乙酰麦迪霉素

乙酰麦迪霉素（共2篇）

乙酰麦迪霉素 篇1

乙酰麦迪霉素 (Midecamycin Aecetate, MA) 为麦迪霉素衍生物, 具有吸收良好、组织浓度高、作用持续时间长等特点, 使之广泛应用于临床。主要用于治疗葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌、流感杆菌等引起的感染[1]。为检测MA在体液中的浓度, 进一步研究其体内处置过程, 本文建立并优化了人血清中MA浓度的高效液相色谱测定法。此方法快速简便, 灵敏度高, 重现性和专属性好, 用于健康人单剂量口服MA片后的血药浓度测定, 结果满意。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

日本岛津高效液相色谱仪 (LC-2010, 紫外检测器, CLASS-VP工作站) 、XW-80旋涡混合器、GS-15R高速冷冻离心机、Sartorius电子天平、台湾艾柯实验室专用超纯水机等。

1.2 试剂

乙酰麦迪霉素片 (石家庄制药集团欧意药业有限公司, 批号20071209, 规格0.1g) 、乙酰麦迪霉素对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号20060615) 、甲醇 (色谱纯) 、超纯水, 其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱分析条件

日本岛津高效液相色谱仪 (LC-2010, 紫外检测器, CLASS-VP工作站) , Diamonsil C18柱 (5μm, 4.6 mm×150 mm, 迪马公司) , 流动相:甲醇∶水=85∶15 (v/v) , 流速1.0 m L/min, 检测波长254 nm, 柱温25℃, 此色谱条件下测定乙酰麦迪霉素的保留时间为3.4 min.见图1.

2.2 乙酰麦迪霉素标准液的配制

精密称取乙酰麦迪霉素对照品50 mg, 置50 m L容量瓶中, 先加少量的流动相使其溶解, 然后再加流动相至刻度, 即得1 mg/m L的标准储备液;再取该标准储备液1 m L置100 m L容量瓶中, 用流动相稀释至刻度, 得10 mg/L标准工作液备用[2]。

2.3 样品的预处理

取血清1 m L, 加入0.1 mol/L Na OH, 混匀, 再加乙酸乙酯的混合提取液4 m L, 置旋涡振荡器上振荡提取2 min, 3 000转/min离心5 min, 定量取出有机相3 m L, 置45℃N2吹干有机相, 用100μL流动相定容待测。

2.4 血清标准曲线的绘制

取6支10 m L玻璃尖底刻度离心管, 分别加入乙酰麦迪霉素标准工作液, 浓度分别是100, 500, 1 000, 5 000, 10 000, 50 000 ng/m L各100μL, 分别加空白血浆900μL, 混匀, 即得制备血样, 照2.3方法操作, 20μL注入色谱仪分析。记录峰面积, 以峰面积外标法定量, 浓度 (c) 对峰面积 (S) 进行线性回归, 线性关系良好, 线性范围10~5 000 ng/m L, 回归方程Y=110.63X+256.47, r=0.9996, 最低检测浓度10 ng/m L.

2.5 回收率及精密度测定

制备10, 200, 3 000 ng/m L乙酰麦迪霉素血样, 每一浓度做平行管3份, 照2.3方法测定, 每份样品同日内进样5次, 1周内测定4次 (d1, 2, 3, 7) 。其平均回收率为98.31%, 各浓度的日内、日间RSD结果见表1.

2.6 样品测定

乙酰麦迪霉素片1 g口服, 连续使用2 d~5 d的临床患者, 于次日给药前抽取静脉血, 3 000转/min离心, 分离血清1~2 m L, 照2.3方法测定, 用回归方程计算血药浓度。其血清药物浓度在25~3 220 ng/m L之间, 在所做血清线性范围内。

3 讨论

乙酰麦迪霉素吸收好, 血药浓度高, 作用时间长, 且味不苦, 适合于儿童用药。适用于敏感葡萄球菌、各组溶血性链球菌、肺炎链球菌等的感染。乙酰麦迪霉素物理性质与红霉素相似, 且结构中无共轭体系, 紫外吸收较弱, 特别是在测定低血药浓度时, 可考虑加已知浓度的标样, 增加血中浓度, 尽量使结合型的乙酰麦迪霉素游离出来, 再行测定。

用本方法测定临床使用乙酰麦迪霉素患者的血药浓度, 其浓度范围符合本法所控制的线性范围。目前的血药浓度测定方法处理较为繁琐, 杂质、杂峰较多, 优化后方法简单, 易于操作掌握, 可供广大基层医院及相关机构对该药进行血药浓度测定, 本法也为今后的研究提供了一种可靠的体内分析方法。

参考文献

[1]沙静姝.麦迪霉素[J].药学通报, 1979, 14 (6) :285-286.

