酶免分析仪（精选6篇）
酶免分析仪 篇1
ALISEI全自动酶免分析仪是意大利SEAC公司生产的全自动酶免分析仪, 具有自动加样、自动温育、自动洗板、自动比色一体化功能, 取代以往的影响因素较多的手工操作, 减轻了检验人员的劳动强度, 并具有全中心操作界面, 使用简便、灵活、直观, 深受检验技术人员的欢迎。
我院自2004年购入该机后, 经过多年的使用, 已进入故障高发期。在使用维修中发现一个特殊的故障, 多次出现, 怀疑与该机型设计构造有关, 现介绍如下。
故障现象:打开电源开关后机器进入初始化程序, 提示“洗板头初始化失败”。
故障分析与检修:
据操作人员反映, 机器工作过程中突然听到机器内僻叭响声, 并闻到强烈刺鼻的糊味。由此判断机器内部有元器件烧坏, 打开机器外壳直观检查各相关元气件检查发现3号板上的4A保险丝已熔断, 驱动芯片L6202 (U6) 爆裂。更换保险丝及驱动芯片L6202 (U6) 后开机, 再次出现焦味和保险熔断声音, 说明该故障可能由于前线驱动负载问题。改变思路重新检查, 经检查发现洗板头控制上下部分以及反应盘拨动时轻松, 与关机时阻力相同, 判断控制板未加上电。洗板部分与反应盘驱动部分是3号板, 说明是这部分没有正常工作, 再结合操作人员描述, 前期检查发现3号板上的4A保险丝已熔断, 驱动芯片L6202 (U6) 爆裂。由于无线路图, 结合实际功能对3号板进行大体分析:洗板驱动部分有2个电机 (即上下运动的电机和前后运动的步进电机) , 反应盘的驱动电机。这些电机应由3组驱动芯片负责驱动, 每组驱动线路相同。分别是:U12 (L6202) 、US (L297) 、U6 (L6202) 一组, U4 (L6202) 、U11 (L297) 、U 10 (L6202) 一组, U7 (L6zoz) , Ug (LZ97) , U9 (L6zoz) 一组。 这3组驱动芯片中U6 (L6202) 爆裂。更换4A保险及U6 (L6202) 后开机, 再次出现焦味和保险熔断声音, 说明该故障可能由于前线驱动负载问题。怀疑负载电机有问题, 拆下反应盘右下方的驱动电机, 检查发现内部线圈已腐蚀严重。更换一个同型号步进电机并将3号板上保险及U4更换。开机, 可进行正常初始化, 进入正常工作程序, 故障排除。在以后的维修过程中, 又先后出现3次样品盘, 试剂盘驱动电机线圈腐蚀短路引起驱动电路损坏的故障, 经更换电机及相应驱动元件后, 故障均排除。
2 结论
由于该设备结构设计样品盘、试剂盘、反应盘的驱动电机都位于设备底板的下部, 设备长期使用过程中容易被纤维蛋白原或试剂顺着步进电机的引出线流入位置较低的步进电机内, 造成电机短路, 进而导致线路板驱动部分的故障。因此该机器出现相似故障时, 故障表象是驱动线路板故障, 实际上则是电机损坏引起。在发现线路板步进电机驱动部分的芯片烧毁时, 应首先检查该驱动电路负载电机是否损坏, 经确认后再去维修线路板, 避免维修多走弯路。起到事半功倍的效果。如果盲目更换线路板上的驱动芯片可能会再次烧毁芯片, 甚至引发更多故障。
参考文献
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[4]姜远海, 彭明辰.临床医学工程技术[M].2版.北京:科学出版社, 2009:260-271.
