大孔树脂

大孔树脂（共11篇）

大孔树脂 篇1

番茄红素具有很强的抗氧化、防癌、抗癌、清除香烟和汽车废气中的有毒物质及活化免疫细胞的功能，是一种良好的天然功能色素，可望成为预防癌症的功能食品之一。

本项目采用大孔吸附树脂结合溶剂提取的方法从番茄皮中提取出番茄红素，该项目具有操作简单、投资小、产品收率高、纯度高和成本低的特点，具有较强的市场竞争力和发展前景。

技术原理及流程

该技术是将番茄粉碎后经过溶剂循环浸提、树脂提取、精制和干燥后制得番茄红素成品。该技术的创新点主要是将大孔吸附树脂结合溶剂提取技术将番茄红素提取出来。该技术具有操作简单，收率较高和成本较低的特点。

成果水平及主要技术指标

该技术处于国际水平，已经申请中国发明专利，具有自主的知识产权。

生产规模及产量

年产10吨番茄红素需要投资80万元，其中固定资产60万元，流动资金20万元。

市场分析及效益预测

随着“回归自然”、“以食代药”的呼声的提高，生病服药的概念正在遭受到以预防疾病为主概念的冲击。由于番茄红素具有很强的抗氧化、防癌、抗癌、清除香烟和汽车废气中的有毒物质及活化免疫细胞的功能，因此从番茄中提取番茄红素用于制造预防癌症的功能性食品具有广阔的市场前景。番茄红素可以广泛地出口，用于保健食品的制造等。可见该项目具有较好的市场前景及经济效益。

单位：天津大学科技处

地址：天津市南开区卫津路92号邮编：300072

电话：(022) 27405745

大孔树脂 篇2

摘要：在介绍了大孔吸附树脂的结构、吸附原理和分类,以及论述了国内外采用大孔吸附树脂处理苯胺、苯肼、含酚、含苯甲酸衍生物、含萘衍生物和含锌离子等废水具有很好的.吸附-解吸特性的基础上,深入探讨了大孔吸附树脂处理废水的优点和影响因素,并指出大孔吸附树脂在工业废水的处理上是一种非常具有应用前景的新型吸附材料.作 者：李鸿江 温致平 赵由才 LI Hong-jiang WEN Zhi-ping ZHAO You-cai 作者单位：李鸿江,LI Hong-jiang(深圳市环境工程科学技术中心,深圳,518001;同济大学污染控制与资源化研究国家重点实验室,上海,92)

温致平,WEN Zhi-ping(深圳市环境工程科学技术中心,深圳,518001)

赵由才,ZHAO You-cai(同济大学污染控制与资源化研究国家重点实验室,上海,200092)

大孔树脂 篇3

关键词：改性大孔树脂 莱鲍迪甙A 斯替维甙 特异性吸附

中图分类号：TS202 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2015）02-0064-01

甜菊糖甙是从甜菊叶中提取出来的一种甜味剂[1]，其主要成分为斯替维甙（ST）、莱鲍迪甙A（RA）。RA在甜菊糖中甜度最高、口味纯正，大量药物实验证明，甜菊糖甙无毒副作用，经常食用可预防高血压、糖尿病、龋齿等，是一种可替代蔗糖的理想的甜味剂[2]。

近年来，大孔树脂主要应用于食品和中药等方面[3]。目前在甜菊糖分离纯化中也得到了广泛应用[4]。为了提高分离效果，本文对D-101型树脂进行了改性。成功制备了D-101-DCCD与D-101-CDD。结果显示D-101-DCCD不仅对于RA具有特异性的吸附能力，而且在针对RA的脱附性能上又表现出不同于其他树脂的特性。

1 材料与仪器

1.1 仪器

SHZ-82B型水浴恒温振荡器；岛津高效液相色谱仪LC-20A，SPD-20A紫外检测器。

1.2 材料

D-101型树脂；四氯化钛（TiCl4，AR）；3-氯-1，2-丙二醇缩丙酮（CDD）与1，2，2-二甲基-3-二噁烷-4-甲酰氯（DCCD）；RA与ST标准品（ST：99.1%，RA：98.7%）（上海甄准）。

1.2.1 D-101-DCCD的制备

将3.5g D-101干燥后于CCl4中氮气保护下溶胀36h，将6mlTiCl4缓慢加入，于室温下滴加5mlDCCD，30℃搅拌反应24h。以NaOH溶液进行水解，过滤后的产物放入真空干燥箱，于120℃干燥至恒重，即得。

1.2.2 D-101-CCD的制备

将3.5g D-101于CCl4中氮气保护下溶胀36h，将6ml TiCl4缓慢加入，于室温下滴加4.5mlCDD，其他步骤同1.2.1。

2 方法与结果

2.1 分析方法

2.1.1 色谱条件[5]

色谱柱为Thermo NH2柱（250 mm×4.6mm，5μm）；流动相为乙腈/水（V/V=80/20）；流速为1.2ml/min；进样量20μl，柱温为30℃；紫外检测波长为210nm。

2.1.2 对照品溶液的配制

将ST和RA标准品置于105℃干燥箱中恒温2h，分别精确称取ST、RA适量，用流动相进行溶解。

2.1.3 标准曲线的绘制

分别精密吸取对照品溶液0.1、0.2、0.5、1.0、2.5ml，以流动相定容至10ml，以ST、RA质量浓度为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y）进行线性回归，方程为：

y=1.391*104x+309.5，r=0.9997； （ST）

y=1.210*104x-952.7，r=0.9995； （RA）

2.2 树脂的静态吸附量

吸附24h后测定上清液中各组分含量，分别计算静态吸附量。

Q0=（Co-Cx）* V0/Mx

Q0：静态吸附量（mg/g）；

V0：溶液体积（ml）；

Co：初始浓度（mg/ml）；

Cx：吸附平衡后甜菊糖的浓度（mg/ml）；

Mx：吸附平衡时树脂的用量（g）；

2.3 树脂的静态脱附量

测定洗脱10h后洗脱液中各组分的含量，计算树脂的静态脱附量。

Q1=（Co-Cx）* V0/Mx

Cx：脱附平衡后甜菊糖的浓度（mg/ml）；

V1：静态脱附体积（ml）；

Q1：甜菊糖的静态脱附量（mg/g）；

Mx：吸附平衡时树脂的用量（g）。

2.4 树脂的静态脱附率

设定甜菊糖的吸附量与脱附量的比值为静态脱附率（U）。

Uy= Q1/Q0*100%

Uy：靜态脱附率（%）；

Q1：甜菊糖的静态脱附量（mg/g）；

Q0：甜菊糖的静态吸附量（mg/g）；

3 结果与分析

3.1 三种树脂的静态吸附能力比较

D-101-DCCD对RA的吸附饱和速度最快、更具特异性；静态吸附量见表1。

从数据上看，两种改性树脂的吸附量均优于D-101树脂；D-101-DCCD对RA的静态吸附量达到了126.7mg/g，显示出良好的吸附能力。

3.2 三种树脂的静态脱附能力比较，数据如表2所示

如表2所示，D-101-DCCD对于RA和ST之间的脱附能力存在很大的差异。我们利用不同浓度的乙醇水溶液对RA进行脱附，结果发现，RA的静态脱附率随乙醇浓度增加而增加，100%时达到最大值，然而，从节约成本考虑，建议采用95%的乙醇作为脱附溶液。

4 结果与讨论

本文对D-101型树脂进行了改性。系统地比较了D-101、D-101-DCCD与D-101-CDD这三种大孔树脂对RA和ST的吸附/脱附能力，结果显示D-101-DCCD对于RA具有特异性的吸附和脱附能力。因此，D-101-DCCD在RA的分离纯化方面具有很高的应用前景。

参考文献

[1]滕祥金，杨丹.2007[J].中国糖科，（4）：24-26.