[2]陈海燕, 卓芝, 曾杰.高效液相色谱法测定麦迪霉素片中麦迪霉素A1的含量[J].中国药房, 2003, 14 (2) :111-112.

乙酰麦迪霉素 篇2

中国药典2005年版二部抗生素微生物检定法 (附录ⅪA) 测定。

2 测量方法

(1) 供试品溶液的制备:取本品5片, 研细, 加乙醇200ml使溶解, 移至500ml量瓶中, 加灭菌水稀释至刻度, 制成1000u/ml的溶液, 摇匀, 静置;精量上清液2.00ml, 分别置50ml与100ml量瓶中, 加灭菌磷酸盐缓冲液pH 7.8稀释至刻度, 制成40u/ml和20u/ml的溶液。 (2) 标准品溶液的制备:将标准品0.03886g置50ml量瓶中, 加20ml乙醇溶解后, 加灭菌水稀释至刻度, 根据标准品的效价计算并补加灭菌水1.101ml (使用2ml的移液管) , 制成1000u/ml的溶液, 摇匀, 静置;精量上清液2.00ml, 分别置50ml与100ml量瓶中, 加灭菌磷酸盐缓冲液pH 7.8稀释至刻度, 制成40u/ml和20u/ml的溶液。

3 检验原理

本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用, 采用量反应平行线原理的设计, 比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小, 以测定供试品效价的一种方法。

4 不确定度的来源分析

供试品的溶解过程带来的不确定度;供试品的稀释过程带来的不确定度;标准品的称量过程带来的不确定度;标准品的溶解过程带来的不确定度;标准品的稀释过程带来的不确定度;微生物检定过程带来的不确定度;结果重复性带来的不确定度。

5 供试品的溶解、稀释与标准品的溶解、稀释过程所用的玻璃量器带来的不确定度分析

移液管、容量瓶标准不确定度来源均有4种:校正、重复性、温度、人员读数。 (1) 2ml移液管、50ml容量瓶、100ml容量瓶与500ml容量瓶校正引起的不确定度:根据JJG196-1990《常用玻璃器具》检定规程规定, 20℃时2ml移液管 (A级) 的容量允差为±0.012ml, 50ml容量瓶 (A级) 的容量瓶允差为±0.050ml, 100ml容量瓶 (A级) 的容量允差为±0.1ml, 500ml容量瓶 (A级) 的容量允差为±0.25ml, 取矩形分布得:u1 (V2) =0.006928mlu1 (V50) =0.02887mlu1 (V100) =0.05774mlu1 (V500) ==0.1443ml (2) 重复性引起的不确定度分量u2 (Vx) :通过重复测定10次统计出标准偏差如下:u2 (V2) =0.0092mlu2 (V50) =0.015mlu2 (V100) =0.02mlu2 (V500) =0.12ml (3) 温度引起的不确定度分量u3 (Vx) 根据《化学分析中不确定度的评估指南》 (P38) 中数据可知:水的膨胀系数为2.1×10-4, P=0.95, C=1.96, ΔT=3℃.体积变化:V×液体的膨胀系数×ΔT3 (V2) =0.0006429mlu3 (V50) =0.01607mlu3 (V100) =0.03214mlu3 (V500) =0.1607ml (4) 人员读数引起的不确定度分量u4 (Vx) 根据《化学分析中不确定度的评估指南》:u4 (V2) =0.00816mlu4 (V50) =0.2041mlu4 (V100) =0.4082mlu4 (V500) =2.0412ml以上4项合成得出2ml移液管、50ml容量瓶、100ml容量瓶与500ml容量瓶带来的不确定度分量为:u (v2) =0.008186ml则相对不确定度:urel (v2) =u (v2) /v2=0.008186/2=0.4093%

