手工显微镜计数

手工显微镜计数（精选7篇）

手工显微镜计数 篇1

我们对125份标本同时做流式尿分析仪、尿沉渣和显微镜分析,以了解3种计数方法对泌尿道细菌感染的诊断价值。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

IQ200型全自动尿液沉渣分析仪(美国)、UF-1000I流式尿分析仪(日本Sysmex)及手工显微镜系统(日本OLYMPAS光学显微镜),所用试剂及试纸条均为原装。UF-1000I型尿中有型成分分析仪中配置有与UFII专用质控品(2种浓度级别);IQ200型质控品为美国原装。其中,校准物批号为CA04122HI225000000,聚焦物批号为F00425H1104000000,用质控物对仪器进行质控,以保证其工作质量。

1.2 标本来源

随机收集我院住院患者晨尿125例样本。其中,男75例,女50例;年龄8~67岁,平均(31.2±22.5)岁;其中100例经详细询问病史,血、尿生化和免疫学检查及肾活检而确诊为肾小球疾病,另25例根据病史及有关影像学检查,如静脉肾盂造影、超声波检查、CT、腹部平片、膀胱镜及病理活检等分别确诊为肾输尿管结石、急性膀胱炎、急性肾盂肾炎、肾结核、前列腺癌等。

1.3 检测方法

用一次性洁净的塑料杯收集我院住院患者清洁中段晨尿20m L左右。将尿液混匀,分为3管。第1管用于IQ200尿液沉渣分析;第2管用于UF-1000I流式尿分析;第3管用于手工显微镜计数分析。3种检测方法都按各自的说明书或规程进行操作。对后两种方法测定细菌数超过空白上限均值的标本,均行尿沉渣涂片、革兰染色、镜检加以确认。

1.4 判断标准

IQ200尿沉渣分析过程及结果参照《全国临床检验操作规程》,红细胞0~3个/HP,白细胞0~5个/HP,管型0~1个/LP,超过此范围,视为阳性。UF-1000I结果评价标准参见文献[1]:红细胞:男性0~12个/μL,女性0~24个/μL,白细胞:男性0~12个/μL,女性0~26个/μL,超过此范围为阳性。手工显微镜计数结果以尿沉渣镜检结果为参照标准,手工显微镜计数阴性或UF-1000I阴性而尿沉渣镜检阳性为假阴性,手工显微镜计数或UF-1000I结果阳性而尿沉渣镜检阴性为假阳性。

1.5 统计分析

对于3种方法之间敏感性与特异性的比较采用卡方检验,P<0.05表示差异有统计学意义。所有数据的录入及统计分析均采用统计软件SPSS 15.0进行。

2 结果

三种方法检测细菌、RBC、WBC的检出率较一致,相比无显著性差异(P>0.05)。对RBC而言,检出率高低分别为IQ200>UF-1000I>手工显微镜;对白细胞而言,检出率高低分别为手工显微镜>UF-1000I>IQ200。具体情况见表1。

3 讨论

当前血尿是泌尿系统疾病的常见症状,明确出血部位和性质有助于疾病的诊治。其中,尿液分析是三大常规之一,分析的内容包括:外观及物理性状检查(尿量、颜色、浊度),干化学检查(化学物质的存在和量的变化),显微镜检查(尿沉渣),其中显微镜检查是鉴别尿中各种有形成分的金标准。但是,我们长期以来对尿沉渣检查重视不足,检查方法也不规范,对泌尿、循环、肝胆、内分泌等疾病的诊断及预后判断没有起到最大帮助[2]。很多患者及其家属目前尚不能接受该项检查。

UF-1000I运用流式细胞术及电阻抗原理,对尿液有形成分进行计数及分类,流式细胞仪分析比传统的尿沉渣分析方法在计数尿液中的有形成分方面精密度更好;且这一系统的免离心方式能使其具有高通量的自动化程度[3]。但是,该仪器不能消除草酸盐结、酵母菌、球菌、杆菌等对红细胞计数的影响;而且它对管型、精子等极高的假阳性率使得它只能作为尿液沉渣定量分析的过筛试验。全自动IQ200尿沉渣分析仪具有定量检测尿液中细菌数量的优点,在泌尿系统感染的诊断、治疗及疗效判断方面,较UF-1000I分析仪的定性检测又具有明显优势。据此,临床医师可判断感染的轻重,通过观察治疗前后细菌数量的改变,及时调整药物和治疗方案,从而达到最佳治疗效果。但因尿中有形成分复杂,形态大小不一,极易出现假阳性,故当存在干扰因素时,应进行显微镜复查,以提高尿沉渣检验质量。

