细菌总数（共4篇）
细菌总数 篇1
摘要：乳中的微生物是导致乳新鲜度降低的主要原因, 因此保证原料乳的新鲜度是乳品企业和奶农、牧场共同关注的问题, 所以我们在实际工作中要采取一些措施降低乳中的微生物, 以保证鲜乳的品质。
关键词：鲜乳,细菌总数,降低
鉴于乳中的微生物是导致乳新鲜度降低的主要原因, 因此保证原料乳的新鲜度是乳品企业和奶农、牧场的共性问题。而怎样才能降低鲜乳的细菌总数, 使交售、收购的鲜乳符合国家标准、地方标准、企业标准呢?在日常工作中只要做到全过程控制, 并形成从奶源管理、收奶人员到奶户全员重视持之以恒, 是不难达到目的的。以下是经过多次现场实际试验所积累的一点经验, 用于降低细菌数的一组做法仅供参考。
在采取控制措施前后对四个大型牧场的牛舍空间和所挤鲜乳进行细菌总数抽样对比, 其结果如下:
这里说明一点, 在控制牛乳的细菌总数的同时, 必须根据牧场、牛舍和牛群情况, 对整体产乳牛群做隐性乳房炎及临床乳房炎检查, 并将呈阳性的乳和常乳分开, 以免造成乳的自身污染。在出现大批乳房炎时必须快速治疗、预防, 同时对牛舍进行严格的清理、杀菌 (特别是牛床有垫草的, 应保证垫草每日一换) 。
1 乳收购前后的工作
1.1 奶车
奶车是运输原乳的工具, 在原乳未装车前, 必须保证其奶罐内部清洁、管路清洁, 无杂质、异物, 无刷罐水。出车拉奶前要保证每次必须对奶罐进行高温杀菌。杀菌温度在80℃以上, 杀菌时间不少于15分钟。在装奶前又必须将奶罐温度降下来, 这时, 可采取用洁净的冷水, 也就是直接用冷水管 (未接触外界) 冲刷内壁即可。 (此项工作在杀菌后发车前展开) 。
1.2 取样、抽奶的要求
对一些到工厂送奶的奶车, 必须即刻进行抽样检验, 以减少细菌数的上升, 因为, 有很多鲜奶在装车前奶温未降下来, 而细菌总数在温度适宜时会呈对数上升繁殖, 会造成细菌严重超标。
抽奶的管道、泵必须做到每车结束顶洗管路, 当班结束后和抽奶前用碱、酸溶液、清水顶洗管路。残留液为中性。 (有条件或自动化程度高的乳品厂可将奶泵、奶车与自动清洗连接采取自动清洗) 。
2 牛乳挤奶前、挤奶中的工作
2.1 挤奶的准备工作
首先必须保证挤奶前所用的全部装奶容器是洁净的, 无奶垢, 无污垢、杂质。擦乳房的毛巾必须是每天挤奶结束洗净的毛巾, 并要同挤奶小桶、挤奶器罐一道用开水烫过方可使用。装奶容器不能有剩余脏水, 刷桶水必须清洁, 以免水中细菌残留。挤奶器、管道必须用清水顶刷一遍 (有条件的最好用开水) 。必须保证地面无粪便, 无垃圾。
2.2 挤奶
挤奶开始必须每头牛一盆水擦净乳房, 特别是乳头, 用挤奶器可擦净乳头后药浴。前三把奶不应掺进常乳中。因为这三把奶是与外界接触最近受污染严重, 细菌数量最高的。牛乳挤完后必须进行过滤, 并要保证过滤布洁净不带菌。 (过滤布每次用过后用热水清洗净后凉干下次再用前用开水烫后再用。)
2.3 贮存
过滤后鲜奶必须立即盖盖远离牛棚现场, (因牛舍内是严重的污染源) 。如挤完后的奶能够或需要马上交售的, 应放下手中的任何工作, 立即抢时间交售。因为只有这样才能减少污染时间, 降低污染可能。如果不能立即交售, 必须立即离开挤奶现场进行快速降温, 降温时必须每5-10分钟上下用洁净的搅拌耙搅拌一次。直到将乳温降到水的温度为止。
但降温用的冷却水必须在摄氏10度以下, 要摄氏7度以下最佳, 有条件的可自打井, 这佯可用冷水排放矢志循环的方法, 保证冷却水低温直至交售奶。如自来水流畅, 可用自来循环降温。另外说明一点, 降温时要盖好奶桶盖, 防止蚊虫、苍蝇等昆虫进入带菌, 同时要防止降温水进入乳中污染鲜乳。
3 场所、器具处理
3.1 器具处理
挤奶后的所有器具必须用清水、肥皂、清洗剂洗净后凉置能风处, 有条件的牧场要将器具管道用酸、碱综合使用方法清洗杀菌, 装过奶的容器刷后要倒扣放置。
过滤布、擦乳房毛巾, 抹布等必须洗净, 消毒、凉干, 或放置通风处, 切忌放在牛舍、挤奶现场和有污染可能的场所。
3.2 场所即挤奶间处理
挤奶间地面在挤奶前、中必须保证无粪便, 特别是早、晚两遍奶最容易受遍积牛舍内的污染空气和粪便的污染。
要保证挤奶现场无粪便, 除不在牛舍挤奶外, 必须作到及时清理粪便, 有条件的可在牛内安装胶管用水冲刷牛床、过道。