u (v50) =0.2073ml则相对不确定度:urel (v50) =u (v50) /v50=0.2073/50=0.4146%

u (v100) =0.4139ml则相对不确定度:urel (v100) =u (v100) /v100=0.4139/100=0.4139%

u (v500) =2.0561ml则相对不确定度:urel (v500) =u (v500) /v500=2.0561/500=0.4112%

6 标准不确定度的评定

(1) 供试品的溶解过程带来的不确定度:供试品的溶解采用500ml (标准不确定度分析见5) 的容量瓶则由供试品的溶解体积带来的相对不确定度分量为:urel (v1) =urel (v500) =0.4112% (2) 供试品的稀释过程带来的不确定度1) 供试品稀释采用2ml移液管、50ml容量瓶、100ml容量瓶带来的合成相对不确定度为 (即稀释因子f1带来的相对不确定度) :urel (f1) =0.8236% (3) 标准品的称量过程带来的不确定度1) 取样 (标准品的均匀性) 本实验依照JTF1135-2005《化学分析中不确定度的评估指南》规定, 由此所致的不确定度可忽略不计。2) 标准品称量W标=0.03896-0.00010=0.03886g称量不确定度来自两个方面:天平校准和重复性 (1) 天平校准 (制造商给出天平的置信区间为0.03mg) , 按均匀分布, 则校准产生的不确定度分量为:u1 (m1) =0.01732mg (2) 天平的重复性:按《化学分析中不确定度的评估指南》附录G (不确定度的常见来源和数值) 中给出的数据, 得到分析天平的重复性约为0.5×最后一位有效数字。十万分之一的分析天平, 最后一位有效数字为0.01mg, 所以天平重复性带来的不确定度分量为:u2 (m1) =0.5×0.01mg=0.005mg因为是两次称量, 则由天平带来的不确定度计算两次u (m1) = (2×0.017322+2×0.0052) 1/2=0.02550mg则由天平称量带来的相对不确定度:urel (m1) =0.02550mg/38.86mg=0.06562% (4) 标准品的溶解过程带来的不确定度:溶解用到2ml移液管与50ml容量瓶所带来的合成相对不确定度为:urel (v2) =0.5826% (5) 标准品的稀释过程带来的不确定度:标准品稀释采用2ml移液管、50ml容量瓶、100ml容量瓶带来的合成相对不确定度为 (即稀释因子f1带来的相对不确定度) :urel (f2) =0.8236% (6) 微生物检定过程带来的不确定度:抑菌圈测量采用ZY-300IV型微生物自动测量分析仪, 标准不确定度是由ZY-300A抑菌圈电脑测量仪校准带来的, 由检定证书给出的示值重复性为:0.03%、0.03%、0.03%、0.00%以上4项合成得出合成相对不确定度为:urel (s) =0.05196% (7) 结果重复性的不确定度:测量重复性标准偏差是测量时所有随机影响的合成, 因此其他不确定度来源中的随机分量不再考虑。取本品重复测量六次, 测量值分别为:93.63%、92.46%、92.89%、92.09%、92.71%、93.91%平均值:92.9%单次测量的标准不确定度为:u (J) =0.6964%在日常检验中, 测定两份样品报告平均值, 故平均值的标准不确定度为:u (J) =0.4925%平均值的相对不确定度为:urel (J) =u (J) /92.9%=0.4925%/92.9%=0.5301% (8) 合成相对标准不确定度:urel (wx) =1.4673%合成标准不确定度:urel (wx) =u (wx) /wxu (wx) =92.9%×1.4673%=1.3631% (9) 扩展不确定度:U=ku=1.3631%×2=2.7262% (k=2) (10) 报告结果:ω= (92.9±2.7) % (k=2, 置信概率95%)

摘要：目的建立并运用抗生素微生物检定法测定乙酰螺旋霉素片含量测定的不确定度评定方法。方法应用测量不确定度评定方法分析检验过程中不确定度的主要来源。结果不确定度的主要来源: (1) 供试品的溶解过程带来的不确定度; (2) 供试品的稀释过程带来的不确定度; (3) 标准品的称量过程带来的不确定度; (4) 标准品的溶解过程带来的不确定度; (5) 标准品的稀释过程带来的不确定度; (6) 微生物检定过程带来的不确定度; (7) 结果重复性带来的不确定度。结论运用不确定度评定方法有助于检测人员在检测过程中重点关注关键环节的质量控制, 以提高检测工作的质量。

关键词：不确定度评定,抗生素微生物检定法,乙酰螺旋霉素片含量测定

参考文献

[1]中国药典.2005, 2.

[2]JTF1135-2005.化学分析中不确定度的评估指南.