化学发光技术

化学发光技术（共12篇）

化学发光技术 篇1

电化学发光技术 (ECL) , 是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应, 实际上包括了电化学和化学发光两个过程, 由电启动发光反应, 因此可对反应进行精确控制。电化学发光免疫分析技术 (ECLIA) 是电化学发光和免疫测定相结合的产物, 能对各种物质进行快速分析, 是目前最先进的标记免疫测定技术, 该系统是通过在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应, 由电启动发光过程, 在电极表面循环进行, 产生大量光子, 使电信号增强, 检测灵敏度大为提高, 并且易于控制。ECLIA检测法具有准确度高、灵敏度高、检测速度快等特点, 尤其适用于微量物质的测定。

1 ECLIA的工作原理

电化学发光免疫分析是采用三联吡啶钌[Ru (bpy) 3]2+作为标记物, 在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应。其工作原理是结合了标记物的生物分子与配体发生特异的结合反应后进入流动测量室, 电发光过程被启动。其化学发光主要是基于[Ru (bpy) 3]2+络合物和三丙胺 (TPA·) 两种电化学活性底物在反应中引起的光子发射。含三丙胺 (TPA) 的缓冲液进入测量室, 同时电极加电, 化学发光剂[Ru (bpy) 3]2+和电子供体TPA在阳电极表面同时各失去一个电子发生氧化反应。二价的[Ru (bpy) 3]2+被氧化成三价。TPA被氧化成阳离子自由基TPA+, 并迅速自发地脱去一个质子 (H+) , 形成自由基TPA·。由于[Ru (bpy) 3]3+是强氧化剂, 自由基TPA·是强还原剂, 两个高反应基团在电极表面迅速反应, [Ru (bpy) 3]3+被还原形成激发态的二价[Ru (bpy) 3]2+, TPA·自身被氧化成二丙胺和丙醛。接着激发态的[Ru (bpy) 3]2+衰减成基态的[Ru (bpy) 3]2+同时发射一个波长620nm的光子。这一过程在电极表面周而复始地进行, 产生许多光子, 光电倍增管检测光强度, 光强度与[Ru (bpy) 3]2+的浓度呈线性关系, 可测出待配体的含量。

电化学发光免疫分析采用链霉亲和素—生物素包被技术, 这是一种新型生物反应放大系统。以直径为2.8μm的磁性球作为载体, 反应面积比板式扩大了20~30倍, 利用生物素-链霉素亲和素的牢固结合力, 免疫放大能力和反应系统中的磁分离功能, 使免疫反应在微球表面快速进行。并且, 电发光过程产生许多光子, 使光信号得以增强。因此, 其检测灵敏度大为提高, 可达到检测浓度小于1 Pmol/L的超微量物质, 线性范围也可达6个数量级。

2 ECLIA在临床中的应用

2.1 检测细菌及病毒

除病毒外, 细胞的是一切生命活动的基本组成单位, 人体就是细胞的集合体, 每个细胞就是一个独立的小生命, 而执掌着细胞的核心物质就是核酸, 核酸作为遗传物质基础, 具有贮存、传递和表达遗传信息的功能。因此对标本中的核酸进行定量分析, 能为临床准确, 及时的诊断疾病, 监测治疗效果显得十分必要。由于普通的细菌培养方法往往存在培养时间过长等诸多缺陷, 因此, 现在很多实验室都在寻求快速、灵敏的检测方法。研究表明用放大核酸序列分析的方法对食物中沙门杆菌进行检测, 结果表明, 应用ECLIA技术在18 h后就可得到明确的结果;应用ECLIA技术对H5N1型病毒进行核酸序列放大分析, 与传统的鸡胚培养法比, ECLIA技术与其在灵敏度上高度一致, 结果与胚胎培养完全相同[1]。ECLIA检测食品和环境污染物中大肠杆菌O157:H7和鼠伤寒沙门氏菌, 克服了传统细菌培养速度慢, 检出率低等弱点[2]。同时用ECLIA检测法还可以检测艾滋病病毒抗原和艾滋病病毒抗体;检测乙肝病毒表面抗原和抗体、e抗原和e抗体、乙肝核心抗体、甲肝抗体和甲肝IgM抗体、丙肝抗体以及风疹病毒和弓形虫的IgG和IgM抗体等。

王利娜, 姚智等[3]用ECLIA法检测乙肝表面抗原 (HBsAg) 的研究中发现:ECLIA法检测HB-sAg精密度, 最大批内变异≤8.30%, 最大日间变异≤15.33%, HBsAg灵敏度0.05 ng/ml。

说明ECLIA检测HBsAg灵敏度高, 重复性好, 检测范围宽。

2.2 检测肿瘤标志物

肿瘤是威胁人类生命健康的主要因素之一, 也是死亡率最高的疾病之一。肿瘤发生的隐匿性及发展的侵袭性, 多数患者在确认时已有远处转移, 因此早发现、早诊断、早治疗是提高肿瘤患者生存率和治愈率的关键。肿瘤标志物作为肿瘤的特有标志, 对其的动态观察及测定, 可为肿瘤的诊断、治疗及预后提供可靠的依据。ECLIA法可以对CA199、NSE、CEA、CA242、ferritin、β-HCG、AFP、F-PSA、PSA、CA125、HGH和CA153等十几种肿瘤标志物进行测定。Sakizono等[4]用ECLIA法检查了36例肝细胞癌, 肿块直径小于2cm的患者, 其中有17例血清PIVKA-Ⅱ升高, 提示该检测法适用于检测血清微量PIVKA-Ⅱ, 有利于肝癌的早期诊断。黄琛, 汤汉红等[5]在ECLIA法检测与蛋白质芯片法多肿瘤标志物结果差异的研究中显示:两种方法有较好的相关性 (P<0.05) , 且E-CLIA法能更精确检测肿瘤标志物。卢业成等[6]在ECLIA法定量检测血清AFP的临床应用及其优越的研究中, 显示ECLIA法和RIA法具有良好的相关性 (r=0.981, P<0.05) ;回收率均在95%以上, ECLIA法明显高于RIA法 (P<0.05) ;ECLIA法的线性范围 (>500μg/L) 较RIA法 (<500μg/L) 要宽。ECLIA法定量检测AFP的准确性和精确度都明显优于RIA法, 较RIA法更能满足临床需要。说明ECLIA法在检测肿瘤标志物时具有准确度高、灵敏度高、检测速度快的特点, 能充分满足临床和科研试验的需求, 尤其适用于临床急诊检测。

