表达及意义

表达及意义（共10篇）

表达及意义 篇1

1. 引言

在韩国语中, 动词的一个显著特征是一个动词可以有两种用法, 既可以在句子中作动词, 又可以作补助动词。而韩语有相当的补助动词, 如“●●, ●●”等, 这对于韩语学习者学习语义有很大的影响。因此, 对母语为非韩语的韩语学习者及教授韩国语的人来说, 学习韩语动词时要特别注意这一点。

2. 动词“●●”的意义及其汉语表达

2.1 动词●●的基本义及其汉语表达

动词“●●”动词是视觉感官的基本动词, 将一般动词派生意义固定。动词“●●”以与眼相关的动作为基本词汇意义。

姐姐看了看我, 问我去了哪里。

王丹在看电视。

例句 (1) (2) 表明动词“●●”的基本意义为“通过视觉来了解事物事态”。通过例句 (2) , 我们发现, 例句不仅有看书的意思, 在“感像”“读书”的基本义之外, 还有“通过视觉来掌握事物的意思”。

动词“●●”体现基本义时, 汉语与其等同的词有“看/视望”。这类的单词如下:“●●●●/俯视, ●●●●/翻出来看, ●●●●/向外看, ●●●●●/向下看, ●●●●/轻视, ●●●●●/张望, ●●●●/耐心地看, ●●●●/回头看, ●●●●●/回看, ●●●●/环视, ●●●●/望着, ●●●●●/仰视, ●●●●/仰望, ●●●●/打量, ●●●●/偷看”等。

2.2 动词“●●”的派生意义和汉语表达

“●●”的派生义基本上体现为“通过用眼看来发挥作用”: (1) 用眼睛认识或感受 (看) 。 (2) 见面 (相见) 。 (3) 医生给患者诊察 (看病) 。 (4) 为了解食物的味道或咸淡提前尝试吃少量 (尝、品尝) 。 (5) 做或处理事 (办、做) 。 (6) 守护或照顾 (看) 。 (7) 去市场买东西 (去市场、赶集) 。 (8) 参加考试 (考试) 。 (9) 建立新家庭或迎娶 (娶、抱、得) 。 (10) 算命, 占卜 (看) 。 (11) 摆饭桌 (摆) 定期的收报纸, 阅读 (看、订) 。 (12) 做礼拜 (做) 。 (13) 有某种结果 (得、受) 实现某种结果 (达成、实现) 。 (14) 排泄 (解手、方便) 。

3. 补助动词“●●”的意义与其在汉语中的表达

3.1 补助动词“●●”的“试行”意义

“试行”是“作为试验尝试一下”的意思。此时, “●/●/●●●”的形式等同于“汉语”动词/重叠动词+看”。如: (1) ●●●● (吃吃看) ; (2) ●●● (做做看/试试看) ; (3) ●●●● (穿穿看/试试看) ; (4) ●●● (写写看) 。汉语中, 通常采用动词“试”和助词“看”表达“试行”的意思。

3.2 补助动词“●●”的“经验”意义

补助动词“●●”在很多情形下可以解释为“经历”的意义。两种意义在某种情形下不可完全区分开来, 多数句子里“经历”与“试行”的意义一起体现。“●/●/●+●●”的形式等同于汉语的“动词+过”形式。

给奶奶打电话了?

经历过了, 你就会明白的。

“●●”在过去时的情况下主要解释为“经历”的意义, 而如跟惯用型“●●●●●/●●”一起使用, “●●”表达“经历”的意义, 即使与“●●●●●”等感情色彩不好的词连用, 也表达:“试行”的意义。汉语的“过”接在动词后体现像“完结”“经历”的语法意义。在表达“经历”这样的意义时, 补助动词“●●”等同于汉语的“过”。但汉语的“看”不能体现“经历”的语法意义, 因为相对于汉语的助词“看”, 韩语补助动词“●●”的意义更加丰富。

3.3 补助动词“●●”的“假定”意义

学习者在文中表达“假定”意义时, 可以将形容词和补助动词“●●”结合, 即构成“动词/形容词先行谓词— (●●) +●●”的形式, 等同于汉语的“如果/要是/假如”。

你如果/要是老了就知道了。

我如果/要是漂亮就好了。

3.4 补助动词“●●”的“让步”意义

与后续词尾“_ (_●) ●”或“_●●”等连用时, 跟“●●”连接受制约的谓词可把补助动词“●●”用作先行词。在汉语中等于“就算……也……”, “即使……也……”, “尽管……也……”, “虽然……可是……”等形式。例如:

尽管去了也没有用。

虽然下雨了, 可是有什么用呢?

3.5 补助动词“●●”的“恭顺”意义

“●●”有时用作委婉的表达。所有委婉的表达方式比起直接表达, 更能起到体现“恭顺”的效果。

哲洙, 你把玩具放这里吧。

哲洙, 你把玩具放这里吧。

(1) a.b在语感上有差异。可以看出 (1) a比 (1) b表达更委婉。对孩子说话, 相对于直接用命令型, 更多采用“

加型。

请带学生出来一下吧。/能带学生出来一下吗?

请带学生出来一下吧。/能带学生出来一下吗?

那么我就告辞了。

那么我就告辞了。

通过例句, 我们看到补助动词“●●”有两种委婉表达方式, 第一, 指使对方行动, 如 (2) a;第二, 体现转换话者的“意图”和“试图”, 如 (2) b, 此时等同于汉语的“请……一下”, “那么……就”。

4. 偏误分析

4.1 使用补助动词产生的偏误

补助动词“”虽然是使用频率很高的补助动词, 却在实际运用当中很少活用, 时常用错。让学生翻译“请把课文内容预习一下。”“请你读一下课文。”这样的句子时, 学生常只

写作“●●●●●●●●●●●.”“●●●●●●●●●.”却不写成“●●●●●●●●●●.”“●●●●●●●●●●.”这是因为, 汉语没有补助动词, 学生们的大脑仍然没有形成补助动词的观念。下面是错误使用补助动词的实例。

(1) 将所有动词均视为补助动词

例如将汉语中的重叠动词看作是补助动词。

(2) 没有使用补助动词“●●”

今天要去找老师打听成绩。

这学期要努力探究阅读方法。

我终于坐飞机了。

(2) a.b.c中使用“●●●”“●●●”“●●”是无误的, 但我认为, 如使用补助动词“●●”会更好一些, 表达会更完善。

(3) 补助动词前没有动词

我大学4年很害羞, 没尝试过爱情。

他太紧张了都没跟老师说话。

看 (3) a.b的句子, 表达了“我没恋爱过”“他没跟老师说过话”的意思, 必须添加动词“●●”。这是由于补助动词“●●”不能发挥谓语的作用, 必须有先行动词。一个句子中如果省略了先行动词, 就成了病句。

(4) 惯用形态使用错误

在例子 (4) a中, “●●”前面事实成为了后面行动或状态的原因。使用时后面必须有伴随原因的结果。

(4) b用跟a相同的句型, 但b的“●●”表达前面动作进行着, 出现了意料之外的结果。

(2) 是进行着前文行动重新体验到后文提到的事实。由于“……●……”表达的是假定的意思, 因而成了病句。

—●●● (●●●) 是体现进行了前文动作后, 发现了另外的状况。

—●●●是体现推测想象预测。

●●●●●●●● (●●●:形容词)

