药敏检测

药敏检测（共8篇）

药敏检测 篇1

埃希菌 (Escherichia coli) 俗称大肠杆菌 (E.coli) , 是埃希氏菌属中最重要的一种细菌, 属于革兰氏阴性兼性厌氧杆菌, 一些特殊血清型的大肠杆菌对动物有致病性[1], 如某些致病性大肠杆菌能引起禽严重腹泻、蜂窝织炎、肿头综合征、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、脐带炎、眼炎、纤维蛋白性心包炎和败血症等, 给养鸡业带来严重的经济损失[2]。近30年来, 随着我国规模化养鸡业的快速发展, 禽大肠杆菌性疾病的危害越来越重, 鸡大肠杆菌已成为最严重的病原菌之一[3], 尤其是近年来抗生素在养鸡业的无节制、不规范的大量应用, 多重耐药菌株广为流行, 使鸡大肠杆菌病防不胜防。为有效防治某密集养殖地区的鸡大肠杆菌病, 特进行了鸡大肠杆菌区域性实时药敏动态检测及高效药物研发的研究。

肠杆菌的耐药率大幅度上升, 多重耐药菌株剧增, 耐药谱增宽。对硫酸新霉素、氯霉素、四环素、强力霉素、氨苄青霉素、麦迪霉素、吡哌酸的耐药率最高;对庆大霉素、卡那霉素有中等敏感性;对呋喃妥因、多粘菌素B的耐药性最低。近年来, 微生物对大多数喹诺酮类药物的耐药率达10%以上, 我国部分地区耐药大肠杆菌比率高达40%以上。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

培养皿, 电子天平, 高压蒸汽灭菌锅, 试管, 恒温箱, 冰箱, 剪刀, 接种环, 酒精灯, 无菌操作台等。

1.1.2 试剂

药敏试纸片 (丁安卡那霉素、硫酸新霉素、盐酸克林沙星、左旋氧氟沙星、乳酸恩诺、氟苯尼考、粘杆菌素、磷霉素纳、头孢哌舒、头孢曲松、头孢噻肟、阿莫西林) 、麦康凯培养基、葡萄糖、乳糖、甘露醇、枸橼酸盐、V-P试验、普通琼脂、革兰氏染色液等。

1.1.3 病料

2012年4～6月自泰安及周边地区兽医门诊63例病死鸡和病残鸡的肝脏和心脏分离病菌。

1.2 方法

1.2.1 麦康凯培养基的制备

称取52.00g麦康凯培养基倒入锥形瓶中, 加800ml去离子水, 用电炉微热, 玻棒搅拌, 使其完全溶解, 最后定容至1000ml。将锥形瓶及培养皿洗好、晾干的培养皿包好, 放入高压蒸汽灭菌锅进行高压灭菌15min。灭菌后, 倒入平皿 (厚度3mm) , 冷却后, 倒置, 放入4℃冰箱备用[4]。

1.2.2 细菌的分离培养

无菌采集病、濒死鸡的肝脏接种于麦康凯琼脂培养基, 放于37℃恒温箱培养24h。

1.2.3 细菌染色、镜检

无菌从肝脏或心脏取病料直接涂片, 染色 (草酸铵结晶紫1～2min, 水洗;革兰氏碘液媒染1～3min, 水洗;95%～96%酒精脱色20～30s, 1min水洗;加稀释复红染10～30s, 水洗;吸干) , 显微镜观察。

1.2.4 生化试验

将纯化菌株分别接种于葡萄糖、甘露醇、靛基质等生化鉴定管中, 放于37℃恒温箱培养过夜。

1.2.5 药敏试验

将收集大肠杆菌按时间分为3组:4.7～4.26为第1组26株, 4.27～5.16为第2组21株, 5.17～6.7为第3组16株。

无菌操作勾取大肠杆菌纯培养菌落以划线方式致密而均匀地涂布于普通琼脂培养基表面。再用无菌尖头镊子摄取各种抗菌素药敏试纸片, 按一定密度分别贴到上述己涂布细菌的培养基表面。将贴好药敏试纸片的平板翻转, 底部向上, 置37℃恒温箱内培养18h, 取出观察结果, 并测定抑菌圈直径, 作好记录。

2 结果

2.1 菌落形态

在麦康凯培养基上生长成光滑湿润粉红色圆形菌落;在普通平板培养基上生长成突起、湿润乳白色圆形菌落。所分离的细菌均为革兰氏阴性、两端钝圆的短小杆菌。

2.2 生化结果

所分离的细菌均能分解葡萄糖、乳糖、甘露醇, 产酸产气, 甲基红试验、硝酸盐还原试验、靛基质试验均为阳性, V.P均为阴性, 均不能利用柠檬酸盐, 均能在三糖铁培养基中生长, 产酸产气。

2.3 药敏试验

判定标准按抑菌圈直径大小作为敏感性高低的标准。抑菌圈直径越大表明细菌对该药的敏感性越高。抑菌圈直径大于20.1mm的为高度敏感;直径在15.1～20.0mm者为中度敏感;直径在6.0～15.0mm者为低度敏感或耐药[5]。

2.3.1 第1组

对克林沙星高度敏感, 丁胺卡那霉素、头孢曲松、头孢哌舒、硫酸新霉素高度敏感的大肠杆菌也较多, 粘杆菌素、左旋氧氟沙星中度敏感, 而对头孢噻肟、磷霉素钠、乳酸恩诺耐药性较强。