2.3 检测激素

激素是体内含量很少但却是不可缺少的物质, 很多代谢性疾病就是由于激素的代谢紊乱而引起的。对于激素的检测, 传统的方法多为放射免疫法, 其对于工作人员的损害及公共环境的污染是不言而喻的。ECLIA检测系统可对甲状腺激素、性激素等多种激素进行测定, 可给临床诊断、治疗、预后提供可靠的实验室数据。张瑞等[7]在应用ECLIA法定量检测血清绒毛膜促性腺激素 (HCG) 的临床应用及其优越性的研究中显示:ECLIA法明显优于RIA法;ECLIA法和RIA法具有良好的相关性 (P<0.05) ;回收率均在95%以上, ECLIA法明显高于RIA法 (P<0.05) ;ECLIA法的线性范围较RIA法要宽。说明ECLIA法定量检测HCG的准确性和精确度都明显优于RIA法, 较RIA法更能满足临床需要。Golla等[8]在糖尿病的研究中, 应用多种免疫学方法对大鼠模型血清中胰岛素进行分析, 结果表明, ECLIA可动态测定5 pg~5 ng范围的胰岛素水平, 相对于其他方法来说ECLIA是一种非常灵敏、可信且没有放射污染的均质分析方法。

综上所述, ECLIA分析系统是一套有效性好、准确度高、灵敏度高、系统精度良好、检测速度快的自动化免疫分析系统, 能充分满足临床和科研试验的需求, 尤其适用于临床急诊检测。相信随着医学技术的不断发展, 研究的不断深入, 该法在临床及基础研究领域的应用前景将是十分广阔的。

参考文献

[1]田润华, 郑春喜, 等.电化学发光免疫分析与临床应用[J].齐鲁医学杂志, 2004, 19 (5) :464-465.

[2]董伟.新型的电化学发光免疫分析及其临床应用[J].标记免疫分析与临床, 2001, 8 (1) :31-33.

[3]王利娜, 姚智, 等.电化学发光免疫分析技术检测乙肝标志物的应用[J], 天津医科大学学报, 2008, 14 (1) :48-50.

[4]Sakizono K, Oita T, Shibata Y, et al.Clinical usefulness ofserumPIVKA-Ⅱlevels determines by ECLIAsystemas atu-mor marker for heptocellular carcinoma[J].Rinsho Byori, 1998, 46 (9) :36-41.

[5]黄琛, 汤汉红, 等.蛋白质芯片技术与电化学发光技术检测多肿瘤标志物结果的评价[J].天津医药, 2008, 36 (12) :942-944.

[6]卢业成, 刘丽儿, 等.电化学发光免疫分析法在AFP定量检测中的应用[J].标记免疫分析与临床, 2003, 10 (4) :232-233.

[7]张瑞, 贾良勇, 等.电化学发光免疫分析法在HCG定量检测中的应用[J].延安大学学报 (医学科学版) , 2008, 6 (3) :108-109.

[8]Golla R, Seethala R.Asensitive, robust high-throughputelectro-chemiluminescence assayfor rat insulin[J].BiomolScreen, 2004, 9 (1) :62.

化学发光技术 篇2

非水毛细管电泳-电化学发光/电化学双检测技术在药物分析中应用

非水毛细管电泳(NACE)具有电泳电流低和分析速度快等优点,可以用于难溶于水以及在水中不稳定的化合物的分离分析~([1]).

作 者：袁柏青 由天艳 作者单位：中国科学院长春应用化学研究所,长春,130022刊 名：分析化学 ISTIC SCI PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY年，卷(期)：200937(z1)分类号：O65关键词：

让化学在生活中发光 篇3

关键词： 生活化教学 初中化学 教学意义 教学对策

化学研究的是与人们日常生活息息相关的问题，对藏区初中学生来说，使用的教材不仅与实际生活严重脱轨，而且加上语言带来的障碍，很难调动其学习积极性，对他们来说化学学习是一个难题，普遍存在化学学习障碍。化学学习不仅不能为其参加中考加分，反而成为拉后腿的科目。在这样的背景下，教师有必要将化学教学与学生的生活实际联系在一起，积极引导学生在生活应用中理解化学知识，在培养对化学的学习兴趣的同时提升其化学水平。

一、在藏区初中化学课堂开展生活化教学的意义

（一）有效激发学生的学习热情。

生活化教学主张在课堂教学中积极引入身边生活知识，用学生都熟悉的场景进行教学，不仅能够有效丰富课堂教学内容，使课堂更接地气，还能够激发学生学习兴趣，使学生更好地将注意力投入到课堂中，提高学生的化学学习效率。

（二）有效提高课堂教学的实效性。

化学知识对学习基础不牢固的西藏学生来说并不容易理解，加上教材中普遍使用汉语编写，语言的障碍使得化学学习更晦涩难懂。开展生活化教学，将学生生活中常见的现象引入课堂，不仅使课堂更生动，而且直观、形象的解释比起教材上呆板的叙述更便于学生理解，从而使教学效果得到增强。

（三）真正落实学以致用的理念。

化学是一门关于生活的科学，学习的最终目的是解释、解决生活中的问题，做到学以致用。在课堂中引入实际生活中的内容，开展生活化教学，使化学学习与生活实现有效结合，学生就能真正运用化学知识解释生活现象，活学活用，在运用中理解化学理论，真正落实学以致用的理念。

二、如何有效开展生活化教学

（一）教学内容尽量贴近生活，激发学生学习兴趣。

化学研究内容与生活息息相关，将课堂教学与学生生活有效结合在一起能够有效帮助学生理解化学知识，因此教师在教学中需要尽量采用与学生生活息息相关的教学内容，从学生切实的生活体验中选择教学素材，开展化学教学，激发学生的学习兴趣。如研究生石灰与水发生的反应的过程中，可以给学生展示一次煮鸡蛋，将鸡蛋放进生石灰中，加入水，让学生仔细观察在这个过程中发生的实验现象，当水遇到生石灰冒出大量白色水蒸气的时候，提问学生：这些是什么？然后当着学生的面敲开鸡蛋，鸡蛋已经熟了，让学生带着“水遇到生石灰发生了什么”的问题进入新课，探讨相关化学反应过程。再如在研究木炭的吸附性质的过程中，可以利用墨水、木炭开展相关的实验，在实验中发现木炭具有的吸附能力。

上述小实验都是我们在生活中经常看到的现象，虽然可能学生并没有注意到，但是通过这样的实验能帮助学生将化学与生活联系在一起，更直观形象地理解记忆相关的化学知识点，更有效地调动学生的学习兴趣，更主动地投入到课程教学中。

（二）利用实验教学，积极开展探究式教学。

实验教学是化学学习过程中一个十分重要的环节，更是化学教学不可或缺的教学内容。化学并不是一门注重死记硬背的学科，更注重的是学生观察与探究能力培养，再加上初中阶段学生好奇心旺盛，是培养科学探究思维的关键时期，在教学中穿插实验教学，不仅能够满足学生的求知欲，还能培养探究精神。如进行铁钉生锈的研究之前，给每个学生分发一颗铁钉，让学生用小纸盒装起来放在教室，每天进行观察，并做好观察记录。经过一段时间后，上课的时候让学生分享自己观察到的现象，进行讨论，总结分析铁钉生锈的原因有哪些。这个过程中，学生亲身参与实验，在感受实验乐趣的同时培养观察能力。

