毛细管色谱柱

毛细管色谱柱（共10篇）

毛细管色谱柱 篇1

甲醇是一种重要有毒化工原料, 被广泛地用于生产中。但是我国尚未制定水和废水中甲醇的监测标准方法。在《空气和废气监测分析方法》 (第4版增补版) 中, 用纯水吸收空气中的甲醇, 使用PEG-6000填充柱通过气相色谱检测水中的甲醇样品, 由氢火焰离子化检测器测定[1]。Agilent HP-FFAP毛细管柱和PEG-6000柱均属极性柱, 可用于醇类和芒香族类的分析[2,3]。因此, 本文对采用HP-FFAP毛细管柱测定水中的甲醇的可行性进行了研究, 希望能够有效地分离水中甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮, 并对外标法和乙酸乙酯为内标物的内表标法定量进行了探讨。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent 7890A型气相色谱仪/FID检测器/色谱工作站 (美国安捷伦公司) ;毛细管柱:Agilent HP-FFAP 50m×0.32 mm×0.5μm;自动进样器:Agilent 7683。

试剂:甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙酸乙酯 (均为色谱纯) ;蒸馏水。

甲醇标准溶液:取甲醇 (色谱纯) 10.0μL置于100 mL容量瓶中, 用蒸馏水定容, 配成浓度为79mg/L的甲醇标准溶液。重复配制3份, 进行色谱分析时, 取3份的均值作为标准。

混合样品溶液:用移液枪分别准确吸取10.0μL的丙酮、甲醇、乙醇、异丙醇 (20℃时各物质的密度:丙酮为0.788mg/L, 乙酸乙酯为0.901mg/L, 甲醇为0.792mg/L, 乙醇为0.790mg/L, 异丙醇为0.785 mg/L) 注入100 mL容量瓶中, 用重蒸馏水配成一定浓度的标准贮备液, 使用前由该标准贮备液配制标准系列溶液。

1.2 分析方法

1.2.1 色谱条件

柱温:40℃;汽化室温度:210℃;检测器温度:210℃。载气的氮气流量:6 mL/min。燃气的氢气流量:40 mL/min。助燃气的空气流量:400 mL/min。恒定柱流+尾吹的氮气流量:46 mL/min。进样方式:不分流, 在0.15 min, 分流出口吹扫流量:60 mL/min。进样量:0.2μL。

1.2.2 样品定性

取配制成的混合甲醇水样和单独的甲醇标准溶液各1 mL于自动进样瓶中, 按上述色谱条件进行定性以确定分离度和对称因子。分析色谱图见图1。

1.2.3 标准曲线绘制

按表1配制甲醇标准系列。各取甲醇标准系列1mL于自动进样瓶中, 置入自动进样器, 设置取0.2μL标样进行色谱分析, 以峰面积对甲醇浓度 (mg/L) 绘制标准曲线。标准曲线见图2。确定该方法测定甲醇含量的线性和线性范围, 并以2倍信噪比计算最小检出限。

1.2.4 方法精密度和准确度检验

取配制成的混合甲醇水样, 按上述色谱条件重复进样以确定该方法对水中甲醇含量测定的准确度和精密度。以加标回收率方法对准确度进行进一步验证。

1.2.5 样品内标法定量

加入乙酸乙酯作为内标物, 对甲醇进行内标法定量, 与外表法定量进行比较。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件优化

Agilent HP-FFAP毛细管柱采用TPA改性的聚乙二醇为涂层, 属于极性毛细管柱。而传统的以聚乙二醇 (PEG-6000) 为固定液的填充柱来分析甲醇, 也属于极性固定液。因为甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇都具有较强的极性, 根据“相似相容”的气相色谱基本原理, 可以推断用Agilent HP-FFAP应该可以较好的对甲醇进行分析。而且本试验采用50m×0.32 mm×0.5μm的毛细管柱, 柱容量较大可以进行直接不分流进样。为了减少样品峰拖尾的情况, 通过试验摸索, 采用不分流进样瞬时后分流吹扫的方法达到了较理想的效果。通过试验发现柱温采用甲醇沸点64.5℃附近65℃, 也是混合样品平均沸点附近, 有利于得到较好的分离度和峰型。该方法选用FID检测器, 该检测器对甲醛没有响应, 并且对甲醇同系物质保留时间具有线性关系, 故而甲醛和其他醇类物质不会对该方法造成干扰。

2.2 分离度和对称因子

通过分别进样可以确定, 标准色谱图如图1。可见采用本方法色谱条件, 能够使甲醇与出峰时间相近的乙醇、丙酮、乙酸乙酯、异丙醇很好的分离, 且没有产生拖尾及干扰现象。其中, 甲醇的分离度大于10, 对称因子为0.85～1.15。

2.3 工作曲线和线性范围

按上述方法中标准曲线的绘制, 可以得出回归方程为:

Y=3.85×10-2X-3.88×10-2相关系数r=0.9997。以2倍信噪比, 进样量0.2μL可以计算出方法的检出限为0.07ng。以20倍信噪比, 进样量0.2μL可以计算出方法的定量限为7.0ng。线性范围为0～79mg/L。可见该方法有良好的线性范围和较低的检出限。

2.4 准确度和精密度

分析甲醇浓度为39.5mg/L的水样, 测得甲醇的相对标准偏差≤5%, 平均值与标准值之间的相对误差≤±10%, 结果见表2。加标回收率在95%～105%之间, 结果见表3。可见该方法有较好的准确度和精密度。

2.5 样品内标法定量

试验结果见表4, 可见内标法定量也有可行性。

3 结论

用Agilent HP-FFAP毛细管柱不分流进样测定水中的甲醇, 方法线性范围为0～79mg/L之间, 加标回收率在95%～102%之间, 并且具有较好的精密度, 其相对标准偏差<5%。该方法在不配备顶空进样设备的条件下可以简便、快速、准确的检测水中甲醇的含量, 同时也适于大气和废气中甲醇含量的测定[1,4]。

