应用[J].中国医学装备2011, 9 (11) :28-31.

[4]洪国慧.DXI800全自动化学发光分析仪故障两例[J].医疗装备, 2012, 6:67

[5]李丽.Uni Cel DXI800化学发光仪故障一例[J].医疗装备, 2010, 24 (3) :88

化学发光免疫分析仪 篇8

关键词：硝基苯胺类化合物；酶免疫化学；分析技术；液相色谱；气相色谱

中图分类号：X832 文献标识码：A 文章编号：1009-2374（2013）35-0049-02

硝基苯胺类化合物有着很大的毒性，能够经皮肤以及呼吸道吸收。如果吸收量过大便会诱发产生高铁血红蛋白，从而使人体出现缺氧以及紫绀等症状，这对于整个神经系统会带来较大的危害，如果中毒进一步加深将会直接威胁到生命安全。硝基苯胺类化合物还会诱发溶血性贫血。随着我国农业、工业的不断发展，硝基苯胺类化合物的使用范围也越来越广，在医药、农药、工业染料等方面都有着十分广泛的作用。因此硝基苯胺类化合物的检测也被越来越重视。在传统的检测中主要是以色谱柱技术为主，包括了GC、HPLC、GC/MS以及HPLC/MS。相对而言色谱柱技术检测时间较长、操作较为繁琐同时需要较高的经济成本，这就让硝基苯胺类化合物检测的效率受到了一定的影响。近年来随着酶免疫化学分析技术的不断成熟，酶联免疫吸附受到了很大的关注，其应用领域也在不断延伸。通过将硝基苯胺类化合物检测与酶联免疫吸附结合起来，可提高硝基苯胺类化合物检测的精确度并达到缩短检测时间的目的。

1 实验器材、试剂以及动物

实验试剂：戊二醛、4-硝基苯乙胺、牛血清白蛋白和卵清蛋白、兔血清、四甲基联苯胺、羊抗兔IgG-HRP、弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂（试剂均为分析纯）。

实验器材：磁力搅拌、高速冷冻离心机、酶联免疫检测仪、紫外分光光度计、96孔酶标板。

实验动物：雄性大白兔。

2 实验步骤

2.1 合成完全抗原

图1 4-硝基苯乙胺、BSA偶联

将戊二醛以及BSA进行反应，保证戊二醛过量，让酶分子仅与其中的一个醛基进行结合。反应以后用凝胶过滤层进行过滤，得到BSA-戊二醛复合物，再加入4-硝基苯乙胺进行偶联，如图1所示。包被抗原制备与上述方法一致，将BSA更替为OVA，并加入过量的赖氨酸让过量醛基反应。

2.2 完全抗原性能鉴定

利用紫外分光光度计对硝基苯乙胺以及BSA偶联进行相应的鉴定，在波长为200～400nm的紫外光照下测定相关的吸光值，并对其进行激光解吸附电离飞行时间质谱（需要紫外扫描计算基质辅助）来测定偶联物中4-硝基苯乙胺与蛋白的摩尔比。在整个偶联反应过程中会出现多聚物甚至是沉淀，所以在分析的过程中也需要对副反应程度进行分析。在此基础上采用SDS-PAGE凝胶电泳对硝基苯乙胺完全抗原的构成进行测定。

2.3 抗体制备

采集免疫血清之前雄性大白兔的血样作为对照，以PBS对免疫原复合物（4-硝基苯乙胺-BSA）进行稀释，得到梯度浓度（100ug/只、150ug/只、200ug/只），然后再给予注射。在第一次注射的过程中，将等体积完全福氏佐剂加入到4-硝基苯乙胺之中（1mL）以达到乳化效果，之后再进行注射，隔周以后加强免疫注射，共加强三次，若最后得到的抗血能够超过1∶1×104就可以提取使用。需要注意的是，在进行血液采集之前应该先让雄性大白兔禁食，避免血脂过高。采集血液之后静置1小时，之后对血液凝集进行离心，分离出血清，装管。离心温度为4℃，转速为5000～7000r/min，时间控制在10～15min。