开展实验教学还能够培养学生的创新能力，在探究过程中强化学生的学习自信心，提高化学学习兴趣，教师需要积极引导学生进行学习引导，鼓励学生表达自己的观点与看法，积极开动脑筋，培养其创造性思维能力。如研究二氧化碳的特性的过程中，可以开展二氧化碳倾倒实验，在密封的玻璃箱中分层点燃蜡烛，将制好的二氧化碳导入玻璃箱中，观察现象，发现蜡烛熄灭的顺序是由底层到顶层，以此判断二氧化碳比空气重，而且不能燃烧，更不支持燃烧。

（三）以微型实验代替传统实验，提高学生创新能力。

西藏地区受到经济与自然条件的影响，教育水平受限，在化学教学中很多实验器材缺乏，教师可以尝试引入微型化学实验，有效解决物质缺乏的制约，以最少的器材实现最佳的教学效果。这个过程中可以引导学生充分发挥自己的创造性思维，如用矿泉水瓶制作洗瓶等，在动手中感受到化学的奇妙，激发学生化学学习兴趣。

每个地方的教学都有其自身的特点，在西藏地区开展初中化学教学需要教师尊重当地实际情况，贴近学生的实际生活，灵活运用各种教学手段，运用实验教学、探究式教学等形式调动学生的学习热情，让学生更主动、更积极地参与教学过程，从而学好化学，开拓思维，培养自主创新能力。

参考文献：

[1]吴德刚.西藏教育研究[M].北京：高等教育出版社，2009.

化学发光技术 篇4

1 资料和方法

1.1 临床资料

前列腺癌组45例, 年龄40岁～75岁, 均为来我院入住患者, 通过手术或活检标本病理检查证实。正常对照组59例, 年龄35岁～69岁, 均为来我院健康体检合格人员。

1.2 仪器与试剂

北京科美东雅微孔板光子计数分析仪和北京科美东雅生物技术有限公司生产的配套试剂盒。

1.3 检测方法

所有检测对象采血前10 d禁止常规直肠检查、前列腺按摩、前列腺活检、膀胱镜等操作, 晨起空腹采肘静脉血2 ml, 分离血清置-20℃待检。检测原理和方法基于双抗体夹心法的化学发光检测方法。在微孔板上包被PSA的抗体, 捕捉被检者血清中对应的PSA, 结合标有失踪物的二抗, 然后经酶促催化化学反应产生光信号, 用专门的化学发光检测仪读取光信号, 通过软件进行信号值和浓度值的换算, 对PSA进行定量分析。操作步骤按试剂盒操作说明书进行。

1.4 临界值设定

PSA<4μg/L, 结果以高于临界值判定为阳性。

1.5 统计学方法

用SPSS10.0统计学软件包进行统计分析。检测数据以均数±标准差 (x±s) 表示, 组间数据比较用t检验, 阳性率采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清PSA测定结果见表1。

用配对t检验, 结果显示P<0.01。说明前列腺癌组PSA水平与正常对照组比较有显著性差异。

2.2 各组阳性率评价见表2。

用χ2检验, 结果显示P<0.01。说明前列腺癌组阳性率与正常对照组比较有显著性差异。

3 讨论

PSA是一种具有237个氨基酸残基的单链糖蛋白, 分子量约为34 000 Da, 在功能上属于类激肽释放酶的一种丝氨酸蛋白酶。1971年首次发现于精液中, 1979年Wang在前列腺组织中也分离出与其相同的糖蛋白, 并命名为prostate specific antigen (PSA) , 即前列腺特异性抗原。PSA是由位于前列腺腺泡和导管的上皮细胞分泌, 正常生理情况下, 前列腺特异表达的PSA通过导管分泌到精液中, 其在精液中的浓度高于在血清中浓度的100万倍 (0.5～5.5 g/L vs 0.1～4.0μg/L) 。在前列腺的腺泡和导管腔与血液循环系统之间, 存在着明显的组织屏障, 当患有前列腺癌时, 由于肿瘤细胞的异常生长会使这一自然屏障遭受破坏, PSA就会大量渗漏于血中造成血清PSA水平的大幅度升高[3]。由表1可知, 前列腺癌患者血清PSA显著升高, 显著高于正常对照组, 与对照组相比具有极显著性差异 (P<0.01) 。说明血清PSA检测对前列腺癌有一定的鉴别诊断意义, 通过检测PSA可以提高前列腺癌的检出率, 达到早期诊治的目的。

参考文献

[1]Jemal A, Murray T, Samuel A, et al.Cancer statistics2003[J].CA Cancer J Clin, 2003, 53 (1) :5～26

[2]朱洪祥, 钱雄炎, 陈树根, 等.前列腺癌内分泌治疗对血PSA的影响及其临床意义[J].中华现代外科学杂志, 2006, 3 (6) :478～479

化学发光技术 篇5

技术是罗氏公司开发的，但全自动机械制造却由日本的日立公司承担，所以仪器上还有Hitachi的标志。这个仪器让大家吃惊的一大原因就在于一直在实验室研究的电致化学发光居然已经真正地产业化了，其中我们一直无法解决的诸多问题（尤其是重现性）均已得到解答，看来罗氏的确花了不少心血开发这款仪器。

罗氏电化学发光免疫分析技术的性能特点——创新的技术，与众不同

一、最先进的检测原理

电化学发光免疫测定，是目前最先进的标记免疫测定技术，是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术，具有敏感、快速和稳定的特点，在固相标记免疫测定中技术上居领先地位。电化学发光（ECL）是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上是电化学和化学发光两个过程的完美结合。电化学发光与普通化学发光的主要差异在于前者是电启动发光反应，循环及多次发光，后者是通过化合物混合启动发光反应，是单次瞬间发光。因此ECL反应易精确控制，重复性极好。

电化学发光免疫测定是电化学发光（ECL）和免疫测定相结合的产物，直接以[Ru(bpy)3]2+标记抗体，反应时标记物直接发光。且[Ru(bpy)3]2+在电极表面的反应过程可以周而复始进行，产生许多光子，使光信号得以增强。

二、专利的包被技术

链霉亲和素（streptoavidin，SA）和生物素（biotin，B）是具有很强的非共价相互作用的一对化合物，特异性强且结合紧密。一分子SA可与四分子B相结合，增大了抗体结合量，达到放大效果。在ECL的试剂中，SA通过特殊的蛋白结合物均匀牢固地包被在磁性微粒上，形成通用的能与B结合的固相载体，另一试剂为活化的B衍生物化合的抗原或抗体。两种试剂混合时，抗原或抗体即包被在磁性微粒上。

三、独特的载体

ECL中采用的固相载体是带有磁性的直径约2.8m的聚苯乙烯微粒。其特点是反应面积极大，比板式扩大20－30倍，使反应在近乎液相中进行，反应速度大大加快，利用氧化铁的磁性，使用电磁场分离结合态和游离态，方便迅速，实现了精确的全自动化。

四、独到的磁分离技术

实现了结合相和游离相的完全自动化分离，且检测池在无电场时彻底清洗，避免了交叉污染。

五、超高的测定灵敏度和测定线性

发光信号检测的宽线性加上电化学发光独特的标记物本身（发光底物）循环发光和专利的链霉亲和素-生物素包被技术的信号放大作用，使电化学发光测定的检测下限可达10-12和10-18级，线性范围最大超越7个数量级，在待测抗原（抗体）极微量或达到病理期极限时，均能准确测定，避免了样本稀释重测定，既节约时间，又节省试剂。