[2]胡献丽，董文宾，郑丹.2005[J].食品研究与开发，26（1）：36-38.

[3]王继峰，薛冬，藏晶[J].中医药导报.2001，7（3）： 125-126.

[4]王瑞.2008[J].辽宁大学学报，35（4）：355-357.

[5]陈天红，张杨，刘晓航.1998[J].中国科学，2（28）：460-465.

大孔树脂纯化莲蓬壳色素工艺研究 篇4

本文利用大孔树脂对从莲蓬壳中提取的色素进行纯化处理。通过比较6种大孔树脂对莲蓬壳色素吸附量及解吸率的测定,筛选出最佳树脂,并研究了纯化过程中吸附、洗脱的最佳工艺条件。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

莲蓬壳,采自安徽安庆地区;大孔树脂,三星树脂科技有限公司;无水乙醇为分析纯。

1.2 实验方法

1.2.1 原料制备

1.2.2 大孔树脂预处理

大孔树脂根据说明书要求进行预处理,将六种型号的大孔树脂用去离子水浸泡24h充分溶胀后,除去上层漂浮着的杂质和破碎的树脂颗粒,过滤;用无水乙醇乙浸泡24h后过滤,回收乙醇,用去离子水洗树脂至滤下的液体无醇味。

1.2.3 大孔树脂的筛选

称取预处理后的AB-8,D 101,D 201,WD 306,WD 918,WDA 302的六种树脂各10g分别放入三角瓶中,各加入吸光度为的莲蓬壳色素提取液在磁力搅拌器上搅拌

吸附完毕后,测吸光度。分别将上述吸附了莲蓬壳色素的树脂进行过滤,然后将树脂置于烧杯中,加入无水乙醇10mL,在磁力搅拌器上搅拌0.5h后过滤,稀释至50mL,测吸光度。以吸附率和解吸率为评价标准选出对莲蓬壳色素吸附和解吸性能较佳的大孔树脂型号。

吸附率=[(A1V1-A2V2)/A1V1]×100%

解吸率=[A3V3/(A1V1-A2V2)]×100%

式中:A1———原液的吸光度

V1———原液的体积,mL

A2———吸附后色素液的吸光度

V2———吸附后色素液的体积,mL

A3———解吸后的色素液的吸光度

V3———解吸后的色素液的体积,mL

1.2.4 动态法研究大孔树脂纯化的工艺条件

确定影响大孔树脂纯化莲蓬壳色素的因素,分别对进样量、进样速度、洗脱液流速、洗脱剂用量进行单因素实验,通过单因素试验确定大孔树脂纯化莲蓬壳色素的最佳工艺条件。

2 结果与讨论

2.1 树脂型号的选择

静态吸附实验结果如表1所示。

静态解吸实验结果如表2所示。

从表1和表2可知,D 101和WDA 302三型树脂对莲蓬壳色素有较强的吸附能力,但WDA 302型树脂用无乙醇不能将其洗脱下来,WDA 302型树脂不适用于莲蓬壳色素的分离纯化。同时AB-8型的吸附能力更优于D 101型树脂,综合考虑六型树脂的吸附能力、解吸能力、洗脱剂的选择,选择出AB-8型树脂,作为莲蓬壳色素分离纯化的树脂。

2.2 单因素实验

2.2.1 进样量对吸附效果的影响。

将预处理后的AB-8型大孔树脂20mL装入吸附树脂柱,量取已知450nm处吸光度为0.834的莲蓬壳色素提取液30mL以2.0mL/min的流速过树脂柱。收集流出液,在450nm处测定吸光度,再量取已知450nm处吸光度为0.834的莲蓬壳色素提取液20mL以2.0mL/min的流速过树脂柱。收集流出液,在450nm处测定吸光度,重复以上,直到流出液吸光度接近0.834为止。试验结果如图1所示。

由图1可以看出,随着进样量的增大,流出液的吸光值变大,在进样量70mL以下,吸光值变化不明显,但当进样量大于70mL以后,流出液吸光度变化明显,当进样量由90mL增加至110mL及以上时,流出液的吸光度已经接近进样的溶液吸光度0.833,此时可以认为已经吸附饱和,所以进样量选择80mL,即4倍树脂体积。

2.2.2 吸附速度对吸附效果的影响。

将预处理后的AB-8型大孔树脂20mL装入吸附树脂柱,量取已知450nm处吸光度为0.834的莲蓬壳色素提取液60mL分别以0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mL/min的流速过树脂柱。收集流出液,在450nm处测定吸光度,试验结果如图2所示。

由图2可知,吸附速度对吸附效果的影响显著,随着吸附速度的减小,吸附效果变好,但是当吸附速度下降到2mL/min及以下时,吸附效果变化不明显,所以最佳吸附条件为2mL/min,即每分钟1/10树脂体积。

2.2.3 洗脱剂用量对洗脱效果的影响。

将预处理后的AB-8型大孔树脂20mL装入吸附树脂柱,量取已知450nm处吸光度为0.834的莲蓬壳色素提取液100mL以2.0mL/min的流速过树脂柱。确保吸附饱和,用去离子水洗树脂柱,至流出液无色。用无水乙醇以1mL/min的速度通过树脂柱洗脱色素,每5mL分管收集洗脱液,稀释5倍并在450nm处测定吸光度,试验结果如图3所示。

由图3可知,洗脱剂无水乙醇通过5mL时,莲蓬壳色素开始被洗脱下来,之后色素浓度迅速升高,达到顶峰,洗脱剂通过20mL后,色素溶液浓度下降,洗脱下来的色素变少,当洗脱剂用量大于30mL吸附在大孔树脂柱上的莲蓬壳色素基本上完全洗脱下来,而且此曲线出峰迅速,没有明显的拖尾现象。因此,本实验确定最佳洗脱剂的用量为25mL,即1.25倍树脂体积。

2.3.4 洗脱液流速对洗脱效果的影响。

将预处理后的AB-8型大孔树脂20mL装入吸附树脂柱,量取已知450nm处吸光度为0.834的莲蓬壳色素提取液100mL以2.0mL/min的流速过树脂柱。确保吸附饱和,用去离子水洗树脂柱,至流出液无色。用25mL无水乙醇以0.3、0.6、0.9、1.2、1.5n、2.0n、3.0mL/min的速度通过树脂柱洗脱色素,收集洗脱液,稀释至100mL并在450nm处测定吸光度,试验结果如图4所示。

由图4可知,洗脱液流速小于1.0mL/min时,莲蓬壳色素的洗脱效果基本不变,可以认为洗脱完全,当流速大于1.2mL/min时,洗脱效果则随着流速而下降,因此,本实验确定的最佳洗脱液流速为1.0mL/min,即每分钟1/20树脂体积。

3 结论

大孔树脂型号AB-8,选用最佳提取条件下得到的色素溶液,进样量为4倍树脂体积,进样速度每分钟1/10树脂体积,洗脱剂为无水乙醇,洗脱剂用量为1.25倍树脂体积,洗脱液流速为每分钟树脂体积

参考文献

[1]邹秀文,赵效锐,靳晓白.中国荷花[M].北京:金盾出版社,1997:1-3.

