HBsAg检测

HBsAg检测（共8篇）

HBsAg检测 篇1

摘要：目的 通过参加卫计委临检中心室间质量评价,发现问题,总结经验,提高实验结果的可靠性和准确性。方法 按照卫计委临床检验中心的要求,对其发放的采供血机构血液检验样本进行检测,对HBs Ag回报的室间质评结果进行分析,并用S/CO值与全国的S/CO均值进行比对分析。结果 参加卫计委临检中心室间质评工作多年来,每年均取得各个项目满分的好成绩,传染性指标的S/CO值与全国均值接近。结论 参加室间质量评价,可不断提高实验室的检测水平,保证输血安全。

关键词：HBsAg,室间质评,结果分析

能力验证,也就是我们通常所说的室间质评,其定义为多个标本周期性地发送到实验室进行分析和(或)鉴定,将每一个实验室的结果与同组的其他实验室的结果或指定值进行比较,并将比较的结果报告给参与的实验室[1]。通过实验室间的比对判定实验室的校准、检测能力以及监控其持续能力。我国血站系统开展输血前传染病指标室间评价活动已多年[2],通过与其他实验室室间质评对比,了解本实验室的实际检测能力,找出平时不易被发现的误差,对提高实验室工作人员的业务水平、工作责任感,提高检测质量,确保用血安全有着重要作用。我站一直参加卫计委、四川省临检中心室间质量评价,本研究就对我站参加卫计委临检中心的HBs Ag项目室间质量评价进行总结分析,现报道如下。

1 资料和方法

1.1 参评情况

参加卫计委临检中心采供血机构血液检验传染性指标室间质量评价,每年评价3次,每次5个标本,传染性指标包括HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗体,均用不同厂家试剂与常规标本一起检测。

1.2 试剂

HBs Ag试剂由北京万泰、BIO生物药业有限公司提供;均经中国药品生物制品检定所批检合格,在有效期内使用。

1.3 质控血清

HBs Ag 0.2 IU/ml(北京万泰)、HBs Ag 0.1 IU/ml(BIO),北京康彻斯坦公司提供,在有效期内使用。

1.4 仪器设备

AT-plus 2全自动样品处理系统、Xantus全自动加样仪、FAME全自动酶免分析系统。

1.5 方法

在室间质评活动中,HBs Ag采用ELISA法,在规定的时间内随常规标本一起进行检测,上报结果,室间质评成绩返回后,实验室对参评结果进行汇总、分析,在每次回报的质评结果中,均有质评小结,每种试剂有全国的S/CO均值,标准差(SD),通过对预期阳性标本的S/CO值与全国均值进行比对分析,计算出SI值,SI小于等于2表示可接受。

2 结果

对2015年HBs Ag检测的室间质评结果进行比对分析,数据见表1。

注:SI=∣我室S/CO值-全国S/CO均值∣/SD,SI小于等于2表示可接受

3 讨论

2015年我站传染性指标室间质评得分为满分,评价结果“合格”,但是不能仅满足于这个成绩。这只是定性的结果,在卫计委临检中心室间质评总结大会上多次强调,需根据每种试剂的S/CO值进行比对,找出细小的差距。我室坚持按照总结大会中的要求进行分析汇总,发现差距,及时查找原因,从表1中的检测结果中可以看出,我室传染性指标的S/CO值与全国均值接近,SI值全部在可接受的范围内,经过对每个项目、每个标本分析总结,可从以下方面分析原因:(1)如实验室S/CO值与全国S/CO均值相比,每个项目均偏低,须认真查找原因,有可能是系统误差,如实验室环境温度过低、试剂平衡时间不够等;(2)有时强阳性的S/CO值与全国S/CO均值相差太大,标准差也很大,是因为有的酶标仪能读到3.0,有的却能读到4.0,造成标准差也增大大,计算出来的SI值仍能接受;(3)定性结果虽然正确,但个别标本SI值大于2,需仔细查找原因,用原标本再检测一次,查看是否有少加、漏加;(4)定性结果与预期结果不符,需引起特别重视,查看是否为弱阳性漏检还是由于工作责任心不够;(5)预期与实际的阴性标本检测结果的S/CO值非常接近,这样分析没有多少实际意义,可以只看定性结果,但是对阳性标本进行这样的分析非常有意义。

通过室间质评项目的实施,同时结合人员培训教育以及实验室之间的交流协作活动,可以显著提高实验室的检测质量[3]。

参考文献

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HBsAg检测 篇2

[文献标识码]A

[文章编号]1005-0019(2009)7-0016-01

乙型肝炎在我国发病率很高,是当前严重危害人们身体健康的传染病之一,HBsAg是乙肝感染指标之一。因此,HBsAg的检测往往是健康体检的项目之一。近期,我县实验中学组织全校教职工来我院进行健康查体,所查项目包括B超、心电图、胸透、肝功、血脂、HBsAg等。在HBsAg的检测过程中,出现了HBsAg假阳性一例。根据笔者多年的临床经验,对出现HBsAg假阳性的原因及预防措施谈谈自己的看法。

