保存图片和文字教学设计(共12篇)
保存图片和文字教学设计 篇1
《用文字和图片说话》教学设计
日照市岚山区巨峰镇初级中学孙海江
微项目1:用文字和图片说话
【教学目标】
1、搜集、获取、整理素材的能力;
2、掌握利用演示文稿等信息技术软件展示自我观点的能力;
3、演示文稿中文字格式、图片等技术手段运用;
4、通过参与项目活动,提高信息搜集、信息处理和选用合适的信息工具进行表达的信息技术综合应用能力;
5、体验小组合和项目探究过程中的学习的乐趣,感受到自身的价值。
【教学重、难点】
1、主题的选择;
2、素材的搜集和甄别整理;
3、演示文稿的设计与制作。
【过程与方法】
设置情境(提出项目)→师生讨论(项目选题)→小组探索合作(制作项目)→交流、总结(项目交流)→创新、运用、提高(项目总结)
【教学过程】
提出项目:
如果做一次演讲稿,怎样能更好的表达出自己的思想?为演讲稿锦上添花呢?提出ppt制作项目课题。明确,能够使用ppt制作软件模板、版式、背景设置等办法,快速制作个性化的作品辅助演讲,但是要注意不能简单地认为把文字和图片复制、粘贴过来就万事大吉。
使用PPT的目的是为了更好地与听众进行沟通。而PPT作为演讲者与听众之间沟通的桥梁,只能把它做得具有丰富的视觉表现效果,能引人入胜,让听众看得懂、愿意看,才能使他们在聆听演讲的过程中不至于疲劳,让演讲内容深入人心。
通过本项目,针对主题演讲活动,一起探索如何用文字和图片制作听众喜欢的PPT。
项目选题:
建议以小组为单位开展活动,每个小组从以下选题中选择一项,以保证有充足的时间对问题展开深度探究,探究之后大家一起分享成果。
项目指导:
专题1:用模板美化主题
PPT模板是帮助新手制作出专业PPT的快捷、有力的工具。因为很多模板是专业人员设计的,他们对颜色和对象搭配有一定的专业水准。
1、标题模板
保存图片和文字教学设计 篇2
一、常见误区
11.该该突突出出的不突出
如图1所示, 这是一张课件的首页面, 标题是“认识三角形”。作者选择的这张图片图案为三角形, 能够看出作者想选择与课题内容有关的图片做为背景图片, 应该说这个想法是很好的。但问题是首页面是用来突出课题的, 可是这里正相反, 图片太醒目, 课题文字却并没有被突出, 效果就不是很好。
22.乱乱用用背背景景图图片片, 喧宾夺主
这种情况在新教师中较突出, 制作者往往为了盲目追求一种强烈的视觉效果而使用了不恰当的图片。如图2所示的这张幻灯片是一个音乐课件中的一张。为了增加页面的可视性, 作者使用了一张与课件内容毫不搭边的图片, 其结果不仅降低了文字的可视性, 也让人整体上感觉不协调。
33.文文字字小小而而满满, 图片质量低
在制作课件时有时会遇到大量的文本素材, 如果不加处理直接搬到幻灯片上, 这种不顾学习者感受的做法, 效果注定是很差的 (如图3) 。如此密密麻麻的文字, 学习者不仅不愿看, 想看也看不清楚。
再就是课件中使用的图片模糊不清、失真, 不但影响课件的表现力, 也影响学习者的情绪。
二、造成误区的原因
造成以上误区的主要原因是对课件的本质缺乏理解。将课件理解成单纯地追求视觉刺激, 只追求课件花哨的、外在的表现力, 对课件所应起的强化作用、创设情境的作用、化抽象为直观的作用、激发学习兴趣等方面的作用缺乏理解。课件不能对教学内容进行形象地再现, 更不能体现一定的教学策略, 其效果只能是适得其反。
另一方面的原因就是缺乏一定的课件制作技术, 对素材的处理缺乏经验、对课件制作软件及其它辅助软件的使用方法不够精通。因此, 课件的制作需要两方面的能力:一是对课件的正确理解;二是相关素材的处理及课件制作技术, 缺了哪一个都不可能做出好的课件。
三、强化文字
11.只只有有文字的情况
若某张幻灯片中只有文字素材, 那么文字就是要强化的内容。最简单的强化方法就是利用颜色、字体和字号的方法, 不同性质的文字使用不同的颜色、字体和字号。如:标题文字与正文文字使用不同的字体和颜色。
另一种强化文字的方法就是在文字下方添加与文字颜色对比强烈的自绘图形。相当于给文字添加一个背景色, 以突出文字。
再就是根据课件内容用图示的方法表达相应内容, 改变传统的项目符号和表格的表现形式, 增加内容的新鲜感和吸引力, 起到强化效果。
以上几种方法在实际应用中往往根据具体内容进行综合使用, 以达到应有的强化效果 (如图4、图5所示) 。