[2]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].广州:广州科技出版社,2005:141-144.

[3]Sakano K,Mizutani M,Murata M,et al.Procyanidin B2 has anti-and pro-oxidant effects on metal-mediated DNA damage[J].FreeRadic.Biol.Med.,2005,39(8):1 041-1 049.

[4]凌智群,谢笔钧,江涛,等.莲房原花青素对大鼠实验性心肌缺血的保护作用[J].中国药理学通报,2001,17(6):687-90..

[5]Li MY,Xu Z T.Quercetin in a lotus leaves extract may be responsiblefor antibacterial activity[J].Arch Pharm Res.,2008,31(5):640-644.

[6]刘韶,雷鹏,李新中,等.莲心多糖的提取工艺研究[J].中药材,2006,29(10):1 102-1 104.

大孔树脂 篇5

大孔树脂吸附-生物再生法处理高盐苯酚废水的研究

摘要：本文利用大孔吸附树脂吸附-生物再生法处理高盐苯酚废水.循环再生实验结果表明XDA-1吸附-生物再生法处理高盐苯酚废水效果稳定,6次再生效率仍可维持在81%以上,对NaCl的分离效率均大于99%.再生XDA-1的大部分孔隙结构没有受到破坏,表面性质保持较好,由此可以认定生物再生是一种较为安全的再生方法.作 者：顾锡慧 作者单位：中海油天津化工研究设计院,天津,300131期 刊：天津化工 Journal：TIANJIN CHEMICAL INDUSTRY年，卷(期)：2010,24(1)分类号：X783关键词：苯酚 吸附 高盐废水 生物再生 XDA-1

大孔树脂 篇6

关键词：大孔树脂 除蛋白

中图分类号：TQ461 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2015）04-0083-01

1 实验准备

1.1 实验材料

红黄鹅膏粗多糖（实验室制备）。

1.2 试验仪器

AL-104电子分析天平、YXQ-SG46-280S手提式压力蒸汽灭菌器、Eppendorf移液、酶标仪680型、Bio Rad恒温水浴锅。

1.3 实验试剂

石油醚，硫酸，丙酮，乙醇，葡萄糖均为分析纯、大孔树脂。

2 实验方法

2.1 多糖提取工艺流程

红黄鹅膏子实体干品→粉碎→按一定水料比配成溶液→超声破碎仪超声→热水浸提→过滤→取上清液→浓缩→醇沉→干燥→复溶→硫酸-苯酚法测定粗多糖含量。

2.2 采用苯酚-浓硫酸法测总糖含量

多糖含量（%）=（CVD/M）×100%，式中，C由回归方程得出；V为多糖提取液体积（mL）；D 为红黄鹅膏多糖提取液的稀释倍数； M样品干重（g）。

2.3 样品蛋白质含量测定

将样品准确稀释合适的倍数，吸取1.0ml溶液，测量其吸光度，以标准曲线计算蛋白质含量。制作蛋白含量标准曲线为y=0.0111x+0.3224，R2=0.9984。蛋白含量=CVt/1000VsWf （mg/g），其中，C由回归方程得出，Vt为提取液总体积（ml），Wf为样品鲜重（g），Vs为测定时加样量。

蛋白质脱除率=（脱蛋白前的含量-脱去蛋白后的含量）/脱蛋白前的含量×100%。

多糖回收率=脱蛋白后多糖含量/脱蛋白前多糖含量×100%。

2.4 四种大孔树脂的筛选

2.4.1 大孔吸附树脂的预处理

无水乙醇浸泡大孔树脂24小时，充分膨胀后，用乙醇进行冲洗，直到洗出液加三倍蒸馏水无白色混浊现象，再用蒸馏水对其进行冲洗，洗至无醇味，然后将树脂浸泡于蒸馏水中备用。

2.4.2 静态吸附与解析实验

（1）静态吸附实验。称取经预处理的四种大孔吸附树脂1g，置于100ml锥形瓶中，向其加入30ml多糖样品溶液，置于摇床，25℃震荡吸附，每半小时取样一次，测定OD值，可求得相应多糖质量浓度，计算大孔树脂的吸附率及吸附量。

（2）静态解析实验。

Q=（C0-Cr）V0/W

D0=（C0-Cr）/C0×100%大孔吸附树脂静态吸附后，将其进行过滤，将过滤的大孔树脂置于100ml 的锥形瓶中，加入30ml蒸馏水作为洗脱剂，置于摇床震荡解析，每隔30min取一次样，测定其吸光值，求得相应多糖质量浓度，计算树脂的解析率及解析量解析量。解析率吸附率及吸附量分别按下式计算。

D=[CV/（C0-Cr）V0]×100%

C0 为初始质量浓度，Cr为吸附后质量浓度，C为解吸液的质量浓度，V0为初始溶液体积，V为解吸液的体积，W为树脂质量，Q为吸附量，D0为吸附率，D为解吸率。

2.4.3 动态吸附与解析实验

（1）动态吸附实验。准确称取经过预处理后的大孔树脂，湿法装柱（1.5cm×30cm），层析柱径高比为（1：20，体积34.634cm3）。吸取多糖样液100ml，上样吸附，上样量为2倍柱体积，控制流速为1ml/min，每4ml取一次样，测定其吸光值，可求得相应多糖质量浓度，可计算树脂的吸附率及吸附量。

（2）动态解析实验。用蒸馏水作为洗脱剂，控制流速为1ml/min，每4ml测1次吸光值，求得相应多糖质量浓度，得多糖动态解析率及解析量。

3 结果与讨论

3.1 静态吸附与解析

在静态吸附过程中，D-101对蛋白的吸附率高，达到83%，解析率低为12%，对多糖的吸附率达到58，解析率为72%，因此D-101型号的树脂效果较好。

3.2 动态吸附与解析

在动态吸附过程中，D-101对蛋白的吸附率高，达到89%，解析率低为17%，对多糖的吸附率达到72%，解析率为84%，因此D-101型号的树脂效果较好，且动态吸附效果优于静态吸附效果（图1）。

4 结语

在除蛋白、脱色等方面，与常规方法比大孔树脂吸附法操作简单，成本较低且对环境无污染。本实验对D101、AB-8、X-5、D-311四种不同型号的大孔树脂对红黄鹅膏多糖多糖的吸附及解析性能进行考察，结果表明，D-101型大孔树脂的效果最佳，对蛋白其静态吸附率及解析率分别为83%和12%，动态吸附率及解析率分别为89%和17%，对多糖的静态吸附率和解析率为58%和72%，动态吸附率和解析率为72%和84%，对蛋白的去除率达到90%，多糖保留率达到64%。

