流感病毒检测

流感病毒检测（精选12篇）

流感病毒检测 篇1

A型流感病毒即人们常说的甲型流感病毒, 它在我国已有很长的病史, 在世界范围内也有过几次大规模的流行, 每年死于感染此病毒的人有几百万人, 给经济的发展造成巨大的损失。A型流感病毒的流行期类似于其他呼吸道感染疾病, 一般冬季多发而夏季发生率相对较低。人员密集、环境封闭、通风条件比较差的地方容易发生和传播。医院、学校等公共场所容易流行。A型流感病毒容易变异, 这已引起全球广泛的光注。根据其H和N抗原的不同, 又可分为多个亚型。其中H抗原有15个亚型, N抗原有8个亚型。众所周知的禽流感就为H5N1。人类容易感染和传播的主要有H1N1, H2N2, H3N2这三种亚型, 但也有报道人感染H5N1的病例, 其中还有引起死亡的报告, 这些报道一度引起民众的恐慌。A型流感病毒易变异性这一特性要求在检测中要尽快确定感染者感染的是哪种亚型, 以便医护人员对症治疗和做出相应的防治措施。A型流感病毒可通过呼吸道、消化道、眼结膜、皮肤损伤等多个途径传播, 因而确诊疾病的亚型并且隔离传染源、切断传播路径、保护易感者是控制疾病流行的有效方法。

荧光定量RT-PCR检测方法的灵敏度高, 并且可以有效的防止检测过程中样品的污染, 极大的提高了检测的准确性。此外荧光定量RT-PCR检测方法灵活性也好, 可一次获得样品的多个遗传信息, 这就大大的缩短了检测时间, 为A型流感病毒患者的治疗创造了最佳治疗时间。本次研究选取2011年9月至2012年3月我院收治的10例A型流感病毒感染者, 随机分为两组, 对照组5例进行常规检测, 实验组5例进行荧光定量RT-PCR检测。两组临床资料进行分析, 情况如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究病例10例, 其中女性6人, 男性4人, 年龄5~70岁。小孩4例和老人3例比重较大, 男女比例相当。10例患者中, 发烧咳嗽的有1例, 浑身酸痛流涕的有2例, 出汗咳嗽流涕的有1例, 发烧浑身酸痛的有2例, 发烧并且出汗的有1例, 浑身酸痛兼出汗的有1例, 发烧、浑身酸痛、出汗、咳嗽流涕的有2例。两组在性别、年龄、病情等一般资料上比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

对照组5例进行常规检测, 采用血清学检测方法和病毒分离培养方法进行检测。实验组5例采用荧光定量RT-PCR方法进行检测。

1.3 统计学分析

采用SPSS 13.0统计学软件, 计数资料行χ2检验, P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

实验组荧光定量RT-PCR方法检测时间短, 且具有特异高, 敏感性高的特点。这些特性对疾病治疗也有极大的帮助。对照组发现有3例病情加重, 其中1例并发淋巴系统疾病2例并发肺部细菌感染, 继发性肺炎主要症状表现为持续发烧、头痛、呕吐、恶心、嗜睡、食欲不振、吐浓痰、痰液黏稠且黄、少数痰中带血、病人面色发黄。并发淋巴系统疾病的患者表现为淋巴结中大、身体浮肿、淋巴管扩张扭曲、局部淋巴管管壁及其周围组织发生炎症细胞浸润、浸润的细胞中有大量噬酸性粒细胞。实验组有2例病人并发肺部细菌感染, 症状表现为发烧、恶心、呕吐、嗜睡惊厥等症状, 没有发现有淋巴系统病变的病例。经化验科检验, 肺部细菌感染的继发性肺炎主要是感染金黄色葡萄球菌、嗜血杆菌和肺炎链球菌。实验组治疗时间为1~3周, 对照组治疗时间为2~4周, 其中有1例病情严重的为6周左右。有1例因病情恶化转移到上级医院去接受治疗。值得提醒的是, 在研究过程中发现A型流感病毒容易感染其他住院病人。而这些病人都是些免疫能力相对比较低的病患。见表1。

注:*与对照组比较1) P<0.05。

3 讨论

A型流感病毒具有很强的侵袭力, 而且对药物的治疗具有抵抗力的突变或是变异, 可以对病人的健康造成威胁。对照组并发症较高, 可能是因为血清学检测特异性和敏感性不高, 检验的准确性低从而有误诊影响到对疾病的治疗或是错误治疗诱发病毒变异, 这些因素都可能加重疾病或是引起并发症;病毒分离培养方法至少需要21d才能得到检测结果, 检测时间过长, 有些患者所感染的病毒在检验过程中可能已经发生突变或者是变异, 从而影响到治疗的效果。A型流感病毒极易突变, 不正确的治疗以及治疗时间过长均易导致突变, 从而加重治疗的困难性。而且突变后的A型流感病毒株具有更强的毒力和攻击性。此外, 耐药性也是一个不可忽视的问题, 在确诊之前采用广谱抗病毒药物, 不仅易导致耐药还可能导致突变从而贻误病机。从感染A型流感病毒的人群分析, 老人和小孩所占比重相对较大, 老人免疫系统功能退化而小孩免疫系统尚未发育好, 这两大人群共同特点就是免疫力比较差。因此加强对老人和小孩的保护也很重要。感染A型流感病毒后, 人体的免疫力降低, 原本寄居于人体的正常菌群如金黄色葡萄球菌变成致病菌, 从而引发一系列的感染。早期识别以及采取长期隔离防范措施看来对预防受到感染的免疫功能受损患者发生 (医院性) 流感病毒爆发不失为是一种谨慎的作法[1]。然而, A型流感病毒感染早期症状并不明显, 只有50%左右的有明显的类似于呼吸道感染疾病的症状。这就加重了防治的难度。到医院就诊的都是症状明显、病情较严重的患者。这就需要医院有快速的检测结果和尽早的治疗。荧光定量RT-PCR检测方法正好弥补了血清学、病毒分离检测方法的不足, 对A型流感病毒的检测时间短, 异性高, 敏感性好, 为疾病A型流感病毒感染的尽早治疗创造了条件。荧光定量RT-PCR检测方法不仅对A型流感病毒的治疗有积极作用, 而且有利于隔离传染源, 切断传播途径, 保护易感者, 减轻人们的恐慌心里和心理压力。有利于提高治愈率, 缩短治病时间, 提高病人的生活质量。

摘要：目的:探析荧光定量RT-PCR检测方法对A型流感病毒检测的快速性、敏感性和特异性以指导临床治疗。方法:选择我院2011年9月至2012年3月收治的10例感染A型流感病毒病人, 随机分为对照组和实验组。对照组5例进行血清学、病毒分离培养等方法进行检测, 实验组5例进行荧光定量RT-PCR检测。结果:实验组的确诊率和治疗效果均高于对照组, 且所用的检测时间和治疗时间均短, 差异均有统计学意义 (P<0.05) 。结论:荧光定量RT-PCR检测A型流感病毒准确率高, 对临床治疗有积极的指导作用。

关键词：荧光定量RT-PCR,A型流感病毒,检测方法

参考文献

[1]《美国医学协会期刊》 (JAMA) doi:10.1001/jama, Jairo Gooskens, Aloys C.M.Kroes, 2009:297.

流感病毒检测 篇2

推荐单位湖南省出入境检验检疫局

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主要完成人

1.朱中武

主持了课题《猪流感病毒抗原表位筛选及其应用研究》(附件32)，主持完成了专利《抗H3N2猪流感病毒血凝素蛋白多克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》的研究工作(附件2)，参与完成了《一种H1N1猪流感病毒血凝素模拟抗原表位及其应用》(附件1)和《抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》(附件3)。

课题工作量占总工作量的60%。

2.唐连飞

作为主要完成人员，完成了课题《猪流感病毒抗原表位筛选及其应用研究》(附件32)，主持完成了专利《一种H1N1猪流感病毒血凝素模拟抗原表位及其应用》(附件1)和《抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》(附件3)，参与完成了《抗H3N2猪流感病毒血凝素蛋白多克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》的研究工作(附件2)。

课题工作量占总工作量的60%。

3.孟芳

作为主要完成人员，参与完成了《猪流感病毒抗原表位筛选及其应用研究》(附件32)，参与完成了专利《抗H3N2猪流感病毒血凝素蛋白多克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》(附件2)、《一种H1N1猪流感病毒血凝素模拟抗原表位及其应用》(附件1)和《抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》(附件3)。

课题工作量占总工作量的55%。

4.秦智峰

主持完成了专利《一步法检测新型甲型H1N1 2009流感病毒的试剂制备方法和应用》的研究工作(附件6)。

课题工作量占总工作量的40%。

5.卢体康

作为主要完成人员参与完成了《一步法检测新型甲型H1N1 2009流感病毒的试剂制备方法和应用》（附件6）的研究工作。课题工作量占总工作量的45%。

6.周智君

完成了课题《猪流感病毒抗原表位筛选及其检测应用研究》的全部动物实验内容（附件32），完成《抗H3N2猪流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》和《抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体，杂交瘤细胞株及抗原捕获ELISA试剂盒》专利的所有有关动物免疫、单克隆抗体大量制备的研究工作。

课题工作量占总工作量的45%。

主要完成单位湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心，中南大学

流感病毒的自白 篇3

由于人体具备自动防卫机制——免疫系统，尤其是那些健康且年轻力壮的人，体内的免疫系统能识别并清除我们，以致我们常被“扫地出门”。所以，通常我们先从抵抗力相对较弱的儿童、老年人和已经患有某些慢性疾病的人下手，或者在人处于过度疲劳、聚集在空气混浊的公共场所等处时寻找机会，倾巢而出，从人的呼吸道进入人体，再通过他们传染到其他人，从而造成流行。

进入人体后，我们在人体内潜伏1至5天不等，然后突然引起疾病发作，寒颤、高烧（通常38.5℃以上）、肌肉酸痛、疲乏无力，影响人们生活工作。我们还藏在患者呼吸道的飞沫中，经空气传播扩散，也可通过患者的一些用品如手绢、床单和衣服等进行接触传播，这个过程可持续一个多星期。

我们最厉害之处，在于我们可以引起多种严重并发症，最常见的有急性支气管炎。如果我们侵入了人体的下呼吸道，就会引起病毒性肺炎或细菌性肺炎，这一招对于那些原来就有呼吸道疾病的老年人、儿童和慢性病患者是严重的打击;如果侵入人体的心脏，便会引起心肌炎、心包炎;如果是儿童患者，还会引起中耳炎。这种种并发症便是我们致人于死地的杀手锏。即使是原本健康的人，一旦感染流感，也有出现并发症的危险。

长期以来，人类孜孜不倦地研究对付我们的方法，对我们的变异情况和疫情进行监测，新的方法不断出台。不过，我们还有一绝招——“变脸”，即改变自己的抗原性，来逃避人体免疫系统对我们的清除，所以感染过流感的人，虽然体内已产生了抗体，但对于“变脸”后的我们却还是没有免疫力，这就是为什么我们会反复引起流行或暴发的原因。

但是，科学家研制的流感疫苗——倒真让我们觉得束手无策了。疫苗是一种生物制品，而非血制品。在它的配方里含有能够抑制我们流感病毒活性的成分。人们如果在流感流行季节来临之前注射疫苗，体内可产生对我们的抵抗力。为了针对我们善于“变脸”的特性，有一个叫世界卫生组织的团体，每年都不厌其烦地监测世界各地流感病毒的变异及流行趋势，从而制定新的流感疫苗配方标准。无论我们如何“变脸”，人类总有有效的疫苗来对抗，使我们的活动能力大不如前了。