●●●●●●型前面必须接动词体现意图打算, 但不接形容词。在 (5) 中, ●●●是形容词。

—●●●●●型的前面必须接形容词, 体现某种性质或状态。可是由于下面例句中—●●●●●●型接了动词, 成了病句。

●●●●●●●●●●●●●● (●●:动词)

其中 (●●) 是动词, 一般情况下不能体现某一事物的性质和状态。

4.2 偏误产生的原因

偏误产生的原因可归纳为以下几条: (1) 母语的干扰。 (2) 宾语规则的过多使用。 (3) 在使用补助动词过程中, 如受教材和授课教师的影响, 也会产生偏误。此外, 在大多数情况下, 不会只产生一种偏误, 而会同时产生很多偏误。避免偏误的方法有以下几种: (1) 熟练作为母语的现代汉语语法。 (2) 将现代汉语语法跟韩国语语法进行对比, 了解两种语言的差异。 (3) 知识丰富, 且精通现代汉语语法和韩国语语法, 能够熟知同一个动词的各种语法功能。 (4) 面向学习者编写适当的教材。

在韩语学习中韩语补助动词“●●”具有动词和补助动词双重意义, 造成了非母语的韩语学习者及教授韩国语的教师的困扰, 产生语病, 希望本文的研究能够对韩语补助动词的教学有所助益。

参考文献

[1]金海月.朝鲜语“V来/去”与汉语“V来/去”的对比.延边大学硕士学位论文, 2000.

[2]金基赫.国语辅助动词研究.延世大学研究生院国语系博士学位论文, 1987.

[3]朴宗翰.现代汉语表示方向的复合动词的形成与语义研究.汉城大学博士学位论文, 1993.

[4]邢福义.韩国语实用语法[M].北京:外语教学与研究出版社, 1995.

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表达及意义 篇2

肿瘤的发生、发展与细胞的异常增殖密不可分。细胞增殖是一个被高度协调机制控制的基本生物过程，人体复杂的调控机制负责胚胎的正常发育、伤害和感染等的调控，一旦调控平衡被打破，就可能产生肿瘤[1]。1983年Gerdes从何杰金瘤细胞系IA28的粗核成分免疫鼠制備名为Ki-67的抗体，发现此抗体仅认可处于细胞周期的增殖细胞核抗原，其表达在人增殖细胞的G1、S、G2、M期，但在G0期无此抗原表达，由此命名这种抗原为Ki-67抗原。Ki-67抗原基因定位于第l0号染色体上，Ki-67蛋白由分子量为358761D和319508D的两条多肽链组成，并由两个缝接的9768bp和8686bp的m-RNA所编码。最近的研究证明，Ki-67抗原是核基质的一部分，具有非蛋白的特点，它的表达因细胞周期而异。通过详细的细胞周期分析显示：它从G1后期开始出现，分布于核仁周围，S和G2期逐渐升高，分布于细胞核内，M期达高峰，呈网状结构包绕整个染色体，而不出现在G0期，在有丝分裂中，Ki-67出现在所有增殖细胞的染色体，并在后期迅速减少，半衰期不到一个小时 ，故Ki-67的表达与细胞周期严格相关[1]。这说明Ki-67可作为标记细胞的“生长指数”来衡量肿瘤细胞的生长速度，与恶性肿瘤的发展、转移和预后高度相关。

1 肺癌

宋作庆[3]采用免疫组化方法(S-ABC法和S-P法)检测70例NSCLC和20例同期良性病变肺组织中Ki-67的表达，Ki-67的阳性表达率为85.7％ ，而正常肺组织中无表达，差异有统计学意义。说明Ki-67的表达与肺癌的发生关系密切，是恶性肿瘤的特征性表现。国内外多数学者研究发现，腺癌中Ki-67的表达低于其他组织类型，可能与腺癌细胞增殖速度较低有关[1]。李英杰[4]等运用免疫组化方法检测Ki-67的表达，发现肺癌分期越晚，Ki-67表达越高。也有学者认为，Ki-67仅能标记细胞的增殖速度，而与组织学类型和临床分期无关。

2 乳腺癌

研究显示，Ki一67在乳腺癌组织中阳性率约为80％左右 ，在不同病理类型之间Ki-67阳性表达率差异有统计学意义，其中浸润性导管癌中阳性表达率明显高于其他类型；有淋巴结转移者与无淋巴结转移者相比Ki-67阳性表达率差异亦有统计学意义，Ki-67的阳性表达与淋巴结转移呈正相关，且Ki-67阳性表达者更易于发生在淋巴结转移，而淋巴结转移是目前判断乳腺癌预后的独立预后因素，因此可认为Ki-67是判断乳腺癌预后的可靠指标[5]。刘新兰[5]等研究发现Ki-67的阳性表达与体重指数呈正相关，说明体重指数可能与乳腺癌的增殖有关，可能是影响乳腺癌预后的因素之一。赵峰霞[6]等研究发现Ki-67的表达与CerbB-2表达呈正相关关系，表明Ki-67与CerbB-2之间可能具有协同作用。

3 胃癌

韩军平[7]等研究发现，ki-67与胃癌的Lauren分型和病理分级无关，而与癌的浸润深度和淋巴结转移有关，随着癌组织的浸润深度的增加、淋巴结转移率的增加，ki-67指数增加。

4 大肠癌

由于大肠癌的发生学说中有一个比较公认的“腺瘤-癌演变”发病模式，它强调在不同的阶段有不同的基因变化参与，其中大肠粘膜细胞增殖活性的逐渐增强直至发生质变为其根本特征[2]。王红[8]的实验发现在正常大肠组织、大肠腺瘤和大肠癌中Ki-67阳性率逐渐增高，大肠腺瘤和大肠癌中的Ki-67阳性率显著高于正常组织，说明Ki-67阳性率能可靠地反映正常和病变组织增殖活性，Ki-67抗原的表达在细胞的M期达高峰，其直接反映的是肿瘤细胞的增殖活性。大肠癌组织中Ki-67表达与组织学类型无关，但与肿瘤浸润深度、癌细胞分化程度有关。分化程度越低、伴有淋巴结转移者Ki-67表达越强[2]。

5. 子宫内膜癌

Ki-67在正常子宫内膜组织、单纯性增生、复杂性增生、非典型增生和子宫内膜癌中的表达是逐渐增加的，表明了其增殖活性逐渐增强。子宫内膜样腺癌患者其Ki-67指数低于其它癌。Ki-67的表达与子宫内膜癌的分化程度、肿瘤的组织学分级、临床分期、肌层浸润深度和淋巴结转移呈正相关，表明Ki一67可以反映子宫内膜癌的临床生物学行为，间接提示子宫内膜癌患者的预后[9]。

5 宫颈癌

在未成熟鳞状上皮化生中Ki-67表达一般局限于正常黏膜上皮细胞下1／3的基底细胞上，随鳞状上皮内病变级别的增加，Ki-67表达数量增加，位置上移，在高级别鳞状上皮内病变可弥漫表达于上皮全层[10]。从慢性宫颈炎-上皮内瘤样病变-宫颈癌，Ki-67表达水平进行性增高，同时Ki-67表达与宫颈癌组织分级和临床分期相关，提示宫颈癌细胞增殖活性的改变与宫颈癌的发展过程及恶性程度有关[11]。

细胞核增殖抗原Ki-67能代表细胞增生活性,与多种肿瘤的发生发展、转移及预后密切相关，已成为检测肿瘤细胞增殖活性的有效指标之一。对肿瘤的早期诊断、预后判断及治疗方面有广阔的应用前景。

参考文献：

[1] 向靖;陆友金. Ki-67与肺癌关系的研究进展[J]. 临床肺科杂志. 2012，17(4)：706-707.