强极性大孔树脂的合成与表征 篇7

本实验以纤维素为骨架结构与己二酰氯交联, 同时加入一定比例的致孔剂发生反应, 它们互相交联形成了多孔骨架结构含交换基团的交联化合物。合成的大孔树脂用傅利叶红外光谱仪进行基团表征, 用扫描电镜进行树脂成孔表征。用芦丁做吸附质探讨合成的大孔树脂的吸附性能, 包括平衡吸附、静态吸附与解吸, 同时研究不同条件对该树脂的静态吸附性能的影响。

1 实验部分

1.1 原料和仪器

微晶纤维素, 曲阜市天利药用辅料有限公司;氯化锂 (liCl, 分析纯) , 天津市津北精细化工有限公司;N, N-二甲基乙酰胺 (DMAc, 分析纯) , 天津市巴斯夫化工有限公司;己二酸, 氯化亚砜, 吡啶, 液体石蜡 (分析纯) , 天津市光复科技发展有限公司;环己烷 (分析纯) , 天津市科密欧化学试剂有限公司;无水碳酸钠/无水碳酸氢钠 (分析纯) , 天津市恒兴化学试剂制造有限公司;氢氧化钠 (分析纯) , 北京益利精细化学品有限公司;盐酸 (分析纯) , 哈尔滨新春化工产品有限公司;无水乙醇, 1, 4-二氧六环 (分析纯) , 天津市富宇精细化工有限公司;芦丁, 郑州荔诺生物科技有限公司。

傅立叶红外仪 (FT-R) (美国E360型红外光谱分析仪) ;SEM (美国JMS-6700扫描电子显微镜) ;T6紫外分光光度计 (北京普析通用有限公司) ;RE-52A旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器有限公司) ;SHZ-82A恒温振荡器 (宁波贝诺有限公司) 。

1.2 大孔树脂的合成

1.2.1 纤维素的溶解

在干燥的250mL四口瓶中, 加入一定量的liCl, 其含量为DMAc的5%～10%, 再加入一定量的微晶纤维素, 含量约为DMAc的1%～4%, 安装回流冷凝管, 然后通入氮气, 用加热套加热至100℃并保持2h, 再自然冷却至室温, 纤维素完全溶解, 得到均相溶液。

1.2.2 己二酰氯的制备

将0.5mol的己二酸投入到500mL三口瓶中, 向恒压滴液漏斗中加入2.5mol二氯亚砜, 控制反应温度不超过30℃, 待全部滴加完毕后缓慢升温至90℃, 并在该温度下回流6 h, 且全程通入氮气保护。待反应结束后进行常压蒸馏, 回收75～80℃二氯亚砜馏分, 之后再改用减压蒸馏, 收集126℃ (1.6kPa) 的馏分, 计算收率为63.0%～79.9%。

1.2.3 大孔树脂的合成

向已溶解的纤维素中加入比例为1∶1的10mL吡啶与1, 4-二氧六环的混合溶液做催化剂, 加入40mL比例为1∶4的环己烷与液体石蜡的混合溶液做致孔剂, 然后将己二酰氯与DMAc按1∶2的比例混合均匀, 注入恒压滴液漏斗中, 将它缓慢滴加入溶解的纤维素均相溶液中, 在40～80℃的温度下快速搅拌, 反应24h, 并且整个过程都通入氮气保护, 反应结束后自然冷却至室温。然后将产物倒入500mL的冰水混合物中清洗、抽滤。再先后用乙醇、碳酸氢钠水溶液、乙醇、水依次洗涤至中性, 抽滤, 烘干[1,2,3]。

2 表征

2.1 红外光谱分析

将处理好的大孔树脂样品真空60℃干燥, 与KBr按1∶100的质量比进行混合, 充分研磨压片, 用傅利叶红外光谱仪进行基团表征。

纤维素及己二酰氯交联纤维素大孔树脂的FTIR图如图1和图2所示。通过图谱对比可以看到, 己二酸纤维素酯在1733.79cm-1附近明显出现了尖锐的强吸收峰, 判断为酯羰基伸缩振动的特征吸收峰, 表明纤维素发生了酯化。图谱在1652.44cm-1附近同时出现了吸收峰, 估计是酰胺类羰基化合物, 此峰是酰胺与氢键缔合导致谱带移至1650～1640cm-1。在3400cm-1处的OH基伸缩振动峰发生了明显的衰减, 表明反应过程中消耗了OH基团。

2.2 扫描电镜分析

取处理好的己二酸纤维素树脂做电子扫描电镜 (SEM) 测试[4], 如图3。

由图3可看到, 在纤维素树脂的表面有很多枝状纤维素骨架与己二酰氯交联出现的大的孔径。但是孔径分布并不均匀, 这可能是由于纤维素在溶解过程中, 先是纤维素中的无定形区先溶胀, 而结晶区先转变为无定形区后溶胀, 于是在交联反应过程中, 纤维素部分的无定形区首先溶解的部分优先与己二酰氯反应, 而部分还未溶解的无定形区或未完全打开的结晶区再与己二酰氯反应, 由于反应时间和程度的不同从而导致了交联度不同, 因此形成了孔径分布不均的树脂。

3己二酰氯交联纤维素大孔树脂的吸附性能测定

3.1 芦丁标准曲线绘制及含量测定

准确称量芦丁0.1500g , 加80%乙醇溶解, 定容至50mL, 用吸量管准确量取芦丁标准溶液0.00mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL和4.00mL, 并分别置于50mL容量瓶内, 加蒸馏水定容, 摇匀, 在365nm处测定芦丁溶液的吸光度。

由所得数据线性回归如图4, 得到回归方程为y=12.498x-0.0071, R2=0.9996。根据待测样的吸光度值, 就可计算得出芦丁的含量。

3.2 大孔树脂静态吸附与解吸

3.2.1 大孔树脂静态吸附

根据静态吸附实验, 称量芦丁0.0100g, 树脂0.4000g于80%乙醇溶液中, 室温下振荡。测定不同时间段上清液中芦丁浓度, 以吸附时间为横坐标, 吸附量Q为纵坐标, 作吸附动力学曲线, 如图5。吸附量计算公式:

Q= (C0-C1) ×V/M (1)

式中:Q—吸附量, C0—吸附前芦丁浓度, C1—吸附后芦丁浓度, V— 定容后芦丁溶液的体积, M—树脂的质量。

由图5可知, 曲线初始上升迅速, 表明树脂在这段时间内吸附速度快;11h后曲线开始趋于平缓, 说明吸附量达到一定程度时随时间增长, 吸附速度与吸附量增量迅速减少, 树脂有少量的解吸现象发生。故本实验选择11h作为上柱液静态吸附时间[5,6,7,8]。

3.2.2 大孔树脂静态解吸

根据静态解吸实验配制初始浓度为0.0100g/L芦丁溶液, 加入大孔树脂0.5000g在25℃下恒温吸附24h, 测量芦丁溶液浓度为C1。将达到吸附平衡的树脂在真空条件下干燥。分别称取1.0000g达到吸附平衡的树脂加入0%、20%、40%、60%、80%乙醇溶液中, 在35℃下恒温10h。取乙醇溶液用T6紫外分光光度计测量芦丁溶液的浓度C2 。解吸率d (%) 的计算公式:

d (%) =C2 / (C0-C1) ×100 (2)