流感病毒检测 篇4

1 材料与方法

1.1 样本来源

所检测的200份咽拭子样本均采自佳木斯市中心医院门诊部患者, 主要是具有发热症状的呼吸道传染性疾病病例。

1.2 主要试剂

病毒RNA提取试剂盒 (KIT 74104) 及RT-PCR反应体系试剂盒 (KIT 210212) 均为德国QIAGEN公司产品;FQ-PCR试剂盒为北京金豪公司生产, RT-PCR引物购自大连宝生物公司, RNA酶抑制剂 (promega) 由上海生物工程公司提供。

1.3 主要仪器设备

Z233MK-2台式高速小型离心机购自德国Eppdendorf公司, 7300基因扩增仪购自美国ABI公司, Gene Genius凝胶成像分析系统BIO-RAD购自美国伯乐公司, FS-91自动DNA扩增仪购自上海复生生物公司。

1.4 方法

病毒RNA提取、FQ-PCR、RT-PVR、扩增产物电泳分析方法均按试剂盒及仪器操作说明书进行。

2 结果

2.1 2种方法检测的阳性率结果

在200份来自临床的咽拭子检测标本中, 用FQ-PCR检测后甲型流感病毒检测阳性的为96份, Ct值最小为12.95, 最大为24.63, 阳性率为48.0%;用RT-PCR检测后结果甲型流感病毒检测阳性的为69份, 凝胶条带在235bp处出现, 阳性率为34.5%。2种方法检测的阳性率差异具有统计学意义 (P<0.05) 。见表1。

2.2 2种方法全程检测所需时间

FQ-PCR:RNA病毒提取需1 h, 配制反应体系及实时荧光RT-PCR反应需2.0～2.5 h, 整个过程大约共需要3.0～3.5 h。

普通RT-PCR:RNA病毒提取需1 h, 实验设计及PCR反应体系配制约需1 h, RT-PCR反应约需4 h, RT-PCR产物检测约需2 h, 整个过程大约共需要8 h。

3 讨论

FQ-PCR是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测, 从而实现对起始模板定量及定性的分析。在FQ-PCR反应中, 随着PCR反应的进行, PCR反应产物不断累计, 荧光信号强度也等比例增加[1]。通过对荧光的实时动态检测可对PCR产物进行定性及定量, 它具有灵敏度高、特异性强、所需时间短的优点, 并且实现了PCR检测的密闭操作, 克服了普通RT-PCR易污染以及强致癌物溴化乙啶对操作人员的危害的缺点, FQ-PCR则更体现了其应用的价值[2]。

摘要：目的 比较实时荧光PCR检测 (FQ-PCR) 与RT-PCR在鉴定甲型流感病毒中的优劣, 建立能快速简便、特异地从临床标本中检测并鉴定流感病毒的新方法。方法 对200份临床采集的咽拭子样本进行FQ-PCR与RT-PCR检测, 综合比较2种监测方法之间的差异。结果 FQ-PCR检测200份临床咽拭标本, 96份甲型阳性, 阳性率为48.0%;从RNA提取到检测结果仅需3～3.5 h。RT-PCR检测200份临床咽拭标本, 69份阳性, 阳性率为34.5%;从RNA提取到检测结果约需8 h。结论 FQ-PCR方法快速、特异、灵敏, 在甲型流感病毒检测中具有较大的应用价值。

关键词：实时荧光PCR,RT-PCR,甲型流感病毒

参考文献

[1]程晓雯, 周丽, 赵锦, 等.荧光定量RT-PCR在流感病毒检测上的应用.中华实验和临床病毒学杂志, 2004, 18 (3) :289-290.

禽流感病毒自述作文600字 篇5

我是一名h7n9禽流感病毒，今天我是作为一名使者，作为禽流感病毒王国的使者出访中国。作为禽流感病毒，我不曾考虑中国是否欢迎我们的到来，但是我们还是来了一大队人马。很庆幸，我一来，就有暂住地，就是安徽省了。

我们十分开心，继续走南闯北，业绩辉煌。

我们在中国引发了一场没有硝烟的战争，全国人民都投入到抗战中，天天用消毒水喷养鸡场、养鸭场，连运鸡、鸭的车上也喷了消毒水，使我们无从下手。可是我们仍不死心，以与中国交界的城市为大本营，还在北京、安徽、广州等地扎下根据地，搅得那里鸡犬不宁。但是，好景不长，科研所的叔叔阿姨们每天在加紧研制消灭我们的.药物及预防我们的疫苗。我们的军队在中国人民万众一心的抗击下已经溃不成军了，然而，我们绝不甘心就这样败退，我们还要卷土重来!

禽流感病毒家族 篇6

这场发端于上海、安徽、江苏、

浙江等地的疫情引起了

国内外高度关注，

成为继2003年“非典”之后

对政府公共卫生事件应急机制的

一次巨大考验。

3月10日在上海市第五人民医院（以下简称“上海五院”）呼吸道科，江苏盐城籍、在上海市闵行区经营一家猪肉摊的吴亮亮因呼吸衰竭停止了呼吸，年仅27岁。在此前，上海已经有4人因为相同的症状死亡，夺走他们性命的就是H7N9禽流感病毒。

人感染H7N9禽流感是中国首次发现的新发人畜共患传染病，疫情来势汹汹。目前，H7N9疫情在我国爆发的范围、感染源和传播方式等，都亟待进一步调查和确认。相关专家表示，该病毒在活禽市场检出率最高，目前主要集中在华东地区，但不排除在更大范围内检出的可能性。当前最关键的是要尽快确认H7N9禽流感病例感染的来源，以避免疫情进一步扩散。

未知病毒让专家深感不安

4位死者中的第一位是55岁的李宗成，他在2月11日就出现了病症，2月14日首次到上海五院就诊， 2月28日不治身亡。他87岁的父亲李培洲2月24日发病， 3月4日死亡。李培洲的另外一个已经69岁的儿子、李宗成的大哥李宗星2月19日发病，2月26日也住进同一个医院，幸运地死里逃生。

2月26日，上海市闵行区疾病控制预防中心的专家与上海市公共卫生临床中心的专家来到上海五院会诊，并没有得出李氏父子为病毒所感染的结论。

上海市卫生局后来发布的通报称，上海五院先后向市公共卫生临床中心和市疾病预防控制中心送检了三父子的病例标本，两中心开展了实验室筛查，排除了感染季节性流感、甲型H1N1流感、人感染高致病性禽流感（H5N1）以及非典、新型冠状病毒的可能。

但是复旦大学附属中山医院呼吸内科主任白春学教授并不这么看，2月28日，他被邀请参加上海五院的第二次会诊，他当场表示，患者的症状又像是甲流的症状，那就有可能是一种新的病毒引起的，要求对其做进一步的病毒检测。

当时，白春学对这种可能存在的病毒也有一些不安，当天会诊完之后，他都不敢进家门，为了慎重起见，他将衣服放在外面洗，没敢带回家。

H7N9以前未发现过人的感染情况

一个月以后，上海五院的谜底被解开。3月31日，国家卫生和计划生育委员会通报，在上海和安徽发现3例人感染H7N9禽流感病例。这是全球范围首次发现人类感染H7N9病毒。

令人奇怪的是，李氏三父子中只有父亲李培洲被检测出了H7N9病毒，他究竟是如何染上H7N9病毒的呢？他的两个儿子为何出现和H7N9禽流感类似的症状？目前依旧还是一个谜。

截至4月11日17时，全国确诊感染H7N9禽流感患者增至38人，其中，上海18例、江苏12例、浙江6例、安徽2例，全国共10例死亡，上海一名4岁感染者在4月10日康复出院，这也是第一名康复的H7N9病毒感染患者。而死者李宗成由于没有检测出H7N9病毒，他不在H7N9病毒死亡者的名单上。

让很多科学家感到十分疑惑的是，H7N9亚型流感病毒以往仅在禽间发现，虽然在荷兰、日本及美国等地曾发生过禽间爆发疫情，但未发现过人的感染情况。

另外，尽管在H7N9以上世界上已经分离出25个毒株，但是根据农业部统计，25个毒株均来源于野鸟。另外H7N9甚至在中国从未被发现，以上25个毒株数据全部来自于国外研究机构。

而如今，H7N9在中国突然之间窜入了人间。因此这种病毒目前对中国乃至世界的公共卫生专家和科学家都拉响了警报。

“这次为何会有H7N9感染人，目前还不能够得出可靠的结论。” 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所研究员谭文杰表示。

4月10日下午，在浙江大学医学院附属第一医院的感染病房，本刊记者见到了一位老年H7N9病毒感染者，这位老人姓胡，今年65岁，是余杭区的一位农民。记者从医院了解到，胡姓老人之前因胆囊炎住进浙江大学医学院附属第二医院，但由于其病情危重且有人感染H7N9病毒的迹象，所以转到了浙一医院。经过紧张的检测，4月10日12时，浙江省卫生厅通报，省疾控中心报告这位患者标本检测为H7N9禽流感病毒核酸阳性，最终诊断为人感染H7N9禽流感病例，这也是浙江省目前的第六例人感染H7N9禽流感病例。

“父亲前期的症状主要有咳嗽、发烧，测量时最高达到了38.9度，而且4月6日就开始发烧了。”老人的儿子告诉记者。而在记者问及老人病前是否与家禽接触时，他告诉记者， 他们那儿绝大多数人家都会买鸡吃，鸡是很常见的食物之一。但是H7N9究竟是怎么感染老人的，目前还没有答案。老人之前因胆囊炎住院，在确诊是感染了H7N9后，医院专家组对这种情况都表示不解，因而引起研究方面的重视。

禽流感病毒家族

在禽流感病毒家族中，本次在中国华东地区流行的H7N9只是其中的一种。

鸟类专家、沈阳理工大学生态研究室主任周海翔教授表示，并不是人类提出禽流感病毒的概念以后才有这类病毒的存在，实际上，有一些禽流感病毒已经在鸟类群体中存在了较长的时间，例如以前的鸡瘟就属于此列，并进行了一些分化和演变。

在人类历史上，曾多次发生禽流感疫情，19 世纪末至20 世纪初，该病毒“游历”了欧洲、南美洲、东南亚等地区的一些国家，甚至又远涉万里去了埃及。1983 年和1995 年，禽流感分别在美国和墨西哥又有两次大的爆发。

如今在科学界，流感病毒可分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型。与其“兄弟”乙型和丙型不同的是，甲型流感病毒能够使人、猪、马和禽致病，其中使禽致病的就被称之为禽流感。

湖南省疾控中心流行病学博士刘富强告诉记者，甲型流感也是一个大家族，依据流感病毒中血凝素蛋白（缩写为H）的不同可分为1-16种亚型，根据流感病毒神经氨酸酶蛋白（缩写为N）的不同可分为1-9种亚型，而H不同亚型可以与N的不同亚型相互组合形成不同的流感病毒。如果将它们相互之间进行数学组合搭配，推测应该有144种搭配结果，现实中已经发现了130余种。

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但是实际上，甲型流感病毒要远远多于144种。因为禽流感病毒由8个基因片段组成，包括H、N、PB2、PB1、PA、NP、M、NS，其病毒的命名只由H、N这两种基因名称确定，并没有考虑中间的6个“家族成员”各自的变化。这样同样被称为H1N1的病毒，也不一定是同一种。

显微镜观察发现，甲型流感中H的外观很惹眼，像长矛一样凸起于病毒表面。而H和N这两者从某种程度上决定了病毒进入细胞和最后扩散出细胞的能力。

H是专门负责与感染细胞上受体结合的。通俗地讲，H像是携带了一把钥匙，它通过与活细胞的受体，也就是能和病毒结合的蛋白质相结合，打开了细胞的生命之锁，然后进入细胞。因此，人们称其为病毒感染的“开路先锋”或打开细胞之门的“钥匙”。而N则在病毒完成复制后，撕裂细胞，让复制后的病毒畅通无阻地离开细胞。