1材料与方法

1.1一般资料:健康体检者,男,31岁,血压、心率、心电图、B超、肝功、血、尿常规及其他体格检查均未见异常,无既往病史。

1.2标本:体检者清晨空腹按要求采血,按常规操作分离血清,无溶血、乳糜及黄疸等。

1.3方法:用ELISA方法检测,试剂为潍坊3V公司生产(批号20090301),洗板机(ZMX988B全自动洗板机)、酶标仪(WELLSCANMK3)均处于正常工作状态。

2结果

2.1按说明书要求操作,阴性、阳性对照、空白、质控均在标准范围内,此体检者HBsAg结果显示阳性。我们长期工作以养成习惯,所有ELISA检测HBsAg阳性结果均用胶乳法(广州万孚生物技术有限公司生产,批号W0390321S)复查,此体检者复查结果显示为阴性,前后结果不一致。其余各样本前后结果一致。

2.2由于受条件限制,建议体检者到上级医院复查确诊,确诊结果为阴性(检测方法不详)。

3討论

ELISA方法检测HBsAg出现假阳性的样本时有报道,原因也各不相同,从文献上看,引起假阳性的原因大体上分为标本、试剂、操作等原因[1]。

3.1标本原因,可分为外源性和内源性。

3.1.1内源性:血清中的补体可与IgG的Fc段结合;血浆中的纤维蛋白原和酶结合物一起易粘附到ELISA检测杯上不易洗掉;血清中有类风湿因子(RF),RF可与抗体结合等都易造成假阳性。

3.1.2外源性:血清分离不彻底,有血细胞加入反应杯;标本污染、溶血等。

3.2试剂:试剂从冰箱取出时间短;不同批号、不同包装试剂混用等。

3.3操作:工作人员责任心不强,粗心大意,加错样本;加样不准;洗版不彻底等。

3.4为了对患者、对科室、对自己负责,我们应采取下列措施尽量避免假阳性结果的产生。

3.4.1标本内在因素不易避免,出现阳性结果时应采用不同厂家、不同批号的试剂进行复查。

3.4.2试剂盒一定要平衡至室温后使用。不同批号、不同包装的试剂最好不要混用。

3.4.3溶血标本、污染标本不能用,应重新采样。

3.4.4尽量缩短手工操作时间,快速、准确完成加样、加试剂。

3.4.5有报道,标本应放置10小时以上再检测较好[2]。

HBsAg检测 篇3

关键词：金标记免疫层析法,酶联免疫法,HBsAg,结果比较

乙型病毒性肝炎是目前已确认的病毒性肝炎中对人体健康危害最为严重的一种肝炎。1965年Biumberg等首次发现乙型肝炎病毒 (HBV) 的表面抗原 (HBsAg) 。HBV主要经过血液、性接触、日常生活接触和母-婴垂直传播。HBsAg是HBV感染的主要标志, 目前实验室常用的检测方法有酶联免疫法、金标记免疫层析法和化学发光法[1]。本文将我院临床随机标本1256份用酶联免疫法和金标记免疫层析法检测的结果进行比较, 以观察两种方法检测结果是否一致。

1 材料与方法

1.1 研究对象

标本为我院门诊及住院患者随机样本1 256份, 均为静脉采血, 37℃温浴30 min, 离心机分离血清, 取血清进行测定。

1.2 主要仪器和试剂

酶标仪 (深圳雷杜生命科学股份有限公司, 型号RT-2100C) 。酶联免疫法试剂 (上海科华生物技术有限公司, 国药准字S10910114, 生产批号20080828) 。胶体金法试剂 (艾康生物技术有限公司, 国药准字S20000059, 生产批号200812446) 。

1.3 分析

用酶联免疫法和金标记免疫层析法分别对1 256份标本进行检测, 具体操作按SOP文件执行。

1.4 统计学方法

方法间结果比较用配对四格表资料的χ2检验, P<0.05为有显著性差异。

2 结果见表1。

χ2=0.25<χ20.05, 1=3.84, P>0.05, 故不认为两种方法对标本HBsAg检测结果有统计学差异。

3 讨论

3.1 血液中的HBsAg是临床检查中的常规项目, 实验室

对其检测结果的准确回报对于临床医生的诊断非常重要。目前一般实验室用于定性测定的方法有金标记免疫层析法与酶联免疫法。经过本次调查, 两种方法结果经统计学处理, 没有明显差异, 均能良好服务于临床。

3.2 酶联免疫法是目前应用最广泛的免疫测定技术, 用

于各种抗原抗体的定性和定量测定, 具有灵敏度高、特异性强、快速简便、稳定性好、易于自动化操作等优点。目前规定, 临床标本的检测不能仅根据目测判断, 必须用仪器测定后报告[1], 需要酶标仪、洗板机等特殊设备, 实验成本相对较高, 适用于大中实验室。