[2] 何晓彬，赖敏. 结肠癌中Notch-1与Ki-67的表达及临床意义[J]. 四川医学. 2011，32(8)： 1178-1180.

[3] 宋作庆，徐萧洪，韦森，等．肝素酶及Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]．中国肺癌杂志. 2009，12(7)：785—788.

[4] 李英杰，于长海，李授，等．PCNA和Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义[J]．临床军医杂志. 2011，39(2)：261—263．

[5]. 刘新兰;张桂香. Ki-67和E-cadherin在乳腺癌组织中的表达及意义[N]. 宁夏医科大学学报-2011.33(11).1040-1044

[6] 赵峰霞,张静,曹文庆,等. 乳腺癌组织中CerbB-2、Ki-67、Pgp、GST-∏、TopoⅡ的表达变化及意义[J]. 山东医药. 2011，51(46)：75-76.

[7] 韩军平，刘斌，孟燕，等. 多药耐药基因产物及CerbB-2、ki-67在胃癌中的表达及其临床病理学意义[J]. 现代肿瘤医学. 2011，19(11)：2281-2284.

[8] 王红，赵逵，王建立，等．COX-2、EGFR和Ki-67在大肠癌组织中的表达及其意义[J]．山东医药. 2008，48(31)：1-3.

[9] 王琨华;郭启勇. 子宫内膜癌的DWI成像特征及其与PCNA、Ki-67表达相关性研究[J]. 医学影像学杂志. 2011，21(11).1718-1723.

[10] 练玲芝，惠京，汤捷. 宫颈未成熟鳞状上皮化生和高级别鳞状上皮内病变中细胞角蛋白及Ki一67的表达[J]. 山东医药2011，51(15)：28-30.

论实验影像的多元化表达及意义 篇3

一、实验影像与科学技术

实验影像是综合了各种学科和技术, 尤其是发展到现代, 随着科学技术的提高, 实验影像也越来越与科技联系的更紧密。例如与计算机数字技术的结合, 计算机数字化技术贯穿于当下几乎全部影像艺术, 包括实验影像。与计算机技术的高度结合, 可以使影像在电脑中进行任何处理和修改、剪辑和后期影像制作, 甚至很多特效都超乎我们的想象, 给受众者们带来了崭新的视觉冲击和震撼力, 为艺术的发展提供了前进的动力, 也为艺术家们提供了意想不到的惊喜和便利, 成为他们当今不可缺少的艺术手段。这种计算机数字技术为实验影像提供了新的视觉世界也为录像艺术提供了交互性的便利。除此以外, 还有互联网的出现于应用对实验影像的影响。互联网具有其他电子媒介所没有的独特功能, 比如便利的实时展示、人机互动性, 在表现力方面, 互联网业打破了单一的表现方式, 结合了图片、文字、动画和影像等各种综合媒介的形式。同时也提供了人们在地里和空间方面无障碍的交流。

二、实验影像与哲学

哲学以主观的自我意识感悟整个客观世界, 而艺术用外在形式体现内在的美。实验电影更能反映出和哲学的关系。比如法国先锋艺术家路易斯·布努埃尔拍摄的《一条安达鲁狗》, 就是以创造性思维作起点进行哲学情境的实验, 影片没有完整的故事情节, 只是一个个奇怪的画面来组成整个影片的节奏。弗洛伊德的本我学说, 认为本我是最原始的, 是包括生物和人类都存在的, 是原始的本能, 要满足于本身自我的快感、原始冲动、生理等欲望。

德里达的结构主义学说, 强调打破原有的框架和单元化的存在秩序和状态数千年来形成了很多固有的社会秩序、道德秩序、社会伦理道德规范等秩序, 反传统、反模式、反标准。并对个体进行包括叠加、重构等方式的艺术重组, 这种分离破碎的符号所表达出来的破碎和未知感正是解构艺术家所追求的。而实验影像也是反对传统的艺术模式, 反叙事, 他们都是摒弃传统的表达形式, 或者在其基础上进行分解、颠覆、重组和改良, 从而产生新的表达方式。从这点上来讲, 解构主义和实验影像在理念上是有相同之处的。实验影像在创作手法上可以借鉴解构主义的学说, 而解构主义可以在实验影像基础上进行更进一步的改造与分解, 使其不断的发展下去。

三、实验影像与音乐

音乐是一种听觉艺术, 它不需要翻译, 是一种无国界的全球语言。音乐特有的节奏和韵律给艺术作品增添了色彩, 烘托了影片所营造的氛围, 使受众者更容易理解作品, 并且进入影片之中。而音乐对于实验影像这个小众型的艺术而言, 除了制造影片氛围之外, 还可以引起艺术家更深刻的思考和创作。中国的张培力创作的录像艺术片《保鲜期———1994 /8 /24》, 采用了声音和画面分离的“破境”方式, 画面是一个人解剖鸡肉的场景, 但是背景音乐却是我们古典乐曲《春江花月夜》, 这部影片虽然没有采取同期声的背景音乐或者更加适合的音乐, 反而是毫不相关的古典音乐, 表面看似奇怪, 但是这正是艺术家的实验探索的体现。是艺术家灵活运用音乐与画面的探索, 是深入分析音乐与画面关系的研究。

音乐与画面可以协调, 也可以不协调。可以有背景音乐, 也可以没有背景音乐。实验影像是一个自由的影视门类, 更加灵活运用了音乐, 来表现艺术家的实验意图。但凭借实验影像的艺术魅力, 我们很容易就能记住某个悠扬的乐曲以及某种极具代表性的声音。因为视听语言的综合表现我们通过视觉的刺激加上头脑中的想象会对单纯的音乐赋予情感认识, 于是音乐的表现不再是刻板的音符, 视觉的体验也更有独特的想象空间。

在实验影像没有出现之前, 可以说没有什么艺术在画面和空间上具有如此的自由表现力。它既可以重现真实的空间形象, 又可以表现虚幻的空间形象; 同时实验影像的综合性表达使其具有信息的共时性和瞬息性等特点, 而且画面本身的表现意义也丰富了影像的独特的形式语言手段。实验影像的艺术表达融合了多方面的感知信息, 可以通过一部作品领略到视听语言的魅力, 同时因为其实验性更能在一定程度上解放思想, 活跃人们对于传统影像的惯性思维。影像视频媒介拥有众多的受众对象, 完全可以由具体视觉、听觉来表达主题、甚至传递抽象思维的艺术媒介, 因此对实验影像实验形式语言性表达的多元化研究对于实验影像的生产者和受众人群都有着重要的现实意义。

参考文献

[1][美]A.L.李斯.实验电影史与录像史 (岳扬) .吉林:吉林出版集团有限责任公司, 2011.

