总生物碱含量

总生物碱含量（共11篇）

总生物碱含量 篇1

狼毒( Stellerachamaejasme) 又称断肠草、馒头花、 燕子花等,是瑞香科狼毒属多年生草本植物,广泛分布于我国东北各省及西南地区海拔2 300 ~ 4 200 m向阳山坡草地[1],为了与大戟科大戟属狼毒( Euphorbiafischeriana) 相区别,常称为瑞香狼毒。瑞香狼毒中含有香豆素、黄酮、甾醇类成分,是重要的药用植物, 也是严重危害畜牧业发展的有毒植物[2]。瑞香狼毒味苦、性平,具有袪痰、散结、杀虫和抗肿瘤的作用,在传统中医中被逐步开发利用[3]; 但是,瑞香狼毒是一种有毒植物,误食可引起家畜中毒甚至死亡,而且由于其根系发达、生命力顽强,导致牧草大幅减产,给草原畜牧业造成巨大损失。瑞香狼毒的大量生长被认为是草原( 场) 退化的标志。近年来,随着我国天然草原( 场) 退化不断加剧,瑞香狼毒顺势扩张,仅青海、甘肃和内蒙古3个省区分布面积在182. 81万hm2以上[4,5],对畜牧业的危害程度与日俱增,如何有效防控瑞香狼毒,降低其所致经济损失,并对其加以合理利用在当前显得尤为必要和迫切。

瑞香狼毒在西藏多个地市均有分布,其中那曲、 林芝( 波密) 、阿里( 日土、噶尔、普兰) 及昌都等地区危害较为严重。面对瑞香狼毒的危害,人们趋利避害,积极利用,早在1 300多年前瑞香狼毒根已被用来造纸,狼毒纸驱虫避鼠、久不变色[6]。随着有毒植物利用的多样化,也给瑞香狼毒的防控与利用诸多启发。王敏等[7,8]研究表明,瑞香狼毒总黄酮和总生物碱提取物均具有较强的抗肿瘤作用。由于不同生长阶段、生长环境和放牧强度下瑞香狼毒总黄酮含量可能不同[9,10],因此本研究对西藏瑞香狼毒不同物候期地上部分全草总黄酮和总生物碱含量进行测定,旨在为西藏瑞香狼毒药用开发与综合利用提供基础资料。

1材料与方法

1. 1植物样品

瑞香狼毒花前期、花期和花果期地上部分全草, 分别于2013年7—9月份采集于西藏自治区当雄县 ( 30°28'58″ ~ 72″N,91°06'28″ ~ 74″E) ,将植物样品阴干、粉碎、过40目筛,保存备用。

1.2主要仪器和试剂

电子分析天平( FA3204B) ,上海精科天美贸易有限公司生产; 旋转蒸发仪( EV311) ,北京莱伯泰科仪品有限公司生产; 荧光分光光度计( 930A) ,上海三科仪器有限公司生产; 电热恒温水浴锅 ( DK - 98 ⅡA) ,天津市泰斯特仪器有限公司生产; 数控超声波清洗器( KQ - 500DE) ,昆山市超声仪器有限公司生产; 芦丁标准品,上海融禾医药科技有限公司生产; 氢氧化钠、无水三氯化铝、无水甲醇、高氯酸、冰醋酸、氯仿、正丁醇等均为市售分析纯。

1.3方法

1. 3. 1荧光分光光度法测定总黄酮含量标准品溶液的制备: 精密称取10 mg芦丁,用10 m L无水甲醇溶解制成1 mg /m L标准贮备液。分别取贮备液5, 10,15,20,25 μL置于5 m L比色管中,加0. 01% 三氯化铝甲醇溶液0. 8 m L,以无水甲醇定容至刻度,摇匀,配制成系列标准工作溶液。

样品贮备溶液的制备: 准确称取0. 5 g样品置于带塞锥形瓶中,加入50 m L无水甲醇室温静置过夜, 超声提取40 min过滤,滤液加无 水甲醇定 容至50 m L,作样品贮备液。