2.4 抗体纯化

经过离心得到的抗血清以辛酸-硫酸铵进行纯化，再通过电泳法来测定多克隆抗体分子量区间。

2.5 酶联免疫吸附操作流程

主要步骤为包被抗原→洗涤→添加封闭液→添加检测血清→添加羊抗兔IgG→添加入四甲基联苯胺溶液→添加终止液。

2.6 效价评定

对抗血清与对照血清进行逐级稀释，对照血清中加入100uLPBS，并以酶联免疫吸附方法来测定相关效价，多次测定后以最大稀释倍数作为最终效价。

2.7 构建ic ELISA方法

将4-硝基苯乙胺-OVA在缓冲液当中稀释，浓度为0.5ng/L。将稀释之后的4-硝基苯乙胺-OVA加入到酶标板上（每孔50uL），在密封之后除去包被抗原，并进行洗涤。添加封闭液温育，加入梯度4-硝基苯乙胺以及抗体，抗体量为60uL，再次进行温育（温度控制在37℃，时间为1小时），将抗血清除去并进行洗涤。之后加入了酶标二抗工作液（每孔100uL），温育1小时，温度为37℃。以Logistic模型来确定检测范围。

2.8 特异性检测

采用以下公式来测定交叉反应率：

交叉反应率=4-硝基苯乙胺抑制率50%时所需的浓度/结构类似物50%时所需的浓度×100%

结构类似物包括了邻硝基苯胺、间硝基苯胺、对硝基苯胺、甲苯、苯胺。

3 结果评测

图2 4-硝基苯乙胺棋盘实验

采用以下公式对半抗原与载体的结合比进行计算：摩尔消光系数（ε）=吸光值/摩尔浓度；结合比=[ε280（偶联物）-ε280（载体蛋白）]/ε280（半抗原）；另外还可以通过飞行时间质谱来进行结合比的计算：结合比=（完全抗原分子量-载体蛋白分子量）/半抗原分子量。

上述公式中ε280为完全抗原和载体蛋白在280nm的紫外吸收值的变化及半抗原在该波长处的摩尔消光系数。通过多克隆抗体纯化效果鉴定以及多克隆抗体效价测定来分析得到相关的血清效价检测结果，具体如下：

通过方阵实验来确定酶联免疫吸附方法的工作条件，首先应该将反应控制在灵敏区域，也就是说抗原出现变化时，吸光值将会呈现出相应的变化。将反应控制在抗原浓度较小的区域，从而达到节约试剂的效果，并且也可以从一定程度上降低特异性吸附作用。通过处理得到以下

曲线：

图3 4-硝基苯乙胺间接竞争ELISA标准曲线

4 结语

在整个实验过程中其核心是建立相关的酶联免疫吸附方法，并以该方法为基础对硝基苯胺类化合物进行测定。此方法操作较为简便并且周期较短，重复性以及灵敏性都处于较高的水平。其整体稳定性相对来说要优于色谱法，在水环境下可以对硝基苯胺类化合物进行较为迅捷的

检测。

参考文献

[1] 彭方毅，何苗，盛建武，施汉昌.水中硝基苯胺类化

合物酶免疫化学分析技术研究[J].化学学报，2007，

（22）：2563-2569.

[2] 霍江莲，李军，葛毅强，祁彦，储晓刚.二硝基苯胺

类除草剂残留检测技术的研究进展[J].农药，2011，

（4）：127-128.

[3] 杨利国，胡少昶，魏平华.酶免疫测定技术[M].南

京：南京大学出版社，2008.

[4] 中国国家环境保护总局.水和废水监测分析方法（第

化学发光免疫分析仪 篇9

铈(Ⅳ)-吐温40-邻苯二酚化学发光体系测定废水中的邻苯二酚

基于在吐温40存在下邻苯二酚与铈(Ⅳ)在酸性介质中发生化学发光反应,建立了测定邻苯二酚化学发光分析法.该法测定邻苯二酚的线性范围为3.0×10-7 ～5.0×10-5 mol/L,检测限为1.0×10-7 mol/L,相对标准偏差为3.0%(邻苯二酚浓度为5.0×10-6 mol/L,平行测定11次).用该法测定实验室废水中的邻苯二酚,结果令人满意.

