项目实战实验小结

2024-07-26

项目实战实验小结(共11篇)

项目实战实验小结 篇1

实战小结

尊敬的老师、老师:

今天上午专项课上组织了跆拳道实战练习,我参加了打实战,打过实战之后,我感觉收获很多,在这里我做了一个实战小结。

上午专项课的实战后,我仔细地反思了比赛的过程,我认为自己今天的比赛总体上来说不是太理想,但是也有一些优点值得继续保持,首先我列举一些今天的比赛过程中的一些优点,以便继续保持:

1、赛前做了较充分的准备,护具准备得比较齐全,赛前也做了热身运动,拉伸了韧带,这一点是十分重要的,能够保证比赛中发挥良好的水平,避免比赛中受伤;

2、没有运用不熟练的招式,招式较简洁明了 但是仍有许多不足之处有待加强:

1、比赛中进攻欲不强;

2、许多招式不熟练;

3、进攻时衔接不够紧密,进攻不连续;

4、对对方的进攻反应不足;

5、场地感不强;

6、左腿技术生疏;

针对以上的不足之处,我作了如下的应对及改进措施:

1、气势上不能处于下风,否则就是无形中助长对手的进攻欲望。

2、平时训练打实战最忌拖拖拉拉,一定要打快,打出刚学过的动作,确保每次实战都在高强度状态下完成,这样才能有所提高。

3、迅速判断对手是防守反击型打法还是纯进攻打法还是打完就退型。对于防守反击打法的选手,应不断用假动作迷惑对手,或者迅速启动打对手一个措手不及;对于纯进攻打法因先避其锋,消耗对方体力,并摸清对手的动作习惯,当一切已经了如指掌的时候,就是进攻对手的时候;对于第三种类型,一定要追着打!

4、善用身体假动作,如耸肩,送肩;

5、在打比赛的时候要时刻关注自己和对手在场中的位置,灵活地运用场地;

6、综合运用吊、打、靠、绕等技巧。

我会在以后的训练之中注意到以上的几点,并逐渐改进并提高自己。

2012/11/27

大一

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项目实战实验小结 篇2

一、开发背景

市内某城中村的村办企业每年赢利上亿元, 该村村民均持有该企业股份, 已连续多年在年底向村民发放分红款。经了解, 该村将于2013年1-2月向村民发放年底分红款4000多万元, 各家银行都在积极争取中。

二、市场分析及开发过程

(一) 不利因素, 邮局优势。

该村的对公账户开在某大银行, 且村委会与该银行合作多年, 已初步确定这笔款项仍由此银行发放。邮局有成功代发社保养老金、企事业单位工资款的经验, 能确保款项及时、准确发放到位, 并得到了社保局和其他企事业单位领导和相关人员的好评, 实现了以客户带来客户。邮政网点多、分布广、营业时间长、业务品种齐全、网点离村民近, 可提供专车接送等贴心服务。该营业网点职工一直不间断地在该村附近宣传邮局储蓄政策, “到邮局办理存款”的理念已深入百姓心中。

(二) 成立公关小组, 与村委会接触。

局领导高度重视, 成立了以局长为首的公关小组, 多方入手寻找可用的社会关系, 与村委会成员多次接触, 详细介绍邮局代发社保养老金、企事业单位工资款的成功案例, 表明邮局完全有实力、可成功批量代发此款项。公关小组多次召开分析会, 最终确定方案:一方面利用村里的有线电视平台宣传;一方面由该网点职工挨家挨户走访村民, 宣传储蓄政策, 进行策反。

三、营销策略、成效

(一) 该营业网点某营业员的母亲是该村村民, 她仔细分

析每家经济情况, 利用晚上时间, 带领网点所主任, 拜访大客户和在村里有影响力、号召力的客户, 向他们宣传邮局储蓄政策, 动员他们将分红款从某大银行取出, 存入邮局。

(二) 该营业网点营业员携带春联、台历、挂历、年画等小

礼品, 给村民送去节前祝福, 并细心讲解邮局现有的储蓄业务种类和储蓄政策, 以及到邮局办理存款的便利性, 如可顺便交话费、电费、煤气费、办理车险等, 吸引客户来邮局办理存款业务。

(三) 该网点所主任、理财经理认真查看局所大客户档案,

筛选出该村村民信息, 逐个拨打电话问候, 送去节前祝福, 做好客户维护工作, 并针对客户实际情况, 深入挖掘客户隐形需求, 宣传邮局现有的储蓄政策, 鼓励老客户继续到邮局办理存款业务。

(四) 经过局所全体人员的共同努力, 邮局取得了该村年底分红款项目开发的成功。

截止3月底, 共成功揽收该村年底分红款4000多万元。以项目拉动实现余额跨越式发展, 为完成首季开门红余额计划和全年收入计划打下了夯实的基础。

四、营销启示

(一) 用户至上, 用心服务。

要树立“以客户为中心”的经营理念, 转变观念, 要求全局职工、各营业网点认识到:服务工作无小事、服务工作关系到核心竞争力的提高和市场品牌形象, 使职工牢固树立服务第一、客户至上的买方市场观念, 并成为共识, 从客户角度换位思考, 奏响“服务主旋律”, 在办理各种业务时做到准确、快速、热情、周到, 真正做到服务出效益, 让客户切实感受到邮政金融网点是身边的银行, 是可信赖的银行。想客户所想, 急客户所急, 为客户提供贴心、细致的服务, 培养邮政的忠实客户。

(二) 规范服务行为, 提升网点职工服务水平。

营业网点是服务窗口, 应突出服务质量标准化, 保持网点营业厅窗明几净, 服务设施摆放有序, 所有柜员着装统一、规范, 仪容仪表符合上柜要求, 接待客户必须使用文明用语。提供个性化服务, 特色服务和限时服务、承诺服务, 达到牢固把握市场主要客户群的目的, 增强客户吸引力。

(三) 学习业务知识, 提高服务技能。

采取多层次、宽领域、多渠道、全方位的培训方式, 提高职工的整体素质, 以适应激烈竞争的需要, 将培训面扩展到每一个不同岗位、层次的员工;通过多种形式的培训和学习, 夯实业务基础, 提高办理业务的速度与效率, 使职工自身素质得到提高, 增强工作责任心, 从而对工作充满激情, 自觉提升对客户的服务水平。

(四) 重点维护, 注重收集信息。

充分利用节假日, 采取高层走访和局所主任、客户经理挂户维护相结合等方式, 全面融洽客户关系, 重点培育一大批贴心客户和潜力客户, 积极发挥客户经理的营销职能作用, 联系大户, 并做好优质客户的日常维护工作, 培育优质客户对邮政的认同感, 全面开展公关, 深入挖掘市场潜力, 提高营销素质, 拓展客户, 抢占市场。

(五) 及时跟进, 突出亮点。

抓住机遇, 及时跟进, 突出邮局优势。利用邮局的政策优势和贴心服务, 吸引和感动村民, 最终该村村民均被邮政人员的服务态度和执著精神所感动, 积累了经验, 为以后的工作打开新局面。

邮局始终坚持“用户至上”的服务理念, 通过业务培训、技术练功等方式提高职工服务水平和服务技能, 积极做好重点客户的维护和深度开发工作, 突出邮局优势广泛宣传, 积极策反, 项目开发取得了巨大成功。

参考文献

[1]吴辉英.邮政金融客户关系管理营销人员信息系统开发研究[D].吉林大学, 2006

[2]陈晶晶.“龙头”舞动风劲起——安徽邮政总部营销项目开发纪实.中国邮政报, 2010-2-2

房产投资实战小结 篇3

购房出租惹闲气

过去,我也觉得房地产很有投资价值,可自己买过两套房后才知道,除非你自己是职业炒家或者大老板,不然,房子这个东西,还是要以实用为主,不能贪求投资房子可赚大钱,不亏就不错了;年轻的朋友更不要老是记挂着一些美好的置业梦想,在某个山明水秀的地方投资什么产权别墅。其实,买房子不要买在郊区,更不要买在旁边有大片未开发空地的地方,那样不但没有升值潜力,而且租不出去,住也不方便。我现在的一处房产就在广东番禺,卖出去要亏五六万元,也租不到一个好价格,还要不时开着车跑去讨债,浪费汽油费不说,还生一肚子闲气。

购房要用银行按揭

项目管理实战学习心得1 篇4

施工项目管理是施工企业对施工项目进行有效的掌握控制。施工项目管理者对施工项目全权负责,是组织协调的工作。

一、施工项目的组织机构管理

施工项目组织机构管理与企业组织机构管理是局部与整体关系。组织机构设置的目的是为了进一步充分发挥项目管理功能,提高项目整体管理水平,以达到项目管理的最终目标。一个好的组织机构,可以有效地完成施工项目管理目标,有效地应付各种环境的变化,形成组织力,使组织系统正常运转,产生集体思想和集体意识,完成项目部管理任务。