列线性回归方程: 芦丁系列标准工作溶液配制完毕20 min后,在EX435 nm、EM490 nm条件下测定其荧光强度,列出线性回归方程。

样品溶液总黄酮含量测定: 样品溶液配制好20 min后,置工作曲线相同条件下测吸光度,代入线性回归方程即可求得样品溶液总黄酮含量。

1. 3. 2非水滴定法测定总生物碱含量总生物碱制备: 精密称取样品粉末50 g,工业乙醇热回流提取总浸膏。总浸膏转入蒸发皿,60 ℃蒸干后用1 mol/L稀盐酸溶解过滤,滤液碱性氯仿萃取得碱性氯仿部分生物碱。余液继续用碱性正丁醇萃取得碱性正丁醇部分生物碱,合并两部分生物碱作为总生物碱。

滴定: 总生物碱用30 m L无水冰醋酸溶解于锥形瓶中,滴加结晶紫指示剂4滴,以高氯酸标准液滴定至蓝色为终点,记录高氯酸体积V1; 同时做空白对照,记录消耗高氯酸体积V0。计算公式: 总生物碱 ( % ) = ( V1- V0) M/50 × 100% 。式中M为瑞香狼毒所含主要生物碱毫克当量数,计算样品总生物碱含量。

2结果(见表1)与分析

%

由表1可见,瑞香狼毒不同生长阶段中花果期总黄酮和总生物碱含量均最高,其次为花期,以花前期瑞香狼毒中总黄酮和总生物碱含量最低。

3讨论

瑞香狼毒通常以根茎为药用部分,研究表明,瑞香狼毒叶中总黄酮含量显著高于根部; 而且西藏高寒草地植被易破坏难修复,采挖瑞香狼毒根部对植被损害较大,开发利用意义不大。因此,本研究以地上部分总黄酮和总生物碱含量为研究对象,采用荧光分光光度法测定总黄酮含量简便易行,精确性较好[11]。 总生物碱含量测定时,以碱性氯仿和正丁醇两部分生物碱作为总生物碱,与一般以碱性氯仿部分生物碱作为总生物碱的作法不同,主要考虑到碱性正丁醇提取部分可能含有生物碱。虽然这种方法提取的总生物碱会混入更多杂质,但对滴定结果影响并不大。

毕凌霄等[9]研究表明,瑞香狼毒5— 9月份总黄酮含量呈先降低后升高的趋势,与本研究结果一致。 本研究中不同物候期总黄酮含量均显著偏低,主要由于西藏特殊的地理环境及植物采集地放牧强度较低所致。因此,采集当地放牧强度相对较高草场瑞香狼毒测定其总黄酮含量,并进行差异性分析是解决此问题的最佳方法。

4结论

西藏瑞香狼毒总黄酮和总生物碱含量花果期 > 花期 > 花前期。花果期西藏瑞香狼毒地上部分全草总黄酮和总生物碱含量相对较高,是药用开发利用的最佳时期,但对于总黄酮和总生物碱含量是否达到药用开发利用限值有待进一步研究。

摘要：为了研究西藏瑞香狼毒的药用开发与综合利用,试验采用荧光分光光度法和非水滴定法对西藏天然草原主要有毒植物瑞香狼毒不同物候期地上部分全草总黄酮和总生物碱含量进行测定。结果表明:瑞香狼毒花前期、花期和花果期总黄酮含量分别为0.410%、0.445%和0.471%;总生物碱含量分别为0.255%、0.308%和0.368%。说明瑞香狼毒总黄酮和总生物碱含量花果期>花期>花前期,花果期是瑞香狼毒药用开发的较好时期。

关键词：西藏,瑞香狼毒,总黄酮,总生物碱,含量测定

参考文献

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[6]孙颖.传统瑞香狼毒藏纸造纸工艺研究现状[J].兰台世界,2013(5):70-71.

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[8]王敏,王学习,贾正平,等.瑞香狼毒总生物碱的抗肿瘤活性和机理研究[J].中药材,2010,33(12):1919-1922.

[9]毕凌霄,廖蓉苏.不同生长期瑞香狼毒和牛心朴子总黄酮含量研究[J].时珍国医国药,2010,21(10):2505-2507.

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[11]罗喜荣,黄静,杨军,等.荧光分光光度法测定瑞香狼毒中总黄酮的含量[J].安徽农业科学,2012,40(17):9260-9261.