酶免分析仪 篇2
1 材料准备
试剂盒定位物、样品转盘、校准物(B、M、H)、空白杯、反应杯定位物、稀释液等。
2 校准步骤
2.1 探针的校准
将试剂盒定位物放入试剂保温座内。依次按下MONITOR→CAL→BOOM→START键,仪器自动工作,探针指向定位物1号位;按LEFT或RIGHT键,探针在1号位上左右调整,此时应松开探针臂上的螺丝,调整探针的前后位置,使探针在1号位的正上方,然后拧紧螺丝;接着按VERTICAL,通过DOWN或UP,上下调整探针,使探针尖部最大限度地接近1号位,但不能接触1号位。按VERIFY键,探针来回摆动后仍然停在1号位的正上方,调整完毕。按STORE键保存。否则,按REPEAT键重新上述调整。
2.2 样品转盘的校准
在样品转盘的1、2号位上放校准物B;在3、4号位上放校准物M;在5、6号位上放校准物H;在7、8号位上放空白杯,锁定转盘,盖上仪器盖,依次按MONITOR→CAL→CRSL→MEIA→START键,仪器开始自动测试,如测试通过,仪器会显示203 MEIA CAROUSEL CALIBRTION PASS字样,如果不通过,仪器会给出提示,按提示纠正后重新上述调整。
2.3 反应杯位置的校准
将反应杯样的探针定位物放入样品转盘1号位,并锁紧样品转盘。按START键,探针自动移向定位物上方,按BOOM键,通过LEFT或RIGHT键左右调整探针在定位上方的位置,并使其停在定位物的正上方;再按VERTICAL键,通过DOWN或UP键,使探针最大限度地接近定位物,而不接触定位物;按CRSL键,通过CW或CCW键转动转盘,使探针的前后方向也处于定位物的上方,按VERIFY键,测试探针摆动后的位置,如果探针能自动回到定位物的正上方,说明调整好,按STORE键保存;如果有偏差,则按REPEAT键重新调整。
2.4 液面感应器的校准
在样品转盘的第2、7、12、17、22号位上放上干净的空白杯,锁定转盘,盖上仪器盖后,按START键仪器会自动在5个空白杯内分别注入50mL的稀释液,这时打开仪器盖,探针自动下降感应各杯的液面,并打印各杯感应到的液面高度;正常时5个杯的液面都应该在260～270之间;并显示STORING CALIBRATION表示仪器通过调整;如果显示INUALID LEVELS表示不通过,需要按REPEAT键重新进行上述调整。
2.5 光路的检查
在主菜单下,依次按下MONITOR→HND→CTRL→OPTICS→MEIA→PROLED→LAMP,此时屏幕右上方会显示ON;稍待灯泡光亮稳定后,记下屏幕显示的数值;按EXIT回到主菜单,再依次按下SYSTEM→FILES→输入38.25→DISPLAE→查看屏幕显示的检测值并把它改为前面记下的数值,按STORE键保存。按EXIT回到主菜单。
3 小结
经验表明,仪器的机械部分校准类似X轴、Y轴、Z轴三维立体多方向校准,在校准时应综合处理;仪器在更换备件时也需要对仪器进行校准,在实际使用中仪器必需保持最佳状态,平时应根据仪器的使用频率做上述校准,以免产生误差,造成试剂的浪费,影响检测结果,甚至损坏仪器。
参考文献
[1]何晓华,吕豪.全自动酶免分析仪常见故障及处理方法[J].医疗卫生装备,2006(1):104.
[2]王宁皎,等.立式任选型全自动生化分析仪常见故障及处理[J].中国医疗器械杂志,2004(3):226-228.
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[4]王志伟,等.酶免之星的安装调试与维护[J].医疗设备信息,2007(2):81-82.