项目经理应具备一定的基本素质:领导才能、政治素质、理论知识水平、实践经验、时间观念。

二、施工项目质量管理

1、建立质量保证体系,施工企业依据质量保证模式,建立自己的质量保证系统,编写质量手册,制定质量方针、技师目标,使之更具有指令性、系统性、协调性、可操作性、可检查性。

2、人、材、机的控制

3、控制施工环境与施工工序

在项目施工中,影响工程质量的环境因素很多。因此,根据工程项目的特点和具体条件,应对影响质量的环境因素,采取有效的措施严加控制,尤其是施工现场,应建立文明施工和文明生产的环境,保持材料工件堆放有序,道路畅通,为确保质量和安全创造良好的条件。项目管理者联盟文章,深入探讨。

为了把工程质量从事后检查转向事前控制,达到“以预防为主”的目的,必须加强对施工工序的质量控制。工序质量的控制通过对工序部分检验的数据进行统计、分析,来判断整个工序的质量是否稳定、正常,其步骤为:实测—分析—判断。

为了更有效地做好事前质量控制:

(1)是要严格遵守工艺流程,是确保工序质量的前提,任何操作人员都应严格执行。

(2)是控制工序活动条件的质量,主要活动条件有施工操、材料、施工机械、施工方法和施工环境。只有将它们有效地控制起来,使它们处于被控状态,才能保证每道工序质量正常、稳定。

(3)是及时检查工序活动效果。加强质量检验工作,对质量状况进行综合统计与分析,及时掌握质量动态,自始至终使工序活动效果的质量满足规范和设计要求。

(4)是设置质量控制点,在一定时期内、一定条件下进行强化管理,使工序始终处于良好的受控状态。

三、施工项目的成本管理

施工项目的成本形式分为预算成本、计划成本、实际成本。

随着施工项目管理的推广和普及,已经正式为施工项目管理向深层次发展的主要标志和不可缺少的内容。因为它能够体现施工项目管理本质特征,能够反映施工项目管理的核心内容,能够提供衡量施工项目管理效绩的客观尺码。

施工项目成本管理是施工项目管理系统中的一个子系统,具体内容包括:成本预测、成本计划、成本控制、成本核算、成本分析、成本考核。

制定施工项目成本管理的措施:施工项目成本的控制,不仅是专业成本人员的责任,也是项目管理人员,特别是项目部经理的责任。要按照自己的业务分工负责。围绕生产经营这个中心开展工作。要建立以项目经理为核心的项目成本控制体系,实行项目经理负责制,就是要求项目经理对施工进度、质量、成本、安全和现场管理标准化全面负责,特别要把成本的控制放在首位。

建立项目成本管理责任制:项目管理人员的成本责任,不同于工作责任,工作责任完成不等于成本责任完成。如:单方强调质量,忽视了成本,单方做到供货及时,但忽视昂贵的价格等。因此在完成工作责任的同时,还应考虑成本责任的实施,进一步明确成本管理责任,使每个管理者都有成本管理意识,做到精打细算。

对施工队实行分包成本控制:项目部与施工队之间建立特定劳务合同关系,项目部有权对施工队的进度、质量、安全和现场管理标准进行监督管理,同时按合同支付劳务费用。施工队成本的控制,由施工队自身管理,项目部不应该过多干预。

四、施工项目安全生产与文明施工的管理

所谓施工项目安全管理,就是施工项目在施工过程中,组织安全生产的全部活动,通过对生产因素的具体控制,使生产因素不安全的行为和状态减少或消除,不引发事故,从而保证施工项目的正常运行。

1、坚持安全管理原则

即坚持安全与生产同步,管生产必须抓安全,安全寓于生产之中,并对生产发挥促进与保证作用。坚持“四全”动态管理,生产活动中对安全工作必须是全员、全过程、全方位、全天候的动态管理。

2、坚持控制人的不安全行为与物的不安全状态

分析事故的成因,人、物和环境因素的作用是事故的根本原因,从对人和物的管理方面,去分析事故,人的不安全行为和物的不安全状态,都是酿成事故的直接原因。

3、制定安全管理措施加强施工项目的安全管理,制定确实可行的安全管理制度和措施十分重要。它是管理的方法和手段,对生产各因素状态的约束和控制,根据施工生产特点,安全管理也具有明显的行业特色。要落实安全责任,实施责任管理,加强安全教育,例行安全检查。

做好文明施工,首先要健全管理组织机构和文明施工管理制度,做到按专业、岗位、区域等包干负责。在施工项目中对现场各个方面专业的管理,开展文明施工竞赛活动,有布置、有检查、有考评、有奖惩,评比结果公布于众。

总之,施工项目的管理是全方位的,要求项目经营者对施工项目的质量、安全、进度、成本、文明施工等,都要纳入正规化、标准化管理,这样才能使施工项目各项工作有条不紊、顺利地进行。

项目实战实验小结 篇5

不同服务项目有不同的制作与操作流程,因此客户合作流程亦不同

一、海迎影视合作流程九步曲:

①意向沟通

电话沟通 — 面谈 — 确定拍摄方案与预算 ②签约合作

签定合同,支付预付款,项目启动

③创意脚本

甲方提供资料—创意脚本—解说词定稿—双方确定脚本 ④前期拍摄

召开拍摄前会议召开、按进度表进行拍摄 ⑤后期制作

开始后期制作,剪辑、配音、配乐、特效包装

⑥提交成片

初稿提交—修改—客户签字确认成片—支付尾款—后续服务

二、整合传播服务流程

品牌传播的最终目的就是要发挥创意的力量,利用各种有效发声点在市场上形成统一的、多方位的品牌声浪,有声浪就有话语权。海迎立足企业品牌核心价值,在品牌识别的整体框架下,为客户量身定制高效、精准的整合营销传播策略及执行。我们通过“智慧种子”的服务,调配各团队专业人员,为客户提供传播策略制定、媒介执行、平面与视听全方位创意解决方案、公关活动策划及执行、网络营销、传播效果跟踪和优化、长期传播顾问等“一站式服务”服务模式。

与海迎的合作方式,可以是:

长期传播顾问(3-5年战略顾问式合作)

年度合作(提供年度媒体投放策略与执行、媒体传播效果跟踪优化、平面与视听全方位创意解决方案)季度合作(提供阶段性媒体投放策略与执行、媒体传播效果跟踪优化、平面与视听全方位创意解决方案)专项活动策划与传播执行(地产活动、商务会议、公共关系等)或其他形式的可合作方式

整合传播合作流程:

沟通洽谈—确定初步合作意向,客户填写需求信息表

策略方向—乙方给出初步的合作建议(项目周期、费用预算、付款方式、项目成果、团队构成进度安排等)签约合作—签订合同 提交预付

深入调研— 企业内部深入调研、行业市场信息分析 提交投放策略与方案 方案提报—甲方审核,乙方修改方案 方案确定—双方确定投放策略与方案

媒体执行—媒体执行 效果监测 定期提交甲方审核 项目结束—建立良好合作关系,后续服务

三、完整的影视制作流程:

企业选宣传片和公司宣传片拍摄流程主要分为以下步骤:

1:制作组与客户初次沟通,了解需求。从客户确定创意一直到实际投入拍摄之前,都属于这一阶段,在这段时期,企业宣传片和公司宣传片的具体制作方案将逐渐成形,具体的制作准备将逐步完成。

2:与客户亲密接触,详尽了解企业和产品(或城市特点)。在这个过程中必须了解,公司宣传片的用途,拍摄场景,是否需要请模特,拍摄时间,还有片长时间,还有是何种语言版本。

3:制片组和创意人员做出初期创意脚本方案和报价。

客户就企业宣传片和公司宣传片的长度、规格、交片日期、任务等与我们达成一致,必要时形成书面说明,帮助理解该企业宣传片和公司宣传片的创意背景、目标对象、创意原点及表现风格等等。同时公司会在限定的时间里根据以上确定信息呈递报价和制作日程表。

创意中会体现具体拍摄过程以及拍摄每一个环节的内容还有时间。通过文案脚本可以让客人直观的了解到企业宣传片和公司宣传片成型后的大概框架内容。并根据以上内容向客户提供报价单。

4:前期沟通,达成合作意向,签定合作合同,确定制作时间表。

5:前期采访,收集素材,出企业宣传片或者公司宣传片初稿,并送交客户审阅。根据客户要求及专题片内容,邀请知名作家或本公司编导进行前期采访,同时收集相关素材,出文案初稿,并送交客户审阅。

6:客户初稿审阅通过。客户从内容上对企业宣传片或者公司宣传片文稿审阅,提出修改意见,直至文案通过。

7:摄制组前期现场勘景。文案通过后,本公司成立小组,并由导演及摄像进行前期现场勘景。摄制组含:导演,制片,摄像师,灯光师,化妆师,场工,后期剪辑师,音响师,配音演员。

8:出分镜头拍摄脚本及专题片解说词,并送交客户审定。勘景结束后,由导演根据现场实际情况,在初审文案的基础上,进行艺术加工,制定出分镜头脚本及专题片解说词,并送交客户审阅。