根据感染物种的不同，甲型流感可以分为禽流感病毒、猪流感病毒和人流感病毒等。刘富强表示，禽类特别是野生水禽是所有甲型流感病毒的自然宿主，也是感染家禽和偶然感染哺乳动物的病毒池。

谭文杰表示，目前人类感染的甲型流感病毒共有H1、H2、H3、H5、H7、H9等六个亚型。但是禽流感病毒并不容易感染人类，流行性病学调查和研究发现，大多数感染野禽和家禽的流感病毒不引起人类感染，或者仅引起有限的人间感染和死亡。

禽流感病毒家族致病能力的演变

刘富强告诉记者，在过去10年，高致病性和低致病性禽流感病毒已经被发现与人类的感染有关，但是主要是从家禽到人类直接传播的结果，所有这些病毒都未获得在人群有效传播的能力。

目前针对H7N9感染者密切接触者的观察和研究也表明，其并没有显现出能够人传人的特点。不过刘富强表示，由H7亚型禽流感导致的人间感染还未进行广泛的研究，这在未来需要引起足够的重视。？？

H7N9是否在传播实现从低致病性向高致病性的演变？这是目前很多人尤为关心的一个核心问题。刘富强说，H7和H9亚型的低致病性禽流感病毒，以前基本只是导致了人体较轻症状的呼吸道感染或结膜炎。一些导致了感染的鸡鸭大量死亡的H5和H7亚型高致病性禽流感病毒，已经被发现和人类的严重疾病和死亡有关。也正是这样的原因，人类以往忽略了对低致病性禽流感病毒的注意。

但流感病毒的致病性并非一成不变。1994年5月，墨西哥的鸡群中流行H5N2型低致病性禽流感，但到了1995年初，该病毒突然变异成高致病性病毒株，在墨西哥爆发。这些年，由H5N1亚型流感病毒导致的潜在大流行威胁已经引起了很多关注，而由H7亚型导致的人间感染还未进行广泛的研究。

“禽流感对人的致病能力与人体的免疫能力也有关。”谭文杰认为，不同的病毒相遇后交换基因，变异为新型的混种病毒，因此人类对其缺乏免疫力。他打了一个比方，他说包括禽流感病毒在内的流感病毒就像一个时装模特，可以随时更换衣服，通过更换衣服，以不同的形象出现。而我们人体的免疫系统有时候有点健忘，刚开始可能不太识别它，所以流行之初，人类对它的免疫力比较低。在我国爆发的H7N9就属于此类。

目前，世界上还没有专门的人感染H7N9病毒预防疫苗。最近，有人提出，我国应该迅速开发出H7N9病毒预防疫苗，谭文杰表示，目前对H7N9病毒的认识还十分有限，加上样本数量少，其未来是否流行还有很多不确定因素，现在就投入上千万上亿元开发出疫苗还不现实，不过倒是可以进行技术储备和前期研究。

流感病毒检测 篇7

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂和仪器

H7N9亚型禽流感病毒荧光RT-PCR试剂盒购自中山大学达安基因股份有限公司, 批号为:2015002;H5亚型禽流感抗原 (Re-6株) 、H9亚型禽流感抗原:购自哈尔滨维科生物技术开发公司, 批号分别为:2013004, 2013002;新城疫抗原购自哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司, 批号:20150116;病毒RNA提取试剂盒 (离心柱法) 购自中山大学达安基因股份有限公司, 批号:20140724。

1.1.2 仪器与设备ABI 7500荧光PCR仪, 购自美国ABI公司。

1.1.3 样品来源鸡泄殖腔、后拭子共100只采自东莞市常平镇三鸟批发市场。

1.2 方法

1.2.1 核酸提取方法

在1.5m L的无菌离心管内加入50μL蛋白酶K;取200μL样品加入离心管中;加入200μL已含Carrier RNA的裂解液, 漩涡振荡15s充分混匀, 瞬时离心, 72℃, 10min;加入250μL乙醇, 漩涡振荡15s;将混合液全部吸至离心柱, 室温下12000g离心1min, 将离心柱装至新的收集管;将500μL的抑制物去除液加入离心柱, 室温下12000g离心1min, 将离心柱装至新的收集管;将500μL的去离子液加入离心柱, 室温下12000g离心1min, 将离心柱装至新的收集管;将离心柱收集管室温下14000g离心3min除去参与乙醇;将离心柱取出, 放置于新的1.5m L, 打开离心柱盖子, 72℃放置2min;在离心柱膜的正上方加入72℃预热的洗脱液50μL, 静止1min, 14000g离心1min, 核酸-20℃保存。

1.2.2 荧光RT-PCR方法

分别配置H7和N9反应体系, 每管加入反应液A 17μL, 反应液B 3μL。探针检测模式设置为:Reporter Dye1:FAM, Quencher Dye:NONE, Passive Reference:NONE。反应条件设置为:50℃15min, 1个循环;95℃15min, 1个循环;94℃15s, 58℃45s (收集荧光) , 45个循环。阴性质控无扩增曲线Undet, 阳性质控有扩增曲线, Ct值小于等于32结果成立。结果判定:如果H7及N9反应体系FAM检测通道均无扩增曲线或Ct值大于42判为H7N9亚型禽流感病毒阴性;如果H7及N9反应体系FAM检测通道均有扩增曲线, 且Ct值小于等于42判为H7N9亚型禽流感病毒阳性;如果仅H7或N9反应体系仅其中的扩增曲线满足判为阳性, 则只能判定H7亚型或N9亚型禽流感病毒阳性。

2 结果

2.1 H7N9亚型禽流感抗原检测结果

以10-2~10-11各稀释度H7N9禽流感抗原为模板, 用离心柱法提取方法提取核酸, 然后用同一试剂盒方法同时上机检测, 检测结果为H7能检测出1:10-10抗原稀释度, N9能检测1:10-9抗原稀释度, 详细结果见表1。

2.2 特异性试验检测结果

分别用H7N9亚型禽流感抗原、H9亚型禽流感抗原、H5亚型禽流感抗原、新城疫抗原强1:1000稀释, 用离心柱法提取方法提取核酸, 用同一试剂盒方法同时上机检测, 结果为阳性质控、临界阳性质控和阴性质控成立, H7N9亚型禽流感抗原H7反应体系CT值为19.01, N9反应体系CT值为20.22, H9亚型禽流感抗原、H5亚型禽流感抗原、新城疫抗原的H7和N9体系检测结果均为阴性。

2.3 重复性试验

用离心柱法3次平行提取病毒RNA为模板, 同时用同种试剂进行检测, 对其重复性进行分析, 变异系数 (CV) 为1.13%, 重复性良好。

2.4 临床样品检测结果检测100份鸡泄殖腔、喉拭子结果均为阴性。

3 讨论

H7N9亚型禽流感病毒是一种新型重组的A型流感病毒, 2013年2月在中国华东地区首发并呈高度散发状态, 虽然对家禽无症状或低致病性, 但对公共卫生构成了严重的威胁。由于此病对家禽无症状或低致病性, 所以应用快速的实验室检测方法, 对该病进行监测显得尤为重要。荧光PCR技术作为一种快速、准确、特异方法已广泛用于动物疫病监测和发生动物疫情时的早期诊断该方法操作简便, 从核酸提取到出结果仅需3h, 荧光PCR不仅实现了常规PCR从定性到定量的飞跃, 而且与常规PCR相比, 荧光PCR技术由于多使用了一条可与模板互补配对的荧光探针, 提高了特异性, 并且由自动化仪器收集荧光信号, 避免了肉眼判断的主观性, 又可进一步提高灵敏度;荧光PCR技术全封闭反应, 无须PCR后处理, 避免污染, 保证了结果的可靠性和重复性。根据试验结果, 应用建立的荧光RT-PCR方法检测H7N9亚型禽流感抗原, H7体系可以检测到1:10-10抗原稀释度, N9体系能检测到1:10-9抗原稀释度, 且对H9亚型禽流感抗原、H5亚型禽流感抗原、新城疫抗原无交叉反应, 重复性试验变异系数为1.13%, 证明该方法敏感度比较高, 特异性好, 重复性好, 适合大规模的动物疫病监测。

参考文献

[1]Y.M.Saif, 等.禽病学[M].第11版.北京:中国农业出版社, 2005:147-166.

[2]朱闻斐, 等.H7亚型禽流感病毒概述[J].病毒学报, 2013, 29 (3) :245-249.

[3]张险朋, 等.三种核酸提取方法检测禽流感病毒的比较[J].动物医学进展, 2014, 35 (11) :116-119.

[4]Gao R, et al.Human infection with a novel avian-origin influenza A (H7N9) virus[J].N Engl J Med, 2013, 368 (20) :1888-97.

流感病毒检测 篇8

1 材料

1.1 血液样品

在湘西自治州已免疫禽流感灭活疫苗 (H5N1亚型, Re-1株) 的A、B、C、D 4个鸭场中, 分别于免疫后0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 14, 18, 22周选取10只家鸭进行采血, 每只采1.0 mL, 共480份。其中A、B两场只免疫1次, C、D场首免后3周加强免疫。

1.2 主要试剂

H5、H7亚型禽流感灭活抗原和H5、H7亚型禽流感标准分型血清及1%鸭红细胞悬液、pH值为7.2的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液 (PBS) 、阿氏液 (红细胞保存液) , 均购自哈尔滨兽医研究所。

2 方法

2.1 血清的分离

将血液样本置37 ℃温箱里过夜, 第2天取上清液, 若上清液中混有红细胞, 3 000 r/min离心3 min, 上清液即为血清。

2.2 新鲜1%鸭红细胞悬液的制备

采3只健康非免疫鸭的血液与等体积的阿氏液混合, 用PBS洗涤3次, 每次均以2 000 r/min离心5 min, 洗涤后用PBS配成1%的红细胞悬液, 4 ℃保存, 备用。

2.3 H5、H7亚型禽流感病毒灭活抗原血凝效价的测定

采用微量法进行血凝 (HA) 试验。

结果判定:将板倾斜, 观察红细胞有无呈泪滴状流淌。完全血凝 (不流淌) 的抗原或病毒的最高稀释倍数代表1个血凝单位 (HAU) 。

2.4 血清样品中H5、H7亚型禽流感病毒抗体血凝抑制效价的测定

采用微量法进行血凝抑制 (HI) 试验。

结果判定:当阴性对照孔血清效价不大于2 lb, 阳性对照孔血清误差不超过1 lb, 试验有效。以100%抑制4个HAU抗原凝集的血清最高稀释倍数作为该血清的效价, 即血清效价。血凝抑制效价小于或等于4 lb为免疫效力低下, 大于或等于5 lb判为免疫合格, 并计算合格率及几何平均效价。

3 结果

3.1 H5亚型禽流感病毒抗体检测结果

3.1.1 各鸭场免疫后抗体水平与时间关系

结果见图1。

由图1可知, 各鸭场HI抗体水平消长规律基本一致。在免疫后1～2周开始显著上升, 在4～5周达到最高水平之后开始有一个平缓的下降过程。但是, A、B两场免疫后各周的抗体水平相对较高, 这说明采取2次免疫的效果要明显优于只免疫1次的。

3.1.2 免疫2周后各鸭场免疫合格率

由于所采集的血清中包含免疫后0～2周后家鸭血清, 这时正处于免疫应答阶段, 抗体水平不高, 不纳入免疫合格统计范围。A、B、C、D 4个鸭场免疫2周后的血清各90份, H5亚型禽流感病毒抗体合格率分别为65.56%、67.78%、53.33%、47.78%, 经计算总体合格率为58.61% (见表1) 。