总生物碱含量 篇2

┌ 水蒸气蒸馏法：用于具有挥发性的生物碱，如麻黄碱及液体生物碱。

│

·生物碱常用提取方法┤ 升华法：用于具有升华性的生物碱，如咖啡碱。

│

└ 溶剂法：用于大多数生物碱。

·总生物碱的提取，主要介绍溶剂提取法

1. 水或酸水提取法

原理：①利用生物碱盐易溶于水，难溶或不溶于亲脂性有机溶剂的溶解性能，用水进行提取。

②用酸水提取可使生物碱都以盐的形式被提出，提高提取率。

常用的酸：0.5%～1%的乙酸、硫酸、盐酸或酒石酸等。

提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法。

此方法的缺点是提取液体积大，浓缩困难，水溶性杂质多。

2. 醇类溶剂提取法

原理：游离生物碱及其盐一般都能溶于乙醇和甲醇。

提取方法：浸渍法、渗漉法、加热回流(连续回流)提取法。

此方法的缺点是含有大量脂溶性杂质。

3. 亲脂性有机溶剂提取法

原理：利用游离生物碱易溶于低极性有机溶剂，进行提取。

提取方法：冷浸法、加热回流(连续回流)提取法。

此方法的特点是 ① 提取前需用碱碱化。

② 只能提取亲脂性生物碱，亲水性生物碱不被提出。

③ 杂质少，易于进一步纯化。

总生物碱含量 篇3

关键词：斜脉暗罗；总生物碱；紫外分光光度法；茎；叶；皮

中图分类号： R284.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）01-0263-02

收稿日期：2013-05-23

基金项目：江西省教育厅项目（编号：GJJ13678）；赣南医学院项目（编号：YB201218）。

作者简介：刘冰晶（1988—），男，云南昆明人，硕士，助教，从事中药化学研究。E-mail：974141690@qq.com。斜脉暗罗（Polyalthia plagioneura）属番荔枝科（Annonaceae）暗罗属（Polyalthia genus），系我国特有种，分布于云南、广东、广西南部及海南[1]，为海南优势种[2]。国内外学者从暗罗属20多种植物中得到了生物碱、萜类等多种类型化合物[3-4]，从斜脉暗罗中分离得到生物碱类化合物marcanine A和少量其他化合物[5-7]，但有关斜脉暗罗总生物碱含量的测定未见报道。本研究以小檗碱为对照品，在pH值为4.5的醋酸—醋酸钠缓冲溶液中，以溴甲酚绿为显色剂，在628 nm波长下，利用分光光度法测定斜脉暗罗总生物碱含量，为保护和合理利用药用植物资源斜脉暗罗提供科学依据。

1材料与方法

1.1仪器、试剂与材料

紫外可见分光光度计（尤尼柯UV-4802）；98-C-数显控温电热套（天津泰斯特）；索式提取器；电子天平；三氯甲烷（AR）；溴甲酚绿（AR）；小檗碱标准品（成都领航者生物）；pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液；0.01 mol/L氢氧化钠溶液（用乙醇溶解）。

斜脉暗罗采自海南省昌江县霸王岭自然保护区，由海南师范大学生命科学学院钟琼芯教授鉴定为Polyalthia plagioneura，标本现藏于江西省脑血管药理重点实验室。

1.2 试验方法

参照刘冰晶等的方法[8-9]并进行改良。

1.2.1试验溶液配制用0.2 mol/L氢氧化钠滴加冰醋酸，调节pH值为4.5，即得醋酸—醋酸钠缓冲溶液；称取溴甲酚绿40 mg，加100 mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液溶解，过滤，即得0.04%溴甲酚绿溶液。

1.2.2标准曲线的制作称取干燥至恒重的小檗碱对照品2 mg，置于100 mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至100 mL，摇匀即得20 mg/L标准溶液。取小檗碱对照品溶液，显色后进行可见-紫外全波长扫描，结果表明对照品溶液在628 nm处有最大吸收峰。经多次重复，峰形一致且空白对照无干扰，故选择628 nm作为样品测定的波长。取标准溶液1.2、2.4、36、4.8、6.0、7.2 mL分别置于 20 mL 容量瓶中，用三氯甲烷稀释至10 mL，加入pH值為4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液 5.0 mL 和0.04%溴甲酚绿溶液 2.0 mL，剧烈振摇5 min，静置 30 min；取下层液5 mL，加入 0.01 mol/L 氢氧化钠—乙醇溶液1.0 mL，摇匀，于628 nm处测吸光度。以小檗碱含量为横坐标，吸光度为纵坐标制作标准曲线。