9:客户审阅分镜头拍摄脚本及内容,并签字确定通过。客户从画面上对脚本审阅,提出修改意见,直至脚本通过。

10:前期拍摄。

根据摄企业宣传片或者公司宣传片合同,确定的拍摄设备进行前期拍摄。提供设备:摄像机:sony摄像机,高清设备,胶片灯光:专业新闻灯,碘钨灯,聚光灯,灯光组(含发电机)辅助设备:广角镜,轨道,摇臂,专用航拍直升机或飞艇。

11:后期剪辑。由后期剪辑师按照分镜头脚本对拍摄内容进行后期制作,一般包含四个阶段。初剪:根据内容整理拍摄素材

精剪:在初剪的基础上,进行精致的特技制作。

配音:邀请著名主持人对专题片进行配音。

混音:精心挑选适合专题片主题的音乐,同解说词配音及精剪片进行最后合成。

12:企业宣传片或者公司宣传片,客户初审。在规定日期内,交出样片,客户进行初审,对画面提出修改意见。

13:修改。根据客户意见,导演进行最后修改。

项目实战实验小结 篇6

(如欲公开以下内容,或者需对大纲作专业化调整,请与本人联系确认)

【课程关键词】 项目管理新发展,ERP项目管理流程,沙盘模拟 【课程时长】 2天(估计每天6.5小时)

【课程对象】项目总监,项目经理、其他各级经理和主管 【课程形式】

演讲,问题讨论和个案分析。

问题讨论和个案分析将与授课紧密结合。

授课现场需准备投影仪,电源拖板,学员用胶贴纸,铅笔和练习纸,如再配有白板和白板水笔更好

采用了电影剪辑和情境片断等多媒体培训技术,力求既紧紧扣住培训要点,又营造活跃,轻松和积极的培训氛围。

采取小组互动式教学,学员人数不可超过35人。

第一单元 项目启动实战模拟 ERP项目整体管理 项目需求分析技巧 对非功能性需求的把握 项目可行性分析 成本效益分析 SWOT分析/练习波士顿矩阵

项目经理的挑选和项目章程 项目经理的影响力

从技术专才转向项目管理的路径

项目管理正面范例性案例:项目背景分析与项目章程范例分析

模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之一(项目粗估与章程)项目干系人分析 干系人分类

重要干系人管理技巧

项目管理正面范例性案例:干系人分析表 项目团队组建

公司组织结构类型对项目管理的影响分析

项目管理正面范例性案例:某著名跨国公司矩阵结构下的项目管理组织结构和考核体系分析 项目管理组织结构

项目管理正面范例性案例:项目管理组织图分析 关键人员获得演练

项目管理正面范例性案例:某著名跨国公司项目团队建设技巧分析

项目管理反面对比性案例研讨:某跨国公司典型项目启动阶段的主要问题研讨 模拟实战:IT与ERP目管理模拟实战指引之一(项目粗估与章程)

模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之二(干系人分析,组织结构图)

第二单元 项目计划模拟实战 项目计划的重要作用 基线概念

项目计划的制定技巧 关系人承诺

项目计划中的团队合作技巧 项目范围计划

项目管理正面范例性案例:项目范围说明书范例分析与练习WBS的特点

制作WBS的方法和技巧

项目管理正面范例性案例:WBS范例与练习项目人力资源计划

跨部门项目团队的特点和管理技巧 跨文化项目团队的特点和管理技巧

项目管理正面范例性案例:人的性格分类和评估演练 项目管理正面范例性案例:成本账目矩阵范例

项目管理正面范例性案例:项目责任分配矩阵范例和练习项目风险管理计划 风险识别方法 风险评估方法 风险应对方法

ERP项目实施的风险特殊性

项目管理正面范例性案例:IT与ERP项目风险管理计划范例分析 项目进度计划 活动逻辑关系 网络图

活动估时技巧 关键路径 浮动时间

如何利用关键路径法合理掌握进度 甘特图

项目管理正面范例性案例:项目网络图范例分析 项目管理正面范例性案例:项目进度计划范例分析 项目成本计划

人力资源计划和非人力资源计划 估算法

成本基准计划 现值方法

管理及应急储备

项目管理正面范例性案例:资源计划范例

项目管理正面范例性案例:项目费用预算案范例

项目质量计划

质量计划编制:质量计划的内容 现代质量管理趋势 质量准则及策略制定

质量保证:高层管理者、项目经理和项目团队成员的质量责任 项目数据收集

项目管理正面范例性案例:项目质量计划范例分析 项目沟通管理计划

项目沟通管理的主要问题:沟通模式、沟通类型、沟通渠道 项目管理信息系统(PMIS)沟通障碍

管理项目沟通要点:主动倾听、有效会议的要点 沟通计划编制

分析主要项目干系人的信息需求(5W1H)项目管理正面范例性案例:IT与ERP项目沟通管理计划范例分析 项目采购计划

采购计划编制:自制与外购分析、合同类型及风险 询价计划编制:采购文件的组成 询价 供方选择

项目管理正面范例性案例:项目采购管理计划范例分析

模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之三(人力资源和职责分配)模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之四(风险管理)

模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之五(WBS和网络图)

模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之六(预算表)相应功能体验: 项目与任务 甘特图向导 资源分配视图等 任务工作表 任务信息界面

比较基准

关键路径自动计算

第三单元 项目实施模拟实战 项目启动会议组织技巧

项目管理正面范例性案例:会议纪要范例 项目实施阶段的沟通技巧

项目管理正面范例性案例:项目信息报告版范例、进度报告范例、费用报告范例、人员使用报告范例 非正式沟通分析

项目实施阶段的团队建设技巧 项目实施阶段的冲突处理技巧 项目实施阶段的项目合同管理 合同种类分析和使用技巧 挣值分析技巧

项目管理正面范例性案例:项目挣值分析范例详细分析和演练

模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之七(挣值分析报告)相应功能体验: 项目中任务的限制

对任务和资源的排序和筛选 项目跟踪原则 比较基准

纪录项目实际进展

第四单元 项目控制模拟实战 变更控制流程

项目管理正面范例性案例:变更请求文档范例

项目管理正面范例性案例:因果图和帕雷托图范例演练 合同控制技巧

变更控制委员会CCB机制分析 零碎变更授权机制 零碎变更累计机制 零碎变更升级机制

整体控制分析

项目管理正面范例性案例:赶工范例分析

项目管理正面范例性案例:某著名跨国公司变更控制流程和问题累积升级机制分析

模拟实战:IT与ERP项目管理模拟实战指引之八(总进度提前20% 的综合解决方案)相应功能体验:

定位并解决项目的资源冲突 资源分配视图-资源调配延迟 跟踪项目的实际进程 项目进度报表

第五单元 项目收尾模拟实战 项目移交

项目管理正面范例性案例:移交文档范例分析 合同收尾 行政收尾

项目管理正面范例性案例:项目收尾感谢信范例分析 项目管理综合竞争体验

项目实战实验小结 篇7

【课程背景】

房地产内训:随着房地产行业之间的竞争日趋激烈,房地产开发商越来越重视房地产市场定位与目标客户的产品需求分析。如何更有效的做好房地产市场定位产品精准营销策略,中国房地产培训网特邀原中国房产信息集团华南区域执行总经理肖先生推出《房地产客户定位与客户营销实战培训》高级研修班,与全国地产界精英共同探讨房地产客户定位与产品规划定位实操技术!

【讲师介绍】

肖老师,中房商学院房地产培训网高级顾问,原中国房产信息集团咨询中心副总经理、华南区域总经理,中国房地产培训网特约培训师。肖先生于2000-2003年中信华南(集团)建筑设计院负责规划与建筑设计工作,拥有丰富的房地产设计经验。2004-2007年担任合富辉煌集团发展策划部总监,期间参与创建部门并实现成功运营,拥有服务于大量品牌地产商的成功经验。2007年后作为股东之一创建广州泰盈房地产顾问有限公司及华房联策(北京)投资咨询有限公司,均出任总经理兼任广州泰盈置业集团副总裁。

肖先生亲自操刀的地产项目逾百余个,分布在四十余个城市,如万科集团:武汉红房子旧城改造项目、贵阳金阳十二滩项目等;金地集团:广州金地荔湖城;中房集团:广州天马河国际公馆;华润集团:沈阳华润万象城、沈阳华润橡树湾;阳光集团:福建龙岩项目、西安阳光上林城;中惠集团:海口蓝天白云项目;华侨城集团:昆明项目;泰盈集团:西安奥林匹克花园、沈阳九如溪谷、十里锦城、常州八千里等项目;西安高科房产:西安夏日景色、八号府邸、高科尚都、绿水东城等项目;保集集团:上海奉贤项目、南昌保集半岛、天津国际游艇城等。具有很强的一线品牌企业丰富实战操盘经验。