3.2 H7亚型禽流感病毒抗体检测结果

所检测的A、B、C、D 4个鸭场均未免疫H7亚型禽流感疫苗, 480份家鸭血清用血凝抑制试验也没有观察到血凝抑制现象, 说明没有H7亚型禽流感病毒抗体, 即没有感染H7亚型禽流感病毒。

4 讨论

试验对湘西自治州免疫过H5N1亚型高致病性禽流感疫苗的规模化鸭场进行H5和H7亚型禽流感病毒的抗体进行监测, 目的是了解规模化鸭场H5N1亚型高致病性禽流感疫苗免疫的效果, 了解规模化鸭场中是否存在H5和H7亚型禽流感野毒感染。

试验结果表明:4个免疫了H5N1亚型禽流感疫苗的鸭场禽流感H5抗体总的合格率为58.61%, 合格率偏低, 这可能与免疫程序、免疫时间以及疫苗的选择有关。从各个场的情况来看, 采取免疫2次的A、B场的抗体合格率明显高于只免疫1次的C、D场, 并且抗体下降的趋势也更缓慢;因此临床上免疫应采取首次免疫3周后加强免疫1次的方式。但是临床上有相当多的养殖户为了节省劳动量, 选择只免疫1次, 这是总体免疫效果不好的一大原因。

由于血凝试验和血凝抑制试验不能区分野毒感染产生的抗体和疫苗毒产生的抗体, 故不能完全肯定所检测到的阳性样品中全部为疫苗接种产生的抗体, 但是从4个鸭场未免疫前家鸭的H5抗体水平都很低, 几乎都没有产生血凝抑制的结果来看, 即使有野毒感染, 感染率也应该较低。对于H7亚型禽流感, 目前国内还没有疫苗, 4个鸭场也没有检测到H7亚型禽流感病毒阳性的血清, 说明H7亚型禽流感病毒在规模化鸭场的感染率也是很低的。

综合此次调查结果, 对湘西自治州规模化鸭场的禽流感防制工作提出以下几点建议:加强家禽疾病防治工作宣传, 使农民和养殖户认识到禽流感的危害以及防制工作的重要性, 保证家鸭禽流感免疫工作的顺利开展, 对鸭群提供完全的保护;加强或强制疫苗免疫, 加大家鸭高致病性禽流感疫苗免疫的普及率, 且要及时监督反馈免疫效果;注重生物安全措施, 防止家鸭与野禽接触, 尤其在候鸟迁徙途经之处加强防控;水禽与陆禽分开饲养, 切断禽流感由家养水禽向陆禽传播的途径;选用有效疫苗, 制订合理的免疫程序并每年坚持定期检测抗体水平, 保证免疫抗体的保护效果;相关防疫部门建立切实可行的家鸭禽流感防制机制。

摘要：为了研究湘西自治州规模化鸭场的高致病性禽流感的免疫情况和潜在的感染风险, 笔者于2008年从湘西自治州各县市采集了规模化鸭场血清标本共480份, 采用血凝试验和血凝抑制试验对4个免疫了H5亚型禽流感病毒灭活疫苗的规模化鸭场的不同日龄家鸭进行了H5和H7亚型禽流感病毒抗体的检测。结果表明:4个规模化鸭场H5亚型禽流感病毒抗体合格率分别为65.56% (59/90) 、67.78% (61/90) 、53.33% (48/90) 、47.78% (43/90) , 说明规模化鸭场的H5亚型免疫抗体水平还有待提高, 以对家鸭提供确实的保护;H7亚型禽流感病毒抗体阳性率为0, 规模化鸭场没有H7亚型禽流感病毒感染。

流感与流感病毒 篇9

背景资料

在人类历史上, 出现过多次由各种病毒引起的大规模传染病, 近几年爆发的就有非典 (SARS) 、流感等。

流感是由流行性感冒病毒 (流感病毒) 引起的一种急性呼吸道传染病。

流感病毒结构自外而内可分为包膜、基质蛋白以及核心三部分。

包膜是包裹在基质蛋白之外的一层磷脂双分子层膜, 这层膜来源于宿主的细胞膜, 成熟的流感病毒从宿主细胞出芽, 将宿主的细胞膜包裹在自己身上之后脱离细胞, 去感染下一个目标。包膜中除了磷脂分子之外, 还有两种非常重要的糖蛋白:血凝素 (H) 和神经氨酸酶 (N) 。这两类蛋白突出病毒体外, 长度约为10至40纳米, 被称作刺突。一般一个流感病毒表面会分布有500个血凝素刺突和100个神经氨酸酶刺突。

基质蛋白构成了病毒的外壳骨架, 骨架中除了基质蛋白 (M1) 之外还有膜蛋白 (M2) 。基质蛋白与病毒最外层的包膜紧密结合, 有保护病毒核心和维系病毒空间结构的作用。

病毒的核心包含了贮存病毒信息的遗传物质以及复制这些信息必需的酶。

根据流感病毒感染的对象, 可将病毒分为人类流感病毒、猪流感病毒、马流感病毒以及禽流感病毒等。其中, 人类流感病毒根据其核蛋白的抗原性可以分为三类:甲型流感病毒 (又称A型流感病毒) , 在动物中广为分布, 能造成世界流感大流行;乙型流感病毒 (又称B型流感病毒) , 仅在人与海豹中发现, 常引起流感局部爆发, 不会引起世界流感大流行;丙型流感病毒 (又称C型流感病毒) , 仅在人与猪中发现, 以散在形式出现, 一般不引起流行。

在核蛋白抗原性的基础上, 流感病毒还根据H和N的抗原性分为不同的亚型。根据世界卫生组织1980年通过的流感病毒毒株命名法修正案, 流感毒株的命名包含6个要素:型别/宿主/分离地区/毒株序号/分离年份 (HmNn) , 其中对于人类流感病毒, 省略宿主信息, 对于乙型和丙型流感病毒省略亚型信息。例如A/swine/Iowa/15/30 (H1N1) 表示的是核蛋白为A型的, 1930年在Iowa分离的以猪为宿主的H1N1亚型流感病毒毒株, 其毒株序号为15, 这也是人类分离的第一支流感病毒毒株。

1996年至2012年, 荷兰、意大利、加拿大、美国、墨西哥、英国都报告过人类感染H7流感病毒的病例, 大部分感染和家禽中暴发的流感有关。这些感染主要导致结膜炎和轻度上呼吸道症状。唯一一例死亡病例发生在荷兰。

H7N9是全球首次发现的新亚型流感病毒, 于2013年3月在上海和安徽两地率先发现。经调查, H7N9流感病毒基因来自于东亚地区野鸟和中国上海、浙江、江苏鸡群的基因重配。

感染H7N9病毒的绝大多数病人会出现严重肺炎, 症状包括发烧、咳嗽、气短。不过, 对于感染甲型H7N9流感病毒后可能产生的全部症状, 目前认知仍是有限的。至2013年7月, 全国共报告确诊病例130余例, 其中40余例死亡。

试题设计

1.关于甲型H1N1流感病毒与H5N1禽流感病毒的有关比较, 错误的是 ()

A.均使感染者发烧, 因此两者抗原相同

B.感染不同的人后所引起的患病程度可能不同

C.感染正常人体后均能引发特异性免疫反应

D.均可能发生基因突变而改变传染性

2.“达菲” (又名磷酸奥司他韦) , 是目前人们公认的抵抗甲型H1N1流感病毒的有效药物之一。该药能抑制流感病毒表面的一种蛋白质———神经胺酸酶 (N) 的作用, 从而使流感病毒不能从宿主细胞中释放出来。下列判断正确的是 ()

A.“达菲”能阻止甲型H1N1流感病毒在人体细胞内的繁殖

B.“达菲”能阻止甲型H1N1流感病毒在人体细胞间扩散

C.“达菲”能使甲型H1N1流感病毒丧失对人体细胞的识别能力

D.“达菲”能使甲型H1N1流感病毒中控制神经胺酶的基因发生突变

3.有人试图通过实验来了解H5N1禽流感病毒侵入家禽的一些过程, 设计实验如下:

一段时间后, 检测子代H5N1病毒的放射性及S、P元素, 下表中对结果的预测中, 最可能发生的是 ()

4.禽流感是由禽流感病毒 (一种非逆转录RNA病毒) 引起的急性传染病, 能感染人类。研究者针对禽流感病毒进行了相关研究。请回答下列问题:

(1) 禽流感病毒遗传物质的基本组成单位有__种。对禽流感病毒的基因测序时, 主要工作目标是测定禽流感病毒__。

(2) 病毒除感染家禽外, 还能感染其他哺乳动物, 说明不同种类的被感染细胞表面具有相似的__, 体现了细胞膜具有__的功能。在被感染的细胞中, 通过RNA复制与__过程合成病毒蛋白, 从而产生子代病毒, 机体被感染细胞的清除可通过免疫反应实现。

(3) 某男子感染了禽流感病毒并已产生相应抗体, 无明显病症, 但这并不能保证他短期内再次感染时不会成为禽流感患者, 理由是__。

5.2009年世界上发现了能感染人类的高致病性甲型H1N1流感病毒。我国参与了抗击甲型H1N1流感的国际性合作, 并已经研制出甲型H1N1流感疫苗。下图所示为甲型H1N1病毒在人体细胞中的一些变化以及相关反应。请回答:

(1) 甲型H1N1流感病毒侵入到人体后, 机体往往先通过图中__过程 (填标号) 阻止病毒的散播, 再通过图中__过程 (填标号) 予以消灭。

(2) 图中b的作用是__, c的作用是__。

(3) 人体细胞中蛋白质的合成与甲型H1N1流感病毒蛋白质的合成过程相比, 主要区别是____。

(4) 注射甲型H1N1流感疫苗可预防甲型H1N1流感, 疫苗作用的原理是__。对鸡蛋过敏者不宜注射甲型H1N1流感疫苗, 其原因是___。

(5) 制备单克隆抗体也是治疗甲型H1N1流感的方案之一。以能产生抗H1N1流感病毒抗体的浆细胞和骨髓瘤细胞为材料, 能够制备出单克隆抗体的方案是__。

(1) 将骨髓瘤细胞中的癌基因导入上述浆细胞中, 并使癌基因表达

(2) 将控制合成抗H1N1流感病毒抗体的基因导入骨髓瘤细胞, 并使目的基因表达

(3) 将能产生抗H1N1流感病毒抗体的浆细胞和骨髓瘤细胞融合, 筛选出杂交瘤细胞并进行体外大规模培养

(4) 将控制H1N1流感病毒抗原的基因导入骨髓瘤细胞, 并使目的基因表达

6.某研究小组为研制预防禽流感病毒的疫苗, 进行如下简要的操作流程:

(1) 实验步骤 (1) 所代表的反应过程是__。

(2) 步骤 (2) 构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和__酶, 后者的作用是将用限制性内切酶切割的__和__连接起来。

(3) 如果省略步骤 (2) 而将大量扩增的H基因直接导入大肠杆菌, 一般情况下, 不能得到表达的H蛋白, 其原因是H基因在大肠杆菌中不能__, 也不能__。

(4) 步骤 (3) 中, 通常要使用__处理细胞, 使大肠杆菌成为感受态细胞。

(5) 为了检验步骤 (4) 所表达的H蛋白是否与病毒H蛋白有相同的免疫反应特性, 可用__与__进行抗原—抗体特异性反应实验, 从而得出结论。

(6) 步骤 (4) 和 (6) 的结果相比, 原核细胞表达的H蛋白与真核细胞表达的H蛋白的氨基酸序列__ (相同/不同) , 根本原因是__。

7.科学工作者利用基因工程研制出两种甲型H1N1流感病毒疫苗, 为检测两种疫苗的免疫效果, 以小鼠为实验材料进行实验, 实验处理及结果如下表:

注:“-”表示免疫应答效果不显著, “+”的数目表示免疫应答效果的显著程度。

(1) 重组细菌进入小鼠的巨噬细胞内, 利用__细胞的表达系统合成抗原蛋白。

(2) 设置第2组和第4组作为对照, 其目的是__。检测结果显示, 未重组细菌和未重组空白载体__ (能/不能) 刺激机体产生体液免疫。

(3) 每组实验需要接种3次, 利用再次免疫具有__的特点, 使实验结果更加显著。效应T细胞可来源于__。

(4) 本实验可以得出的结论:

(1) ____________;

(2) ___________。

8.H7N9型禽流感是一种新型禽流感, 由颗粒型重配病毒引起, 于2013年3月底在上海和安徽两地率先被发现。该病重症患者病情发展迅速, 表现为重症肺炎, 体温大多持续在39℃以上。下图为某患者体内一些生理过程的示意图, 其中 (1) ~ (6) 表示体内的激素或免疫物质。请据图回答问题:

(1) 患者的发热症状主要是由激素 (3) 的作用造成的, 激素 (3) 的名称是__-。当其含量过高时, 激素 (2) 的变化趋势是__。据图可知人体调节内分泌活动的枢纽是__。

(2) 患者因在服药后大量出汗而使尿量减少, 参与此过程调节的激素是__ (用数字表示) , 其作用的靶器官是___。

(3) (6) 表示免疫活性物质, 其中属于信号分子的是__;能清除体液中抗原的是__;在非特异性免疫过程中发挥作用的是__。

(4) 若患者一段时间后康复, 参与此过程的调节机制是__。

9.病毒的RNA分为三类, 即正链RNA[ (+) RNA]、负链RNA[ (-) RNA]和逆转录RNA, 分别存在于三种不同类型的病毒中。正链RNA能与核糖体结合, 具有mRNA的功能;负链RNA必须在病毒颗粒携带的转录酶的作用下转录成 (+) RNA才具有mRNA的功能;逆转录RNA在逆转录酶的作用下合成DNA, 整合到寄主的DNA中, 再转录合成mRNA。SARS病毒与HIV病毒虽然同是正链RNA病毒, 但二者遗传信息的传递及表达是不同的。SARS病毒遗传信息的传递及表达可以用以下左侧概念图表示, 请完成右侧HIV病毒遗传信息的传递及表达的概念图。

10.2009年3月底开始, 美国、墨西哥等国接连爆发大规模甲型H1N1流感疫情, 并迅速蔓延至北美地区以外的国家, 全球拉响防疫警报。某学校生物兴趣小组的同学通过查阅资料发现, 常见的流感病毒都是RNA病毒, 提出疑问:甲型H1N1流感病毒的遗传物质是DNA还是RNA?下面是该兴趣小组设计的实验步骤, 请将其补充完整:

(1) 实验目的:_____。

(2) 材料用具:显微注射器, 甲型H1N1流感病毒的核酸提取液, 猪胚胎干细胞, DNA水解酶和RNA水解酶等。

(3) 实验步骤:

第一步:把甲型H1N1流感病毒核酸提取液分成相同的A、B、C三组, ____;

第二步:取等量的猪胚胎干细胞分成三组, 用显微注射技术分别把A、B、C三组处理过的核酸提取物注射到三组猪胚胎干细胞中;

第三步:将三组猪胚胎干细胞放在相同且适宜的环境中培养一段时间, 然后从培养好的猪胚胎干细胞中抽取出样品, 检测是否有甲型H1N1流感病毒产生。

(4) 请预测结果及结论:

(1) ________;

(2) ________;

(3) 若A、B、C三组出现甲型H1N1流感病毒, 则甲型H1N1流感病毒的遗传物质既不是DNA也不是RNA。

参考答案

1.A提示:决定病毒抗原特异性的是病毒表面的蛋白, 甲型H1N1流感病毒与H5N1禽流感病毒表面的蛋白不同, 故抗原不同。

2.B提示:病毒无法释放, 从而不会在人体细胞间扩散。

3.D提示:家禽体细胞在含32 P的培养基中连续培养后, 核酸被32 P标记;家禽体细胞在含35S的培养基中连续培养后, 氨基酸被35S标记。H5N1禽流感病毒被3 2 P的家禽体细胞中连续培养后, 核酸被3 2P标记。核酸被3 2P标记的H5N1禽流感病毒侵染氨基酸被3 5S标记的家禽体细胞时, 进入细胞的是核酸, 蛋白质未进入。由于合成子代病毒核酸和蛋白质的原料来自家禽体细胞, 所以子代蛋白质全部含有35S, 核酸少数含32P。

4. (1) 4 (RNA上的) 核糖核苷酸序列

(2) 受体 (糖蛋白) 信息交流 (信息传递) 翻译细胞

(3) 病毒可能发生变异

5. (1) (1) (2) (5) (6) (7) (8) (1) (2) (3) (4)

(2) 与抗原特异性结合使靶细胞裂解, 释放其中的抗原

(3) 前者有转录过程, 后者没有

(4) 接种疫苗可诱导人体产生特异性免疫, 获得记忆细胞, 当该种抗原再次侵入时, 记忆细胞会迅速增殖、分化, 形成抗体, 产生抵抗力

疫苗是由在活鸡胚中培养的病毒 (灭活后) 制成的

(5) (1) (2) (3)

6. (1) 反转录

(2) DNA连接载体H蛋白基因

(3) 复制合成H基因的mRNA

(4) Ca2+

(5) 大肠杆菌中表达的H蛋白康复动物 (鸡) 的血清

(6) 相同表达蛋白质所用的基因相同

7. (1) 重组细菌

(2) 排除空白载体和未重组细菌的干扰 不能

(3) 迅速、强烈T细胞和记忆细胞

(4) (1) 两种疫苗都能诱导机体产生特异性免疫应答 (2) 重组细菌疫苗诱导机体产生特异性免疫应答的效果好于重组DNA疫苗

8. (1) 甲状腺激素下降下丘脑

(2) (5) 肾小管 (或肾小管和集合管)

(3) 淋巴因子抗体溶菌酶

(4) 神经-体液-免疫

9.

10. (1) 探究甲型H1N1流感病毒的遗传物质是DNA还是RNA

(3) 分别用等量的相同浓度的DNA水解酶、RNA水解酶处理A、B两组核酸提取液, C组不做处理

(4) (1) 若A、C两组出现甲型H1N1流感病毒, B组没有出现, 则甲型H1N1流感病毒的遗传物质是RNA

(2) 若B、C两组出现甲型H1N1流感病毒, A组没有出现, 则甲型H1N1流感病毒的遗传物质是DNA

禽流感病毒 篇10

传统上认为流感病毒具有很强的宿主特异性, 不同宿主的流感病毒尤其是人流感病毒与禽流感病毒, 一般情况下不能在不同宿主间相互传播。人流感病毒同禽流感病毒识别不同的受体, 人流感病毒识别SAa2, 6Ga1特异性受体, 主要存在于人的呼吸道中, 禽流感病毒识别SAa2, 3Ga1特异性受体, 主要存在于水禽的消化道以及呼吸道中。这两种受体在猪体内都存在, 因此猪的种间屏障相对较低, 具有最大限度被人流感病毒和禽流感病毒感染的能力, 通常被称为流感病毒的“混合器”, 不同来源的流感病毒在猪体中可以发生重配, 产生感染更广的病毒。

目前, 已经从禽体内分离到全部16种HA亚型和9种NA亚型病毒, 常见的亚型组合有136种。流感病毒在禽类中宿主范围较广, 家禽和野鸟都能被感染, 迁徙水禽, 特别是鸭类多带毒不发病。按其致病性, 可将禽流感分为非致病性、低致病性和高致病性三大类。非致病性禽流感不会引起明显临床症状, 仅使染病的禽鸟体内产生抗体。低致病性禽流感可使禽类出现轻度呼吸道症状、食量减少、产蛋量下降, 出现零星死亡。高致病性禽流感发病率和死亡率高, 可引起鸡100%死亡, 大多数高致病性禽流感的暴发流行是由H5或H7亚型病毒引起。高致病性禽流感被世界动物卫生组织 (OIE) 列为A类动物疫病, 我国也将其列为一类动物疫病。

你染上“亚爱情流感病毒”吗？ 篇11

面对日渐冷落的爱情，我们看到了一群又一群染上“亚爱情”病毒的患者，他们落寞地在围城外游荡着，虽然对爱情厌了，烦了，却下不了分手的刀子，生怕引起的创伤，会干扰了平静的生活。那么，面对这种温凉爱情，该何去何从？还是赶快找出病根，对症下药吧！因为生活还要精彩地过下去。

一、口述实录（stories）

爱情如水，不喝不行？

姓名：卫捷

性别：男

年龄：30岁

城市：青岛

职业：外贸公司经理

恋期：不确定

症状：多疑功利症

十年前，我以为爱情是“路易十三”，这辈子喝一瓶尝尝鲜就足够了。五年前，我以为爱情是“五粮液”，这辈子或多或少要经历几次。三年前，我以为爱情是“青岛啤酒”，可以按需分配，能喝多少就喝多少。到今天，我终于想明白了：爱情其实就是水，不喝不行。仅此而已。

经历第一次爱情时，我20岁，青春逼人，走到哪里都可以阳光灿烂。我和初恋的女孩可以深夜手拉手穿梭在城市的大街小巷，走到清晨的海边海誓山盟。为了操练“我爱你”这句话，当时的我努力练习了整整一个星期。可惜那场美丽的爱情最终还是破碎了，根源是我没有房子，没有工作，也没有钱，我拿什么来兑现那句承诺？我成了“三无”产品，被无情地淘汰。

经历第二次爱情，我24岁，刚刚大学毕业，找到人生的第一份工作，拿到手的工资刚够开销。虽然那时的我依然对爱情的纯真抱有幻想，但当爱情刚刚来临的时候，我冷静地观察了很久，直到确信她是喜欢我的人，而不是喜欢我的钱时，才狂热地把爱情的遥控器塞给她。可惜，那场爱情还是飞了，因为她发现了另一个更值得她爱的男人。那个男人没我帅，但比我浪漫。那人比我有钱，我约会只能送一张电影票，那家伙居然可以送一张去澳大利亚度假的飞机票。原来，钱才是浪漫之源。

当我29岁的时候，似乎已经对谈情说爱有些麻木了，对爱情引发的种种奇迹也都见怪不怪。这一次，我的爱情更像是一场生意，一场赤裸裸的生意。我先谈我的条件，然后她再谈她的条件。半年后，在双方父母的催促下，我们去婚姻登记处领证。遗憾的是，这场爱情终究没有开花结果。因为就在我们准备领证的关键时刻，我发现她欺骗了我。她所展示的条件里有很多水分，例如她说她只有25岁，可事实上她已经28岁了，而且还离过婚。

我总觉自己经历过的爱情故事就像是一部被人编造好的闹剧。爱情容易让人快乐，但也容易让人受伤。现在的我，已经学会如何平静而忧伤地对待每一份可能来临的爱情，就像面对生命中每一份可能来临的危险。

其妙解说：遭遇过多次情感挫败，因此怀疑爱情存在的可能，这种亚爱情观念的产生是可以理解的。但如果患者因此而一叶障目，陷入游戏人生的状态，恶性循环的结果只能是伤害自己。调整自己的心态，在感情上要善待自己。