从表1可见,3种检测方法各有利弊,对于红细胞、白细胞、管型和细菌的检测均可能导致假阳性和假阴性的情况。(1)红细胞:UF-1000I检测为阴性而尿沉渣镜检阳性的标本,经沉渣镜检证实,红细胞为碎片或少量影红细胞,所产生的荧光强度弱,位于低荧光区,且测定碎片的体积比小红细胞小,产生假阴性;显微镜检测阴性而尿沉渣镜检阳性的标本是由于患者服用大量Vit C导致尿高浓度Vit C的干扰;UF-1000I检测为阳性而尿沉渣镜检阴性的标本中有的经显微镜证实为红细胞完全破碎的血尿,有的分别是由霉菌引起的假阳性,或由尿中结晶和大量细菌引起[4]。沉渣分析仪能检测血红蛋白,是显微镜检查及UF-1000I所不能确定的,故沉渣分析仪检测弥补了UF-1000I及显微镜检测的不足。(2)白细胞:UF-1000I为阳性而尿沉渣镜检阴性的标本由尿p H值>8.0造成白细胞破碎,尿沉渣镜检检测不出,或由标本中有小圆上皮细胞、大量细菌、细小的非晶型尿酸盐和大量破碎的上皮细胞引起。手工显微镜检测定阴性而尿沉渣镜检阳性的标本中,经沉渣、涂片、瑞氏染色、镜检证实为淋巴细胞[5];另外,因注射大量庆大霉素药物、尿胆红素>11.25 mg/d、尿白蛋白>500 mg/d均可引起尿沉渣检测阴性而尿沉渣镜检阳性的结果,因白细胞检测受尿蛋白、尿胆红素等因素的干扰,检测白细胞的尿试纸条的酯酶反应减低或受抑制,白细胞检测结果出现假阴性。而UF-1000I测定阳性而尿沉渣镜检阴性的结果原因尚未明了,有待今后继续研究。

摘要：目的:探讨IQ200尿沉渣分析仪与UF-1000I流式尿分析仪及手工显微镜计数3种检测方法的临床应用价值,并进行对比分析。方法:随机收集我院泌尿患者125例,同时用IQ200尿沉渣分析仪、UF-1000I流式尿分析仪及手工显微镜计数进行检查。结果:3种方法检测细菌、RBC、WBC的检出率较一致,相比无显著性差异(P>0.05);RBC的检出率高低分别为IQ200>UF-1000I>手工显微镜;WBC的检出率高低分别为手工显微镜>UF-1000I>IQ200。结论:在临床运用上应把3种方法的优缺点有机地结合起来,并综合考虑应用。

关键词：IQ200尿沉渣分析仪,UF-1000I流式尿分析仪,手工显微镜计数,红细胞,白细胞

参考文献

[1]张家红,郭丽洁.UF-1000I型全自动尿沉渣分析仪临床应用价值分析[J].实用医技杂志,2004,11(9):564-566.

[2]邱方城,秦维超.Sysmex UF-1000I全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞影响因素分析[J].临床检验杂志,2006,24(6):472.

[3]徐礼杭.UF-1000I沉渣仪与显微镜检测尿液有形成分的结果比较及干扰因素探讨[J].2009,8(22):132.

[4]杨新原,张群智.UF-1000I尿沉渣分析仪检测尿红细胞786例结果分析[J].2009,8(22):53.

[5]彭慧文,吴耀良.UF-1000I全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞假阳性结果分析[J].检验医学与临床,2009,6(21):84.

手工显微镜计数 篇2

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我科自2010年2月至2011年2月来院就诊体检人群198例为研究对象, 男103例, 女95例, 年龄21～79岁, 平均 (46.3±2.7) 岁, 其中正常标本113例, 脂血标本46例, 溶血标本39例, 所有人员均采用自动计数仪和显微镜下目测进行血小板计数。

1.2 检验仪器及方法

采用日本光电MEK-6318K血细胞分析仪及配套试剂、普通显微镜及严格按照《全国临床检验操作规程》配制的1%草酸铵稀释液。方法:取进行检查对象静脉血2mL注入ED-TA-K2真空抗凝管中保存, 轻轻混匀数次, 严格按照仪器操作规程;显微镜计数采用同一标本20μL, 加入含有0.38mL草酸铵稀释液的清洁塑料试管中混匀, 取悬液一滴充入计数池内, 静置10min计数并计算。所有标本均在18～22°C的室温内放置, 均在1h内计数完成, 每个样本计数2次, 取平均值记录。所用数据用SPSS 14.5软件进行统计分析。

