尿有形成分分析仪论文（通用7篇）
尿有形成分分析仪论文 篇1
摘要：目的使用AVE-763尿有形成分分析仪 (AVE-763) 与BW-500干化学分析仪 (BW-500) 、OLYMPUS显微镜检查3种方法来分析红细胞、白细胞检查结果的阳性符合率。方法收集门诊、住院患者随机尿标本542例, 同时使用3种方法进行测定, 并按照设定参考范围进行阳性人数统计分析。结果AVE-763与干化学分析对红细胞检测阳性符合率较高, 对白细胞的检测阳性符合率较低;而AVE-763与人工显微镜两种方法检查红细胞与白细胞具有很高的阳性符合率。结论AVE-763全自动尿有形成分分析仪, 利用“视觉技术”做镜检, 对尿液中红细胞、白细胞的识别和分类计数与标准的人工显微镜检查的符合率高, 而且自动化程度高, 操作简便, 能够满足临床需求。
关键词：尿有形成分分析仪,干化学分析仪,OLYMPUS显微镜,符合率
1 材料与方法
1.1 材料
AVE-763全自动尿有形成分分析仪 (湖南长沙爱威科技实业有限公司) 及配套试剂包;BW-500型干化学分析仪 (烟台宝威生物技术有限公司) 及配套试纸条;OLYMPUS双目显微镜 (日本) 。
1.2 标本来源
周口市中医院门诊、住院患者的随机中段尿液542例。
1.3 方法
1.3.1 尿标本收集
用一次性塑料尿杯随机收集上述患者的清洁中段尿, 充分混匀后, 分成3管 (使用一次性尿液专用塑料试管分装) :2管用于分析仪检查, 另一管用于显微镜检查。
1.3.2 分析仪测定法
严格按照仪器说明书操作步骤对每份充分混匀的尿标本进行测定, 并用配套质控物对仪器进行监控。AVE-763在测定过程中标本需要沉降100s, 记录实验结果。
1.3.3 人工显微镜镜检法
取混匀后的尿液标本10mL于一次性尿液专用塑料试管, 以1500/min, 离心5min, 吸掉上清液, 留0.2mL尿沉渣, 按卫生部全国临床检验操作规程进行镜检。
1.3.4 统计学方法
采用χ2检验。
2 结果
在542例随机尿标本中, 用3种方法分别检测红细胞、白细胞进行比较。尿液全自动有形成分分析仪:红细胞≥0～5/HPF为正常, 白细胞≥0～10/HPF为正常。尿干化学分析:红细胞≥25/μL, 为阳性, 白细胞≥70/μL。显微镜检查:红细胞以0～3/HPF为正常, 白细胞以0～5/HPF为正常。AVE-763全自动尿液有形成分分析仪检测红细胞阳性者146例, 白细胞阳性者124例;而干化学分析红细胞阳性者141例, 白细胞阳性56例, 红细胞、白细胞二者符合率分别为97和45%。显微镜检查红细胞阳性138例, 白细胞阳性116例, 与AVE-763尿有形成分分析仪检测红细胞、白细胞两者符合率分别为95%和94%, 见表1、2。
表1显示, 两种方法对红细胞的测定符合率较高, 无显著性差异 (P>0.05) ;对白细胞的测定符合率低。表2显示, 两种方法对红细胞、白细胞的测定具有很高的阳性符合率。
3 讨论
尿液有形成分分析仪是尿液分析中不可缺少的重要内容。尿液分析对泌尿系统疾病、肾脏疾病、循环系统及感染性疾病等有重要的诊断及鉴别诊断意义。由于它能提供大量有价值的临床诊断信息以及标本采集的无创伤性, 一直被临床专家誉为“体外肾活检”。随着科技的发展, 尿液分析的检测水平不断提高, 但在实际工作中, 不同方法间在识别和计数各种有形成分时与标准显微镜的测定结果间存在一定差异。本文采用AVE-763尿有形成分分析仪通过与另外两种方法比较, 来评价该仪器对尿液有形成分的识别准确度和有效性, 为临床提供可靠的诊断数据和信息。
3.1 AVE-763全自动尿有形成分分析仪检测技术
AVE-763全自动尿有形成分分析仪, 利用“机器视觉”技术, 实现显微镜检识别全自动化。通过摄像头在低倍镜下扫描采集, 高倍镜下对所采集的图像进行分析、处理, 并与已建立的各种有形成分的模型数据库进行对比分析, 计数红细胞、白细胞、上皮细胞、结晶等定量结果。该仪器对结晶、真菌、上皮细胞易误判, 但对红细胞的鉴别准确性达95%, 对白细胞的鉴别中, 由于白细胞形态易受尿液渗透压、酸碱度、炎症程度的加重发生变性而出现形态改变。对脓细胞、小圆上皮细胞、移行上皮细胞易误判为白细胞。但该软件具有“人工辅判”和“警告提示”功能, 直接通过选择图象分析即可审核报告, 纠正不必要的错误信息。由此可见, AVE-763全自动尿有形成分分析仪对不能识别或误判的成分可辅以人工识别, 较好地解决了其识别准确性问题, 具有很高的临床应用价值。
3.2 尿干化学分析法
3.2.1 红细胞/血红蛋白测定是利用血红蛋白具有过氧化物酶活性。
即可检测完整的红细胞, 又能检测游离的血红蛋白。此外, 由于某些具有过氧化物酶样的物质[1], 如肌红蛋白、菌尿, 特别在泌尿系统感染中, 大多数革兰阴性菌和某些革兰阳性菌可释放过氧化物酶和超氧化物歧化酶[2], 这些物质和酶在干化学测定红细胞时都能使试剂中的过氧化氢分解出游离氧, 使色源呈色而出现假阳性。其次, 某些肾病患者的尿中红细胞由于各种原因导致破裂, 血红蛋白逸出造成干化学阳性、镜检阴性, 尿试纸浸取尿液时间过长均可导致此种现象。
3.2.2 白细胞的检测原理是基于中性粒细胞胞质内含有特异性白细胞
脂酶, 该酶可催化吲哚酚酯分解出吲哚, 后者再与重氮盐反应呈现紫色化合物, 其颜色深浅与中性粒细胞多少呈比例关系, 但它不与淋巴细胞、单核细胞起反应, 在某些以淋巴细胞、单核细胞感染的疾病的尿液中检测结果会与临床不符。
3.3 人工显微镜检查法
人工显微镜检查法是长期使用的方法, 也是形态学检查的“金标准”。人工显微镜对尿液有形成分分析时严格按照卫生部全国临床检验操作规程进行检查, 定量取混匀尿10mL于离心管内, 以1500r/min离心5min, 弃去上清液, 留沉渣0.2mL混匀后冲入计数板作人工计数。
综上所述, AVE-763全自动尿有形成分分析仪应用视觉技术进行有形成分的检测, 与标准显微镜对红细胞和白细胞的测定结果具有很高的阳性符合率, 与干化学方法对红细胞的检测符合率较高, 且可以通过人工辅判不断完善数据库来进一部增强识别能力, 同时用不离心尿标本检验能够有效地提高工作效率、准确性和标准化程度。
参考文献
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[2]徐银萍, 王胜奎.尿液分析仪与尿沉渣镜检两种方法的比较分析[J].现代检验医学杂志, 2006, 21 (3) :72.