2.3.2 第2组

对克林沙星、丁胺卡那霉素、头孢曲松高度敏感, 粘杆菌素、左旋氧氟沙星、头孢哌舒、氟苯尼考中度敏感, 而对头孢噻肟、磷霉素钠、乳酸恩诺耐药性较强。

2.3.3 第3组

对克林沙星高度敏感, 丁胺卡那霉素、左旋氧氟沙星、硫酸新霉素高度敏感的大肠杆菌也较多, 粘杆菌素、阿莫西林、头孢曲松中度敏感, 而对头孢噻肟、磷霉素钠、乳酸恩诺、氟苯尼考耐药性较强。

3 讨论

表1表明大肠杆菌对克林沙星高度敏感, 敏感率达60.32%, 对丁胺卡那霉素、硫酸新霉素、头孢曲松高度敏感率较高, 分别是41.27%、28.57%、34.92%。对粘杆菌素、左旋氧氟沙星中度敏感分别是52.38%、31.75%。大肠杆菌对克林沙星最敏感为79.37%, 对丁胺卡那霉素、头孢曲松、粘杆菌素、硫酸新霉素也敏感, 对头孢噻肟、磷霉素钠、乳酸恩诺耐药性较高, 药物敏感率为9.53%、6.35%。

(%)

对比发现大肠杆菌对药物的敏感性在不断地变化, 但是大部分的药物敏感性变化不大, 克林沙星对大肠杆菌一直保持高度敏感, 而硫酸新霉素、头孢曲松、左旋氧氟沙星则敏感性变化较大, 对磷霉素钠、头孢噻肟耐药性较高。因此, 及时实时动态检测大肠杆菌对药物敏感性, 有利于研发高效抗菌药物, 对治疗和预防大肠杆菌具有重要的实践意义。

参考文献

[1]胡仕凤, 雷红宇, 宁玲忠.鸡大肠埃希菌病的诊断与防治[J].养禽与禽病防治, 2005.5-15.

[2]周霞, 王静梅, 马贵军.鸡大肠埃希菌的分离鉴定及免疫预防[J].上海畜牧兽医通讯.2005.42-43.

[3]陈溥言主编.兽医传染病学[M].北京:中国农业出版社, 2008.

[4]陈天寿主编.微生物培养基的制备与应用[M].北京:中国农业出版社, 1995.

[5]姚火春主编.兽医微生物学实验指导[M].北京:中国农业出版社, 2002.

药敏检测 篇2

【摘要】目的：了解哈密石油辖区泌尿生殖道解脲脲原体（Uu）、人型支原体（Mh）、沙眼衣原体（CT）感染情况及支原体药物敏感性，为临床合理用药提供可靠依据。方法：应用单克隆抗体胶体金法检测衣原体抗原，应用支原体定量培养及药敏试验一体化的方法检测支原体。结果：117例患者中支原体、衣原体感染率为69.2%。其中Uu感染率为61.5%，CT+Uu混合感染率为1.7%，Uu+Mh混合感染率为5.9%；男女性别感染率分别为5.56%和94.44%，结论 支原体感染以Uu为主，多重耐药现象很严重，临床应参照药敏结果选用抗菌药物。

【关键词】沙眼衣原体；解脲支原体；人型支原体；药敏试验

【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）02-0283-02

沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（Uu）、人型支原体（Mh）主要通过性接触传染，引起人类泌尿生殖系统感染，导致非淋菌性尿道炎〔1〕。近年来，衣原体、支原体耐药性随着抗生素的广谱大量使用日趋厉害，给治疗带来了困难。为了解本地区衣原体、支原体感染及对临床常用抗生素的耐药情况，对2011年1月～2014年12月四年期间来我院117例疑似泌尿生殖道感染患者进行了CT、Uu、Mh检测及耐药状况统计。现报道结果如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 来自2011年1月～2014年12月在我院妇科、外科门诊就诊的117例非淋菌性尿道炎患者。其中男性17例，女性100例，年龄在20～70岁，均有尿道或阴道瘙痒等不适症状。患者均为居住在哈密石油基地及周边人群。

1.2 标本采集方法 尿道分泌物取样前清洗尿道口，用专用棉拭子插入尿道2～3cm，轻轻旋转后取出，置无菌管中立即送检；前列腺液由临床医生按摩取材并立即送检；宫颈分泌物经扩阴器扩阴后，用无菌棉球擦去宫颈口分泌物，用专用棉拭子插入宫颈口1～2cm，轻轻旋转后取出，避免接触阴道壁，置无菌管中立即送检。

1.3 衣原体检测方法 采用上海凯创生物技术有限公司提供的单克隆抗体胶体金法检测试剂盒。

1.4 支原体检测方法 采用珠海丽拓发展有限公司生产的Uu和Mh培养鉴定药敏试剂盒，当有支原体生长时，选择培养基颜色由黄色变为红色；并进行12种抗菌药物敏感试验。每种抗菌药物均有两个药物稀释浓度 ，当药敏孔两孔均变红，表示有支原体生长，显示耐药，反之则敏感，药敏孔低稀释度（A）变色、高稀释度（B）不变色为中度敏感。

2 结果

2.1 支原体、衣原体检测结果 117例临床标本中支原体、衣原体阳性者共81例，感染率为69.2%，检测结果见表1。可见Uu的感染率明显高于CT+Uu及Uu+Mh混合感染。从性别看，女性感染率又明显高于男性（ⅹ2=4.64，P<0.05）。

2.2 年龄构成比 支原体、衣原体感染阳性患者按照四组年龄段进行统计分析，感染集中在20～40岁，共63例，构成比为77.78%。

2.3 支原体药敏分析 分别选择Uu72株、Uu+Mh混合感染7株，对12种抗菌药物药敏情况进行分析。结果见表2。

3 討论

近年来，国内报道Uu和Mh的感染率约24.19～49.13%〔2-3〕，国外报道约20%～60%〔2-3〕，本结果显示，Uu单项感染72株，混合感染4株，感染率为69.2%（81/117），比国内外报道高，说明在哈密石油辖区Uu引发的泌尿生殖道感染还是很高的。