1.2.3空白溶液的制备取10 mL三氯甲烷溶液于20 mL容量瓶中，加入5.0 mL醋酸—醋酸钠缓冲液和0.04%溴甲酚绿溶液2 mL，剧烈摇动5 min，然后静置30 min；取下层液 5 mL，加入0.01 mol/L氢氧化钠—乙醇溶液1.0 mL摇匀，作为空白溶液。

1.2.4斜脉暗罗总生物碱的提取分别准确称取斜脉暗罗茎0.5 g、叶0.25 g和皮0.5 g，用适量氨水湿润，密封放置 30 min，索式提取2 h，将提取液置于碘化铋钾溶液经薄层层析（TLC）至不显色为止，回收三氯甲烷，残留物放冷至室温，用三氯甲烷溶解并定容至20 mL；取0.2 mL于容量瓶中，加三氯甲烷定容至10 mL，混匀作为样品液；取10 mL样品液于3个20 mL容量瓶中，加入5.0 mL醋酸-醋酸钠缓冲液和 2 mL 0.04%溴甲酚绿溶液，剧烈摇动5 min，然后静置 30 min；取下层液5 mL，加0.01 mol/L氢氧化钠—乙醇溶液1.0 mL，摇匀，于628 nm处测吸光度，计算生物碱含量。试验重复3次。

2结果与分析

2.1标准曲线方程

经过统计处理，得到标准曲线回归方程为：D=0.008 2C+0.167 1，相关系数r=0.999 1，线性范围为2.0～12.0 mg/L。

2.2稳定性试验

取斜脉暗罗提取溶液0.2 mL，每隔10 min用分光光度计测定1次吸光度，结果（表1）表明，斜脉暗罗茎、叶、皮提取物在1 h内稳定，RSD值分别为2.140%、2.070%和0.379%。

3.3精密度试验

取同一批样品，进行6次平行试验，测定含量，斜脉暗罗茎、叶和皮提取物吸光度RSD值分别为0.385%、1.882%和0.412%，精密度良好（表2）。

3小结与讨论

以小檗碱为标准品，测定斜脉暗罗茎、叶和皮总生物碱分光含量分别为 0.267 1%、1.473 7%和0.790 8%。利用紫外分光光度法测定斜脉暗罗茎、叶、皮中总生物碱含量，操作简便快捷，灵敏度高，重现性好，测定结果准确可靠。该方法与重量法、滴定法等测定方法比较，克服了多次重复萃取所造成的误差；与液相色谱法比较，具有所用仪器简单、操作方便、耗时少的优点。本研究结果可为斜脉暗罗的开发利用提供科学依据。

nlc202309041845

参考文献：

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总生物碱含量 篇4

关键词：山豆根配方颗粒,总生物碱,含量分析

山豆根配方颗粒与其药材一样, 具有清热解毒, 消肿利咽。用于火毒蕴结, 乳蛾喉痹, 咽喉肿痛等功效。山豆根药材总生物碱含量较高是评价质量的重要指标之一, 本试验以苦参碱为对照品, 建立了山豆根配方颗粒总生物碱含量的测定方法, 现报道如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器

TU-1900型紫外分光光度计 (北京普析通用仪器有限公司) , FA2004电子天平 (上海恒平科学仪器公司) , pHS-25型酸度计 (上海精密科学仪器有限公司) 。

1.2 材料

溴百里酚蓝, 超纯水, 甲醇、氨水、氯仿、磷酸二氢钾、氢氧化钠、95%乙醇等试剂均为分析纯。

1.3 材料

山豆根配方颗粒 (南宁培力药业有限公司, 批号:A061024-01、A081082-01、A090706-01, A101276-01) , 苦参碱对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号:110805-200508) , 溴百里酚蓝、甲醇、氨水、氯仿等试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液制备