酶免仪负压泵的替代 篇3
关键词：替代,负压泵,做法
ALISEI全自动酶免仪产于意大利,它主要是根据酶标记原理,对呈色物的有无和呈色深浅进行定性定量分析,广泛用于医院临床检验和科研实验室等。我院引进该机已近十余年,目前正处于故障多发期。2008年初,我院检验科报修ALISEI全自动酶免仪,现象为自检不能通过,计算机显示屏显示真空度故障。根据计算机显示屏显示真空度故障,我们按照常规处理方法拆开微型真空泵分解泵体、阀片,分别进行清洁处理,重新组装程序结构,多次精心组装再试机,故障依旧。有文献[1,2,3,4,5,6]分析认为:该机已引进近十余年,微型真空泵的活塞可能严重磨损,因此不能产生所需负压,这种故障通过维修是很难排除的。对于这种情况有以下2种解决方法:一是购买原厂生产的微型负压泵(公司称此泵价格很高,约18 000元,而且没货,购买周期很长),这样将严重影响工作;二是找替代品。经研究,我们选择了后者。以下介绍用国产负压泵替代进口微型负压泵的做法并进行了分析,供同行参考。
1 分析和选型
用国产负压泵替代进口微型负压泵,面临以下问题:(1)国产负压泵体积大;(2)噪声大;(3)工作电流大。为了不影响正常工作,我们先找到一台旧电动吸引器,把它的工作电源接到主机之外,每次开动主机之前,先人工开启电动吸引器。它的电源不能直插入主机,因为这种电动吸引器的工作电流远大于进口负压泵的工作电流,一旦受主机控制(同步工作)可能会烧坏主机,所以只能临时人为控制电动吸引器的启动和关闭。这台旧电动吸引器能够满足全自动酶免仪的负压工作条件,但是噪音大,另外,人工控制很麻烦。根据应用实例,要克服噪音问题,首先应考虑选用低噪音模式电动吸引器,虽然在噪音上能满足要求,但这种类型的机器体积大,不能满足工作环境的要求。因此,只能在电动吸引器中选择一个噪音较低的作为负压源[7,8]。经多次实验,最后确定选择上海医疗器械工业(集团)公司医用吸引器生产的YB.Dx23D电动吸引器,这种机器与同类相比,噪音低、负压高、流量大、体积小、可移动。
2 主要技术参数
(1)吸引泵:旋片式;(2)极限负压值:≥0.09 MPa;(3)负压调节范围:0.02～0.09 MPa;(4)抽气速率:≥20 L/min;(5)噪声:≤60 dB;(7)电源:～220(1±10%)V,50 Hz;(8)输入功率:280 W;(9)外形尺寸:340 mm×305 mm×420 mm。这些技术参数基本上能够满足工作要求,但是其中有一项输入功率为280 W,远大于全自动酶免仪负荷设计值,需要进行改造。如果全自动酶免仪长期直接驱动电动吸引器,可能会烧坏全自动酶免仪主机。针对这种情况,我们决定对电动吸引器(YB Dx23D型)的主控电路(启停运行电路)进行改造,改造后的电路如图1所示。
3 替代负压泵电路的设计和工作原理
改造后的电路图:RF1为Q5×20/1.5 A(变压器电源用保险管);RF2为Q5×20/1.5 A(网电源用保险管);S1是手动启动开关;S2是脚踏启动开关(此开关在本电路中不用,摘除);K是负载继电器;HL是工作指示灯;K1和K2是负载继电器的接点,当此接点吸合时,电动机开始工作;C1是负载电动机的启动电容;M是负压泵电动机;T是控制变压器。如果将电路图中的虚线连接上,此电路就构成了原电动吸引器控制电路图。不难看出,经过改造后的电路是将电路图中虚线去掉,分别把来自主机(全自动酶免仪)输出的交流220 V(电路图中(1)、(2))和网电源交流220 V(电路图中的(3)、(4))各用10 A250 V三相插头连接上,采用控制、运行分割独立供电。这样,全自动酶免仪主机驱动的负荷只是1个变压器、1个继电器和1个工作指示灯,减轻了主机负荷,实现了主机与负压泵的同步工作。应用国产负压泵替代进口酶免仪用微型负压泵已运行了1 a多,工作正常,未出现任何故障。需要强调的是,这2个10 A/250 V三相插头一定不能插错,否则不但不能正常工作,还可能损坏主机,因此,可用不同类型的三相插头或插座进行区分。
改造后的替代负压泵电路工作原理如下:分别插好来自主机输出的交流220 V和网电源交流220 V三相插头后,将S1手动启动开关闭合。当启动全自动酶免仪电源后,主机输出的交流220 V电压驱动电路图中的控制变压器(T),工作指示灯(HL)亮,负载继电器(K)得电工作,负载继电器的接点K1、K2闭合,网电源交流220 V电压驱动负压泵电动机(M)工作。如此往复工作,实现了主机与负压泵同步工作,同时也实现了利用国产负压泵替代进口负压泵的设想。
4 调试
首先,分别插好改造后的替代负压泵与全自动酶免仪的交流220 V和网电源交流220 V的三相插头,启动全自动酶免仪电源、计算机进行自检,观察替代负压泵的工作。待工作正常后,观察负压表指针,一边观察一边调整负压微动阀,使其示值约在0.04 MPa即可,因此负压过低或过高都会影响机器的正常工作。负压过低(0.02 MPa)时,无力吸取管路中的废液;负压过高(0.04MPa)时,吸力过高,对机器管路等有损害,这是经我们多次实验测试得到的结果。总之,只要精心调试此负压机器,就可以使其正常工作。
5结论
本文介绍了用国产电动吸引器作为负压源替代进口微型负压泵,采用控制、运行分割供电技术实现了附属设备与主机的同步工作。此技术简单易行、经济实效,还可以应用到其他需要负压的仪器设备中。目前,我院检验科这台经过改造的全自动酶免仪己正常运行1 a多,未出现任何故障,可见,利用国产负压泵替代进口负压泵的做法是可行的。
参考文献
[1]何晓华,吕豪.全自动酶免分析仪常见故障及处理方法[J].医疗卫生装备,2006,27(1):36.