摘要：目的建立用AgilentHP-FFAP毛细管色谱柱测定水中甲醇含量的方法。方法采用HP-FFAP毛细管色谱柱, 对柱温箱温度、检测器温度、汽化室温度、载气流量、分流比等参数进行对比试验, 选择最佳操作条件, 对水中乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇、异丙醇进行分析, 同时进行内标法、外标法进行定量检测。结果本方法线性范围为0～79mg/L之间;工作曲线相关系数 (r) 大于0.999;加标回收率在95%～102%之间;进样量0.2μL时, 按2倍信噪比计算最小检出限为0.07ng。结论本方法准确、可靠, 可以用来测定水中的甲醇含量。

关键词：HP-FFAP毛细管色谱柱,气相色谱,甲醇,水

参考文献

[1]国家环保总局。空气和废气监测分析方法[M]。第4版增补版。北京:中国环境科学出版社, 2007。595-596。

[2]邓青, 邓岚, 荆碧。毛细管气相色谱快速测定白酒中甲醇[J]。云南师范大学学报, 2002, 22 (5) :42-43。

[3]蒲国强, 林小葵, 李玉萍, 等。程序升温升压毛细管气相色谱法测定酒中甲醇和杂醇油[J]。预防医学情报杂志, 2008, 24 (6) :488-489。

[4]王志刚, 王晓晶, 王斐, 等。毛细管柱顶空进样测定大气中的丙酮、甲醇、乙醇和异丙醇[J]。污染防治技术, 2008, 21 (4) :106-107。

毛细管色谱柱 篇2

毛细管气相色谱法测定矿坑水中的苯系物

以国家标准方法和EPA方法为基础，进行了矿坑排水中苯系物的测定。在测定过程中进行了质量保证和质量控制实验，用外标法定量。在水样测定的同时对用自动顶空进样器和吹扫捕集浓缩仪两种进样方式测定矿坑排水中苯系物的方法进行了比较，对进样方式和影响测定的因素进行了讨论。结果表明，自动顶空进样器的.回收率为108.58％～116.38％，方法检出限为5.00～10.00g/L；吹扫捕集浓缩仪的回收率为94.87％～105.63％，方法检出限为0.25～0.50g/L。

作 者：刘菲 王艳玲  作者单位：中国地质大学水资源与环境工程系，北京 100083 刊 名：地球科学-中国地质大学学报  ISTIC EI PKU英文刊名：EARTH SCIENCE-JOURNAL OF CHINA UNIVERSITY OF GEOSCIENCES 年，卷(期)： 25(5) 分类号：P641.4+61 X752 关键词：苯系物   自动顶空进样器   吹扫捕集浓缩仪   回收率  

毛细管色谱柱 篇3

白酒生产中产生的酸是形成酒中芳香组分的基础物质。不同的酸与醇在酶的作用下，生成不同的酯，酸本身在酒中还起重要的调味作用。目前能定量测定的白酒中的主要酸，含量较多的有乙酸，乳酸，已酸和丁酸。含量少的有甲酸，丙酸，异丁酸，戍酸，异戍酸，庚酸，辛酸等。用GC方法分析白酒中的羧酸，样品多先经衍生化处理。然而，经衍生化反应后造成的分析误差不可避免。而且衍生化的手续往往冗长费时，不利于快速分析。所以白酒中的羧酸直接进样的方法值得研究。

本方研究了毛细管气相色谱方法用白酒中羧酸直接进样分析的可能性；采用30M×Φ0.32mm、柱内涂2uM FFAP的弹性石英毛细管柱作为色谱床，并对载气线速，升温程序等色谱条件认真进行了优化选择，羧酸样品不经衍生化直接进样，成功地实现了C2～C20饱和及不饱和羧酸的分离。未发现样品中各饱和及不饱和羧酸明显分解。作为实例，分析黑龙江东北王有限公司白酒中的主要羧酸，采用内标法计算其含量。我们的工作表明，FFAP毛细管柱用于羧酸的直接进样分析是可行的。

1.实验部分

1.1仪器和试剂

仪器：岛津GC-14C气相色谱仪、FID检测器；浙江大学智能信息工程研究所N2000工作站；Φ0.32mm×30M弹性石英毛细管柱，柱内涂2uM FFAP。

色谱条件：载气：N2（99.99%）柱前压0.22MPa，柱内载气线速14cmS-1；燃气H2压力0.2MPa；助燃气：Air，压力0.1MPa；尾次N2；分流比60：1气化温度280℃，检测器温度：280℃；升温程序：初温90℃，恒温1min，以11℃·min的速率升温到235℃；恒温5min，色谱分析周期约17min。

试剂：C2-C20。羧酸标样；山梨酸（内标）标样；

CH2Cl2纯化处理至色谱进样无干扰峰；

CH3CH2OH纯化处理至色谱进样无干扰峰。

1.2样品制备

标样配制：经纯化的CH2Cl2中加入羧酸标样40mg（固体标样）或40ul（液体标样），定容至100ml，进样0.6ul。

酒样处理：先用液一液萃取法除去酒样中的醇、酯，以免其干扰测定.调节水相PH值以释放其中羧酸（PH=1），然后用100mlCH2CL2分次萃取，用KD浓缩器浓缩到2ml，进样1ul。