【课程背景】

一、新政下房地产项目定位宏观经济篇

1、透视2013年房地产宏观经济

2、利用房地产宏观研究怎么指导项目开发

二、标杆实例教学:房地产客户调研与客户分析

1、怎么进行客户需求的深入了解

2、客户需求的定性与定量分析

3、客户分析为客户定位的铺垫与引导

三、产品定位知识体系与方法论

1、产品定位涉及的知识体系与核心知识点

2、产品定位的实践方法论

3、产品定位的常见误区与避免方法

四、标杆实例教学:客户定位—产品定位—设计语言的贯通

1、客户定位与产品定位衔接的方法与实例

2、产品定位转化成设计语言的范式与实例

3、客户定位—产品定位—设计语言的贯通实例

五、标杆实例教学:客户定位与客户策略

1、客户定位的系统性案例演示

2、精准的客户定位对全策划乃至项目开发全案的价值演示

3、如何识别客户定位是否准确有效

六、客户定位的知识体系与研究方法论

1、客户定位涉及的知识体系

2、客户分析与客户定位的研究方法论

3、客户分析与客户定位的常见误区与避免方法

七、房地产策划方法论及客户定位、产品定位的核心价值

1、房地产策划的实质与策划方法论

2、房地产策划的核心价值解构

3、房地产供求分析主线中客户定位与产品定位的角色

4、客户定位与产品定位在策划体系中的价值

物理实验小结 篇8

从大一的下学期开始,我们的物理实验课上到现在已经两个学期了,记得在高中的物理课堂上,我们也经常做实验,但是记得我们都是看着老师做,然后我们在下面看着,结果正常都是老师说,而现在我们一个人或者两个人一台仪器,我们可以根据实验的要求来自己做实验,得到实验的结果,在做实验的过程中,发现并解决问题。这样也增强了我们的动手能力与发现问题的能力,大学里注重的是自主学习,所以在每次实验之前我们都会自己先对实验进行预习,大致了解实验目的、实验原理、实验仪器以及实验步骤等,然后再去实验室做。

两个学期下来,我们做了很多的实验,但是让我记忆最深的要属全息照相这个实验了,下面,就让我说说这个实验吧,既是一个小结,也是对我学习实验的一个回顾与思考。

其实全息照相最让我感兴趣的是它能再现十分逼真的立体像,与我们观察的实物是一样的,立体感很强,如果你把全息片分成若干的小块它的每一块都可以再现元物体的完整的像,神奇的吧。而且它还易于复制,并且还保持和原来的像一样。全息照相的时候是要把教室里的灯全部关闭的,整个教室这个时候很安静的,对了。我们的试验台好像是高阻尼全息实验台,也就很好的防止了不必要的震荡对实验的影响了,一个人一个实验台,我当时旁边的试验台没有人,所以,我就一个人调了两个试验台,嘿嘿,还好,时间都来得及的,我们在老师的安排下统一而有序的做着实验,实验时,我们要保证光路的光程差要尽量为零。因为只有在这种情况下,物光与参考光才能最相干。在摆放好仪器后,我们需要固定好仪器。这个实验是所有同学同时进行,在老师发出曝光指令后我们就会一起按下按钮。曝光结束后,接下来的就是显影和定影了。在显影液里泡上几十秒,然后放入清水中。实验的时间由老师决定的,我们大家都很配合老师的,因为我们都想看看自己做出来的到底会是什么样子的,等到底片上的水汽干了之后,就可以通过原先的光路查看自己的全息照相了,老师第一个看的我的,然后就给了个92分,哎妈呀~老高兴了~嘿嘿。

两个学期的实验也就这样的做结束了,对我来说,我感觉自己确确实实学到了一些东西,但是,我想,我要说的这些话可能确实很普通,但确确实实是我想说的。

第一,养成课前预习的好习惯。实验时,我们只有两个小时的实验时间,为了在规定的时间内快速高效率地完成实验,达到良好的实验效果,需要认真地预习,才能在课上更好的学习,收获的更多、掌握的更多。说道这里,我想,不能不提我们的预习了,很大一部分的同学都是仅仅把课本上的句子抄了下来,具体说的什么其实一点也没有在意,只有弄懂了实验的目的,基本原理,了解实验所采用的方法的关键与成功之处;我们才能把把实验中所有的地方都弄透彻,才能达到实验应有的效果。

第二,上课时认真听老师做预习指导和讲解,不知道老师有没有观察过,上课你在讲的时候,你注意到有同学在记你说的注意点吗?可能老师你也会说,实验很简单,没什么必要吧,但是我想说,有时候还就真的要记下来的,做实验的时候老师正常不在,你看不到,这个时候很多同学就会去问其他同学,刚老师讲的什么啊?怎么做的啊?我忘记了什么的。

第三,实验培养我们的动手能力。“实验就是为了让你动手做,去探索一些你未知的或是你尚不是深刻理解的东西。”现在,大学生的动手能力越来越被人们重视,大学物理实验正好为我们提供了这一平台。每个实验都亲自去做,不放弃每次锻炼的机会。可是还是有一部分同学喜欢抄别人的实验数据,我个人觉得这样就很没有意思~干脆,就别做实验了,直接填好数据你回去得了。

大学物理实验课让我收获颇丰,同时也让我发现了自身的不足。在今后的学习和工作中不断提高、完善自己通过实验所学到的东西,做到真正的学以致用。

测试实验报告小结 篇9

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)

2列(相位-度)

3列(频率-Hz):A= [5 6 3;10 20 4;] A = >>

第二次 > swa1 请输入合成信号的个数:Nn= 3

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)

2列(相位-度)

3列(频率-Hz):A= [6 2 1;10 4 3;50 20 6;] A = 50

第三次

请输入合成信号的个数:Nn= 4

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)

2列(相位-度)

3列(频率-Hz):A= [10 6 1;9 5 3;20 14 6;13 10 8;] A = >>

(二)方波

1.>> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 3

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 1

Type =

>> >> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 4

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 1

Type =

>> >> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 5

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 1

Type =

>>

三角波 1 >> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 3

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 2

Type =

>> n =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 2

Type =

> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 6

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 2

Type =

>>

锯齿波 1>> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 3

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 3

Type =

>> >> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 6

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 3

Type =

>> >> swa2 请输入合成信号的谐波最高次数:Nn= 9

Nn =

请输入合成信号的类型(1-方波 2-三角波 3-锯齿波)Nn= 3

Type =

>>

(三)>> DFA 请输入周期系数Tm= 1

Tm =

是否加窗cflag=(0-不加窗 1-加窗)0

cflag =

0

请输入合成信号的个数:Nn= 2

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)

2列(相位-度)

3列(频率-Hz):A= [6 5 2;8 6 3;] A = >>

>> DFA 请输入周期系数Tm= 1

Tm =

是否加窗cflag=(0-不加窗 1-加窗)1

cflag =

请输入合成信号的个数:Nn= 2

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)

2列(相位-度)

3列(频率-Hz):A= [6 5 2;8 6 3;] A = >>>> dfa 请输入周期系数Tm= 1

Tm =

是否加窗cflag=(0-不加窗 1-加窗)0

cflag =

0

请输入合成信号的个数:Nn= 3

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)3列(频率-Hz):A= [10 20 5;30 40 9;20 30 9;] A =

>>

2列(相位-度)

加 >> dfa 请输入周期系数Tm= 1

Tm =

是否加窗cflag=(0-不加窗 1-加窗)1

cflag =

请输入合成信号的个数:Nn= 3

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)

2列(相位-度)

3列(频率-Hz):A= [10 20 5;30 40 9;20 30 9;] A =

>>>> dfa 请输入周期系数Tm= 1

Tm =

是否加窗cflag=(0-不加窗 1-加窗)0

cflag =

0

请输入合成信号的个数:Nn= 4

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)

2列(相位-度)

3列(频率-Hz):A= [6 5 2;9 6 3;10 5 4;20 10 9;] A = >>

加 >> dfa 请输入周期系数Tm=

Tm =

是否加窗cflag=(0-不加窗 1-加窗)1

cflag =

请输入合成信号的个数:Nn= 4

Nn =

请输入对应信号的幅值,相位,频率矩阵A(Nn*3),其中1列(幅值)3列(频率-Hz):A= [6 5 2;9 6 3;10 5 4;20 10 9;] A = >>

实验室小结 篇10

本学期,在学校各级领导及全体教师的关心、配合下,学校实验室工作有效的保障了学校理科教学工作的开展。现将实验室工作总结如下:

(一)执行有效的实验操作制度、加强学习,强化过程管理

用好管好实验室,是实验教学的前题,充分发挥实验室的作用,进一步执行有效的实验操作制度,确保了实验教学的开展。

1、加强组织管理、严格执行有效的实验操作制度、保证实验教学:根据实验室工作情况,严格执行实验室管理的各项制度,并将其落实到工作管理中,实验教师,规范操作实验仪器,做到分类存放,贴有标签,注明名称编号,记好进出帐,同时做好实验室仪器标本的防腐、防潮、防尘,防蛀等工作。确保实验教学的正常进行。