尿有形成分分析仪论文 篇2
1 基本原理
1.1 荧光染色技术
UF-1000i通过吸液管吸入800μL尿液,然后使用旋转阀量选出150μL的沉渣分析样本和62.5μL的细菌分析样本进入不同的通道,并分别进行荧光染色。其中沉渣通道使用0.01%的聚甲炔荧光染料,细菌通道使用0.01%的特异性核酸荧光染料。
1.2 半导体激光流式细胞计技术
系统利用样本注射器将反应室内的染色样本吸入鞘流管路,并通过样本鞘流注射器将固定剂量的样本压入并穿过加注管。为使尽可能多的尿细胞逐个顺畅通过,加压的鞘流液被送入贯流分析池,鞘液包围染色样品形成一个液体通道,通过喷嘴以单柱形式喷出。尿有形成分在其中以单行队列穿过,两种液体不会混合,这表示尿有形成分可以始终从鞘液的中心穿过。用带有稳定波长(635nm)、高能量和高度方向性的红色半导体激光束照射在上述贯流分析池中的样本上,单个细胞会按不同的角度发出荧光和散射光。系统再将这些电信号进行分析,为各有形成分按照荧光强度生成一维直方图,并按照荧光强度和散射光强度生成二维散点图,从而分析各有形成分含量。鞘流技术结构原理见图1。
光学系统由红色半导体激光、贯流分析池、聚光器和检测仪组成。其中,红色半导体激光是UF-1000i硬件方面的一大特点,由于这种激光的采用,使得将激光电源部件设置在本体内部成为可能。另外,虽然前向散射光和荧光的测量点与UF-100相同,但它同时又将侧向散射光、荧光强度分级别、电子基团作为多个检测参数。光学系统结构原理图见图2。
1.3 有形成分的识别
从激光源向前至侧面发出的散射光被称为前向和侧向散射光。前向散射光强度信号主要反应离子的大小信息,侧向散射光信号能反映出细胞的表面状况。
两种染料的荧光脉冲宽度可以反映离子的长度。沉渣通道的0.01%的聚甲炔荧光染料将细胞核的一部分、细胞质和细胞膜染色,高灵敏度荧光强度和低灵敏度荧光强度在电信号放大程度上有所不同。整个低灵敏度荧光脉冲宽度可以反映染色部分的全长,而部分高灵敏度荧光脉冲宽度可以反映粒子中包含物的染色程度;细菌通道的0.01%的特异性核酸荧光染料可以对细菌内的核酸成分进行区别染色,而高灵敏度荧光强度则可以反映细菌染色的强度。
1.4 尿电导率
将两块平行的极板,放到被测尿液中,在极板的两端加上一定的电势(为正弦波电压),然后测量极板间流过的电流。根据欧姆定律,电导率(G)=电阻(R)的倒数,是由电压和电流决定的。
尿电导率表示尿中电流导体的容易度。受尿中离子密度的影响,与尿的浓缩度密切相关,在研究信息中用电导率分级表示。
2 临床应用
(1)UF-1000i能给出十二项干生化结果,其中尿微量白蛋白的检测能用于早期肾损害的诊断,特别是作为糖尿病、系统性红斑狼疮等全身性疾病的早期肾损害的敏感指标。当微量白蛋白大于20mg/L时表明肾脏遭到早期损害。
(2)UF-1000i还能定量给出红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌的分析参数,让临床医生一目了然,根据各有形成分的多少更便于对患者作出明确疾病诊断和疗效观察。同时能提供结晶、酵母样真菌、小圆细胞、病理管型、粘液丝、精子等标记参数和研究参数。
(3)UF-1000i除了提供委托检验项目的定量结果外,产品还能提供用于临床医生早期发现肾脏疾患和诊断治疗指导原则制订的“血尿诊断指导方针”。通过沉渣检验提供用于红细胞形态确认的红细胞形态信息,用于诊断肾性和非肾性血尿。当红细胞大小呈均一性时,为非肾性血尿,即病变来自肾脏以下部位;当红细胞呈均一性时,为肾性血尿,即病变就在肾脏。
(4)白细胞定量和细菌定量及亚硝酸盐定性联合应用可以更好地确诊疾病和帮助临床医生诊断和鉴别诊断泌尿系疾病,更好地观察治疗效果。
如白细胞阳性而细菌及亚硝酸盐阴性,表明为非菌性炎症或炎症刺激。如三者全为阳性即可诊断为细菌性炎症,并可根据白细胞和细菌的多少来初诊病情的轻重和疗效。如白细胞和亚硝酸盐阳性而细菌阴性,说明是含有亚硝酸盐还原酶的细菌感染;如白细胞和细菌阳性而亚硝酸盐阴性,说明主要是不含亚硝酸盐还原酶的细菌感染。如白细胞阴性而亚硝酸盐和细菌阳性,主要考虑为污染所为。
(5)尿液电导率反映尿液中粒子的电荷多少,反映尿液电解质的导电能力,与质点的种类、大小无关,与渗透压正相关,是诊断肾浓缩功能新参数。因此,尿液电导率的分级信息可评价肾脏的浓缩稀释功能,是反映肾脏功能的重要指标。尿液电导率降低见于肾小球肾炎伴肾小管和肾间质病变;显著减低见于肾小管、肾间质结构和功能受损所致肾脏浓缩功能障碍者。
3 小结
UF-1000i型全自动尿有形成分分析仪,是一款采用新型多种特异性核酸荧光染色和多种检测方法等全新技术的尿中有形成分分析仪器。它不仅在技术上先进,结果可靠,操作简便,受到检验科使用者的好评,同时也有很高的临床应用价值,值得推广使用。
摘要：本文简要介绍了UF-1000i全自动尿有形成分分析仪的沉渣检测原理及各主要指标的临床实用价值。
关键词：尿液有形成分分析仪,检测原理,临床应用
参考文献
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尿有形成分分析仪论文 篇3
关键词：尿有形成分,时间,上午10时尿
常规尿液检查要求患者起床后留取晨尿标本。文献指出, 在规定的时间内检测患者晨尿标本, 可以保证尿液中各种有形成分如细胞、管型等保持完整性, 增加尿液检查的准确率, 减少漏检率[1]。留取晨尿标本对于住院患者来说很容易办到, 但对于一些门诊患者来说, 由于种种原因, 不能及时留下晨尿标本进行检查。国内对留取尿液标本的时间选择研究较少。本研究选取上午10时留取的尿液与晨尿进行对比, 探讨在两种时间下尿液有形成分及尿肌酐的变化情况。
1 对象与方法
1.1 研究对象
随机抽取祈福医院2012年1月至2014年1月门诊和住院部705例已确诊的患者, 其中尿路感染235例、泌尿系结石200例、肾小球肾炎168例, 肾结核3例, 继发性血尿 (如肾挫伤、狼疮肾、肿瘤等) 99例。其中男性331例, 女性374例, 年龄16~82岁。
1.2 实验方法
每例研究对象留取早晨7点前第一次晨尿标本, 为A组;留取上午10点的尿液标本, 为B组。每组约为20 m L左右, 都为清洁中段尿, 充分混匀后备用。 (1) 尿沉渣检查:用UF-100型流式尿沉渣分析仪, 严格根据操作步骤, 完成各项操作, 检查尿液红细胞, 白细胞和管型。 (2) 尿肌酐测定:用北京化工试剂厂生产的苦味酸法肌酐测定试剂盒测定尿肌酐, 严格根据操作步骤进行。
1.3 统计学处理
使用SPSS17.0统计软件。数据以均数±标准差 (±s) 表示, 两组间比较采用t检验。P<0.05具有统计学意义。
2 实验结果