3.3 金标记免疫层析法试纸条生产技术已成熟, 其灵敏

度在15 min时可以检测出5 ng/ml HBsAg, 30 min时可以检测出1 ng/ml HBsAg, 已接近酶联免疫法。此法特异性强、快速简便、重复性好、无需特殊仪器设备、实验成本相对较低, 更适宜中小实验室。

参考文献

HBsAg检测 篇4

关键词：低浓度,乙肝病毒表面抗原,化学发光磁微粒子免疫分析法,酶联免疫吸附法

我国是乙肝病毒性肝炎的高发区, 约有超过10%乙肝病毒携带者。而乙肝表面抗原 (Hbs Ag) 是乙肝病毒感染 (HBV) 检测中最重要的依据。长期以来, 全国各个医院的检验科均开展了乙肝的检测。酶联免疫吸附法 (ELISA) 和化学发光磁微粒子免疫分析法 (CMIA) 是比较常用的检测方法。但是由于检测方法的敏感度和特异性的差别, 导致在试验中经常出现对Hbs Ag低浓度标本检测结果各异。为此, 该研究使用了ELISA和CMIA两种检测方法对整群选取2012年4月—2014年7月期间236例Hbs Ag低浓度阳性标本和100例阴性标本做了比较和分析, 并探讨其临床价值。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

整群选取236例低浓度阳性标本均来自该院2012年4月—2014年7月门诊与住院患者。其中男性91例, 女性45例, 年龄15~86岁 (36.47±6.2) 。100例阴性标本是同期的门诊与住院患者, 其中男性64例, 女性36例, 年龄16~72岁 (χ2=44.48±15.2) 。

1.2 仪器与试剂

ELISA采用的是上海科华生物工程股份有限公司生产的试剂, CMIA法使用的是郑州安图生物工程有限公司生产的化学发光磁微粒子A2000仪器及其配套试剂, TRFIA法使用的是苏州新波生物技术有限公司生产SYM—BIO时间分辨荧光分析仪及其配套试剂。

1.3 首先使用TRFIA法对236例标本Hbs Ag进行浓度测定

经过检测, 236例标本的Hbs Ag浓度确定为0.5~1.0 ng/m L。再对100例标本检测浓度确定为0.5 ng/m L以下。根据TRFIA试剂说明书Hbs Ag检测浓度判定>0.5 ng/m L为阳性, <0.5 ng/m L为阴性。然后使用ELISA法和CMIA法对236例低浓度标本和100例阴性标本进行检测。按照试剂有关说明书, 《ELISA法S/CO值》1.0为阳性, S/CO值﹤1.0为阴性。《CMIA法检测值》0.15 ng/m L为阳性, ﹤0.15 ng/m L阴性。两者结果不一致的标本, 最后使用TR-FIA法进行复检。

1.4 统计方法

数据使用SPSS11.5软件进行统计学分析, 计数资料进行χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 在此次实验中, 使用ELISA法和CMIA法同时对236例标本和100例阴性标本进行检测

ELISA法检测出阳性标本为195例, 阳性率为82.6%。CMIA法检测出阳性标本为232例, 阳性率为98.3%。差异有统计学意义 (χ2=33.62, P<0.05) 。ELISA法敏感度为84.1%, CMIA法敏感度为98.7%。其差异具有统计学意义 (χ2=30.21, P<0.05) ELISA法特异性为95%, CMIA特异性为97%。其差异无统计学意义 (χ2=0.8353, P>0.05) 。正因为两种检测方法的敏感性的差距, 导致了结果的显著差异, 见表1、表2。

3 讨论

该研究中, 首先使用TRFIA法作为标准的检测对照方法, 236例Hbs Ag阳性标本浓度和100例Hbs Ag阴性标本浓度是使用TRFIA方法检测的。TRFIA法是以镧系元素为示踪物, 标记抗原或抗体, 用时间分辨技术测量的方法。具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点, 非常适合对标本的超微量测定。根据有关资料, TRFIA法对Hbs Ag灵敏度可达到0.05 ng/m L以下[1], 保障了结果的可靠性、准确性和精确性。236例Hbs Ag标本经TRFIA确定浓度为0.5~1.0 ng/m L。在使用两种方法做检测对比实验中, CMIA法阳性率明显高于ELISA法 (98.3%/82.3%) 。CMTA法敏感度与特异性也高于ELISA法 (98.7%/84.1%) (97%/95%) 。而ELISA法在该试验中漏检率较高, 其漏检率为17% (41/236) 。因此, ELISA法与CMTA法在检测Hbs Ag低浓度标本中, 具有明显的差异。