要切忌在挤完奶不盖桶盖、不立即交奶或不立即降温而先清理牛粪, 这样会严重污染牛乳。
牛舍内要定期消毒、杀菌, 杀菌剂可选用2-5%高锰酸钾溶液 (使用时不能与有机物接触, 否则失去作用) 、1-2%氢氧化钠 (火碱溶液) 、火碱溶液喷雾杀菌, 在奶牛放出牛舍后杀菌, 在挤奶前要用清水冲刷一遍, 以防火碱烧伤牛蹄。
夏季牛粪处理要远离牛舍或密闭式埋盖。这样可减少粪便乱堆积造成的蚊蝇对牛乳的污染。
牛体卫生必须保证清洁无粪垢、污垢, 无异色。
以上方法主要适应一般小型牛舍或条件差一些的牛舍, 目前, 已经有很多牧场建立了现代化集中榨乳厅, 卫生条件远远超过了一般普通个体牛舍, 并在某些方面要比以上介绍的标准。故本方法仅供奶农们参考借鉴。
参考文献
[1]沈萍.微生物学实验[M].北京:高等教育出版社, 1999.
[2]李启明, 印佰星, 顾瑞霞.原料乳微生物特性对牛乳货架期的影响的研究[J].中国乳品工业, 2005, (7:) 17-19.
浅析原料乳中细菌总数的检测方法 篇2
细菌总数是反映牛乳卫生质量的一个重要指标。细菌总数, 嗜冷菌, 体细胞的检验能为生产者提供用奶依据。原奶质量的好坏对产品的质量起关键的作用。因此, 细菌总数的检测是乳品厂的一项重要内控指标。常用的细菌总数检测方法有显微镜直接计数法、平皿计数法、还原试验法、Bacto Scan FC法, 这几种方法各有其优缺点。
一、显微镜直接计数法[1]
1、涂片染色法
用微量加样器将0.01ML样品均匀涂布于载片上和1cm²的面积内, 经干燥固定染色后用显微镜计数.
在计数前先用物镜测微尺测出显微镜油镜视野的直径, 然后将染色的载片放在载物台上进行计数, 计算数10个视野的细菌总数, 求出每个视野的平均菌数。将视野的半径 (r) 和每个视野的平均菌数x¯代入公式, 即可算出每克或每毫升样品内的菌数。
用此法方法制好的标本可贮存, 作永久性记录, 并可观察细菌的形态, 了解哪些细菌占优势。
2、计算室法
可用血球计数室进行计算, 将样品注入计数室中, 由于计数室的容积已知并有刻度, 计算一定数量刻度内的菌数, 即可算出每克或毫升样品中的细菌数。显微镜直接计数的优点是操作简单, 快速, 可在数10分钟内得到结果。除显微镜外不需要其它设备, 在搞鲜乳菌数计数时, 还可观察乳内有无细胞 (如白细胞) 对于发现乳房炎很有意义。其缺点是不能区分样品中的活菌与死菌, 而且此方法适用于菌数高的样品, 测定结果接近实际数值;对于菌数低的样品误差大, 不适用。用此方法检查很多个样品时, 长时间观察显微镜会使眼睛疲劳, 引起人为误差。某些食品颗粒易与菌体混淆不易辨识, 给计算带来麻烦。
二、平皿菌落计数法
平皿菌落计数法是常用的一种活菌计数法。将样品经适当稀释后, 取不同稀释倍数的稀释液, 分别加入灭菌培养皿内。随后加入融化并冷却到45℃左右的琼脂培养基, 使其与稀释样品充分混合均匀, 凝固后翻转培养皿进行培养, 所用琼脂培养基不应含有抑菌物质。乳制品35℃培养48小时该方法所得结果滞后性是其缺点。在生产实践中检出结果越快越好, 以便根据菌数多少采取相应措施。
三、还原实验法
细菌维持生命活动需从生化反应中获取能量, 在氧化还原过程中有的成分被氧化, 有的成分被还原, 测定还原能力即可推断样品内的菌数多少, 电位计可测出氧化还原电势发生的变化。某些指示剂也可以测定这个变化, 这些成分的颜色改变决定了样品内的菌数多少, 样品内含菌数高, 颜色改变就快, 这些成分的还原时间同细菌数量成反比, 还原试验常用的色素有美蓝, 属于指示剂的有刃天青。
1、美蓝还原试验
将美蓝配成1:30.000的溶液, 按1:10的比例加入样品中, 混合均匀, 置于37℃水浴中, 每30分观察一次美蓝由蓝色还原成无色需要的时间, 而后根据褪色时间检查美蓝还原试验表估计每克或每ML的菌数。
2、刃天青试验
3、红四氮唑试验
四、Bacto Scan FC法
这个仪器是最综合分析检测原料奶的组成和卫生质量的一种方法, 尤其对日常牛群状况的改变和牛乳价值度有较大益处。Bacto Scan FC被定义为对单个细胞计数而不是象平皿计数法计的是菌落数。此装置可以用在中心化验室分析原料奶中细菌含量。此方法快速、准确, 8分钟检测出结果。