作 者：谢成根 李淮芬 刘宜树 常文贵 Xie Chenggen Li Huaifen Liu Yishu Chang Wengui  作者单位：皖西学院,化学系,安徽,六安,237012 刊 名：化工环保  ISTIC PKU英文刊名：ENVIRONMENTAL PROTECTION OF CHEMICAL INDUSTRY 年，卷(期)： 25(2) 分类号：X8 关键词：化学发光法   铈(Ⅳ)   邻苯二酚   吐温40   分析  

化学发光免疫分析仪 篇10

病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范

一、病理科免疫组织化学技术员培训规范：

凡新入我科的病理技术员均需进行免疫组化理论知识的学习、培训，经考核合格、具备病理技术员技士资质后方能从事免疫组织化学染色。

二、病理科免疫组织化学染色操作规范 1.免疫组织化学染色前的准备事项(一)组织切片的制备

常规切片脱蜡至水（组织固定需用10%中性甲醛）(二)抗体的选择、稀释和保存

（1）选择抗体应先了解其反应谱和适用条件〔包括适用切片(石蜡切片抑或冷冻切片)、稀释度和温育时间等〕。

（2）对于未曾使用过的新抗体，应按照有关说明书的提示，以几个不同的稀释度对适宜检材(已知阳性切片/涂片)进行预试验;根据染色阳性表达的程度和检材背景着色程度，确定用于染色的最适稀释度（3）抗体的原液应于分装后置于一20℃冷室中保存，切勿反复冻存(以免效价 降低)。（4）抗体的工作液可置于4℃冰箱中保存。（5）抗体的稀释。

(1)一般用0.01M PBS(生理盐水磷酸盐缓冲液)，pH值7.2。(2)或用0.05M TBS(生理盐水三经基氨基甲烷缓冲液)，pH值7.6。(3)必要时可按需要加适量小牛血清清蛋白。(三)被检测组织内抗原的修复

（1）经4%中性甲醛之类含醛基固定剂固定的组织，其切片中的抗原决定簇因醛的交联作用而被封闭，从而影响抗原一抗体反应。进行免疫组织化学染色前，对于组织切片进行抗原修复处理，会使组织中的固有抗原尽量多地暴露出来，提升了大部分检测抗体的阳性率和反应强度。有的抗体不需要进行抗原修复。应按抗体试剂说明书的提示决定是否进行被检测组织内的抗原修复。（2）抗原修复缓冲液。

(l)一般为0.01M柠檬酸缓冲液(2.1g柠檬酸溶于100ml蒸馏水中，用2M NaOH调节pH值至6.0)。(2)有些抗体需要特殊修复缓冲液，如高PH值的EDTA(50mM Tris.，10mM EDTA，pH9.0)，或商品化的该高题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码2/13

pH修复液等。

（3）抗原修复的常用方法。(l)胰蛋白酶消化法: ①组织切片脱蜡、水化。

②滴加一滴0.1%胰蛋白酶液于组织切片上。

③37℃下温育20-40min(温育时间取决于组织经4%中性甲醛固定时间的长短和被检测抗原)。

④蒸馏水冲洗，终止反应。

⑤阻断内源性过氧化物酶。

⑥进行免疫组织化学染色。（配制0.1%胰蛋白酶液时，应将0.1g胰蛋白酶溶于0.1%无水氯化钙水溶液(pH值7.8)中。）

（2)胃蛋白酶消化法: ①组织切片脱蜡、水化.②滴加胃蛋白酶工作液于组织切片上。

③37℃下温育10-30min(一般为10min，可延至30min，取决于组织经4%中性甲醛固定时间的长短).④浸人蒸馏水，终止反应。

⑤进行免疫组织化学染色。用1%胰蛋白酶液37℃下处理20min。(应以 0.1M HCI配制胃蛋白酶工作液。过度的胃蛋白酶消化会使组织结构破坏、切片 脱落。)（3)微波修复抗原法: ①组织切片脱蜡、水化(硅化玻片或经防脱片胶处理的玻片)。