六、稳定的试剂

电化学发光标记物三联吡啶钌在无电场和递电子体（三丙胺）存在的自然环境下非常稳定，保证了用它标记的抗体（抗原）试剂也非常稳定，2－8℃可稳定一年以上，批内和批间变异系数分别为<4%和<7%，在首日使用之后也可以稳定3个月。

七、简便创新的定标概念

每个测定项目的基本定标曲线已由罗氏公司完成，并已存入试剂的二维条形码，自动读入仪器，用户只需进行二点重定标即可。

八、简便稳妥的二维条形码——当代最先进的全自动信息处理技术

二维条形码是电化学发光分析仪的“信息高速公路”，可以存储超过一千字节的信息，使同批试剂仅做一次2点定标，亦使仪器自动化程度升高，不必做大量的定标、质控等前期工作，厂家已做12点标准曲线，既节约时间，又保障结果的准确。

九、先进的闪烁存储技术

断电时软件数据永不丢失，避免硬盘损坏，导致系统崩溃，启动速度比硬盘快10倍。

十、广泛的应用范围和广阔的开发前景

检测项目广泛应用于甲状腺、性激素、骨代谢、心肌梗塞、肿瘤标志物、传染病抗原抗体等的定量测定。

化学发光技术 篇6

【关键词】肝纤维化;化学发光;临床应用评价

【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】1044-5511（2011）10-0364-01

肝纤维化是一切慢性肝病的共同病理学基础，肝纤维化发生时的大量细胞外基质在肝脏内的堆积，最终导致肝硬化的发生[1]。尽管目前还没有很好的手段治疗肝硬化，但是近来，人们发现肝纤维化的发生是可以阻止的，因此肝纤维化的诊断和治疗受到高度的重视。血清学指标因其无创、简便、便于监测病人病情而成为广泛利用的检测方法，尤其是利用透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)联合检测的手段[2]。我们采用化学发光技术的四项试剂盒检测血清标本，以探讨这些指标对肝病肝纤维化诊断的价值。

1 材料和方法

1.1 实验对象：

按2000年全国病毒性肝炎诊断标准选择本院门诊和住院患者，排除可能因为治疗而导致标志物下降的标本，共计218例，其中男124例，女94例，年龄16 ~75岁．平均44.8岁。分急性病毒性肝炎42例，慢性肝炎轻型45例，慢性肝炎中型46例，慢性肝炎重型48例．肝硬化37例。对照组50例，为同期来我院体检者，经检查各项指标正常，且年龄与性别构成比与患者组相近。

1.2 检测方法：

LN、CⅣ采用化学发光两步双抗体夹心法，PⅢNP、HA采用化学发光间接竞争法。试剂盒均购自安图绿科生物工程有限公司。采用郑州安图实验仪器公司LUMO发光仪检测，严格按试剂说明书操作。

1.3 统计方法：

数据均以(X ± S)表示，组间比较采用t检验。

2. 结果

2.1 各组肝病患者血清HA、PⅢNP、LN、 CⅣ检测结果见表1。由表1知在急性肝炎组中四项指标与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)，在慢性肝炎轻度组中除LN外与对照组比较均呈显著性升高(P<0.01)，且三项指标均随病程的进展而升高。

与对照组比较△P<0．01。与急性肝炎组比较◆P<0.01

2.2 以慢性肝炎中度为肝纤维化的诊断标准，以慢性肝炎轻度组各指标的95％可信限上限为判断值，三项指标及联合检测对肝纤维化的诊断价值见表2。

3. 讨论

肝纤维化是肝硬化的早期病理基础。由于肝脏的代偿功能很大．目前常规肝功能试验无法诊断肝纤维化或早期肝硬化。肝活检为创伤性检查，不能判断肝纤维化的活动度，且难以动态观察[3]。因此检测肝纤维化的的血清标志物对于肝纖维化的诊断和治疗非常有意义。从表1看，所有四项标志物随着病情的加重呈梯度升高，特别是HA、PⅢNP和CⅣ，在早期肝纤维化的诊断中意义更大，而LN则对于中度和重度纤维化的病人的诊断和治疗更有意义。

敏感度低是目前肝纤维化血清学检测的现状，但是本文采用标本排除了可能因治疗而导致标志物浓度下降的标本，从表2看，单项检测的敏感度和特异性均很高，而联合联测则能获得更加可靠的诊断结果。化学发光法是新兴技术，与传统的RIA和ELISA方法相比，有线性范围更宽，更加灵敏的特点，这对于肝纤维化诊断敏感度低的现状亦有一定的改善作用。

参考文献

[1]王浩，高春芳．肝纤维化的血清学诊断．使用临床医药杂志，2005，7：4-9

[2]俞纯山．肝纤维化的检测及临床意义．中华检验医学杂志，2003，3：190-192

化学发光免疫分析方法与应用进展 篇7

1 化学发光免疫分析方法类别

1.1 化学发光免疫分析

化学发光免疫分析方法主要是由化学发光剂, 对抗原或者抗体进行直接标记的免疫测定方法之一。当前比较常见的化学发光免疫分析方法主要有吖啶酯类化学发光剂和鲁米诺类化学发光剂。一般情况下, 吖啶酯以及吖啶磺酰胺类的化合物均属于化学发光免疫分析方法, 能够在加入适量的CTAC后, 大大的增强发光效果。其次, 鲁米诺类物质的发光原理主要为氧化发光。含有鲁米诺类物质的碱性溶液, 能够在催化剂的辅助下实现基态, 进而发出光子。

1.2 化学发光酶免疫分析

化学发光酶免疫分析主要采用没进行生物活性物质的标记, 以此判断其免疫反应。出现免疫反应后, 复合物上的酶便会再次对发光底物产生作用, 利用信号试剂等进行发光。当前, 化学发光酶免疫分析当中比较常见的标记酶应该为碱性磷酸酶, 以及辣根过氧化物酶。其中, 碱性磷酸酶主要在酶联免疫分析、核酸杂交分析当中得到了广泛的应用。具有反应速度较快, 分析时间较短, 结果较为正确可靠等优点。而辣根过氧化物酶主要将鲁米诺及其相应的衍生物作为主要的发光底物, 在使用过氧化酶的情况下, 对抗体进行标记。在此基础桑, 通过过氧化酶将发光试剂启动, 将能够起到一定的发光标记作用。金茂俊等 (2012) 在其研究中认为, 该种方法比较传统, 发光强度比较低, 且测量不便。但是, 在长时间的研究下, 已经能够长时间的保证发光新高增强, 分析灵敏且准确[1]。

