畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展

畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展（共4篇）

畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展 篇1

畜禽产品兽药及添加剂残留的防控

介绍了畜禽产品兽药及添加剂残留的定义、分类及常见危害,分析了畜禽产品兽药及添加剂残留形成的.原因,并提出了控制对策.

作 者：赵欣 孙义东 王翠梅 王德安  作者单位：赵欣(烟台市饲料监察所,山东,烟台,264000)

孙义东,王翠梅,王德安(中国农业大学烟台研究院)

刊 名：现代化农业 英文刊名：MODERNIZING AGRICULTURE 年，卷(期)：2009 “”(2) 分类号：S8 关键词：兽药   添加剂   残留   畜禽产品  

畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展 篇2

我国的兽药残留监控工作起步较晚, 但有关部门已经开始重视动物性食品中的兽药残留问题, 制订了各种监控兽药残留的法规, 这是我国对兽药残留监控保证动物性食品安全的有力措施。但是, 兽药残留监控是一项长期而艰巨的工作, 需要政府和管理部门的高度重视和广大民众的支持。下面就如何控制兽药的残留谈谈几点想法和建议:

1 严格规范兽药的安全生产和使用

监督企业依法生产、经营、使用兽药, 禁止不明成分以及与所标成分不符的兽药进入市场, 加大对违禁兽药的查处力度, 一旦发现, 严厉打击;严格规定和遵守兽药的使用对象、使用期限、使用剂量和休药期等。加大对饲料生产企业的监控、严禁使用农业部规定以外的兽药作为饲料添加剂。

2 加强饲养管理、改变饲养观念

学习和借鉴国外先进的饲养管理技术, 创造良好的饲养环境, 增强动物机体的免疫力, 实施综合卫生防疫措施, 降低畜禽的发病率, 减少兽药的使用。同时, 充分利用中药制剂、微生态制剂、酶制剂以及多糖等高效、低毒、低残留的制剂来防病、治病, 减少兽药残留。

3 加强兽药残留监控、完善兽药残留监控体系

加快国家、部、省三级兽药残留监控机构的建立, 加大监控力度, 严把检验检疫关, 严防兽药残留超标的产品进入市场, 对超标者给予销毁和处罚, 促使畜禽产品由数量型向质量型转换, 使兽药残留超标的产品无销路、无市场、迫使广大养殖场户科学合理使用兽药、遵守休药期的规定, 从而控制兽药残留。

4 加快建立兽药残留检测方法, 积极开展国际交流合作

畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展 篇3

关键词 畜禽产品；兽药残留；免疫学检测方法

中图分类号：S859.84 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2016）12--02

兽药是畜禽生成中必不可少的一部分，能够降低发病及死亡率，提高养殖效益。但随着兽药种类及数量的持续上升，兽药滥用现象日趋严重。兽药在畜禽体内持续积累造成了兽药残留，残留超标会使消费人群中毒、过敏等；同时，也会引起耐药性、生态环境毒性等其他问题[1]。近年来，因兽药残留问题导致的食品安全信任危机逐步加剧，使之成为制约畜牧业发展的重要因素。兽药残留的控制离不开检测标准的制定及检测技术的发展。免疫学检测技术以抗原抗体的结合为基础，具有特异性强、灵敏度高、筛选速度快、操作简单等特点。随着免疫学技术的日趋完善，免疫学检测方法在众多兽药残留检测手段中脱颖而出，其应用越来越广泛。本文就近年来用于兽药残留的免疫学手段做一简要综述，以期为兽药残留检测提供参考。

1 酶联免疫测定法（ELISA）

ELISA方法是一种将抗原-抗体特异性反应与酶高效催化反应相结合的检测方法，是酶免疫测定法中应用最广的一种方法，具有操作简单、灵敏度高、批量检测等优势。检测时首先将抗原或抗体吸附于固相载体表面，后加入待测抗体或抗原，再加入酶标记的抗原或抗体，最后通过底物显色生成有色物质，根据吸光值对样品进行定性及定量分析。该方法对动物产品中的磺胺类、四环素类、己烯雌酚、苯巴比妥、氯霉素和黄曲霉素等兽药残留具有高灵敏度及准确度[2]。自ELISA方法首次用于兽药残留检测至今几乎所有常用兽药均建立了酶联免疫检测系统，大部分已应用于兽药残留的快速检测中。