大孔树脂的解吸率-洗脱液浓度关系曲线, 见图6。

式中:d—解吸率, C1—吸附饱和时芦丁溶液的浓度, C2—解吸后芦丁溶液的浓度。由图6可知:随着洗脱液乙醇浓度的增加, 芦丁在树脂上的吸附能力逐渐下降。这可以从芦丁的分子结构出发来解释, 芦丁属于皂苷类物质, 组成皂苷的苷元为甾体与三萜类, 连接成糖基成苷后有很大的极性, 随着乙醇浓度的增加, 洗脱液的极性下降, 洗脱效果下降。水的极性最大, 因此以水的洗脱效果最佳。

3.3 大孔树脂对乙醇-水溶液中芦丁的平衡吸附

常用的吸附等温线模型有Langmuir方程和Freundlich方程。Langmuir方程是表面吸附的理想情况[9,10,11]。实际上, 在很窄范围内的吸附可认为是在均匀表面上进行, 可用该方程描述。用Freundlich吸附方程拟合, 吸附等温线方程可表示为:图7为该大孔树脂对乙醇-水溶液中芦丁的吸附等温线, 图7表明, 吸附等温线都是Ⅰ型等温线, 用Freundlich等温吸附方程拟合:

3.4 温度对静态吸附的影响

分别称取5g制备的大孔树脂于5个锥形瓶中, 然后分别加入0.1g芦丁, 同时分别加入80%乙醇-水溶液, 最后分别在20℃、25℃、30℃、35℃、40℃条件下恒温振荡24h后, 分别提取上清液测紫外吸光度, 并将所得紫外吸光度值整理后得到吸附量分别为0.002440g/L, 0.005998g/L, 0.008158g/L, 0.005341g/L, 0.003440g/L, 将数据整理作图8。

由图8可以看出, 随着温度的升高, 树脂对芦丁的吸附逐渐增大。但是当温度达到30℃时, 树脂对芦丁的吸附能力达到最大;温度继续升高, 树脂对芦丁的吸附能力呈下降趋势, 由此, 本实验选择30℃为最佳吸附温度。

3.5 时间对静态吸附的影响

称取5g制备的大孔树脂于锥形瓶中, 然后称取0.1g芦丁加入锥形瓶中, 之后加入80%乙醇-水溶液。将锥形瓶于30℃下恒温振荡, 并且在2h, 4h, 6h, 8h, 10h, 12h, 14h, 16h时分别取上清液测紫外吸光度, 将所得紫外吸光度值整理后得到吸附量分别为0.005033 g/L、0.006545g/L、0.008158g/L、0.008362g/L、0.008362g/L、0.009033g/L、0.009033g/L、0.009033g/L, 将所得数据整理后作图9。

由图9可以看出, 制备的大孔树脂对芦丁的吸附量随着时间的延长逐渐增大, 在8～10h时出现短暂的吸附平衡, 之后又继续增大;直到12h时, 吸附量达到最大, 并且随着时间的延长吸附量不变, 说明在12h时本实验制备的大孔树脂对芦丁的吸附能力达到最大。

4 结论

(1) 本方法采用己二酰氯与纤维素聚合反应, 同时在得到的均相溶液中加入一定比例的吡啶与1, 4-二氧六环的混合溶剂为复合氧化剂, 以及一定比例的环己烷与石蜡的混合溶剂作为致孔剂, 反应中互相交联聚合形成了具有多孔骨架结构的大孔吸附树脂。

(2) 利用傅利叶红外光谱仪对制备的大孔树脂进行基团表征, 得到的图谱显示反应物中含有羟基与酯基, 说明纤维素中的羟基并未完全反应, 而且反应生成了酯基。用扫描电子显微镜进行树脂孔径表征, 图片中有不均匀且层次不一的孔洞, 这就说明反应生成了大孔树脂。

(3) 以芦丁为吸附质, 探讨合成的大孔树脂的吸附性能, 同时研究了不同溶剂对该树脂的吸附性能影响, 得到的芦丁在树脂上的吸附数据符合Freundlich等温吸附方程, 所以本实验合成的新型大孔树脂可以用来吸附苷类。并且通过比较还发现, 当用乙醇做溶剂时吸附性能最好, 用水做溶剂解吸效果最好。

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大孔树脂分离桑叶黄酮的研究 篇8

1 材料

Perkin elmer UV/Vis spectrometer Lambada 12紫外分光光度计。桑叶:药材购于浙江省中医院药房。大孔树脂购于华东医药器械公司;乙醇等为分析纯。

2 方法与结果

2.1 上柱药液的制备

取桑叶药材70g, 先用50%的乙醇浸泡3小时, 超声提取3次, 每次30分钟。过滤, 合并滤液, 回收至无醇味, 加水调整至140m L, 相当于每m L含0.5g生药的浓缩液。高速离心15分钟, 过滤, 备用。测得黄酮含量为160mg/m L。

2.2 含量测定

2.2.1 芦丁对照品的制备

精密称取120℃干燥恒重的芦丁对照品50.85mg, 用甲醇定容于50m L容量瓶中, 摇匀, 精密量取10m L, 用甲醇定容于25m L容量瓶中, 摇匀备用。

2.2.2 标准曲线的绘制

精密称取芦丁对照品溶液0.1、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0m L, 分别置于25m L具塞试管中, 各加水至6.0m L, 加入5%亚硝酸钠1.0m L摇匀, 放置6分钟, 加入10%硝酸铝1.0m L, 加水至刻度, 摇匀, 放置15分钟, 在510nm处测吸光度, 绘制浓度-吸光度标准曲线, 得回归方程:y=0.0115x+0.0004, r=0.9999。

2.2.3 桑叶总黄酮的含量测定

按照桑叶的提取工艺提取桑叶制成浸膏, 取上述桑叶浸膏适量置于100m L容量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀作为供试品溶液, 分别吸取供试品及芦丁对照溶液20m L, 测定桑叶总黄酮含量。

2.3 静态吸附-解吸实验

2.3.1 静态吸附

取5种处理好的大孔树脂 (DA-101、D-101、AB-8、HP-20、H-103-1) 1g, 分别加入桑叶提取液10m L于25m L三角瓶中。每间隔20分钟振荡1分钟, 持续4小时后, 静置24小时, 使达到饱和吸附。然后进行抽滤, 测定滤液中黄酮含量, 按下式计算吸附率, 见表1。

饱和吸附率= (C0-C1) /C0×100%

2.3.2 静态解吸

将静态吸附好的树脂进行过滤抽干, 各加入50%乙醇20m L, 每间隔20分钟振摇1分钟, 持续4小时后, 测定洗脱液中桑叶黄酮的含量, 按下式计算解吸率, 见表1。