支原体药敏试验结果显示，Uu对大环内酯类的交沙霉素、克拉霉素，四环素类的强力霉素、美满霉素，高敏>90%，但对于临床常用的阿奇霉素、罗红霉素、氧氟沙星、诺氟沙星均有不同程度耐药性。交沙霉素、强力霉素、美满霉素治疗Uu与Mh混合感染有效。本次检测显示诺氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星的耐药率分别为93.67%、72.15%、55.7%。提示喹诺酮类药物在本辖区不适宜用于治疗泌尿生殖道解脲支原体感染，推荐强力霉素、交沙霉素、美满霉素、克拉霉素为首选药物。

支原体感染是生殖道感染常见的病原体，以Uu为主，多重耐药现象很严重，临床应参照药敏结果选用抗菌药物，并进行足量、足疗程治疗，以减少耐药菌株的产生，提高治疗效果。

参考文献：

〔1〕杨胜烨，刘全.天津医科大学总医院门诊性病22084例分析〔J〕.中国麻风皮肤病杂志，2006，22（6）：479～481。

〔2〕袁晃堆，张玉琼，麦达昌.502例泌尿生殖道支原体感染及耐药研究〔J〕.广东医学报，2003，21（5）：488-489。

药敏检测 篇3

1 资料与方法

1.1 对象

2008年6～12月来我院不孕不育科就诊的疑为泌尿生殖道感染的患者73例, 其中男47例, 女26例, 年龄18～48岁。取材前1周内均未使用过抗生素。

1.2 方法

1.2.1 试剂

采用支原体培养、鉴定及药敏一体化试剂盒 (郑州博塞生物工程有限公司提供) 。板内包被的10种抗生素分别是:美满霉素 (MIN) , 多西环素 (DOX) , 大观霉素 (SPE) , 罗红霉素 (ROX) , 阿奇霉素 (AZM) , 交沙霉素 (JOS) , 克拉霉素 (CLA) , 林可霉素 (LIN) , 甲砜霉素 (THI) , 司帕沙星 (SPA) 。

1.2.2 标本采集

男性取尿道口内1～2cm处分泌物, 若尿道口分泌物较少者则采用无菌留取前列腺液。女性取宫颈口2～4cm处的分泌物。以上均置于无菌试管中立即送检。

1.2.3 检测方法

严格按试剂盒操作说明进行, 采用分离鉴定和计数双控判定结果, 黄色为阴性, 清晰透明红色为阳性, 混浊红色为污染, 空白对照应为黄色, 如红色判为污染, 观察时间48h。药敏结果判定 (48h) , 每一种药物有高、低两个浓度, 两孔均变红为耐药, 两孔均不变为敏感, 低变红高不变为中介。

2 结果

2.1 支原体培养结果

73例患者支原体培养阳性26例, 阳性率为35.6%。均为Uu感染。26例女性患者中阳性10例, 阳性率38.5%, 47例男性患者中阳性16例, 阳性率34.0%。

2.2 药敏试验结果

Uu对10种抗生素存在不同程度耐药, 无1株对10种测试抗生素全部敏感, 见附表。药敏试验结果表明, Uu对抗菌药物敏感性最高的依次是强力霉素 (多西环素) 、美满霉素、交沙霉素、司帕沙星, 分别为100.0%、100.0%、96.2%、92.3%, 其次是克拉霉素、罗红霉素、林可霉素和阿奇霉素, 分别为76.9%、73.1%、73.1%和69.2%, 最低是大观霉素, 为11.5%。

3 讨论

支原体除可以粘附于细胞、巨噬细胞表面外, 还可以粘附于精子表面, 从而阻止精子运动, 其产生神经氨酸酶样物质可干扰精子与卵子的结合。这也是支原体感染引起不育不孕的原因之一。本资料表明, 本地区泌尿生殖道支原体感染总发病率为35.6%, 均为单一Uu感染, 未检出Mh感染。说明本地支原体感染以单一Uu为主, 与有关文献报道[3]基本相符。

本地区的Uu菌株对大观霉素的耐药性在10种抗生素中排在第一位, 耐药率达88.5%, 若将中敏株也归纳入耐药行列, Uu对大观霉素的耐药率竟高达100.0%, 可见大观霉素已不能应用于本地区Uu感染者的治疗。阿奇霉素具有良好的抗衣原体作用, 其在临床上较为常用, 本文结果显示, 阿奇霉素的耐药率较高 (30.8%) , 提示Uu对阿奇霉素的耐药性有增强趋势, 实验室应注意耐药性监测, 临床医生在选用阿奇霉素进行Uu治疗时须考虑加大剂量, 可能会有比较好的效果。

由于支原体缺乏细胞壁, 对抑制细胞壁合成的药物如青霉素类、头孢菌素类等不敏感。司帕沙星为喹诺酮类药物, 其抗菌机制主要通过抑制脲支原体属DNA回旋酶而影响DNA的合成, 干扰脲支原体属的生长。本文结果显示, 司帕沙星药物敏感性达92.3%, 亦可作为Uu感染的首选。这与其他地区的报道稍有不同[4,5,6]。可能与不同地区、不同人群的耐药菌株有差异有关。本分析结果显示, 美满霉素、强力霉素、交沙霉素耐药率均低, 并保持相对稳定, 在无条件做药敏试验或药敏试验结果未报告之前可作为首选用药[7]。由于支原体耐药株的不断出现及各地用药情况、耐药株的不同, 对于治疗效果不佳的泌尿生殖道支原体感染应参考药敏试验结果, 交替使用或联合使用当前最敏感的药物, 做到合理用药, 减少抗菌药物滥用, 以防止交叉耐药导致的耐药株上升[3,8]。

参考文献

[1]柳继兴, 邱晓英, 宋霞.泌尿生殖道支原体检测及对8种抗生素的体外抗菌活性研究[J].中华医院感染杂志, 2005, 15 (2) :137-138.