乙肝表面抗原 (Hbs Ag) 是医院各实验室最常见的检测项目, 其阳性是人体感染HBV最重要的标志。它具有免疫原性, 可刺激人体产生相应的抗体[2]。而对一些Hbs Ag低浓度的标本使用不同的方法学检测, 结果并不一致, 导致临床诊断无所适从。而近年有关报道认为, 部分急性或慢性乙肝患者体内的Hbs Ag自然转阴和经过抗病毒治疗后转阴后, 仍然在其血清中检测出低浓度的Hbs Ag。成为长期、稳定的低水平病毒感染者, 即HBV隐匿型感染[3]。因此, 低浓度Hbs Ag的检出对于临床诊断治疗和流行病学的研究都是重要的依据。

现在, 各实验室多数使用酶联免疫吸附法 (ELISA) 进行检测。而ELISA具有操作简便、成本低廉、可靠性较高、适合批量检测等优点, 其敏感性可达0.7 ng/m L。但是由于方法学的局限性, 容易受外界因素的影响。主要影响因素是: (1) 胆红素较高、自身免疫性疾病、类风湿性因子等内源性因素。 (2) 标本所用的抗凝剂和试剂包被抗体的质量等。 (3) 变异株所产生的干扰因素。 (4) 由于Hbs Ag含量过高, 易产生后带现象。 (5) 在操作中, 由于人为因素使温育时间不够、加样不当等原因而影响结果的准确性。根据有关资料, 使用ELISA法检测低浓度Hbs Ag, 容易产生钩状效应和灵敏度低下而导致假阴性[4]。在该试验中, ELISA法存在着一定的漏检率, 符合以上观点。

随着医学检验技术的发展, 近年来化学发光磁微粒子免疫分析法 (CMIA) 已经开始在实验室广泛使用, 其特点也已经得到了印证。与传统的ELISA法相比较, 它具有操作简便快速、高灵敏度、强特异性、试剂批间差异较小、稳定等特点。其线性范围高出ELISA法3~4个数量级, 是免疫分析技术的发展方向[5]。其原理是使用化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合, 用于检测微量的抗原或抗体。根据有关资料, 化学发光免疫分析技术检测Hbs Ag的灵敏度可达到0.064 ng/m L[6]。从方法学的角度来看, CMIA法对于监测HBV感染进程与复制状态以及对于抗病毒治疗治疗效果的评价都有重要的意义[7]。

在该试验中, CMIA法在Hbs Ag低值标本检测中敏感性与特异性均高于ELISA法。因此在日常的工作中, 检测Hbs Ag标本尤其是低值标本中, CMIA法优于ELISA法。另外, CMIA法由于是定量检测, 因此克服了使用定性方法对灰区结果的判断困难。对灰区结果能够做出明确客观的评价和判断[8]。HBs Ag定量检测不仅对于判断感染HBV活跃度, 有着重要的意义, 也可预测患者治疗过程中的的应答情况。进而指导患者的个体化治疗, 提高治疗效果。

建议各实验室如果有条件, 尽可能使用CMIA法替代ELISA法, 以保证检测结果的准确性。

参考文献

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[4]何敏.罗福东化学发光免疫分析与酶联免疫吸附试验检测血清HBs Ag及HBs Ab的结果比较[J].广东医学, 2014, 35 (12) :1900-1901.

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[6]张欣欣.Stephen A.Locarnini Hbs Ag定量检测在慢性乙型肝炎抗病毒治疗监测中的意义[J].中华检验医学杂志, 2010, 33 (1) :82-83.

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HBsAg检测 篇5

1 资料与方法

1.1 材料

1.1.1 检测HBsAg的GICA试条

4种品牌、8个批号, 分别称为试条1 (批号P006和6926, 规格5.5 mm) ;试条2 (批号980908, 规格3.3mm) ;试条3 (批号9811059和98120711, 规格3.3 mm) ;试条4 (批号8092801、8122901和9022001, 规格3.3 mm) 。

1.1.2测定HBsAg的EIA试剂盒

共4种, 分别为上海实业科华生物技术有限公司, 厦门新创科技有限公司, 上海荣盛生物技术有限公司和深圳华元医药生物工程公司产品。

1.1.3 HBsAg定值质控样品

购于北京全国临床检验中心 (批号9901, 分别为1、2、5 ng/ml) 。

1.1.4 酶标仪

美国Bio-Rad450型。

1.1.5 标本来源

采集无偿献血者和来本院就诊患者的末梢全血1190份、血清968份。

1.2 方法

1.2.1 敏感性试验

对定值为1 ng、2 ng、5 ng/ml的3种HBsAg质控样品和2158份受检全血或血清标本, 采用4种GICA试条和4种酶免疫 (EIA) 试剂盒同时测定。GICA法测定血清HBsAg是将各试条的加样区直接浸入血清中30s, 取出后平放静置。全血HBsAg测定则采用受检者末梢全血3滴直接滴加于每一试条加样区, 待渗透约1min后, 插入含0.3 ml生理盐水的小试管中静置。两种测定均在30min内间断观察并记录A值。定值样品测定与血清HBsAg测定相同。