[2]雅克·德里达.解构与思想的未来.吉林:吉林人民出版社, 2011.

[3]厉震林.导演的律动.上海:上海书店出版社, 2011.

表达及意义 篇4

关键词 胃癌 免疫细胞化学 Western blot Ki67doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2012.30.213

胃癌是全世界最常见的恶性肿瘤，且死亡率极高，严重威胁人类的生命[1]。Ki67是一与增殖细胞相关的核抗原，与肿瘤增殖、浸润及转移和预后密切相关[2]。本研究应用免疫细胞化学技术SABC和Western blot对胃癌细胞株SGC7901、BGC-823进行检测，探讨Ki67在胃癌细胞中的表达及在胃癌发生发展中的意义。

资料与方法

材料：①细胞：人胃癌转移淋巴结细胞SGC7901购自武汉生命科学细胞中心，人胃低分化腺癌细胞BGC-823细胞购自武汉博士德生物工程有限公司。②试剂：RPMI-1640购自Gibeo公司；Ki67单克隆抗体购自北京中杉金桥有限生物公司；DAB显色试剂盒及即用型（鼠/兔）SABC免疫组化染色试剂盒购自北京中衫生物技术有限公司。PIRA裂解液购自北京中衫生物技术有限公司。

方法：①细胞培养：细胞株SGC7901、BGC-823在RPMI-1640完全培养液中常规培养。完全培养液中含有10%的小牛血清（CS）、1%青霉素、1%链霉素。培养条件为湿润状态下37℃和5% CO2。②免疫细胞化学：常规消化细胞，制备细胞悬液，并调整细胞密度2×105/ml。将高压灭菌的盖玻片放入6孔培养板内，滴加细胞悬液2.5ml/孔，待细胞爬满盖玻片时，取出细胞爬片，浸入固定液4%多聚甲醛30分钟，PBS（pH 7.2～7.6）浸洗3×3分钟后进行染色。采用SABC免疫组化法，具体步骤按照试剂盒说明操作。试剂盒里的阳性片为阳性对照，用PBS代替一抗做阴性对照。③结果判定标准：CyclinD1、Ki67阳性细胞均表现为细胞核内含棕黄色颗粒。在光镜下，结合免疫细胞化学染色强度和阳性细胞率两个参数，综合判定CyclinD1、Ki67的阳性染色。用BioMias图像处理系统在100倍镜下选取癌视野中5个区域，分别在高倍镜（400×）下随机选择25个视野。采用Image Pro Plus 5.0图像分析软件检测阳性染色的积分光密度值（IOD）。④Western blot方法：收集细胞，裂解得总蛋白，考马斯亮蓝法定量蛋白。调整样品蛋白浓度使其相同，取样品经SDS-PAGE后，转印至PVDF膜上。PVDF膜以5%脱脂奶粉封闭2小时，加入一抗过夜。经洗涤后，加入二抗，室温孵育2小时。最后用ECL显影并扫描测灰度值。

统计学处理：采用SPSS13.0统计软件，实验数据以（x±S）表示，根据数据来源和统计学要求进行重复测量的方差分析。P<0.05有统计学意义。

结 果

免疫细胞化学法检测Ki67在两种胃种胃癌细胞株中的蛋白表达：Ki67在胃癌细胞株中阳性表达均呈棕黄色，并且定位于细胞核。人胃癌转移淋巴结细胞SGC7901中Ki67的蛋白表达IOD值（5018.210±107.628）△明显高于BGC-823细胞（1966.439±123.020），差异有显著性（P<0.05）。

Western blot检测Ki67在各宫颈癌细胞株中的蛋白含量：人胃癌细胞株SGC7901、BGC-823内均有Ki67阳性蛋白表达条带。蛋白条带灰度值分析表明：人胃癌转移淋巴结细胞SGC7901中Ki67蛋白的阳性表达均高于人胃低分化腺癌细胞BGC-823细胞，差异有显著性（P<0.05）。

讨 论

细胞的增殖状态，对研究肿瘤生物学行为、判断其危害性具有及其重要意义。一旦细胞周期调控失常，就会导致肿瘤的恶性增生[3]。Ki67是应用最广泛的增殖细胞标记之一。Ki67蛋白是由两条多肽链组成，Ki67抗原的量随细胞周期的不同而发生改变。在G1中期到后期出现表达，S期和G2期逐渐增加，有丝分裂期达到高峰，分裂后迅速降解或丢失抗原决定簇。现认为Ki67的功能与染色质相连，与细胞的有丝分裂有关[4]。Ki67的表达和细胞增殖状态密切相关，是反映细胞增殖的主要生物学指标。因此，通过本研究结果表明，在转移癌细胞株SGC7901中Ki67的表达明显高于非转移细胞株BGC-823（P<0.05），提示Ki67的高表达与胃癌的发生和发展密切相关。

肿瘤细胞的异常增殖可以通過多种方式与细胞外基质相互作用促进了肿瘤细胞的浸润和转移。由此可见，Ki67在胃癌的发生、发展过程中起到了重要的作用。它不仅能客观反映胃癌细胞的增殖活性，并能评估癌细胞发生增殖、转移的潜能[5]。因此认为，Ki67高表达可能导致胃癌细胞增殖周期调控失常，使细胞发生无限制增殖及异常分裂，最终导致胃癌细胞恶性转化，甚至发生转移。

参考文献

1 Lee J H，Miele ME，Hicks DJ，et al.KiSS-1，a novel human malignant melanoma metastasis suppressor gene[J].J Natl Cancer.

2 Charles J，Sherr.The Pezcoller Lecture：Cancer Cell Cycles Revisited[J].Cancer Research，2000，60（14）：3689-3695.

3 Pruitt K，Der CJ.Ras and Rho regulation of the cell cycle and oncogenesis[J].Cancer Lett，2001，71（1）：1210.

4 Bartek J，Lukas C，Lukas J.Checking on DNA damage in S phase.Nat Rew Mol Cell Biol，2004，5：792-804.

脑脊液单核细胞P38表达及意义 篇5

1 资料与方法

1.1 一般资料

把研究对象分为癫痫组和对照组, 癫痫组我院门诊就诊的癫痫患者, 参照国际抗癫痫联盟癫痫分类及命名委员会修改方案诊断标准[2]分类。共测查癫痫患者30例, 其中男20例, 女10例, 年龄15~65岁, 平均年龄 (35.5±6.1) 岁;起病年龄6~35岁。平均起病年龄 (21.9±9.7) 岁;对照组:与癫痫组患者各个情况均相匹配且无其他神经精神史的健康志愿者15名。

1.2 脑脊液收集

收集初发病历30志愿患者, 初发癫痫后1 h、24 h、7 d、30 d、90 d、180 d分别收集5 m L脑脊液, 勿污染及混入血液等。过液氮后转入-80℃超低温冰箱保存。

1.3 Western印迹检测P38蛋白表达

用蛋白提取试剂盒 (南京凯基公司) 提取总蛋白, 定量试剂盒 (BCA法) 测定蛋白浓度。依次加入5×上样缓冲液煮沸、上样、电泳、转膜、封闭, 滴加兔抗P38 (比例1:100) , 滴加生物素标记的二抗 (比例1:800) , 4℃摇晃3 h, PBST洗膜10 min×3次后行ECL发光5 min, 应用胶片曝光, 结果扫入凝胶成像系统 (bandscan软件分析系统) 进行灰度分析。