22.有文字也有图片
也就是说课件中的文字与图片都是需要强化的内容。这时, 由于图片的存在, 文字往往会不如图片醒目。因此, 这种情况重点强化的还是文字。当文字与图片同时存在时, 采用在文字下面加与文字颜色对比强烈的自选图形的方式效果比较好 (如图6) 。
四、处理图片
11.作作为为背背景景图片
课件中的背景图片忌“花”和“乱”, 既然做为背景就不是要重点显示的内容, 因此背景图片可处理为透明样式、黑白样式, 或者将其缩小点缀在页面的四周, 切忌与文字争宠, 喧宾夺主。
22.作为图片素材
除了文字, 图片是课件中最常见的素材。为了保证图片的显示效果, 最基本的要求就是图片要清晰。因此, 在对图片进行放大或缩小时要使图片保持正常比例和大小。再就是注意图片格式, 尽量使用矢量图片。
其次, 是要使图片风格统一。尤其在同一张页面中, 或全部使用卡通图片、或全部使用线条图片、或全部使用剪贴画等。如果几种类型的图片同时使用在同一张页面中, 会影响课件风格的统一性。再就是如果页面中有多张图片, 还要注意图片的修饰和排版的方式也要统一。
第三, 不要使用与课件内容无关的图片。有的人对课件的内涵缺乏理解, 只是一味追求外在形式, 追求强烈的视觉刺激, 使用了与课件内容无关的图片。如美女图片、风光图片等, 造成了与文字内容不协调, 也对文本信息的显示造成干扰。有的甚至作为背景图片, 结果适得其反, 该强化的内容反而淹没在眼花缭乱的背景当中。
课件的简洁与条理是课件制作的两个基本原则。尤其对于文本内容, 只有界面简洁, 课件中的内容才能被学习者所关注;只有内容有条理才能使学习者的思维清晰、有逻辑。对于图片, 课件中要使用与文字内容相关联的图片, 在排版方面文字与图片不要混合叠加在一起, 要有各自的占位区, 并要根据情况在文字下方添加自选图形做为底色以达到突出强化文字的效果。为了将文字与图片处理得更好, 掌握一定的文字与图片加工处理的方法是必不可少的, 比如:Photoshop、flash软件等。了解课件中图片素材的常用格式、图片大小处理的方法、图片半透明、黑白、美化等相关技术方法。
总之, 教师应理清多媒体课件在教育教学中的地位与作用, 避免课件在教学中的形象工程, 注重积累课件制作经验, 不断提高课件制作质量, 让多媒体课件成为课堂教学的有效助手。
摘要:理清多媒体课件在教育教学中的地位与作用, 避免课件在教学中的形象工程, 注重积累课件制作经验。通过对实例的分析与说明, 强调提高课件制作质量的重要性。旨在为广大一线教师提供可用的经验。
保存图片和文字教学设计 篇3
这些看似“不可能完成”的问题,其实都是有办法解决的,我们只需要用WPS Office 2010个人版,再加一个小小的插件,就能搞定了。
首先,从WPS官方网站(www.wps.cn)下载最新版的WPS Office 2010个人版,安装到电脑中,再到其模板页面中搜索一个叫做“输出为图片”的插件(下载地址:http://www.wps.cn/addons/ThreadView/wdid-5868.htm),点击“安装到WPS”即可使用。
用WPS文字打开任意一篇文档,执行“文件/输出为图片格式”,就会弹出“另存为”对话框,选择好存储路径,输入文件名(默认为原文件名),在“保存类型”中选择一种格式(推荐使用PNG格式),单击“确定”按钮。
片刻之后就保存好了,该文档有几个页面就保存为几张图片,存到MP4中可以用电子相册来看“原版”小说了,也可以通过电子邮件给远在国外的亲戚发不再有乱码的“中文”文档了。
《让文字和图片飞起来》教案分析 篇4
教学目标:、会打开已有的演示文稿。
2、会设置文字、图片和艺术字等对象的动画效果,并会给每
个对象配上声音。
3、培养学生经常保存文的良好习惯。
教学重点:
设置文字、图片和艺术字等对象的动画效果并配上声音。
教学难点:
在设置动画效果之前要先选中对象。
前准备:、制作好演示文稿范例。
2、提供声音素材(光盘里的“声音”文夹下)。
教学过程:
一、激趣导入:
我们已经制作了一张图文并茂的古诗欣赏幻灯片,在Perpint里,我们还可以让图片和文字飞起来。
二、新教学
⒈打开文“春晓”(师演示)
⑴启动Perpint。
⑵打开“春晓”。
