奶牛人工授精技术交流

奶牛人工授精技术交流（共7篇）

奶牛人工授精技术交流 篇1

人工授精是改良乳牛的一种行之有效的方法, 国内外已广泛推广应用。实行人工授精, 由于充分利用良种公牛, 既可加速牛群改良, 提高牛群平均产乳水平, 又能提高受胎效果, 减少疾病传染, 节约费用, 有力地促进了乳牛业的发展。本人结合实际谈几点人工授精技术要点, 供同仁交流。

1 发情鉴定

母牛的发情鉴定是适时配种和提高人工受精率的重要前提。发情鉴定主要是两种。

1.1 外部观察法

每天观察时, 如果有母牛发情你会看到发情母牛, 兴奋不安。寻找其他发情母牛, 嗅闻其他母牛外阴。站立或在运动场来回走动。爬跨其他母牛并接受其他母牛爬跨, 不发情的母牛不接受爬跨;还有就是发情母牛举尾, 食欲减退, 产奶下降;发情母牛外阴红肿, 发情初期阴道粘液量多, 透明而粘稠, 后量少略现浑浊。

1.2 直肠检查法

就是把手进入直肠来触摸卵巢上的卵泡的发育情况, 如大小、质地、形状等, 以此查明牛的发情阶段, 判断真假发情, 确定输精时间。

2 输精前准备

2.1 输精器的准备

牛用玻璃或金属输精器, 可用蒸汽、75%的酒精或放入高温干燥箱内消毒;输精胶管因不宜高温, 可用酒精或蒸汽消毒。输精器每头牛准备1～2支。

2.2 精液准备

2.2.1 精液剂型

奶牛人工授精的精液剂型有:常温精液、颗粒精液和细管精液3种。

常温精液是将采集到的公牛精液通过稀释处理, 分装保存在3～5℃冰箱内, 不能超过4天, 在取带过程中, 应置放在有冰块的保温瓶内, 避免震荡。由于该型保存时间短, 仅局限于在公牛站周围的奶牛场户使用。

颗粒精液是将稀释后的精液, 在超低温条件下滴冻成黄豆粒大小, 收集在专用的布袋中, 贮存在液氮罐中。由于该剂型在制作、保存、使用过程中易造成污染, 在输精操作过程中又不方便, 所以使用越来越少。

细管精液是将稀释后的精液, 分装在特制的塑料细管内, 再置入液氮罐内保存。由于其有着与外界接触面小, 在使用过程中又携带方便, 易解冻, 输精时受污染的可能性小等优点, 所以使用方便。

2.2.2 精液质量检查

2.2.2. 1 冷冻精液的解冻

由于剂型不同, 冷冻精液的解冻方法也有差别。颗粒冻精解冻的稀释液应另配, 细管冷冻精液不需要解冻稀释液。

颗粒精液的解冻:先配制解冻稀释液, 一般常用的是2.9%柠檬酸溶液、维生素B12 (0.5毫克/毫升) 溶液、葡柠液 (葡萄糖3%、二水柠檬酸钠1.4%) 。各种解冻液装于安瓿中, 经灭菌后长期备用。

解冻时, 先取1～1.5毫升解冻液放入小试管内, 浸入40℃的热水中, 经过2～3分钟后投入1～2粒精液颗粒。待融化1/2～1/3时, 在常温下轻轻摇动至完全解冻后, 检查评定精子的活力, 然后进行输精。

细管精液的解冻:由液氮罐内迅速取出1支细管冷冻精液, 立即投入40℃的热水中, 待精液基本溶化时, 用灭菌小剪剪去细管的封口端, 装入细管输精器中。细管精液的品质检查, 可按批抽样评定, 不需要每支精液现场做检查, 否则将会减少每头份精液的输精量及输入精子数。

注意:精液解冻后必须保持所要求的温度, 严防在操作过程中温度出现回升或回降;冷冻精液解冻后不宜存放时间过长, 应在1小时内输精。

2.2.2. 2 精液质量检查

为提高人工授精受胎率, 首先必须保证输精的精液质量。在输精前首要进行精液质量的检查:在取样时, 冷冻颗粒精液取出液罐后, 看颗粒是否完整, 颜色是否正常, 有无杂质;细管精液取出液罐后, 检查管体是否完好, 细管上的公牛号是否清晰。颗粒冻精最好每一颗解冻后都检查, 细管精液则按每一批数量抽检2～3支。将被检精液滴一点在玻片上, 用盖玻片盖在液面, 在400倍显镜下观察精子活力。

2.3 母牛的准备

将接受输精的母牛固定在栏内, 尾巴固定于一侧, 用0.1%新洁尔灭溶液清洗消毒外阴部, 再用酒精棉球擦拭。

2.4 输精人员的准备

输精员要身穿工作服, 指甲剪短磨光, 戴一次性直肠检查手套或手臂洗净擦干后用75%的酒精消毒, 待完全挥发干再持输精器。

3 输精方法

配种时左手戴好长臂手套, 用肥皂水沾湿后插入母牛直肠, 握住子宫颈的进口处, 同时胳膊向下用力开阴门;右手持输精枪由阴门插入阴道, 先向上斜插一段, 避开尿道口, 而后平插, 一直插到子宫颈口。此后要双手配合把输精枪前端引入子宫颈管内, 接着再往里插, 穿过2～4道皱褶样的螺旋状组织就进入了子宫体, 即可将精液注入子宫体基部。注入精液时, 要把输精枪稍微往后拉一下, 避免输精枪口被阻。如果发现大量精液残留在输精枪内, 要重新输精。输精时推射速度不宜过快, 应一边推进, 一边缓缓活动输精枪。输精完毕后, 应用左手捏住阴唇下部有节奏地按摩几下, 这样可以刺激阴蒂, 提高母牛的兴奋性, 从而提高受胎率。