2、保质保量完成常规实验工作。演示实验和学生分组实验的开出率均均超过100%。完成了各年级实验考查。其中实验老师精心准备、在科组老师的的大力协助下,促使学生积极参与,动手和实践能力增强,学校实验教学提供了详实的实验数据。

3、积极响应区电教中心关于做好实验教学论文的上送工作,其中关于实验室实验室使用的教学论文送了两篇。

4、加强教师培训学习。参加了区组办的教育装备中心发起教育部教学仪器研究所举办的 “小学教学仪器配备标准”培训班学习,学习了小学教学仪器配备的相关知识,对于今后的实验室仪器配置和管理工作起到了一定的指导作用。

5、实验室做好实验室财产清点及入册工作,做好与实验室管理相关的表格登记、整理工作,妥善保管相关的档案资料。搜集与学科教学相关的教学资源,整理、扩充教学资源库。

6、按照区电教中心的要求在科学老师及实验员配合下更新了按2010新部颁标准录入的仪器数据和非部颁仪器数据工作。

7、科学组在人手紧张的情况下经常利用计算机网络对与教学相关的资料进行收集和整理,不断扩充本校学科资源网的资源。将下载和整理好的2G容量的教学资源上传到电脑教育资源库,为我校的科学学科教学资源做出贡献。

(二)、规范管理、强化安全意识

1、实验教师加强对实验室教学仪器和设备的维护管理,指导学生正确使用实验仪器设备,定期检查实验室使用电线路等,对实验室的各种设备,凡是有损坏的,及时维修,保证实验教学正常开展。

2、教师做好实验室物品管理,努力做到仪器存放系列化,保管科学化。根据学期初认真制定的实验教学计划,在学期中及时督促上实验课的老师认真填写各种实验表册。做到规范管理、科学管理。

3、加强安全意识、防范措施到位:早到定期检查实验室的各类安全设施,做到发现问题,及时解决。同时要求实验教师,每天上完实验课,要力行检查,水、电、门窗是否关闭,实验室整洁工作是否做好,防患于未然。认真做好化学实验废水、废物的回收和处理工作。有害废水、废物经无害处理后才排放或丢弃。平时坚持小心做好三防与防爆、防中毒、防潮、防意外事故和用电安全工作。确保了教学工作的顺利。

(三)、其它方面:

1、实验教师积极参与学校组织的月考考试工作。同时,为学校开展校本本课程讲座和各类学科竞赛、辅导工作提供场室安排,积极参与学校教务处安排的各项工作。

2、完成春季学校教学仪器的采购工作,为下学期的实验教学做好准备。

3、积极配合学校,做好对外交流及接待工作。如本学期加强与其它学校与相关公司的沟通和交流,曾接待青云中学、一中实验中学的实验教师到学校交流学校。

(四)、存在的问题

本学期存在问题,主要表现在以下几个方面:

1、实验教研还有待加强,让教研为教学服务的意识不足,实验教师培训中的自我培训意识有待加强。

3、探究实验室的利用率还有待提升和加强。

实验室生活小结 篇11

1跑page胶的时候,小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些,且分离效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分离。

2.提取质粒的时候,最后一步的酒精挥发很关键,基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间,最好是空调吹热风,或是37度温箱放长一点的时间,我试过室温过夜,酶切很好。3.做WESTERN BLOT 的时候,大家往往会摸索一抗、二抗的浓度,封闭时间,曝光时间等等,而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜,甚至重新提蛋白,这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后,将PVDF膜晾干,裁减成小块,保存起来,用的时候取出一块,没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说,节约了大量的时间。4.有关缓冲液和培养基配置

1)将缓冲液配方中的成分分别以10-100倍配成母液储存,需要的时候只需将相应的母液混合,补加水稀释即可

2)配培养基时通常会忘记各成分的量,如配LB时的三个成分不记得到底哪个是5g,哪个要10个,因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量,如配LB时,在NaCl瓶外注明10g/L, yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等,很方便,不需要每次配之前临时翻书 5.有关PCR主反应液配置: 在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定,每次配置PCR反应液很繁琐,可以将其配置类似kit的形式,按你需要的反应体系列表,然后放大100倍配置100×主反应液(100次反应),其中含buffer,Mg2+,dNTPs,但不含引物和Taq酶,然后可以10×分装或一管储存在-20度,在需要的时候拿出融开,然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数,再补加相应反应倍数的Taq和引物,混匀后分装,这样做的好处如下:

1)可极大的节省宝贵的时间,可早点收工,看球 2)避免每次反应加样不均的可能 3)大大减少PCR假阳性的产生 6.有关酶切反应液的配置: 在做酶切时,也可以象PCR一样配置主反应液,每次反应前先列好反应的体系,算好需要的反应数,然后按所需反应的体系按所需反应数放大,加入buffer、酶、水,质粒栏空缺,然后混合后按除质粒DNA的体积分装,然后再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切,这样做的好处如下,特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显: 1)各反应成分均一

2)可大大减少限制型内切酶的使用 3)节省时间

7.有关SDS-PAGE:

1)可将SDS-PAGE的积层胶,分离胶预先配好大体积如100ml储存在4度冰箱(注:10%AP,TEMED不加,切记!!),每次配置时只需吸取相应体积的预制胶加入AP,TEMED即可,没必要每次制胶时候翻分子克隆,特别方便,而且,这样的预制胶可储存半年以上,不失为偷懒的绝佳方法;更关键的是可大大减少与丙稀酰胺的接触,因此大大减少中毒的机会。

2)电泳时虽然小电泳分离效果要好一些,但2小时以上的等待的时间实在是痛苦,因此可以提高电泳至150V,但需要将整个电泳槽放在放满冰水的脸盆里散热,这样跑出来的胶分离效果丝毫不比低电压来的差,关键是时间大大节省,不需1h即可看结果了

8.实验中小窍门我想能够分成两类:一类是“非常规”操作;一类是常规操作过程中一些省时省事手段。前一类,我举个例子:有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大(1~2毫米以上,BL21就长得快),下一步转化子做质粒鉴定。这个情况下可以直接挑取一块菌苔(勿带出培养基),50微升酚/氯仿悬浮菌体,放置两分钟,加40微升TE抽提,上层TE吸出后再氯仿抽提一次,吸取上层TE即是质粒提取液。提取的质粒可以直接用于电泳和酶切。这样操作,可以省去转接液体试管的培养步骤,至少节省6~8小时的时间。但是,要在各步骤都控制得很好的情况下才能保证提取和酶切的效果,不同的实验室或者操作者未必能够很方便地重复----其实,其它的一些“小窍门”也是如此。

后一类的小窍门则在实验室中无处不在。如:平行作不同样本的PCR,模板DNA加量一样,配置PCR体系可以一起配制后分装----这点做过试验的都知道,但是配制的时候配制量可以比预期分装量稍多一点(如用100微升则配110微升),这样可以避免有时候分装不够的尴尬,因为不同特别是大小不同的枪,会有误差。再比如:楼上有站友说的sds-page胶预配(APS和TEMED、或者后者先不加)的问题,实际上时间放置过长肯定影响效果,如果要在一天内连续地跑两次板,何尝不可?又比如,配sds-page胶的时候,上层胶和下层胶可以只用一个大枪头:先取胶,次取水,取6.8的tris后再取8.8的tris,省时省料。20021108站友开的这个帖子很好,在上上层楼的帖子说得也有道理。但我想,“窍门”和“偷懒”不应该是因果关系。其实,不管是那一类的小窍门,都是在充分地理解实验各步骤的原理、经过多次试验积累、再加上一点点思索然后尝试的结果。知其然知其所以然和勤于思考敢于探索,是根本。否则,别人的小窍门对你也未必能够有用。才进实验室的新手,务必要先练好规范扎实的操作,然后才能弄“窍门”。本末倒置,贻害无穷。

9.我一直是把SDS-PAGE的积层胶,分离胶预先配成mixture,APS制胶时加入,半年内使用,绝对没有问题,我保证。

10.做SDS-PAGE的时候,除了蛋白量上样一致,最好体积也一致,这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽,方便后面的比较,特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致,否则跑出来会有的宽有的窄,特别是上样体积相差较大的。

11.在把蛋白胶做成干胶时,很多时候会因为有气泡使胶裂掉,我的经验是在做胶时加上层膜前在胶上多加些水就不容易进气泡了,还有就是高温烘胶,我喜欢放到60度烘箱里烘,这样水分蒸发速度快,即使有一些小的气泡也不会有影响,呵呵,这是经验之谈,我从来都没失手过,大家可以试试