②将组织切片置于容器(塑料盒或玻璃缸)中，并向其中加人抗原修复液 200ml，盖上具有小孔的盖子。

③将该容器置于微波炉(705-800W)中央加热(95℃)5min，2次(于两次之间，应向容器中添加蒸馏水50ml，严防组织切片干燥)。

④将该容器移出微波炉，置于室温下冷却15-20min。

⑤蒸馏水冲洗。

⑥阻断内源性过氧化物酶，而后将切片置于蒸馏水中。

⑦用TBS或 PBS液冲洗。

⑧进行免疫组织化学染色。(4)热水浴法: 题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码3/13

①组织切片脱蜡、水化(硅化玻片或经防脱片胶处理的玻片)。

②向装组织切片的容器加人足量(例如200ml)抗原缓冲液，置于水浴锅中，加热至95-99℃(不沸腾)预热。

③将组织切片插人已预热的容器内，温育20-40min。

④将该容器由微波炉移出，置于室温下冷却20min。⑤室温下，用TBS、PBS或水洗。

⑥蒸馏水冲洗。

⑦阻断内源性过氧化物酶，而后将切片置于蒸馏水中。

⑧用TBS或PBS液冲洗。

⑨进行免疫组织化学染色。

（5)压力锅法: ①组织切片脱蜡、水化(硅化玻片或经防脱片胶处理的玻片)。

②向4-5.5L的不锈钢压力锅中加人抗原修复缓冲液(约为锅容积的2/3)，不加阀情况 下加热至沸腾。

③将组织切片插放于金属切片架上，并置于压力锅内沸腾的缓冲液中。

④加阀情况下，将组织切片加压2min。

⑤压力锅自行冷却或以流水冷却减压后，持续20min。

⑥将冷却后的切片取出，蒸馏水冲洗后，置于TBS或PBS液中(以免组织切片干燥)。

⑦蒸馏水冲洗。

⑧阻断内源性过氧化物酶，而后将切片置于蒸馏水中。

⑨用TBS或PBS液冲洗。

⑩进行免疫组织化学染色。

（四）组织切片中内源性酶的阻断

1.内源性过氧化物酶 主要存在于红细胞、嗜中性粒细胞、单核细胞了嗜酸性粒细胞和组织内。阻断方法:最常用0.3%-0.5%H2O2-甲醇液，作用15-30min，阻断液必须使用时新鲜配制。由于阻断内源性过氧化物酶常同时导致被测抗原变性(使特异性着色减弱)，而大部分组织不含有内源性过氧化物酶，所以阻断内源性过氧化物酶一般不必作为常规步骤。必须阻断内源性过氧化物酶时，可安排在第一抗体反应后进行，以减少抗原的破坏。题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码4/13

2.内源性碱性磷酸酶 主要存在于嗜中性粒细胞和内皮细胞。阻断方法:应用1M左旋咪唑，作用15-30min。

3.内源性生物素 肝、胰、肾等的细胞内含有多量生物素或类生物素物质。阻断方法:先将切片浸于卵白素(0.5μg/ml)中15min，以缓冲液洗净后，移浸于生物素饱和溶液中15min，再用缓冲液洗去多余的生物素饱和液;也可应用商供的阻断试剂盒(按说明书操作)。(五)正常血清保护

作为检测试剂的抗体蛋白带有一定的负电荷，免疫组织化学染色时，易与带有正电荷的组织〔特别是纤维组织、变性和(或)坏死的细胞、嗜酸性粒细胞等〕发生静电吸引而导致非特异性染色。去除这种非特异性染色最有效的方法是，在滴加第一抗体前，先滴加用于制备第二抗体动物的非免疫血清或是滴加除制备第一抗体动物以外的其他动物非免疫血清，浓度为1：5-1：20;必要时可滴加2%-5%牛 血清清蛋白。正常血清保护作用时间10-20min。用于阻断非特异性结合的血清不能有明显的溶血。(六)缓冲液

用于稀释抗体，洗涤切片的缓冲液主要有两种。1.TBS(0.05M，pH7.6)，Tris一HCl缓冲液(0.SM，pH 7.6)100ml 8.5%NaCl 100ml 蒸馏水加至 1000ml Tris一HCI缓冲液(0.5M，pH7.6)三经甲基氨基甲烷(Tris)61g HCl 37ml 蒸馏水加至 1000ml 2．PBS(0.IM，pH 7.6)Na2 HPO4 · 12H2O2 29g NaH2PO4 · 2H2O 3g NaCl 85g 蒸馏水加至 1000ml 使用时用蒸馏水稀释10倍即成0.0lM。

二、免疫组织化学染色常用方法 题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码5/13

(一)直接法 1.脱蜡和水化。

2.3%过氧化氢或0.5%过氧化氢甲醇液，5min。

3.TBS或PBS缓冲液洗涤。4.抗原修复。

5.无关动物正常血清(适当稀释)20-30min。

6.甩去正常动物血清，滴加适当稀释的辣根过氧化物酶标记抗体，或增强的酶标多聚物一步法(Enhanced Polymer One-step Staining，EPOS)抗体于切片上，20-60min。7.TBS或PBS缓冲液洗涤。