2.实验结果

定性结果：

3.结论

毛细管气相色谱法测定废水中甲醇 篇4

废水中甲醇含量的测定通常采用变色酸比色法, 但此方法繁琐、复杂、比色误差大, 不易操作。但是中国并没有制定废水中甲醇标准分析方法。在空气和废气监测分析方法 (第四版增补版) 一书中, 采用水吸收气体中的甲醇, 使用PEG-6000填充柱通过气相色谱检测水中的甲醇, 用氢火焰离子化检测器 (FID) 测定甲醇含量。大口径厚液膜毛细管柱可直接替代填充柱具有多种优点, 分离效果好、准确性高。采用气相色谱法具有灵敏、快速, 不受共存物干扰等优点。Agilent DB-WAX毛细管柱固定液是硝基对苯二酸改性的聚乙二醇, PEG-6000柱固定液也是聚乙二醇, 可用于水中醇类和芒香族类的分析。所以本文采用Agilent DB-WAX毛细管柱测定废水中的甲醇的可行性进行了实验, 确定了适宜的气相色谱条件, 希望能够有效的分离废水中甲醇, 并用外标法进行定量进行了探讨。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent 7820气相色谱仪;氢火焰离子化检测器 (FID) ;毛细管柱:Agilent DB-WAX 50m×0.32mm×0.50um;自动进样器Agilent G4513A。

试剂:甲醇 (色谱级) ;蒸馏水。

甲醇标准溶液溶度如下:0.0010、0.0039、0.08、0.15、0.7%

1.2 分析方法

1.2.1 色谱条件

柱箱温度60℃——10℃/min——150℃;进样器温度200℃;氢火焰离子化检测器 (FID) 温度:300℃, 氢气流量30m L/mim, 空气流量400 m L/mim, 尾吹流量2 m L/mim;色谱柱流量0.8 m L/mim;进样方式:分流进样, 分流比20:1;进样量0.5ul。

1.2.2 标准曲线的绘制

按表一各取1m L甲醇标液放入自动进样瓶中, 把进样瓶放进自动进样器, 设置自动进样0.5ul, 通过软件绘制标准曲线。标准曲线见下图

1.2.3 方法精密度和准确度检验

取配制成的甲醇水样0.012%按上述色谱条件重复进样五次以确定该方法对水中甲醇含量测定的准确度和精密度。五次结果0.011、0.014、0.011、0.013、0.010%, 相对标准偏差RSD为0.14。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件优化

Agilent DB-WAX毛细管柱固定液是硝基对苯二酸改性的聚乙二醇, 属于强极性毛细管柱, 而传统的聚乙二醇 (PEG-6000) 为固定液的色谱柱也是极性柱。用Agilent DB-WAX毛细管柱完全可以对废水中甲醇进行分析。通过试验发现柱箱温度采用甲醇沸点稍高一点 (75℃) 可以得到非常较的分离效果和很好的出峰形状, 其他的醇类也不影响甲醇的分析。

3 结语

采用Agilent DB-WAX毛细管柱分流进样分析废水中甲醇具有较好的准确度和精密度, 可以简便、快速、准确的检测废水中的甲醇含量, 同时也适用于气体中甲醇含量的测定。用本方法选择实验条件更加科学合理, 测定结果更加可靠。

参考文献

[1]空气和废气监测分析方法 (第四版) [M].北京:中国环境科学出版社, 2003.

毛细管色谱柱 篇5

建立了顶空毛细管气相色谱法测定茶多酚中正己烷、氯仿、乙酸乙酯和丙酮4种有机溶剂残留量的方法.并讨论了平衡温度、平衡时间、盐效应对测定的影响.分析结果表明:该方法对上述4种有机溶剂均达到了完全分离,相关系数为0.994～0.999,检出限范围为0.065～0.268 μg/g,测定结果的.相对标准偏差为0.39%～2.13%,样品的回收率为90.9%～105.3%.

作 者：刘波平周妍 罗香 曹树稳 王俊德 LIU Bo-ping ZHOU Yan LUO Xiang CAO Shu-wen WANG Jun-de 作者单位：刘波平,LIU Bo-ping(南京理工大学化工学院,南京,210094;江西省分析测试中心,南昌,330029)

周妍,曹树稳,ZHOU Yan,CAO Shu-wen(南昌大学生命科学院,南昌,330047)

罗香,LUO Xiang(江西省分析测试中心,南昌,330029)

王俊德,WANG Jun-de(南京理工大学化工学院,南京,210094)

毛细管色谱柱 篇6

关键词：苦味酸,气相色谱法,正己烷

苦味酸 (2, 4, 6—三硝基苯酚) , 俗称黄色炸药, 是一种黄色晶状固体, 无气味, 干燥时具有爆炸性, 易溶于苯、乙醇等[1]。主要用于爆炸物的制造, 农业上杀菌剂、除霉剂, 医药治疗上杀菌剂、收敛剂及氯化苦试剂的制造, 对人的眼睛、皮肤及呼吸道会产生危害, 由于它的毒性, 根据《地表水环境质量标准》 (GB3838-2002) , 苦味酸已被列为集中式生活饮用水源地80项特定监测项目之一, 标准限值为0.5mg/L, 采用的分析方法为气相色谱法[2,3], 该方法基于苦味酸沸点较高 (超过300℃) , 利用次氯酸钠做为氧化剂将苦味酸转化为沸点为112℃的氯化苦 (三氯硝基甲烷) , 以苯萃取后进入带有电子捕获检测器 (ECD) 的气相色谱仪分离和测定。

目前, 苦味酸的测定方法除了气相色谱法, 还有反相高效液相色谱法 (RP-HPLC) 和离子对固相萃取后高效液相色谱法, 最新的研究方法还有直接进样—液相色谱—三重四级杆质谱法[4,5], 由于受到实验室条件及标准方法的限制, 我国大多数采用气相色谱仪 (ECD) 进行分析测定。但是在实际应用中, 《生活饮用水卫生规范》中规定的苦味酸测定方法—填充柱气相色谱法已经不能满足分离效果和精确度的要求, 现多用毛细管气相色谱法分析测定[6,7], 此外苦味酸测定过程中多采用毒性较大的苯为萃取溶剂, 在实验过程中容易对人造成危害, 本文利用毒性较小的正己烷萃取, 毛细管气相色谱法分析苦味酸, 具有较高的精确度和回收率, 同时对衍生条件进行了优化。