12.做大肠表达时确定蛋白是否表达一般要煮样做诱前诱后检测,但很多时候煮出来的很黏影响跑胶效果.我发现如果现用8M Urea重悬细菌再煮效果会有极大改善.注:不能用Gu-HCl代替 13.我也推荐几个偷懒的方法 做SDS-PAGE跑胶通常都是现配现用,但配胶要>1h,所以如果想第二天睡个懒觉而又不耽误跑胶可以于前一天晚上做好浓缩胶和分离胶,待凝聚后不要拔下梳子,把含胶玻璃板从制胶槽取下,用保鲜膜包上,注意玻璃板上下两边缘会有气体,所以需要加一点电泳缓冲液以避免胶内水分蒸发.然后放4度过夜.第二天直接拔下梳子行后续.国外好多公司出售脚既是如此,可以保存上星期.2 配置分离胶或者非变性胶时因胶凝时收缩可导致加样孔变浅.可以将加剩的胶放入4度以降低凝聚速度,而将凝胶放入37度促聚,并随时用4度加剩的胶补充下降的胶面.另外将胶横放与水平面成~10度角也可以减少收缩的影响.3 推荐一个节约抗体/时间的做法: 同时跑2块胶,同时转膜,然后两块膜背靠背放入同一封口膜同时封闭,同时一抗二抗(最好是用转轮,这样效果好.如果是摇床,隔一段时间帮它们翻个身以保证两张膜的正面都有机会与液体充分接触.一起洗膜(可以稍微加强洗膜也可以不做.我最多一张盘子里放4张膜而没有影响洗膜).可分别或同时压片.这样就可以节约一半抗体和接近一半时间而不会影响结果.或者另外一个就是孵育后的抗体不要扔,好的抗体可以反复做好几张膜呢.但每次都会减弱,效果不如上面一种方法.14.做western blotting 转膜时,胶放在转膜缓冲液中一段时间,待胶在含有甲醇的缓冲夜中缩小的差不多后装好转膜装置,我的经验是把膜印在胶上直接在膜上画出预染maker条带,方便的很。因为很多时候跑电泳时胶上的预染maker很清楚,等转膜后就不是分辨的很清楚了。不过要注意画好预染maker后就不要使胶和膜发生对位移动了,以防maker失去参照价值。

15.超滤最合适用于蛋白的浓缩,更换缓冲液和除盐,对于按照分子量进行初分离的效果不是很好,理论和现实是有很大差别的^_^ 16.关于Western Blot 1)器具的清洁非常重要,开始做前,为了安全,尤其是装胶的厚薄玻璃板,可以先用中性洗涤剂和自来水反复冲洗,确保无洗涤残液后用蒸馏水冲洗2-3遍,然后用去离子水冲洗一遍。最后用95%酒精再擦一遍后晾干备用。

2)配胶最好现用现配,先配下层胶(分离胶),后配上层胶(浓缩胶或积层胶),而且在临灌胶前加APS并迅速混匀,即用移液枪抽吸与注入1-2次即可。

17跑蛋白page的时候,一开始用加样针,太麻烦,发现用20ul枪+普通小白枪头点,非常省事。另外,点样时有可能看不清孔在哪,看远离你的那面胶,孔有反光的。点样也点你对面的那块胶,省的总低头,干咱这行的容易得颈椎呀,爱惜自己。

18.垂直电泳时,可在电泳糟中放入青霉素小瓶等,可自然使液面提高而不影响电泳,又很节约电泳缓冲液。

19.我们有时要沉淀东西时,由于沉淀量很少,离心完之后不知道到底有没沉淀下来东西,由于量很少,不好观察,所以离心时建议按特定的方向放置离心管,这样你就可以在离心之前确定沉淀该沉淀到管子的大致部位,这样离心后就可直接观察那有没有沉淀,避免满管子找,另外看沉淀时可以对光看,这样就是颗粒状的细小沉淀也能看见的。

20.大家都知道PMSF有剧毒,以前都是知道浓度和要配的体积的基础上,算出要称多少毫克的PMSF,其实也可以先称PMSF,称多少算多少,再调整异丙醇的体积,到达你所要的浓度。这样就避免了你长时间和它接触。

21.跑好SDS-PAGE胶的一些体会。

1.清洗好玻璃板,不要偷懒,很多时候跑完电泳撬胶时会因为玻璃板不干净胶粘在板上把胶撬破。2.配胶时不要反复用枪混,稍微摇混就可以了,用枪混多次会导致胶凝不好影响电泳图的分辨率。3.AP分装成500微升一管保存放-20度,避免AP用太久失效。

4.倒胶时把玻璃板中的水用滤纸尽量吸干,因为微量的水存在会影响配的胶浓度。5.尽量不用过夜放室温或者四度的胶,也回影响胶 的分离效果。

6.电泳完撬胶时根本不需要用撬胶板,在一平皿里装好水,把有胶一面的放在水中晃动几次胶很容易就脱落下来,一点没有问题,方便的很。

7.点样时样品别忘了离心这步,因为上样含有固体沉淀会影响电泳图分辨效果。8.尽量在冰浴状态下跑。

22.做 2-DE 做的比较多,总结了几个小窍门:

1.一向电泳时,盐离子容易聚在 胶槽的两侧.剪一小段IPG胶条放在两侧,构成盐桥,电压就容易上去了.避免一向电泳不好影响最后实验

结果.

2. SDS-PAGE时,在灌胶之前,一般大家都会用凡士林封底, 在SDS-PAGE 电泳之前又必须把凡士林搽干净,很是麻烦,我的经验是:不用凡士林,取少量未加Ap的分离胶,按比例加2倍量的Ap,然后灌入板间,等上几分钟,待胶凝固后就可以接着灌分离胶了.方面,效果好!23.蛋白质纯化时,蛋白质降解可能与超声破菌保持冰浴有关,之前建议加pmsf,建议在上柱子洗脱的时候也加pmsf(蛋白降解抑制剂),一定要用之前再加。

24.做透析的时候,拿一个5ml的枪头或者是其他类似的东西,剪短,穿过个塑料泡沫之类的面积比烧杯大东西,然后把透析带一端扎紧,另一端开口绑紧在5ml枪头下端,扎紧得那端也可以弯过来绑成u字型。这样就可以用1ml的枪穿过5ml的枪头的孔,另一只手调整透析带,来加样取样,省去了总绑透析带的麻烦,对同一个蛋白大量多次透析非常方便 25.第一次发贴说一下自己的小经验,希望版主能给我一分,每次看到好东西因为没分都没法下,好羡慕有分的人啊。当然也不能不劳而获,说一下自己的实验技巧给大家分享。

1.配SDS-PAGE胶时,用枪头混匀比较麻烦,而且费时费力,效果也不好。可以剪一小段夹文件的那种曲针做转子放到配胶的小烧杯里,在磁力搅拌器上边搅边加入各溶液,这样加完也就混匀了,直接灌胶即可。2.上面的站友也说过,上样用黄枪头就行,我也一直在用,根本不用注射器,方便的很,建议大家也试试。3.电泳后考马斯亮蓝染色一般要1h到2h,脱色也要2h左右,麻烦的很。现在给大家说一个简单的方法,是我从一个师姐那里学到的。

加入染色液后,先放入微波炉里加热5-10秒,使染色液微热即可(千万不要加热太久,否则冰醋酸就挥发了)。然后放水平摇床上摇20分钟,最多半小时就染好了。

脱色也很简单,不用脱色液,直接用去离子水,放微波炉里煮沸5分钟左右,然后将水倒掉,再换上新的去离子水煮,这样反复几次,就可以了。效果可能比正常的脱色稍差一点点,不如那样清楚,只要电泳时比平时多上1/5的样品就可以了,关键是这样省时省材料(用不着含甲醇和冰醋酸的脱色液)。方便快捷!放心,反复煮胶不会把胶煮坏的。

26.我也说说我的小经验。可能大家都知道,请别笑话我。

1、配胶时一定要掌握好时间,不要因为过度赶时间,而造成以后的条带粗大,压不成条带,且消耗很多试剂和时间。

2、加样时,冲洗加样器可用双蒸水,用电泳液会使加样器中有很多的泡沫。或许是因为SDS的原因吧?