1.2.2 特异性试验

收集80份经EIA测定HBsAg为阴性的血清标本, 分别从4种GICA试条中各任意抽取20条进行复检。另收集6份EIA初始测定HBsAg出现前带反应 (实际为抗原过量而呈弱阳性, A值0.216～0.328) , 但GICA测定为强阳性的血清标本, 经稀释后再用EIA复检, 以此2种试验观察GICA测定HBsAg的特异性。

1.2.3 GICA试条的渗透速度和均一性试验

从每一种品牌的不同批号中任意抽取10条GICA试条, 分别浸入同一份混合血清中, 以试条加样区接触血清开始计时, 30s后取出, 平放静置观察, 待血清渗透至对照线出现肉眼可见颜色时, 记录时间, 并以各自10条的平均时间作为渗透速度的指标。均一性观察是在测定受检标本时, 连带观察100条每一品牌或不同批号GICA试条, 以标本在滤膜上渗透时出现明显的未浸湿的斑块, 或浸液后15min以上不能到达对照线的试条判为不均一, 计算各自百分率作为试条的均一性指标。

1.2.4 其他相关性试验与观察

①对GICA试条用于全血与血清标本测定HBsAg的敏感性做比较试验;②观察试条保存条件对测定结果的影响;③对GICA和EIA测定HBsAg时, 每份所需试剂成本和检测时间分别进行测算并比较。

2 结果

2.1 采用4种GICA试条和4种EIA试剂盒, 对3种HBsAg定值的质控品和2158份受检血标本测定HBsAg的结果见表1, 2。

注:*为定性试验结果阴性, 其余为阳性

注:血清HBsAg浓度约为51 200 ng/ml, 而GICA测定都显强阳性

2.2 EIA法测定80份HBsAg阴性的血清标本, 经4种GICA复检结果均为阴性。6份EIA初始测定HBsAg出现前带反应呈弱阳性的血清标本 (A值0.216～0.382) , 经稀释后重测均为强阳性 (A值1.169～>2.500) , 其中1份作倍比稀释最高至1∶25 600, 其A值为0.240, 与定值样品比较, 推算该份。

2.3 GICA试条的渗透速度和均一性试验结果见表3。

2.4 用GICA试条4测定1 139份献血员的全血HBsAg阴性标本, 采血后收集血清经EIA全部复检, 检出的47份阳性血清, 再用同批号GICA试条重新测定, 检出阳性6份。另外试验观察到密封包装开封后的试条在4℃存放时, 由于受潮, 在使用此种试条检测时, 对照线和阳性反应色带均变弱, 甚至不出现, 使测定敏感度下降或失效。

2.5 经测算GICA试条每份成本费为4.0～6.2元, 测定用时间5～30min;每份EIA试剂的成本费1.0～1.2元, 测定所需时间1.5～2h。

3 讨论

GICA检测HBsAg具有简便、快速、可单份操作的优点[3], 能满足就诊者急诊检验的需要, 尤其为无偿献血者现场采血前检测HB-sAg提供了便利条件。因此, 许多实验室采用GICA法测定HBsAg的兴趣与需求不断增加。目前, 国内一些试剂厂商纷纷推出或代理国内外商品化的GICA试条, 但各生产厂家制备试条的固相微孔膜、包被方法和金标记用抗体以及工艺技术上存在差异, 使HBsAg的测定结果受到一定影响。就此, 我们选用国内代理商的4种GICA先后8个批号试条对测定HBsAg的性能、结果等技术性参数作了比较及评价, 为实验室的选用提供参考。

本研究选择了3种低定值的HBsAg质控样品和2 158份待检测HBsAg的全血或血清标本, 先后采用4种GICA试条和4种EIA试剂盒对每份样本经2种方法同时测定并比较。GICA对HBsAg的最小检出量是1～5 ng/ml, EIA的最小检出量均≤1 ng/ml (表2) ;GICA对HBsAg的检出率为EIA的95.6～98.7%, 平均为96.2% (表2) 。结果表明GICA法的敏感性低于EIA法, 与文献报道大致相同[3]。与EIA比较, GICA检测HBsAg一般不出现假阳性;对抗原量过大的标本未发现前带反应。表明GICA检测HBsAg具有高特异性。

GICA检测HBsAg虽然适用于单份标本测定和急诊检验, 对现场采血前献血员的筛选有其实用价值, 但由于测定的敏感度低于EIA法, 加上其成本是EIA法的4～5倍, 使GICA的应用将受到一定的限制。由于其灵敏度 (≥1ng/ml) 低于EIA (≤1ng/ml) 也可部分检测[4], 存在一定漏检。为了确保临床用血的安全, 经GICA初筛测定为HBsAg阴性的供血, 仍需用EIA进行复检。如时间允许, 患者就诊和献血员筛选应首选EIA检测HBsAg, 可提高检出率, 并大大降低检测费用。