⑶学生打开“春晓”文。
⒉、让图片和文字飞起来(师示范)
⑴选择[视图]菜单中的[工具栏]命令,单击[动画效果],这
时,你就可以看到“动画效果”工具栏。
⑵先选中艺术字古诗欣赏,单击“动画效果”工具栏中自定
义动画,打开“自定义动画”对话框,对艺术字进行动画设置。我们先单击“动画效果”下拉框,选择“右侧飞入”的效果,单击[预览]按钮,就可以看看效果。最后单击[确定]。
(用同样的方法,设置好其他对象的动画效果。)
(师巡回指导)
3、学生设置幻灯片中对象的动画效果。
4、演示放映幻灯片
选择[视图]菜单中的[幻灯片放映]命令,看一看幻灯片的放
映效果是不是和我们刚才的设想一样。
、学生放映幻灯片
三、展示学生作品
、观看学生作品
2、学生对所观看的作品发表议论。
四、教师总结本节内容
(学习了设置幻灯片中的文字和图片等对象的动画效果,并
军训手抄报图片文字 篇5
军训手抄报图片
军训小知识
1.买一两双鞋垫。军训穿特定的服装和鞋,鞋的质量是很差的,鞋底比较薄,里面本身没有鞋垫,穿起来不舒服,军训一两天很多人的脚底就会磨出水疱(特别是天气热的时候),如果不是长水疱的话~我觉得军训还是挺轻松的。
2.有的部队为学生准备褥子,有的不给。事先学校都会跟学生和家长交代清楚。如果部队只提供床铺,学生要带夏被(或毯子)、褥子和枕头。家长和学生不能图省事,以为越简单越好。军训一天下来学生非常疲惫,特别需要一张舒适的床。如果把衣服铺在身子底下充“褥子”,把衣服叠起来当“枕头”,学生会感觉很不舒服,睡觉也不解乏。所以,该带的东西都应该带齐。
3.买支消炎用的膏药。如果真的起水疱了,晚上睡觉前用针把水疱弄穿(多弄几个洞),把里面的水挤出,然后涂点药膏,第二天脚板就不会那么痛了。
4.轻便装的防晒油。虽然出汗会把防晒油冲走~~但是用了总比没有用的好,休息的时候拿出来用就可以了
5.学生勿忘带雨伞,防备往返路程以及军训之余下雨。
5.带一块小手帕,擦汗。
6.有条件的同学中午可以喝一瓶运动饮料,可以喝适量盐水。
7.今年我们穿的军服是晴纶做的~估计你们的也一样,散热性很差,质量又不好,皮肤敏感的同学要准备一些药物,还要注意穿军服的时候里面不可以真空~~~一定要穿些吸汗的背心。恩还有最好就是撒点爽身粉在身上没那么容易生痱子的.8.军训水壶有非常强烈的异味,可用热茶叶水浸泡一晚(打开瓶盖),可显著减少异味。壶口不干净,也洗不干净,用嘴碰过后喝的水都是苦的~~我自己就在小卖部要了条吸管,喝水的时候就不用碰壶口了。
9.军训所有服装都容易掉色,不宜与淡色衣物一起洗。
10.每天军训前有意识的活动脚踝和膝盖,否则容易扭伤。
11.随身带好风油精或者万金油,感到头晕时自行涂抹。
12.食堂供应冰冻碳酸饮料但是强烈建议不要在餐中饮用,对肠胃不好。
13.不要每次拉歌或者喊口号的时候都很用力地喊~~记住你要喊10+天的,别头一天就把嗓子喊坏了。
军训励志名言
1、团结进取,奋力拼搏;齐心协力,共铸辉煌!
2、吃不好,喝不好,睡不好,但我们以苦为乐。
3、辞别父母离学校,誓不成功志不还。
4、军训,会使我们快速成长因为酸甜苦辣在这里尝遍。
5、挑战极限,超越自我,自强不息,厚德载物!
6、不抛弃,不放弃,坚持到底就是胜利!
7、军训,可以增强体质,磨练意志。
8、把汗水和泪水抛在脑后,让意志力永存。
9、严于律己,学会自强,勤奋刻苦,报效祖国。
10、教官与我一步之遥,我距教官千里之外。
11、革命流血不流泪,生死寻常无怨尤。
12、磨练顽强的斗志,培养吃苦的精神,锤炼良好的品质!
13、政治合格,军事过硬;作风优良,纪律严明!
14、团结一致,奋力拼搏;争创一流,展我雄风!
15、服从命令听指挥,军旅生活我最棒。
16、读书可以增长知识,军训可以增强体魄。
17、激情飞扬,超越梦想;挑战极限,铸就辉煌!
18、军训是地狱,但是是那种让人去了还想去的地狱。
19、军纪如铁,意志如钢;超越自我,自尊自强!
20、军纪如铁,意志如钢,刻苦训练,严格要求!
21、流血流汗不流泪,掉皮掉肉不掉队!
22、敢于挑战,永不言退。
23、在指挥与服从中,陶冶自身品格,升华内心思想。
24、一个将军不可缺少的品质是刚毅。
25、兵熊熊一个,将熊熊一窝。
26、只有争光的权利,没有抹黑的义务。
27、努力学习,刻苦训练;团结互助,争创佳绩!