1.3 电化学发光免疫分析

电化学发光免疫分析主要有电化学原理产生的反应, 引起了一定的化学发光过程。国外著名学者Leland曾在其研究中, 对三联必定钌体系当中所存在的电化学发光机理进行比较全面的且深入的研究。经过研究发现, 当三联吡啶钌作为发光的底物, 三病案作为激发光反应物质时, 阳极的表面会出现两种物质同时失去电子的情况。若三联吡啶钌出现了衰减, 并在衰减的过程中能够发出比较长的, 例如波长为620mm的光子, 其将能够重新恢复成为基态的三联吡啶钌。在此过程当中, 电极的表面将能够产生比较连续的、稳定的、高效的、增强的发光现象。

2 化学发光免疫分析方法的应用

2.1 食品安全检测中的应用

在当前食品安全问题十分严重的情况下, 必须采用有效的方法对食品安全进行检测。洪亮 (2015) 在其研究中表示, 当前化学发光免疫分析方法已经能够在食品安全检测当中得到良好的应用[2]。不仅能够有效的对生物毒素进行检验, 防止人们食入病毒而引起中度时间, 及时发现有毒因素。亦能够对病原微生物等进行检测, 既节省操作时间, 有具有良好的灵敏度。此外, 对于兽药、农药等环境污染物亦能够有效检测, 防止因农药、兽药等药物残留引起中度事件的发生。

2.2 临床诊断中的应用

临床诊断中亦对化学发光免疫分析方法进行了有效的、广泛的应用。尤其在对甲状腺疾病患者进行甲状腺球蛋白浓度的检测当中, 更能够通过该方法有效的提升假阳性和假阴性的检测率。例如, 刘洪玲等 (2015) 在其研究当中, 采用化学发光免疫分析方法对甲状腺患者的假阴性、假阳性检测结果、以及灵敏度、特异性等, 与放射免疫法进行了对比分析[3]。结果发现化学发光免疫方法的检测效果更佳。由此可见, 化学发光免疫分析方法能够在临床诊断中发挥比较良好的效果, 为临床诊断提供有力依据, 值得临床应用并推广。

3 结语

综上所述, 近年来, 化学发光免疫分析方法及其应用的研究逐渐增多, 发展非常迅速。化学发光免疫分析方法的类别主要有化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、电化学发光免疫分析等。同时, 该方法凭借其自身的优势广泛应用于食品安全检测、临床诊断当中。但是, 未来的研究更应该致力于在降低成本、提高质量、扩大应用范围等方面。以此促进化学发光免疫分析方法获得更加良好的、快速的发展和应用。

参考文献

[1]金茂俊, 邵华, 金芬, 等.化学发光免疫分析方法的研究及应用[J].农产品质量与安全, 2012, 05 (02) :42-46.

[2]洪亮.化学发光免疫分析技术在食品有害因素检测中的应用[J].化学工程与装备, 2015, 10 (11) :216-218.

超微弱化学发光体系的研究及应用 篇8

关键词：超微弱化学发光,过氧化氢,无机盐

1 超微弱化学发光体系的基本原理

化学发光主要是指由两种物质在化学反应的情况下所产生的电磁辐射现象, 造成这种现象的原理是由于基态分子在吸收相应的能量后把产生的激发态分子通过光辐射的方式转回到基态分子, 从而产生化学发光的现象。

化学发光分析法作为化学发光研究中的主要方法, 在一定程度上促进了我国化学专业的发展。化学发光分析法所利用的设备简单, 并且灵敏度高, 测量的范围广, 从而得到了化学研究人员的广泛使用。化学发光体系中比较常见的便是鲁米若化学发光体系、过氧化草酸酯发光体系以及高锰酸钾化学发光体系, 这类化学发光体系以其高度的灵敏度被运用与化学领域之中。但是, 这类化学发光体系也存在一定的缺点, 比如说, 在研究中所使用的反应试剂价格比较昂贵, 并且具有一定的危险性, 选择性低。因此, 人们研究与关注的焦点逐渐朝着超微弱化学发光体系的方向发展。超微弱化学发光试剂不仅价格便宜, 并且试剂以温和的条件在化学反应的氧化机理中产生了重要作用, 并且这一过程也逐渐被人们认为是生物体系中最具可能性的氧化机理。因此, 对该机理的研究, 成为了提高化学发光能力的基本研究。

2 对超微弱化学发光体系的研究及应用

2.1 过氧化氢———碳酸氢盐体系

碳酸氢盐作为化学发光体系的重要缓冲溶液, 已经在研究人员的研究中成为了化学发光的主要发光试剂。在20世纪80年代, 人们就已经发现碳酸氢根在中性条件中与过氧化氢产生过氧碳酸盐, 并且过氧碳酸盐的反应动力学原理已经被人们进行了相关的报道。特别是林金明研究组在试验中对两者进行结合从而产生超微弱化学发光体系。

人们利用化学发光光谱以及荧光光谱与电子自选共振光谱, 对化学发光的反应机理进行了研究与推测, 其中, 当溶液中的过氧化氢与HCO3-进行反应中会在一定条件下形成烃基自由基以及碳酸根自由基。除此之外, 当溶液中的自由基参与化学反应就会产生二氧化碳二聚体发光体, 激发态物质辐射能量重新回到基态, 从而产生化学发光的现象, 其中所产生的反应机理下图:

林金明研究组在研究中发现该化学反应不具备危害性与污染性, 在此基础上, 研究组利用其原理对金纳米增强、荧光染料增强以及碳纳米球增强进行了研究与分析, 从而建立了流动注射化学发光分析法。其中, 碳纳米球增强在对自来水以及雪水的检测中得到了应用, 这种方法不仅灵敏度比较高, 并且抗扰性比较小。

2.2 过氧化氢———亚硝酸盐体系

亚硝酸盐与过氧化氢结合会产生过氧亚硝酸。过氧亚硝酸作为一种性质较强的酸性物质, 会在一定条件下失去一个质子从而产生过氧亚硝酸盐, 这种反应机理是比较常见的。而过氧亚硝酸盐是一种活性较大, 且性质稳定的氧化剂, 在与化学物质进行反应时速度是比较快的, 并且如果在增敏剂存在的条件中可以使化学发光的强度得到增大。

除此之外, 相关人员把二氧化碳加入过氧亚硝酸盐中, 这种方式可以让化学发光体系在利用表面加强的作用下得到加强, 这种方法也逐渐被人们运用到实验之中, 比如用来测定在水中的亚硝酸, 从而使亚硝酸的选择性得到加强。

化学发光体系在碱性溶液中所发出的强度比较大, 但是在碱性溶液中过氧化氢会非常容易被相应的离子进行分析, 会对化学发光的现象造成一定的干扰。国外Starodubtseva在对此研究的报道中可以得知, 如果在非碱性溶液之中, 过氧化氢与NO2-在反应中会形成HOONO。HOONO在反应的前期会发生物态的变化, 并且在生成硝酸盐的时候会产生化学发光, 这种情况是比较微弱的。但是很多研究人员认为化学发光的主要载体是1O2。林金明研究组在静态注射的研究中发现这两种物质会在一定条件下产生比较微弱的化学发光现象, 并利用电子自旋共振的理论对这一实验进行了证实, 并且把两者通过流动的方式注入到溶液之中, 可以在一定程度上加大化学的发光体系。

3 结论

化学发光的研究已经经历了几十年的时间, 在这段时间里, 化学发光的理论基础得到了加强, 并且化学发光体系的应用范围也得到了加强。由于化学发光分析法所利用的设备价格比较昂贵, 且具有一定的局限性, 从而无法得到人们的认可。随着科技的发展, 在近几年, 人们研究出了过氧化氢与无机盐共同结合所产生的超微弱化学发光体系, 这种体系的价格比较便宜, 并且具备一定的绿色、环保性能, 所产生的反应条件比较温和, 在反应中与化学反应所产生的氧化机理成为了人们研究的主要对象, 并且逐渐成为人们关注的焦点。本文阐述了超微弱化学发光体系的研究现状, 并且所提出的体系与理论可以为以后化学发光的研究提供基础保障, 从而促进其发展。

参考文献

[1]薛伟.亚硫酸氢钠——过氧化氢超微弱化学发光体系增敏剂的探索, 制备及应用研究[J].北京化工大学, 2012.