1.4 统计学方法

结果采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理, 认知功能测验成绩用±s表示, 组间比较采用独立样本检验。利用多元线性回归分析多个自变量对于正态分布的变量的相关性。P<0.01为差异具有统计学意义。P38分子生物学实验数据采用单因素因素方差分析, 组间比较用LSD-t检验。

2 结果

Westernn blot印迹检测结果:各个试验组脑脊液单核细胞中P38蛋白均有表达, 表达有明显差异性 (P<0.01) 。癫痫组在癫痫初期 (30 d) 明显高于对照组, 后期 (60d) 明显低于对照组。癫痫组内组内比较, 蛋白灰度校对值癫痫发作7 d时明显高于1 h、24 h、7 d、30 d、90 d、180 d组, 180 d组最低 (P<0.01) 。

注:组内比较P<0.001

3 讨论

癫痫是神经科常见的一种慢性病。反复的癫痫发作给患者的身心健康造成严重损害, 脑功能受损尤为受到密切关注, 表现在认知功能障碍等方面[3]。已有研究表明癫痫患者认知功能较正常人明显下降。而影响认知功能是多因素综合作用的结果, 起病年龄、发作类型、受教育程度、用药情况、发作频次密切相关, 且起病年龄、发作频次及受教育程度最为显著。药物不规律使用可以导致耐药或癫痫本身不能控制, 长期规律用药, 其药物本身对患者认知功能也是一种重要的损害。在癫痫患者中, 大部分患者的认知功能损害是缓慢进行的, 最后可发展为不可逆的认知功能障碍。

突触素P38存在于所有神经终末的突触囊泡膜上及脑脊液单核细胞内, 单核细胞中P38被分泌至脑脊液从而进入循环, 与突触可塑性密切相关, 与突出重构及调节长时程增强密切相关[4]。本研究显示, P38在癫痫发病早期, 呈逐渐升高, 30 d前均高于正常健康对照组, 30 d为最高。多次癫痫发作所, 异常放电激活MAPK激活系统, 使P38表达逐渐增加, 促进癫痫发作所引起脑生理生化损伤的修复及促进新的突触形成, 及突触重建修复, 维持认知功能功能, 后由于P38调节长时程增强及突触可塑性, 启动损伤保护过程。所以认知功能与对照组无明显变化。而长期的癫痫发作, 引起脑部自我功能的失调和破坏, 打破这种平衡, 认知功能即会下降, 微观上P38也可引起多种基因的表达, 引起认知功能神经元的调亡, 即认知功能受损[5]。

综上所述, 本研究表明癫痫患者认知功能受损, 而P38脑脊液单核细胞中的蛋白变化随着认知功能变化而变化, 是有关认知功能的重要因子, 但机制复杂, 尚不明确, 有待进一步探索。

摘要：目的 检测脑脊液P38的表达, 探讨其意义。方法 30例癫痫首次发作患者发作后1 h, 24 h, 7 d, 30 d, 90 d, 180 d脑脊液及外伤后复查脑脊液正常者脑脊液为对照组, 用Western bolt检测脑脊液单核细胞P38蛋白表达变化。结果 脑脊液中P38表达在各个时间段表达与对照组相比明显变化 (P<0.05) 。结论 P38与癫痫患者认知功能变化密切相关, 是认知功能维持的重要因子。

关键词：癫痫,认知功能,P38,脑脊液

参考文献

[1]谷鸣, 钱元桂.61例癫痫患者认知功能及其影响因素分析[J].安徽医药, 2009, 13 (3) :290-292.

[2]Proposal for revised clinical and electroencephalographic classification of epileptic seizures.From the Commission on Classification and Terminology of the International League Against Epilepsy[J].Epilepsia.1981, 22 (4) :489-501.

[3]Noe KH, Locke DE, Sirven JI.Treatment of depression in patients with epilepsy[J].Curr Treat Options Neurol.2011, 13 (4) :371-379.

[4]Bonora A, Benuzzi F, Monti G, et al.Recognition of emotions from faces and voices in medial temporal lobe epilepsy[J].Epilepsy Behav.2011, 20 (4) :648-654.

MTLC在食管癌中的表达及意义 篇6

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集2013年6月—12月山西省汾阳医院25例手术切除食管癌标本作为研究组, 配对对照组织为距癌组织1 cm以上的癌旁组织或者切缘远端正常组织, 均经病理证实, 均经福尔马林浸泡固定和石蜡包埋组织切片。本组病例年龄35岁~65岁, 男18例, 女7例, 均为鳞状细胞癌患者;所有入选患者均未行新辅助化疗。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学方法

采用SABC免疫组化染色方法, 第一抗体MTLC、Ki-67、c-Myc、p53及SABC即用型试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司, 操作步骤按试剂盒说明书进行。用已知阳性的食管癌切片作为阳性对照, 用PBS代替一抗作阴性对照。

1.2.2 结果判定

MTLC以细胞质或细胞核出现黄色或棕黄色颗粒为阳性, 采用Tanaka等[6]提出的计分法:染色强度分为4级:无着色0级计0分, 浅黄色1级计1分, 棕黄色2级计2分, 棕褐色3级计3分。在400倍光镜下随机观察5个不同视野, 根据阳性细胞占总细胞的百分比分为4级:<5%为1级, 5%~25%为2级, 26%~50%为3级, >50%为4级, 分别取对应分值1, 2, 3, 4, 用细胞数得分和染色强度得分相乘即为该基因的表达量。

1.3 统计学方法

数据均采用SPSS19.0统计学软件进行分析, 计量资料采用t检验, 相关性采用双变量Pearson相关分析, P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 MTLC在食管癌中的表达情况

在本组试验中, MTLC在正常鳞状上皮内呈强阳性表达, 而且是位于基底层细胞、副基底层细胞、棘层细胞, 基底层细胞及副基底层细胞单个散在或成簇状阴性表达 (见图1) , 随着鳞状上皮的恶性变, MTLC阳性细胞的数量减少及强度逐渐减弱, 在浸润性鳞癌中MTLC阳性细胞数进一步减少 (见图2) 。研究组阳性表达量明显低于对照组, 组间差异有统计学意义 (P<0.01) (见表1) ;MTLC阳性表达量在高分化组高于中低分化组, 差异有统计学意义 (P<0.05) (见表2) 。