[2]朱庆义, 胡朝晖, 刘峰林, 等.解脲脲支原体多带抗原基因分型鉴定及其临床应用研究[J].中华医院感染杂志, 2005, 15 (8) :856-858.

[3]肖嵘, 文海泉, 曹成海, 等.2002年湖南地区性病门诊患者支原体感染情况调查及药敏结果分析[J].临床皮肤科杂志, 2003, 32 (8) :451-452.

[4]吕世静, 陈文青, 方欲森, 等.广东省不同地区泌尿生殖道支原体感染及药敏结果比较[J].中国皮肤性病学杂志, 2005, 19 (12) :736-738.

[5]缪小佟, 邹建话, 梁思哲, 等.626例泌尿生殖道感染的支原体鉴定及药敏分析[J].中国皮肤性病学杂志, 2006, 20 (3) :163-164.

[6]李冬芹, 余蜀丹, 于建斌, 等.1951例门诊患者支原体检测及药敏分析[J].中国麻风皮肤病杂志, 2005, 21 (5) :406-407.

[7]陈利, 曾践高.泌尿生殖道性传播疾病的病原体分布与药敏分析[J].中国感染控制杂志, 2004, 3 (3) :228.

药敏检测 篇4

1 资料与方法

1.1 研究对象

我们选择了2013年1月至5月在我院门诊在就诊的疑似为泌尿生殖道支原体感染的患者796例作为研究对象。其中男性204例, 女性592例, 受检者均严格按要求取材送检, 所有患者取标本前1周均未使用过任何抗生素类药物。

1.2 标本采集

男性患者在尿道消毒后用无菌拭子由前尿道2～4cm处取尿道分泌物;女性患者消毒外阴后, 用阴道窥器扩引阴道, 先用消毒棉拭子拭去宫颈口分泌物, 再用另一无菌拭子伸入宫颈1～2cm处轻转一圈, 并至少停留20s取宫颈分泌物送检。所有样本均用配套的无菌容器立即送检。

1.3 试剂与检测方法

用珠海丽珠试剂股份有限公司生产的解脲脲原体和人型支原体培养鉴定药敏试剂盒, 严格按照说明书操作并判读结果, Uu及Mh阳性结果指35～37℃培养, 分别于24h和48h观察, 液体培养孔由橙黄色变红色, 且液体透明清亮, 若培养基变红但混浊, 不能报阳性, 应考虑细菌或真菌生长等。

1.4 药敏结果判断

每种抗生素设高、低两个浓度进行检测。高、低两孔不变红表示敏感, 高、低两孔都变红表示耐药, 低孔变红、高孔不变表示中介。

1.5 菌落计数

计数孔由橙黄色变为红色且清亮为阳性, 即≥104c Fu/m L。

1.6 统计学方法

采用χ2检验。

2 结果

2.1 支原体分型鉴定

796例患者中共检出支原体阳性337例, 阳性率42.34%, 各型支原体感染情况见表1。其中男性39例, 阳性率为19.11% (39/204) , 女性298例, 阳性率为50.34% (298/592) , 男、女感染率经χ2检验分析, 两者比较差异有统计学意义 (P<0.05) , 女性显著高于男性, 见表2。

2.2 药敏结果

对337例支原体阳性患者进行体外药敏试验, 各型支原体感染者对9种抗生素的药敏结果见表3, 从中可查出各型支原体对9种抗生素的耐药率。

3 讨论

从上述三表可以看出:本次研究惠阳区796例泌尿生殖道感染患者的支原体检测, 总感染率为42.34%, 和何寿国、钟洁海报道的45.09%[2]大体相符合。包括Uu感染率33.04%, 前者报道的31.6%略同, 但低于黄德元、汪虹彬报道39.1%[3]。Mh感染率为5.15%, 这与国内大部分调查报告大体相符。Uu+Mh混合感染率4.15%, 低于何寿国、钟洁海报道的8.23%。Mh及Uu+Mh混合感染率虽然不及Uu高, 但它俩的耐药率明显高于Uu感染的耐药率, 因此, 在临床上体现了治疗Mh及Uu+Mh混合感染要比单一感染Uu的要难。女性支原体感染阳性率明显高于男性, 这可能与女性的生理结构有关, 造成支原体寄居女性泌尿生殖道的机会高于男性, 当机体免疫力下降, 或泌尿生殖膜受损时, 易发生感染[4];女性生殖道的内环境和p H更适宜支原体的生存;再者, 支原体属条件致病菌, 常为携带者, 通常无症状, 当身体抵抗力减低时, 侵犯机体, 造成感染;还有女性患妇科其他疾病机会多, 就诊率高, 而男性就医的机会少于女性。因此, 女性支原体的检出率高。Uu的降解产物可使阴道p H值增高, 易造成其他细胞的感染和繁殖。Uu+Mh混合感染也占一定比例, 因此, 支原体的感染不容忽视。

支原体为条件致病菌, Uu与Mh的致病浓度均为≥104c Fu/m L。临床医师应结合临床症状作出综合性诊断, 客观的看待检测结果, 不能盲目的支原体阳性就作出支原体感染的诊断。支原体是介于细菌和病毒之间能在人工培养基上生长增殖的最小原核细胞型微生物, 无细胞壁, 在形态上呈多形性。Uu和Mh可定植于尿道黏膜上皮细胞上。解脲脲原体作为一种条件致病菌吸附在宿主细胞表面, 在条件合适的情况下可引起NGN。