1.3 统计学处理

采用SPSS 14.5软件进行统计分析, 各项数据用x-±s表示, 组间比对采用t检验, 以P<0.05有统计学意义。

2 结果

2 组计数结果进行比较, 正常标本计数无明显差异性 (P>0.05) , 脂血标本和溶血标本计数比较, 有明显的差异显著性 (P<0.05) 。

2 组检出率进行比较, 正常标本检出率无差异性 (P>0.05) , 脂血标本中血细胞分析仪检出率高于显微镜 (P<0.05) , 溶血标本中显微镜检出率高于血细胞分析仪检出, 有明显的差异显著性 (P<0.05) 。

3 讨论

本组资料中如表1所示, 脂血和溶血标本有明显的差异显著性 (P<0.05) , 说明电阻抗凝将红细胞碎片和脂血中与血小板大小相似的乳糜微粒等作为血小板计数, 导致血小板计数偏高。据临床资料报道, 由于红细胞碎片、乳糜微粒形成的干扰, 在电阻分析仪上使血小板计数高出已被甚至2倍。另外, 血细胞分析仪所处环境其他仪器设备的干扰和地线的连接与否也会影响血细胞分析仪计数结果。而且据表2所示, 在脂血标本中分析仪检测的检出率比显微镜高, 而在溶血标本中检出率比显微镜低, 说明血细胞仪自动计数虽检出迅速, 操作简单, 灵敏度高, 但在特定情况下, 特别是血小板计数<100×109/L的情况下, 不能只依赖计数仪, 应重视显微镜检测为临床正确诊断和治疗提供的可靠的指标。

影响血小板计数的原因: (1) 由于血小板体积小, 容易发生粘附、聚集和变性等, 在采血过程中由于穿刺不顺, 组织液混入等原因引起血小板发生聚集, 可导致计数结果偏低; (2) 一些血液病或肿瘤疾病病人由于长期服用化疗药物, 导致血小板计数出现假阳性增高或降低; (3) 抗凝剂的比例也会影响检测质量和结果。

综上所述, 血小板的显微镜与血细胞自动计数仪检测都是血小板计数的重要检测方法, 在临床进行检测中, 要重视两者存在的影响和优势, 对数据谨慎分析, 使血小板计数结果的可信度提高, 确保检测结果的准确性, 为临床治疗和用药提供有效的指导。

摘要：目的 探讨显微镜与血细胞计数仪在血小板计数中的作用及其影响。方法 对198例来院就诊体检人员进行血小板计数统计。结果 正常标本计数无明显差异性 (P>0.05) , 脂血标本和溶血标本计数比较, 有明显的差异显著性 (P<0.05) 。结论 显微镜与血细胞自动计数仪都是血小板计数的重要检测方法, 在检测中重视2种方法影响和优势, 对数据谨慎分析, 确保检测结果的可信度和准确性, 对临床治疗和用药提供有效的指导作用。

关键词：显微镜,血细胞计数仪,血小板计数,影响,作用

参考文献

[1]马玉芹.显微镜目测法与血细胞自动计数仪在血小板计数中的作用[J].吉林医学, 2009, 30 (5) :452.

手工显微镜计数 篇3

关键词：尿液分析仪,显微镜红细胞计数,尿液隐血实验

尿液隐血检验在临床检验科中较为常见,是目前临床作为尿血最为直接的诊断依据,可作为尿路结石、某些肾病以及泌尿系感染等疾病的诊断依据[1]。在传统的尿液隐血实验中,其检验方式为显微镜红细胞计数检验方式,这种检验方式虽然结果较为可靠比较耗时费力,随着近年来医学技术以及科技的不断进步,检验学的的检验方式也得到了较多改变,尿液分析仪就是一种新型医学检验手段,且越来越多地应用于尿液隐血实验中[2]。本文对2015年5月~2016年5月本院检验科收入的140例尿液标本进行了两种不同检验方式的尿液隐血检验,报道如下。

1. 资料与方法

1.1 一般资料

共选取140例于2015年5月~2016年5月本院检验科收入的尿液标本进行尿液隐血检验。所有提供尿液样本的受检人员共140名,其中男74例,女66例,年龄24~77岁,平均(51.22±5.48)岁。将尿液分析仪所得结果设为A组,将显微镜红细胞计数所得结果设为B组。

1.2 方法

使用尿液分析仪对尿液中的血红蛋白进行分析,得出检验结果为A组。操作步骤为:向试管中放置10m L尿液,浸入尿液试纸,浸润片刻,试纸取出放入尿液分析仪中,得出检验结果。

使用显微镜供细胞计数检验对尿液标本进行观察,进行红细胞数量计算,得出结果为B组。具体步骤为:取出10m L尿液样本,放入试管,离心5min,去除沉淀物,约为0.2m L,清澈液体吸出,剩余液体混匀后取20μL混悬液,放置于玻片上,使用显微镜,对扁平本红细胞进行观察记录。