1、测量原理
通过对细菌的荧光染色, 减少和发散原料奶中的成分, 所以细菌被计数。荧光检测方法可以检测出细菌发射的光, 当一束极细的样品通过流路细胞检测器时, 光的脉冲信号被传递进入电子脉冲, 然后通过计算显示在PC机上。
为避免其它成分如脂肪蛋白和体细胞的干涉, 样本必须经过化学处理以达到除去这些干扰成分的目的, 使牛乳最终成为真溶液状态。然后化学试制对细菌细胞作用, 细胞壁被刺破对DNA (脱氧核糖核酸) 染色。再通过激光照射后获取反射信号, 确定细菌的含量。
2、试剂的配制
(1) Rinse (清洗液) :用于流路清洗, 保持流路清洁。
100ml rinse concentrate加入至50升去离子水中混匀15-20度可保存一周。
(2) Sheath liquid stock solution (基础液) :用于配制sheath liquid液。
在8升去离子水中加入buffer powdet溶解加入Detergent (500ml) 用去离子水定容至10升, 室温可保存一周。
(3) Staining Reagent Stock Soluctionu (基础液) :用于配制Incubation Reagent液。
将buffer power溶解于8升去离子水中加入一瓶500ml Detergent和一瓶staining medium定容至10升, 闭光保存。
(3) Sheath liquid (载体液) :携带菌体细胞进入观察室。
量取2升sheath liquid stock solution加入8升去离子水中摇匀
(4) Blank (空白液) :较正系统准确度。
1升去离子水中加入50ml sheath liquid stock solutiom
(5) Incubation Reagent (染色液) :用于给菌体细胞染色。
量取550ml staining Reagent stock solution加入一瓶Enzyme 50反复冲洗后, 摇匀, 此试剂当天配制不可保存。
(6) End of Day Solution (清洗液) :在关机前给机器进行全面清洗。
10升去离子水中加入50ML25%氨水混匀。
五、结束语
细菌总数的检测对原料奶质量的控制有重要意义, 根据不同的要求采用不同的检测方法, 每一种方法各有利弊。Bacto Scan FC法是目前最快速、准确可靠的一种检测方法。
摘要：本文介绍了原料乳中细菌总数的常用四种检测方法, 及其优缺点。主要介绍了BactoScan FC检测方法。此方法自动、快速、可靠。
关键词：原料乳,细菌总数,检测方法
参考文献
[1]食品微生物学.东北农业大学出版社
细菌总数 篇3
遗爱湖, 黄冈市的城中湖, 地理方位为:东经114°87'、北纬30°44', 位于古城黄州新老城区中部, 鄂黄长江大桥桥头, 距京九铁路黄州火车站10公里。遗爱湖由东湖、西湖和上、下菱角湖组成, 水面2.93公顷, 近4000亩。仅就面积而言, 比南京的玄武湖和杭州的西湖都要大。从天空往下看去, 遗爱湖要比杭州西湖还要美丽:河汊沟通, 湖湖相连, 湖中点缀座座小岛, 丽质天成。黄冈市遗爱湖鸟瞰图见图1。
遗爱湖作为黄冈市的城中湖, 承担着市民的饮用水水源地、农田灌溉、景观娱乐、水产养殖等多方面的用途, 因此对该湖水质的卫生细菌学检测非常重要, 它直接关系到人民群众的健康安全问题。我们在实验过程中对遗爱湖水质的卫生细菌学检测主要是检测细菌总数和大肠菌群数。细菌菌落总数 (CFU) 是指1毫升水样在营养琼脂培养基中, 于37℃培养24小时后所生长的腐生性细菌菌落总数。它是有机物污染的一个重要指标, 也是卫生指标。在饮用水中所测得的细菌菌落总数除说明水被生活废物污染的程度外, 还指示饮用水能否饮用。但水源水中的细菌菌落总数不能说明有机物污染的来源, 因此需结合大肠菌群和粪大肠杆菌来判断水中的污染物来源及安全程度。水中细菌总数与水体受有机物污染的程度成正相关, 因此细菌总数常作为评价水体污染程度的一个重要指标。一般未受污染的水体细菌数量很少, 如果细菌总数增多.