1 实验

1.1 仪器和试剂

气相色谱仪 (Agilent 7890A) , ECD检测器, HP-5毛细管色谱柱 (Agilent 30m×0.32mm×0.25μm) ;

苦味酸标准溶液 (Accu Standard公司, USA) , 0.1g/L (甲醇中) ;

正己烷 (J.T.BAKER, USA) , 次氯酸钠 (分析纯) ;

氮气 (纯度≥99.999%) 。

1.2 色谱条件

气化室温度:280℃;分流比:5∶1;

柱温箱温度:220℃;

载气流速:2.0mL/min;尾吹流速:60mL/min;隔垫吹扫:3mL/min;

检测器温度:300℃。

1.3 实验步骤

1.3.1 苦味酸标准使用液

用移液管准确吸取苦味酸标准溶液 (0.1g/L) 1.0mL于10mL容量瓶中, 正己烷定容至10mL刻度, 苦味酸标准使用液浓度为10mg/L。

1.3.2 工作曲线制作

于6个25mL具塞比色管中用微量注射器分别取苦味酸标准溶液 (10 mg/L) , 0、10、20、50、100、200μl , 用蒸馏水稀释至10mL刻度, 使其质量浓度分别为0、10、20、50、100、200μg/L, 加入次氯酸钠2.0mL, 塞进瓶塞后振荡均匀, 30℃下反应50min, 加入1.0mL正己烷振荡萃取3min, 静止分层, 移取上层正己烷相供气相色谱ECD测定。以苦味酸浓度为横坐标, 对应的色谱峰的峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线。

1.3.3 样品测定

准确量取10mL水样于25ml具塞比色管中, 加入10ml水样, 加入次氯酸钠溶液2.0mL, 塞紧管塞振荡均匀, 在30℃下反应50min, 加入1.0ml正己烷振荡萃取3min, 静止分层, 取上层正己烷溶液进行分析。

2 结果与讨论

2.1 工作曲线和方法可靠性

2.1.1 工作曲线及检出限

水样中的苦味酸被氯化后, 生成氯化苦, 用气相色谱法 (GC-ECD) 测定。按色谱条件 (1.2) 分析所得目标产物氯化苦如图1所示, 保留时间为3.666min, 与溶剂峰完全分离, 且色谱峰对称性良好, 无拖尾现象。在本实验条件下, 苦味酸浓度为0～200μg/L的范围内绘制标准曲线, 有良好的线性关系, 其线性回归方程和线性相关系数分别为Y=161.5x+35.62, R=0.9997。

当取样量为10mL, 用上述方法测定, 计算标准偏差S, 按MDL= t (n-1, 0.95) ×S计算检出限, 可计算得到方法的检出浓度为0.013μg/L。能够满足地表水环境质量标准 (GB 3838-2002) 的要求[2]。

2.1.2 方法可靠性实验

选择苦味酸低质量浓度5.00μg/L和高质量浓度20.0μg/L进行空白加标回收实验, 每组各做了7个平行实验, 测定其回收率并计算标准偏差和变异系数。见表1, 两组测定结果的平均值分别为5.12μg/L和21.0μg/L, 平均回收率分别为102%和105%;标准偏差为0.33和0.94, 变异系数分别为6.35%和4.35%, 由此可知利用正己烷萃取苦味酸具有较好的精确度和准确度。

2.2 实验条件的优化

2.2.1 反应温度

苦味酸的测定是利用在适当的条件下, 次氯酸与苦味酸反应生成氯化苦, 再用有机溶剂萃取后测定。因此, 反应温度对于实验结果有很大的影响, 温度较低, 反应速率慢, 反应完全所需时间长;温度高, 反应速率快, 但是反应程度不一致, 因为次氯酸钠与水反应生成的氧, 在较高的温度下, 容易挥发, 致使反应效率下降[4,5]。反应温度对苦味酸测定的实验结果表明, 如图2所示, 30℃时响应最大, 温度增加至40℃和50℃时, 峰面积减小, 反应速率降低, 故反应温度为30℃时较合适。

2.2.2 反应时间

用20μg/L质量浓度的苦味酸, 分别选择20、30、40、50、60、70min进行反应时间实验, 结果显示, 如图3所示, 反应时间为50min时响应最大, 反应时间太短或太长都会影响反应效率。这与刘利辉[1]等报道测定苦味酸反应时间为50min一致。

2.2.3 次氯酸钠加入量

在质量浓度为20μg/L的苦味酸中分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL的次氯酸钠, 30℃下水浴反应50min。实验结果如图4所示, 次氯酸钠的加入量和峰面积成正比, 但加入2.0mL时响应最大, 因此次氯酸钠的加入量最适为2.0mL。

3 结论

通过正己烷萃取毛细管气相色谱法测定水中苦味酸的实验表明:用正己烷可以替代苯做为萃取剂, 具有较高的回收率;利用GC-ECD建立的工作曲线具有很好的线性关系, R=0.9997;方法的精确度和准确度实验表明该方法是可靠可行的。对苦味酸的衍生条件进行了优化, 最适的反应温度为30℃, 反应时间为50min, 次氯酸钠的加入量最适为2.0mL。

参考文献

[1]刘辉利, 鲜啟鸣, 邹惠仙, 等.水中苦味酸的测定[J].环境污染与防治, 2005, 27 (2) :145-147.

[2]国家环境保护总局、国家质量监督检验检疫总局.GB3838-2002, 地表水环境质量标准[S].北京:中国标准出版社, 2002.

[3]吴文辉, 向红.毛细管气相色谱法检测水中的苦味酸[J].净水技术, 1999, 18 (3) :35-37.

[4]管丽凤.水中苦味酸的测定[J].环境科学与管理, 2008, 33 (2) :123-125.