给我一个温暖的拥抱

姓名：藤上风铃

性别：女

年龄：24岁

城市：安庆

职业：广告策划

恋期：13个月

症状：冷战压力症

最烦吵架，可吵架不断；最烦冷战，可冷战没完。过去都说七年之痒，可现在变了，一切速度都成倍地增长，恋爱了一年就觉得腻味，什么都无趣。我开始说他不求上进、生活没有情调，他开始说我过于理想化、不停地给他压力，然后就是争执，再进入冷战，谁也不愿意先理谁，就这么悬着、挂着、沉默着。

一年之前我们可不是这样的，想当初我跟他说起那些天花乱坠的美好未来时，他总是会说一定会的，可现在他却说别做梦了，现实点吧；想当初我们经常去那家红茶馆对坐聊到打烊才回家，可现在他说不喜欢在那样的环境里干巴巴地喝茶；想当初吵架后，他立马会打电话给我说 sorry，可现在他却说没错的人是不需要道歉的。有时我会有些心酸，问你是不是不爱我了，如果不爱我就给我自由、放了我，他却又一脸真诚说当然爱了，可是想想你自己吧。

我发现最近，我经常把他拿来和别人比较：说他的衣服穿得没有谁谁有品味，说他的知识没有谁谁丰富，说他的幽默感没有谁谁厉害，也许我是真的对他期望太高？曾经跟死党们聊天的时候聊到他，她们一致认为他是一个好男人，说我要求太高，说我那么说话太伤一个男人的自尊。我久久的怀疑，我激励他是伤了他的自尊了？我不是男人，自然不知道我在说这些话时他的感受，不过看他有时候的眼神好像真的有些哀怨呢。记得他曾经转发过一个网页给我，其中有一句话是这么说的：“爱一个人就要爱他的优点，也要爱他的缺点，爱是接受的过程，不是改变的过程。”这也许就是我们目前沉默的最大原因吧。

其实当初若干次的沉默，总是会在他的妥协之后又恢复生机。或者是一顿安排得很好的浪漫晚餐，因为他知道我最贪吃了；或者是一次短暂的出行；或者是一封真情感人的E-mail……

写到这里，突然想起一个拥抱来。那是在一次争执后，他一天没有来找我，第二天晚上约我出来时，什么话也不说，只在看到我的那一瞬间，紧紧地把我搂在怀里，深情地说想我。那一刻，我觉得什么都不重要了，满脑子都是他的好。也许现在，我也该主动去抱抱他，两个人的温度总比一个人高。

其妙解说：给我一个拥抱，一个吻……有一首歌就是这样温柔地唱着，然后感动了不少人。这样一个小小的动作，在肌肤相亲的瞬间，我们都会产生幸福的感觉。所以，在爱情马拉松的长跑中，我们更需要从细节上关爱对方。尝试着在每次见面和离开的时候，不要忘记给你的宝贝来点这样的温情。很难做到吗？其实不难，习惯成自然的时候，爱情就有了热度的保险。

电话诉衷肠的悲凉

姓名：周小小

性别： 女

年龄： 24岁

城市： 桂林

职业： 办公室职员

恋期： 三年

症状：相思无用症

跟男友认识大概有三年了。惊天动地的一见钟情。孤身一人外出旅游的时候，与他在火车上相遇。 很巧，他也是自己一个人去旅游，而且目的地居然和我的一样。那还用说，肯定是结伴而行了。短短五天的相处，彼此都发现对方是自己此生最投缘的人，人生能得几个知心爱人？于是山盟海誓，非君不嫁。

大家都是在职场上混的江湖儿女，知道现实的残酷，于是便约好了各自努力五年，等有了积蓄，再牛郎织女大团圆。 于是，他回北京，我回桂林，大家各自努力赚钱。 除了本职工作之外，我还兼做业余撰稿人，每天写东西到头大如斗；他为了早日事业有成，一个一个的证书连着考，差点没白了少年头。

但我们之间的残酷是，两个人的距离实在太远，桂林到北京，坐火车需要30多个小时，请不了假，又不舍得买机票。所以，我们一年只能见一次面。然后，只能打电话，写信，发E－mail，体贴他比我工资还少，一直都是我打过去，有一个月，我的电话费近2000元，付费的时候才惊觉。但又不能不打，不打电话，就断了联系，怕他忘记我。

去年国庆的时候终于能有假期见面了，他来桂林看我。两人大门不出，一天到晚腻在宾馆里，休息的时候也不愿意睡，你看着我，我看着你，恨不得一天有100个小时。但我们似乎已经无话可说，除了上次一起旅游的事可以拿出来翻来覆去地回忆外，还能说什么？可以说什么？我们不在一起生活，不在一起工作，不知道平时对方的朋友，对方的休闲。只是因了一时的热情就盲目地爱上，因时间与空间的阻隔根本无法交流，这样的爱情终将流产，我心里明白。

我很现实，但也很讲道义，他现在在单位混得不好，所以我不能主动提出分手。 只能这么拖着，一星期三次电话变成一次，后来变成半个月一次，只等着他自己明白过来。

就这样冷冷地继续着所谓的恋爱，淡如白开水的寒喧问好。这个等待失恋的过程，可能漫长可能短暂，但终于让我明白过来，空间与时间的隔阂真的力量强大。 我在它的面前败下阵来。

其妙解说：两地相思的爱情是危险的，你们之间阻隔着巨大的空间，远水救不了近火。爱情容易走火，容易饥饿。周围的花花世界中又有太多的诱惑在身边招摇，如果不小心有一段好姻缘发生在你身边，拒绝？你不忍心。接受？你矛盾。如果这样的话，处在两难境地的你就要承受矛盾的痛苦选择了。为难自己的感情，这又何必呢？何况旅途中一见钟情的艳遇只适合发生在小说的情节中，要把那样动人的童话变成现实，终究有太多的困难。长痛不如短痛，干脆来个长话短说，做个了断，如此辛苦地拖累了彼此的生活，又有什么意义？毕竟你们面对的未来是如此遥遥无期。青春苦短，为何还要那么挥霍呢？爱情是用来享受的，不是用来空白等待的。

忙碌的工作是爱情的黑洞

姓名：云璐

性别：女

年龄：25岁

城市：北京

职业：建筑师

恋期：五年症状：孤独无聊症

早晨在一个象征性的吻后，只留下一阵匆匆离去的脚步声。男人在外面应酬繁忙，在这个社会看来是再正常不过的事情了，而在一个女人眼中，他忙得连我们相爱五周年的日子都已经完全没有印象了。

两年前，我们搬到了一起，起初的日子甜蜜而让人留恋。我们的小屋布置得舒适而温馨。下班后，我们手牵着手一起去超市买东西。回到家，他就坐在饭桌前，傻笑着看我将一盘盘菜肴端上桌。只有他夸过我做的菜是世界上最好吃的美味，我想那是我最骄傲的时刻。他告诉我，在结婚时，要送给我一个和我长得一模一样的大娃娃，因为他知道娃娃一直是我最喜欢的礼物。我们甚至都已经想好了未来baby 的名字，他说我们的baby会成为世界上最幸福的孩子。但慢慢地，他的工作越来越忙，回家也越来越晚，偶尔回来早时，也是躺在沙发上休息，不爱说话。周末不能在一起的情况已经成为家常便饭，我们之间的摩擦也时有发生。我不明白，曾经拥有的爱情为什么会变成如今这副模样？日子如白开水般平淡无味，而我的心却越来越累。

我轻轻地吹灭一根根点在餐桌上的蜡烛，心也随之渐渐冷下去了。坐在这孤独的黑暗中，我感到一丝凉意漫过身体。披上件深蓝色的大衣，我不愿再呆在这窒息的空间里了。街上，华灯初上，我漫无目的地游荡，看熙熙攘攘的人群映着闪烁的霓虹来来往往。有时我想，是不是我们的缘分已经快到了尽头？但若真的让我放手，我却又分明舍不下这一切。我们就像对方身体里的一部分，平常感受不到什么，一旦失去，就会痛彻心扉。突然，一个花店的橱窗内，一束鲜红的“红衣主教”映入我的眼帘。都已经记不清他有多久没有送花给我了，那份遥远的记忆在心中突如其来：还记得他第一次送花给我时，捧着一大束玫瑰固执地站在宿舍门口那冰冷的夜风里，全然不顾旁人的侧目。他在电话里告诉我，如果我不下楼去接受他的花，他会一直站在那里，直到第二天早上。五年前的今天，一个捧着花站在风中的少年捕获了我的心。我曾偷偷地猜想，他会捧着多少朵玫瑰来向我求婚呢？因为在我们热恋的日子，他总是给了我一个又一个的惊喜。而如今“结婚” 这两个字却让我有了一丝恐惧，我不敢想象婚姻会把我们的爱情拖入一个怎样尴尬的境地。手机屏幕上显示出几行小字：“亲爱的，我要很晚才能回来，你先睡吧，做个好梦。”我关上手机，闭上眼睛，轻轻叹了一口气。今夜，不知会有怎样的梦陪我入眠？

其妙解说：如果每天的工作把你的业余时间挤压到只剩下睡眠，如果生活中只有工作，那么你与机器人又有什么区别？有了钱，你却没有时间享受，感情的温度自然会急速下降。面对冷漠的现实，有时候我们需要一次私奔的刺激。暂时放下工作，两个人去一个陌生的地方，行走在异乡异地，你们的心灵必然会靠得更近。所以有人说，离开是为了回来。如果经历过一段长长的旅行，你们还能轻松地对彼此说“我爱你”。那么，你们可以结婚了，你们未来的生活将是美满而幸福的。感情冷落的时候，不妨发动一次属于你们的共同出走吧。

逃不出初恋的阴影

作者：张贞

性别：男

年龄：24岁

城市：湖北

职业：自由职业者

恋期：半年

症状：初恋后遗症

一个人一生中最难忘的恐怕要数初恋了，周星驰在《幸运一条龙》里充满激情地说：“初恋是一个人一生中最美好的。”听起来好一阵辛酸，我没有像星爷那样的爱情大团圆结局，但是我和他有着同样怀念初恋的情怀。

记得在高中的时候，我暗恋班里一个非常优秀的女孩子，那时 她是我的好朋友，但我觉得自己成绩差，不敢和她有深的接触，竭力压抑着自己的感情。每晚睡不着，辗转反侧脑海里全是她的影子，以致于成绩越来越差，最后，我对上学彻底失去了信心。高三快毕业的时候，我整日放纵自己，自己给自己理由去逃课。有一天，我喝醉酒在家里躺了三天，三天里我想了许多，最后决定给她写一封情书。情书写好后，我托朋友给她送过去，自己却不敢去见她，一个人买了一张车票跑到遥远的广东，期待着她的回音，那时候为了爱情我几乎疯了。后来，她给我写了一封回信，信里的大致意思是：她永远把我当作一个在乎的朋友。那年，她考上了武汉的一所名牌大学，而我只考上了一所很差劲的学院。去年我毕业了，她又考上了研究生，我再也不敢去找她了，觉得自己和她是两个层次的人，信心全无。

然后，我也开始恋爱，只是再也找不到从前为了爱情一个人跑到广东去的疯狂劲了。我总是爱把身边的女孩同她相比，一直想在她们的身上寻觅到她的影子，总是对她们说：你应该去剪一个短发，你应该去把头发烫一下，你的肩太宽了。我的恋人总是因为我太装模作样地挑剔而受不了我，离我而去。

在跳着初恋舞曲的纯真气氛中，周星驰抓住了他的初恋。而我，在失去初恋的日子里，继续寻找着当时的心情，当时的人物。我想只有让时间将初恋那段日子完全洗刷掉，我对爱情才可能重新充满激情和希望。