表示水体可能受到有机物的污染, 细菌总数越多, 污染愈严重。由于重金属、某些有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用, 总细菌数少的水样也不能排除被有毒物质污染的可能性。大肠菌群是指一群能在37℃, 24小时内发酵乳糖产酸产气, 需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌, 它主要包括肠杆菌科的大肠埃希氏菌、枸椽酸杆菌、克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌, 它主要来源于人畜粪便, 通常可作为水体粪便污染的指标菌。
二、遗爱湖水体卫生细菌学检测的内容及指标
水源水、饮用水中往往含有一定量的细菌、病毒和病原原生动物等病原体, 而水传疾病的暴发绝大多数情况是由病原体引起的。因此, 对水体进行细菌学指标检测是保证水质、保护人民健康的必然要求。与人体健康密切相关的微生物广泛分布于自然环境中, 水是其特别好的培养介质。当水体受到人、畜粪便、生活污水或某些工业废水污染时, 水中特定微生物会大量增加。开展水体细菌学指标检测, 可以间接判断水体污染状况和环境卫生学质量。我国法定使用的常规细菌学指标有细菌总数、总大肠菌群数 (Total Coliform, 简称TC) 。1982年在我国推荐使用粪大肠菌群数 (Feeal Coliform, 简称FC) 和粪链球菌群数 (Feeal Streptococcu", 简称FS) 及其粪大肠菌群数/粪链球菌群数的比值 (FC/FS) 来综合观察水体的污染程度及污染源的类型。并指出当FC/FS<1时, 是以动物粪便污染为主, 如FC/FS<1, 且FC、FS数量又很低时可能是一种长远污染, 水体已经自净;当17时, 是人粪为主的新鲜污染。
遗爱湖水体中微生物来源及种类主要是雨水冲刷土壤而使水体含有土壤微生物, 如硝化细菌, 氨化细菌, 芽孢细菌等。工业废水、生活污水排放而使废水含有大量微生物, 其中含大肠杆菌、霍乱菌、肠球菌、腐生菌等肠道病原菌。空气微生物通过降水作用进入水体。水体固有微生物菌群如丝状、荧光、光合细菌, 藻类等。水体微生物的分布从水平分布看污染源多的水体, 微生物数量多, 远离污染的水体微生物数量少。从垂直分布看, 距水面0~ (5~10米) 处, 由于受阳光紫外线照射作用微生物数量较少, 但浮游藻类较多;中层5~10米以下至25~50米处, 微生物数量较多;深层50米以下菌减少。好氧、厌氧及兼性微生物则主要分布在不同深度的水体中。水体中生长的微生物类型还与水体存在的碳物质有关。
世界卫生组织及美国等均认为细菌学指标极端重要, 因为它能在同一时间造成大片人群发病及死亡, 发展中国家每年有1220万5岁以下儿童因儿童病死亡, 超过300万人死于腹泻, 其中多数是由于受污染的水引起, 尤其在作为饮用水水源的水体中更应值得注意。在我国, 一般以异样菌总数、总大肠菌群数、粪大肠菌群或蛔虫卵数作为对细菌学指标的一种控制, 在景观河道、景观娱乐方面规定总大肠菌群数≤1×10个/升, 生活杂用水中规定粪大肠菌群≤3个/升, 而农田灌溉水质中的粪大肠菌群数≤1×1O个/升、蛔虫卯数≤2个/L, 在渔业方面总大肠菌群不超过5×10个/升 (贝类养殖水质不超过500个/升) 等。在国外, 细菌学指标发展体系比我国系统化得多, 而且整个细菌控制指标相对严格。通常以大肠菌值作为衡量指标。如美国在市政杂用水、灌溉中水中大肠菌值均≤2.2个/100毫升;城市再利用及风景河道湖泊方面粪大肠杆菌在100毫升水样中不得检出;农业再利用及间接饮用水不得检出粪大肠杆菌;在灌溉方面, 如草皮农场、果园、非食用作物的灌溉及风景景观塘湖、建筑使用、工业回用、环境回用等方面粪大肠杆菌≤200个/100毫升。与我国粪大肠菌群≤1×10个/L相比, 已明显高出许多倍, 日本也不例外, 在市政杂用上大肠菌值≤1O个/毫升, 多数不得检出。
三、黄冈市遗爱湖水体细菌总数的测定