晨尿组 (A组) 与10时尿组 (B) 相比, 红细胞、白细胞、管型数无明显差异 (P>0.05) ;A组尿肌酐较B组高 (P<0.05) 。见表1。
注:*A组vs B组, P<0.05
3 讨论
尿沉渣分析是临床上常用的诊断肾脏疾病的检查项目[2], 要求患者留取清晨起床后的第一次尿, 即晨尿。但实际上很多门诊患者无法按照此要求执行, 多是留取随机尿液检查。非晨尿对尿液有形成分的分析结果是否造成影响鲜有报道。
本研究对晨尿和上午10时尿液有形成分进行对比后发现:尿有形成分 (红细胞、白细胞和管型) 在两组的检测结果无明显差别, 研究对象中, 没有发现尿液有形成分中晨尿阳性而10时尿阴性的结果;反而有2例泌尿系结石患者尿红细胞在晨尿为阴性但在10时尿为阳性。造成结果不一致的原因可能因上午患者身体活动结石出现移动所致, 不过没有明显统计学意义。这说明10时尿检测非但不会漏检晨尿的阳性结果, 反而在某些病种有可能提高检测的阳性率。
本研究发现:晨尿肌酐明显高于10时尿肌酐, 可能是由于夜间到清晨这段时间较长, 肌酐排泄量较多;或是由于夜间尿液的浓缩等原因[3], 有待进一步探讨。有实验表明, 尿肌酐的含量与尿量成反比, 尿量少的人尿肌酐含量高, 尿量多的人尿肌酐含量低[4]。所以, 当收集尿标本做内生肌酐清率实验时应充分考虑。
在临床工作中, 采集患者清晨7时左右的尿液标本给患者带来极大不便, 许多患者在家留样时可能造成标本污染, 标本不能在2 h内送达医院检查造成实验室误差[5]。而采用上午10时左右的尿液标本, 可操作性强, 方便使用, 可以减少因尿液标本保存不当引起的检验误差。
综上所述, 10时尿液标本中尿有形成分与晨尿相比无明显差异, 可靠性较高。且对患者来说收集方便, 值得推广。
参考文献
[1]吴鹏, 翁艾罕.UF-1000i全自动尿沉渣分析仪测定尿电导率同尿渗透压参数相关性分析[J].检验医学, 2013, 28 (6) :496-498.
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尿有形成分分析仪论文 篇4
1983年以前,有关尿液有形成分检查一直停留在显微镜检查法这一水平上,其技术延续了200多年。虽有许多改进的方法,如定量的Addis计数法、1h定量计数法、染色法等,仍然是以人工显微镜观察技术为基础。尿液有形成分的自动化进程一般认为始于1983年美国国际遥控影像集团公司(International Remote Imaging System,Inc.,Iris)推出的尿沉渣检查工作站--Yellow Iris,从而改变了尿液有形成分分析技术的历史,开创了自动化分析的时代。1995年日本Sysmex公司推出的UF-100则以流式细胞技术和颗粒计数分析
尿液有形成分的自动化分析设备,目前以检测原理可划分为两大类型,一类是采用模拟显微镜操作技术流程开发的各种影像式尿液有形成分分析仪,采用数字图像分析的方法直接分析尿中的有形成分,简称为数字图像技术;另一类则采用流式细胞分析技术,通过物理或化学的方法对尿中的有形成分进行测定,简称为尿流式分析技术。本文分别介绍其原理和操作流程。
1. 尿流式细胞分析技术
日本Sysmex公司采用流式细胞技术用以保证尿液中各种颗粒成分以单个排列形式高速流经流动计数池(Flowcell),配合经典的DNA/RNA染色技术,对尿标本中的细胞膜、细胞核、细胞质进行特异性的核酸荧光染色,通过半导体激光技术检测细胞,根据不同种类的细胞大小和长度、核酸的含量、结构的复杂程度等信息进行分类计数,具有检查速度快和精度高的特点。目前的UF-1000i系统(图1)还采用了双检测通道(沉渣通道、细菌通道)配合特殊试剂,分别检测细胞和细菌成分,提高了对尿中细菌检查的准确性。该仪器每小时可完成100个尿液标本的测定,可定量报告5项分析参数,可对6种有形成分进行这一独有技术,开创了尿有形成分分析自动化技术的新方法并广为应用,目前此类仪器使用较为普遍,已经有新型号的UF-1000i等系列产品问世。标记和定量计数,另有3项具有临床诊断应用价值的研究性提示信息,还有散点图和直方图配合参数的分析,都是该仪器的特点。
检测原理:标本中的细胞等成分被仪器吸入后,经含有荧光染料的试剂染色后,在鞘流液带动下进入检测部,激光照射通过Flowcell内所有颗粒。仪器根据颗粒的染色和大小特征等信息进行识别判断。在仪器屏幕显示的散点图上(图2),左边两图中X轴代表颗粒的荧光强度(S_FL),它反应细胞膜、核膜、线粒体和核酸的含量,Y轴表示前向散射光强度(S FSC),它表示颗粒的体积大小,这两个图所反映的内容相同,下图是上图的扩展形式;蓝色散点代表白细胞分布情况,红色散点代表红细胞分布情况,粉色散点代表细菌的分布范围。右侧直方图分别表示红细胞和白细胞体积大小分布情况,其中红细胞直方图可用于血尿时红细胞体积大小和分布宽度的判断。仪器另有专门的反映管型、小圆上皮细胞及细菌专用散点图,例如绿色散点代表非病理性管型,橙色散点代表病理性管型等。
将仪器检测并收集到的荧光强度信号、散射光信号、电阻抗信号转变为相应的数据,产生特定的散点图和直方图,从而得到尿中细胞和各种有形成分的初步筛查数据。可得到的分析参数有红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌定量计数结果以及显微镜视野下相应的换算值(1);还可对某些成分,如病理性管型、结晶、精子、小园上皮细胞、酵母菌、粘液丝进行提示性报警(2),这些研究性参数的定量报告和电导率(Cond.)测定报告(3)(图3)。如与尿干化学分析仪器连接,可接收和打印尿干化学结果,形成完整的尿分析报告。
该仪器可对尿中红细胞体积进行分析,可根据红细胞体积大小和是否均一性,初步判断血尿的性质,这对鉴别血尿来源和肾脏疾病的诊断具有一定价值。当仪器在分析尿中红细胞时,80%以上的红细胞体积发生变形或体积变小(<126 ch),仪器的红细胞提示信息会显示“Dysmorphic?”,此时在红细胞体积直方图中可见到红细胞分布明显偏小(图4上),细胞峰值位于直方图的左侧。当80%以上的红细胞形态正常时(>84 ch),在红细胞体积直方图上会见到细胞峰位置偏向右侧,同时会出现“Isomorphic?”的提示(图4下)。当细胞大小比例不能区分大细胞性还是小细胞性时,仪器会提示“Mixed?”,不能鉴别。
该仪器的特点仍然是过筛性实验,当其结果显示为“阴性”时,可以发出报告。当结果显示为“阳性”时,当仪器提示信息显示“REVIEW”信息时,仍然需要进行人工镜下复核,若结果一致可出报告,若结果不符,应以人工显微镜下鉴别判断的结果为准。若仪器筛检标本出现管型、结晶、小园上皮细胞、精子、酵母细胞等阳性提示信息时,仍须人工确认鉴定是何种管型或结晶,以及排除干扰造成的假阳性。