精密称取干燥至恒重的苦参碱对照品适量, 用95%乙醇制成含536μg/mL苦参碱的对照品原液, 吸取1mL对照品原液, 用5%乙醇定容于25mL容量瓶中, 作为对照品稀释液。

2.2 供试品溶液制备

取山豆根配方颗粒0.5g, 研成粉末, 精密称量, 置具塞锥形瓶中, 精密加入氯仿:甲醇 (10∶10) 20mL, 氨液1.5mL, 密塞, 称量, 于70℃水浴回流加热4h后补重, 摇匀, 滤过, 取续滤液转移, 精密量取续滤液10mL, 挥干溶剂, 加甲醇溶解稀释, 转移于10mL容量瓶中至刻度, 摇匀, 吸取1mL, 蒸干溶剂, 用95%乙醇定容于10mL容量瓶中, 摇匀, 即得。

2.3 缓冲液及显色剂配制

吸取0.2mol/L磷酸二氢钾25mL, 0.1mol/L氢氧化钠39mL, 加水至100mL容量瓶中, 用pH酸度计校正至7.4作为缓冲液。精密称取溴百里酚蓝0.0250g, 加缓冲液至100mL容量瓶中配制成0.025%的显色剂。

2.4 线性关系考察

分别精密吸取苦参碱对照品原溶液1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于25mL容量瓶中, 分别吸取2mL, 分别置于具塞锥形瓶中。以加入2mL的95%乙醇为空白对照, 在413 nm波长处测定吸光度, 以吸光度Y为纵坐标, 测定浓度C为横坐标, 绘制标准曲线, 结果表明苦参碱测定浓度在4.29～21.4μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系, 回归方程为Y=0.0230C+0.2275, r=0.9990。

2.5 精密度试验

精密对照品稀释液2mL, 按上述方法重复测定6次, 结果6组吸光度测定平均值为0.323, RSD为0.16%, 表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验

精密吸取对照品稀释液2 mL, 测定吸光度, 每间隔1h测定1次, 吸光度RSD为1.05%, 表明显色后样品在6h内基本稳定。

2.7 重复性试验

取同一批号配方颗粒剂样品 (A101276-01) , 共6份, 按“2.2”项下方法制成供试品溶液, 取供试品溶液2mL, 按上述方法测定吸光度, 结果见表4, RSD为1.11%, 表明本方法重复性较好。

2.8 加样回收率试验

精密量取已测含量的配方颗粒样品6份, 精密加入苦参碱对照品适量, 按照供试品溶液制备方法进行操作, 测定吸光度, 计算回收率, 平均回收率为99.54%, RSD为2.17%。结果见表1。

2.9 样品测定

分别选取不同批次的山豆根配方颗粒, 按2.2法制备供试品溶液, 吸取供试品溶液2 mL, 测定吸光度, 以苦参碱计算, 得出供试品中总生物碱的含量, 结果见表2。

3 讨论

3.1 酸性染料比色法常用于制剂中生物碱的含量测定[1,2,3]。

试验中对缓冲液pH值的选择、溴百里酚蓝溶液加入量进行了测定, 确定pH=7.4缓冲液下, 苦参碱对照品与供试品在413 nm波长处有最大吸收。

3.2 总生物碱含量是评价山豆根药材质量的重要指标之一, 本试验以苦参碱为对照品, 对山豆根配方颗粒中总生物碱进行测定, 结果为较满意, 且方法快速、准确, 可用于山豆根配方颗粒质量控制。

参考文献

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[2]邓光辉, 胡炜, 刘榕城, 等.溴百里酚蓝比色法测定叶下珠生物碱的含量[J].时珍国医国药, 2009, 20 (5) :1193-1194.