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[7]王昕.ELISA检测HBsSAg影响因素分析[J].临床输血与检验,2001,3(2):43.
酶免分析仪 篇4
我实验室经过4年多的实践，总结出了在使用FAME过程中一些常见的故障及排除方法，现报道如下，供各位同行参考。
1 故障一
1.1 故障现象
仪器在使用过程中，洗板机被锁定，仪器退板。
1.2 分析与检修
造成洗板机被锁定的原因较多，可按以下顺序进行排查检修：
(1)洗板机的吸液针或注液针堵塞。观察被退出的酶标板，若微孔内注水不均、未注水或溢出可确认是吸液针或注液针堵塞，需将洗板头拆下清洗。具体步骤如下： (1) 将仪器外配的白色托盘放置在洗板头正下方，以防拆卸洗板头时水溅到仪器内。 (2) 左手下压冲洗托盘，使洗板头的注液通道和吸液通道充分暴露。 (3) 右手按逆时针方向旋开洗板头紧固螺钉。 (4) 水平将洗板头移出，注意防止从吸/注液通道内滴下的水外溅，并立即取一干净软布擦拭W14线路板上方2个输注液通道口，防止水流入W14板内。 (5) 清洗洗板头：先打开上盖，用螺丝刀从右向左将6个橡胶塞捅出，再用粗细2种针疏通吸液及注液针，用毛刷清洁3个通道，清洗完后装好橡胶塞及上盖，将绿色的洗板头连接板擦拭干净，重新将洗板头安装好即可。
(2) W2控制线路板感应失效。W2控制线路板是位于洗板头正下方的绿色玻璃板，当板上有污物时会感应失效，常发生于吸液针或注液针堵塞、洗液外溢时，此时虽排除了堵孔故障但洗板机仍无法解锁，仪器报警显示洗板头液面感应故障，用干净软布擦拭后即可排除。
(3) W14线路板接触不良或损坏。W14线路板位于洗板头正后方，与洗板头通过连接板直接相连，由于多种原因特别是拆卸洗板头未注意防水时可导致连接的金属接触点生锈，感应系统工作不正常，仪器频繁发生洗板机被锁定的情况，此时被退出的酶标板微孔内注水多均匀一致。拆下洗板头，用干净软布擦拭洗板头连接板，并及时使用细砂纸轻轻打磨掉锈迹，再将洗板头装上即可。如果反复打磨后仍不能解决时，则需要更换W14线路板。
(4)洗板头Z向丢步。洗板头Z向丢步时仪器会报警并锁定洗板机。此时可先运行洗板机解锁程序并注意观察洗板机解锁动作，从而判断原因。Z向丢步的原因可能有：
(1) 洗板头与酶标板有碰撞。可能原因是更换新厂家的酶标板后未重新测量板的尺寸或传送架定位块松动导致酶标板未卡紧，只需根据具体情况处理即可。
(2) 洗板头位置控制线路板W16板的光电感应器损伤或失效。W16板是位于洗板头侧方的绿色线路板，用于感应及控制洗板头的位置，若发现洗板头动作失控、无法还原时可能是线路板光电感应器损坏，此时需更换新线路板。
(3) 洗板头控制Z方向电动机损坏。若发现洗板头在解锁过程中发出异常声响，多为Z方向电动机损坏，此时需更换新电动机。
2 故障二
2.1 故障现象
冷启动或运行过程中酶标仪被锁定。
2.2 分析与检修
酶标仪被锁定时首先考虑酶标仪下方的光路板不洁，用干净纱布轻轻擦拭光路板即可。如仍不能解锁，则可能是光源减弱或滤光片不洁引起，此时需拆卸滤光板并清洁甚至更换光源。