1.3 观察指标

采用自制满意度调查量表对检验科工作人员进行调查,本自制量表参考自视觉模拟评分量表(VAS)[3,4],满分10分,分数越高表示满意度越好,将≥7分视为满意,将4~6分视为较满意,将≤3分视为不满意。对比本院检验科52名工作人员对两种检验方式满意度。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件,计数资料用百分比表示,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1检验结果对比

对两种检验方式的结果进行总结并统计,发现共同显示为阳性的标本共21例。若将B组所得结果视为标准,对A组结果进行分析,A组结果的假阳性率为16.00%,假阴性率为6.96%;若将A组结果为标准,则B组结果假阳性率为27.59%。假阴性率为3.60%。医院检验科工作人员对尿液分析仪满意度较之显微镜红细胞计数更高,差异较大,具有统计学意义(P<0.05)。具体数据见表1和表2。

2.2 满意度对比

医院检验科工作人员对尿液分析仪满意度较之显微镜红细胞计数更高,差异较大,具有统计学意义(P<0.05)。具体数据见表3。

3. 讨论

尿液隐血检验在临床中应用较广。尿液分析仪具有速度快、操作简便等优点,显微镜红细胞计数的特点为准确率高,但是重复性差,较为费时[5,6]。近年来尿液分析仪在临床尿液隐血实验中的应用越来越多,但若尿液中含有较多肌红蛋白等物质,则检验结果往往会存在偏差,检验结果呈现假阳性[7]。

本文对本院检验科收入的140例尿液标本进行了两种不同检验方式的尿液隐血检验,对比检验结果表明,两种检验方式中共同检验出为阳性的尿液样本共21例,若将B组所得结果视为标准,对A组结果进行分析,A组结果的假阳性率为16.00%,假阴性率为6.96%;若将A组结果为标准,则B组结果假阳性率为27.59%。假阴性率为3.60%。说明临床检验工作中,两种检验方式均存在一定偏差,将两者结合才能更好地对尿液隐血情况进行检验。医院检验科工作人员对尿液分析仪满意度较之显微镜红细胞计数更高,差异较大,具有统计学意义(P<0.05),说明在日常工作中检验科工作人员对尿液分析仪满意度更高。

综上所述,临床中将显微镜红细胞计数检验与尿液分析仪检验相结合,对尿液隐血检验中可取的更高的准确率,但临床工作人员对尿液分析仪操作满意度更高。

手工显微镜计数 篇4

1材料与方法

仪器:日本希森美康 (Sysmex) 公司生产的sysmex XS-800i全自动血细胞计数仪。仪器使用一个半导体激光器+核酸荧光染色+光检测器模块应用流式细胞计数法执行白细胞计数和五分类分析, 得出中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的百分比。

1.1 检测对象

2010年8月以来, 我院门诊和住院患者, 年龄5～61岁, 共156例

1.2 方法

取静脉血2 ml 注入含15%EDTA-2K抗凝剂的抗凝管中, 上下颠倒4～5次, 充分混匀, 用自动分析仪进行血常规检验和白细胞分类测定;同时, 用该血液推血膜片二张, 经瑞氏染色后进行显微镜白细胞分类计数, 共计数200个白细胞, 得出各类白细胞所占百分比, 与全自动血细胞之分类结果进行对比。

2结果

应用日本希森美康 (Sysmex) 公司生产的sysmex XS-800i全自动血细胞计数仪得出的分类结果与显微镜白细胞分类结果进行对比实验[2], 在156例对比结果中有151例除单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞有差异 (P<0.01) 外, 中性粒细胞和淋巴细胞两法的检测结果基本一致 (P>0.05) , 见表1, 有5例患者仪器出现不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示, 报警提示内容有:出现大量幼稚细胞;出现有核红细胞;核左移;核聚集;血小板聚集;异常淋巴细胞等。

有5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱, 在5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示, 报警提示内容有:出现大量幼稚细胞;出现有核红细胞;核左移;核聚集;血小板聚集;异常淋巴细胞等。5例患者经显微镜分类, 其中4例血涂片中有杆状核以前的幼稚细胞出现, 1例出现异常淋巴细胞。提示以后工作中, 当仪器出现异常图谱或提示有异常结果时, 一定要进行显微镜分类检验。5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示情况的见表2。