[5]谢复清, 何星存, 蒋毅民.浮选分光光度法测定水中痕量苦味酸[J].广西科学, 1994, 1 (4) :23-25.

[6]中华人民共和国卫生法制与监督司, 生活饮用水卫生规范[M].北京:中国标准出版社, 2001:283-285.

毛细管色谱柱 篇7

1 仪器与试药

1.1 仪器:

GC900B高性能气相色谱仪 (上海天普分析仪器有限公司) ;N2000色谱工作站;瑞士梅特勒-托利多MS精密天平 (梅特勒-托利多中国公司) ;AS-01无油隔膜真空泵 (北京优晟联合科技有限公司) ;SB25-12D超声波清洗机 (宁波新芝生物科技股份有限公司) ;RE-501旋转蒸发仪 (深圳市朗诚实业有限公司) ;MEM-MERT真空烘箱 (上海人和科学仪器有限公司) ;Kertone实验室超纯水机 (科尔顿中国有限公司) ;H.S11-1电热恒温水浴锅 (上海昨非实验室设备有限公司) ;SOCOREX可调容量移液器 (北京桑翌实验仪器研究所) ;AHS-6890自动顶空进样器 (北京华仪三谱仪器有限责任公司) 。

1.2 色谱柱:石英毛细管柱 (0.53 mm×1.0μm, 30 m, SE-30) 。

1.3 对照品:咖啡因对照品 (中国药品生物制品检定所) 、布洛芬对照品 (中国药品生物制品检定所) 。

1.4 试剂:水为纯化水, 其它试剂均为分析纯。

1.5 试药:布洛芬胶囊 (北京万辉双鹤药业有限责任公司, 国药准字H11022549) 。

2 测定方法确定

2.1 色谱条件

石英毛细管柱 (0.53 mm×1.0μm, 30 m, SE-30) ;载气:氮气;汽化室温度220℃;检测器温度260℃;柱温200℃。进样量:1μl, 分流比1:8。

2.2 对照品溶液的制备

2.2.1 内标液的配制。取咖啡因10mg置于10ml容量瓶内, 加甲醇溶解并定容至刻度 (每毫升含1mg咖啡因) , 即得。

2.2.2 对照品溶液的制备。精密称取布洛芬对照品50mg至25ml容量瓶中, 加甲醇溶解并定容, 即得。

2.2.3 供试品溶液的制备。

取装量差异项下的供试品内容物, 研细, 精密称取 (相当于布洛芬20mg) , 置具塞锥形瓶中, 精密加入甲醇10m L, 密塞, 精密称定重量, 超声处理 (240W, 40k Hz) 30min, 放冷, 精密称定, 用甲醇补足重量, 摇匀, 滤过。取续滤液, 即得。

2.3 专属性试验

依照处方取除布洛芬, 按样品制备工艺制成阴性对照样品, 照2.2.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液, 依上述方法测定, 结果在布洛芬出峰处阴性液无色谱峰, 结果阴性试验没有干扰, 表明本方法专属性良好。

2.4 精密度试验

精密称取布洛芬对照品20mg至10ml容量瓶中, 加甲醇溶解并定容。照上述色谱条件, 精密吸取1μl, 连续进样6次, 记录峰面积。结果, RSD=0.99%, 表明本方法精密度良好。

2.5 对照品的线性考察

分别精密称取布洛芬对照品5.0、10.0、20.0、40.0、80.0mg至10ml容量瓶中, 分别加入内标液1ml, 加甲醇溶解并定容。取上述溶液, 分别精密上述溶液吸取1μL, 注人气相色谱仪, 依照2.1项下的色谱条件测定, 记录色谱峰。以布洛芬与内标峰面积比值 (Y) 为纵坐标, 浓度 (X) 为横坐标, 绘制标准曲线, 计算回归方程为:y=0.031x一1.721 (r=0.99996) 。结果表明, 布洛芬在0.5~8mg·m L-1范围内呈良好的线性关系。

2.6 重现性试验

称取同一批的布洛芬样品6份, 按测定方法项下的方法制备供试品溶液, 测定含量, 并计算样品的RSD值, 结果RSD为0.98%, 结果表明此方法的重现性良好。

2.7 准确度试验

取对照品适量, 加入到样品中, 加入量分别相当于样品含量的80%、100%、120%。取模拟片照“含量测定”项下方法试验, 计算回收率为99.6%, RSD为0.93%。

2.8 样品稳定性试验

取同一批布洛芬样品, 按2.2.3项下的供试品制备方法制备供试品, 将供试品置室温下放置, 分别于第0、1、2、3、4、5小时, 精密吸取供试品溶液10?l注入液相色谱仪中, 记录色谱图。测定布洛芬中布洛芬的RSD=0.63%。结果表明供试品5小时内稳定。

2.9 样品含量测定

依照上述含量测定方法, 测定布洛芬三批样品中布洛芬的含量, 结果三批样品的含量分别为98.9%、99.1%、98.5%。

2.1 0 酸碱滴定法与毛细管气相色谱法的对比

采用酸碱滴定法与毛细管气相色谱法对同一样品连续测定三次, 实验结果表明两种方法具有相似的精密度和准确度。

3 结论

目前药物治疗是风湿性关节炎治疗的主要手段[1]。布洛芬 (ibuprofen) 为临床常用的非甾体解热镇痛抗炎药, 其抗炎、镇痛作用远比阿司匹林、对乙酰氨基酚、保泰松强[2]。布洛芬测定方法有分光光度法, 酸碱滴定法, 高效液相色谱法, 原子吸收法等[3,4,5,6,7]。测定布洛芬多采用酸碱滴定法测定, 酸碱滴定法专属性不强, 采用毛细管气相色谱法具有较强的专属性。酸碱滴定法与毛细管气相色谱法具有相似的精密度和准确度, 但毛细管气相色谱法方法简便。本实验表明此方法分离效果好、方法简便、快捷、准确, 、专属性好, 可用于布洛芬片中布洛芬的含量测定。

参考文献

[1]王华燕, 胡文祥, 刘接卿等.药物治疗风湿性关节炎的研究近况[J].中国医药导刊, 2007, 9 (3) :237-245.