3 故障三
3.1 故障现象
酶标板在运行过程中不能到达准确位置，传输架被锁定。
3.2 分析与检修
FAME的微板传输架共有2种，即主传输架及次传输架。南方的潮湿空气易使空气中微尘积聚，增加传输架运行阻力，最终出现传输架传输微板不能到位、微板传输架丢步并被锁定[2]。此时需将传输架手工移动至无冲撞位置，在移动的过程中要注意动作快、定位准确，再将传输架解锁即可重新运行。值得注意的是，出现传输架丢步后应尽早用专用润滑油润滑主传输架，否则下次实验可能无法初始化或解锁，从而导致实验失败。
4 故障四
4.1 故障现象
酶标板未加试剂即退板，实验失败，查实验追踪显示为试剂液面感应失效或无法检测到液面。
4.2 分析与检修
试剂液面感应问题，可按下述顺序进行排查及检修：
(1)试剂仓底W1感应板潮湿，这是最常见的引起液面感应故障的原因。引起的原因有： (1) 试剂盒内试剂超量，在关闭分配单元仓门时用力过重导致试剂外溅。 (2) 试剂从冰箱内取出后未恢复至室温即装载，导致冷凝水产生。此时只需打开试剂仓，用干净软布将底板擦拭干净即可排除，在平时工作中应注意不可将试剂加得太满并将试剂恢复至室温再装载即可预防。
(2)试剂盒底的金属块脱落。试剂盒底的金属小块用于试剂盒定位，若脱落可导致试剂液面感应故障，重新安装此金属块即可排除。
(3)注射器损坏。注射器特别是终止液中的注射器极易损坏，更换新注射器即可排除故障。
(4)试剂仓底W1感应板腐蚀严重。此现象多见于终止分配单元，由于该单元内的试剂多为强酸性液体，挥发或溢出后会导致感应板腐蚀，可将感应板拆下并用无水乙醇清洁。
5 故障五
5.1 故障现象
酶标板孵育后未洗涤即退板，实验失败，查实验追踪显示为孵育时间超限。
5.2 分析与检修
孵育时间超限大多由于标本量过大导致集中洗板，有些酶标板在孵育槽内等待时间过长超过了仪器所设的宽容度，可通过提高仪器的宽容度[3]、优化工作表[4]来排除此故障。
6“Pause”键的灵活使用
“Pause”键是位于仪器右侧的黑色按钮，在仪器运行过程中为解决一些突发情况可按此键使仪器暂停，操作者对仪器进行应急处理后再按计算机屏幕上的“继续”键，使实验继续进行，从而避免实验失败。但使用此功能时要注意动作快、时间不能过长，否则工作表计划被打乱会导致整个实验失败。
以上是我们在使用FAME过程中遇到的一些常见故障及排除方法，由于仪器故障总是在操作中突发的，厂方工程师不可能立即到位，因此仪器操作人员初步掌握一些维修技能十分重要。我们的心得是：在遇到仪器被锁定时不能单看报警信息，应仔细观察仪器的动作，具体分析才能较快找到故障原因。同时全自动酶免仪是一种精密仪器，日常维护保养十分重要[5]，如每日使用专用的消毒洗板液进行日维护可大大减少洗板机发生堵塞的情况，定期清洗注射器可大大延长注射器的使用寿命等，只有按照要求定期进行维护保养方可减少故障发生。
参考文献
[1]陈新瑞, 杨一芬, 唐亚梅.辉煌之星全自动酶免分析连体机性能综合评价[J].临床检验杂志, 2004, 22 (4) :316-317.