红霉素和氧氟沙星过去一度被认为是支原体疗效较好的药物, 随着临床抗生素的不合理应用, 不可避免的出现了耐药菌株, 从药敏结果可以看出, Uu、Mh、Uu+Mh的药敏谱有一定的差异。Uu对氧氟沙星、罗红霉素、司帕沙星有一定的耐药性。Mh和Uu+Mh混合感染对阿奇霉素、罗红霉素、克拉霉素、氧氟沙星耐药率大, 已经达73%以上。由于支原体无细胞壁, 故临床上多用干扰蛋白合成的抗生素。天然对抑制细菌细胞壁合成的抗生素 (β-内酰胺类) 耐药。支原体合并其他病原体感染的情况较多, 有的合并滴虫、霉菌感染, 有的合并淋球菌感染, 有的合并衣原体感染等。临床在应用抗生素的时候一定要根据药敏情况。滥用抗生素的现象使得Uu, Mh的耐药菌株日益增多。临床医生尽量避免经验用药, 减少和防止耐药菌株的产生和传播, 支原体一旦出现耐药就有可能是多重耐药菌株[5]。近几年研究发现, 位于解脲脲原体染色体上旋转酶基因发生突变, 使DNA旋转酶靶位改变, 从而降低药物积累, 而产生耐药。

总的来看, 本地区支原体感染对强力霉素、美满霉素、交沙霉素都比较敏感, 是临床首选药物。

摘要：目的 探讨本地区泌尿生殖道支原体感染及药敏情况, 指导临床合理用药。方法 利用支原体培养鉴定药敏试剂盒进行临床检测。结果 796例患者共检出支原体感染337例, 阳性率42.34%, 其中解脲脲原体 (Uu) 阳性263例 (33.04%) , 人型支原体 (Mh) 阳性41例 (5.15%) , Uu+Mh混合感染阳性33例 (4.15%) 。药敏结果显示, 单纯Uu感染药敏试验, 敏感率最高的是3种抗生素:强力霉素 (DOX) 92.02%, 美满霉素 (MIN) 91.63%, 交沙霉素 (JOS) 73.00%, 而敏感率最低的3种抗生素为氧氟沙星 (OFL) 10.27%, 罗红霉素 (ROX) 19.77%, 左旋氧氟沙星 (LEV) 21.29%。Mh及Uu+Mh混合感染率虽然不及Uu高, 但它俩的耐药率明显高于Uu感染的耐药率。结论 泌尿生殖道支原体引起的感染日趋增多, 它们对各种抗生素的耐药率也在缓缓上升, 因此定期对本地区泌尿生殖道感染培养检测及耐药性监测, 是十分必要的。其有利于指导临床用药、控制耐药菌株的产生。

关键词：支原体感染,泌尿生殖道,药敏

参考文献

[1]龙绍芬, 蔡昭惠, 黄连芬, 等.1100例泌尿生殖道样本中UU与Mh感染率及耐药性[J].实验医学检验杂志, 2001, 8 (1) :30-31.

[2]何寿国, 钟洁海.632例泌尿生殖道支原体的检测及药敏分析[J].国际检验医学杂志, 2008, 29 (7) :599-601.

[3]黄德元, 汪虹彬.1695例泌尿生殖道支原体检测及药敏分析[J].国际检验医学杂志, 2008, 29 (9) :845-846.

[4]孟曙芳, 戚均超, 王琴, 等.泌尿生殖道支原体感染调查及耐药性分析[J].浙江临床医学, 2006, 8 (2) :203.

药敏检测 篇5

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2009年12月～2010年12月149例女性患者,年龄18～45岁,平均29.6岁。这些患者都来自门诊皮肤科、妇产科、泌尿科。伴随着泌尿生殖道感染症状、白带增多;有异味、外阴瘙痒、痛;有不孕史。

1.2 标本采集

妇科医生在严格无菌操作下插入宫颈管,约2cm处取分泌物,取出棉拭子置无菌试管中即送检验科细菌室培养。

1.3 方法

采用深圳珠海浪峰生物技术有限公司生产的支原体药敏试剂盒,严格按照技术操作规范进行操作。

2 结果

在149例患者中,支原体阳性79例(53.0%)。其中单纯解脲支原体(Uu)感染48例(60.8%)、单纯人型支原体(Mh)感染8例(10.1%)。Uu、Mh混合感染23例(29.1%),79例支原体的药物结果见表1。

3 讨论

本组资料显示,149例患者阳性率53.0%,这与女性泌尿生殖道的解剖结构较易感染有一定的关系,并且由于本试验结果采用的是双控制判断标准即液体培养基由橙黄色变为红紫色,培养基透明、清亮,而且同时在分离鉴定与半定量计数的试验条上,Mh或Uu必须≥104CFU/mL才可报阳性,故增加了实验结果的准确性,值得推广与普及。

从本组药敏结果看,10种抗生素对两种支原体的敏感性由高到低依次为美满霉素、交沙霉素、克拉霉素、强力霉素、四环素、司帕沙星、环丙沙星、罗红霉素、阿奇霉素、红霉素。其中美满霉素、交沙霉素的敏感率与有关报道有较高的一致性[1]。而阿奇霉素、红霉素等较为常规使用的抗生素耐药率较高,这主要由于支原体感染后自觉症状较轻,所以就诊率低,而且患者中普遍存在滥用抗生素现象,耐药性相当严重。

支原体的感染率越来越高,它对许多抗生素产生的耐药性应引起临床的关注,选择合理,高效的抗生素进行治疗十分重要。喹诺酮类药物是一种广谱抗菌药物,它通过抑制细菌的DNA合成而发挥作用,对泌尿生殖道感染的病原体有着较好的杀伤力[2,4],但近十几年的广泛使用,使其耐药性迅速增加,应引起重视。本试验结果提示,治疗支原体感染时,如不能做药敏,则应把美满霉素、克拉霉素、交沙霉素作为首选药物,有条件的医疗机构在检查支原体时应做药敏试验,控制耐药菌株的产生。

参考文献

[1]周关键,汪曼菲,马明艾,等.不孕症248例宫颈分泌物支原体检测及药敏分析[J].这个误诊学杂志,2005,5(4):704-705.