洗脱率=[洗脱浓度×洗脱体积]/饱和吸附量×100%

比较各种树脂的吸附和解吸率, 表明DA-101对桑叶黄酮的吸附分离效果最佳。

2.4 工艺条件考察

2.4.1 上样量考察

取桑叶提取液, 加于8m L (1BV) 的DA-101树脂上以2BV/h的流速进行吸附, 按树脂体积数收集流出液, 于510nm处测定吸光度, 计算总黄酮含量, 绘制动态吸附曲线, 见图1。由图可知上样量为8BV时达到饱和吸附, 故确定上样量为8BV。

2.4.2 醇洗脱浓度的考察

取桑叶提取液, 加于DA-101树脂上, 以2BV/h的流速进行吸附, 再以6种不同浓度的醇 (10%、30%、50%、70%、90%、100%) 进行洗脱, 收集各浓度的洗脱液100m L, 于510nm处测定吸光度, 计算总黄酮含量结果见表2。从表2可以看出, 当醇浓度为50%时洗脱效果最好。

2.4.3 洗脱终点的确定

按上述确定的条件, 取桑叶提取液进行上柱, 吸附和洗脱, 分段收集洗脱液, 测定洗脱液中黄酮含量, 绘制洗脱曲线, 见图2。从图2可以看出, 当洗脱剂用量为15BV时基本上将黄酮洗净。

2.5 分离的桑叶总黄酮纯度的考察

按优化的工艺条件, 取桑叶提取液加于DA-101树脂上, 收集洗脱液, 浓缩, 蒸干, 加甲醇定容至100m L容量瓶, 测定总黄酮的含量, 并测定干膏收率, 计算总黄酮的纯度, 见表3。从表3可看出, 经DA-101大孔树脂处理后的总黄酮含量可达72.6%以上, 具有良好的应用价值。

3 结论

通过实验得出:DA-101分离富集效果最好, 其最佳工艺为以每m L含0.5g生药, 上样量为8BV, 洗脱浓度为50%乙醇, 洗脱剂用量为15BV。经过分离富集后黄酮含量可达到72.6%以上。该法简单可行, 分离效果好, 能满足于大生产的要求。

摘要：目的:筛选分离桑叶总黄酮的最佳树脂, 并对影响分离的各种因素进行系统的研究, 使分离工艺达到最优化。方法:采用静态与动态吸附-解吸两种方法, 用紫外分光光度法测定桑叶总黄酮的含量, 优化最佳工艺。结果:DA-101分离效果最好, 其最佳工艺为以每m L含0.5g生药, 上样量为8BV, 洗脱浓度为50%乙醇, 洗脱剂用量为15BV。经过分离富集后黄酮含量可达到72.6%以上。结论:该法简单可行, 分离效果好, 能满足于大生产的要求。

关键词：桑叶黄酮,大孔树脂,工艺优化

参考文献

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大孔树脂 篇9

1.1 仪器

Agilent高效液相色谱仪:包括化学工作站, VWD检测器, ZORBAX SB-C18 (5μm, 4.6×250mm) 色谱柱;梅特勒电子天平。

1.2 试剂

甲醇为色谱纯 (美国天地公司) , 其余为分析醇。

1.3 对照品

阿魏酸对照品由中国药品制品检定所提供。

1.4 药材

当归购于甘肃岷县, 为道地药材, 经鉴定为当归Angelica sinensis (Dliv.) Diels的干燥根。

1.5 大孔吸附树脂

购于天津南开大学化工厂。

2 色谱条件

Z O R B A X S B-C 1 8 (5μm, 4.6×250mm) 色谱柱;柱温:30℃;流动相:甲醇∶0.05%冰醋酸 (40∶60) ;检测波长:320nm;流速:0.6ml/min。

3 实验方法

3.1 树脂的前处理

取市售大孔吸附树脂, 用乙醇加热回流提取洗脱, 洗至洗脱液蒸干后无残留。经乙醇洗净的树脂保存备用。以乙醇湿法装柱。继续用乙醇在柱上流动清洗, 不时检查流出的乙醇, 至与水混合不呈白色混浊为止 (取1ml乙醇液加2ml蒸馏水) 。然后以大量的蒸馏水洗去乙醇, 洗至流出液Molish反应呈阴性, 备用。少量乙醇的残留将会大大降低树脂的吸附能力。

3.2 不同树脂比吸附量 (absorbtion ratio) 的测定

精密量取当归提取液75ml (每ml含生药1g) , 加到已经前处理的树脂, 调节流速为0.5ml/min, 过柱流出液重吸附2次, 静置15分钟, 用水洗至流出液Molish反应呈阴性, 再用95%的乙醇洗脱, 洗脱至流出液无色为止。结果见表1, AB-8型大孔吸附树脂具有较大比吸附量, 性能优于其他几种树脂。故选择弱极性树脂AB-8作为当归总酚酸吸附纯化的树脂。

3.3 A B-8型大孔吸附树脂对当归总酚酸吸附, 分离相关参数的研究

3.3.1 比上柱量 (saturation ratio) 的测定

精密量取当归提取液50ml (1g生药/ml) , 加到已经前处理的树脂, 调节流速为0.5ml/min, 过柱流出液重吸附2次, 静置15分钟, 测定其比上柱量。比上柱量是所用树脂达吸附终点时, 单位质量干树脂吸附夹带成分的总和, 即S= (M上-M残) /M。经测定, AB-8型大孔

吸附树脂对当归总酚酸 (以阿魏酸计) 的比上柱量为5.60, RSD=3.40%。

3.3.2 比吸附量 (absorbtion ratio) 的测定

上述树脂用水洗至流出液Molish反应呈阴性, 测定其比吸附量。比吸附量是单位质量干树脂吸附成分的总和。即A= (M上-M残-M水) /M。经测定, AB-8型大孔吸附树脂对当归总酚酸 (以阿魏酸计) 的比吸附量为3.88, RSD=3.99%。

3.3.3 洗脱溶媒的选择

取AB-8型大孔吸附树脂7克, 湿法上柱, 平行制备7份, 分别经过前处理, 根据吸附容量, 精密吸取当归提取液 (1g生药/ml, 含阿魏酸0.8439mg/ml) 上柱, 过柱流出液重吸附2次, 静置15分钟, 用蒸馏水洗脱至流出液Molish反应呈阴性, 分别用30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%的乙醇洗脱, 测定其中阿魏酸的含量。

另当归提取物每ml含固形物0.5373g, 经过计算, 其纯度为0.158%。结果显示30%乙醇洗脱液所得样品中, 阿魏酸纯度为9.60%, 相对含量最高, 故确定洗脱溶媒为30%的乙醇溶液。当归提取物经过AB-8大孔吸附树脂的吸附、洗脱后, 在固形物含量降低的同时, 纯度呈显著性提高。

3.3.4 洗脱累积率的测定

取AB-8型大孔吸附树脂7克, 湿法上柱, 经过前处理, 根据该树脂的吸附容量, 精密吸取当归提取液 (每ml含1克生药) 上柱, 用蒸馏水洗脱至流出液无色, 用30%乙醇液洗脱, 刚开始连续收集50ml洗脱液, 以后分段收集, 每50ml收集一次, 累计收集350ml。计算各部分洗脱液中阿魏酸的含量, 测定结果可知, 用30%乙醇液洗脱, 收集150ml洗脱液, 99.23%的指标成分已从树脂上解吸下来, 即洗脱体积为9BV。