2. 数字影像式尿液有形成分分析技术
该技术以显微镜为基本检测平台,配合数字影像及计算机处理软件形成一类尿液有形成分分析仪器。该类仪器目前发展较快,类型众多,但根据其数字影像拍摄过程,作者将其划分为两大类,一类为样本在平板鞘流液辅助下,在流动过程中拍摄数字影像、经计算机处理识别的仪器;另一类是样本充入特殊的计数板后,应用不同的技术将样本沉淀于计数板后,在静止的状态下拍摄数字照片,再经计算机软件处理和识别的一类仪器。
2.1 流动拍摄型数字影像尿液有形成分分析系统
该类仪器以Iris公司于2002年推出的小型全自动尿液有形成分分析仪i Q200为代表,它的前身是1983年推出的Yellow Iris尿有形成分分析系统。该仪器于2002年通过了美国食品药品管理局(FDA)的认证。仪器可以与日本京都的AUTIONMAX AX-4280型尿液干化学分析系统联合组成尿液分析流水线(图5)。其检测原理是尿液中各种有形成分在鞘流液的包裹下通过流动计数池(flowcell),主要作用是使细胞排成一列通过,尽量避免发生重叠,以方便拍摄可以分割开的图像;第二个作用是细胞在流动过程中,尽量使得细胞的最大平面与全自动智能显微镜的摄像镜头(CCD)保持90℃垂直方向,以方便摄像镜头拍摄有形成分的最大平面图像。细胞和其他有形成分在进入流动池前需经过特殊的试剂做技术处理,使得所拍摄和分析的图像更有特点而易于区分(图6)。
由于这些有形成分是在流动过程中被检测和拍摄照片的,因此该系统也被称为流动式显微镜(Flow Microscope)。这些照片的影像经电脑系统处理后,在屏幕上显示和鉴别类型。它继续沿用其专利技术的全自动智能化显微镜图像分析技术和先进的自动粒子识别(APR™)分析系统,同时配合流式细胞分析技术和粒子呈像分析技术,用于识别和定量分析尿中的12种有形成分,每小时可完成55个样本的测试,并储存1万份以上的图文检验结果。可以依用户定义检测范围自动地给出结果报告和图像报告,可以按要求在监视器上显示出来所拍摄的图像,对不易识别的成分,可通过人工辨认和识别,极大地减少额外手工显微镜分析过程,并可以对一些类型的粒子进行亚分类。图7为i Q-200测定血尿后所显示的屏幕局部,左侧为分割成单个细胞的图像部分,右侧为检测有形成分的类别等。对仪器识别错误的成分,检验专业人员在电脑屏幕上确认后,可使用鼠标点击并将其移到归类的相应的分类中。
而目前采用类似原理的设备,国内也有开发和研制。例如长春迪瑞公司开发的FUS-200尿液有形成分分析仪,采用了流式进样和流动拍摄图像技术(图8),经人工智能软件系统进行有形成分识别和计数,可筛检尿液中的红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、结晶、细菌等12类有形成分,并具有红细胞形态学统计报警信息,具有提示血尿来源的能力。检测速度据迪瑞官方网站说明,可达到每小时120个样本。该系统可以与同品牌的尿干化学分析系统通过连接桥连接,形成FUS-200/H-1000全自动尿液分析系统。系统软件可由用户可定义选择将全部标本进行尿有形成分检测,也可定义当标本中一项或者多项干化学结果阳性时再进行尿有形成分检测。
2.2 静止拍摄型数字影像尿液有形成分分析系统
基于影像处理技术的尿液有形成分分析仪,由于计算机和数字化技术的迅速发展,也在不断推出新的产品,美国戴西斯公司推出的Dia Sys R/S2000系统就是典型代表,由于出现较早,它不具有自动识别和计数的能力。此后许多厂家纷纷推出多种采用显微镜检查原理,配合数码摄像头扫描、流动式或一次性计数板、自动化或半自动化进样设备、电脑软件或硬件系统组成的尿液有形成分分析系统(也叫做尿液分析工作站)。系统检测原理基本相同,都是将尿液标本充入一次性或流动式计数板,由显微镜和摄像头拍摄一定数量的画面,通过计算机显示后由检验人员确认尿液有形成分的数量和类别后打印图文报告。其区别多在使用计数池类型、自动化进样和加样、自动显微镜的应用、染色与否等方面略有不同。
由于尿液中的有形成分种类众多、亚类型众多、体积大小变化无常、无染色处理、某些成分罕见,还可因保存条件、尿渗透压、p H等因素影响会出现较多的改变,因此在识别上比较难。虽然很多系统都做了初步的尝试,可以对常见有形成分进行初步识别和分析计数,但尚未有非常令人满意的系统出现。作者就几个常见设备进行简单介绍和评价。
(1)长沙爱威公司推出的AVE-76系列尿液有形成分分析仪由自动显微镜、流动式计数板、数码摄像头(CCD)、自动进样系统、计算机软硬件系统构成。尿液标本经进样系统混合均匀后,被充入流动式计数板,经过一定时间自然沉淀后开始测定。显微镜可根据要求自动转换低倍和高倍镜头,按照测定程序,仪器首先用低倍镜拍摄8~16幅图片,计算机系统则根据所摄图片上的内容,寻找到可疑目标并进行准确定位,然后自动转换为高倍视野,对定位的可疑目标拍摄8~16幅图片,拍摄图片数量可由用户定义。计算机系统可分别对低倍视野和高倍视野照片中的目标进行分析。计算机系统中已经建立了大量的数据模型库,对所拍摄的图片中的目标进行分析,根据目标大小、颜色、灰度、纹理等各种特征数据进行数字化处理,与系统内已经建立的数据模型进行比对、分析、理解、拟合、处理,参照已建立的模型数据识别该图像所属的类别,被厂家冠名为“机器视觉”,系统还根据有形成分的不同类别,分别进行定量计数,最终以每微升含量的方式给出图文报告。仪器还具有学习功能,通过专家的训练对同类目标进行细化分类和建立数据模型,使其“认识”更多成分,可明显提高有形成分的检出和识别率。当出现形态不规则、不典型或有疑问的有形成分时,仍可通过专业人士进行辅助判断和识别。该系统的工作流程可参考示意图(图9)。
该厂家近年来已经将尿有形成分分析系统的产品进行了很大的改进,并生产出适合各级医院使用的系列化产品。AVE-763B型尿液有形成分分析仪使用5管试管架,在光学计数板上具有两条检测通道,测速为60~120样本/h;AVE-764B型采用了标准的10管试管架,多两通道分时连续工作,除常规尿有形成分分析外,还可进行异形红细胞形态学自动分析,可扩展对体液标本的分析,检测速度为60~120样本/h,具有样本条码自动识别能力,可自动或人工进行日常清洗和强制清洗、自动保养。AVE-766型是最新产品(图10),采用10管试管架,双显微镜系统,六通道连续检测,检测速度可达100~180样本/h。该仪器除了具有上述仪器的基本功能外,还具有室内质控功能,带质控软件,有配合的质控品。
(2)离心沉淀式尿液有形成分分析仪器。以匈牙利77 Elektronika公司生产的Uri Sed(图11)尿液有形成分分析仪为代表,但其产品在国内由于代理商不同而有两种商品品牌,分别为COBIO XS和Lab UMat。仪器分类属于静止拍摄数字图像式尿液有形成分分析系统。