[2]刘永琼, 刘桂桂, 刘永红.布洛芬新剂型研究与应用[J].医药导报, 1996, 15 (1) :5-8.

[3]余琛, 陈秋潮, 洪有采等.反相高效液相色谙法测定血清布洛芬含量[J].药物分析杂志, 1991, 4:34-36.

[4]PTTRE D, GRANDI M.Rapid determination of ibuprofen inplasma by high perfermance liquid chroamtography.J Chromatogra-phy, 1979, 170:278-281.

[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[M].北京:化学工业出版社。

[6]孙美玲, 周俊, 解家顺, 等.计算分光光度法测定复方布洛芬胶囊中3组分含量[J].计算机与药学, 2003, 27 (4) :241-242.

毛细管色谱柱 篇8

1 实验

1.1 试剂与仪器

气相色谱仪, Thermo Fisher Trace 1300, 配NPD检测器和FID检测器;TG-WAXms色谱柱, 30 m×0.32 mm×0.50μm二苯胺, 色标, 光复化学试剂;乙醇, 色谱纯;硅胶采样管, 6×90 mm溶剂解吸型, 内装200/100 mg硅胶;移液枪, 0~200μL, 0~1 000μL分析天平, 精度为0.000 01 g。

1.2 实验步骤

1.2.1 标准溶液

在5 m L容量瓶中, 用分析天平准确称量二苯胺0.011 84 g, 加入少量乙醇溶解, 稀释到刻度, 摇匀。此溶液为二苯胺标准储备液, 质量浓度为2 368.0μg/m L。在5 m L容量瓶中加入该标准储备液200μL, 用乙醇稀释到刻度, 得到标准应用液94.72μg/m L。

1.2.2 色谱条件

进样口300℃, 分流进样, 分流流量为50.0 m L/min;柱流量为1.5 m L/min;柱温为120℃, 保持0.5 min, 以25℃/min速率升温至230℃, 保留3.5 min;FID6211.821检测器为300℃, 尾吹气流量为40 m L/min;空气流量为350 m L/min, 氢气流量为35 m L/min;NPD检测器为300℃, 尾吹气流量为15 m L/min, 空气流量为60 m L/min, 氢气流量为2.3 m L/min, 二苯胺的保留时间为7.26 min。FID和NPD检测二苯胺的谱图如图1和图2所示。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线、保留时间、回归方程、检出限

分别配制质量浓度为5.92μg/m L、11.84μg/m L、23.68μg/m L、47.36μg/m L和94.72μg/m L的标准系列。NPD检测器测试样品与FID不是同一天, 所以, 要重新配置标准系列, 质量浓度分别为4.230μg/m L、6.345μg/m L、8.460μg/m L、12.69μg/m L和25.38μg/m L。进样量1μL, 每个质量浓度的分别进样3次, FID检测器方法检出限为0.036μg/m L, 回归方程为-833.127+1424.55X, 相关系数 (r) 为0.999 9;NPD检测器方法检出限为0.016μg/m L, 回归方程为449.219+972.509X, 相关系数 (r) 为0.999 8.FID和NPD检测的校准曲线如图3和图4所示。

2.2 色谱条件的选择

初次设定的色谱条件是:初始柱温120℃, 20℃/min升温到230℃/min, 保持5 min, 二苯胺出峰时间是8.05 min。因为分析时间比较长, 改用方法之前提到的色谱条件后, 二苯胺保留时间为7.26 min。虽然采用更高的柱温和恒温分析能有效缩短保留时间, 但考虑到真实样品采集时现场或多或少会有其他干扰物, 比如苯胺、生产工艺、其他原辅料等, 所以, 恒温分析通常不适合职业卫生现场的复杂环境所采集的样品。

2.3 解吸效率测试

取18支硅胶管, 分成3组, 各6支, 分别向每组加入二苯胺标准储备液3μL、5μL、10μL, 两端密封放置过夜, 甲醇解吸后测定。测得解吸效率在96.06%~99.45%, 结果如表1所示。

2.4 方法准确度

将配置的低质量浓度样品 (C=5.92μg/m L) 加标, 加标质量浓度为2 368μg/m L, 加标体积为5μL, 重复进样6次, 计算加标回收率, 结果如表2所示。

3 结论

综上所述, 二苯胺具有毒性, 对人体健康有很大的影响, 尤其是工作场所空气中的二苯胺, 对劳动者的健康会产生很大的影响。因此, 检测工作场所空气中的二苯胺含量是十分必要的。本文采用气相色谱法检测二苯胺, 填补了职业卫生检测方法GBZ/T160关于芳香族胺类化合物对二苯胺的检测, 保障了劳动者的工作安全。采用FID检测器检测, 平均解吸效率为97.8%.在工作中, 用解吸液直接进样, 分析简便、快速、准确;用NPD检测器检测, 在同样的色谱条件下, 对比2种检测器对二苯胺分析的检出限, 2种检测器对二苯胺检测的差异不大, 都能满足职业卫生接触限值的要求。但是, 分别对比2种检测器的检测数据, 确定FID检测器对于二苯胺的分析是切实可行的。由此可知, 使用FID检测二苯胺是值得推广的一种检测手段。

摘要：二苯胺有挥发性, 高毒, 对环境的危害极大。我国对该物质工作场所接触限值有明确的规定, 但是, 目前没有相应的分析方法。建立了FID-气相色谱法检测二苯胺的方法, 采用Thermo毛细管柱TG-WAXMS分离, 样品经乙醇洗脱直接上样分析, 同时, 用NPD检测器分析二苯胺。经比较, 2种方法的检出限无明显差别, 均能满足职业卫生检测要求。

关键词：二苯胺,色谱条件,标准曲线,精确度

参考文献

[1]李光, 查河霞, 刘祥萍.工作场所空气中二苯胺的气相色谱测定法[J].现代预防医学, 2010 (08) .