其妙解说：初恋的美丽是因为带着纯真的感情，全心地投入，所以刻骨铭心。但是初恋夭折的概率又特别高，而得不到的感情又尤显珍贵。要走出初恋失败的阴影无疑需要很大的勇气，虽然时间可以治愈伤痛，但当事人更要努力改变自己的生活。因为你不可能拿着那个影子的形象来要求另外一个女孩子，形象上不可能，个性上更不可能。所以，尽快解开初恋的枷锁，尝试着接受另外一段新鲜的爱情吧。印度诗人泰戈尔说过，如果你因为错过了太阳而流泪，那么你也会错过星星。

二、旁观者说法（sound）

因为冷落而看清内心

滕华：女，25岁，未婚，财经杂志记者

赤名丽香曾是无数男人的梦中情人，据说她那阳光般明亮的微笑足以倾国倾城，但如果男人们皆以赤名丽香为样板来寻找自己的另一半，我估计不少人的结局肯定是终生坚守王老五的阵地。原因无他，日剧、韩剧的魅力只存在于影视剧当中，它与真实生活之间有着太远太远的距离。爱情在电视里被一再美化，可生活中的我们却接连不断地发现自己或对方的丑陋之处。赤名丽香的扮演者铃木保奈美在现实生活中的婚姻生活并不如意，这可能就是爱情对爱情开的一个玩笑。

普天下真能相安无事一辈子的恋人真该为自己的好运大声喝彩，这无异于买彩票中了500万元。身边不断涌现出遭遇亚爱情的痴男怨女，爱情不如意毕竟要比如意的要多得多。作为一个危险的预告，亚爱情的状态多出现在一段感情结束之前。男女双方对感情已经太熟悉，或者忽然间转为陌生，抑或厌倦疲劳，这无味的爱情已经走到了闪着红灯的十字路口。如果恋人在这时候没有足够的耐性等到绿灯的再现，向前跨出那违规的一步也就决定了两人从此各走各的路。当然，也有因祸得福的恋人，亚爱情的红灯提醒了他们之间的疏远，反而让他们重新意识到对方的重要，大彻大悟之后修得个破镜重圆乃至皆大欢喜，实在是件美满的事。

任何一段爱情都不会永远停留在高潮阶段，爱情有如潮水，有潮起，自然也有潮落。高潮时的爱是燃烧着的火焰，恋爱双方恨不能一时间倾其所有的激情和温柔；低潮时的爱是刚刚熄灭的柴火，散发着袅袅轻烟，残留着丝丝温度。爱情降温，不需要惊惶，更不需要看轻自己或者怀疑恋人。一段降温的爱情或许正好让你看清自己的内心，到底爱他或是不爱？对于大多数恋爱中的男女来讲，这不正是最重要的一个问题么？

浪漫需要时间投资

郁毅：男，28岁，未婚，售后服务工程师

平心而论，我对爱情的要求不高，只要我爱的女孩能够和我过太平日子就可以了。要激情要浪漫，那是需要时间经营的，但是我缺少的就是这些。

我的工作是做售后服务的，经常要去全国各地出差，所以和女友约会的频率只能牵强到一星期一次，有时甚至是半个月一次。这是不得不面对的事实。身心疲惫的时候，人是无心去考虑什么浪漫约会的，只要看到对方的微笑就很开心了。我想大家都在为未来不断打拼，如果没有足够的经济实力做基础，那么爱情也只能是空中楼阁。我身边有不少朋友都忙着赚钱养房子，没办法，这就是现实。感情有所冷落不可避免，同时也是对彼此的一种考验。如果无法顺利跨过这个坎，以后遭遇了风雨又怎么办？

不过，我也了解女孩子多数还是喜欢浪漫的。所以，我偶尔会买张戏票给她，或者骑车带她出去郊游，她都会很开心。两个人只要有深厚的感情基础，我并不害怕这种“亚爱情”的危机会有什么严重后果。

三、测试（test）——爱情测温是非问答：

1. 他是否在你面前显得愈来愈沉默、愈来愈缺少话题，但是在其他朋友面前，他依然很活跃？

2. 他是否已经很少和你谈及工作情况或身边的人际关系？

3. 你逗他说话，他是否会显得心不在焉？

4. 他是否刻意减少和你见面的次数，时常用不同借口逃避见面？

5. 若你和他已经结婚或同居，他下班后是否并不急着回家，而是留下工作，或者喜欢和同事在外面happy一下？

6. 他现在的笑容是否比以往少了，取而代之是那可有可无的表情？

7. 他是否有意避免与你的身体接触？

8. 你是否发现过他找其他人倾诉，而不再找你？

9. 他是否不再像从前那样对你嘘寒问暖？

10. 如果他身体不舒服，你劝他去看医生，他回复你的语气是否带着不耐烦？

如果以上是非题中，你的回答超过一半是YES，那么你要注意了，你们之间的爱情可能已经陷入了一种疲倦阶段，亚爱情已经悄悄地侵袭了你们的生活，你应该警觉起来了。建议你们面对面坐下来，推心置腹地谈一下自己的感受，这样有助于找出你们冷漠关系的原因。亡羊补牢，为时未晚。

坦然应对“亚爱情”

文/章震宇（心理学专家）

21世纪的今天，随着物质生活水平的不断提高，人们越来越强调生活的质量，越来越关注自身的健康。生活的高质量需要健康的生活方式作为支持，而健康的生活方式更依赖于积极的认知理念指导。

爱情作为人类生活中最绚丽的华彩乐章，一直是被人们倍加关注的情感主题。在商品经济的大潮冲击下，现代人的情爱观正在悄悄发生着裂变，中国人已经从低质量、高稳定的婚姻关系中走出，正在追求高质量且动态平衡的情感生活。

在追求爱情的征程中，有的人伤痕累累，始终痴心不改；有的人困顿疑惑，彷徨踌躇不前；有的人勇往直前，紧握幸运之手。我们无从统计，在体验了“曾经沧海难为水”的斑驳，有多少男女仍然能够保持“除却巫山不是云” 的率真；我们无法回答，跌宕起伏才算爱情，还是平平淡淡才是真；我们也难以预言，是理想主义者能够找到爱情，还是现实主义者能够赢得幸福。不过，我们完全有理由以积极的心态来面对生活，我们完全有能力用自己的选择来迎接未来。

爱情有规律可循

第一条应该是选择。大多数人在追求爱情的时候，总是不由自主地问自己，他（她）是不是最适合自己的人，他（她）能否给自己带来一生的幸福。其实，如果能够设身处地站在对方的立场上，感同身受地思考，我是不是最适合对方的人，我能否给对方带来一生的幸福，这才是完整意义上的选择，因为选择是双向的，只有价值观的吻合才能共同创造美好的爱情。

第二条应该是平等。《简·爱》中有一句名言：通过坟墓我们将平等地站在上帝面前。平等不单纯是物质上的对等，更是双方心理上的平衡，综合物质精神各要素的平衡。并且这种平衡应该是一种动态平衡，只有双方都是发展的，这种平衡才是稳定的，如果有一方静止，或者双方都静止，爱情就会成为一潭死水，就可能将爱情送入坟墓。

第三条应该是接受。在选择时要睁大眼睛，在接受时要全盘接受，既接受对方的优点，也接受对方的缺点。因为对方是一个活生生的人，你不可能只选择那闪光的一半，舍弃那黯淡的另一半。任何试图去改变对方的奢望，都会化为徒劳的感叹和情感的伤害。因此，千万不要在选择后试图去改变对方，选择之后应该做的是接受，要知道金无足赤，人无完人，想想你自己也不十全十美，就比较容易接受对方的缺点了。

第四条应该是尊重。无论对方是接受自己，还是拒绝自己，都应该无条件地尊重对方的选择。爱情是来不得半点虚假的，任何勉强都会留下自欺欺人的祸根。千万不要以为接受才是尊重，拒绝同样是尊重，不选择或者不被选择，惟一的原因只是因为不适合，适合的才是最好的。

古人用“众里寻他千百度，蓦然回首，那人却在灯火阑珊处”的惊喜来描绘爱情的理想境界，其实爱情中可能更多的是“昨夜西风凋碧树，独上高楼，望尽天涯路”的孤独和“衣带渐宽终不悔，为伊消得人憔悴”的折磨。情感生活的美好和健康有可能只是人们梦寐以求的理想境界，现实生活与美好期望之间总是存在或多或少的差距，爱情可以帮助我们走向成熟，无论你在爱情中经历了什么，你得到的都应该是生活的智慧，而不是对生活的畏惧。

“亚爱情”不可怕

所谓“亚爱情流感病毒”，我并不觉得有什么可怕。如果一分为二地看待这个问题，我们很容易发现：一方面既然是流感，人人都会有染上的危险，都会给我们健康的情感生活带来威胁；另一方面，流感恰好是一种警报，提醒你情感生活已经陷入了亚健康状态，你需要及时作出回应，它激发你的抵抗力，有利于提升情感生活的健康水平。

从来没有听说过，有谁被流感病毒感染，一次，两次，三次，或者多次，就会终身是病人，再也难以恢复健康。但是，有一个关于猫的故事却发人深省：有一天，一只猫跳到一只正在加热的炉子上玩耍，结果被烫得“喵呜”惨叫一声跳了下来。从此，这只猫再也不敢跳到炉子上去了，即使在那只炉子冷却了以后。如果有人在情感挫折以后，仍然不改变自己的行为方式，那它恐怕需要向猫讨教一下；如果有人在情感挫折以后，从此再也不敢追求幸福，那他比那只猫又高明在哪里呢？

在人们的情感生活中，有一种所谓的悲剧脚本，有些人由于受到父母不幸的婚恋模式的负面影响，有些 人由于早期的情感创伤，有些人由于性格的弱点，他们习惯于为自己营造一个悲悲切切的情感氛围，给自己安排一个悲剧的角色，在惟妙惟肖地一通演出之后，每次的故事最终总是如愿以尝地走向他被伤害的结局，他总是那个在一隅舔舐自己伤口的不幸者。于是，他再也不敢尝试，远远地躲开那些让他受伤的“炉子”，这才是真正致命的病毒 ——他以为自己有得病的经历，就永远是病人了。

如果在烫伤还没有痊愈的情况下，就急于跳上另一只炉子的猫是盲目的，这就像一个患流感尚未痊愈的病人，却急于锻炼身体，结果只能是病得更重。在还没有从前一段感情的阴影中走出来，就匆忙投入另一段感情，与其说是爱情的驱动，不如说是孤独的作用。这是对对方的一种不尊重，更是对自己的一种不负责。

爱情有潮起潮落，生活有高峰低谷。胡适曾经指出：人生有五种境界，诗歌的境界、散文的境界、小说的境界、哲学的境界、宗教的境界。我想，这五种境界无所谓高低，有的只是不同的风格，诗有诗的清新脱俗，散文有散文的不拘一格，小说有小说的荡气回肠，哲学有哲学的深刻睿智，宗教有宗教的虔诚笃信。同样，爱情在各人的眼中也应该有不同的风格，选择何种风格来谱写自己的爱情乐章是个人的自由，每个人都有选择的自由。每个人都有权利，也有能力选择自己的情感生活，根据不同的环境，不同的心境，灵活地选择生活的境界，只有富有弹性的人生才是充满智慧的人生，不要忘了给自己更多选择的机会，你才有可能与幸福同行。

经常有情侣在一起祈祷上苍，渴求永恒的爱情，祈求爱情的保险良方。虽然他们将信将疑，却还是会在千年古树上系上红绳，在悬崖绝壁挂同心锁，在天涯海角指天盟誓。其实良策只有一条：对生活的细微之处始终保持积极的关注，一个热吻，一个拥抱，一句真挚的赞赏，一个深情的眼神，都会使爱情滋长。莎士比亚曾经说过：播种一个动作，收获一种行为；播种一种行为，收获一个习惯；播种一个习惯，收获一种性格；而性格决定命运。如果你想为爱情求一个护身符，那么请你此时此刻从生活的细微之处入手。你不需要有任何超然的境界，只要领悟到这一鳞半爪，在情感生活中就会受益匪浅。