3、对于大分子蛋白质,转膜过夜更好。滤纸的张数可以适当减少。

4、在跑样时同时加入MARKER有助于正确识别所需的蛋白位置,减少NC膜的消耗。

5、一抗、二抗的浓度不要太高。

6、做ECL显影时,根据荧光的亮度调整时间。泡完显影液,胶片应用水洗一下,以减少定影液变黄。

7、和有经验的同学交流,也是非常重要的。知识的交流绝对有助于试验的成功。这是我目前的一点拙见。

27.推荐一个省质粒试剂盒硅胶柱与溶液的方法:

所有试剂使用手提质粒自己配置的溶液

一、溶液

二、溶液三(代替试剂盒的solution1、2、3),然后一比一的与饱和碘化钾或碘化钠(代替结合缓冲液)混合,就可以让质粒在硅胶上结合,而试剂盒的硅胶柱可以重复使用,没有试剂盒溶液量的限制,只要是一样的质粒我想提几管就提多少。

顺便说一句硅胶柱也可以用自己买的硅胶粉末代替,离心后倒掉硅胶柱上面的上清就可以,用起来不象柱子方便。效果比手提的要好要快。

28.做WB时,样品比较多, 又怕放时间长了对蛋白样品不好,而且确定以后肯定要做某个抗体,只是一时没有决定.那么你可以选择先做SDS-PAGE,并转膜.然后把PVDF膜凉干, 放四度保存.以后拿出来封闭后,加抗体就行了.蛋白在膜上,且已经分离, 比保存在BUFFER里面的蛋白肯定更可靠。呵呵

29.今天作his纯化的时候,又琢磨了一个窍门,与大家分享。我得样品比较多,几百ml,而柱子不够大,只有10几ml,跑来跑去的上样,还总得记着,太麻烦了。于是,我就刷干净了一个烧杯,装了我的样品,找了一个细胶皮管,当连通器,就像鱼缸换水一样,用5ml枪在一头一吸,液体流出来,放到纯化柱里,调好烧杯的位置,两个液面一样平了,呵呵,上了好几个小时了,没有问题,现在调低速度,过夜上样:)30.能导致PAGE胶不凝的原因主要有三个:

1、配胶中用到的主要试剂的配置。

主要就是30%的丙稀酰胺的配置。粉末状的丙稀酰胺和甲叉丙稀酰胺使用不应该超过一年,因为丙稀酰胺会吸潮水解,这样以来丙烯酸的含量就会加大,从而导致page胶不凝。

2、温度。

温度高时凝固快,但是亦不宜过高,因为温度变化会影响交连物的孔径大小。所以温度在25度最为合适。

3、氧气。

氧气是凝固的终止剂,所以不能让胶中出现气泡。虽然都是些看起来听低级的错误,但是不注意还是会犯。31.我做2维蛋白电泳,也有些心得:

1、向电泳玻璃板内加入胶条时,先在缝隙中加入配好的溴芬兰缓冲液,要加满,再将胶条贴后面玻璃板壁用薄塑料片将胶条缓缓推下至凝胶上缘,这样可以很好的避免胶条下形成空气泡。

2、能做出好的图谱已经很不容易了,如果在扫图时撕破实在可惜,所以扫图要小心,将凝胶转移到扫描仪时可以用塑料隔片在下面托着,同时保持有些水,这样就安全多了。32.凑个热闹说两句吧

1、sds-page胶如果配好装好倒入内槽液以后,发现内槽液稍有渗漏,可以把外槽液多加一些,加满,加到与内槽液相齐,这样就可以继续正常跑胶,不用浪费已经加进去的内槽液

2、至于染色脱色的问题,我们这里一直是染色:加热半分钟,摇20分钟;如果染液不是新配的,就加热半分钟摇十分钟,凉透了再重复一次即可 脱色也一直是用去离子水煮两三次即可

3、不知道大家都是怎么做酶切的,我的体会是,酶切质粒时,两个酶分别单酶切比直接双酶切效果要好很多。我有一次双酶切两次都没连出来,后来分步单酶切,连接效率几乎100%。

可以第一个酶切完后直接把体系热失活,(根据酶说明书上一般是65度20min)然后直接向里面补第二个酶

或者第一个切完后用氯仿抽提,把蛋白提出

或者中间做一次回收,这个就要考虑回收效率和损失的问题了,但是这样除蛋白最彻底 前两个方法我们这都是有人做过的,已经都很好用了

33.俺也来说说关于Bradford法蛋白浓度定量和DTNB法巯基浓度定量的一点体会:

我是做蛋白修饰巯基后,通过这两种方法的定量来间接反应修饰的程度。一路摸索过来,也有半年有余;最大的体会就是不要急于求成,直接实验,首先检测修饰体系是否对方法有影响,修饰基团是否会在595nm和412nm下有特定的吸收,修饰后修饰试剂本身是否会有变化,对蛋白整体结构造成影响,其次再谈具体修饰比例和程度。对于巯基浓度测定方法,有四种(Anal Biochem.1998 Dec 1;265(1):8-14),而DTNB本身虽然灵敏度不高,但是重复性和抗干扰是最佳的了。

34.考马斯亮蓝染色后的脱色,如在脱色液中加数张捏成条状的Kimwipes纸(国外实验室常用,相当我们的擦镜纸,全棉纤维制造),由于染料吸附到纸纤维上,脱色加速。待纸着色较深时,更换新纸条,不用换液。我想脱脂棉或纱布也是一样的。但滤纸等可能不行,会溶掉。

半贴壁细胞如SP/0或杂交瘤细胞传代时,不用吹打或刮落。先将上清吸出,适当拍打培养瓶(当然是塑料瓶,玻璃瓶拍碎了别找我),即可见贴壁细胞脱落,加培养基混悬即可。注意,过力拍打培养瓶会裂,特别是瓶颈。

35.一向电泳时,盐离子容易聚在 胶槽的两侧.剪一小段IPG胶条放在两侧,构成盐桥,电压就容易上去了.避免一向电泳不好影响最后实验结果. 36.我也推荐几条:

1、关于20021108战友的说法,我觉得我们制备好了一批感受态,最好马上转化一种已知质粒,与此同时,取一点感受态接种到含抗性的固/液体培养基培养来做对照。这样第二天即可以知道这批感受态是否还有外源质粒,又可以知道这批感受态转化效率的高低。如果合格,那以后就可以放心使用!因为我也曾经遇到其实是因为感受态不好而导致试验不成功,但是当时不知道,结果费时费力。

2、做克隆挑斑时,我们可以在将沾有菌体的牙签丢到试管前,在一块相应抗性的平板上点一下,标注清楚,培养时间稍长一点,待长成较大菌落后收取。以后需要哪一个菌,就在平板上挑取。这样既方便快捷,又可以保证菌的一致。

3、抽提质粒时,加入Sloution II和III后要求轻柔混匀。我个人觉得不用这样,只要不是非常剧烈,可以快速混匀。尤其可以运用在一次抽提多管质粒的时候,这样可以快速,而且效果一点也不差。

4、抽提质粒时,用无水乙醇沉淀的时间可以由实验操作者来决定,如果时间充裕可以30min,否则8-10min也可以。至于温度,个人觉得-20度好于常温。如果加入可醋酸钠,会较容易形成盐类杂质,所以时间短一些更好!

今天想到这些,先写到这里,以后想到了在上来与大家分享。希望我的小经验对大家有所帮助!37.首先声明:实验中的一些技巧要用在首先对基本的操作有深刻了解的基础上,在力求省时、省力、节约成本等的同时,实验的准确性是最重要的。

对大多数做蛋白的战友们来说,培养细胞应该是不陌生的,我这里谈一个培养细胞的小技巧,大家知道,对于一定的空间(如某种尺寸的细胞培养瓶)来说,细胞数目太多或者太少都不利于其生长,太多了就要消化,太少了要换一个小点儿的培养瓶,我的做法是:如果细胞数目太少,可以不必去找小一点儿的培养瓶,可把原来的培养瓶由原来的平放改为竖着放,这样底部的空间就小了,有利于细胞的生长,当细胞数目增加到一定程度的时候还可以在平过来,避免了来回换培养瓶而增加污染的机会(对没有小培养瓶的更实用)。

个人体会,仅供参考。

38.说说关于SDS-PAGE的几个小经验

1、做好胶后,把所有的加样孔都加上样,这样可以防止边缘的样品脱尾。

2、高电压/高电流电泳时,可以把电泳槽放到4度冰箱中进行电泳,省时省力,1hr搞定。

3、胶考染时间40min,放在凝胶摇床上(没有胶床可以放到28度普通摇床上,但要控制好摇床速度)缓缓摇动,使染色均匀,同时可提高检测的灵敏度,根据我的经验可以达到银染的级别,就是脱色时间比较长,一般需要脱色2-3d,夏天的时候要勤换脱色液,防止变臭哦

39.质粒小提如果是用作鉴定或酶切,不必进行酚仿抽提,将溶液1.2.3 离心后的清液移入一个新的1.5ml离心管中,再次离心3-5分钟,小心取出上清液后,直接沉淀,不必担心DNA切不开,我已经这样使用一年多,没出过什么问题。当然这样的质粒不很干净,但是做鉴定足够了。尤其是实验室女同胞们,可以减少酚仿的侵害,而且节省时间。

分子生物学当中的经验教训及技巧[copy](2009-03-23 15:02:08)大家平时做实验,肯定都有很多小的技巧,在书上都看不到的,也没有系统的整理,但是确实能够起到很好的作用,不妨在这里与大家分享一下。

任何专业任何点滴的东西都行,也许就对别人有一点好处哦!举个例子:

我在用酶标板加样的时候,蛋白样品常常会产生很多气泡,如果做荧光实验,由于灵敏度非常高,一点点微小的气泡都会影响很大,常常又不可能加消泡剂,我就用卫生纸,撕下来一下条,搓成小针,碰一碰气泡就破了,很好使:)