28、微笑面队每一次即将到来的挑战。
29、累死沙场君莫笑,古来军训几人回。
蚯蚓的日记文字内容无图片 篇6
妈妈说我应该永远记住三件事:
1、地球给了我们需要的一切。
2、我们钻地道的时候,也同时帮忙照顾了地球。
3、绝对不要在爸爸吃报纸的时候烦他。
3月29日
今天我努力教蜘蛛怎样钻地。一开始他全部的脚都卡住了。(图:蜘蛛说:“我想我有一个脚踝扭伤了。”)后来他又吞了一堆土。我放弃了。明天他要教我怎样倒立走路。
4月1日
蚯蚓没办法倒立走路。(图:蜘蛛用丝缠在蚯蚓的腰上带着它爬在树上,蚯蚓好倒立过来。)
4月4日
钓鱼季从今天开始。我们全都钻到更深的地方。(图:爸爸说:“你们有没有听到什么声音?”爷爷在自己的屋里睡得真香。}
4月10日
下了整晚的雨,地下湿透了。我们一整天都待在人行道上。跳房子是一种非常危险的游戏。
4月15日
今天我忘记带午餐,肚子实在太饿了,只好吃回家功课。老师叫我写十次“我以后不吃回家功课。”写完以后,我把那张纸也吃了。
4月20日
今天我偷偷靠近公园里的一些小孩,他们没听到我来了。我在他们面前扭来扭去,他们大声尖叫。我就爱看他们这个样子。
5月1日
爷爷教过我们,礼貌非常重要。所以今天我对遇到的第一只蚂蚁说:“早安。”(图:队伍里还有六百只蚂蚁。我在那里站了一整天说:“早安,早安,早安,你好吗?早安,见到你真高兴!你好!早安,早安```````````````````)5月8日
昨天晚上我做了一个最可怕的恶梦——巨大的鸟在玩跳房子!妈妈说我睡前不可以再吃那么多的垃圾了。
5月15日
今天我和蜘蛛吵架。他跟我说有脚才算酷,然后他就跑了,我追不上他。也许他说得没错。5月16日
我逗蜘蛛笑,他笑得太厉害了,结果从树上掉下来。谁说一定要有脚呢?(图:蜘蛛“砰”的一声从树上掉下来。)
5月28日
昨天晚上我去参加学校的舞会。把头向前摆,把头向后摆,扭扭身体转个圈,我们只能这样跳。
6月5日
今天美劳课,我们做通心面项链。我把我的作品带回来,大家把它当晚餐吃了。(图:爸爸夸我:“你真有天分!”)
6月15日
我姐姐觉得自己美极了!我告诉她,不管花多少时间照镜子,她的脸永远长得跟她的屁股一个样。蜘蛛觉得这真的很好笑。妈妈可不这么想。(图:妈妈在大声的训斥我。)
7月4日
我长大以后想要当秘密情报员。蜘蛛说我得非常小心,因为总统可能一不小心就会踩到我。“这个工作很危险。”我告诉她,“但是总得有人去做。”
7月28日
作为一条蚯蚓,有三件事我不喜欢:
1、不能吃口香糖。
2、不能养狗。(图:妈妈:我们养它好不好?妈妈看见狗害怕极了。)
3、功课那么多。
7月29日
作为一条蚯蚓,有三个好处:
1、永远不必看牙医。(图:医生拿着放大镜看,说:“没有蛀牙——也没有牙齿。)
2、永远不会因为拖着泥巴进屋里而被骂。
3、永远不必洗澡。(图:妈妈说:“谁是我的脏宝贝呀!”)
8月1日
保存图片和文字教学设计 篇7
第一学期开展语言文字海报
为了让孩子们说好普通话,我校开展了一系列的活动:如推说规范普通话,写规范语言文字,推广普通话面向现代化,让同学们知道普通话同青春携手,文明语言和时尚并肩、让大家行动起来,手拉手说普通话,心连心做中国人,让普通话充满校园,让正确的文字流行身边。
校园里处处提醒孩子们用普通话
下图是孩子们在升旗时用普通话宣誓
六2中队在用流利的普通话讲该周的升旗主题
张校长在集合集会中给孩子们强调文明用语的重要性
文明语言进校园,用流利的普通话讲授每一节课,好习惯从小养成 一年级赵娜娜老师用流利的普通话为孩子们上课
徐凤老师在引导孩子们用流利的普通话讲故事
四1的同学在用流利的普通话阅读课文
唐瑕老师在教孩子们怎样认真书写每一个字
保存图片和文字教学设计 篇8
——— 教学设计
山丹县三立小学
盛秀花
【教材分析】
《插入图片和艺术字》这节课选自小学信息技术教材第二册第四单元《制作幻灯片》中的第十三课的教学内容。本节课的主要内容是在幻灯片中插入图片和艺术字。它是在学生掌握了纯文字幻灯片制作的基础上进行教学的,是在学生学习了在Word中输入文字、修改文字、美化文字、调整段落等技能之后学习的,主要涉及如何在幻灯片中插入图片和艺术字,以及如何根据自己的需要恰当地设置图片的版式、大小和位置以及艺术字的大小、颜色、样式等知识点,从而为学生能最终制作出丰富多彩、赏心悦目的作品奠定基础。
【学情分析】
本堂课教学对象为小学五年级学生,他们有特定的心理特征:好玩、好问、好奇,他们对理论性强的知识点不易理解,对具体的操作较容易接受,对通俗易懂的语言比较容易理解。在学习本课之前,他们已具备一定的计算机基本操作能力。他们初步了解了、掌握了Word菜单下的一些常用命令,并对相应的工具按钮操作也有了一定的基础和认识。
【教学目标】
知识目标:掌握在幻灯片中插入图片和艺术字的方法,并能对插入的图片和艺术字进行恰当地调整。
技能目标:培养学生自我探索、自主学习的能力。掌握在幻灯片中插入图片和艺术字的方法;能正确使用方法为文章插入与之相匹配的艺术字或图片,并能进行相应的设置,使文章图文并茂。
情感目标:培养学生相互合作的精神;通过在幻灯片中插入艺术字和图片,培养学生良好的审美情趣及创新意识。【教学重、难点】