4 输精操作注意事项

输精操作时, 若母牛努责过甚, 可采用喂给饲草、捏腰、拍打眼睛、按摩阴蒂等方法使之缓解。若母牛直肠呈罐状时, 可用手臂在直肠中前后抽动以促使松弛。

操作时动作要谨慎, 防止损伤子宫颈和子宫体。

试验表明, 子宫颈深部、子宫体、子宫角等不同部位输精的受胎率没有显著差别。但是输精部位过深容易引起子宫感染或损伤, 所以采取子宫颈深部或子宫体输精是比较安全的。

要检查子宫状况和精液品质。精子活力应达3.5以上, 对子宫内膜炎母牛暂不输精, 抓紧治疗。解冻后最好立即输精, 延期输精应正确保存, 细管冻精解冻后以0℃～4℃保存为好。

奶牛人工授精技术交流 篇2

猪的人工授精技术对加速改良猪的品种、控制疾病传播、大幅降低经营成本、提高养猪经济效益具有非常积极的现实意义。随着规模化养猪的发展，猪的人工授精技术在湘乡市迅速推广，推行建立家畜人工授精站，大面积推广应用人工授精技术，大幅度提高了优秀公猪的利用率，使公母猪比例由原来高于1:50降低到1:300以下，平均受胎率一直稳定在87%以上。

1人工授精的相关设备和设施 1.1采精室

采精室一般在公猪舍的一端，为独立的房间。采精室内备有一个固定母猪台，高度以45～50㎝为宜，最好使用活动式母猪台，以便根据猪的大小进行调节。采精室面积为12㎡（4.0m×3.0m）左右；母猪台一般固定在采精栏的中央或一端靠墙，以一端靠墙。地面的一端应略有坡度，并在母猪台后面或周围铺设防滑地板胶。地面不应太光滑，以免公猪行走或爬跨时跌伤，损坏趾蹄。

1.2精液处理室

精液处理室是用来对公猪精液进行检查、稀释、保存的地方，与采精室紧密相连。二者通过墙壁上的双层玻璃口相互传递采精杯及精液。主要需要如下设备和用具：显微镜、双蒸水器、磁力搅拌器、干燥箱、普通冰箱、集精杯、17℃恒温冰箱、聚乙烯塑料袋或食品保鲜袋、精子密度仪、输精管、精密电子天平、多孔水浴锅、输精瓶（袋）、聚乙烯手套、精液分装设备、精密温度计、量筒、量杯、烧杯、漏斗、纱布、滤纸、玻璃棒、剪刀、药匙、载、盖玻片，其它（如毛巾、洗衣粉、脱脂棉、润滑剂等）。还要购买稀释粉。

2、公猪的爬跨训练

瘦肉型后备公猪一般4～5月龄开始性发育，7～8月龄左右进入性成熟。国内一般的养猪企业，后备公猪6月龄左右体重达90～100㎏时结束测定，此时是决定公猪去留的时间，但还不能进行采精调教。准备留作采精用的公猪，从7～8月龄开始调教。

调教前，先将其它公猪的精液或其胶体或发情母猪的尿液涂在母猪台上面，然后将后备公猪赶到调教栏，此时，若调教人员可发出类似发情母猪叫声的声音，能刺激公猪性欲的提高。一旦有较高的性欲，公猪慢慢就会爬跨母猪台了。如果有爬跨的欲望，但没有爬跨，最好第2天再调教。一般1～2周可调教成功。

每次调教的时间一般不超过15～20分钟，每天可训练1次，但1周最好不要少于3次，直至爬跨成功。调教成功后，1周内每隔1天就要采精1次，以加强其记忆。

3采精前的准备和采精的方法 3.1采精前的准备

3.1.1采精杯。将盛放精液用的食品保鲜袋或聚乙烯袋放进采精用的保温杯中，工作人员只接触留在杯外的袋的开口处，将袋口打开，环套在保温杯口边缘，并将消过毒的2层过滤纸罩在杯口上，用橡皮筋套住，连同盖子放入37℃的恒温箱中预热。

3.1.2公猪。采精之前，应将公猪尿囊中的残尿挤出。若阴毛太

长，则要用剪刀剪短，防止操作时抓住阴毛和阴茎而影响阴茎的勃起，以利于采精。用水冲洗干净公猪全身特别是包皮部，并用毛巾将包皮部擦干净，避免采精时残液进入精液中污染精液，也可以减少部分疾病传染给母猪，从而减少母猪子宫炎及其它生殖道或尿道疾病的发生，提高母猪的情期受胎率和产仔数。

3.1.3采精室。采精前先将母猪台周围清扫干净，特别是公猪精液中的胶体，防止公猪走动时打滑，造成扭伤，影响生产。安全区应避免放置物品，采精室内避免积水、积尿。

3.2采精的方法

采精一般有两种方法，即假阴道采精法和徒手采精法。但目前最常用的为徒手采精法。

徒手采精法所需设备简单（如采精杯、手套、过滤纸等），操作简便。具体做法如下：将采精公猪赶到采精室，先让其嗅、拱母猪台，工作人员用手抚摸公猪的阴部和腹部，以刺激其性欲。当公猪性欲达到旺盛时，将爬跨母猪台，并伸出阴茎龟头来回抽动。此时，若采精人员用右手采精，则要蹲在公猪的左侧，右手戴聚乙烯制双层手套，抓住公猪阴茎的螺旋头处，顺势拉出阴茎，并顺势稍微回缩，直至和公猪阴茎同时运动，左手拿采精杯；将公猪包皮内的尿液挤出后，应将外层手套去掉，以免污染精液或感染公猪的阴茎。若用左手采精，则要蹲在公猪的右侧，左手抓住阴茎，右手拿采精杯。这样做使采精人员面对公猪的头部，主要是能够注意到公猪的变化，防止公猪突然跳下时伤到采精人员。采精的同时，采精人员如能发出类似母猪发情