将未离心的新鲜尿标本置于试管内并安放在专用试管架上,将试管架置于仪器进样台上。仪器启动后会将试管架运送到测试位置,取样管插入到标本中打出气泡将样本混匀,后吸取尿样200μl,将其注入到仪器内部储存的方型薄板内,板腔内厚度为0.2μm。注入标本后的薄板被自动移至内置的特制离心机内并立即以2000rpm/min的速度离心10秒。经离心处理后样品中的有形成分被沉淀在薄板的一侧,然后被送至内置的显微镜平台上,并处于数字照相机的可调焦距范围中,而沉淀于同一个平面的有形成分在经过仪器的自动对焦后正好处于数字相机的拍摄焦点上。该系统采用20倍物镜头和数字相机对相当于显微镜检查的10个视野的范围进行多点拍摄,所有拍摄的图像通过仪器内部的高级图像处理软件进行处理。该软件数据库中会包括所有可识别粒子的特征性信息,应用人工神经网络和其他智能数学模型的识别判定算法,将所拍摄的尿中粒子根据其各自的特征信息通过多个数学模型与数据库中的信息进行比对、计算、分类和和计数。该系统目前可以自动识别出红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、鳞状上皮细胞(EPI)、非鳞状上皮细胞(NEC)、酵母菌(YEA);对尿中结晶(CRY)还可以细分为一水草酸钙结晶(Ca Oxm)、二水草酸钙结晶(Ca Oxd)、三联磷酸盐结晶(TRI)、尿酸结晶(URI),将管型分为透明管型(HYA)和病理管型(PAT);此外还有白细胞团(WBCc)、精子(SPRM)、细菌(BAC)和粘液丝(MUC),对不能分辨的物质则标记为“不可分类的粒子(UNC)”,用于提示检验者注意鉴别。在仪器测定并拍摄的数字图像为全视野照片,与显微镜下所见非常接近,识别出的有形成分可用英文字母标出并显示在屏幕上(图12)。
仪器特点是通过快速离心使得有形成分迅速沉淀于薄板一侧,并不会因有形成分沉淀而导致标本浓缩,提高了显微镜成像清晰度,减少细胞重叠和不处于同一层面而导致的图像拍摄模糊等问题。仪器内存储的各种粒子的特征性信息数据库可根据厂家提供的更新数据库进行更新,相关识别和判定的数学模型等软件可通过厂家的升级更新得到优化,以不断提高其识别尿中各种有形成分的灵敏度和正确率。对仪器尚不能识别的成分、形态特征不典型的成分,可导致仪器误判或漏判,某些形态不典型的成分也可出现错误识别或漏检,此时应通过屏幕检视的方法进行确认和修正,由有经验的检验人员进行确认、核实或修改后发出报告。
仪器具有连接尿液干化学分析系统的能力,一般连接本公司的尿干化学分析系统,通过连接桥进行连接。可选择干化学分析完成后全部进行有形成分分析,也可设定筛检规则,选择干化学试验出现阳性反应的标本继续进行有形成分分析,实现尿液分析的快速过筛和全自动流水线化。
(3)其他影像式尿液有形成分分析系统。目前国内许多厂家都在积极开发具有自动识别能力的尿液有形成分分析系统。这些仪器设备一般均采用数字影像拍摄和识别的模式进行开发,多采用自动进样,充入专用计数板,通过显微镜平台,由数字相机拍摄大量图像信息,经过提取有形成分影像,并通过计算机数据库和识别软件系统进行识别分析。他们的区别主要在检测速度、识别能力、染色与否等方面。
例如杭州龙鑫的LX8000一体化全自动尿液尿有形成分分析系统(图13),集全自动尿有形成分相差显微镜分析系统和全自动尿干化学分析系统共同组成的多通道尿液分析一体机,仪器共用一个尿液进样系统,可一次性同步完成尿干化学分析和有形成分的全自动镜检分析。尿标本经吸样、排样、吸样混合均匀后,被充入平面流式计数池内,标本在计数池内经过一定时间自然沉淀后开始被测试。根据程序设定显微镜高、低倍物镜自动互换。按照测试程序,低倍镜拍摄5幅图片,系统则根据所拍摄图片上的成分,定位追踪,自动转换为高倍视野,对定位成分拍摄25幅图片。智能识别系统可分别对低倍视野和高倍视野图片中的成分进行分析。计算机系统中的数据库,对所拍摄的图片中成分,根据形态、大小、颜色、梯度、灰度、透光度、纹理等各种特征数据进行处理,与系统内的数据库进行比对、分析、拟合、进行识别、分类定量计数。仪器具有以下特点:样本条码自动识别、自动清洗和强制清洗、自动保养、室内质控程序。该系统使用10管位试管架,具有两通道、四通道两种多通道检测功能,测速为80~120样本/h;除对常规尿有形成分分析外,异形红细胞形态学标本,还可以启用显微镜内相差装置进行分析。
国内其他类似的尿液有形成分分析设备还有南京千盛、重庆天海、塞科希德、国联在线、上海迅达等。
3. 尿液有形成分分析系统的质量管理
各种实验室检测技术和设备均应有质量管理程序和措施,甚至应该有配套的质控物质。在这方面临床生化、血细胞分析和临床免疫分析技术起步比较早,技术也相当成熟。尿液分析是起步比较晚的一个项目,虽然干化学的定性分析早已有质控品和要求,但是普及和重视程度远不如血液检验项目,而尿中有形成分检测的质量管理方法和质控品,又因检测系统的分析原理不同而难以统一。作者仅根据现有的资料分别介绍。
3.1 室内质量控制
(1)流式尿液有形成分分析系统可通过校准物、质控物对仪器进行有效的质量管理。仪器备有专用的校准品,可用于激光光路的调整和校正,这需要专业工程师进行操作。质控物UF-CHECK为一种特殊的胶乳微粒,可以提供WBC、RBC、CAST、EC、BACT参数的靶值和浮动范围,还可以提供包括前向散射光、荧光强度、电导率等多项系统参数的质控范围。每日开机后应首先进行质控物测定,质控物测定完毕后,数据可自动绘制成L-J质控图(图14)。该质控物是一种专用于UF系列仪器的质控物,是采用替代物质模拟制作的质控品,与真实的尿液中有形成分不同,因此在采用其他检测原理的仪器上不能使用。
(2)流动型影像尿液有形成分分析系统可以通过三种配套的物质对仪器进行质量管理,仪器具有焦点校准和质量控制功能。i Q-200仪器是有厂家配套生产的焦点校准品(i Q Focus)可用于仪器鞘流和焦点的调整,应于每日开机后进行焦点校准。而阴性和阳性质控物(i Q Negative,i Q Positive control samples)可用于仪器的日常质控测定。按照操作规程,每日均应进行焦点校准和室内质控操作,当达到质控品设定的要求,不失控的情况下后方可进行日常标本的测定。该仪器的质控物和校准物都是专用的,不可在其他原理的仪器上应用。
(3)静止型尿液有形成分影像分析系统,一般通过调整镜头对焦方式来达到系统校正的目的。仪器同样具有质量控制程序,可以选择厂家推荐的第三方质控品,应包括至少两个水平,如阴性或阳性质控物做室内质控管理。例如匈牙利的Uri Sed尿液有形成分分析系统厂家推荐的第三方质控品:Quantimetrix的quan Tscopics;Quantimetrix edip and spin;hycor KOVA LIQUA-TROL;Bio Rad Liquichek(伯乐)等都可以用在该设备的日常质控工作中。