全自动化学发光分析仪性能评价 篇9

1 材料

1.1 仪器

Abbott i2000SR美国雅培公司生产, 加样器:法国吉尔森, 经过较准。

1.2 试剂

1.2.1 ARCHITECT AFP controls, level 2, 84ng/mL;ARCHITECT HCG controls, level 1, 25mIU/mL, ARCHITECT CEA controls, level 3, 100ng/mL。

1.2.2 雅培原装试剂

2 方法与结果

2.1 精密度

取ARCHITECT AFP controls, level 2, 靶值84ng/mL;ARCHITECT HCGcontrols, level 1, 靶值25mIU/mL;ARCHITECT CEAcontrols, level 3, 靶值100ng/mL一天内对上述项目进行20次测定。每天测定一次, 连续测定20d, 结果见表1。

结果可见, 天内变异系数<4%, 天间变异系数<5%, 精密度良好。

2.2 准确度

对仪器进行保养、调标后对ARCHITECT AFP controls, level 2, 靶值84ng/mL;ARCHITECT HCG controls, level 1, 靶值25mIU/mL;ARCHITECT CEA controls, level 3, 靶值100ng/mL进行测定, 然后与靶值比较, 计算出偏差, 结果见表2。结果表明定值质控血清靶值与实测值的比较, 原装试剂偏差最低为0.1%, 最高为4%。准确度较高。

2.3 线性试验

将3个HCG高浓度病人血清充分混合重复测定三次为期望值, 再对该血清用生理盐水进行对倍稀释, 产生6个浓度, 上机测定, 进行测定值与期望值之间的比较, 结果见表3。依据所测结果得回归系数:1.07, 测定项目期望值与测定值的相关系数线性良好。

单位:mIU/mL

2.4 携带污染试验

取HCG controls, level 1, 靶值25mIU/mL、controls, level3, 靶值5000mIU/mL, AFP controls, level 1, 靶值25ng/mL, controls, level 3, 靶值191ng/mL, 连续测定低值三次, 再测定高值三次, 共循环测定4次, 结果见表4。

单位:mIU/mL

根据公式:

1.55%, LH=0.02%。可知, 总的携带污染率较低。高值对低值的携带污染率相对较大, 但低值对高值几乎不影响。说明该机具有良好的内外冲洗能力和防携带系统.

3 讨论

以上实验结果表明, 该仪器具有良好的线性, 且线性范围宽 (AFP:0～87500;β-HCG:1.2～225000) , 如此宽的线性范围完全可以适应临床的需要;从表1可知, 无论是中值AFP, 高值CEA, 低值HCG, 其天内CV值均较低, 具有很好的重复性, 天间CV值也较小, 说明仪器的稳定性很好;高值标本对低值标本HCG检测的携带污染率较低, 低值对高值几乎可以忽略不计。总之, 从仪器检测的相关性, 重复性或线性等主要性能来看, Abbott i2000SR全自动化学发光分析仪是大、中型医院临床实验室比较理想的免疫分析仪之一。

关键词：Abbott i2000SR,性能与评价,精密度,稳定性

参考文献

[1]余立江, 吴锦华, 杨树德.NCCLS文件推荐的评价仪器精密度性能方法的应用[J].中华医学检验杂志, 1992, 15 (3) :54-56

化学发光技术 篇10

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集标本来自到中国航天科技集团公司七三八疗养院健康体检的中国航天科技集团公司上海第八研究院职工, 共100例。

1.2 仪器与试剂

博阳生物科技 (上海) 有限公司的LiCA光激化学发光检测仪及原装配套试剂, 美国雅培公司的i2000SR化学发光微粒子免疫分析仪及原装配套试剂, 定值血清由博阳生物提供。检验过程均按照试剂和仪器操作说明书进行。

1.3 方法

所有标本均抽取清晨空腹静脉血4mL, 离心分离血清待测。两种仪器同时检测100份血清中AFP和CEA, 且用LiCA分别检测AFP和CEA两项指标的低、高值定值血清。由于两种仪器检测方法不同, 其检测项目的正常范围也不同。参考值:LiCA AFP 0～7ng/mL、CEA0～8.2ng/mL;i2000SR AFP 0～13.4ng/mL、CEA 0～5ng/mL。

1.4 统计学分析

用SPSS13.0统计软件进行数据分析, 两组间采用配对t检验和直线回归分析。

2 结果

2.1 相关性试验

用LiCA和i2000SR同时对100份血清标本检测AFP和CEA两项指标, 检测结果见表1。由表1可见, LiCA和i2000SR两种仪器检测结果具有很好的相关性, 且无显著差异 (P>0.05) 。

2.2 准确度和精密度试验

用Li CA检测AFP和CEA的低、高值定值血清 (批号AFP:C1004;CEA:C1012) 各测定20次, 得低值和高值批内精密度, CV在1.95%～4.65%之间, 检测结果见表2。由表2可见LiCA检测结果准确度高, 精密度好。

3 讨论

LiCA检测原理源于LOCI (luminescent oxygen channeling immunoassay, LOCI) 技术, 最初由Ullman等[1]在1994年报道, 后由Perkin Elmer公司生产相关试剂。该技术采用了纳米级颗粒, 增加了反应表面积, 极大地提高了检测灵敏度, 这种纳米颗粒在液相中保持稳定的悬浮状态, 并借助于“结合则发光”原理, 实现了均相、一步、免清洗和高通量检测[2]。检测过程不易受到荧光淬灭现象、样本常见干扰物质、p H值、离子强度及温度等因素的影响, 保证了检测稳定性[3,4,5]。

本实验100例血清标本分别用LiCA和i2000SR同时检测AFP和CEA, 各项目的相关系数均>0.96;两种仪器对各项目检测结果配对t检验, P>0.05, 表明Li CA和i2000SR具有较高的相关性。

对定值血清检测结果表明, LiCA具有较好的准确性和精密度, 本法的批内CV<5%与其他文献的报道基本一致[6,7]。LiCA是均相免疫测定法, 避免了酶联免疫吸附试验 (ELISA) 、放射免疫法 (RIA) 等检测方法中繁琐的分离和洗涤步骤, 且由于微粒表面积的增加, 提高了检测的灵敏度。

LiCA以其独特的检测技术实现了均相、免清洗检测且具有标本用量少、检测速度快、成本低等优点, 适用于临床和大批量健康体检人群肿瘤筛查的检测。

参考文献

[1]Ullman EF, Kirakossian H, Singh S, et al.Luminescent oxygenchanneling immunoassay:measurement of particle binding kineticsby chemiluminescence[J].Proc Natl Acad Sci, 1994, 91 (12) :5426-5430.