8.0.04%-0.05%DAB(二氨基联苯胺四盐酸)H2O2液显色5-10min，镜下观察控制显色时间。底物配法:DAB 40-50mg；0.05M TBS(pH 7.6)l00ml；3% H2O2 100-200ml。9.缓冲液洗，流水洗涤。10.苏木精淡染细胞核。11.脱水，透明，封片。(二)间接法

l-5步同“直接法”。

6.滴加第一抗体于切片上，湿盒内温育30-60min。7.TBS或PBS缓冲液洗涤。

8.HRP标记抗体或用增强的酶标记多聚物(Enhanced Labeled一 Polymer Sys-tem，ELPS)抗体滴加切片上，湿盒内温育30min。9-14步同“直接法”的7-11步。(三)过氧化物酶一抗过氧化物酶(PAP)法 1-5步同直接法。

6.适当稀释的第一抗体，湿盒内温育30-60min。7.缓冲液洗涤。

8.第二抗体，湿盒内温育30min。9.缓冲液洗涤。

10.滴加PAP，湿盒内温育30min。题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码6/13

11-15步同“直接法”的7-11步。

双PAP法:上述操作进行到第10步后，再重复7-10步1次，然后继续11-15步。(四)葡萄球菌A蛋白(SPA)免疫酶法 1-5步同“直接法”。

6.第一抗体，湿盒温育30-60min。7.缓冲液洗涤。

8.酶联SPA，湿盒温育30min。9.缓冲液洗涤。

10-13步同“直接法”的8-11步。(五)ABC法和SABC法

ABC法是卵白素-生物素-酶复合物(Avidin--Biotin--Peroxidase Complex)法的简称。SABC法是链霉卵白素-生物素-酶复合物(Streptavidin一Biotin一peroxidase Complex)法的简称。l-5步同“直接法”。

6.第一抗体，湿盒温育30-60min.7.缓冲液洗涤。

8.生物素化的第二抗体，30min。9.缓冲液洗涤。

10.ABC复合物或SABC复合物(皆于使用前新鲜配制)，30-60min。11-15步同“直接法”7-11步。(六)LSAB(SP)法

LSAB(SP)法，是标记的链酶卵白素-生物素(Labeled Streptavidin--Biotin)法的简称，操作步骤同“ABC法”，只是以LSAB复合物替代ABC复合物。(七)CSA法

CSA法是催化信号放大(Catalyzed Signal Amplifieation)法的简称。1-5步同“直接法”。6.第一抗体，15-30min。7.缓冲液洗涤。

8.生物素标记的第二抗体，15-30min。题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码7/13

9.缓冲液洗涤。

10.链霉卵白素-生物素-HRP复合物(用前新鲜配制)，15min。11.缓冲液洗涤。12.放大液，15min。13.缓冲液洗涤。

14.HRP-StrePtavidin，15min。15-19步同“直接法”的7-11步。(八)二步法Envision System Envision是通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体。1-5步同“直接法”。6.第一抗体，30-60min。7.缓冲液洗涤。

8.Envision TM，10-30min。9-13步同“直接法”的7-11步。(九)双重免疫组织化学法.Sequential(1)鼠或兔抗体1，30-60min。

(2)Envision TM，羊抗鼠/羊抗兔/HRP，30 min。(3)DAB(棕色)，2-10 min。(4)鼠或兔抗体2，30-60 min。

(5)Envision TM，羊抗鼠/羊抗兔/AP，30 min。(6)AP(红色)。2.Simnl一Aaneous(1)混合鼠抗体1和兔抗体2，4℃，过夜或60 min。(2)Envision TM羊抗鼠/HRP和羊抗兔/AP。(3)AP染色。(4)HRP染色。

上述方法除注明温度者外，均可在室温(20-25℃)环境中进行;第一抗体温育后，如有必要可置于4℃题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码8/13

下过夜。

三、免疫组织化学染色的常用抗体标记物(一)上皮源性标记物 1.一般性标记物

（1）CK(角蛋白)CK亚型:①CK5/6;②CK7;③CK8;④CK10/13;⑤CK18;⑥CK19;⑦CK20。(2)EMA(上皮细胞膜抗原)。

2.特异性和(或)相对特异性上皮标记物

（1）CEA(癌胚抗原，标记胃癌、大肠癌).（2）CA242(肿瘤相关粘液抗原，标记胰腺癌、大肠癌)。

（3）TG(甲状腺球蛋白，标记甲状腺癌).（4）PSA(前列腺特异性抗原，标记前列腺癌)。

（5）PSAP(前列腺特异性酸性磷酸酶，标记前列腺癌).（6）34βE12(标记前列腺底细胞).（7）AFP(甲胎蛋白，标记肝癌、内胚窦癌).（8）Hepatoeyte(标记肝细胞癌)。