时的“呼呼”声，对刺激公猪的性欲将会有很大的作用，有利于公猪射精。手握阴茎的力度太大或太小都不行，应以不让其滑落并能抓住为准。用力太小，阴茎容易脱掉，采不到精液；用力太大，一是容易损伤阴茎，二是公猪很难射出精液。公猪一旦开始射精，手应立即停止捏动，而只是握住阴茎；射精结束后，应马上捏动，以刺激其再次射精。

应注意的是，采精杯上套的2层过滤用的过滤纸，使用前不能用水洗，若用水洗则要烘干。因水洗后，相当于对采得的精液进行了部分稀释，即使水分含量较少，也将会影响精子的浓度。

采精结束后，公猪一般会自动跳下母猪台。对于采得的精液，先将过滤纸及上面的胶体丢掉，然后将卷在杯口的精液袋上部撕去，或将上部扭在一起，放在杯外，用盖子盖住采精杯，迅速传递到精液处理室进行检查、处理。

4精液的检查、稀释、分装与保存 4.1精液品质的检查

从采精递过来的精液，要马上进行鉴定，以便决定可否留用，从而保证母猪的受胎率和产仔数。检查精液的主要指标有如下几个：精液量、颜色、气味、精子密度、精子活力、酸碱度、黏稠度、畸形精子率等。每份经过检查的公猪精液，都要有一份详细的检查记录，以备对比及总结。

检查前，将精液转移到在37℃水浴锅内预热的烧杯中，或直接将精液袋放入37℃水浴锅内保温，以免因温度降低而影响精子活力。

整个检查过程要迅速、准确，一般在5～10分钟内完成。

4.1.1精液量。后备公猪的射精量一般为150～200mL，成年公猪为200～300mL，有的高达700～800mL。精液量的多少因品种、品系、年龄、采精间隔、气候和饲养管理水平等不同而不同。

4.1.2颜色。正常精液的颜色为乳白色或灰白色，精子的密度愈大，颜色愈白；密度越小，则颜色越淡。

4.1.3气味。正常的公猪精液含有公猪精液特有的微腥味，这种腥味不同于鱼类的腥味，没有腐败恶臭的气味。

4.1.4精子密度。指每毫升精液中含有的精子量，它是用来确定精液稀释倍数的重要依据。正常公猪的精子密度为2.0～3.0亿个精子/mL。精子密度一般用显微镜检查法。在400倍视野下观察精子的密度，判断标准如下：精子之间的空隙小于1个精子；每毫升原精液一般含有精子3～4亿个以上。精子之间的空隙可容纳1～2个精子，每毫升原精液一般含有精子1.5～3亿个。

4.1.5精子活力。精子活力的高低关系到与配母猪受胎率和产仔数的高低，因此，每次采精后及使用精液前，都要进行精子活力的检查，以便确定精液能否使用及如何正确使用。

精子活力的检查必须用37℃左右的保温板，以维持精子的温度需要：将载玻片和盖玻片放在保温板上预热至37℃左右后，再滴上精液，在显微镜下进行观察。精子活力评定一般采用10级制，即在显微镜下观察一个视野内的精子运动，直线运动的精子占总数的零点几，则为零点几级；新鲜精液的精子活力以高于0.7为正常；使用稀

释后的精液，当活力低于0.6时，则应弃去不用。

4.1.6畸形精子率。畸形精子指断尾、断头、有原生质、头大、双头、双尾、折尾等精子，一般不能直线运动，不仅受精能力较差，而且影响精子的密度。若通过摄像显示仪观察，则很容易区分。若用普通显微镜观察，则需染色。公猪的畸形精子率一般不能超过20%，否则应弃用。

4.2精液的稀释

经过检查的精液，差的弃去，留品质好的进行稀释处理。优良公猪利用率的高低，关键在于精液处理保存的好坏。处理后的精液和原精液相比，一是扩大了与配母猪头数，能迅速将优秀公猪基因推广开来；二是增加了精液的营养成分，有利于精液的保存；三是便于运输。

4.2.1稀释液的准备。稀释剂有多种配方，分短期保存和长期保存等。短效稀释剂一般要在3天内使用，否则效果较差。长效稀释剂可保存5～8天，但配种受胎率及母猪产仔数不及短效稀释剂。稀释剂在采精前用双蒸水进行混合溶化，可用磁力搅拌器以促进溶解。然后，在水浴锅内进行预热，备用，也要配制好后先贮存，但要在24小时内使用完。

4.2.2精液稀释方法。稀释前，应对自己所需精液的稀释头份进行确定。但一般采用多次稀释法，如150mL原精液加入150mL稀释液形成300mL稀释精液，300mL稀释精液再加入300mL稀释液形成600mL稀释精液。注意每次稀释后，需要检查精子活力，并于15～20分钟后进行第2次稀释。

稀释时，将稀释液顺着盛放精液的量杯壁慢慢注入精液，并不断用玻璃棒搅拌，以促进其混合均匀；不能将稀释液直接倒入精液，因精子需要一个适应过程。

4.3稀释后精液的分装

精液的分装，有瓶装和袋装两种，装精液用的瓶子和袋子均为对精子无毒害作用的塑料制品。瓶装的精液分装时简单方便，易于操作，一般为80mL一瓶。

分装后的精液，要逐个粘贴标签，一般同一个品种贴同一种颜色的标签，便于区分。

4.4稀释后精液的保存

分装后的精液不能立即放入17℃左右的恒温冰箱内，应先留在冰箱外1小时左右，让其温度慢慢下降，以免因温度下降过快而刺激精子，造成死精子增多等。放入冰箱时，不同品种的公猪精液应分开放置，否则匆忙中容易拿错精液。从放入冰箱开始，每隔12小时要摇匀1次精液，因精子放置时间过长，会大部分沉淀。对于一般猪场来说，可在早晨上班后，下午下班前各摇匀1次。为了便于监督，每次摇动都应有摇动时间和人员的记录。