[2]Ullman EF, Kirakossian H, Switchenko AC, et al.Luminescentoxygen channeling assay (LOCITM) :sensitive, broadly applicablehomogeneous immunoassay method[J].Clin Chem, 1996, 42 (9) :1518-1526.

[3]Poulsen F, Jensen KB.A luminescent oxygen channeling immuno-assay for the determination of insulin in human plasma[J].Biomol Screen, 2007, 12 (2) :240-247.

[4]Li Y, Choi M, Cavey G, et al.Crystallographic identification andfunctional characterization of phospholipids as ligands for theorphan nuclear receptor steroidogenic factor-1[J].Mol Cell, 2005, 17 (4) :491-502.

[5]Motola DL, Cummins CL, Rottiers V, et al.Identification of ligandsfor DAF-12 that govern dauer formation and reproduction inC.elegans[J].Cell, 2006, 124 (6) :1209-1223.

[6]高云朝, 赵卫国.光激化学发光法检测甲胎蛋白实验性能评价[J].检验医学, 2009, 24 (8) :578-581.

化学发光技术 篇11

关键词：LED；研究现状；应用领域；性能；驱动原理

伴随着LED技术的不断革新，对发光二极管技术的研究也有着快速的发展，其中一些大功率发光二极管在现实社会中的运用越来越广泛，本文主要针对常用的大功率发光二极管技术予以简要的探讨和分析。

一、发光二极管的研究现状

近年来，LED的研究水平一直保持稳步增长状态，特别是上个世纪90年代，发光二极管的研究取得新的里程碑。发光二极管技术的革新促进了很多产业内部结构的调整，特别是对一些新兴产业的发展有着十分重要的影响，相关技术在各种新兴领域得到廣泛利用。

二、发光二极管驱动电路的种类

发光二极管驱动电路有着多种分类方式，根据发光二极管的使用功能、使用要求、使用条，一般有以下几种分类方法：

1、根据驱动源方式进行分类

根据不同的驱动源方式，可以把发光二极管分为这几种方式：（1）电压源驱动的发光二极管。这种方式优点在于结构简单、便于使用；缺点是同时存在着电阻损耗大、电流调节不便等因素。（2）电流源驱动的发光二极管，发光二极管最理想的驱动方式是电流源驱动。主要包括三种应用方式：加镇流电阻式、多路电流源式、高频变压器升压式。

2、根据负载的不同连接方式来进行分类

根据发光二极管负载的不同连接方式来进行分类，有下列几种：（1）并联型，多个发光二极管并联，连接在驱动电源上，构成了发光二极管的并联连接。启动电压较低的发光二极管有较大的电流通过，相比较而言，亮度较大，功耗较大，极易因过载而损坏。为避免这种不安全因素，可以在每个发光二极管上串联一个小阻值的镇流电阻；（2）串联型作为最常用的连接方式，串联型连接具有突出的优势：每个发光二极管中流过的电流大小相同，发光强度一致，拥有良好的均匀性。（3）串并联混合型。根据实际的工作要求、应用需要、驱动方式、现场条件等等，正确合理地综合应用串并联连接方式，可以达到工作效率的最大化。

三、大功率发光二极管的应用

发光二极管的光亮度越来越高，颜色选择范围越来越广，因而也越来越广泛地应用于各个领域。较低光通量的发光二极管多应用于指示灯和显示屏，随着光通量也就是光亮度的提高，LED灯也由室内发展到室外，应用于功率信号灯、特殊照明灯等等。

1、照明光源

发光二极管以白光形式作为照明光源，相较于一般的普通照明光源，优势显而易见。LED光源因其无红外线辐射，具有很好地隐蔽性，除此之外，发光二极管十分耐震，采用固体化的结构，便于携带，而且十分适合以蓄电池方式充电。这些优势，为LED灯在照明光源的应用领域开辟了很大的空间。日常生活中的埋地灯和草坪灯早已随处可见，发光二极管还在其他方面满足着人们的照明需求，比如用作手电、学习台灯、手术医生的头灯、显微镜的视场照明、室内展览馆的照明等等。

2、新一代灯饰

在灯饰制造业方面发光二极管有着许多特有的优势，比如环保节约、使用周期长、容易控制、操作简单、灯光颜色可以变换等，而且随着科技日新月异，发光二极管的制作工艺越来越精致而且质量在不断提高，相应的制作成本越来越低。这些优点使得发光二极管开拓灯饰市场占有巨大的有力地位。现在很多地方发光二极管制作而成的建筑物都能见到，比如桥梁、广场以及一些高大的建筑物等。单色的、多色的，甚至是变色的LED灯将现代都市装饰成一个流光溢彩的梦境一样的世界，将现代都市打造成了一个灯壁辉煌、流光溢彩的不夜城。

3、交通信号灯

很早以前，在航标灯中就运用到了发光二极管技术，现在，有关LED的研发进一步深入，发光二极管在交通信号等系统中已经占有非常重要的地位。和其他信号灯相比， LED信号灯更加节约用电，而且使用周期长，维护设备的成本低。如今，LED灯采用的发光波长是黄绿色光505nm、色光590nm、红色光630nm。有一点需要注意，夏天温度高如果驱动电流过大很容易造成发光二极管的损害。交通信号灯系统当今世界还不是很完善，但是相信在不远的将来的应用领域还将被继续开拓，相信在不远的将来，铁路专用信号灯、机场专用信号灯也将大量采用发光二极管作为光源材料。

4、液晶屏背光源

液晶显示需要背光源，LED灯就是一种很好地选择。发光二极管不仅可以用作白色、红色、绿色、蓝色等单色背光源，还能够以变色背光源的形式应用于生产实践中。近期，在我们最不可或缺的生活用品——手机中，以发光二极管作为制作背光源的元件，已成为液晶显示屏的又一发展方向。这种创新使手机产品明显地提升了档次，收到了很好地效果。已经制成的液晶屏背光源，可以达到八十以上的显色指数，有很好地混色效果，且厚度仅为六毫米。虽然，当前的大型背光源尚处在研发阶段，但不难想象，这种项目不日之后将取得不错的市场回报。

5、显示屏

显示屏的问世，起源于二十世纪八十年代中期，最初的发展形态，是文字屏或动画屏，分为单色和多色不同种类。随着科技的发展，九十年代初，发光二极管显示屏实现了视频技术，可以保证电视图像直接上屏。尤其是到了九十年代中期，以InGaN为材料的超高亮度发光二极管研发成功，该二极管有绿色和蓝色两种颜色，投产后被广泛应用于室外屏的设计之中，取得了很好地效益回报。现在，无论是广场、体育场馆，或者是商场、街道，发光二极管制作的显示屏随处可见，甚至，在银行利率屏、汇率屏、证券行情屏等应用领域，也占有一席之地。随着发光二极管的研发规模越来越大，LED灯有望形成一条新兴产业链。

结束语

大功率发光二极管在市场上有着巨大的需求，前景广阔。坚持对LED技术长期的研发并把相关技术在社会生活中充分开发和利用，不仅有利于科学技术的进步，也能把科技转化为生产力，促进社会的发展。

参考文献：

[1]杨安发.定电流对LED的重要性[J].照明工程学报，2013（9）.