总生物碱含量 篇5

1试验材料和方法

11试验材料洋葱黄瓜蒜苔

12试验方法首先将三种蔬菜洗净、擦干，洋葱切成3 mm宽的条，黄瓜切成2 mm厚的片，蒜苔切成3 cm长的段。共设4种处理方法：对照(分别称取3种切好的蔬菜100 g于植物组织捣碎机中，加等量水捣成匀浆)、漂烫(分别称取3种切好的蔬菜100 g于沸水中热烫2 min捞出，沥干，冷却，而后称取50 g于植物组织捣碎机中，加等量的水捣成匀浆)、油炒(分别称取3种切好的蔬菜100 g于炒锅中，加5 ml花生油，10 ml水，急炒2 min，取出，冷却，而后分别称取50 g于植物组织捣碎机中，加等量水捣成匀浆)、微波处理(分别称取3种切好的蔬菜100 g于微波盘中，加花生油5 ml、水10 ml，加热2 min取出，冷却，而后分别称取50 g于植组织捣碎机中，加等量水捣成匀浆)。

13分析项目总酸性物质含量用中和滴定法，氨基态氮含量用甲醛滴定法。

2结果与讨论

21不同烹调方法对蔬菜中总酸性物质含量的影响

由表1可看出微波加热可提高蔬菜中的总酸性物质含量，其中洋葱提高了287％，黄瓜提高了541％，蒜苔提高了1089％。而漂烫、油炒则使蔬菜中的总酸性物质含量降低，其中洋葱分别降低了3136％和86％，黄瓜分别降低了2297％和21％，蒜苔分别降低了1571％和688％。这可能是由于蔬菜中的有机酸易溶于水，在漂烫过程中大量损失掉。而在油炒过程中，油脂在蔬菜表面形成了一层保护膜，降低了有机酸的损失。而微波加热是一种特殊的加热方式，其机理有

待进一步研究。

表1不同烹调方法对蔬菜中总酸性物质含量的影响

注：蔬菜中总酸性物质含量以苹果酸计算。A、B、C：1％显著水平，a、b、c：5％显著水平

22对蔬菜氨基态氮含量的影响

由表2可看出，漂烫、油炒、微波加热3种烹调方法与对照相比蔬菜中氨基态氮含量均降低，其中漂烫降低的最多，洋葱降低了3083％，黄瓜降低了3657％，蒜苔降低了1454％；微波加热降低的最少，洋葱降低了601％，黄瓜降低了670％，蒜苔降低了474％。这可能是由于漂烫导致大量氨基酸溶于水中而损失掉。而油炒、微波加热可能是由于高温，使氨基酸发生了氧化。

表2不同烹调方法对蔬菜氨基态氮含量的影响

注：A、B、C、D：1％显著水平，a、b、c、d：5％显著水平

3结论

总生物碱含量 篇6

1 仪器与试药

1.1 仪器

日立UV-3010PC紫外—可见分光光度计(日本日立);722光栅分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);FA1004B电子天平(上海精密科学仪器有限公司);KQ-250型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);X/WT数显调节仪电热恒温水浴锅(余姚市显星仪器有限公司);RE-52A系列旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);微型高速万能试样粉碎机(北京市永光明医疗仪器厂);电热恒温干燥箱(上海市跃进医疗器械一厂)。

1.2 试药

天仙子药材于2007年3月购于安徽药材市场,经药典方法鉴定为天仙子的干燥成熟种子;硫酸阿托品对照品(购于中国药品生物制品检定所,纯度>98%);水为蒸馏水,其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

2.1.1 样品制备

生品:天仙子干燥种子,经粉碎后过60目筛,粗粉于烘箱中60℃干燥4h,备用。清炒品:将锅预热至190℃,投入生品100g,拌炒4min,经粉碎后过60目筛,备用。醋炒品:取生品100g,加40ml米醋闷8小时后按清炒法炮制药材,粉碎过40目筛,备用。醋煮品:取100g药材,加40 ml米醋,闷润2h,润湿加水没过药材,文火煮至药汁被吸尽,于微波炉低温烘干4min,经粉碎后过60目筛,备用。

2.1.2 供试品溶液的制备

取天仙子生品及不同炮制品粉末50.0g于500ml圆底烧瓶中,加300 ml 95%乙醇,置于80℃水浴回流提取3h,滤过,同法再提取2次,滤过,合并滤液,浓缩。提取物用2%硫酸溶解,合并酸水液,滤过。滤液以5%碳酸钠碱化至pH 9～10,用氯仿萃取3次(20 ml,20 ml,20 ml),合并氯仿萃取液并挥干,残留物以2%硫酸溶解,将pH调为7.0,加水定容于100 ml量瓶中,即得天仙子及其炮制品的供试品溶液。