教学重点:掌握在幻灯片中插入图片和艺术字的方法。教学难点:能根据自己的需要恰当地设置艺术字的大小、颜色、样式以及图片的版式、大小和位置。
【课时安排】 1课时 【教学准备】
PPT课件、各类相应的文章及图片素材库。【教学理念】
遵循新课标理念,采用任务驱动教学法和演示教学法为主,把“探究—合作—创新”的思想渗透在整个教学过程中。用任务去驱动学生们主动探索、发现、学习新知;用任务帮助学生们运用所学的知识去解决实际问题;用任务来体现学生们的创意,展示他们的个性。采用合作学习形式,让学生讨论、探索,有利于充分发挥学生的个人特长并培养合作精神。
【设计思路】
因小学五年级学生思维较为活跃、协作及操作能力较强,在教师的引导下,能相互合作,自主探索获取知识。故本堂课我主要采用任务驱动教学法,辅之以演示法,整个教学过程一共设计了三个教学任务,每个教学任务的都承载着本节课的知识点,每个任务都连环相扣,以学生合作探究为主,教师讲解演示为辅,尊重学生在课堂中的主体地位,强调教学中的“民主、交往、互动、对话”,重视学生的“经历与体验”,倡导多元评价,让学生在自主、合作、探究的学习过程中完成对知识的建构。【教学过程】
一、创设情境,激情导入。
1.通过PPT课件,首先展示一组图文并茂的幻灯片,吸引学生的注意力。
2.引导学生观察并讨论对幻灯片的的感受。
3.设问:同学们想学在幻灯片中插入图片和艺术字的方法吗?让学生明确这节课的学习目标,积极参与教学活动。
4.揭示课题:插入图片和艺术字。
二、任务驱动,深入探究。任务一:添加一张新幻灯片。
1.[教师]老师先演示讲解在幻灯片中添加一张新幻灯片方法。
2.[学生]给出任务让学生完成任务。任务二:给幻灯片插入图片。
1.[教师]演示如何在幻灯片中插入剪贴画。
2.[学生]尝试如何在幻灯片中插入“来自文件”中的图片。
3.[学生]选派代表演示插入图片的过程。
4.[教师]指导学生调整图片的位置和大小,突破教学难点。5.[学生]学生二次修改、完善自己的作品。任务三:尝试给幻灯片插入艺术字 1.[学生]学生自主尝试插入艺术字标题。2.汇报交流,查找问题,解决问题。3.师生总结插入艺术字的方法。
三、综合运用,学以致用。
1.[学生] 学生独立完成作业。2.[学生]选派代表展示作业。
四、游戏升华,提高技能。
1.[教师]提供资源,并向学生说明游戏要求及规则。
2.[学生]自由操作,完成作品。(提示:可以独立完成,也可以自由组合,共同完成)
五、归纳总结,拓展延伸。
1.同学们通过今天的学习,你们有什么收获? 2.请您欣赏,拓展延伸。【板书设计】
插入图片和艺术字
剪贴画
插入----图片----
来自文件
自动保存和恢复 篇9
需要注意的是,自动保存以后的信息并不是存储到了原来文件中,而是保存在了一些临时文件里,此时如果发生了断电,你原来的文档中保存仍然是你上次保存的内容,那自动保存有什么意义呢?自动保存会存储你上次最后一次手动存盘到最后一次自动保存之间所输入的信息,在发生了非正常退出后,用word再次打开原来的文件,可以看到会同时出现一个恢复文档,此时这个恢复文档中保存的就是上次断电时自动保存的所有信息了,将原来的文档关闭,再将恢复文档保存为原来的文档就可以最大限度的减小损失了。
改变默认路径
你一定注意到在启动word后第一次使用保存和打开对话框时默认的文件夹都是“my documents”即“我的文档”,如果你的大部分工作并不是保存在这个文件夹下,那是很不方便的,不过我们可以改变默认路径到指定的文件夹:打开“工具”菜单,单击“选项”命令,打开“选项”对话框,单击“文件位置”选项卡,这里有一个“文件类型”列表,选择第一项“文档”,单击“更改”按钮,
弹出“更改位置”对话框,从对话框中选择默认的保存文件夹,单击“确定”按钮回到“选项”对话框,单击“确定”按钮,下次进入word时默认的保存和打开路径就是刚才选择的文件夹了。
多文档切换
在word 中,每打开一个文档,word 就会在任务栏中增加一个新的按钮,因此在同时打开几个文档时可以通过单击任务栏上相应的按钮来切换文档窗口,也可以通过使用windows切换任务的快捷键alt+tab来在不同的文档间切换。
关闭和退出
关闭正在打开的文档可以使用“文件”菜单中的“关闭”项。
界面的介绍
使用键盘来打开菜单:我们已经知道了如何用鼠标来打开菜单,事实上用键盘也可以打开菜单。菜单栏上每个菜单项中都有一个带有下划线的字母,按下alt+字母键,可以打开相应字母对应的菜单,如我们按下alt+f键,就可以打开“文件”菜单;菜单打开后用上下光标键可以控制光条的移动,当光条所选定的选项有下级菜单时,按向右的光标键可以打开下级菜单;按左光标键则可以取消这个子菜单的显示;如果想要执行某个菜单命令,只要在光条位于该选项时敲回车键就可以了。按esc键可以回退菜单的层数,按一次回退一级。
免疫细胞的分离和保存技术 篇10