2.2 研究组组织中MTLC与Ki-67、c-Myc、p53表达之间的相关关系

癌组织中MTLC与Ki-67、c-Myc、p53的表达之间均呈负相关关系 (P<0.05) 。见表3。

3 讨论

邱广斌[1]等克隆出的MTLC基因, 位于染色体的6q25区域内, 该基因全长约21 kb, 含2个外显子, 其c DNA序列长1 006 bp, 编码蛋白包括235个氨基酸。其5p侧翼序列存在癌蛋白c-Myc的结合位点, MTLC蛋白一级结构含有一个核定位信号结构域, 亚细胞定位实验证实该基因主要在细胞核表达, Northern印迹分析表明MTLC基因在心肌、肝、肾、脑等多个组织有表达, 并提出该基因可能作为c-Myc的靶基因以转录因子形式参与维持细胞正常生理功能。邱广斌等还发现MTLC基因可促进胃癌细胞系BGC 823细胞凋亡[4], 并通过RT-PCR、免疫组化及c DNA微阵列分析观察到MTLC基因在胃癌组织中表达降低, 认为MTLC可能是一种抑癌基因[5]。刘水平[3]等发现MTLC m RNA在肝癌组织中表达下调, 认为MTLC表达降低可能与肿瘤发生发展关系密切。在本组试验显示, MTLC在正常鳞状上皮内呈阳性表达, 在浸润性鳞癌中MTLC阳性减低, 说明MTLC在食管癌中可能是一种抑癌基因。MTLC在高分化组表达高于低分化组, 说明MTLC在食管癌的分化过程中也起一定作用。邱广斌[1]等发现MTLC的5p侧翼序列存在癌蛋白c-Myc的结合位点, 本组试验发现MTLC表达与Ki-67、c-Myc、p53的表达呈负相关, 说明MTLC可通过多种途径影响食管癌的发生发展, 与其发现相符。

总之, MTLC可以作为食管癌的肿瘤标志物, MTLC低、表达对食管癌的发生有促进作用, MTLC与KI-67、c-Myc、p53表达之间呈负相关关系。

参考文献

[1]邱广斌, 邱广蓉, 徐振明, 等.6q25区域新基因MTLC的克隆及特性分析[J].中华医学遗传学杂志, 2003, 20 (2) :94-97.

[2]邱广斌, 郝冬梅, 宫立国, 等.MTLC基因在喉癌组织中的低表达及其对喉癌Hep2细胞凋亡的影响[J].中华检验医学杂志, 2005, 28 (11) :1178-1180.

[3]刘水平, 贺剑鸣.MTLC基因在肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达[J].湘南学院学报 (医学版) , 2006, 8 (3) :16-17.

[4]邱广斌, 郝冬梅, 郑志红, 等.胃癌组织中MTLC基因表达研究[J].中华检验医学杂志, 2005, 28 (1) :85-87.

[5]欧阳小明, 黄世章, 梅开勇, 等.MTLC基因在乳腺癌组织中的表达及其意义[J].中国煤炭工业医学杂志, 2006, 9 (7) :695-696.

表达及意义 篇7

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择2014年6月—2015年7月收治于山西大医院心内科的AMI病人(AMI组)20例,稳定型心绞痛(SA)病人(SA组)20例,对照组20例。

1.2 AMI组入选标准及排除标准

1.2.1 入选标准

胸痛发作时间间隔和入院时间<12 h;年龄<75岁;至少两个肢体导联Ⅱ、Ⅲ、a VF导联ST段抬高>0.1 m V或3个以上胸前导联ST段抬高≥0.2 m V;血浆心肌酶升高;病人有行PCI的准备。所有病人接受低分子肝素4100 IU治疗,使激活全血凝固时间(ACT)值>250 s,入院第1天起给予辛伐他汀40 mg口服。

1.2.2 排除标准

心肌梗死病史;肝脏或肾脏功能衰竭;心源性休克;肿瘤或血液系统疾病;全身炎症反应或风湿免疫系统疾病。

1.3 SA组病人入选标准

有典型临床症状:如胸痛、可放射至左肩背部或活动后出现心绞痛症状;既往有心绞痛病史,近1月无发作。

1.4 对照组病人入选标准

心脏瓣膜病或心律失常的病人。

1.5 方法

1.5.1 标本采集

抽取AMI组、SA组、对照组病人入院后12 h之内及治疗3个月后外周静脉血6 m L,加肝素抗凝,储存于-80℃冰箱中待测。实验室检测G-CSF、VEGF浓度。

1.5.2 超声心动图检查

病人入院后(胸痛症状出现12 h以内)行超声心动图检查,3个月后复查心脏彩超,经检查测量左室射血分数(LVEF)。

1.5.3 临床表现

心力衰竭症状采用纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级评价,心绞痛严重程度采用加拿大心血管协会(CCS)分级评价。

1.6 统计学处理

应用SPSS13.0统计软件进行分析,符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验;各组之间相关性采用Pearson相关性分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组病人一般资料比较

3组病人一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。详见表1。

2.2 各组G-CSF、VEGF水平比较

AMI12 h内血清G-CSF、VEGF水平均明显高于SA组和对照组(P<0.05),而SA组与对照组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AMI组治疗3个月后血清G-CSF、VEGF水平与SA组及对照组比较无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。

pg/m L

2.3 AMI组LVEF比较

AMI组心脏彩超结果:12 h LVEF为(4 0.7±5.7)%,治疗3个月后为(5 7.2±8.5)%,两时间段比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

2.4 心肌梗死后G-CSF、VEGF与LVEF相关性分析(见图1、图2)

血清VEGF水平与左室射血分数(LVEF)呈正相关(r=0.615,P<0.05),血清G-CSF与LVEF成正相关(r=0.492,P<0.05)。

3 讨论

心肌梗死引起局部心肌组织消失,瘢痕组织形成,最终导致心力衰竭。危险因素改变、医学进步、基础治疗及介入干预已改善心血管疾病的预后,但由于冠状动脉疾病引起的心力衰竭预后较差,甚至不及大多数癌症[4,5]。目前治疗收缩性心力衰竭重点主要是平衡神经级联激素、改善心功能和减少心脏突发事件的发生[6],上述方法不能恢复心肌梗死后坏死心肌细胞活性,心肌梗死区心肌细胞坏死后瘢痕组织形成最终导致心力衰竭。近些年新研究的干细胞疗法有望解决这些问题。

干细胞增殖分化过程中持续表达VEGF、G-CSF等细胞因子,但是目前干细胞疗法机制仍不是明确,不可应用于临床。因此,新治疗方法可改善心肌梗死引起的心肌重构及再生能力;细胞因子可能是关键的调节分子,控制和改善一系列心肌梗死后移植细胞的生存和聚集[3]。细胞因子在心肌再生、新血管形成、抗细胞凋亡、抗重塑机制等方面发挥重要作用[7]。

本研究通过检测心肌梗死12 h及治疗3个月后外周静脉血G-CSF、VEGF,结果显示心肌梗死后外周血中G-CSF、VEGF均升高,且与LVEF有一定正相关。表明心肌梗死后G-CSF、VEGF可改善心功能方面。G-CSF因其无严重的不良反应,而被广泛使用的干细胞动员中介[8],已证明能促进骨髓干细胞动员在血液中的生存和改善心肌梗死后心脏功能、减少心肌纤维化[9]。G-CSF有两个干细胞动员机制:①通过下调基质细胞衍生因子-1(SDF-1)浓度和激活CD26蛋白酶分裂SDF-1 N端阻碍其结合CXCR4受体来实现;②可增加血清中其他细胞因子及生长因子浓度[10,11,12]。G-CSF有可能增加动脉粥样硬化风险,但动物实验中已证实其确定的、改善心功能的作用[13]。VEGF是公认的、强有力的、促血管生长因子,心肌梗死导致心肌缺血时,机体VEGF增高促进新生血管形成。Awada等[14]等通过心肌梗死模型证实VEGF-血小板源性生长因子系统有利于改善心功能、血管壁厚度和减少纤维化、炎症。