细菌总数是指1毫升水样在营养琼脂培养基中, 于37℃培养24小时后所生长的细菌菌落总数。将原样或稀释后的水样置于营养琼脂培养基上, 37℃培养24小时, 计算平皿内菌落数目乘以稀释倍数, 即得1毫升水样中所含的细菌菌落总数, 它反映的是检样中活菌的数量。由于细菌常以块状、链状、片状聚在一起, 因而一个菌落通常不是一个细菌细胞增生的, 所以此法测定获得的水中菌数较实际要低。
水中的细菌总数可以作为水体的卫生状况和污染程度的指标。水中大多数细菌并不致病, 但水中细菌总数越少越好。菌数愈高, 表示水体受有机物或粪便污染愈重, 被病原菌污染的可能性亦愈大, 但不能说明污染物的来源, 也不能判断病原微生物的存在与否。
用稀释平板计数法测定水体中细菌总数的步骤如下:
1. 制备营养琼脂培养基。
各成分用量分别为牛肉浸膏3克, 蛋白胨10克, 氯化钠5克, 琼脂20克, 蒸馏水1000毫升, pH=7.2~7.4。在配制过程中需要加热并用玻璃棒不断搅拌, 然后分装到灭菌处理后的培养皿中, 待凝固后灭菌备用。
2. 采集水样。
水样采集后, 迅速送回实验室进行检验。水样采集与检验间隔时间控制在4小时以内, 若来不及检验, 应放在4℃冰箱内保存。取样时要注明日期、温度、水的来源、环境状况、水的用途等。
3. 在无菌操作下, 以10倍递减法稀释水样。
稀释倍数视水质而定, 以培养后平板的菌落数在30~300个之间的稀释度最为合适。
4. 接种。
用1毫升无菌移液管分别吸取各个浓度的稀释液1毫升分别以无菌操作方式注入无菌培养皿中, 每一稀释度做2个平行, 另取一套无菌培养皿, 做空白对照。待制备好的营养琼脂培养基冷却至45℃左右, 以无菌操作方式倾入每皿约15毫升, 并立即在桌上作平面旋摇, 使水样与培养基充分混匀。
5. 培养。
将做好的平板倒置于恒温箱中, 37℃培养24小时。
6. 计数。
用肉眼观察, 计数各浓度的2个平板的菌落总数, 并计算平均菌落数。根据各种不同情况采用不同的计算方式报告结果。
用肉眼观察, 计各浓度的2个平板的菌落总数, 并计算平均菌落数。根据各种不同情况采用不同的计算方式报告结果。菌落数的报告方式有以下几种情况:
(1) 首先选择平均菌落数在30~300之间者进行计算。当只有1个稀释度的平均菌落数在此范围时, 则以该平均菌落数乘其稀释倍数报告之。
(2) 若有2个稀释度的平均菌落数在30~300之间时, 则按两者的菌落总数之比来决定;若比值小于2应报告两者的平均数;若大于2则报告其中较小的菌落总数。
(3) 若所有稀释度的平均菌落数均大于300, 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(4) 若所有稀释度的平均菌落数均小于30, 则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(5) 若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间, 则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(6) 若所有的菌落数均为“无法计数”时, 应注明水样的最大稀释倍数。
(7) 在求同稀释度的平均数时, 若其中1个平板上有较大片状菌落生长时, 则不宜采用, 而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落约为平板的12, 而另1/2平板上菌落分布很均匀, 则可按半平板上的菌落计数, 然后乘以2作为整个平板的菌落数。
(8) 菌落计数的报告。菌落数在100以内时按实有数报告, 大于100时, 采用两位有效数字, 在两位有效数字后面的位数, 以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零位, 可用10的指数来表示。
经过以上方法测定遗爱湖水体中细菌总数平均超过1000个。
四、检测结果及水质的判断
按照上述方法, 经取样对遗爱湖水质进行卫生细菌学测定, 每毫升水样含细菌总数为﹥1000个, 根据地下水环境质量标准 (GB/T 14848-93) 判断, 该湖水质属Ⅴ类水质。
参考文献
[1]严平川, 彭小思, 王俊.湖北省湖泊环境现状及污染控制措施, 《中国水利》2004年第3期.