3讨论

全自动血细胞计数仪正以省时、省工、省力为特点被检验工作者全面采用, 分类结果绝大多数与显微镜分类方法的结果是相符合的。本文的156例对比分析的结果中有151例除单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞有差异 (P<0.01) 外, 中性粒细胞和淋巴细胞两法的检测结果基本一致 (P>0.05) 。在15例中, 单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞显微镜分类结果均比自动化仪器结果低, 而且差异显著 (P<0.01) , 原因可能因为显微镜检查是手工涂片, 细胞在血涂片中分布不均匀, 加之显微镜观察血涂片有一定的局限性、或区域性、或分类计数数量较少所致, 虽有一定的差异, 但对临床诊断影响意义不大。但也有少数结果仪器无法分类或部分分类, 虽有异常的图谱提示, 但不能满足临床要求。本文156例中有5例出现此种现象, 主要是血液中存在大量幼稚细胞和异常淋巴细胞, 仪器虽有提示但却无法识别造成的, 出现此类情况, 应该用显微镜分类加以结果, 在5例不分类的患者结果中4例显微镜分类均发现有白血病细胞, 经临床与骨髓检验诊断为白血病患者。提示在以后的工作中应引起重视, 如出现WBC总数明显增高或伴有Hb不同程度的减低时, 一定要认真分析并结合手工法进行显微镜分类, 才能保证检验结果的准确性和可靠性。

摘要：目的 对比血细胞计数仪和手工显微镜进行白细胞分类计数差异。方法 对156例血标本同时进行全自动血细胞计数仪五分类分析和经瑞氏染色后进行显微镜白细胞分类计数分析对比。结果 大多数结果 是一致的, 但也存在一些差异。结论 自动计数仪省时、省力, 存在盲区, 手工费时、繁琐, 结果 可靠, 两者相结合, 给临床诊断提供更大的帮助。

关键词：全自动血细胞计数仪,显微镜白细胞分类

参考文献

[1]全国临床检验操作规程.第三版:132-136.

手工显微镜计数 篇5

1 材料与方法

1.1仪器Sysmex XT-2000i血液细胞分析仪。

1.2试剂Sysmex XT-2000i配套试剂。

1.3标本来源收集我院厂矿企业上岗前体检人员Sysmex XT-2000i检测血小板结果异常样本96例, 均为EDTA-K2抗凝静脉血。

1.4检测方法对96例仪器检测结果异常样本按《全国临床检验操作规程》方法手工镜检, 与仪器计数进行比较, 并作涂片染色油镜检查观察血小板的形态及分布。

1.5统计方法配对t检验。

2 结果

2.1在96例血小板计数结果异常的标本中, 450>PLT>300的有42例, 涂片染色油镜检查血小板分布均匀, 形态正常。手工镜检计数后两组数据比较, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。

2.2在96例血小板计数结果异常的标本中, 50>PLT>100的有43例, 图片染色油镜检查血小板有聚集现象, 手工计数后两组数据比较, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。

2.3在11例PLT<50的标本中, 由于血小板数量太少, 涂片染色油镜检查血小板散在, 少量, 手工计数后两组数据比较, 差异具有统计学意义 (P<0.01) 。

3 讨论

SYSMEX XT-2000i自动血细胞分析仪及配套原装试剂, 由日本希森美康公司生产。该仪器应用半导体激光流式血细胞原理结合细胞化学荧光染色技术对血细胞进行检测, 通过半导体激光照射被检细胞内部, 如核和颗粒, 侧向荧光反应细胞内DNA和RNA的含量, 提高了细胞分析的准确度和灵感度, 并用散射图 (X轴表示侧向荧光的强度, Y表示侧向散射光的强度) 和直方图直观表示。该设备性能良好、测试快速, 已经得到普遍认可。但通过此次对比发现, 血小板仪器计数与手工计数差异显著。由于血液分析仪原理的限制及影响因素众多, 血细胞计数结果与实际值有一定的差异, 特别是血小板 (PLT) 体积小、易凝集、易破坏的特性和诸多影响因素, 操作过程中如忽视影响因素, PLT计数结果与实际数值差异更显著。

影响因素大致有如下几种:标本自身因素的影响, 由于采血过程不顺利, 过分挤压、未充分与抗凝剂混匀或混匀时间过短等, 人为造成血小板的凝集, 是引起血小板计数不准确的首要原因。采血量也是影响因素之一, 血量最好达到抗凝管体积的1/3, 不能超过2/3, 否则可因抗凝剂相对不足使PLT发生聚集, 导致PLT计数假性降低。抗凝剂的影响, 用于血液分析仪的抗凝剂EDTA-K2为首选, 而有极少数患者体外的EDTA抗凝血, 在室温条件下可发生血小板EDTA依赖性凝集, 或某些患者存在药物性抗血小板抗体, 遇到某些致敏药物引起血小板凝集。还有文献报道, 肝素和双草盐作抗凝剂时, 会导致PLT计数假性降低。标本放置时间的影响, 原则上标本采集15～30 min后检测结果, 30 min～2 h内可以得到最佳的检测结果。经文献报道, 标本放置时间越长, 对PLT的影响越大。随着时间的延长, PLT发生肿胀或产生构型改变, 导致仪器不能正常识别, 使PLT计数假性降低。小红细胞的影响, 正常情况下血液分析仪对红细胞体积的识别比较准确, 而在有小红细胞存在时, 给仪器识别造成困难, 因仪器只识别颗粒大小, 而不能区别颗粒性质, 因而将小红细胞误计成PLT, 使PLT假性增高。红细胞碎片的影响, 血液分析仪对RBC及PLT同时进行计数, 同一样品即使溶血不完全对PLT计数也没有影响, 但在实际工作中发现溶血不完全影响下一例样品的PLT计数, 由于红细胞碎片冲洗不彻底, 能与PLT混淆, 使PLT假性增高。