而国产仪器厂家目前生产配套室内质控品的并不多,但是作为一种定量分析仪器,缺乏室内质控是一种缺陷。已经有厂家重视到此项工作,例如长沙爱威公司是尿液有形成分分析系统的主要生产商,他们已经在新型号仪器上增加了室内质控程序,并生产了配套的高、中、低三个水平的室内质控品。仪器开机清洗和准备完毕后,可首先选择测定质控品,仪器根据测定结果,由质控软件自动保存质控测定结果,并绘制L-J质控图(图15)。各实验室可根据厂家提供的质控靶值和范围设定失控判断标准,也可自己经过测定累计数据后,获得自己实验室的靶值和浮动范围,用于室内尿液有形成分定量分析的质量保障。
3.2 尿液有形成分分析室间质量评价
在世界范围内可提供全面尿液分析室间质评的管理机构不多,而且多在干化学和尿液化学成分的定量分析方面为主。而可以组织尿液有形成分检查的室间质评的机构很少。目前据文献可查的可以提供形态学质评的实验室有芬兰的实验室质量控制中心、意大利医学生物研究中心和美国病理家学院,而只有美国病理家学院所组织的室间质评只针对全自动尿液有形成分分析仪。
多数的形态学检验的室间质量评价,一般是通过阅读有形成分图片的方式进行的,这也是形态学检验的基础。目前国外已经有多年的经验,并形成完整的评价体系。例如Fogazzi G.B.教授所在的意大利米兰尿液研究中心自2001年就启动了尿沉渣室间质评计划,目前有300多实验室参加。他们可以提供4种尿沉渣成分和8张彩色图片,包括光学显微镜、相差显微镜、偏振光显微镜的图片。现在他们提供的室间质评图片一般会同时提供光学显微镜和相差显微镜两种图片,必要时也会提供偏振光显微镜图片。图16为该机构提供的一幅相同视野下尿中磷酸铵镁结晶图片,左图为光学显微镜图,上角小图为偏振光显微镜图,右图为相差显微镜图。2006年起他们可以通过网络下载形态学图片和上报鉴定结果。
我国卫生部临检中心近年来也启动了尿液有形成分的室间质评工作,通过提供尿沉渣图片考核实验室的形态学水平,一般每年进行两次,每次提供10余张光学显微镜、未染色的图片印刷品,实验室可通过网络回报判断结果。而这一工作也已经在国内一些省级临检中心开展,应该说是一种很好的方法和进展。而采用仪器分析方法对尿液有形成分定量计数的室间质量评价,国内尚属空白。
3.3 尿液有形成分分析仪器系统质量评价
新的仪器安装完毕后,在使用前为验证其性能是否符合用户的需求或达到出厂设计要求,一般需要对其各种性能进行评价。目前尚未有明确的有关尿液有形成分分析仪评价的具体要求和条款,但是作为一种对尿中颗粒成分进行定量计数的设备,可以参照血细胞分析仪评价程序进行,两者有许多相似的评价内容可以参照使用,但评价标准可以不同,在尿液细胞分析上,由于其浓度低、数量少,条件可适当放宽松。目前可用于评价的有形成分有红细胞、白细胞、上皮细胞等。
(1)精密度:可进行批内、批间精密度评价,最好能够选择高、中、低浓度的标本。如果仪器生产厂家能够提供定量的尿中有形成分标准物质,可以使用该物质。如果没有这种产品,可以用人血或尿中的细胞进行处理后替代。可使用血细胞分析仪对其进行定量计数,也可采用血细胞计数板精确计数定量。一般情况下低浓度标本的精密度可能变异度略大。
(2)线性:应对仪器的可报告范围内的线性进行评价。可选择定量的高浓度标本,用等渗稀释液稀释成不同的浓度,然后测定,得到线性范围。
(3)携带污染率:用于评价高浓度标本是否对低浓度标本测定产生影响的评价指标。首先选择一含有较多细胞的尿液或质控品,测定三次,再选择一阴性尿液标本或质控品,测定三次。用公式计算获得到携带污染率指标,一般情况下应<2%。
(4)相关性:与其他方法的比对实验,例如与其他类型的仪器比对,或与标准的显微镜和计数板的定量计数法做比对实验,获得每项测定参数的相关系数、斜率和截距、回归公式等。
(5)符合率:还应对仪器的符合率进行评价,对照方法应该是参考方法,如以显微镜法的形态学鉴定为标准方法。测定同一组样本后以显微镜法为准,对结果的符合率进行评价,特别是对细胞、管型类的常见病理成分进行评价,判断该设备在这些可检出的病理性成分上的识别率和计数上的可靠性,分析其假阴性和假阳性率。
3.4 仪器的维护和保养
各型号仪器都应按照设计要求进行日常维护和保养,使用者应遵循厂商推荐的方法建立自己的维护保养程序,并严格执行,这样才能保证仪器检测性质量和运行正常。
流式尿液有形成分分析仪可通过厂家提供的CELLCLEAN专用清洗剂进行清洗,一般是在每日操作完毕后,关机前执行关机程序时应用此清洗剂。清洗剂吸入后可完成对取样针、管路和flowcell等重要系统的自动清洗。如果在仪器运行过程中,出现进样或管路故障时,也可执行清洗程序。
尿液有形成分分析仪器的保养和维护非常重要,如果生产厂家有要求,则需使用专用的清洗液对取样针、管路、flowcell和光学计数板进行清洗。许多仪器已经设计为自动清洗取样针,每次吸取样本后均会反复清洗,以防止标本间的交叉污染。某些仪器工作结束后需执行仪器自带清洗程序,可使用2%的次氯酸钠清洗取样针和废液管路。仪器每日应用完毕后必须进行清洗,运行过程中出现管路或计数板污染或故障也需通过清洗程序排除,因为标本中的蛋白质和有形成分易黏附于系统的管路和计数板上,会对检测结果造成干扰。光学计数板应保持通畅和清洁、无颗粒物、透光性能良好、无灰尘侵入,保证所拍摄的图片背景清晰、无杂物干扰。
应用显微镜镜头观察和拍摄图像的系统,其显微镜镜头的清洁也很重要。同时显微镜的机械和电子调节系统应保持运动调节自如。保持显微镜光源系统的清洁和干净。
摘要：尿液有形成分分析是一项传统项目,也是临床检验中一个重要项目,而其自动化进程起步较晚,目前为止所开发的设备各有特点,但尚不能全部满足临床检验工作需要。本文根据尿液有形成分自动化发展的进程,对国内外一些常见尿液有形成分分析设备从分析原理和特点等方面进行介绍,并对此类仪器在质量控制和质量管理等方面进行介绍,供检验界同行参考。
关键词：尿液有形成分,仪器,自动化,质量控制
参考文献
[1]张时民.实用尿液有形成分分析技术.北京:人民卫生出版社,2008
[2]邹熊丛玉隆.临床检验仪器.北京.中国医药科技出版社.,2010
[3]Fogazzi GB,Secchiero S,Consonni D,Sciacovelli L,el al.An Italian external quality assessment(EQA)program on urinary sediment.Clin Chim Acta.2010,Jun 3;411(11-12):859-67.