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酶免分析仪 篇5
故障原因分析:这两个报错提示在该设备的日常运行中较为常见。经过查阅维修手册可以知道, “8/3/307”提示的是马达节律错误;“8/3/704”提示的是马达不能接近目标位置。出现该报错提示时会出现仪器的抓手在运行中突然停止动作, 不能回复原位;有时甚至会出现抓手碰到门框或是抓手没有抓住微板而导致微板掉落的现象。该错误直接指向Gripper单元的3号马达, 结合实际情况判断, 确定为3号马达disk sensor在通过K2 Board转出到黄色软数据线时输出信号丢失所致。
故障处理方法:打开仪器前透明板, 拔出K2Board接头位置的K2P2端, 发现信号输出的通路为此端的边缘, 触点极细, 故容易发生接触不良。用酒精擦洗K2P2端, 再用橡皮擦擦涂表面, 去除触点表面的氧化层, 再装回K2Board接头。重新开机, 自检通过后, 即可正常运行。需要注意的是, 该分析仪在出现此报错提示后, 可能会伴随着出现一连串的其他报错提示, 这是由于正常的工作流程突然中断引起的报错, 一般无需处理。在解决触点接触不良引起的输出信号丢失的问题后, 其他报错自然解除。
通过观察, 该设备的放置台面不够稳定, 容易摇晃振动, 从而引起K2P2端触点接触不良, 故此故障出现频繁。建议更换该设备的放置地点, 避免该故障或因此问题引起的相关故障再次出现。
故障二:仪器在使用过程中显示“试剂盘门打开”错误报警提示。
故障原因分析:仪器在使用过程中显示“试剂盘门打开”错误报警提示, 首先检查试剂盘门是否关闭, 再检查试剂盘门上的传感器是否能正常工作, 排除上述两个因素后, 拆开仪器检查, 发现电源输出P5端的基板T4A保险丝烧断, 分别断开该电路板上的几个插件, 最后发现是连接比色板排线上的转接头被液体浸蚀引起短路, 造成基板的保险丝烧断。
故障处理方法:将转接头剪除, 直接将多股排线的转接头端焊接到基板, 并更换基板保险丝, 这样即可避免以后腔内潮湿空气及液体再次对转接部位的浸蚀。
故障三:仪器在自检时出现“真空测试failed”和“洗涤测试failed”错误报警提示, 或者在使用过程中显示“150”和“151”错误报警提示。
故障原因分析:当仪器出现上述错误报警提示。查阅维修手册可知, “150”提示的是真空不充分;“151”提示的是真空系统出现错误, 当出现上述错误报警提示时, 可初步判断为真空泵或真空回路出现问题。
当出现此类报警时, 首先应观察真空泵外部管路有无断裂或者破损, 并拧紧两只废液瓶的瓶盖, 排除管路或瓶盖漏气的因素。再进入仪器service模式, 测试泵单元, 发现真空泵压力在30-50bar之间跳动, 该仪器测试压力在140bar以上才能正常工作。断开废液瓶与真空泵的管路连接, 直接用手堵塞仪器出口处的管路, 发现测试压力显示无明显变化。基本可以排除管路或者瓶子漏气的问题。拆开仪器, 用手堵住泵的吸气口发现问题依旧, 因此可以确定为泵体问题。
用内六角拆开泵体, 发现泵体腔内有两个很薄的金属弹片固定在腔体的两面, 一面正常, 另一面金属弹片已断裂。
故障处理方法:用十字螺丝刀把已断裂还有一半固定在腔体内的金属弹片取下, 更换新的弹片即可。 (在更换弹片时最好两块弹片都换掉, 未断的弹片可能也已到使用寿命。) 重新开机, 进入service模式, 真空泵测试压力为163bar, 并保持163bar压力不往下掉。说明故障已经排除。
小结:该设备从投入使用至今已有8年, 常见的故障有设备使用时间长、运转量大等客观原因造成的, 也有设备放置台面不稳定、空气潮湿等使用环境不符合设备要求的主观原因引发的。设备正常运行的客观磨损问题是难以避免的, 但是, 我们应该特别注意由于设备的使用环境没有达到要求而影响设备的使用寿命及日常工作的问题。合理的使用环境、科学的维护保养、规范的操作等都是设备正常工作不可缺少的重要因素, 也是我们在以后的工作需要加强重视的。