[2]谢碧俊, 杨长晓.毛细管气相色谱测定工作场所空气中对苯二胺[J].预防医学情报杂志, 2011 (11) .

毛细管色谱柱 篇9

1 毛细管电色谱技术的进展

1974年Pretorius首次成功实现在填充毛细管液相色谱中用电渗流取代高压泵，并获得了比传统液相色谱高的柱效，但是由于当时所用的柱子管径较大，CEC的优越性并未得到充分的发挥[1]。20世纪80年代，Knox等做了大量有关填充柱CEC的理论和实践工作，证明了在电渗流驱动体系中，可使用更细粒度填料，CEC在柱效上明显优于HPLC，从理论上阐述了CEC高效性的特点，以后CEC才得以迅速发展。1987年Tsuda首次提出将高压泵引入到CEC中，即成为加压毛细管电色谱（pressurized capillary electrochromatography, PCEC），是最具发展潜力的CEC操作模式。PCEC由于压力的引入，使分离过程受pH值和缓冲液的限制相对减小，对复杂样品显示了极大的分离潜力；此外一直困扰CEC的因焦耳热产生的气泡问题由于压力的引入也得到有效的解决，同时检测光程加长，提高检测的灵敏度，也可以实现梯度分离。20世纪90年代以来，CEC技术更是得到迅速发展和应用。

毛细管柱是电色谱分离分析的核心，CEC可根据固定相在柱内的存在方式，分为填充毛细管电色谱（packed column CEC, PCCEC）、开管毛细管电色谱（open tubular, OTCEC）和整体毛细管电色谱（monolithic column for CEC, MCEC）三种。填充毛细管电色谱柱是将液相色谱用颗粒固定相装入毛细空管柱而成。开管毛细管电色谱柱亦即键合色谱涂层毛细管柱。所谓整体柱，又称为棒状柱（rod column）、连续床层（continuous bed）、无塞柱（fritless column），是一种用有机或无机聚合方法在色谱柱内进行原位聚合或固化制成均一多孔的整体式柱床，主要分为有机聚合物整体毛细管电色谱柱和无机基质整体毛细管电色谱柱。

2 毛细管电色谱在中药分析领域的应用

中药的有效成分多而复杂，主要包括黄酮、生物碱、醌类、核苷、香豆素、木脂素等，有效成分含量通常较低，常用的色谱法对于中药有效成分进行分离分析存在很大的缺陷，单纯使用高效液相色谱不能很好的满足实际工作的需要。毛细管电色谱的高选择性和高柱效，为中药有效成分的分析提供了一种新途径。目前，毛细管电色谱已经应用于以下中药有效成分的分析中：

2.1 黄酮

黄酮类化合物一般是中药中的有效成分，具有多种生理活性。刘海兴等[2,3]报道了采用8 mmol/L NaH2PO4、8 mmol/L Na2HPO4 (pH=8.02）为缓冲体系，运行电压12 kV，检测波长254 nm，分别测定旱莲和槐花、槐角中总黄酮的含量，为其质量控制提供了新的方法。

酮类又称双苯吡酮或苯骈色原酮, 其基本母核由苯环与色原酮的2、3位骈合而成, 是一种特殊类型的黄酮类化合物。有研究表明, 采用乙腈-25 mmol/L醋酸缓冲液 (V/V=50∶50, pH=4.5) 为流动相, 分离电压25 kV, 分析电流稳定在5.5 A, 检测波长265 nm, 同时对蝉翼藤中10个酮类化合物进行分离, 并对其色谱分离条件进行优化研究, 取得了良好效果[4]。

2.2 生物碱

咖啡因是一种嘌呤类生物碱，具有兴奋大脑皮层、扩张血管、舒张支气管平滑肌和利尿等功能，其含量是许多药物的一个重要检测指标。国内有学者以咖啡因为模板分子，经紫外光引发原位聚合制备了高选择性分子印迹毛细管整体柱，咖啡因与其结构相似物的最高分离度为2.570，并将该毛细管色谱柱用于分离测定复方对乙酰氨基酚片中咖啡因含量，获得满意结果[5]。

2.3 醌类

大黄是常用的具有泻下、抗菌作用的中药[6,7]。颜流水[8]等用梯度加压毛细管电色谱同时测定药用大黄提取液中5种有效成分：芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。实验结果显示，大黄提取液中的5种蒽醌类化合物可在22 min内完全分离，梯度洗脱微柱液相色谱的柱效为等度洗脱微柱液相色谱的6.63倍，梯度毛细管电色谱的柱效为梯度微柱液相色谱的4.60倍。

2.4 核苷

目前研究表明，核苷类成分是冬虫夏草的主要活性成分，具有多种药理作用。中国澳门学者报道，采用5-氯胞苷阿拉伯糖苷为内标，含2 mmol/L三乙胺的4 mmol/L醋酸-醋酸氨溶液（pH=5.3）, 3%乙腈为添加剂的缓冲液，254 nm检测波长，16 min内虫草中11个核苷类成分（胞苷、尿嘧啶、尿苷、次黄嘌呤、2'-脱氧鸟苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素）得到很好的分离，其含量在天然虫草、人工虫草及人工北虫草中的差异明显，可为虫草的质量控制提供科学依据[9]。