2 胶体金免疫层析测定法（CGIA）

胶体金法将胶体金颗粒作为标记物，通过金标颗粒颜色的直观读取，定量定性的显示检测结果。该方法具有灵敏度高、操作简单、快速有效和成本低廉等特点。胶体金法将抗原或抗体以条带状预先固定于条状纤维层析材料上，金标抗体（单抗或多抗）固定于样本垫上，样品加入后在毛细作用推动下于层析试纸中泳动，与样本垫上金标抗体发生免疫反应，形成聚合物。当聚合物移动至预固定条带时被截留，聚集于条带处而呈色[3]。胶体金法用于定性检测时不需仪器可直观读取且试纸条携带方便，因此该方法适合现场检测。目前已有多种试纸条经农业部批准投入使用，应用于兽药残留检测。

3 荧光免疫测定法（FIA）

荧光免疫法是在抗原-抗体结合原理基础上使用荧光物质作为标记及检测依据的一种方法。荧光物质的选择是该方法的重点，也是限制其发展的主要因素。传统荧光物质干扰大、灵敏度低。时间分辨荧光免疫法、量子点荧光免疫法及荧光偏振免疫测定法等的出现使得FIA的灵敏度得到大幅提升，从而在兽药残留分析中得以迅速发展。FIA主要的优势是可进行全自动大批量检测[4]，相信在兽药残留检测中具有很好的推广前景。

4 化学发光免疫测定法

化学发光免疫测定法包括两个部分，以抗原-抗体结合为基础的免疫反应部分和以化学发光系统为基础的分析部分。该方法具有灵敏度高、特异性好、可全自动检测、有效期长且无辐射等优点[5]。研究显示，化学发光法与ELISA检测法符合率极高。目前，化学发光法已成为兽药残留免疫学检测的一个重要发展方向，未来可能取代放射免疫和ELISA。

5 放射免疫测定法

放射性免疫测定法是用同位素标记的抗原以及机体中抗原共同与抗体发生竞争性的免疫反应的原理，根据竞争效应的强弱程度来判断抗原的含量。这种方法具有成本低，操作简便，耗时较短等的特点，非常适合大量样本的检测鉴定。但这种测定试剂盒在制备及使用过程中会对环境造成一定的污染[6]，危害着人及动物的健康；同时还存在放射性试剂寿命较短的问题，因此，逐渐被非放射性测定方法所取代。

6 生物芯片检测

生物芯片技术的原理是将蛋白质、核酸等生物大分子密集有序的固定于经特殊处理的基片表面，然后与标记的样本进行杂交，然后洗去未结合的目标分子，使用特定的仪器对结果信号进行扫描读取，通过抗原抗体的亲和原理以及核酸序列的互补亲和原理来判断检测结果，达到检测的目的[7]。这种方法具有高效，高通量等其他方法所没有的优势。近年来，我国生物芯片技术领域取得了长足的进步，生物芯片技术已经广泛应用于兽药残留的检测，并具有越来越广的应用前景。

7 结语

畜禽产品中兽药残留问题与人民群众健康息息相关，控制兽药残留、保证食品安全是一项持久而艰巨的任务。近些年兽药残留的免疫学检测手段获得了快速发展，在众多免疫方法中脱颖而出。免疫学检测方法具有操作简单快速、高通量、准确和灵敏度高等优势，适合基层工作者现场筛查使用。随着兽药总类的增多、药物结构的日益复杂，多组分同时、快速检测将成为未来免疫学检测技术的发展趋势。相信通过不断改进及应用，免疫学检测手段将具有更广阔的应用前景，成为兽药残留检测的主要方法。

参考文献

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[2]徐伟，程凤科，孟银，等.酶联免疫吸附法在兽药残留检测中的应用[J].中国家禽，2013，35（12）：49-52.

[3]薛晓，荣霞，叶自霞，等.胶体金免疫层析法在畜禽产品兽药残留检测中的应用[J].动物医学进展，2013，34（12）：179-182.

[4]李丽华，白瑞樱，孙远明，等.环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用[J].食品科学，2012，33（8）：216-220.

[5]马玲，韦建兴，陆忠础，等.磺胺二甲嘧啶间竞争化学发光酶免疫分析法的建立及应用[J].中国食品卫生杂志，2014，26（5）：455-460.

[6]江秀红.兽药残留的快速检测技术研究进展[A].中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会学术年会[C].2008：386-388.

[7]程景，李英杰，张易，等.畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展[J].畜牧兽医科技信息，2009（10）：8-9.

畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展 篇4

1. Qu ECh ERS方法的起源

Qu ECh ERS方法是一种新型药物多残留的样品制备方法, 因具有快速、简单、廉价、有效、可靠、安全的特点而得名。2002年, Qu ECh ERS方法第一次由美国农业部东部地区研究中心首席科学家Lehotay及博士后Anastassiades在意大利罗马举行的第四届欧洲农药残留工作组会议上提出。此方法一经发现就受到各国农残分析者的普遍关注, 发展十分迅速, 现已成功地用于多种食品中的数百种农、兽药残留的分析。Qu ECh ERS方法包括3个步骤:首先, 高湿的样品 (干燥的食品需加水) 用有机溶剂 (乙腈、乙酸乙酯或丙酮) 萃取, 同时加入盐 (硫酸镁、氯化钠或缓冲试剂) 以促使溶剂和水的相分离;其次, 混合体系经过振摇和离心后, 取部分有机相与吸附剂混合, 利用分散固相萃取进一步净化;最后, 混合物离心后所得上清液被直接用于分析或浓缩或溶剂交换。Qu ECh ERS方法主要适用于不含脂肪 (<2%) 的食物, 此方法很灵活, 可根据分析物、基质、仪器和分析者的偏好对净化剂、盐量、水含量和吸附剂等作改进, 改进的方法也适用于含中等或高脂的食物, 如鱼、虾等水产品。Qu ECh ERS方法是利用吸附剂填料与基质中的杂质相互作用, 吸附杂质, 从而达到除杂、净化的目的。Qu ECh ERS方法中吸附剂是加到萃取剂中。Qu ECh ERS方法降低了吸附剂的成本, 避免了样品非均匀的影响。

2. Qu ECh ERS方法的优化

2.1. 提取剂的选择

提取剂的选择是Qu ECh ERS方法的关键点之一。在农兽药多残留分析中, 常用的提取溶剂有丙酮、乙腈和乙酸乙酯。然而丙酮的水溶性强, 不使用非极性溶剂很难实现丙酮和水的分离;乙酸乙酯和水不互溶, 因其极性小于乙腈, 故出现极性大的分析物不易提取而极性小的脂肪、油脂等被共萃出来的问题。相对于乙酸乙酯和丙酮, 用乙腈不会萃取出很多的油性物质。加盐到乙腈中, 通过盐析作用使乙腈和水分层, 而乙腈与非极性溶剂 (如正己烷) 形成明显的分界面, 为下一步去除油性共萃物提供了可能。相对于丙酮, 使用乙腈可以在分配步骤后用无水硫酸镁等干燥剂除去有机相中残留的水。经过对它们提取多类兽药残留的稳定性及效果作对比试验, 表明乙腈是萃取水产品中兽药残留的最适合溶剂。目前报道的Qu ECh ERS方法基本也都是采用乙腈作提取剂。

2.2. 脱水剂的选择

Mg SO4和Na2SO4是常用的脱水剂。Mg SO4具有大的吸水容量, 能明显减少水相, 从而促进兽药在有机相中的分配和两相的分层。在萃取/分配步骤中, Mg SO4水合作用是一个强放热过程, 可使萃取液变热, 达到40℃~45℃, 这有利于萃取。Na2SO4能形成水合物, 在水中的溶解能力较Mg SO4低, 吸水能力稍低。Na Cl也被用作脱水剂, 但对兽药的萃取效果不理想, 可联合使用Na Cl和Na2SO4。Na Cl能除去水溶性好的极性干扰物, 从而提高净化效果以及回收率。经过对比试验我们发现检测水产品中的多兽药残留使用Na Cl和Na2SO4作为脱水剂最好。

2.3. 净化剂的选择

净化剂的选择是Qu ECh ERS方法检测水产品中多兽药残留的重中之重。乙二胺-N-丙基硅烷 (PSA) 、氨基 (-NH2) 吸附剂和中性氧化铝都具有弱的阴离子交换能力, 都是通过氢键和化合物作用, 可除去脂肪酸、部分有机酸、糖和色素。与-NH2吸附剂和中性氧化铝相比, PSA除基质共萃物效果最好, 这是因为PSA同时含有一级和二级胺, 使其结合能力最强。原始Qu ECh ERS方法选择单一使用PSA作为吸附剂, 获得了较好的结果。C18吸附剂常被作为Qu ECh ERS方法的净化剂。C18吸附剂是在硅胶基质上接有十八烷基, 具有较高的相覆盖率和碳含量, 对非极性物质有较高的容量, 对油脂的去除效果十分显著。其还可除去其他一些非极性杂质。经过实验发现PSA作为检测水产品时的净化剂是最合适的, 但是对于四环素类药物的提取效果一直不好, 仅能作为粗筛用, 随着Qu ECh ERS方法的不断改进和成熟, 为了达到更好的净化效果, 净化过程需要综合使用多种净化剂、甚至多次净化。