2.2 对照品溶液的制备

称取硫酸阿托品对照品约25mg,精密称定,置25ml量瓶中,加水溶解,稀释至该度,摇匀。精密量取5.0ml,置100ml量瓶中加水稀释至刻度,摇匀,为硫酸阿托品55.2μg·ml-1的工作液。

2.3 7.2×10-4 mol.L-1溴甲酚绿pH4.42缓冲溶液配制[9]

精密称取溴甲酚绿125mg,用0.2 mol·L-1 NaOH 12.50ml溶解后,加入邻苯二甲酸氢钾2.55g,加少量蒸馏水溶解后,转移至250 ml量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,用pH计校正pH4.42。

2.4 测定波长的选择

精密量取硫酸阿托品对照品溶液及天仙子供试溶液各6.0ml,加入溴钾酚氯的氢氧化钠-邻苯二甲酸氢钾(pH4.42)缓冲溶液3.0ml,摇匀。再分别加入氯仿30.0ml,密塞瓶口振摇3min,静置1 h后取澄清的氯仿液,置于50ml量瓶中,用氯仿定容,摇匀,移置1 cm比色池中,另取蒸馏水如法操作后作为空白对照。分别在UV-3010PC型紫外可见分光光度计300～500 nm进行扫描。结果表明,对照品溶液和供试品溶液均在417 nm处有最大吸收,故选择417nm做为测定波长。

2.5 标准曲线的绘制

分别取对照品溶液0ml,2.0ml,4.0ml,6.0ml,8.0ml,10.0ml,12.0ml置于分液漏斗中,各加水至14.0ml,按2.4项下测定方法进行测定,在417nm的波长下分别测定吸收值。以浓度为横坐标,吸收度为纵坐标绘制标准曲线。回归方程:Y=0.0508X+0.0466,r=0.9998,n=6,结果表明,当硫酸阿托品在2.208～13.248ug·ml-1范围内具有良好的线性关系。

2.6 缓冲液pH值的选择

精密吸取样品溶液6.0ml,分别加入pH3.6,3.8,4.0,4.2,4.4,4.6,4.8,5.0的氢氧化钠～邻苯二甲酸氢钾缓冲液配制的溴甲酚绿溶液3.0ml,其余同标准曲线的绘制项下操作。实验表明,硫酸阿托品与溴甲酚绿形成的离子对在pH 3.70～4.52氢氧化钠-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液中吸收度值稳定,当pH>4.8时吸收度值均明显下降,当缓冲液pH为4.42时,吸光度值最大,即最灵敏。故选用pH4.42缓冲溶液。

2.7 缓冲液用量的选择

经试验硫酸阿托品100ug·10ml-1,加入7.2×10-4mol·L-1溴甲酚绿pH4.42缓冲溶液2.0～5.0ml时,吸收度值稳定。故选用溴甲酚绿缓冲溶液加入量3.00ml为宜。

2.8 溶液振摇时间的选择

硫酸阿托品-溴甲酚绿离子对用氯仿萃取时,振摇时间从1～4 min,吸收度值无变化,故振摇1 min。

2.9氯仿萃取放置时间的选择

硫酸阿托品-溴甲酚绿离子对用氯仿萃取后,放置30～100min,吸收度值稳定。故放置时间选用60min为宜。

2.10精密度实验

取同一比色样品,连续测定5次,吸光度值的RSD为0.76%,表明仪器精密度符合要求。

2.11稳定性实验

精密吸取对照品溶液和样品溶液各6.0ml,分别按标准曲线的绘制项下操作,间隔1h测定吸光度值,结果5 h内吸收值稳定,RSD分别为0.44%,0.58%,n=6,表明无论对照品还是样品的离子对均在5h内稳定。

2.12加样回收率实验

采用加样回收法,取天仙子粉末5份,精密称定,加入硫酸阿托品对照品,按2.4项测定方法进行测定,其结果平均回收率为98.408%,RSD为0.96%,n=5。

2.13重复性实验

取同批供试品溶液5份,依2.4方法进行测定,RSD为0.45%,n=5,表明重复性良好。

2.14样品含量测定

精密吸取供试品溶液,按2.4方法进行测定。结果见表1。

3 讨论与结论

(1)本文对多种提取方法进行了比较,结果表明,醇提取法中的热浸法较冷浸法测定生物碱含量高。而碱氯仿提取法(氨水浸润,氯仿冷浸后超声振荡、回流或索氏提取)测定生物碱含量最低[10]。经对回流提取时间的考察证明,回流提取3次,每次3h,可使总生物碱提取完全,与冷浸相比,提取总生物碱更加完全,操作简单,结果准确,重现性好。