2.5 香豆素

陈怡等[10]报道了用甲醇-乙腈-磷酸盐溶液（15 mmol/L;pH=4.8;V/V/V=22.5∶15∶62.5）为流动相，分离电压1 kV, 216 nm检测波长，对白芷醇提物及过大孔树脂柱后的洗脱成分中花椒毒酚、奥斯生诺、欧前胡素、水合氧化前胡素、白当归素五种香豆素类化合物进行了分离和定量分析，建立了适合白芷等含香豆素类化合物中药工艺优化和质量控制的PCEC方法。

2.6 木脂素

Leona等[11]以原位聚合的方法制备了大孔聚酰胺电色谱柱，分析了北五味子种子提取物中木脂素类成分，35 min内五味子素、戈米辛A、戈米辛N和五味子丙素达到很好的分离效果，并进行了定量分析，结果与HPLC的分析结果非常相似。

2.7 酚类

白藜芦醇（resveratrol）能降低血清胆固醇，对人体具有很好的保健作用。杨俊佼等[12]采用PCEC技术，乙腈-水（V/V=60∶40）为流动相，306 nm检测波长，对白藜芦醇进行了定性和定量分析研究，同时还对白藜芦醇的顺、反异构体转化以及光照稳定性等进行了研究。

另有国内学者以4-羟基苯甲酸为内标，甲醇和2 mmol/L磷酸缓冲液 (pH=3.0）为流动相，电压为-8 kV，检测波长255 nm，建立CEC分离测定复方丹参注射液中原儿茶醛（PAH）和原儿茶酸（PA）的内标定量测定方法，PAH和PA的分离度为4.854, PAH与4-羟基苯甲酸的分离度为4.620[13]。

3 毛细管电色谱的发展趋势

毛细管电色谱法对没食子酸的测定 篇10

1 原理——毛细管电色谱

这是建立在毛细管电泳和液相色谱理论基础上的一种新型的高效的微分离技术。毛细管电色谱法是用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相的一种液相色谱法, 这种技术具备了“三高”特点——灵敏度高、分辨率高和速度高。近年来, 随着电色谱理论的进一步完善, 电色谱在生化药物的分析等很多领域得到了广泛应用, 并且很好的达到了理想分离效果[1]。

2. 毛细管区带电泳法测定翻白草中没食子酸的含量

2.1 翻白草介绍

翻白草为蔷薇科植物翻白草的带根全草。主治吐血、咳血、下血、痢疾、疟疾、疔疮肿毒等[2]。近几年研究表明, 翻白草具有抗菌、止泻、降血糖、抗肿瘤等作用[3-4]。其化学成分主要有鞣质、黄酮、原儿茶酸等。到目前为止还没有关于毛细管电泳法测定翻白草中没食子酸含量的报道。

2.2 实验介绍

2.2.1 实验仪器与所用试剂

实验的仪器:高效毛细管电泳仪、色谱工作站、毛细管 (70μm内径, 57cm总长, 49 cm有效长度) 、p H计测量溶液的p H值[6]

没食子酸、翻白草购于山东聊城利群大药店、实验中所用水为重蒸馏水。

2.2.2 实验所用方法

实验前, 毛细管依次用0.5 mol/L盐酸、重蒸馏水和0.5mol/L氢氧化钠各冲洗9min左右, 然后再用缓冲溶液冲洗9min左右。连续运用四次之后, 毛细管再次重复使用上述方法清洗。

运行电压为22k V, 实验温度为25℃, 紫外检测波长为280nm, 重力进样所需时间为10s (高度差7.6 cm) 。

2.2.3 制备样品

准确称出1.0242 g翻白草研制成粉末, 加入20 m L双蒸馏水, 60℃水浴提取4 h, 过滤、洗涤并定容到50 m L溶液, 得到翻白草样品溶液。

2.3 数据处理

2.3.1 选择的电泳条件

分别配出10、30、50mmol/L三种浓度的硼砂缓冲溶液, 运行没食子酸标准溶液和翻白草样品溶液 (22 k V) , 结果显示分别为8.232、10.025、15.651 min。由此测定, 随着硼砂浓度的逐渐增大, 没食子酸迁移的时间越长。在22 mmol/L硼砂溶液中, 又测出运行电压对没食子酸迁移时间之间的关系, 当电压分别为14、18、22k V时, 没食子酸的迁移时间表现为13.560、缓冲12.192、9.812、9.190、7.652 min。考虑到电流的稳定性和大小的情况, 选择紫外检测波长为280 nm, 电压22 k V, 22mmol/L硼砂溶液, 作为测定条件。

2.3.2 定量分析

2.3.2. 1 标准曲线的绘制

首先配制七种不同浓度的标准溶液的没食子酸。在上述条件下每种标准溶液各运行4次, 取其平均值。看图显示的数据如下:

2.3.2. 2 样品含量测定结果

样品溶液在已选定的电泳条件下运行。如上翻白草样品溶液的电泳分离谱图所得结果。翻白草中没食子酸含量显示为0.598mg/g (RSD=4.01%) (n=5) 。

摘要：本文采用毛细管区带电泳法测定了翻白草中没食子酸的多少。测得翻白草中没食子酸的含量为0.58 mg/g (RSD=4.01%) (n=5) 。本法简便、快速。

关键词：毛细管电色谱,翻白草,没食子酸

参考文献

[1]曾俊玲, 陈希.USB接口在通信方面的研究和应用.计算机仿真, 2003, (2) .

[2]江西新医学院编.中药大辞典, 上册, 上海:上海科学技术出版社, 1977, 5674

[3]孟令云, 孔一杰, 徐文弟等.翻白草微量元素的含量分析[J].微量元素与健康研究, 2001, 18 (2) , 41-42

[4]苏力, 孟令云, 葛艳梅等.翻白草14种微量元素的测定与分析[J].微量元素与研究, 2004, 21 (1) , 36

[5]张颖, 张立木, 高允升等.高效液相色谱法测定翻白草中没食子酸含量.中国医院药学杂志, 2006, 26 (3) , 355-356