[2]汤红峰,林燕辉.支原体对常用抗生素的耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2002,12(8):578-579.

[3]俞信忠,许平,曹艳,等.1240例女性生殖道支原体感染分析[J].中华感染学杂志,2003,13(9):887-888.

药敏检测 篇6

1 资料与方法

1.1 临床资料

研究对象为2004年6月—2008年2月我院就诊的2 000例疑似支原体感染者, 其中男800例, 女1 200例, 平均年龄30岁, 病程5天~3年, 平均30天。多数有与性伴侣的婚外性行为史, 少数因配偶或性伴侣患有性病而就诊, 男性主诉多为不同程度尿痛、尿道灼热或有乳白色黏液样分泌物流出;女性除部分有尿道炎症状外, 多为阴道分泌物异常增多、变黄、异味或外阴瘙痒等不适。部分患者泌尿生殖道症状反复发作。

1.2 标本收集

被检测者在取标本前l周内无抗生素使用史, 男性取标本前2小时以上未排尿。用无菌棉拭子, 男性插入尿道口内2~3cm处, 女性插入宫颈口内l~2cm处停留15~30秒, 轻轻转动l~2圈后取出。

1.3 检测方法

全部标本采用解脲脲原体和人型支原体培养鉴定药敏试剂盒 (珠海丽珠试剂有限公司生产) 检测。所有试剂均在有效期内, 并严格按照试剂盒说明书操作, 分别于24h、48h后观察结果并作出判定。

2 结果

2.1 支原体检出率

2 000例泌尿生殖道感染者的标本经培养鉴定, 共检出支原体1 020株, 检出率为51%;其中检出UU 860株, 检出率为43%;检出MH 160株, 检出率为8%;同时检出UU和MH混合感染71例, 检出率为3.55%。总阳性数为1 020人次, 占51%;阳性中, 男性占40%, 女性占60%。如表1所示。

[例 (%) ]

2.2 敏感性测定

对1 020株UU、MH、UU+MH进行9种抗生素敏感性测定, 结果如表2所示。

3 讨论

对我院收集的2 000例临床怀疑为支原体感染的标本进行检测, 检测结果UU阳性率为43.0%, MH阳性率为8.0%, 71例 (3.5%) 为UU和MH同时感染。本检验结果显示:本地区UU感染率明显高于MH的感染率。单一UU和UU混合MH的比例也高于单一MH, 与相关文献[1]报道一致, 但也有国内学者[2,3]所报道的UU检出率明显低于我们的检出率, 这可认为因地域的不同, UU感染率不一样, 也与本地区流行的感染菌株及抗生素的使用习惯有关。一般认为, 支原体感染女性要高于男性[4], 我们检测到的1020例支原体感染者中, 女性感染率 (60%) 显著高于男性感染率 (40%) , 说明支原体更容易侵犯女性生殖道[5], 因此建议在临床上对疑似性病的女性患者接诊时, 应进行支原体检测。

从疾病流行趋势分析, 随着耐药株的增多, 支原体感染及流行范围将会扩大。因此掌握本地区支原体的药物敏感性, 指导临床合理规范用药, 对支原体所致泌尿生殖道感染有重要的临床防治意义。我们对1 020株支原体进行药敏试验, 结果显示对强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素均有较高的敏感性, 但氧氟沙星、螺旋霉素、司帕沙星均出现比较严重的耐药情况。此结果与国内赵字等[6]报道一致, 与国内有关强力霉素等耐药性报道[7]有较大差异, 这可能是由于UU、MH的感染病例不断增多及对抗生素的使用没有进行必要的控制, 导致耐药菌株不断增多;另外, 也可能与使用时间较长的抗支原体药物的耐药性增高有关, 或与不同地区临床选药方面不同有关系。

总之, 对支原体感染病症的治疗有必要普及药敏试验。临床开展支原体药敏试验, 对正确开展药物治疗支原体感染具有重要的指导意义, 既有助于抗生素的合理和安全使用, 也有助于控制耐药菌株的产生和蔓延, 还可防止盲目、随意应用抗生素造成的机体伤害。在现今抗生素滥用现象尚未得到有效遏制、细菌耐药性的动态发展正需密切关注的情况下, 在临床上治疗UU、MH所致感染时, 应结合药敏试验使用足量敏感药物, 使疗程尽可能缩短, 避免低浓度药物与支原体长期接触, 尽可能避免出现耐药情况。

参考文献

[1]竺璐, 徐新美, 严丽英.STD门诊患者329例泌尿生残道支原体感染情况调查及药敏分析[J].中国皮肤性病学杂志, 2004, 18 (12) :737-738.

[2]王荷英, 施美琴, 叶顺章, 等.非淋菌性尿道炎的人型支原体及尿素分解支原体的检出[J].中华皮肤科杂志, 1991, 20 (24) :31.

[3]胡春梅, 易来龙, 韩春雷, 等.1568例非淋菌性尿道炎患者的衣原体、支原体感染情况分析[J].临床皮肤科杂志, 1996, 25 (4) :199-201.