3.3.5 比洗脱量 (Eluation ratio) 的测定

取AB-8型大孔吸附树脂, 湿法上柱, 经过前处理, 根据该树脂的吸附容量, 精密吸取当归提取液 (每ml含1克生药) 上柱, 用蒸馏水洗脱至流出液无色, 用30%乙醇液洗脱, 收集洗脱液200ml (终点) , 计算其比洗脱量。比洗脱量是吸附达饱和后, 用一定浓度的乙醇洗脱至终点, 单位质量干树脂洗脱成分的质量, 即E=M醇/M。经测定, 比洗脱量为3.16, RSD=2.69%。

3.3.6 不同浓度的当归提取物对AB-8树脂吸附性能的影响

原液浓度会直接影响到AB-8树脂吸附性能。故用不同浓度的当归提取物上柱, 考察其比吸附量及解吸率, 为选择适宜的上样浓度提供依据。定量加入已知含量的当归提取物, 以2BV/1小时的流速上样吸附洗脱, 用蒸馏水洗脱至流出液无色, 再用30%乙醇液洗脱至终点。经试验, 虽然上样浓度高, 比吸附量也随之增加, 但解吸率显著降低, 有效成分不能被完全洗脱下来。因此选择当归药液浓度为1.0g/ml为宜。

3.4 讨论

3.4.1 不同类型树脂对同一成分有不同程度的吸附, 同一型号树脂对多种成分也有不同程度的吸附。为了使树脂法成功地应用于生产, 除选用分离介质, 还要配合最佳的工艺条件, 如药液的预处理, 浓度, PH, 吸附和解吸附的速度, 洗脱剂的选用。同一成分, 所用的大孔树脂的型号不同, 其吸附性能有很大的差异, 故富集纯化不同的成分对大孔树脂的选择很有必要。

3.4.2 当归提取物在没有上柱分离之前, 阿魏酸的含量仅为0.9%, 结果大孔吸附树脂富集纯化, 纯度提高到9.6%。

3.4.3 一般情况下, 纯化同一种药物的大孔树脂, 当其吸附量下降30%以上时, 应视为不宜再用。故应该积累树脂再生的研究数据, 建立合理的树脂再生方法及再生合格标准, 使不同批次产品的纯化效果稳定并能节约成本。

摘要：目的:选择适宜的大孔吸附树脂来纯化当归中酚酸类成分, 并优选其相关参数。方法:采用HPLC法, 测定阿魏酸的含量。结果:选择AB-8型大孔树脂作为当归酚酸类成分吸附纯化的树脂。结论:AB-8型大孔树脂对当归酚酸类成分吸附及洗脱参数为:比上柱量=5.6, 比吸附量=3.88, 比洗脱量=3.66, 洗脱溶媒为30%的乙醇, 洗脱体积为9VB。

大孔树脂 篇10

TU-1900双光束紫外-可见分光光度计 (北京普析通用仪器有限责任公司) , 酸枣仁皂苷A对照品 (批号:110734-201201, 中国药品生物制品检定所) 。

2 方法与结果

2.1 酸枣仁总皂苷含量测定[1]

2.1.1 对照品溶液的制备

精密称取酸枣仁皂苷A标准品3.0 mg, 置于10 ml容量瓶中, 用甲醇溶解并稀释至刻度, 配制成0.3 mg/ml的对照品溶液备用。

2.1.2 标准曲线的绘制

在472 nm波长处采用比色法, 以吸收度 (Y) 为纵坐标, 以质量 (X) 为横坐标, 计算得回归方程Y=16.205X-0.0015 (r=0.9991) 。

2.1.3 样品测定

精密吸取供试溶液适量, 置于10 ml具塞试管中, 挥尽溶剂, 按照“2.1.2”项下总皂苷测定方法进行样品测定。

2.2 酸枣仁总皂苷纯化工艺参数考察与优化

2.2.1 酸枣仁总皂苷的静态吸附及解吸附考察

精密称取预处理后的六种大孔吸附树脂5 g (干树脂) , 分别将其置于500 ml锥形瓶中, 加入250 ml酸枣仁供试液, 预吸附24 h后吸取上清液测量吸光度, 从而计算吸附量。将上述6种吸附树脂滤出, 水洗, 滤纸吸干, 每种树脂等分成4份, 分别精密加入30%、50%、70%、90%乙醇200 m L, 振摇解吸附24 h, 精密量取1.0 ml, 测定吸收度, 结合吸附量计算解吸率。通过吸附—解吸试验, 可知HPD-100型大孔吸附树脂吸附量为122.5 mg/g, 70%乙醇解吸率为96.93%。综合分析各类型大孔树脂对酸枣仁总皂苷的吸附量、解吸率, 选择HPD-100型大孔吸附树脂对酸枣仁总皂苷进行富集。

2.2.2 HPD-100型大孔吸附树脂动态吸附考察

2.2.2. 1 原液浓度对吸附的影响

取5 g (干树脂) 装柱, 准确称量样品溶液5份, 每份10 ml, 分别加入蒸馏水0、5、10、15、20 ml, 体积流量为0.5 ml/min, 分别收集5份过柱液, 完成含量测定和吸附容量的计算。结果表明, 酸枣仁总皂苷吸附溶液质量浓度在1.05~1.58 mg/ml为最佳, 因此可考虑用1.58 mg/ml酸枣仁提取物直接上大孔吸附树脂进行富集。

2.2.3 HPD-100型大孔吸附树脂动态解吸附考察

2.2.3. 1 洗脱剂浓度的影响

取酸枣仁提取物溶液上样, 将4根HPD-100树脂柱 (干树脂5 g) 分别用等量蒸馏水洗脱, 流速控制为1ml/min, 蒸馏水洗脱馏分中Molish反应呈阳性, 说明蒸馏水可除去糖类杂质, 进而以1 ml/min流速分别用30%、50%、70%、90%乙醇洗脱, 5%香草醛浓硫酸反应作为指标, 洗脱至反应为阴性。洗脱后的各馏分经水浴浓缩至干后减压干燥, 冷却后称重并测定其中总皂苷的含量, 计算总皂苷回收率。结果表明, 选用70%的乙醇作洗脱剂, 总皂苷百分含量和总皂苷回收率均最高。

2.2.3. 2 洗脱剂用量的考察

按照以上试验确定的吸附洗脱条件, 70%乙醇的用量是影响酸枣仁皂苷纯化的主要因素, 称取HPD-100干树脂5 g, 按饱和时上样量取酸枣仁提取物溶液168 ml, 待吸附完全后用蒸馏水洗脱至Molish反应呈阴性, 后用70%乙醇洗脱, 分段收集馏分, 共收集5份, 每份40 ml, 馏分经水浴浓缩至干后减压干燥, 冷却后称重并测定其中总皂苷的含量。结果表明, 总皂苷的含量从第1份到第5份在逐渐减少, 说明酸枣仁总皂苷至第5份时已基本被解析附完全, 故确定洗脱剂的用量为200 ml, 相当于40 ml/g (干树脂) 。