5、输精

5.1发情母猪的鉴定

母猪的发情，后备猪比生产母猪难于鉴定，外血缘母猪比国内品种母猪难于鉴定，一般可通过下面的方法进行鉴定：发情的母猪，外阴开始轻度充血红肿，后较为明显，若用手打开阴户，则发现阴户内

表面颜色由红到红紫的变化；部分母猪爬跨其它母猪，也任其它母猪爬跨，接受其它猪只的调情；当饲养员用手压猪背时，母猪会由不稳定到稳定；当赶一头公猪至母猪栏附近时，母猪会表现出强烈的交配欲。当母猪阴户呈紫红色、压背稳定时，则说明母猪已进入发情旺期。

5.2适时输精

给母猪输精时，新鲜精液和保存精液有一个时间的差别。新鲜精液因精子活力强、死精率低，故配种时母猪受胎率高；保存精液随着保存时间的延长，精子活力逐渐变弱，死精子数增多，母猪受胎率偏低。一般（母猪断奶后4～5天发情）上午发现站立反应的母猪，下午应输精1次，第2天上午再进行第2次输精；下午发现站立反应的母猪，第2天上午输精1次，第3天上午再进行第2次输精。

5.3输精的准备

输精前，精液要进行镜检，检查精子活力、死精率等。死精率超过20%的精液不能使用。精液放在34℃～37℃的恒温水浴锅中升温10～20分钟。对于多次重复使用的输精管，要严格清洗、消毒，使用前最好用精液洗1次。母猪阴部冲洗干净，并用毛巾擦干，以免将细菌等带入阴道。

5.4输精方法

输精时，先将输精管海绵头用精液或人工授精用润滑胶润滑，以利于输精管插入时的润滑，并赶一头试情公猪在母猪栏外，刺激母猪性欲的提高，促进精液的吸收。

用手将母猪阴唇分开，将输精管沿着稍斜上方的角度逆时针方向

慢慢插入阴道内。当插入25～30㎝左右时，会感到有点阻力，此时，输精管顶已到了子宫颈口，用手再将输精管左右旋转，稍一用力，顶部则入进入子宫颈第2～3皱褶处，发情好的猪便会将输精管锁定，回拉时则会感到有一定的阻力，此时便可进行输精。

用输精瓶输精时，当插入输精管后，将输精瓶瓶盖的顶端折断，插到输精管尾部就可输精；精液袋输精时，只要将输精管尾部插入精液袋入口即可。为了便于精液的吸收，可在输精瓶底部开一个口，利用空气压力促进吸收。

奶牛的人工授精技术 篇3

输精前要准确鉴定奶牛发情, 把握好适当的输精时间。一般认为在奶牛“静立”强拉位之后到回复期前实施配种能取得较高受胎率。也可根据卵泡发育状况判断, 在卵泡体积增大有一触即破的感觉时为最佳配种期。从实际出发, 如早晨发情, 下午配种;中午发情, 晚上配种;晚上发情, 次日凌晨配种, 能取得较高受胎率。

确定好准确的输精时间后, 从液氮罐中取出预配精子, 在38℃~40℃的温水中迅速解冻, 装枪, 套好枪套筒。配种前, 让助手牵住牛尾, 暴露肛门、阴门。用消毒好的湿毛巾洗净外阴。然后在配种手套上沾上水, 轻揉肛门, 使肛门括约肌松弛, 手臂缓缓进入直肠, 掏出粪便, 从子宫颈侧面伸入下侧, 握住宫颈。另一只手持输精枪以45°角向上进入阴门前庭后略向下方进入阴道宫颈段。在枪头到达穹腔时, 要特别注意输精手法, 双手配合, 通过不断调整输精枪前进的角度, 避开穹腔皱褶, 将抢引入子宫颈, 将精液注入排卵侧子宫体的大弯处。若不能确定哪侧卵巢排卵, 可在右侧子宫角大弯处注入50%~60%的精液, 将剩余部分注入角间沟或左侧子宫角大弯处, 正常情况下右侧排卵的几率大于左侧排卵的几率, 更高于两侧同时排卵的几率。然后慢慢抽出输精枪, 轻按牛背后即完成输精。有条件的牧场应取输精枪上的剩余精液进行镜检, 以确保精子活力。

人工控制奶牛性别技术 篇4

1 胚胎鉴定法

胚胎性别鉴定技术就是利用胚胎分割和冷冻技术对奶牛的胚胎进行性别鉴定。用冷冻精液对母牛进行体外授精, 生产大量纯种胚胎, 然后人为采用机械或化学方法, 进行早期胚胎性别鉴定。事实证明, 胚胎不仅能够进行性别鉴定, 而且分割后的胚胎发育正常;但是缺点在于技术繁琐、设备造价昂贵, 因此难以实现大范围推广和应用。

2 外环境控制法

使用外环境控制法实现性别控制的途径有多种, 但原理大致有以下3种。

1) 控制营养与年龄。

饲料供应不足或采食酸性饲料的母牛多产雄犊;反之, 饲料供应充足或采食碱性饲料的母牛多产雌犊。年老的母牛多产雄性后代;中年母牛多产雌性后代;父母双方都是中年牛多产雌性后代。

2) 控制母牛生殖道的pH值。

由于含X染色体的精子对酸性环境的耐受力比含Y染色体的精子强, 因此, 通过控制母牛生殖道的pH值, 可以达到控制犊牛性别的目的。

3) 控制授精时间。

排卵前一定时间授精的母牛多产雌性犊牛。虽然控制授精时间较简单, 但该法对人授精的技术要求较高且性别控制准确率较低。

3 精子分离法

胚胎鉴定法和外环境控制法虽然理论上可以成立, 但是在现实应用中都存在着一些不足, 以致无法推广和普及。所以, 研究一种既能减轻养殖户 (场) 负担又能达到较高的性别控制准确率的方法显得意义重大。通过对含X染色体和含Y染色体的精子进行分离再实行人工授精从而有效控制性别的技术, 正从若干种技术中脱颖而出, 并逐渐实现了产业化, 越来越多地被应用于养殖户 (场) 的实际生产中。