[4]千荷英, 工千秋, 张树文, 等.性传播疾病中的支原体感染[J].临床皮肤科杂志, 1986, 25 (1) :6-8.

[5]朱秀芳, 单小元, 许建波, 等.189例淋菌性尿道炎病原体检查结果和l临床特点分析[J].临床皮肤科杂志, 2000, 29 (4) :209-210.

[6]赵宇, 陈岚, 吴玮, 等.泌尿生殖道支原体感染患者药敏试验结果分析[J].临床皮肤科杂志, 2006, 35 (1) :25.

药敏检测 篇7

关键词：新生儿肺炎,病原菌,耐药性

新生儿感染性肺炎是新生儿期最常见的感染性疾病, 是引起新生儿死亡的重要原因。它多由细菌引起, 因此了解新生儿感染性肺炎病原菌的分布及其药物敏感性情况, 对指导本地区新生儿科医师合理应用抗生素很有必要。现将近两年我院收治的182例新生儿感染性肺炎痰培养的病原菌及药敏情况进行回顾性分析, 报道如下:

1 材料与方法

1.1 临床资料

2009年1月~2011年1月我院所收治的新生儿感染性肺炎病儿共计182例, 日龄1~28 d;其中, 男104例, 女78例。诊断标准依据《实用新生儿学》新生儿感染性肺炎章节[1]。

1.2 标本采集

患儿咳嗽后叩击背部用一次性吸痰管经鼻至咽部吸取深部痰液至痰培养管中, 密封后送检。

1.3 病原学检测及药敏分析

痰液接种于培养基中, 在培养箱中进行普通细菌培养。所有菌株均按《全国临床检验操作规程》以常规方法采用法国生物梅里埃系统鉴定;最后以K-B法测定, 按美国临床实验室标准化委员会制定标准进行判读。对所有鉴定用试剂及药敏分析用抗生素纸片进行质量控制, 结果均符合预期结果和美国临床实验室标准化委员会颁布的药敏指控标准。

2 结果

2.1 病原菌检测

本组患儿检出的病菌中, 革兰阳性球菌26株, 占30.23%, 检出菌株依次为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌, 其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) 有6例;革兰阴性杆菌60例, 占69.77%, 检出菌株依次为肺炎克雷伯菌、大肠埃希氏、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞, 还有鲍曼不动杆菌, 其中产超广谱β-内酰胺酶的33例, 占55%;其他菌株如产气肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌等。见表1。

2.2 药敏分析结果

革兰阳性球菌对万古霉素、头孢哌酮舒巴坦敏感性较高, 对苯唑西林、头孢唑林敏感性较低;革兰阴性杆菌敏感性较高的药物依次是亚胺培南、头孢哌酮舒巴坦 (舒普深) 、哌拉西林他唑巴坦、环丙沙星、庆大霉素等, 虽对喹诺酮类、氨基糖苷类敏感, 但新生儿一般不作为选择。见表2。

注:“/”表示未做该药药敏试验

3 讨论

新生儿感染性肺炎可发生于宫内、分娩过程中或出生后, 由细菌、病毒或原虫引起, 全世界每年有200万以上儿童死于新生儿肺炎[1], 在生后多与接触患儿者患呼吸道感染有密切关系[2]。以往国内资料认为, 新生儿感染性肺炎主要以葡萄球菌为主, 其次为大肠埃希菌等[1]。本文研究结果显示, 新生儿感染性肺炎以细菌性多见, 主要病原菌以革兰阴性杆菌为主, 其中肺炎克雷伯菌最多, 而革兰阳性球菌中, 以金黄色葡萄球菌居多。基本以条件致病菌 (肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌) 为主, 这可能与新生儿免疫力低下, 机体屏障功能差, 微生态平衡尚未完善, 促进条件致病菌生长繁殖, 从而导致其感染率增高有关[3]。

药敏结果显示, 引起新生儿感染性肺炎的革兰阴性杆菌对三代头孢均不敏感, 只对亚胺培南、舒普深及庆大霉素敏感, 但由于氨基糖苷类药物的耳毒性及肾毒性以及氟喹诺酮类致软骨发育不良的副作用, 限制了其临床应用, 因此我们把亚胺培南及舒普深作为首选药物。本组培养出细菌的药敏试验结果显示均对亚胺培南及舒普深敏感。

近年来由于侵入性操作的发展及广谱抗生素的大量应用, 新生儿耐药菌的感染成为国内外棘手的临床问题。通过对本地区病原菌的分布及耐药情况进行回顾性分析, 不仅可以指导临床经验性用药, 还可以争取时间, 降低新生儿病死率及院内感染发生率。因此, 本地区经验性治疗用药可首选头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、万古霉素等。但新生儿细菌感染耐药菌株的产生也与大量广谱抗生素的滥用有密不可分的关系, 比如新生儿少用的喹诺酮类、氨基糖苷类抗生素, 细菌耐药性明显降低, 所以不论是经验选药还是针对培养的病原菌进行治疗, 都应该以药敏结果为依据。

参考文献

[1]金汉珍, 黄德珉, 官希吉.实用新生儿学[M].3版.北京:人民卫生出版社, 2003:337-342.

[2]王晓莉.新生儿细菌肺炎82例高危因素分析及防治[J].临床医学, 2008, 33 (2) :184-186.