[2]劳嘉葆主编.《造纸工业污染控制与环境保护》, 中国轻工业出版社.
[3]王国惠主编.《环境工程微生物学》, 化学工业出版社.
[4]湖北省环保局简报, 2004年第12期.
[5]金岚主编.《环境生态学》, 高等教育出版社.
[6]林海, 麦光大, 周贞鉴, 郑有轩, 蔡自环, 陈文勇.海南岛水体的细菌学监测与研究, 《环境与健康杂志》1986年01期.
[7]王静, 马文敏.国内外中水水质标准对比分析研究及意义《农业科学研究》, 第26卷第3期, 2005年9月.
细菌总数 篇4
1 材料和方法
1.1 水样的来源
本实验所涉及的几组水样分别取自新安江(屯溪段,是黄山市居民生活饮用水来源)、率水河(新安江的支流,附近是居民生活区,也是各种生活和生产污水的排放地)、听松湖(黄山学院校内,是食堂和澡堂废水的排放地)、学校后池塘(教师宿舍区,是各种生活污水的排放地)、实验室自来水以及空白对照。
1.2 水样的采集
在采集自来水水样时,先用酒精灯将实验室水龙头灼热灭菌,再将水龙头完全打开,放水3—4min,以排除管道内的死水,然后用无菌采样瓶采集水样备用。新安江、率水河、听松湖和学校后池塘4处水样是在距离水面10—15cm处分别从3个地点采集50ml,采集后在实验室充分混匀后备用。
1.3 水的细菌学测定
水样采集后立即进行实验(<2h)。实验过程每组设置3个重复,3个稀释度(6组×3重复×3稀释度)。实验所用培养基为营养琼脂培养基[7],在取样前将所需培养基和培养器皿以及刻度吸管等灭菌,所用培养皿直径为9cm。实验时,将所取水样编号后充分摇匀,用10ml刻度吸管吸取10ml水样,注入盛有90ml无菌水的三角容量瓶中,混匀成10-1稀释液,吸取稀释液10ml按10倍稀释法依次稀释成10-2、10-3、10-4等连续的稀释度。根据水样的洁净程度,学校后池塘水样选取10-2、10-3、10-43个连续稀释度,新安江、率水河、听松湖水样选取10-1、10-2、10-33个连续稀释度,自来水不需稀释;吸取由高倍至低倍的稀释液,每个稀释液分别注入3个培养皿,每皿1ml,待注入彻底融化后、冷却到45℃左右的营养琼脂培养基约15ml,立即旋摇培养皿,充分混匀,让平皿培养基在水平位置放置至凝固,空白对照只需放入15ml培养基即可,然后将培养皿倒置于37℃恒温培养箱培养24h后取出计算其菌落数。
1.4 菌落的计算原则
在检查菌落计数时,我们采用放大镜检查以免遗漏。在计算菌落数时,有较大片状生长的平皿不能采用,应以无片状菌落的平皿进行菌落计数;若片状菌落不到培养皿的1/2,而其余1/2菌落分布很均匀则可以以1/2皿计,再乘以2代表全培养皿的菌落数。
1.5 菌落的报告方式
细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中、37℃培养24h后所生长的菌落数。菌落总数在100以内时报告实有数字,大于100时采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值以四舍五入方法计算;若菌落数无法计算时,应注明水样的稀释倍数。
2 结果与分析
根据水的细菌学报告原则,测得6种水样的菌落总数见表1,水质评价标准见表2。
从表1可见,新安江(屯溪段)水细菌数为260个/ml。根据表2水质评价标准,新安江(屯溪段)水属于清洁水,率水河水样和听松湖水样中细菌数依次为5.0×103个/ml和3.4×103个/ml。根据表2水质评价标准,这两个水样属于不太清洁水。学校后池塘水样中细菌总数为7.2×104个/ml。根据表2的水质评价标准,学校后池塘水样属于不清洁水,自来水水样为极清洁水。