从4种GICA试条的渗透速度和发生不均匀的比率结果可以看出, 试条测定HBsAg的敏感性与两者存在一定的相关性。对于不同品牌或同一品牌不同批号试条的敏感性、渗透速度和微孔膜不均一性的差异, 可能与各厂家所用的材料和制备工艺技术有关。GICA测定全血与血清HBsAg的结果表明, 血清比全血的检出率要高, 必要时可选用血清测定。另外, 选用敏感性高, 渗透速度快, 微孔膜均一性好, 且密封、干燥保存的高质量试条, 可保证HBsAg检测结果的准确性。

通过上述分析, 为提高胶体金法的检出率, 减少漏检率, 首先应增强操作人员的责任心, 严格按照试剂说明书操作, 严格控制反应时间、反应条件, 在温度较低情况下, 可以适当延长反应时间等。在以后工作中, 如果能进一步研究漏检现象, 并且做好防范工作, 胶体金法可以在血液初筛方面有更广泛的应用。

参考文献

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HBsAg检测 篇6

1 材料与方法

1.1 研究对象

对36例初、复检都为阳性, 而一种金标法试纸检测均为阴性的标本进行分析。

1.2 试剂

HBs Ag金标试纸条, ELISA试剂, 均为厦门新创公司出品;HBs Ag系列定值血清, 购自卫生部临床检验中心。灵敏度分别为1 ng/ml和0.12 ng/ml。复检ELISA试剂为北京万泰药业有限公司生产, 灵敏度为0.12 ng/ml。

1.3 方法

HBs Ag金标法, 取指尖末梢血60μl滴于试纸条箭头下方的垫片上, 观察结果严格按说明书进行操作。ELISA法严

NAFLD往往与高脂血症、糖尿病、肥胖、高血压共同存在, NAFLD患者血脂和血糖常呈明显异常, 而酒精中毒引起的脂肪肝尽管也可引起血脂和血糖代谢异常, 但程度多较轻。然而本组资料AFLD组与NAFLD组相比, 血糖和血脂各项指标差异无统计学意义, 与Chen等[7]的研究结果不一致。其原因可能与新疆特殊的饮酒习惯有关, 饮酒时往往进食大量的高脂肪饮食, 从而引起AFLD患者伴发肥胖、高脂血症、糖尿病等。

[参考文献]

[1]李玉华, 姚华, 徐菲莉, 等.酒精性脂肪肝与非酒精性脂肪肝患者生化指

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[2]肖桂初, 黄维加, 刘键, 等.286例非酒精性脂肪肝患者血液生化指标和

格按说明书进行操作。经两次ELISA法初、复检检测后确认的阳性血液标本, 最后确系“金标法漏检”确认漏检的原因, 进行分析。

2 结果

对36例初、复检HBs Ag均为阳性病例。ELISA法检测出阳性36份, 阳性率为100%。金标试纸条检测出阳性34份, 阳性率为94.44%。再次用ELISA法检测均为阳性。如以ELISA法双结果为准, 金标法初筛HBs Ag总漏检率共2例, 漏检率为5.56%。同时金标法检测样本阳性反应时间, 与温度的影响等多方面因素影响, 有1例患者被检测出阳性。金标法HBs Ag总漏检率1例, 漏检率为2.78%, 外界因素导致漏检率同样为1例。

3 讨论

我国是乙肝病毒的高流行区, 约10%的人群为HBs Ag携带者, 广西则达到15%左右。金免疫层析试验的原理是在玻璃纤维素膜上预包被金标抗HBs Ag抗体 (Au2s Ab1) , 硝酸纤维素膜上预包被金标抗HBs Ag抗体 (s Ab2) 和羊抗鼠Ig G。检测时, 样品血清中HBs Ag可与胶体金2抗体结合形成复合物, 由于层析作用复合物沿纸条向前移动。如为阳性标本, 则与检测线预包被的抗体结合形成“Au2s Ab12HB-s Ag2s Ab2”夹心物而凝聚显色。全血金标试纸在试纸条上加过滤膜以阻止血细胞的渗透。金标法检测HBs Ag, 反应时间

肝纤维化指标的分析[J].实用医技杂志, 2006, 13 (13) :2211-2212.

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症程度的诊断价值[J].中国临床医学, 2005, 12 (1) :65-66.