药敏检测 篇8

1 资料与方法

1.1 一般资料

本组共651例, 其中男232例, 女419例, 年龄19～52岁, 平均34岁;其中男性患者主要表现为尿道刺激症状;女性表现为阴道瘙痒、灼痛、尿频、排尿困难、白带增多等。所有患者均符合NGU诊断标准[2]。

1.2 方法和试剂

所有受检者在受检前1周内停止使用任何抗生素类药物治疗。由于支原体对细胞具有高度的亲和性, 故取材时可用无菌棉拭子插入男性患者的尿道l～2cm、或女性患者宫颈管2～3cm处, 轻柔旋转刮取分泌物和上皮细胞。将标本放置运送培养基中送检。采用珠海迪尔生物工程有限公司的Mycoplasma IES Test Kit试剂盒, 结果判读严格按Mycoplasma IES Test Kit试剂盒的操作说明进行。

1.3 统计学方法

采用PEMS 3.1统计软件, 百分率的比较采用精确概率法和卡方检验。

2 结果

2.1 支原体的感染情况

本组651例患者中, 支原体培养阳性者235例, 阳性率36.10%, 其中女性阳性率高于男性, 两者比较有显著性差异 (P<0.05) ;支原体阳性中, 以Uu为主, 与Mh及混合感染者比较, 有显著性差异 (P<0.05) 。见表1。

注:与男性患者比较, *P<0.05;与人形支原体及混合感染者比较, ▲P<0.05

2.2 支原体的耐药性分析

单纯Uu感染者依次对交沙霉素、强力霉素、美满霉素和克拉霉素高度敏感;单纯Mh感染者依次对强力霉素、交沙霉素、克拉霉素、美满霉素高度敏感;而混合感染者对抗生素的耐药率均较单纯感染者严重。见表2。

3 讨论

非淋病性尿道炎 (NGU) 又称非淋病性泌尿生殖道感染, 是我国目前仅次于淋病、尖锐湿疣的发病率较高的性传播疾病[3]。而解脲支原体 (Uu) 和人形支原体 (Mh) 是引起NGU的主要病原体。支原体是介于细菌和病毒之间, 没有细胞壁的能在体外人工培养基中生长和繁殖的原核型微生物。Uu和Mh寄居于人体泌尿生殖道, 其致病性主要通过黏附于泌尿生殖道黏膜上皮细胞, 通过与细胞膜之间的相互作用, 从宿主细胞吸取自身需要的营养成分, 同时释放神经毒素、超氧离子等有毒代谢产物, 从而影响细胞蛋白质和DNA的合成, 致使细胞染色体异常, 最终导致细胞死亡。

本研究中, 支原体培养阳性率为36.10%, 与国内其他报道基本一致[4,5]。在支原体阳性中, 以Uu感染为主 (27.80%) , 其次为混合感染 (5.53%) 和Mh感染 (2.77%) 。这主要是因为Uu特殊的顶端结构能使之牢固地黏附于靶细胞表面的原因。此外, Uu还可以黏附于精子的表面, 从而影响精子的正常功能和代谢, 而Uu的降解产物可以增高阴道的pH值, 有利于其他细菌的繁殖和感染[6]。在性别结构中, 女性阳性率高于男性, 二者比较有显著性差异 (P<0.05) , 其原因可能有以下两个方面: (1) 与女性特殊的解剖结构有关[7], 即女性泌尿生殖道的环境更适合Uu的生存和繁殖; (2) 部分女性患者由于症状不明显而未引起重视, 导致未用药或少用药。

支原体无细胞壁结构, 因此, 对所有破坏细胞壁的抗生素 (如青霉素类、头孢类、万古霉素等) 均不敏感, 临床治疗主要应用大环内酯类、喹诺酮类和四环素类药物。近年来, 随着NGU的发病率逐渐增高, 同时由于泌尿生殖道的生理结构特点, 药物较难渗透, 以及抗生素的不合理应用, 支原体的耐药性也正在不断地发生变化, 其主要表现是对以往敏感抗生素的耐药率的不断增加, 从而给临床治疗带来很大困难[8]。从本研究的药敏试验结果看, 单纯Uu感染者依次对交沙霉素、强力霉素、美满霉素和克拉霉素高度敏感;单纯Mh感染者依次对强力霉素、交沙霉素、克拉霉素、美满霉素高度敏感;而混合感染者对抗生素的耐药率均较单纯感染者严重。因此, 强力霉素、交沙霉素、美满霉素、克拉霉素可作为其一线用药使用, 而耐药率较高的药物应尽量避免使用, 以免造成支原体耐药率的上升和感染流行。

综上所述, 非淋病性尿道炎患者中解脲支原体和人形支原体的混合感染阳性率较高, 且具有较高的抗生素耐药性, 临床医师应根据药敏试验结果合理选用抗生素, 以提高治疗效果。

参考文献

[1]范芳华, 肖震, 于小妹, 等.非淋病性尿道炎患者支原体检测及药敏分析[J].全科医学临床与教育, 2010, 8 (1) :26-27.

[2]赵辩.临床皮肤病学[M].南京:江苏科学技术出版社, 2001:532.

[3]陈德芳.非淋病性尿道炎患者衣原体和支原体的感染状况分析[J].重庆医学, 2007, 36 (11) :1079-1080.

[4]蒙天生.女性泌尿生殖道解脲支原体检测及药敏分析[J].右江民族医学院学报, 2009, 31 (1) :78.

[5]刘礼富, 李焱平, 胡高强, 等.426例泌尿生殖道标本中解脲支原体和人形支原体的分离及耐药性分析[J].中国当代医药, 2008, 15 (6) :47.

[6]温伟洪, 李介华, 钟国权.解脲支原体液体培养及药物敏感性分析[J].检验医学与临床, 2008, 5 (22) :1362-1363.

[7]苏志芳.非淋病性尿道炎患者支原体感染培养及药敏结果分析[J].检验医学与临床, 2009, 6 (10) :785-787.