摘要：目的 观察急性心肌梗死(AMI)病人外周血中粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、血管内皮生长因子(VEGF),探讨其在AMI中的作用及其对心功能的影响。方法 AMI病人(AMI组)20例、稳定型心绞痛(SA)病人(SA组)20例及(对照组)20例。检测SA组、对照组及AMI组各组病人血清G-CSF、VEGF水平。结果AMI组血清G-CSF、VEGF水平均明显高于SA组和对照组(P<0.05);SA组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗3个月后3组血清G-CSF、VEGF水平比较,差异无统计学意义。血清VEGF水平与左室射血分数(LVEF)呈正相关(r=0.615,P<0.05),血清G-CSF与LVEF成正相关(r=0.492,P<0.05)。结论 AMI病人血清G-CSF、VEGF水平升高,且与病人LVEF呈正相关;推测AMI病人机体血清G-CSF、VEGF升高可促进受损心肌修复,改善心功能。

表达及意义 篇8

1 材料与方法

1.1 动物及分组 选择内蒙古农业大学动物中心提供的3~4月龄健康新西兰大白兔24只,体重2~3kg,复合饲料喂养。将24只新西兰大白兔分为两组:左眼制作角膜碱烧伤模型作为实验组,右眼不做手术作为对照组

1.2 动物模型的制备 角膜碱烧伤模型的制作:用5mm圆形滤纸在1N的NaOH溶液中充分浸透,取出滤纸吸取溶液,贴于角膜中央烧灼30秒,移去滤纸后立即用无菌生理盐水冲洗结膜囊,以0.25%氯霉素滴眼。依Hughes分度法为中度碱烧伤模型。

1.3 免疫组化检查 将实验组及对照组术后1天、3天、7天、14天各组分别取6只兔的术眼及空白眼1/3膜(边缘带巩膜组织),浸入10%中性甲醛固定液中固定24小时,酒精梯度脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,免疫组化测定LYVE-1值,阳性结果呈棕黄色背景无色或者淡黄色。

1.4 统计学方法 实验数据用$\overline{x}\pm s$表示,使用SPSS13.0统计软件包,采用方差分析,α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

每个标本做2张切片,每张切片随机取5个不同的高倍视野(×100),计算每个高倍镜视野的平均灰度值(平均灰度值与阳性表达程度成反比关系)。免疫组化阳性结果判定:胞浆内有黄色或棕黄色颗粒即为阳性表达部位。详见表1。

对照组兔的角膜几乎无明显的LYVE-1表达。实验组LYVE-1于术后第3天出现表达,第7天、第14天表达呈递增趋势,实验组内1天、3天、7天比较,LYVE-1值差异有统计学意义(P<0.01),7天和14天比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组3天、7天、14天LYVE-1表达均显著高于相对应的对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。

3 讨论

眼部碱烧伤时,碱性物质进入眼内可与角膜蛋白结合形成碱化变性蛋白[1]。正常角膜中无血管及淋巴管,以维持角膜的透明性和相对免疫赦免状态。但在角膜受到化学伤、热烧伤、感染、手术和佩戴角膜接触镜后,角膜缘的血管就可能长入角膜从而发生血管化,有关角膜新生血管在实验和临床研究均已得到证实,而关于角膜新生淋巴管(corneal lymphangiogenesis,CL)的研究由于一直缺乏特异性淋巴管标记物而未能得到开展。早在半个世纪前,Collin[2]在兔的CNV实验模型中,通过将墨汁注入到血管化角膜中而其最终流入眼局部淋巴结的实验和超微结构分析证明血管化角膜中存在新生淋巴管(corneal lymphangiogenesis,CL)。角膜新生淋巴管可以加速角膜的抗原运输和提呈[3],从而加快免疫应答的进程。LYVE-1是目前特异性最强的淋巴管内皮标志物之一,目前,国内有关大鼠角膜碱烧伤后新生淋巴管标记物VEGFR-3表达的研究仅有个别报道,但未见关于兔角膜碱烧伤后新生淋巴管标记物LYVE-1表达的研究报道。

本研究通过免疫组化染色法,检测淋巴内皮特异性标记物LYVE-1在角膜碱烧伤术后不同时间的表达情况,间接反映术后不同时间角膜新生淋巴管的情况。实验结果显示角膜碱烧伤组于第3天开始出现LYVE-1表达,第7、14天表达加强,说明角膜碱烧伤后于第3天出现新生淋巴管的表达,以后表达加强,揭示新生淋巴管出现于角膜碱烧伤的早期;LYVE-1在第7天和第14天表达无显著性差异,说明从第7天开始新生淋巴管没有再增多,细胞免疫反应进入稳定阶段。

参考文献

[1]刘春民,徐锦堂,赵松滨.角膜碱烧伤后机体巨噬细胞和淋巴细胞功能变化[J].国际眼科杂志,2002,2(4):31-33.

[2]Collin HB.Corneal lymphatics in alloxan vascularized rabbiteyes[J].Invest Ophthalmol Vis Sc,1966,5:1-13.

表达及意义 篇9

关键词： 卵巢肿瘤； 基质金属蛋白酶； 基质金属蛋白酶组织抑制剂

上皮性卵巢在卵巢恶性肿瘤占近90%，该病死亡率极高。 基质金属蛋白酶（MMPs）与侵袭和转移有关[1]。本研究卵巢上皮性肿瘤组织中MMP-2及其抑制剂（Tissue inhibitor of metalloproteinases， TIMP）表达进行检测，结合临床病理资料进行分析。

1 材料与方法

1. 1 资料来源

64例上皮性卵巢癌患者来自我院2010年6月～2012年12月住院患者，均经术后病理确诊，年龄29-76岁。术后诊断按1988年国际妇产科联盟手术病理分期标准（ FIGO）Ⅰ期12例，Ⅱ期7例，Ⅲ期35例，Ⅳ期8例。病理类型：浆液性癌27例、粘液性癌19例、子宫内膜样癌18例。20例正常对照取自子宫良性肿瘤切除的单侧卵巢，对照组为20例卵巢良性肿瘤。

1.2 MMP-2及其抑制剂的检测

所有标本均经4%甲醛固定，石蜡包埋，切片厚度5μm。采用SP法检测，染色步骤按试剂盒说明书进行。阳性表现为细胞浆呈棕黄色，评定标准：阴性（<5%细胞染色），+（6-50%），++>50-75% ，+++>75%。

1.3 統计学方法

采用SPSS13.0软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验或Fisher精确检验。P<0.05认为差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 正常卵巢、良性卵巢肿瘤、卵巢癌中的MMP-2及其抑制剂表达情况

64例上皮性卵巢癌组织中12例MMP-2阴性，52例阳性，阳性率81.2%；20例正常卵巢组织和20例良性上皮性卵巢肿瘤中MMP-2表达率分别为20%和40%。三组间差异具有统计学意义 （χ2=17.88，P=0.001）。

TIMP-2在上皮性卵巢癌中阳性33例（51.6%），正常卵巢组织阳性率为15%，良性卵巢肿瘤组织中阳性率为25%，差异具有统计学意义（χ2=10.42，P=0.005）。