3. Qu ECh ERS方法的优点

(1) 回收率高, 对磺胺类、沙星类兽药残留的回收率介于75%~100% (大部分大于95%) 之间;

(2) 精确度高 (重现性小于5%) , 用内标法进行校正;

(3) 分析时间短, 能在30~40min完成6个预先称重的样品测定;

(4) 溶剂使用量少, 污染小且不使用含氯化物溶剂;

(5) 操作简便, 无需较高技能或培训便可很好地完成;

(6) 使用很少的玻璃器皿, 如:烧杯, 容量瓶, 分液漏斗等;

(7) 方法十分严格, 在净化过程中有机酸均被去除;

(8) 所需空间小, 在小型实验室便可完成;

(9) 提取剂加入容器后立即密封, 使其与工作人员的接触机会少;

(10) 所耗费的溶剂价格低廉;

(11) 样品制备过程中所使用装置简单。

由于Qu ECh ERS方法具有其独特的性能和快速、简易、价廉的优点, 已经引起了全世界分析化学家的关注;但我国在这方面的研究起步较晚, 相关的深入研究不多。目前, 关于Qu ECh ERS技术仍然主要集中在食品中农药残留分析中的应用, 在兽药残留分析中的应用研究相对较少, 尤其在水产品中磺胺类和四环素类药物残留检测中的应用更少。

4. Qu ECh ERS方法在水产品兽药残留分析的应用

由于Qu ECh ERS方法具有以上诸多特点, 所以被不断改进并用于动物源性食品中的兽药残留检测。Qu ECh ERS方法在兽药残留检测方面的应用比农药残留的少, 但也取得了令人满意的成果。因为目前水产品中兽药残留检测的方法已经非常成熟, 因而研究出适合检测水产品的Qu ECh ERS方法成为检测水产品中兽药残留的关键, 水产品作为一种高蛋白、高脂肪的动物源性食品, Qu ECh ERS方法应该随之改进优化。若试样前处理不好, 则会对检测产生较大干扰。在使用Qu ECh ERS方法前处理时, 通常需要优化提取剂、净化剂及其用量, 从而达到较好的效果。采用Qu ECh ERS和液相与飞行时间质谱LC-TOF-MS联用的方法分析虾中的13种常用抗生素和兽药。对比4种样品处理方法, 包括两种SPE方法、MSPD方法和Qu ECh ERS方法。样品经两种SPE方法处理后, 萃取液较浑浊;经MSPD处理后得到澄清萃取液, 但分析物的回收率较低, 大多数低于40%;而Qu ECh ERS方法处理, 可以排除基质干扰, 回收率58%~133%, 且检测限0.06~7μg/kg。用该方法成功分析了12种虾样, 可用于虾中这些分析物的超痕量检测。本人经过多个对比实验发现使用PSA提取样品在加入正己烷进行祛除色素等杂质时效果不是很好, 下层溶液好歹有一些颜色, 磺胺类药物在不使用psa时回收率略高;沙星类药物在不使用氯化钠时回收率较高, 四环素类药物由于较易于样品中的蛋白质脂肪结合, 较难提取, 仅能作为粗筛用。研究建立了水产品中四环素类、磺胺类、喹诺酮类兽药的QuEChERSUPLCMS/M S快速检测方法。分别对液相色谱条件、质谱条件、提取溶剂、净化方法、吸附剂的选择及用量等样品前处理条件进行了优化研究。

5. 结语

Qu ECh ERS方法具有简便、快速、廉价等优点, 非常符合现代检测的要求。我国作为养殖水产品的大国, 对于水产品检测的Qu ECh ERS方法需求较为迫切。根据水产品高蛋白高脂肪的特点、对其不断地改进, 目前已在水产品种多兽药残留分析中获得高的回收率。目前检测水产品中孔雀石绿、结晶紫、磺胺类、沙星类药物残留的Qu ECh ERS LC-MS (/MS) 方法已经逐渐普及, 但是水产品中的常用抗生素四环素类药物的提取效果还不是很好。相信随着科技的进步和检测手段的不断发展Qu ECh ERS方法将更加成熟, 这个问题将很快得到解决。

参考文献

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