摘要：本文简单分析了BEP-III全自动酶免疫分析系统在日常运行中遇到的3例设备故障、原因分析以及处理方法。
关键词：BEP-Ⅲ全自动酶免疫分析系统,故障维修,检验设备
参考文献
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酶免分析仪 篇6
1资料与方法
1.1一般资料选取山东省潍坊市第二人民医院2013年5月~2014年2月结核科门诊及住院的120例结核患者, 均符合2001年中华医学会结核病学分会制定的肺结核诊断标准。随机选择168例健康体检人员。
1.2仪器与试剂采用烟台Addcare ELISA500全自动酶免仪, 试剂采用荣盛公司结核抗体检测试剂, 批号:20130824。
1.3血清标本收集清晨空腹肘静脉血4 ml, 3000 r/min离心10 min分离血清, 血清分装后-80℃保存, 备用。
1.4研究方法选择4、5、6次不同洗涤次数, 10、30、60 s不同清洗震荡时间, 20、40、60 s不同浸泡时间[1], 进行结核抗体的ELISA检测, 观察对最终检测结果的影响, 评价不同因素对灵敏度、特异性、PPV、NPV、PLR、NLR、YI的影响。
统计学方法采用SPSS21.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率 (%) 表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2结果
2.1不同洗涤次数对结核抗体检测的影响洗涤5次时PLR和YI高于洗涤4次的水平 (P<0.05) ;洗涤5次各项与洗涤6次比较, 差异均无统计学意义 (P>0.05) 。见表1。
2.2不同振荡时间对结核抗体检测的影响振荡30 s的方法在灵敏度、特异性、PPV、NPV、PLR、YI方面的诊断效能高于振荡10 s的方法 (P<0.05) ;在PPV和PLR方面的诊断效能高于振荡60 s的方法 (P<0.05) 。见表2。
2.3不同浸泡时间对结核抗体检测的影响浸泡40 s的方法在灵敏度、NPV、PLR、NLR、YI方面的诊断效能高于其他浸泡时间 (P<0.05) 。见表3。
3小结
有研究证实, 结核分枝杆菌的特异性分泌蛋白的抗体检测对结核病的诊断具有重要意义[2,3], 利用基因工程技术将结核分枝杆菌的多种分泌蛋白制成融合蛋白, 利用ELISA技术检测血清中对应的抗体可用于不同类型结核病的诊断。
本文研究结果证实, 建立的洗涤液系统的标准化程序可以提高检测方法的灵敏度、特异性和准确性。
摘要：目的 评价不同的洗涤参数对全自动酶免仪检测结核抗体的影响。方法 120例结核患者采用全自动酶免仪, 选择4、5、6次不同洗涤次数, 10、30、60 s不同清洗震荡时间, 20、40、60 s不同浸泡时间, 进行结核抗体的酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测, 观察比较检测结果。结果 洗涤5次阳性似然比 (PLR) 、尤登指数 (YI) 高于洗涤4次的水平 (P<0.05) 。振荡30 s的方法在灵敏度、特异性、阳性预测值 (PPV) 、阴性预测值 (NPV) 、PLR、YI方面的诊断效能高于振荡10 s的方法 (P<0.05) ;在PPV和PLR的诊断效能方面高于振荡60 s的方法 (P<0.05) 。浸泡40 s的方法在灵敏度、NPV、PLR、阴性似然比 (NLR) 、YI方面的诊断效能高于浸泡20、60 s时 (P<0.05) 。结论 建立洗涤液系统的标准化程序可以提高检测方法的灵敏度、特异性和准确性。
关键词：高通量分析,酶联免疫吸附试验,标准化,结核抗体
参考文献
[1]黄绍梅, 邱薇, 许柳清, 等.蛋白芯片法检测结核抗体在儿童结核病中的诊断价值.广东医学, 2012, 33 (16) :2421-2422.
[2]黄胜, 余继英, 赵春艳, 等.胶体金法检测结核抗体的临床价值探讨.临床肺科杂志, 2014, 19 (6) :1058-1060.