综上所述, 在日常工作中应严格按照规程操作, 对仪器定期进行维护和保养, 在保证仪器正常运行的同时, 如检测过程中出现血小板计数偏低或偏高的现象, 在仪器计数结果异常或有异常提示时, 应及时分析可能的影响因素, 结合临床资料, 进行手工复查, 必要时涂片染色观察, 以得出准确的检验结果, 为临床提供正确的诊治依据, 以避免血小板假性异常造成临床误诊。

摘要：目的 仪器检测血小板异常时, 仪器与手工镜检血小板计数的比较。方法 选择SysmexXT-2000i检测的血小板异常样本96例, 其中450>PLT>300的有42例, 50>PLT>100的有43例, PLT<50的11例, 所有样本均用手工镜检计数。结果 无论血小板高于还是低于参考值, 仪器与手工计数血小板差异均具有统计学意义。结论 SysmexXT-2000i在出现血小板计数异常时, 需用手工计数进行纠正以减少误诊。

关键词：血小板异常,仪器计数,手工计数,分析

参考文献

[1]朱忠勇.怎样看待血液及尿分析仪的过筛作用[J].临床检验杂志, 2003, 21:321-323.

[2]朱晓辉, 何菊英, 朱忠勇.应用血液分析仪后复查血片的内容和方法及程序[J].中华检验医学杂志, 2003, 26:785-787.

手工显微镜计数 篇6

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

血液分析仪采用日本光电公司生产的MEK-6108型和日本东亚医用电子株式会社生产的KX-21型；稀释液、溶血剂等均使用各自配套试剂；光学显微镜计数血小板稀释液由实验室自配。

1.2 标本的采集

采用EDTA-2K抗凝的真空管，严格按规定要求（抗凝剂与血液比例严格控制、血流要顺畅）采集静脉血，标本要求无凝块和溶血。采集后在15 min～1 h测试完毕。

1.3 方法

400份成人标本只用MEK-6108型分析仪测定。200份儿童标本分别用两种仪器进行测定，且各测定两次取其平均值，同时用光学显微镜法计数其血小板值，每份标本计数两次取其平均值。各仪器操作严格按说明书要求，手工法采用改良许汝法，按《全国临床检验操作规程》要求进行。

2 结果

MEK-6108型血细胞分析仪所测的400例成人血小板值高于正常参考上限（300×109/L）者占6%，200例儿童血小板值高于正常参考上限（300×109/L）者占21%，儿童高于成人。

MEK-6108和KX-21两种血细胞分析仪测得的儿童血小板值分别为（204.0±80.5）×109/L、（194.0±71.2）×109/L，两者经统计学处理，无显著性差异（P>0.05）。MEK-6108测得的值[（204.0±80.5）×109/L]与手工显微镜计数值[（190.0±65.3）×109/L比较，无显著性差异（P>0.05）。

将MEK-6108血液分析仪分析时出现异常报警（URI）的28例标本的血小板值[（486.0±98.7）×109/L]与显微镜计数的结果[（279.0±76.5）×109/L]进行比较，有显著性差异（P<0.05）。

3 讨论

不同的血液分析仪虽然有不同的生产厂家，且分析原理及试剂有所不同，但在分析时只要按其要求操作，所取标本合格、操作时间控制在一定范围内（15～60 min），所得的血小板结果无明显差异[1]，笔者的结论也与之相符。

血液分析仪所测得的血小板值高于正常参考上限的儿童多于成人，考虑可能有以下几方面原因： (1) 某些疾病如肺炎、支气管炎、溶血性贫血、川崎病、上呼吸道感染、哮喘喘息发作期、肾病综合征等疾病可引起血小板增高，这可能与血小板活化参与其发病机制有关[2]，而这几种疾病儿童的发病几率要大于成人。 (2) 在采集儿童静脉血液时由于儿童与工作人员难以很好地配合，采集到的标本很容易造成红、白细胞破坏形成碎片。由于血液分析仪对血小板的测定是与红细胞在同一个计数池中进行，其原理是在一定体积（2～24 fl）范围内的颗粒被计数为血小板[3]。当所测标本中有大量小红细胞或红、白细胞碎片，其体积进入血小板计数范围的被误认为血小板，使血小板计数假性增高[4]。 (3) 儿童多有厌食、偏食等不良饮食习惯，易发生营养不良性小细胞贫血，如缺铁性贫血。 (4) 有少数儿童在生理状况及操作因素的影响下其血小板本身就高于正常。