(9)β-HCG(β-绒毛膜促性腺激素，标记胎盘滋养层细胞肿瘤、生殖细胞肿瘤).（10）CA125(卵巢癌).（二)间叶源性标记物

主要是Vimentin(vim，波形蛋白)等.（三）肌源性标记物 1.Desmin(Des，结蛋白)2.Actin(肌动蛋白）.3.SMA(平滑肌肌动蛋白).4.MSA(肌特异性肌动蛋白).5.Myosin(肌球蛋白).6.Myoglobin(MG，肌红蛋白)7.Myogen(肌浆蛋白).题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码9/13

8.MyoDI(肌调节蛋白).(四)血管源性标记物 FⅧRAg(第8因子相关抗原).CD31 CD34 UEA-l BNH9.(五)组织细胞源性标记物 1.CD68/KP-l.2.Lysozyme(溶菌酶)。3.a1-AT(a1-抗胰蛋白酶).4.a1-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)5.Mac387.淋巴造血组织源性标记物 1.全淋巴细胞

(1)CD45/LCA(白细胞共同抗原）。(2)TdT(末端脱氧核昔酸转移酶)。(3)CD30/Ki-1。2.全B细胞(1)Igκ。(2)Igλ。(3)CD20/L26。(4)CD79a。

(5)BLA36(B淋巴细胞抗原)。3.B细胞亚型(1)CDl0。

(2)CD21(标记滤泡性树突状细胞)。(3)CD23。题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码10/13

(4)CD35(标记滤泡性树突状细胞)。(5)CD38.4.全T细胞(1)CD3。(2)CD5。(3)CD43。(4)CD45RO/UCHL-1.5.T细胞亚型(1)CDla。(2)CD4。(3)CD8。6.NK细胞(1)CD56。(2)CD57/Leu-7。(3)CD16/Leu-11。7.粒细胞和单核巨噬细胞(1)CD11c/LeuM5。(2)CD15/LeuM5。(3)Lysozyme(溶菌酶)。(4)al-AT(al-抗胰蛋白酶)。(5)al-ACT(al-抗胰糜蛋白酶)。(6)CD68.(7)S-100蛋白.(8)Mac387。8.其他

(1)EMA(上皮细胞膜抗原).(2)CD99(尤因肉瘤标记物).(3)ALK-l(间变性淋巴瘤激酶)。题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码11/13

(4)HLA-DR。(5)Bel-2。(6)Bel-6。(7)Bel-10。(8)Ki-67。

(9)CyclinD1(周期素D1)。(10)CD25。

(11)CD34。

（七）神经源性标记物 1.S-100蛋白.2.NSE（神经原特异性烯醇化酶）.3.Leu7。

4.Neurofilament(NF，神经微丝蛋白)。5.GFAP(胶质纤维酸性蛋白）

（八）神经内分泌源性标记物 1.激素标记物(1)CA(儿茶酚胺)。(2)5-HT(5-经色胺).(3)垂体激素。

①GH(促生长素)。

②PRL(催乳素)。

③ACTH(促肾上腺皮质激素).④TSH(促甲状腺素).⑤FSH(促滤泡素).⑥LH(促黄体素)。(4)甲状腺。

①TG(甲状腺球蛋白)。

②CT(降钙素)。题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码12/13

(5)甲状旁腺:PTH(甲状旁腺素)。(6)胰岛。

①Insulin(胰岛素)。

②Glueagon(胰高糖素)。

③VIP(舒血管肠肽).④PP(胰多肽).⑤Someitostatin(生长抑素)。

⑥Gastrin(胃泌素)。2.非激素标记物

(1)NSE(神经原特异性烯醇化酶).(2)CgA(嗜铬素A).(3)SY(突触素).3.激素受体

（1）ER(雌激素受体）.（2）AR(雄激素受体）.（3）PR(孕激素受体).(九)细胞增殖标记物 1.PCNA(增殖细胞核抗原).2.Ki-67.（十）黑色素标记物 1.S-100蛋白.2.HMB45.3.Melanoma。

(十一）癌基因和（或）抑癌基因 1.bel-2.2.c-erbB-2.3.p53 4.p16(多肿瘤抑制基因)。题目：病理科免疫组织化学技术员培训及技术操作规范 市一—病理科—30 生效日期：2012年1月1日 版本号1.0 修改日期： 页码13/13

5.nm23。(十二)病原体标记物