用体外方法对机体各种具有免疫反应的细胞分别作鉴定、计数和功能测定,是观察机体免疫状态的一种重要手段。为此,须将各种参与免疫反应的细胞从血液或脏器中分离出来。参与免疫反应的细胞主要包括淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等。由于检测的目的和方法有同,分离细胞的需求和技术也异。有的仅需分离白细胞,有的则需分离单个核细胞(mononuclearcell),其中含淋巴细胞和单核细胞(monocyte),有的则需分离T细胞和B细胞以及其亚群。分离细胞选用的方法应力求简便可行,并能获得高纯度、高获得率、高活力的细胞。现用分离细胞群的原则,一是根据各类细胞的大小、沉降率、粘附和吞噬能力加以组分,另一则按照各类细胞的表面标志,包括细胞表面的抗原和受体加以选择性分离。
一、白细胞的分离
(一)血液中红细胞与白细胞比例约600~1000:1,两者的比重不同其沉降速度亦异,通常用两种方法加以分离。
本法是利用血细胞自然沉降率的分离法,采集血液后应及时抗凝,通常选用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原转化为凝血酶,从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白而防止血液凝固。操作原则是将含抗凝血的试管直立静置室温30~60min后,血液分成明显三层,上层为淡黄色血浆,底层为红细胞,紧贴红细胞层上面的灰白层为白细胞,轻轻吸取即得富含白细胞的细胞群,离心洗涤后加入少量蒸馏水或含氯化铵的Gey溶液,经短时间的低渗处理,使红细胞裂解,经过反复洗涤可得纯度较高的白细胞悬液。
(二)聚合物加速沉淀法
本法是利用高分子量的聚合物如明胶、右旋糖酐、聚乙烯吡喀烷酮(polyvinylpyrolidone,PVP)等使红细胞凝集成串,加速红细胞沉降,使之与白细胞分离。本法的细胞获得率比自然沉降法高。
二、外周血单个核细胞的分离
外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和多核白细胞密度较大,为1.090左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090,血小板为1.030~1.035。为此利用一种密度介于1.075~1.092之间而近于等渗的溶液(分层液)做密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。
(一)Ficoll分层液法
主要用于分离外周血中的单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法。聚蔗糖-泛影葡胺是一种较理想的细胞分层液,其主要成分是一种合成的蔗糖聚合物称聚蔗糖(商品名为Ficoll),分子量为40kD,具有高密度、低渗透压、无毒性的特点。高浓度的Ficoll溶液粘性高,易使细胞聚集,故通常使用60g/L的低浓度溶液,密度为1.020,添加比重为1.200的泛影葡胺(urografin)以增加密度。国外常用商品Isopaque或Hypaque,故又称Ficoll-Hypaque分层液,将适量340g/L泛影葡胺加入Ficoll溶液中即可配制成密度合适分层液。分离人外周淋巴细胞以密度为1.077±0.001的分层液最佳,因为人的红细胞密度为1.093,粒细胞密度为1.092,单个核细胞在1.076~1.090之间。而不同动物血中的单个核细胞对分离液的密度要求各不相同,如小鼠为1.088,马为1.090。分离时先将分层液置试管底层,然后将肝素化全血以Hanks液或PBS液作适当稀释后,轻轻叠加在分层液上面,使两者形成一个清晰的界面。水平式离心后,离心管中会出现几个不同层次的液体和细胞带(图20-1)。
红细胞和粒细胞密度大于分层液,同时因红细胞遇到Ficoll而凝集成串钱状而沉积于管底。血小板则因密度小而悬浮于血浆中,唯有与分层液密度相当的单个核细胞密集在血浆层和分层液的界面中,呈白膜状,吸取该层细胞递经洗涤高心重悬。本法分离单个核细胞纯度可达95%,淋巴细胞约占90%~95%,细胞获得率可达80%以上,其高低与室温有关,超过25℃时会影响细胞获得率。
(二)Percoll分层液法
这是一种连续密度梯度离心分离法。Percoll是一种经聚乙烯吡喀烷酮(PVP)处理的硅胶颗粒,对细胞无毒性。利用Percoll液经高速离心后形成一个连续密度梯度的原理,将密度不等的细胞分离纯化。用Percoll原液(密度1.135)与约等量双离子强度的磷酸缓冲液均匀混合,高速离心后,使分层液形成一个从管底到液面密度逐渐递减的连续密度梯度,再将已制备的单个核细胞悬液轻轻叠加在液面上,低速离心后,便得四个细胞层。表层为死细胞残片和血小板,底层为粒细胞和红细胞,中间有两层,上层富含单个核细胞(75%),下层富含淋巴细胞(98%)(图-2)。该法是纯化单核细胞和淋巴细胞的一各较好的方法,但操作流程较长,手续较多。
图-2 连续密度梯度离心法分离单个核细胞中各细胞成分的分布示意图
三、淋巴细胞及其亚群的分离
为研究免疫细胞的功能,常需高纯度的淋巴细胞或其亚群,分离方法介绍如下。