因血球计数仪具有“浮动界标”纠正功能，并非只要当血液标本中存在小红细胞时就可以使计数的血小板值偏高于实际值，即使其体积<20 fl，也不至于影响血小板计数，只有当多量的小红细胞存在时，超出其功能纠正范围才出现错误结果[4]，并且当出现此类错误时仪器一般会有URI报警提示，URI报警即提示小红细胞或红细胞碎片会对血小板计数有影响而造成计数误差，血小板直方图也会出现异常的表现，其曲线尾部并不是呈下降趋势与横坐标相交，而是呈上升走势。

平均红细胞体积（MCV）是反映体内红细胞大小的一项指标，当血液内小红细胞数量增多时，MCV值就会低于正常参考值，而小红细胞数量增多到一定数量时又会影响血球计数仪对血小板计数的准确性，故而MCV值也可间接判断血球计数仪所计数血小板值的准确与否。和强等[2]报道MCV<70 fl时对血小板计数有影响，我们所分析的28例异常血小板直方图标本中有26例MCV<70 fl，与报道的基本一致。

鉴于上述结果，笔者建议在使用血细胞分析仪计数儿童血小板值时，并不需要每一标本都进行手工显微镜计数，即使其结果高于正常参考范围。但只要当出现下列情况之一时，就必须用人工显微镜计数加以补充，以得到准确的结果： (1) 血小板计数有警示信号（URI）； (2) MCV<70 fl，且RBC直方图显示有<50 fl的小红细胞存在； (3) 血小板直方图曲线呈齿状，表示有血小板聚集，此时血小板计数仪器法测得的结果偏低。

摘要：目的:分析血液分析仪与手工法对儿童血小板计数产生的误差。方法:用两种血液分析仪及手工显微镜计数法对600例血液标本进行血小板计数, 并进行对比分析。结果:成人血小板值高于正常参考上限 (300×109/L) 的比率低于儿童, 两种血细胞分析仪测的儿童血小板值无显著性差异 (P>0.05) , 血液分析仪分析时出现异常报警 (URI) , 直方图尾部有异常升高的血小板值与显微镜计数的结果有显著性差异 (P<0.05) 。结论:使用血液分析仪计数儿童血小板时如出现, 计数有警示信号 (URI) ;MCV<70fl, 且RBC直方图显示有<50fl的小红细胞存在, 血小板直方图出现尾部升高的表现或血小板直方图曲线呈齿状等以上情况时要进行手工显微镜计数仪得到准确的结果。

关键词：血液分析仪,血小板计数,儿童,显微镜计数

参考文献

[1]章文, 徐刚, 陈月生.血液分析仪计数小儿血小板升高因素浅析[J].国外医学:临床生物化学与检验学分册, 2005, 26 (3) :188-191.

[2]和强, 廖志勤, 虞靖虹.哮喘患儿血小板计数与平均血小板容积水平变化的临床观察[J].中国小儿血液, 2002, 7 (2) :54-55.

[3]张军力, 高健钢.现代检验医学临床应用指南[M].呼和浩特:内蒙古人民出版社, 2001:12-44.

手工显微镜计数 篇7

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集2012年1月至2013年10月北京市石景山医院肾内科、泌尿外科住院病人中段晨尿标本700份。

1.2 仪器和试剂

奥林巴斯UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪以及配套试剂, TDZ4-WS低速离心机, 奥林巴斯普通显微镜。

1.3 方法

每天开机后由同一名检验医生应用标准质控液进行仪器质控检查, 收集到的标本分成两个试管。一管由同一名检验医生进行显微镜检查操作, 尿液离心 (相对离心力400 g) 5 min, 取50μL尿沉渣置于洁净载玻片上, 高倍镜下连续计数至少10个视野内的红细胞、白细胞, 低倍镜下连续计数至少20个视野内的管型, 计算均值。另一管由分析仪进行检查。仪器与镜检之间结果以双盲方式判读。灵敏度=真阳性人数/ (真阳性人数+假阴性人数) ×100%, 特异度=真阴性人数/ (真阴性人数+假阳性人数) ×100%。假阳性率又称误诊率, 即实际无病, 但根据筛检被判为有病的百分比。假阴性率, 又称漏诊率, 指实际有病, 但根据筛检试验被定为无病的百分比。检验结果正常值判断标准:红细胞:男性0~12/μL, 女性0~24/μL;白细胞:男性0~12/μL, 女性0~26/μL, 管型0~1.0/μL, 无病理管型。