奶牛染色体的数目为60条, 其中58条为常染色体, 另外2条为性染色体 (即X染色体和Y染色体) 。一般认为雄性动物的性染色体组合为XY型, 而雌性动物的性染色体组合为XX型, 因此精卵结合时就决定了动物的性别。如果将雄性动物的精子进行染色体分离, 获得纯种的X染色体, 使用这种纯X染色体的精子授精配种产生的胚胎则都为雌性。

3.1 精子的来源

农业部对于种畜禽有一整套完善的生产许可标准, 《种畜禽生产经营许可证管理办法》第三条规定:畜禽原种是指经国家及省级畜禽品种审定委员会认定并公布的培育品种 (配套系) 和地方良种, 国务院畜牧行政主管部门批准引进的国外优良畜禽原种 (纯系) 和曾祖代配套系。而符合精子分离技术所需的种牛更是要优中选优, 种公牛的来源主要有3种途径:一是从加拿大直接引入活体种公牛;二是通过在加拿大配种引入妊娠母牛在国内生产;三是从美国、加拿大等国家引进优秀种公牛的冷冻精液。

3.2 精子分离的方法

含X染色体和含Y染色体的精子之间存在着微弱的生物学差异 (如比重、电荷运动性、DNA含量、表面抗原等) , 从而为分离精子提供了依据。因此, 可以通过沉降法、电泳法、免疫学方法、流式细胞光度法等多种方法来实现精子分离。

1) 沉降法。

原理是含X染色体的精子的沉降速度比含Y染色体的精子快。有研究显示, 将认为富含X染色体的精子的部分收集起来并给母牛输精, 母牛所产雌犊的比例为65.4%。虽然含X染色体和含Y染色体的精子的比重有所不同, 但是差别并不是很大, 且比重会随精子的成熟情况而有所变化, 因此该种方法的效果不是十分理想。

2) 电泳法。

原理是精子膜电荷的大小取决于核蛋白结合的唾液酸的含量。含X染色体的精子与含Y染色体的精子膜电荷的分布存在差异, 根据它们表面所带电荷量的不同, 通过电泳将其分离。有研究显示, 通过该法一般可获得75.5%的雌犊, 所以该法的性别控制准确率也不是十分理想。

3) 免疫学方法。

原理是雄性哺乳动物细胞膜上存在特有的H-Y抗原, 而雌性动物细胞膜上没有。通过检测胚胎的细胞膜上是否存在H-Y抗原, 即可鉴定胚胎性别。虽然这种方法分离精子的效率较高, 但经处理后的精子数量较少且活力较低, 很难在生产中应用。

4) 流式细胞光度法。

原理主要是基于DNA含量的差异。研究证明, 含X染色体的精子的DNA含量比含Y染色体的精子高3.8%。根据这个原理, 对精子进行荧光染色, DNA含量高的含X染色体的精子着色量大, 含Y染色体的精子着色量相对小一些, 通过这个差别在专业分离仪器上进行分离。该法分离精子的准确率可以达到90%以上。

3.3 精子分离的操作

根据以上几种精子分离法的比较发现, 流式细胞光度法分离精子最为有效和实用, 该法的具体操作和注意事项如下。

1) 精子的染色。

该染色过程对精子的品质不会产生不良影响。因为染色所应用的染色剂是一种安全的荧光染料, 其只对活细胞的DNA染色。为了保证精子与染料结合良好, 要求精子与荧光染色分子的亲和性相对均匀一致。

2) 精子的分离。

经过染色后的精子在经过流式细胞仪时, 由于喷嘴产生高频率的振动, 高速喷射出的精液就形成肉眼看不见的包含单个含X染色体的精子和单个含Y染色体的精子的微小液滴。微小液滴逐个与激光交截, 精子上的荧光染料被激光激发产生蓝光。蓝光被正、侧2个光电倍增管接收后放大荧光信号, 光电倍增管将接收的信号传入主控机, 主控机根据荧光强度的差别 (由于含X染色体的精子所含DNA的量比含Y染色体的精子多, 其DNA结合的较多的荧光染料所激发的荧光强度比含Y染色体的精子强) 分辨出哪个是含X染色体的精子、哪个是含Y染色体的精子, 同时给包含单个含X染色体的精子或含Y染色体的精子的微小液滴加载正电荷或负电荷。携带正电荷或负电荷精子的液滴在电场力的引导下, 分别落入不同的收集容器中, 这样2种精子即被分离。

3) 精子的罐装。

将分离的精子进行细管罐装, 每支细管含220万个含X染色体的精子, 每头种公牛每年大约能生产2万～3万支细管的精子。然后, 将装有纯种X染色体的精子的细管经过真空冷冻以后, 放入液氮罐 (温度为-196 ℃) 保存。

3.4 人工授精

经过流式细胞仪分离的冷冻精液比普通冷冻精液的价值高很多, 因此, 在实际生产中这种细管精液要求配以较严格的人工授精操作。

1) 选择适宜母牛。

育成牛年龄需在15月龄以上、体重需达360 kg以上;经产牛需在产后60 d以上, 并且要保证分娩后没有发生胎衣不下或子宫炎症;膘情适中, 过肥或过瘦都会影响受胎率。