尿有形成分分析仪论文 篇5
1 资料与方法
1.1 标本来源
随机收集尿结晶高发的泌尿病房和门诊泌尿患者的尿液标本510例, 尿杯为一次性尿杯, 2 h内完成测定。
1.2 仪器和方法
1.2.1 仪器
爱威E-764B尿液有形成分分析仪;Olympus-CH20双目显微镜, 低速离心机。
1.2.2 实验方法
每天按照仪器操作规程, 完成室内质控检测并保证在控, 随后对患者标本进行检测。在E-764B尿液有形成分分析仪测定完成后, 用低速离心机离心尿标本, 用显微镜进行尿沉渣镜检。
2 实验结果
尿液有形成分分析仪法与镜检法检测尿结晶结果比较如表1。采用SPSS17.0计算机统计软件进行数据处理, 计数资料采用χ2检验, P<0.05为差异具统计学意义。经统计学表明:
2.1 510份尿液中, AVE-764B分析仪检测出尿酸结晶阳性率为52 (10.19%) , 人工镜检阳性率为71 (13.92%) , 分析仪阳性率虽低于人工镜检。但经统计学分析, 二者阳性率无显著性差异 (χ2=3.3, P>0.05.) 。
2.2 510份尿液中, AVE-764B分析仪检测出草酸钙结晶阳性率为185 (36.27%) , 人工镜检阳性率为197 (38.62%) , 经统计学分析, 二者阳性率有显著性差异 (χ2=5.0, P<0.05) 。
2.3 510份尿液中, AVE-764B分析仪检测出磷酸氨镁结晶阳性率为57 (11.18%) , 人工镜检阳性率为65 (12.75%) , 但经统计学分析, 二者阳性率无显著性差异 (χ2=0.6, P>0.05.) 。
2.4 510份尿液中, AVE-764B分析仪检测出胱氨酸结晶阳性率为57 (11.18%) , 人工镜检阳性率为65 (12.75%) , 但经统计学分析, 二者阳性率无显著性差异 (χ2=1.3, P>0.05.) 。
3 讨论
从实验结果可以看到, 尿酸结晶 (χ2=3.3, P>0.05.) , 磷酸氨镁结晶 (χ2=0.6, P>0.05) , 胱氨酸结晶 (χ2=1.3, P>0.05) , 仪器法和人工镜检尽管存在着差别。但在在统计学上无显著性差异。而草酸钙结晶 (χ2=5.0, P<0.05) , 二者阳性率有显著性差异。其主要原因是小的草酸钙结晶, 其形态大小与荧光染色的敏感性与RBC类似, 散点图与RBC交叉分布并且前向散射光强度与RBC相近, 干扰AVE-764B的计数[2]。
综上所述, 尿沉渣分析仪在大批量标本的操作方面有着较大的优越性, 但当尿中有形成份敏感性和散射光强度相近似时, 不可避免存在着误判的结果, 从而不可避免地引起有形成分的测定误差。在进行尿液自动化分析的同时, 必须重视尿液的形态学检查[3,4]总体讲, 尿沉渣分析仪, 它不失为一种较好的检测方法, 但同时也要发挥镜检纠错的重要性, 只有二者结合, 才能快速又准确做好检测实验。草酸钙结石是肾结石中最常见的一种类型, 它在结石中占80%~84%[5]。因此我们更应该重视镜检, 为临床提供客观准确的实验诊断依据。笔者未能查到有形成分分析仪和镜检在尿结晶结果上的比较分析的论文及数据, 现有的这两种检测结果对比性统计数据应该极少, 期待同行有更多这方面的统计, 以便于提高工作效率的同时又保证实验室质量, 有较大的意义。
参考文献
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[2]武蓉珍, 刘胜勇, 徐丽珍, 等.草酸钙结晶对UF2100尿沉渣分析仪测定红细胞的影响[J].临床检验杂志, 2001, 20 (4) :222.
[3]姜傥.肾脏疾病临床诊治中的尿液分析问题[J].中华检验医学杂志, 2005, 28 (4) :340-343.
[4]李艳, 从玉隆, 袁桂请.加强形态学临床检验专家座谈会纪要[J].中华检验医学杂志, 2005, 28 (2) :147-148.