(一)、纯淋巴细胞群的采集
通常利用单核细胞在37℃和Ca2+存在条件下,能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性,据此建立许多从单个核细胞悬液中去除单核细胞的方法,藉以获得高纯度的淋巴细胞群。
(1)粘附贴壁法
将已制备的单个核细胞悬液倾于玻璃或塑料平皿或扁平小瓶中,移至37℃温箱静置1h左右,单核细胞和粒细胞均贴于平皿壁上,而未贴壁的非粘附细胞几乎为纯淋巴细胞,继用橡皮刮下贴壁的细胞即为纯单核细胞群。因B细胞也有贴壁现象,用本法分离的淋巴细胞群中B细胞有所损失。
(2)吸附柱过滤法
将单个核细胞悬液注入装有玻璃纤维或葡聚糖凝胶SephadexG10的柱层中,凡有粘附能力的细胞绝大部分被吸附而粘滞在柱层中,从柱上洗脱下来的细胞主要是淋巴细胞。此法简单易行,对细胞极少损害。
(3)磁铁吸引法
利用单核细胞具有吞噬的特性,在单个核细胞悬液中加直径为3μm的羰基铁颗粒,置37℃温箱内短时旋转摇动,待单核细胞充分吞噬羰基铁颗粒后,用磁铁将细胞吸至管底,上层液中含较纯的淋巴细胞。
(二)、淋巴细胞亚群的分离
分离相当纯化的淋巴细胞亚群是细胞免疫检验的基本技术。其原则是根据相应细胞的特性和不同的标志加以选择性纯化。凡根据细胞的特性和标志选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法;而选择性去除不要的细胞,仅留下所需的细胞是为阴性选择。常用以下几种方法:
(1)E花环沉降法
本法是将淋巴细胞与一定比例的绵羊红细胞混合,待淋巴细胞形成E花环后,继用淋巴细胞分层液分离细胞。浮悬在分层界面而不形成E花环的群则富含B细胞,而沉降在管底的形成E花环的细胞用低渗法处理,使围绕细胞周围的绵羊红细胞快速裂解,则获得纯的T细胞。
(2)尼龙毛分离法
本法利用B细胞和单核细胞具有易粘附于尼龙纤维表面的特性,可将T和B细胞分开。操作原则是取松散而经过处理的尼龙毛(聚酰胺纤维),均匀充填在内径5~6nm的聚乙烯塑料管(饮料管即可)内,经Hanks液浸透保温,将单个核细胞悬液加入柱内,放37温箱静置1~2h。用预温的含10%~20%小牛血清培养液灌洗,洗脱液内含有非粘附的T细胞,重复灌洗几次以除去管内残留的T细胞。再用冷或温培养液边冲边洗边挤压塑料管,此时洗脱液内富含B细胞。如此得到的T细胞纯度在90%以上,B细胞纯度可达80%。
(3)亲和板结合分离法
利用亲和层析法分离淋巴细胞亚群,其原理是各种淋巴细胞亚群具有不同的抗原性,将相应抗体结合于塑料平板上,继加细胞悬液,凡抗原阳性的细胞则与相应抗体结合,抗原阴性的细胞可从未吸附的细胞悬液中获取(图-3)。同样若用特异性抗原交联在塑料板上,则可分离得具有特异抗原受体的淋巴细胞。淋巴细胞受体与特异抗原或抗体接触,可引起细胞激活,因此,凡欲去除细胞悬液内某一细胞亚群时,本法更适用。如要分离CD4+或CD8+细胞,则可用抗CD4或CD8单克隆抗体吸附。用抗Ig抗体则可分离B细胞。同样,用活化的C3包被,可分离出有C3受体的细胞。
图-3 亲和分离法图解
(4)荧光激活细胞分离仪分离法
荧光激活细胞分离仪(fluorescenceactivatedcellsorter,FACS)主要由4部分组成:①细胞流动系统及气压流速控制系统,②激光系统,③检测与讯号处理系统,④细胞分选系统。其主要原理是细胞经荧光染色后,通过高速流动系统,细胞排成单行,逐个流经检测区进行测定。当细胞从流动室喷嘴处流出时,超声振荡搅动液流,使液流断裂成一连串的均匀小滴(40000个/s),每小滴内最多含一个细胞(其中只有百分之几的液滴中含细胞),细胞经激光束照射产生荧光和散射光,由光电倍增管接收,转换成脉冲信号,数据经电脑处理,分辨细胞的类型。如识别的是预计所需的细胞时(如T细胞、B细胞要其亚群),在细胞样品流断裂成小滴时,使液滴瞬即感应阳电荷、阴电荷或不带电荷,使所需的细胞在电场偏转下进入不同的收集管(图-4)。用FACS分离细胞准确快速,能保持细胞活力,并可在无菌条件下进行,但仪器昂贵,极少用于常规,而多数仅作为研究的手段。
图-4 荧光激活细胞分离仪简图
四、吞噬细胞的分离和收集
人外周血中单核-巨噬细胞可通过Pecoll密度梯度分离法获取,但数量较少,用血量多。用斑蝥敷贴法可从人体组织液中获取较纯的巨噬细胞,不需作进一步体外分离,细胞量损失较少。该法是用滤纸蘸取10%中药斑蝥酒精浸出液,贴敷在臂内侧皮肤表面,4~5h后皮肤局部充血,48h后局部形成水疱,吸取疱中的组织液,内含巨噬细胞。但此法对病人皮肤有一定损伤,有时可引起局部感染,应慎用。
欲获取小鼠、大鼠、豚鼠等小动物的巨噬细胞,可经腹腔内注入少许石蜡油,3~4天后冲洗出腹腔渗出液,所得细胞悬液中70%~80%为巨噬细胞。
五、淋巴细胞的保存和活力测定
(一)、分离细胞的保存
在某些情况下,分离所得细胞需要加以保存,否则活力迅速下降,甚至死亡。
(1)短期保存技术