3 讨论
水细菌学测定方法不同,对水质的评价也会产生一定的影响[8,9]。殷贵珠[9]对生活饮用水细菌总数和培养时间的研究表明,生活饮用水中测定的细菌总数应以培养48h计数结果更稳定可靠。但鉴于国家的统一标准是24h,本实验还是采取24h细菌总数报告。徐飞等[10]指出,依据2001 年实施的《生活饮用水卫生规范》(以下简称《规范》)测定饮用水源水—水库水的细菌总数,在37℃培养24 h开始菌落计数;同时按《规范》规定,吸取1ml水样注入盛有9ml灭菌水的试管中,混匀制成10-1稀释液。由于水样不够均匀和测试中随机效应的影响,取样1.0ml偏少,容易受偶然误差影响,无法保证取样的代表性、真实性,建议取10ml检样量,本文采取了此方法。
众所周知,黄山是闻名世界的旅游城市,其生态质量的好坏关系到安徽整个旅游业的发展。而新安江是黄山的母亲河,它横穿整个黄山市区,是黄山市人们生产和生活用水的主要来源,新安江最后汇入浙江的千岛湖,因此其水质的好坏不但影响到安徽省而且还影响到邻省,水质的好坏就显得尤为重要。根据本文对水的细菌学测定,我们发现新安江(屯溪段)的水质是清洁的,这充分反映了黄山良好的生态环境,但是要保持新安江(屯溪段)水质的清洁,还需要长期不懈的努力。柯来章等[1]对新安江流域的水质评价也表明,新安江流域水环境质量整体较好,达到Ⅱ、Ⅲ类标准;率水河属于新安江的支流,我们取样的附近是居民生活聚居地,同样属于生活聚居地的还有黄山学院后面池塘附近。从水质标准来看,黄山学院学校后池塘的水质较差,这可能与池塘比较小,其接纳吸收生活垃圾的能力远小于率水河有关。如果要全面对新安江(屯溪段)的水质进行评价,还需测定更多的指标。
摘要：应用标准平皿法测定了黄山市几种水体中的细菌总数,并结合水质评价标准对它们进行了初步的水质评价。结果表明,新安江(屯溪段)中细菌总数为260个/ml,属清洁水;率水河水样和听松湖水样中细菌数分别为5.0×103个/ml、3.4×103个/ml,属不太清洁水;学校后池塘水水样中细菌总数为7.2×104个/ml,属于不清洁水;自来水水样为极清洁水。
关键词：水细菌学测定,水质评价,黄山市
参考文献
[1]柯来章,阎伍玖.黄山市新安江流域水环境质量评价与管理措施[J].资源开发与市场,2007,23(1)∶6-9.
[2]左国超.一种新的水质评价方法——属性识别法[J].现代电子技术,2007,(1)∶157-158.
[3]和吉,胡西林,邱林,等.模糊物元模型在湖泊水质评价中的应用[J].华北水利水电学院学报,2007,(2)∶33-35.
[4]莫崇勋,黎曦,樊新艺.灰关联分析方法在河道水质评价中的应用研究[J].东北水利水电,2007,(1)∶47-50.
[5]李奇珍,何俊仕.水质综合评价方法探讨[J].人民黄河,2007,(1)∶50-52.
[6]张清敏,李洪远,王兰.环境生物学实验技术[M].北京:化学工业出版社,2005∶80.
[7]生活饮用水卫生规范[S].2001∶196-198.
[8]张凡非,张亚尼,贾瑛.细菌总数与培养时间关系的探讨[J].现代预防医学,2000,27(2)∶255.
[9]殷贵珠.生活饮用水菌落总数培养时间的商榷[J].环境与健康,1996,13(4)∶1711.