浅议人体尿液有形成分分析 篇6
1 尿液有形成分检测的意义
尿有形成分检查可为临床解决以下向题: (1) 诊断及鉴别泌尿系统疾病及邻近的生殖系统疾病; (2) 协助了解其它系统疾病, 如自身免疫系统疾病、寄生虫类疾病等; (3) 实施安全用药监护; (4) 实施职业病防护; (5) 对健康人群进行保健体检; (6) 对遗传代谢病进行筛查。
2 尿液有形成分分析的主要方法
2.1 显微镜检查法
操作步骤:取混匀的新鲜尿液10 m L置于一刻度管内, 用回转半径15 cm的水平离心机按1 500 r/min (RCF=378G) 离心, 沉淀5 min, 将离心管倾斜倒去上层液体, 使剩约0.2 m L, 混匀管底沉淀物, 用吸管吸出沉淀物约20μL, 滴于载玻片上, 用盖玻片覆盖后镜检。这种传统方法易受操作者主观影响, 随意性强、误差较大、可比性差, 因此报告结果不利于临床动态观察, 是缺乏标准化的实验方法。
2.2 干化学检查法
(1) 尿液p H原理:采用酸碱指示剂法。方法学评价:尿标本必须新鲜, 时间过长的尿液可滋生细菌, 使尿液转碱性;尿液含过多碳酸氢盐或放置时间过久也可导致挥发, 使p H增高, 不适宜精确测定尿p H, 适合于过筛试验; (2) 尿比密原理:采用多聚电解质离子解离法。方法学评价:该方法灵敏度略低, 只能按0.005的梯度色阶表达结果, 精密度差, 测试范围窄, 并且受强碱性尿和高蛋白质尿的影响。适合于对健康人群的过筛试验; (3) 尿蛋白原理:采用“指示剂蛋白质误差”原理。方法学评价:对清蛋白的敏感性明显高于球蛋白、血红蛋白和黏蛋白, 因此“阴性”结果并不能排除这些蛋白质的存在; (4) 尿葡萄糖原理:采用葡萄糖过氧化物酶法。方法学评价:适用于常规及过筛检查尿中的葡萄糖。而对乳糖、半乳糖、果糖等其它还原糖不反应。高浓度的维生素C会减低反应的敏感性, 可能会造成假阴性; (5) 尿酮体原理:采用亚硝基铁氰化钠法。方法学评价:对乙酰乙酸的灵敏度为50~100mg/L, 对丙酮的灵敏度为400~700mg/L, 与β-羟丁酸不反应; (6) 尿胆红素原理:以偶氮反应为基本原理。方法学评价:过量的维生素C和亚硝酸盐可抑制偶氮反应而呈假阴性, 而大量的氯丙嗪和高浓度的盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物在酸性条件下会呈假阳性反应; (7) 尿胆原原理:以醛反应法或重氮反应法为原理。方法学评价:尿胆原排出后很容易氧化为尿胆素, 故应尽快测定。应用大量抗生素、维生素C和尿中含有高浓度亚硝酸盐或甲醛时, 容易抑制实验, 出现假阴性结果。使用氯噻嗪类、非那吡啶类、对-氨基硫酸和磺胺等药物时可出现假阳性; (8) 尿亚硝酸盐原理:采用亚硝酸盐还原法。方法学评价:测定时尿液必须新鲜, 无外界污染, 最好用晨尿或潴溜4h以上的尿液。出现阳性结果意味着尿液中细菌数量在105个/m L以上。阴性结果并不表明尿液中无细菌, 可能为非硝酸盐还原性细菌引起的尿道感染;也可能为饮食中缺乏硝酸盐等; (9) 红细胞原理:采用红细胞类过氧化物酶法。方法学评价:高浓度维生素C对试验可能有抑制作用, 导致结果偏低或假阴性;浓缩尿或高蛋白尿也可减低反应敏感性。清洗剂和尿道中细菌产生的过氧化氢酶可能引起假阳性结果; (10) 白细胞原理:采用粒细胞酯酶法。方法学评价:该实验仅与尿液中的粒细胞、脓细胞及破坏后的粒细胞释放出的酯酶成分反应。当尿中出现以淋巴细胞或单核细胞为主的白细胞时, 可呈阴性;尿中出现过高的葡萄糖、蛋白质或高比密尿会造成反应的敏感性减低或出现假阴性。
2.3 尿流式分析仪检验法
自动化仪器为尿液有形成分定量分析提供了新的方法。Sysmex公司生产的UF-50, UF-100尿液分析仪是根据流式细胞术设计的专门用于尿沉渣检查的仪器。该仪器所用尿液不用离心, 经荧光染色后, 应用鞘流技术将尿中有形成分单个有序通过检测系统。根据检测后发出的荧光强度和在前向角测定的散射激光强度以及脉冲的大小综合分析, 报告尿中的有形成分的种类和数量, 仪器除可自动报告红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌, 5个定量参数外, 还可测出红细胞的大小分布, 从而得到有关出血部位、尿道或肾脏器官的信息, 同时还能测出尿液电导率指标。包含了数据标志的系统可帮助化验员快速确定哪些样品需要显微镜检查, 节省大量的人力物力。另外, 研究表明, 如果采用定量报告方式 (C/μL) , 最好采用不离心多数量计数法。尿液离心镜检是将尿液离心再悬浮后镜检计数的一种方法, 可能受到离心部分变形溶解或离心沉淀不完全等因素影响, 要比实际理论值明显减低。UF-100作为一种尿有形成分流式定量计数仪器, 其最大检测速度为每小时100个样本, 用于成形成分快速筛选, 标本常规定量是符合临床要求的。该检验法在大工作量环境下, 既保证了检验速度又保证了检测质量, 为临床诊断提供了可靠依据。
3 结语
用显微镜检查方法分析细胞仍存在许多局限性, 产生疑问时必需镜检确诊, 同时费工费时、重复性差、不易定量, 受操作者主观影响, 结果不利于临床动态观察。干化学方法具有所需尿量少、操作方法简便、检测速度快、重复性较好, 对几项化学成分分析能从定性进入半定量等优点, 但它对有形成分检测有一定局限性, 尿液中存在一定量的干扰物质, 可导致检测结果呈假阴性或假阳性, 只适合于临床的初筛工作。尿流式细胞分析仪分析法具有标本无须离心、检测速度快、病理成分敏感度及重复性好等优点, 且由于每份标本检测步骤模式一致便于质量控制及标准化;局限性是它不能检出滴虫、脂肪滴、病理及药物结晶, 也不能识别肿瘤细胞, 当尿中存在大量细菌、酵母菌、结晶等颗粒时可干扰红细胞计数, 也不能识别影型红细胞及病理管型。将同一检测目的几种主要方法有机整合在一起, 对同一份标本的不同方法结果 (干化学、尿流式、沉渣计数) 进行模式匹配, 优势互补, 特别是干化学的快速简便和尿流式细胞分析仪对有形成分定量分析的准确性及自动化, 能够有效降低手工镜检的劳动强度。
参考文献
尿有形成分分析仪论文 篇7
1 日常维护及注意事项
每天进行一次流动计数池上表面的除尘及显微镜清晰度的调试。仪器开机前, 要检查有无清洗液, 以免仪器工作时不能有效清洗流动计数池, 从而影响测试结果;仪器工作中, 如要暂停仪器镜检工作, 需等待仪器把当前检测样本镜检完后才能暂停工作;病人资料中的ID号、尿干化学号、镜检号一定要对上。
2 常见故障及分析
2.1 干化学接收窗口能接收到数据, 但在报告审核中找不到结果:
干化学仪器的日期设置错误;尿液有形成分分析仪的日期被人为改动。
2.2 计数池中有大量杂质无法清洗干净:
采用专用清洗液B进行浸泡5min再进行清洗;如上步无法解决, 可将计数池拆下, 用注射器连接后来回抽吸进行清洗直到干净为止;还不行只能更换计数池。
2.3 在标准版调焦清楚后, 进到“沉渣镜检”程序后又变得不清楚了:
显微镜物镜没拧紧;上下聚焦光片是否与光电开关位置不当, 互相有摩擦;安装计数池不当, 将压紧弹片压得过里, 导致高低镜头转换时碰到压紧弹片;计数池压片太松。
2.4 细胞识别效果不理想:
焦距是否调清楚;背景色是否调至正常范围;更新识别模块。
在使用AVE-764尿液有形成分分析仪过程中, 注意日常保养及常见故障的排除, 就能使我们工作中减少仪器故障, 有效保证检测工作的顺利进行。
参考文献
[1]严密.眼科学[M].第四版.北京:人民卫生出版社, 1995.143-144.
[2]尤黎明.内科护理学[M].第4版.北京:人民卫生出版社, 2006.423.