较短且只需30μl末梢血, 不必做静脉血分离血清, 减少血液离心提取血清的过程。金标试纸法与ELISA法比较, 具有较高的符合率, 较好的特异性, 无假阳性现象, 且操作简便快速, 结果易于观察, 同时不受仪器设备及血样限制, 便于携带, 出现假阴性率为2.78%, 同时其他原因导致金标法存漏检率为2.78%, 现分析原因可能是: (1) 试剂的灵敏度。全血金标试剂的灵敏度为1 ng/ml, 而ELISA试剂的灵敏度可达0.5 ng/ml, 这可能是造成ELISA法检测为弱阳性的标本而金标法检测为阴性的原因。 (2) 操作人员未能按照试剂说明书要求的时间报告结果, 人为缩短了检测时间, 从而造成检测线不明显的弱阳性遗漏而误判。 (3) 实验人员操作不规范, 如加样过多或过少, 未及时将没用完的试纸条密封保存而导致潮解。 (4) 少数标本可能存在乙型肝炎病毒 (HBV) 变异或亚型而不易检出。 (5) 高温、干燥、风吹均能影响实验结果。现报告其他原因导致金标法存漏检率与金标法存漏检率相同。因此, HBs Ag快检的假阴性也可能由人为因素及环境因素造成[4], 如判断结果时间不够、反应不充分、气温低 (克服方法是冬天注意保温或延长反应时间) ;加血量不足或过多;过滤膜破损, 血液渗出过滤膜使检测线模糊, 导致判断失误;判断不仔细, 对那些隐约可见的阳性线误判为阴性;缺乏经验把强阳性结果 (只有1条阳性线, 无阴性线) 判为阴性等。因此, 工作人员应规范操作步骤, 避免人为因素造成的假阴性结果, 以减少初筛时的漏检, 减少血液浪费, 减少经济损失。从目前HBs Ag金标法试纸的灵敏度看, HBs Ag试纸只能作为初筛试剂, 初检和复检试剂采用ELISA法, 以防止HBs Ag漏检的发生, 保证检测结果的真实性, 避免输血与减少HB-s Ag携带者传播疾病的发生。

摘要：目的:早期发现健康人群乙型肝炎感染状况, 对疑似病例进行乙型肝炎病毒抗体检测, 为能够更好更快地检测HBsAg作出诊断。方法:金标法检测后ELISA法初、复检检测确认的阳性血液标本, 并确定金标法漏检病例。结果:对36例初、复检HBsAg都为阳性。金标试纸条检测出阳性34份, 漏检率为5.56%。而ELISA法检测出阳性36份, 阳性率为100%。结论:从HBsAg金标法试纸的灵敏度看, HBsAg试纸只能作为初筛试剂, 初检和复检试剂采用ELISA法, 以防止HBsAg漏检的发生, 保证检测结果的真实性, 避免输血与HBsAg携带者传播疾病的发生。

关键词：金标法,快速检测HBsAg,漏检分析,乙型肝炎病毒

参考文献

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HBsAg检测 篇7

1 材料与方法

1.1 试剂

Architect i1000 HBs Ag自动稀释检测试剂 (批号25540) , Architect i1000 HBs Ag手工稀释检测试剂 (批号25064) 。

1.2 仪器

雅培Architect i1000全自动化学发光分析仪。

1.3 方法

收集30例HBs Ag定量为30~250 IU/m L的阳性标本, 分为3个浓度组 (30~100 IU/m L、101~200 IU/m L、201~250 IU/m L) 分别以自动稀释模式1∶500倍、手工稀释模式血清∶生理盐水1∶500倍进行检测, 与原倍血清检测结果进行比较。

1.4 统计学方法

计量资料以表示, 采用方差分析, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

3个浓度组HBs Ag定量30~250 IU/m L的阳性标本自动稀释模式与原倍血清检测结果相比差异无统计学意义 (P>0.05) , 手工稀释模式与原倍血清测定结果差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表1。

注:手工稀释模式与原倍血清检测结果比较q值分别为2.55, 2.48和2.42, P均<0.05;自动稀释模式与原倍血清检验测结果比较q值分别为1.97, 2.04和1.12, P均>0.05。

3讨论

近年来, 随着化学发光免疫检测技术与试剂的快速发展, 使HBV抗原检测的敏感性得到提高[2], 化学发光定量测定HBs Ag以其快速、准确、自动化程度高、无放射性污染等优点受到越来越多实验室的认可。目前对HBs Ag化学发光法定量检测国际上普遍认可的有雅培公司的Architect HBs Ag检测试剂与罗氏公司的Elecsys HBs AgⅡ检测试剂[1], 雅培公司的检测试剂线性范围在0~250 IU/m L, 对超过250 IU/m L的标本要求进行稀释, 在推出自动稀释模式试剂以前, 实验室往往采用生理盐水或蒸馏水对标本进行手工稀释[3], 操作复杂且容易产生误差。本文通过对自动稀释模式与手工稀释模式下HBs Ag定量检测的对比分析, 认为自动稀释模式不仅方便实验室操作且误差小, 应该取代手工稀释模式。

摘要：目的 探讨化学发光法定量检测乙肝表面抗原 (HBsAg) 自动稀释模式的可行性。方法 将30例HBsAg定量为30250 IU/mL的阳性标本分为3个浓度组 (30100 IU/mL、101200 IU/mL、201250 IU/mL) 分别以自动稀释模式1∶500倍、手工稀释模式1∶500倍进行检测, 比较两种模式与原倍血清测定结果。结果 3个浓度组的阳性标本自动稀释模式与原倍血清测定结果差异无统计学意义 (P>0.05) , 3个浓度组手工稀释模式与原倍血清测定结果差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论 自动稀释模式操作简便, 试验误差小, 应该替代手工稀释模式。

关键词：HBsAg,化学发光法,自动稀释模式,手工稀释模式

参考文献

[1]朱东, 陈俊梅, 魏红, 等.自动稀释模式下乙型肝炎表面抗原定量检测的临床应用及分析[J].中华检验医学杂志, 2013, 36 (2) :180-182.