猪流感病毒研究进展 篇12

1 猪流感病毒的理化性质特征

1.1 形态与结构

SIV是多形性的有囊膜病毒, 常为球形, 直径80～120 nm, 个别丝状体长达数微米, 它常见于刚分离到的病毒颗粒。病毒颗粒有3种蛋白突起, 一种能凝集红细胞的蛋白突起称为血凝素 (hemagglutinin, HA) , 另一种能使病毒颗粒从凝集的红细胞表面释放下来的蛋白突起, 称为神经氨酸 (neuramidinase, NA) 。HA和NA在囊膜上的比例为4∶1～5∶1;膜上的第3种突起称为基质蛋白 (matrix protein, M) , 3种突起均以疏水性氨基酸锚定在类脂膜上。SIV结构可分为3层, 最外层为双层类脂囊膜, 它来自于复制的宿主细胞, 中间层为基质蛋白, 形成一个或若干个球形蛋白壳, 里层是核衣壳, 呈螺旋型对称, 直径9～15 nm, 它含核蛋白 (neucleoprotein, NP) , 3种多聚酶蛋白 (polymerase protein 1, PB1;polymerase protein 2, PB2polymerase protein A) 和病毒单链RNA[6,7]。

1.2 理化特性

1.2.1 pH的稳定性。

猪流感病毒在pH 3.0以下或pH 10.0以上感染力很快被破坏;pH 5.0左右能使SIV血凝素蛋白构型发生改变, 其轻链HA2区溶血序列裸露, 使红细胞发生溶解。

1.2.2 热稳定性。

一般来说, SIV对热敏感, 56℃30min灭活;灭活的顺序为, 病毒颗粒的感染性、神经氨酸酶活性、红细胞凝集活性。病毒在4℃～40℃条件下不稳定, 只能短暂保存, 失去感染性;-10℃～-40℃保存两个月以上, 常使红细胞失去凝集活性;-70℃可保存数年, 冷冻干燥后置4℃可长期保存。

1.2.3 对化学试剂的稳定性。

SIV为有囊膜病毒, 故对乙醚、氯仿、丙酮等有机溶剂均敏感, 200 mL/L乙醚4℃过夜, 病毒感染力被破坏;对氧化剂、卤素化合物、重金属、乙醇和甲醛也均敏感, 10 g/L高锰酸钾、1mL/L升汞处理3min, 750 mL/L乙醇5min, 1 mL/L碘酊5min, 1 mL/L盐酸3min和1mL/L甲醛30min SIV均可被灭活。

2 猪流感病毒的流行病学

2.1 古典猪H1N1亚型

1918年, 在美国首次发生了SI, 同年在匈牙利和中国也有SI发生的记载, 这与最具灾难性西班牙人流感发生的时间一致。当时猪群所表现的临床症状和病理变化与人群中流行的流感有许多相似之处。但直到1931年Shope才分离并鉴定了第一株SIV, 即古典H1N1 SIV[8]。古典H1N1 SIV在遗传进化上与引起1918年西班牙大流感的流感病毒 (H1N1亚型) 密切相关, 它们都来源于共同的祖先:禽流感病毒 (Avian influenza virus, AIV) , 并有很高的相关性。20世纪70年代以前, 古典H1N1亚型SI主要限制在北美地区, 70年代以后才传入亚洲和欧洲。1940～1960年英国、捷克斯洛伐克和西德等国家报道了猪群中存在抗H1N1 SIV抗体, 直到1976年, 意大利首次从猪群中分离到古典H1N1SIV, 与当时流行于美国的古典H1N1 SIV有非常近的相关性, 流行病学调查表明可能是通过猪只贸易从美国传入, 但这次疫情只限于意大利北部, 并没有在欧洲其他国家传播开。直到比利时和法国报道出现古典H1N1猪流感后, 古典H1N1迅速在欧洲大陆传播开来, 此后, 不断有关于古典H1N1从猪群中分离的报道, 核苷酸同源性分析显示分离株与美国古典H1N1 SIV同源性很高, 亲缘关系相近[9,10]。与人H1N1病毒相比, 古典H1N1 SIV很少发生抗原漂移, 这可能是由于SIV所受的免疫压力要远低于人流感病毒。但进入20世纪90年代后, 北美地区猪群中出现了抗原漂移的古典H1N1 SIV[11]。这些毒株不仅在抗原性和遗传性方面与传统的SIV不同, 致病性也发生了变化, 这可能与在猪群中使用疫苗有关[12]。由于病毒的突变, 从而导致SIV更易对人类健康造成威胁[13]。

2.2 类禽H1N1亚型

1979年, 在欧洲猪群中出现类禽H1N1流感病毒, 在抗原性和遗传性方面与北美古典H1N1 SIV有显著的差别, 而与鸭源的H1N1病毒关系最密切。遗传分析表明, 所有的8个基因节段都是禽源的, 表明是禽H1N1病毒跨物种传播到猪[14]。随后, 在德国、比利时、法国和英格兰均检测到类禽H1N1病毒的存在。类禽H1N1病毒可能比古典H1N1病毒具有更好选择优势以及更强的侵蚀力和致病性。传入猪群2年后, 迅速传遍欧洲大陆。目前, 该类病毒已完全取代古典H1N1 SIV, 成为欧洲猪群中主要的H1N1亚型病毒[15]。与人流感病毒、古典猪H1N1病毒相比, 类禽H1N1病毒进入猪群后, 进化速度明显加快。

2.3 类人H1N1和H3N2亚型

血清学监测研究表明人的H1N1亚型流感毒株很容易传递给猪, 偶尔也有从猪群中分离到类人H1N1病毒, 但是该类病毒流行的一个重要特征是不能在猪群中独立存在, 当人H1N1流行株在人群中消失后, 该类病毒在猪群中也不复存在。在实验条件下, 类人H1N1亚型流感病毒已经表现具有猪与猪之间的传播能力, 但在实际中, 大多数毒株在猪群之间的传播并不容易。1938年Shope血清学监测表明, 在自然条件下, 人流感病毒的流行株可以感染猪。1969年, Kundin等人首次从台湾猪群中分离到香港人的H3N2亚型病毒。随后几年内不断有H3N2病毒和抗体被检测或分离的报道, 但没有引起疾病的发生和流行[16]。大量的血清学调查结果表明, 1968年香港H3N2流感毒株与其变异株迅速传到了欧洲美洲的猪群中, 并且在世界范围内的猪群中存在了数年之久, 但都没有引起呼吸道疾病的暴发和流行。此后, 在大陆不断有学者报道分离到人H3N2病毒或从猪血清中检测到人H3N2病毒抗体。2003年李海燕的调查显示在我国东北、华北、华中、华东、华南和西南地区部分猪群中普遍存在H3和H1亚型SIV, 且以H3亚型为主[17,18]。

3 猪流感病毒疫苗的研究

3.1 全病毒灭活苗

目前市场上使用的SI疫苗都是灭活苗, 有单价苗和H1N1与H3N2双价苗, 这类疫苗在欧美多个国家已实现商品化供应。Heinen等比较了疫苗免疫猪和自然感染猪的免疫效果, 发现疫苗免疫猪在攻毒后短期内排毒, 而自然感染猪则得到完全保护分析表明疫苗免疫猪产生了相同或更高的血清HI、病毒中和抗体及核蛋白特异的IgG抗体, 但是鼻黏膜IgA滴度和淋巴细胞增殖反应较低, 这可能解释了免疫后的亚保护状态。目前商品化的猪流感灭活疫苗对预防猪流感虽然发挥了重要作用, 但是对异源和异型病毒不能提供有效保护, 因此灭活疫苗很难有效控制抗原性多变的SIV在猪群中的感染与传播。

3.2 亚单位疫苗

亚单位疫苗是通过物理化学方法或基因工程手段获取病原体主要免疫原蛋白而制成的一种疫苗, 它可以有效避免利用全病原体生产疫苗而导致的生物安全风险, 并有利于提高疫苗中有效成分的浓度、纯度, 以及开发多价、多联疫苗。

3.2.1 DNA疫苗。

将猪流感病毒免疫原 (HA和NA) 基因单独或者与细胞因子 (白介素-6、γ-干扰素等) 编码基因串联后克隆到真核表达质粒中, 然后再将重组DNA质粒导入机体细胞, 通过机体内源性表达并提呈给免疫系统, 诱导宿主产生特异性免疫应答, 发挥保护作用, 这就是所谓的DNA疫苗。最近Tompkins等[19]用表达A型流感病毒M2共同序列的DNA疫苗免疫小鼠, 诱导出M2特异性抗体, 并且对致死性攻毒产生了保护。先用M2 DNA疫苗初免, 再用表达M2的重组腺病毒加强免疫, 提高了与人流感病毒和禽流感病毒M2交叉反应的抗体并且产生了T细胞反应, 实验结果表明, M2 DNA疫苗初免并强化接种, 能对致死性A型流感病毒 (包括H5N1) 攻击产生广谱保护作用[20]。根据SIV的HA、NA、NP和M等主要抗原表位基因构建的猪流感复合多表位DNA疫苗, 在HeLa细胞中表达的重组蛋白具有良好的抗原性[21], 可能是较理想的猪流感候选疫苗。

3.2.2 活载体疫苗。

母源抗体的存在对疫苗接种有负面影响, 不仅延长了感染猪发热和临床症状, 而且与无母源抗体的免疫猪相比, 猪流感病毒对具有母源抗体的免疫猪诱导的肺炎更加严重[22], 因此理想的疫苗还需排除母源抗体的干扰, 而活载体疫苗是很好的选择。被用作载体的包括人腺病毒5型、猪腺病毒3型、猪伪狂犬病病毒、杆状病毒等。Tang等[23]用含有H3N2 SIV HA的重组腺病毒免疫小鼠, 在免疫后2周产生了针对SIV的高水平HI抗体, 初免后3周再加强免疫, 抗体水平大大提高。虽然这些抗体不能中和异源病毒, 但仍能保护免疫小鼠抗异源病毒的攻击。Wesley等[24]对3周龄小猪分别免疫表达HA和表达HA与NP的重组腺病毒混合物, 免疫猪群在4周内均产生了高水平的特异性HI抗体。免疫HA与NP重组病毒混合物的猪群获得了完全保护, 攻毒后无鼻腔散毒和肺部损伤。因此猪群同时接种这两种复制缺陷型腺病毒疫苗对预防猪流感是有效的, 与商品化疫苗相比的另一个优点是没有母源抗体干扰哺乳小猪的早期免疫[25], 并且这种复制缺陷型重组腺病毒不会传播给哨兵猪[26]。

4 结语

综上所述, SI不仅给畜禽养殖造成了重大经济损失, 而且SIV可直接感染人, 导致人类患病或死亡最近以墨西哥和美国为主的全球甲型H1N1流感的暴发更加坚定了对SIV的研究和防控。科学地预防和控制SI, 进而从源头上降低人类流感大流行发生的风险, 在减少世界经济损失和提高人类卫生健康方面, 都具有深远的意义。

摘要：猪流感病毒 (Swine influenza virus, SIV) 是引起猪的急性呼吸道疾病的重要原发病原之一, 常常与其他病原体混合感染造成更严重的损害。此病在世界各地都有发生, 危害严重, 经济损失巨大, 并对人类的健康构成威胁。目前, SIV已遍布美洲、亚洲、欧洲和非洲, 是规模化养猪场普遍存在且难以根除的群发性疾病。而最近发生的以墨西哥和美国为中心的SIV全球暴发事件, 更加拉响了人类对SIV的警钟。文章对SIV的理化性质、流行病学、疫苗等方面的研究情况进行了综述。