2.2 MMP-2表达与卵巢恶性肿瘤临床病理因素的关系

卵巢上皮性癌组织MMP-2表达在年龄和组织学类型方面比较，差异均无显著性（P>0.05）；在组织学分化程度、FIGO分期及淋巴结转移方面则差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

上皮性卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤，早期多无明显症状，通常诊断出已是晚期肿瘤。MMPs可以消化几乎所有的细胞外基质，肿瘤的侵袭性和恶性程度有关联[2]。MMP-2是一组降解细胞外基质的分泌性蛋白[3]，尤其是对IV型胶原的降价，亦是卵巢癌侵袭转移的关键以及重要的良好的预后指标[4]。控制MMP-2的特异性抑制剂为基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP），TIMP-2与MMP-2的结合是细胞介导激活MMP-2的重要步骤，认为MMP-2及TIMP-2的过表达与卵巢肿瘤的发生发展有关[5]。这为MMP-2靶点的治疗提供了实验依据。

本研究表明MMP-2及其抑制剂在上皮性卵巢癌组织的阳性表达率显著高于正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤组织，与文献报道相似。这一结果提示，MMP-2的表达可能在卵巢肿瘤的发生发展中起着重要的作用，是反映卵巢癌恶性程度和侵袭性的重要指标。

参考文献（references）

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表达及意义 篇10

1 资料与方法

1.1 一般资料收集福建医科大学附属第一医院1993-2007年手术切除原发性胃腺癌标本癌旁5cm以上的正常胃黏膜存档蜡块194例, 其中160例胃腺上皮正常, 34例发现胃腺上皮肠化生。所有患者术前均未经放、化疗。

1.2 试剂兔抗人claudin-23多克隆抗体购自美国Abcam公司;链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶 (SP) 免疫组化染色超敏试剂盒及DAB显色试剂盒, 均购自美国Labvision公司。

1.3 组织芯片制备应用组织芯片仪制备6×5点阵组织芯片, 孔径1.2mm, 孔距2.0mm, 孔深5mm。每张组织芯片的第5排第6个位点 (即最后一个孔) 置入内标记 (本实验用肝脏组织作内标记) 。

1.4 免疫组化采用免疫组化SP法染色, 操作严格按照说明书进行, 用已知阳性对照片作阳性对照, 同时用PBS代替第一抗体作阴性对照。

1.5 结果判定claudin-23的免疫组化染色阳性定位于细胞膜或细胞质, 呈棕黄色线状或弥漫颗粒状和点状。根据胃黏膜上皮细胞胞膜和胞质的claudin-23染色定位, 进行半定量分级:“++++”膜表达, 即未发现镜下可察觉的迷离表达;“+++”膜质表达, 以膜为主伴有少量胞质表达, 即少量迷离表达;“++”为细胞质膜表达, 弥漫性胞质表达伴少量膜表达, 即大量迷离表达;“+”为细胞质表达, 弥漫性胞质表达且未见膜表达, 即完全迷离表达;“-”为未见染色, 即表达丢失。

1.6 统计学分析应用SPSS16.0软件包对检测结果进行统计学分析。分级资料采用χ2检验;计量资料采用非参数秩和检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

多数正常胃腺上皮claudin-23染色定位于腺体近腔缘上皮细胞的细胞膜, 呈棕黄色线状, 相互交织吻合呈网格状结构;部分染色定位于细胞膜和/或细胞质中;少数染色定位于细胞质或未见染色 (图1) ;绝大多数肠化腺上皮claudin-23的染色定位于细胞膜 (图2) 。分析发现, 与正常胃腺上皮相比, 肠化腺上皮claudin-23表达更显著的定位于细胞膜 (P<0.05) 。详见表1。

注:两组相比, P<0.05。

3 讨论

本组实验应用组织芯片免疫组化SP法检测claudin-23蛋白在正常胃腺上皮及肠化的胃腺上皮中的表达, 发现二者结果各异。

claudins分布于皮肤、脑、神经系统和内脏组织中, 可沿上皮细胞侧面和基底细胞质膜分布, 并能与相邻细胞的claudins相互反应形成具有一个黏附结构的紧密连接带, 可维持紧密连接的正常生理功能。本组发现正常胃黏膜腺上皮claudin-23表达主要定位于腺上皮细胞的细胞膜, 呈线状、网格状结构, 相适应于紧密连接密集的部位。

王茵萍等[6]运用电镜动态观察大鼠胃癌前病变模型中胃黏膜上皮紧密连接损伤情况, 发现胃腺上皮肠化时, 上皮细胞间已不能看到典型的连接复合体结构, 总体上呈不连续点状细胞连接, 间隙增多增宽, 张力丝等结构消失。证明胃黏膜上皮肠化发生时可引起紧密连接正常结构破坏。紧密连接损伤可直接体现为多种claudins蛋白表达异常。Cun-ningham等[7]对133例胃癌切除术标本运用免疫组化技术研究, 发现100%肠化胃黏膜样本均可见claudin-4表达, 而仅有15%正常胃黏膜样本中可见claudin-4表达。Park等[8]研究发现, 88.8%肠型胃癌中可见claudin-7表达, 并且clau-din-7在肠化胃黏膜上皮中的表达水平明显高于正常胃黏膜。Satake等[9]发现, 胃黏膜上皮肠化时肠化特异因子CDX2 (果蝇同源异型框转录因子) 可诱导claudin-3、claudin-4的mRNA及蛋白的合成, 显著上调两者表达水平。而且, claudin-3、claudin-4在肠型胃癌中表达增强[10]。本组发现, 胃黏膜上皮肠化时claudin-23胞膜表达水平上调。推测胃黏膜肠化时, CDX2 等调节因素可引起claudin-3、claudin-4、claudin-7及claudin-23 发生定位由胞浆转至胞膜或合成数量增多的表达上调改变, 导致细胞间紧密连接结构发生改变, 导致相邻的细胞间隙增大、连接细胞间信号传导通路失调、细胞间的黏附作用减弱, 其具体有待进一步深入研究。

肠化生与肠型胃癌的发生密切相关, 从慢性胃炎→胃黏膜萎缩→肠化生→异形增生→胃癌, 国内外学者多数认可这一模式。而胃黏膜上皮紧密连接的受损程度与该模式过程同步, 呈现出显著的相关性变化[6]。Katoh等[11]通过微阵列技术研究发现, CLDN23 基因在肠型胃癌中的表达经常下调。研究发现, claudin-23表达参与胃癌的发生、发展, 并影响其预后转归。claudin-23的表达异常可能使上皮渗透屏障破坏, 细胞间黏附力下降, 细胞极性丧失, 继而导致胃黏膜肠化乃至胃癌发生。

总之, claudin-23的表达参与胃黏膜上皮肠化的发生, 并可能在其过程中起重要作用。

摘要：目的:探讨claudin-23表达与胃腺上皮肠化生的关系。方法:采用免疫组化SP法检测claudin-23蛋白在正常胃腺上皮和肠化胃腺上皮中的表达。结果:与正常胃黏膜腺上皮相比, 肠化胃腺上皮claudin-23更多表达于细胞膜。结论:claudin-23表达参与胃腺上皮肠化的发生。