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HBsAg检测 篇8

1 对象与方法

1.1 对象

以德清县20所分布于四大乡镇的中小学为调查对象, 包括德清县所有8所高中学校、部分初中学校6所、部分小学6所。共检测中小学生28 532名, 其中小学生8 195名, 初中生7 307名, 高中生13 030名;男生14 190名, 女生14 342名;平均年龄为 (14.23±3.42) 岁。武康镇学校学生16 290名, 平均年龄为 (13.95±3.55) 岁;乾元镇学校学生4 352名, 平均年龄为 (13.58±3.14) 岁;新市镇学校学生5 943名, 平均年龄为 (14.09±3.24) 岁;钟管镇学校学生1 947名, 平均年龄为 (17.21±0.95) 岁。

1.2 方法

采集学生手臂静脉血3 mL, 分离血清, 采用金标法检测HBsAg, 试剂为艾康生物技术有限公司生产的金标法试剂盒, 操作步骤严格按说明书进行。

1.3 统计分析

采用SPSS 13.0软件进行统计分析。不同年龄、不同性别间学生HBsAg阳性率的比较采用χ2检验、趋势χ2检验。

2 结果

2.1 不同年龄、性别学生 HBsAg检出情况 28 532名学生中共检出HBsAg阳性 311人, 阳性率为1.1%。由表1可见, 男生、女生、全体学生HBsAg阳性率均随年龄增大而增加, 经趋势χ2检验, 差异有统计学意义 (χundefined=5.983, 5.763, 8.270, P值均<0.01) 。男、女生HBsAg阳性率分别为1.2%和1.0%, 差异无统计学意义 (χ2=3.438, P=0.064) 。见表1。

2.2 不同地区学校学生 HBsAg检出情况 由表2可见, 武康镇、乾元镇、新市镇、钟管镇学生HBsAg阳性率分别为1.0%, 0.7%, 1.5%, 1.5%, 新市镇HBsAg阳性率显著高于武康镇 (P<0.01) 和乾元镇 (P<0.01) , 钟管镇显著高于乾元镇 (P<0.05) 。

注: () 内数字为阳性率/%。

注:与武康镇比较, *P<0.05, **P<0.01; 与乾元镇比较, #P<0.05, ##P<0.01。

3 讨论

乙肝是由乙型肝炎病毒 (HBV) 引起的, 严重危害人群健康的传染病。我国是HBV感染高发区, 乙肝报告发病数多年来居法定报告传染病前列, 肝炎尤其是乙肝的流行严重危害人民健康, 对社会经济发展具有不容忽视的制约作用[2], 为我国严重的公共卫生问题之一。

此次检测的中小学生年龄从6岁到19岁, 乙型肝炎表面抗原 (HBsAg) 总阳性率为1.1%, 低于全国阳性率 (约10%) 的平均水平[3], 也远低于文献报道的学生感染水平[4,5,6], 表明德清县在乙型病毒性肝炎的综合防治方面取得了积极的效果。

德清县中小学生HBsAg阳性率随年龄增加而显著增高, 可能原因为乙肝疫苗列入免疫规划早期部分、学生家长对乙肝疫苗认识不足, 致使孩子未能接受乙肝疫苗注射;或在接受基础免疫后随着年龄的增长抗体水平逐渐下降, 而又未能接种乙肝疫苗加强针。故应继续检测乙肝两对半的其他指标, 尤其是保护性抗体的检测。对于无保护性抗体的学生, 应进行乙肝疫苗的加强免疫。

德清县新市镇HBsAg阳性率高于县城中心镇 (武康镇) 和其他乡镇, 可能与新市镇离县城中心较远, 相对预防知识、卫生意识和防范意识较县城中心差;也可能与社会宣传不到位, 怀孕时母亲不能有针对性地采取母婴阻断措施等有关。故更应加强该乡镇乙肝防治措施, 加强乙肝疫苗免疫。

为加强乙型肝炎的防治, 可督促教育部门加强对学生、家长进行预防乙肝卫生知识的宣传教育, 提高学生的自我防护意识;政府应制定相关政策, 卫生、教育系统宜密切配合, 在入托、入学的所有新生体检时, 应加强乙肝“三抗”的免费检测, 对“三抗”指标全部阴性的学生应进行乙肝疫苗的强化接种, 以提高抗-HBs阳性率和抗体滴度, 降低乙型肝炎感染率。

关键词：肝炎, 乙型,患病率,对比研究,学生

参考文献

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