[2]周太明.白光LED驱动电路的研究及电子电路的设计[J].半导体照明的曙光，2012（11）.

化学发光技术 篇12

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

IFFL-D型流动注射化学发光仪,西安瑞科电子设备有限公司。

盐酸异丙肾上腺素标准液(50mg·L-1):准确称取5mg盐酸异丙肾上腺素(中国生化药物检验所)于100m L棕色容量瓶中(避光低温保存,8h内稳定)作为贮备液,使用时用水逐级稀释至所需浓度;高锰酸钾(北京化学试剂三厂):0.05 mol·L-1水溶液;甲醛(分析纯);HCl、HNO3、H2SO4、H3PO4、冰乙酸均为分析纯,水为二次蒸馏水。

1—盐酸混合溶液;2—KMn O4溶液;3—异丙肾上腺素溶液;C—流通池;V—进样阀;W—废液;D—检测器

1.2 实验方法

实验装置如图1所示,甲醛,盐酸混合溶液和KMn O4溶液分别由蠕动泵输入混合,异丙肾上腺素溶液由进样阀注入,泵速为30转·min-1,开启蠕动泵,测量发光强度,采样环体积30μL。

2 结果与讨论

2.1 化学发光强度-时间曲线

图2是酸性条件下,高锰酸钾-甲醛-异丙肾上腺素体系化学发光的强度-时间曲线。由图可看出,该体系能产生强的化学发光信号。从反应开始到发光强度达到最大值所需时间约为0.3s,并很快衰减,知此体系为快发光体系。本文以发光信号的峰高来定量测定异丙肾上腺素。

异丙肾上腺素:2.0μg·L-1;HCl:1.0 mol·L-1;formaldehyde:5.0%;KMn O4:2.0×10-3mol·L-1

2.2 反应介质的选择及其影响研究

固定异丙肾上腺素溶液浓度为2.0μg·L-1、KMn O42.0×10-3mol·L-1和甲醛溶液浓度为5.0%的条件下,分别考察了HCl、HNO3、H2SO4、H3PO4、冰乙酸为介质对化学发光强度的影响,结果表明,在盐酸介质中发光强度最大,故在本文研究中均选择HCl作为反应介质。在此基础上,进一步研究了HCl浓度的影响。如图3所示,随着HCl浓度的增加发光强度逐渐增加,在浓度为2.0 mol·L-1时发光强度达到最大,此后发光强度急剧降低。为了获得最佳发光强度,本文中选用2.0 mol·L-1HCl作为反应介质。

2.3 高锰酸钾浓度的影响

其它条件不变情况下,考察了不同高锰酸钾浓度在0.5×10-3~3.0×10-3mol·L-1范围内对化学发光的影响(图4)。随着高锰酸钾浓度的增加,发光强度逐渐增加,在浓度为2.0×10-3mol·L-1时达到最大,此后逐渐减小。因此,选择高锰酸钾浓度为2.0×10-3mol·L-1。

2.4 甲醛浓度的影响

甲醛是该发光体系的增敏剂,对发光强度有显著影响,试验考察了加入不同甲醛浓度时的发光强度如图5所示,可见,选用甲醛的浓度为5.0%时达到峰值,之后发光强度逐渐减少,故选用甲醛的浓度为5.0%。与直接用高锰酸钾氧化的发光强度相比较,加入5.0%甲醛后,发光强度由151.6增加至592.3,增敏近4倍。

2.5 工作曲线

在最佳条件下,,测定了化学发光强度与异丙肾上腺素浓度之间的关系,结果表明异丙肾上腺素在0.1~10.0μg·L-1范围内与发光强度呈良好的线性关系,线性方程为

检出限为0.02μg·L-1。对2.0μg·L-1的异丙肾上腺素标准溶液平行测定11次,平行测得值的RSD为2.7%。根据IUPAC建议[7],DL=KSb/S,K取3,Sb为空白溶液测得值(n=11)的标准偏差,S为工作曲线的斜率,求得检出限为0.02μg·L-1。

2.6 共存物质的影响

在选定条件下,对与异丙肾上腺素可能共存的部分物质进行干扰实验。2.0μg·L-1的异丙肾上腺素溶液中,当干扰水平为±5%时,1000倍的K+、Na+、Ca2+、Mg2+,500倍的葡萄糖、果糖;50倍的L-组氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸无干扰,但VC干扰严重。

2.7 样品分析

优化条件下,对盐酸异丙肾上腺素注射液(标示量1mg/2m L)进行了加标回收测定,将针剂样品稀释至2.0μg·L-1,测定结果如表1所示。由结果可知,此方法可以应用于实际样品的测定。

摘要：在酸性介质中,高锰酸钾能氧化异丙肾上腺素产生化学发光,而甲醛能够显著增强该体系的发光强度。据此建立简单快速测定异丙肾上腺素的流动注射化学发光法,并且对试验条件进行优化。在最优条件下,异丙肾上腺素在0.1～10.0μg·L-1范围内与发光强度呈良好的线性关系,检测限是0.02μg·L-1。对2.0μg·L-1的异丙肾上腺素标准溶液平行测定11次,平行测得值的RSD为2.7%。将本法用于针剂中甲异丙肾上腺素的测定,结果令人满意。

关键词：异丙肾上腺素,流动注射,化学发光,高锰酸钾

参考文献

[1]田兆红.高效液相色谱法测定盐酸异丙肾上腺素注射液的含量[J].中国药业,2009,18(6):33-34.

[2]J.A.Clements,K.Hasson,G.Smith.Determination of isoprenaline by ion-pair high-pressure liquid chromatography[J].Journal of Chromatography A,1980,189(2):272-275.

[3]乔善宝.荧光光度法直接测定盐酸异丙肾上腺素的含量[J].光谱实验室,2005,22(4):737-739.

[4]Nagaraja P,Vasantha R A Sunitha K R.A sensitive and selective spec-trophotometric estimation of catechol derivatives in pharmaceutical prep-arations[J].Talanta,2001,55(6):1039-1046.

[5]李霞,马心英.聚谷氨酸修饰电极测定盐酸异丙肾上腺素[J].化学研究与应用,2009,21(8):1195-1198.

[6]Viviane G.Bonifácio,Luiz H.Marcolino Jr.,Marcos F.S.Teixeira,Orlando Fatibello-Filho.Voltammetric determination of isoprenaline in pharmaceutical preparations using a copper(II)hexacyanoferrate(III)modified carbon paste electrode[J].2004,78(1):55-59.