1、酶切或者PCR体系混合好以后,大家都会用手指轻弹EP管的底部来混匀溶液,常常出现很多气泡。这时候轻弹液面上方的管壁,消除气泡就轻而易举了。千万别弹液面下方的,气泡会越来越多。

2、CR不要一次做太多样品 有时候机器不稳定 影响结果

3、用卫生纸是一个,我觉得最好的是用接种针烧热了之后去戳一下,防止被卫生纸污染哈 建议瞬间离心一下是最好的,不但消除气泡,还有将管壁上的液体离下来,否则可能不够分装

4、卫生纸主要成分是纤维素,一般并不会污染样品,除非你做分析实验,之所以用卫生纸是因为它会吸水,减少水的表面张力,很容易就让气泡破裂了

5、磁珠回收时,不要贪多,收集上层即可,太过影响DNA的纯度和质量,对链接、转化有影像。

6、各种buffer都要完全融化后才能用,而且不管什么药品,如果只剩下最后一点底子了,最好放弃,因为可能会影响你的实验

7、动手前,一定要思路清晰,尽量把要做的事情列出来

8、做前一定要在笔记上写上1、2、3.....,在按照笔记一步一步做,否则容易出错。

9、要加的酶阿,dNTP,水啊之类的能分装的话最好分装好一点,万一污染的话就全完了

10、实验前,列个表单,列明关键点.避免出错.这样费一点时间是值得的.不要太相信自己的记忆.孤风逐日:任何试剂反复冻融对其效率都有很大地影响。所以买来的试剂第一次使用时要注意按每次实验用量分装保存。提取的模板或纯化的样品也最好分装保存,以备不测。

很多个人经验在个板块相关分析中都有一些提及,只要多加留意就可以学到很多高手的不传经验。

11、同时做很多管PCR时的加样技巧 例如,需要做n管PCR:

1.如果用同一对引物扩不同的模板,可以先按照事先确定的比例,按照n+2的量把水,反应缓冲液,dNTP,镁盐,引物和Tag酶先加到一个大管里面,混匀后就是“预混合液”了,然后把“预混合液”分装到做PCR用的小管里面,通常我会分装n+1管,最后向前n管里面入模板,混匀,最后一管不加模板而是加入和模板等量的无菌水,作为对照,以检查加样过程中是否引入了污染,接下来就可以进行PCR反应。2.如果用不同的引物扩同一模板(不做多重PCR),则将第1点的引物和模板次序调换即可。3.同理,如果用不同的引物分别扩不同的模板,则将引物和模板留在最后分装后再分别加入。

这样做的优点:可以大量减少取样次数,减少了不同PCR管之间的误差(这一点对于荧光定量PCR尤其重要);节省时间。

缺点:如果在制备预混合液时的任何一步引入了污染则会导致这一批次的所有PCR反应都被污染,所以我每次都做一个阴性对照(用无菌水替换模板),以检测是否被污染。

12、如果遇到试验有很多步,只是自己看protocol做,没有人带而且是第一次,我建议确立好步骤,然后每做一步的时候只注重眼前这一步,认真的做,不出错。这样每一步都只是关心眼下,可以集中精力,并且每一步都保证无误,最后结果应该不会太坏,而且即使出了问题,可以排除操作的因素。

13、跑PAGE胶染色的技巧吧:

其实是我自己的亲身体会,大家都知道如果严格按照protocol上的去做不但浪费药品,也浪费时间,程序还繁琐,当然代价也高些。

1、如果你跑的是小板的(SSR之类的分析足够),那么先找来4个1升左右的空塑料瓶,洗干净(我用的是上海国药的装尿素瓶,带盖的),用来分别装银染要用的固定液、染色液(硝酸银)、显影液、纯水,在每个上面分别写上名字,以免弄错,每次回收这些溶液后,把盖子拧紧,以阻止一些挥发或分解吧,延长使用“寿命”。

2、一般的书上都说显影液只能用一次,其实完全不至,我一般都是至少用2次,根本一点问题都没有。还有固定液和染色液也可以适当多用几次,只要能然出来就行。

3、有的时候实验室用超纯水so多,也so浪费,或是一时半会制不出来,而染色要用怎么办呢,我无意中就用蒸馏水代替,什么问题都没有,根本没啥差别,甚至于后来我压根都不用蒸馏水了,干脆改自来水,也没啥问题,完全可行,不信大家可以试试,呵呵,虽然说是可能某些地方不是很合理,但对一般像做分子标记之类的根本没啥影响,替老板能省就省点吧,大家都不容易,哈哈!还有我忘了说了,以前经常跑完胶后来不及染色就得回寝室了,怎么办呢,不用熬夜,就把胶剥离下来泡在固定液里,第二天早上再来接着下面的步骤一点问题都没有,就是可能胶尺寸会有些变化,但绝对不影响你的结果。

最后一个就是读带问题,我见过别人好多种方法,但我自己“发明”了一种实用、准确的:

找一块大点的普通玻璃板(我当时用的是跑大垂直板胶的),带上手套(保护好自己,虽然聚合后毒性小,但还是有的),快速把胶捞出来,放在玻璃板上,再迅速把玻璃翻个面,平放在观片灯上,只要你速度快,胶是不会掉下来的,会紧紧贴在玻璃上的,最好玻璃板和管片灯的平面有点空隙,否则胶粘住观片灯表面就会把灯面弄脏,胶也可能会掉,一切弄好后,你就可以直接那笔在玻璃的这个干净面上一清二楚的读带,直接可以往上面写带型,然后为了以后检查用,最好用数码相机快速拍照保存,不但胶上的带可以看清,你在玻璃上写的带型数字也是非常清楚的,当然读完的胶就可以立即扔掉,没必要保存

14、做实验时,认真做好记录,写好实验结果,过一段时间再去看看,温故而知新

15、有些时候做完PCR,由于条带很淡,但你想回收.不妨将有目的条带的胶切下来.放到-20度冻一会,拿出吸它的液体作摸板,再扩增效果很好!

16、做转染,我养过四五种细胞,都做了转染,但每种的转染率都不一样,本人当时就吃了这个亏,提醒大家,谁做转染事前先查一下要转的细胞转然率怎么样。

还有就是我在用脂质体2000做转染时,一次发现转染6小时后的液体打到其他细胞里仍可以转进去,所以为了提高转染率,我以后在6小时的时候都没有把转染液体打出去,只是又加了含血清的培养基。但有一个问题就是,不打出去的话,细胞会死很多,这个也与养的细胞种类,状态都有关。PCR预混:预混一般根据样品的多少,一般我在预混的时候大概每个样品管中预计损失0。5-0。6微升,这样计算需要的总的预混液数量,比较合适。

18、做实验前 一定先写出步骤和列出实验所需要的试剂和器材,下面看看哪些是要购买的,哪些是需要清洗的,哪些是要前处理的如过滤、高压。

定试剂一定要打提前量,不好买的试剂一定要在3周左右前订购,如在SIGMA订货。实验的时候一定要坐好标记!什么时间,多少浓度,如PH值,是否过滤了,做完实验有写离心或过滤的残液,先不要丢弃,万一实验失败,还要重复的。实验中的每个环节都很重要 忽略任何一个都可能导致实验的失败

每个人在实验中都有自己的一些好的细小的习惯

例如tip头吸完后马上从移液器上取下来,以免忙乱的时候又以同一tip汲取另一种试剂 用完量桶或者烧杯后,及时清洗,并放入烘箱。不管大小实验,做完后都要认真做记录。

一个枪头如果可以连续吸两次的话,也不能吸,主要是第二次吸时不准,同时也不能完全打出来。做完实验擦干桌子,一切东西归位,有些东西可以回收的就回收,很多实验室的枪头是回收的 实验前认真设计,作实验时不胡思乱想,叽叽喳喳,做完后在海阔天空,认真分析试验数据

做之前认真设计,做时就不要老是想着结果,平心静气,注意细节,认真记录,因为失败是常事,不要回过头不知道该从哪里找原因。

每次的实验结束,要及时做好记录,不要等。好记性不如烂笔头,这虽然是俗语,但是不要放弃笔的重要性!

加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均

做完实验,清理实验台,以便下次能够更快、更好,更方便的继续工作!药品归位,仪器归位!做实验一定要有计划,最好在有部分实验数据出来时,就着手写文章,这个不是为了出文章,而是在写文章的时候,可以清晰自己的思路,知道后面该先做什么,该重点做什么.不然有时候辛苦半死,数据太分散,不能说明问题.不轻易用别人的东西,用时先打招呼,记录要详细,配液体时要记录试剂的批号等? 所有的东西都要即时标记好,日期,药品名称,浓度,等

移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性。

不用酶标枪时不要一直拿在手里,不可以倒过来(特别是里面还有液体的时候)不要一直说话、聊天~~ 笔记要全~要多全有多全~ 还有一点很关键,笔记要放好,最近我的笔记掉了~哭死 最后,做完实验要洗手~ 离开实验室前或进入实验室前注意水,电是否安全

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