2) 检查精子活力。

将解冻后的精液于显微镜下观察, 100%精子呈直线前进运动的判为1.0级, 90%精子呈直线前进运动的判为0.9级, 依次类推。牛冷冻精液解冻后精子的活力要求在0.3以上, 用于性别控制的精子由于经过筛选, 活力一般在0.4～0.5。经过精子活力检查以后再进行人工授精, 会大大提高母牛的受胎率。

3) 控制母牛发情。

在人工授精之前的15～20 d, 要对母牛进行一定的处理, 以控制其发情时间。将孕酮阴道栓置于母牛阴道中, 一般药物取出后, 母牛会出现集中发情的现象 (即同期发情) , 这样就可以集中对母牛进行人工授精。

4 结语

奶牛人工授精技术交流 篇5

1 奶牛的初配月龄、发情周期和发情症状

1.1 初配月龄

15月龄的荷斯坦牛，其体重达350 kg以上及体尺达到15月龄标准可参加配种。18月龄的荷斯坦牛，必须实施配种。成年乳牛产后第1次配种时间掌握在分娩后50 d以上。

1.2 发情周期

一般为18～24 d，平均为21 d。大多数的发情持续期为10～24 h，但有的高产牛没有性欲表现或者时间短暂。1.3发情症状(1)行为变化：敏感躁动，有人或其他牛靠近时，回首眸视;寻找其他发情母牛，活动量、步行数大于常牛5倍以上;嗅闻其他母牛外阴，下巴依托它牛臀部并摩擦;压捏腰背部下陷，尾根高抬;外阴有明显的煽动;有的食欲减退和产奶量下;爬跨它牛或“静立”接受它牛爬跨，后者是重要的发情鉴定征候。(2)身体变化：外阴潮湿，阴道黏膜红润，阴户肿胀外阴有透明、线状粘液流出，或粘污于外阴周围，粘液有强的拉丝性。臀部、尾根有接受爬跨造成的小伤痕或秃毛斑;有时体表潮湿，有蒸腾状;60%左右的发情母牛可见阴道出血，这大约在发情后2 d出现。这个征侯可帮助确定漏配的发情牛，为跟踪下次发情日期或为应用前列腺素调整发情日期提供可靠依据。

2 选择冻精液和适时输精

2.1 冻精的处理

(1)液氮罐存放要保持整洁，防止曝晒，应有添加液氮的记录或用液氮罐磅重法来显示液氮重每年应进行一次清洗与库存冻精的清点工作。精液储存在高真空保温的液氮罐内;液氮罐应放置在清洁、干燥、通风的木质垫板上;液氮水平面应保持在18 cm以上，至16 cm时，即应添加液氮，可用兰红二色安瓶指示管或固定式磅称判别液氮并作好冻精进、取和库存记录。在平时凡发现液氮罐外壳结霜或夏天有水珠现象时，应引起高度重视，必要时更换性能良好的液氮。(2)精液的取出：除本次需要取出的冻精外，其他冻精不可提到罐口以下3.5 cm线之上，寻找冻精超过10 s，应将分装桶放回液氮内，然后再提起寻找，以保持冻精的冷度;取出后置38℃水浴瞬时解冻或其他行之有效的解冻方法;每一头公牛精液应放置在同一分装桶内，并有分装清单，清单上包括公牛号、数量和取用记录;在清洗液氮罐时，预备好的清洁液氮罐应并列放置，快速转移，冻精在罐外的时间不能超过5 min。(3)精液镜检质量：活力≥0.35以上，直线运动精子密度≥1 000万个，顶体完整率≥40%，畸形精子率≤20%，非病原细菌数≤1 000个/ml。

2.2 适时授精

一般在发情中后期进行，静立、接受爬跨和阴户流出透明具有强拉丝性粘液(粘丝提拉可达6～8次，二指水平拉丝可成“Y”状)，是输精最宜时段。由于实际大多是2次/d的观察发情，因此很少能观察到发情的起始时间。“开始发情”的时间多数只能依靠估测。“开始发情”后16～24 h可视为最佳配种期。通常在早晨发现牛发情的，应在下午输精;在下午发现发情，应在次日早晨。

一般输一次精即可，只有当触摸卵泡诊断延迟排卵时，才有需要进行第2次输精。

3 配种技术

(1)直肠检查子宫和卵巢(泡)态势及把握子宫颈输精是规范的人工输精技术，其技术要点和程序是：手臂涂以润滑剂，轻柔触摸肛门，使肛门肌松弛;手臂进入直肠时，应避免与努责与直肠蠕动相逆方向移动，分次掏出粪便，避免空气进入直肠而引起直肠膨胀;用手指插入子宫颈的侧面，伸入宫颈之下部，然后用食、中、拇指握抓住宫颈，此时宫颈比较结实，阴道质地松软，宫体似海绵体(触摸后为有弹性的实感);输精器以35～45角度向上进入分开的阴门前庭段后，略向前下方进入阴道宫颈段;把握宫颈的整个手势要柔和，在输精器进入宫颈前，可将宫颈靠在骨盆边上，并轻轻挤压宫颈周围的阴道壁，使输精器只能进入子宫颈口，而不会误入阴道穹隆;精液的注入部位是子宫体与子宫角的结合部，在确定注入部位无误后注入精液，在技术熟练的条件下，可将精液注入排卵侧的子宫角大弯部。

(2)输精时注意事项。子宫炎症会妨碍受精卵的着床和发育。因此，输精前及输精中应保持牛阴户周围的清洁及输精器具的干燥与卫生(输精枪外应使用薄膜防护套);子宫创伤出血对精子与受精卵的存活不利应尽量避免创伤。可应用对精子无害、对生殖道黏膜无刺激的润滑剂;在输精器接近子宫颈外口时，正确的方法应是用把握子宫颈的手向阴道方向缓缓移动，使之接近输精器前端，而不是用力将输精器推向子宫颈;输精器前端在通过子宫颈的横行而不规则排列的皱褶时的手法是输精的关键技术。可用改变输精器前进方向、回抽、滚动等操作技巧配合子宫颈的摆动，使输精器前端柔顺地通过子宫颈。禁止以输精器硬戳的方法进入。