1.4 统计方法

所有数据采用SPSS16.0软件系统进行统计处理, 结果以±s表示, 计数资料采用χ2检验, 计量资料采用t检验, 以P<0.05表示有统计学意义。

2 结果

2.1 两种方法对细胞学检查的结果比较

将700例标本按照细胞含量高、中、低分别进行检测, 结果显示, UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪检测数值明显高于普通显微镜检查 (P<0.05) , 见表1。

2.2 两种方法对尿标本平行检查结果比较

两组对红细胞、白细胞以及管型的检查均具有较好的灵敏度和特异度。但显微镜检查组对红细胞、管型其假阳性率以及假阴性率均较低, 与分析仪组比较差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表2。

*与显微镜组比较P<0.05

*与显微镜组比较P<0.05

3 讨论

随着检验技术的不断发展, 尿液检查逐步成为诊断疾病以及健康普查的重要手段, 在临床应用越来越多。尿常规检查包括物理、化学以及尿沉渣检查等, 其中尿液分析仪检测因其快速、安全、便捷、所需标本量少等优点在临床应用中占有十分重要的地位[2]。UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪是目前国内临床使用最先进的仪器, 它使用2种含多次甲基荧光染料的染色剂染色尿液细胞和颗粒, 被染色尿液细胞和颗粒发出的荧光能反映量化的细胞表面、胞质内的性状以及细胞核的性质 (DNA和RNA的数量) , UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪通过流式细胞技术 (FCM) 来获得尿液细胞前向散射光及前向荧光的强度参数, 从而分析尿液中的有形成分, 包括红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、类酵母菌和结晶, 并可定量显示, 在一定程度上提高了工作效率和工作质量[3]。

本研究结果显示, 700例标本按照细胞含量高、中、低分别进行检测, 两种方法检测准确性都较好, 但UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪数值明显高于普通显微镜检查, 说明UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪虽然具有计数精确的特点, 但是阳性率也比传统镜检要高。两组对于红细胞、白细胞以及管型的检查均具有较好的灵敏度和特异度。但是显微镜组对于红细胞、管型其假阳性率以及假阴性率均较分析仪组低。

在临床检测时必须注意: (1) 如果尿液中含有较多的脂肪滴、酵母菌时, 仪器会将其误认为是红细胞, 导致假阳性率升高;如果标本内存在畸形红细胞、靶形红细胞、红细胞碎裂或皱褶均会影响对红细胞的检查率[4]。 (2) 如果尿中含有小圆上皮细胞时, 由于其大小与白细胞体积大小相仿, 或聚集的结晶体等均是假阳性的主要因素。假阴性标本多为白细胞成团、细胞破坏、细胞模糊不清, 使计算机难以进行准确的图像分析所致[5]。 (3) 有的黏液丝在大小形态上接近管型、存在较多的上皮细胞、聚集的红细胞成串珠样排列等也可被误认为是管型, 大量非晶型尿酸盐结晶聚集也提示有管型存在[6]。 (4) 使用显微镜的低倍镜和高倍镜进行双重检测, 进一步对比可防止结果出现偏差。 (5) 尿液中出现酵母菌、血丝一定要进行显微镜检查。 (6) 红细胞为阳性但是细菌、结晶等都为阴性时, 不需要进行显微镜检查。

综上所述, UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪检测尿液中有形成分具有速度快、灵敏度以及特异度高等优点, 尿液中有形成分复杂, 对尿液有形成分的测定易受多种因素影响而导致假阳性、假阴性, 所以不能只依赖仪器检测结果而不进行显微镜检查, 人工镜检是其有效的补充。

参考文献

[1]陈莹.FU-100流式尿沉渣全自动分析仪、尿干化学分析仪及显微镜检的临床应用意义探讨[J].中国社区医师 (医学专业) , 2013, 15 (6) :253-254.

[2]束国防, 芦慧霞, 章琴, 等.UF-1000i尿沉渣分析仪细菌参数在尿路感染中的应用[J].中华医院感染学杂志, 2012, 22 (20) :4668-4670.

[3]赖利华, 张莉萍, 黄莉惠.UF-1000i尿沉渣检测结果与临床诊断的符合性分析[J].重庆医学, 2013, 42 (7) :786-787.

[4]白垚, 程大林, 刘劲松.四种尿沉渣检查方法的比较[J].重庆医科大学学报, 2007, 32 (5) :518-520.

[5]薛冰蓉, 杨渝伟, 陈曦, 等.UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿红细胞、白细胞影响因素的探讨[J].国际检验医学杂志, 2011, 32 (11) :1223-1224.