将分离到的细胞用适量含10%~20%灭活小牛血清的Hanks、Tc-199、RPMI1640或其他培养液稀释重悬。所用培养液要求等渗,具缓冲作用,并对细胞无毒性。通常置4℃保存较好,可减低细胞代谢活动。要注意不要迅速改变细胞所处的温度,以免造成细胞“温度”休克。
(2)长期冷冻保存技术
利用液氮深低温(-196℃)环境保存细胞,是当前世界上通用的细胞长期保存技术。其原理在于深低温环境可中断细胞的代谢,但在降温过程由于冰晶的形成和渗透压的改变均可导致细胞的损伤和部分死亡,所以在冷冻过程中一定要加用冷冻保护剂,常用的保护剂为二甲亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)。冷冻时的降温速度和细胞解冻时的升温速度对细胞活力的保存有很大影响。条件合适时,冻存细胞一旦复苏,恢复37℃培养,其形态和代谢活动均可恢复正常。操作的原则是先对需冻存的细胞作活细胞计数,低速离心后,取沉积细胞用含10%二甲亚砜的小牛血清配制成适当浓度的细胞悬液,分装于冻存管内,速即放入降温过渡站中,避免二甲亚砜对细胞的损伤。继而进行降温冷冻,目前常用两步降温法,即迅速降温至一选择好的临界温作为过渡站,如-80℃低温冰箱过夜,或在液氮罐液面以上的一层空间放置片刻,然后再放入液氮中。如需复苏细胞,则需迅速解冻以恢复细胞的活力,要求在20s以内完全融化。将冻存管自液氮中取出,立即放入40℃温水中,融化后即从水中取出,吸出细胞悬液,加入10倍的培养液中混匀,继而低速离心,尽快洗去保护剂,再悬于新培养液中,计数并检查细胞活力,然后置37℃培养箱内培养。
(二)、细胞活力测定
细胞活力常用百分比表示,活力的大小对试验结果有很大影响。细胞活力的测定有许多方法,最简便常用的方法是台盼蓝(trypanblue)染色法。台盼蓝又称锥蓝,是一种阴离子型染料,这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。免疫检测试剂中常用的防腐剂有硫柳汞、叠氮钠、抗生素等。
1.叠氮钠是HRP的抑制剂,凡是和HRP接触的试剂,一定不能用;
2.硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用,但因其有毒,较少使用;
3.市面许多试剂盒产品,用抗生素做防腐剂较多,如庆大。
4.如果试剂仅在实验室短期使用,其实并不需加防腐剂,常规试剂放4度冰箱,抗体、酶等加甘油分装冻存即可。
5.梅里埃生产的HIV诊断试剂中提到:对照血清的防腐用0.1g/L硫酸庆大霉素和0.2ml/L肉桂醛。
6.防污染可添加0.02%的叠氮钠,或0.01%的硫柳汞。叠氮钠在多数情况下有用且有效,但在有些实验中却不合适,因为它能阻断细胞的电子传递链,对许多生物体都有毒医学 教育网 搜 集整理性,因此不能用于活体实验;因为含有氨基而能干扰许多标记方法;不能用于辣根过氧化物酶标记的抗体。而硫柳汞不含氨基,不影响基质的稳定性。如果将抗体应用于生物活性检测、体内实验,一般不使用任何防腐剂,这些实验用的抗体应少量分装冷存,切忌反复冻融。
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1.制度要求:
金融机构应当按照规定建立客户身份资料和交易记录保存制度。
2.记录保存的完整性
(1)金融机构应当保存的客户身份资料包括记载客户身份信息、资料以及反映金融机
构开展客户身份识别工作情况的各种记录和资料。金融机构应当保存的交易记录包括关于每笔交易的数据信息、业务凭证、账簿以及有关规定要求的反映交易真实情况的合同、业务凭证、单据、业务函件和其他资料。
(2)金融机构应采取必要管理措施和技术措施,防止客户身份资料和交易记录的缺失、损毁,防止泄漏客户身份信息和交易信息。
3.记录保存的时限
金融机构应当按照下列期限保存客户身份资料和交易记录:
(1)客户身份资料,自业务关系结束当年或者一次性交易记账当年计起至少保存5 年。
(2)交易记录,自交易记账当年计起至少保存5 年。
(3)如客户身份资料和交易记录涉及正在被反洗钱调查的可疑交易活动,且反洗钱调
查工作在前款规定的最低保存期届满时仍未结束的,金融机构应将其保存至反洗钱调查工作结束。
(4)同一介质上存有不同保存期限客户身份资料或者交易记录的,应当按最长期限保
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3结束语
总之,文字与色彩都是中国传统文化的重要组成部分,无论是文字还是色彩,都是茶包装设计中的重要元素,对茶包装设计起着积极而重要的影响作用。在茶包装设计中,文字要体现其信息性和审美特性,色彩既要有一定的视觉体验,而且要充分迎合消费者的情感需求。设计师要设计出成功的茶包装产品,首先要对茶产品市场进行系统地调查分析,采取多元化的设计手法,对茶业市场及消费者有更清晰的了解和认知,才能充分地运用文字与色彩,为茶包装设计所用,设计出优秀的茶包装产品,有效树立茶叶品牌,促进茶产品的推广和销售,同时也对中国茶文化的传承发展有一定的推动作用。
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