4 验胎和繁殖挡案的建立

(1)验胎，早期诊断可减少饲料损失、确定妊娠期，计算预产期和安排干奶期。验胎有直肠检查和激素实验两种方法，通常只用直肠检查。授精后第21～24 d，触摸到2.5～3cm发育完整的黄体，表明90%已怀孕了。在授精后60 d、180～210 d进行2次验胎，第1次是为确诊有胎，第2次是确保有胎，准备干奶。第1次验胎时间在技术保证的前提下，可提早到输精后的40～60 d进行。

(2)验胎后对于输精不成功和没有受胎及时分析原因和对有繁殖障碍牛采取措施。

浅谈怎样做好奶牛人工授精 篇6

1 输精准备

输精前应做好母牛的准备, 同时做好输精器材和精液的准备, 输精器应经过消毒。用于人工授精的冷冻精液应来源于经后裔测定选择的优秀公牛的优质精液。冷冻精液解冻后精子活力不低于0.3级。精子复苏率不低于50%。直线前进的精子数:每支细管不低于1000万个, 每粒颗粒不低于1200万个, 每支安瓿不低于1500万个。精子畸形率不高于20%, 精子顶体完整率不低于40%, 无病原微生物。购买的冷冻精液要在专用液氮罐中妥善保存, 特别要经常查看液氮面, 及时补充液氮。

2 发情鉴定

母牛的发情鉴定是适时配种和提高人工援精率的重要前提。发情鉴定主要是2种:

2.1 外部观察法

每天观察, 如果有母牛发情会看到发情母牛, 兴奋不安, 寻找其他发情母牛, 嗅闻其他母牛外阴、站立、或在运动场来回走动。爬跨其他母牛并接受其他母牛爬跨, 不发情的母牛不接受爬跨;还有就是发情母牛句尾, 食欲减退, 产奶下降;发情母牛外阴红肿, 发情初期阴道粘液量多, 透明而粘稠, 后量少略现浑浊。

2.2 直肠检查法

把手进入直肠来触摸卵巢上的卵泡的发育情况, 根据卵泡发育的4个时期来确定适时输精。

2.2.1 卵泡出现期

卵泡稍增大, 直径0.5~0.75cm。直肠触诊为一硬隆起, 波动不明显, 母牛有发情表现, 持续约6~12h。

2.2.2 卵泡发育期

卵泡发育到1~1.5cm, 呈小球状, 卵泡壁紧张, 有弹性, 波动明显, 接受爬跨, 持续10~12h。

2.2.3 卵泡成熟期

卵泡不再增大, 卵泡壁变薄, 紧张度增强, 直肠触诊有一触即破的感觉, 发情减弱, 拒绝爬跨, 转入平静期, 持续6~12h。

2.2.4 排卵期

卵泡破裂排卵, 卵泡液流失, 卵泡壁变为松软, 成为一个小凹陷, 排卵后6~8h原来的卵泡已开始被形成的黄体物质填充, 直肠检查可摸到质地柔软的新黄体。

3 输精时间的确定

牛的发情期为1~1.5d, 单就表现有性欲及性兴奋的时间而言, 平均约18 (10~24) h, 排卵发生在发情开始后28~32h或性兴奋结束后10 (3~18) h。

发情开始后2~5h垂体前叶释放出促黄体素, 然后经过20~24h即排卵, 配种行于从开始到发情现象消失后6h这一阶段, 受胎率较高。实践中一般是奶牛上午发情, 晚上输精;下午或晚上发情, 第2d早上输精。

4 精液质量检查

4.1 冷冻精液的解冻

由于剂型不同, 冷冻精液的解冻方法也有差别。颗粒冻精解冻的稀释液应另配, 细管冷冻精液不需要解冻稀释液。

(1) 颗粒精液的解冻:先配制解冻稀释液, 一般常用的是2.9%柠檬酸溶液、维生素B12 (0.5mg/m L) 溶液、葡柠液 (葡萄糖3%、二水柠檬酸钠1.4%) 。各种解冻液装于安瓿中, 经灭菌后长期备用。解冻时, 先取1~1.5m L解冻液放入小试管内, 浸入40℃的热水中, 经过2~3min后投入1~2粒精液颗粒。待融化1/2~1/3时, 在常温下轻轻摇动至完全解冻后, 检查评定精子的活力, 然后进行输精。

(2) 细管精液的解冻:由液氮罐内迅速取出1支细管冷冻精液, 立即投入40℃的热水中, 待精液基本溶化时, 用灭菌小剪剪去细管的封口端, 装入细管输精器中。细管精液的品质检查, 可按批抽样

辽宁省锦州市太和区营盘乡胡某家饲养的一头驴, 于2009年5月28日发病, 发病后用头孢与抗病毒药物治疗3d, 未见疗效, 故于2009年5月31日来我所求诊。

1临床症状

该驴体温41℃, 精神沉郁, 食欲减退, 流泪, 四肢无力, 走路摇摆。消瘦, 毛色暗淡, 无光泽, 流泪, 结膜潮红、黄染, 眼睑水肿, 粪便干、稀交替出现, 表面附有黄色粘液。

2诊断

按高热病治疗, 未见疗效。在静脉注射时, 发现血液稀薄, 色淡。又因是蜱活动季节, 故初步诊断为焦虫病, 后进行实验室检查。

采取耳静脉血一滴制成涂片, 血片干燥后, 滴数滴无水甲醇固定2~3min, 然后滴加姬姆萨氏染色液, 染色30~60min, 用缓冲液或中性蒸馏水冲洗, 自然干燥后镜检, 发现有多种形态虫体, 有圆形、椭圆形、梨形、逗点形等形态, 虫体多数位于红细胞中央。