3 讨论

本研究通过静态吸附解吸附实验考察了AB-8、NKA-9、HPD-100、D-101、D-301、X-5等六种大孔吸附树脂对酸枣仁皂苷的吸附与解吸附能, 结果表明HPD-100型大孔吸附树脂吸附容量大、解析率高、吸附速度快, 对纯化酸枣仁皂苷工艺具有较高应用价值。洗脱实验结果表明:酸枣仁总皂苷富集于70%乙醇洗脱液部位, 回收率为91.77%, 工艺稳定可行, 重现性好。

摘要：目的 研究最佳大孔吸附树脂纯化酸枣仁皂苷工艺。方法 分别从静态吸附及解吸附考察酸枣仁总皂苷的解析率, 从动态吸附及解吸附考察洗脱剂用量、浓度。结果 选用HPD-100大孔吸附树脂, 酸枣仁总皂苷富集于70%乙醇洗脱液部位, 回收率为91.77%。结论 通过大孔吸附树脂富集方法可较好地纯化酸枣仁皂苷, 工艺稳定可行。

关键词：酸枣仁,纯化,总皂苷,大孔吸附树脂

参考文献

大孔树脂 篇11

化合物[1]。它的吸附作用与表面吸附、表面电性或形成氢键等有关[2]。绿原酸是烟草中主要成分之一, 具有降血压、抗病毒、利胆、抗菌、抗病毒、增高白细胞等药理作用, 是重要的工业的重要原料[3,4,5]。对4种大孔吸附树脂对烟草绿原酸的吸附分离性能进行研究, 采用高效液相法对绿原酸进行测定。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪:安捷伦1100泵;安捷伦检测器;安捷伦色谱工作站;SC202-00型电热恒温干燥器 (上海医疗器械五厂) ;超级恒温水浴锅 (上海医疗器械五厂)

绿原酸对照品 (中国药品生物制品检定所提供, 110753-200413) 。甲醇为色谱纯, 水为注射用水, 其它试剂试药均为分析纯。

烟草产地为黑龙江。

2 色谱条件

色谱柱为USA Agilent ZORBAXSB-C18柱 (规格4.6mm×150mm, 5μm) ;甲醇-2%醋酸水溶液 (17∶83) 为流动相;检测波长为326nm;流速1.0m L·min-1;柱温:25℃。

3 树脂的预处理

先用乙醇浸泡二十四小时以上, 使树脂充分溶胀。采用湿法装柱, 分别用20倍柱体积乙醇通过树脂层, 用去离子水洗尽乙醇, 用20倍柱体积的5%HCl溶液流速通过树脂层, , 而后用去离子水流速洗至中性。再用20倍柱体积的2%Na OH溶液通过树脂层, 用去离子水洗至中性即处理完毕。

4 静态吸附实验

4.1 树脂吸附容量及吸附率的测定

称取预处理好的树脂5克, 装入250m L的磨口三角瓶中, 准确加入一定量的吸附原液, 盖紧瓶塞, 在25℃的恒温水浴振荡器上振摇24 h。充分吸附后, 过滤, 测定滤液中绿原酸的浓度, 计算吸附容量及吸附率, 结果见表1。

4.2 树脂解吸率测定

取上述吸附饱和的树脂, 准确加入一定体积的乙醇溶液, 置恒温水浴振荡器上振荡24 h, 过滤, 测定解吸液中绿原酸浓度, 计算解吸率, 结果见表1。

5 树脂的动态吸附和洗脱实验

从上述实验表XDA-1树脂对烟草中绿原酸吸附和解析能力最好。将一定浓度的烟草提取液以一定的流速通入XDA-1树脂, 考察不同上样p H、绿原酸浓度、流速对树脂吸附性能的影响, 确定最佳的吸附工艺条件。

5.1 上样液p H对吸附效果的影响

绿原酸作为一种多羟基酚酸, 因为绿原酸以游离分子形式存在, 疏水性增强, 树脂对其吸附增所以强在酸性条件下易被吸附。实验证明药液p H值为3时可保持树脂的最大吸附。

5.2 上样液浓度对吸附效果的影响

将烟草绿原酸提取液配制成不同浓度的上样液, 进行动态吸附实验。实验表明, 上样浓度较低时, 随着浓度的增加, 树脂吸附量增加, 当上样液浓度达到3.45mg/m L时, 达到树的最佳吸附效果。随着上样液浓度的继续增加, 树脂的吸附率迅速降低。绿原酸浓度低时, 树脂出现泄漏时仍有一部分树脂未达到吸附饱和, 降低树脂的使用效率;如果浓度过高, 则泄漏早, 处理量小。由实验结果可知原料液的初始浓度以3.45mg/ml左右为宜。随着流速的增加, 树脂泄漏严重, 吸附量下降, 但是流速过慢则会延长吸附操作时间。流速为2和3 BV/h时泄漏率差别不大, 所以选择吸附流速3 BV/h为最佳流速。

5.3 洗脱剂乙醇浓度对绿原酸解吸效果的影响

将提取液上柱, 达到吸附饱和后, 用2 BV的去离子水洗去原液。再分别用不同浓度的乙醇, 以3 BV/h流速进行洗脱, 实验表明40%乙醇的洗脱效果最好。对洗脱液进行含量测定, 发现8倍柱体积基本能将绿原酸洗脱下来。

5.4 最佳吸附-洗脱条件下的验证实验

将处理好的XDA-1树脂装入的树脂柱中。使用盐酸将药液PH值调至3, 以流速3 BV/h上样, 使其达到吸附饱和, 然后用8倍树脂床体积的40%乙醇以3 BV/h流速洗脱, 收集洗脱液。将洗脱液减压浓缩, 使用高效液相对浓缩液按2项下色谱条件进行含量测定。浓缩液中绿原酸含量为40.21%, 绿原酸回收率为82.39%。

6 结论

大孔吸附树脂是一类不含交换基团且具有大孔结构的高分子吸附剂。它具有较大的比表面积, 可以通过物理吸附从水溶液中有选择地吸附有机物, 具有机械强度好、选择性好、解吸容易、可反复使用和流体阻力小等优点。大孔树脂近年来在中草药有效成分的提取分离中受到普遍重视。提取烟草绿原酸原工艺是采用常规采用水提取, 而绿原酸对热不稳定, 在提取、分离过程中大量分解。结合树脂的使用, 不仅简化了工艺、降低了成本而且使产品的收率和质量都明显提高, 具有实用价值。

参考文献

[1]刘荣华, 汪洋, 陈兰英.CDA-40大孔树脂提取胆红素工艺研究[J].中成药, 2000, 22 (3) :187.

[2]中国医学科学院药物研究所植化室.大孔吸附树脂在中草药化学成分提取分离中的一些应用[J].中草药, 1980, 11 (3) :138.

[3]WuWEIHUA, Kang ZHEN, Ouyang DS, etal.Progresses in thepharmacology of chlorogenicacid.NatProdResDev, 2006, 4:691-694.

[4]OhnishiM, MorishitaH, IwahashiH, et al.Inhibitory effectsof chloro-genic acids on linoleic acid peroxidation and hae-molysis.Phyto-chemistry, 1994, 36:579.