通过实验室检查, 确诊为焦虫病。3治疗

锥黄素, 3~4mg/kg.bw, 以0.5%浓度静脉注射120~150m L。同时配合维作者简介:陈艳会 (1977~) , 辽宁人, 本科, 兽医师。

评定, 不需要每支精液现场做检查, 否则将会减少每头份精液的输精量及输入精子数。

注意:精液解冻后必须保持所要求的温度, 严防在操作过程中温度出现回升或回降;冷冻精液解冻后不宜存放时间过长, 应在1h内输精。

4.2 精液质量检查

生素治疗, 以强心, 补液, 并且改善饲养, 加强管理。

治疗后第4恢复防正制常措, 用施药2d3d, 后症, 痊愈状明显。改善, 体温驴蜱4.的1种类搞好, 出现防蜱、灭蜱的季节。和活动规律根据流行地, 实施宁区的︵辽感4有.2计搞好畜舍环境划的灭蜱措施。省锦卫生, 保持清洁干DO州染4净.3。I:1引入马属动物要严格检疫, 防止带0.3和市太焦4入.4病原发。现病例后, 可用治疗药物及相同969/J.IS区动物虫射。剂量, 必要时对其它马、驴进行预防注S卫N.1生监陈病

5 见, 即讨临使床发论上现, 驴相感应染症焦状虫, 一发般的也病很, 比少较与少该671-602督管理艳会的要做好病原病联系起来, 检查常被。作血误诊, 片检查时所以在做诊, 应注断时7.201室办公诊

5意.1以病原检下几点:0.05查越早越好, 因为外周血液.锦03州, 断

5中.2的注意虫体的虫体在发病大小变化5d后开始, 病的消失。81

初期和21与虫体中期多。︶为大、中型虫体, 末期则变为小型000治染5.3。注意是否有驽巴贝斯焦虫混合感马焦虫病还常与马传染性贫血混合疗感染, 在诊断时应加以区别。

5 掌握好输精技术

配种时左手戴好长臂手套, 用肥皂水沾湿后插入母牛直肠, 握住子宫颈的进口处, 同时胳膊向下用力开阴门;右手持输精枪由阴门插入阴道, 先向上斜插一段, 避开尿道口, 而后平插, 一直插到子宫颈口。此后要双手配合把输精枪前端引入子宫颈管内, 接着再往里插, 穿过2~4道皱褶样的螺旋状组织就进入了子宫体, 即可将精液注入子宫体基部。注入精液时, 要把输精枪稍微往后拉一下, 避免输精枪口被阻。如果发现大量精液残留在输精枪内, 要重新输精。输精时推射速度不宜过快, 应一边推进, 一边缓缓活动输精枪。输精完毕后, 应用左手捏住阴唇下部有节奏地按摩几下, 这样可以刺激阴蒂, 提高母牛的兴奋性, 从而提高受胎率。

奶牛人工授精技术交流 篇7

一、材料和方法

㈠试验材料

1. 性别控制冻精配种时间和地点。

2010年1月至2012年10月在天水市嘉信牧业有限公司奶牛场进行。

2. 奶牛性控冻精。

使用以前引进的天津奶牛繁育中心进口加系荷斯坦和国产荷斯坦奶牛性控冻精xy00171以及新引进的蒙牛赛科星性控冻精11103863共500支。

3. 授配母牛的选择。

选择育成牛298头和不同体重、不同胎次(2～5胎)、泌乳时间基本一致或相近的成年母牛44头，育成牛和成年牛饲养管理条件相同。

㈡性控冻精处理和冻配

采取自然发情人工冻配授精的方法。输精前要消毒金属输精枪、开膣器、一次性消毒套管和手套。奶牛经发情鉴定后，确认已到输精时间，牵入保定栏内保定，外阴清洗消毒，将尾拉向一侧。一般可安排1次，即发现发情后10～20 h进行，输精部位在排卵侧子宫体或子宫颈内口，输精时现场解冻精液并装枪，以减少精液解冻后体外停留时间。输精时要求将精液输入卵泡发育良好一侧的子宫角，有助于提高受胎率。

㈢授配牛的饲养管理

加强饲养管理，使其尽快恢复体质，保持健壮，并保证良好的自然发情状态。对授配牛进行严密的发情观察，在授配后45～65 d对奶牛进行早期直肠妊娠检查。

二、试验结果与分析

㈠试验结果

由表1可见，在本次试验授配的342头母牛中，育成牛298头，受胎268头，情期受胎率为70%，母犊率为93.51%，犊牛产活率为97.71%;成年牛44头，受胎37头，情期受胎率为66%，母犊率为94.44%，犊牛产活率为97.22%。其中：二胎牛20头，情期受胎率为66.44%，母犊率为100%，犊牛产活率为93.33%;三胎牛10头，情期受胎率为63.31%，母犊率为87.5%，犊牛产活率为100%;四胎牛8头，情期受胎率为62.25%，母犊率为87.5%，犊牛产活率为100%;五胎以上牛6头，情期受胎率为55.67%，母犊率为100%，犊牛产活率为100%。

㈡分析

试验结果显示，育成牛的情期受胎率较二胎、三胎、四胎、五胎以上分别高3.56、6.69、7.75、14.33个百分点，差异显著(P<0.05)，即育成牛的情期受胎率显著高于成年牛。育成牛与成年牛的产母犊率只相差0.93个百分点，差异不显著(P>0.05)，即育成牛与成年牛及成年牛各胎次间产母犊率无差异。育成牛流产率比成年牛平均值低0.46个百分点，差异不显著(P>0.05)，原因是育成牛群体大，繁殖性疾病少，而成年牛群体小，存在程度不同的繁殖性疾病，同时育成牛产活率比成年牛平均值高0.49个百分点，二者差异不显著(P>0.05)。

三、小结