(2)样品制备采用乙醇提取,乙醇提取所得的提取液经浓缩后得到的是棕色膏状物,无法直接测定其中的总生物碱含量,因此,必须对所得膏状物进行进一步处理,在本实验中,根据天仙子中总生物碱的特性,先将浸膏在加热的条件下溶于2%的硫酸调至pH为2～3。此时,总生物碱与硫酸结合成盐而使总生物碱溶解度增大很多,总生物碱几乎全部转化成易溶于水的盐而转移到水相中。再用5%碳酸钠调pH9～10,在碱性条件下,生物碱盐又可与碱作用转化成游离的生物碱。考虑到天仙子中的生物碱为脂溶性生物碱,因此用氯仿反复萃取,直至生物碱完全转移到氯仿层中。从而增加了总生物碱在氯仿中的溶解度,有利于总生物碱的含量测定。

(3)炮制方法不同,则对生物碱含量的影响亦不同,醋煮品>醋制品>生品>清炒品。与生品比较,清炒天仙子后生物碱含量有所下降,推测炮制时由于温度较高,使天仙子中生物碱成分破坏而损失。醋制后总生物碱的含量增加认为可能是醋酸与生物碱成盐,有利于生物碱的溶出。炮制后总生物碱含量变化的原理有待进一步研究。而醋煮法炮制品生物碱得率高,炮制时间短,操作简便,为推荐的炮制方法。

(4)酸性染料比色法是利用某些酸性染料在一定pH条件下可与碱性物质结合,定量形成有色络合物离子对,并可以定量地被有机溶剂提取,然后采用比色法测定其含量[11,12,13]。该法具有一定的专属性和准确度,并具有简便、快速、样品需用量少、灵敏度高等特点。pH值对酸性染料比色法影响较大。经过反复试验证明,硫酸阿托品、天仙子总生物碱与酸性染料形成离子对的pH条件在1.6～5.6之间,氢氧化纳-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液在pH4.42时吸收度最大且稳定性较好,所以我们选择pH4.42的氢氧化纳-邻苯二甲酸氢钾配制溴甲酚氯溶液。当硫酸阿托品、天仙子总生物碱与酸性染料形成离子对时,用氯仿萃取,萃取液在UV300～500 nm处最大吸收峰位相同,故选择硫酸阿托品较为适宜。

(5)总生物碱的含量测定方法众多,如紫外分光光度法、紫外薄层层析法、重量法、滴定法和酸性染料比色法等。本文采用酸性染料比色法.该法灵敏度高,准确性好,操作简便,克服了重量法和滴定法均需多次萃取易造成误差而导致重现性差的不足。

摘要：目的:探讨天仙子总生物碱含量测定方法。方法:应用酸性染料比色法测定天仙子及其炮制品总生物碱含量。结果:硫酸阿托品在2.208μg·ml～13.248μg·(ml)-1范围内星线性关系.加样回收率为98.41％,RSD为0.96％(n=5)。测得天仙子总生物碱含量生品为0.290mg·g-1,清炒品为0.242mg·g-1,醋炒品为0.420mg·g-1,醋煮品为0.548mg·g-1.炮制品中总生物碱含量以醋煮法最高。结论:本含量测定方法操作简单,灵敏度高,准确度好,重现性好。该实验为天仙子及其炮制品生物碱含量测定提供科学依据。

总生物碱含量 篇7

1.1 水泥混凝土的基本定义

从广义上来说, 混凝土是由具有胶凝性质的材料、粗细不一的骨料、水以及其他添加剂在适当的比例下按照一定的条件混合配制而成的、具有石材性质的人工材料。普通的混凝土是土木工程领域应用最为广泛的混凝土材料, 它的凝胶材料是水泥, 骨料是砂和石, 然后在水存在的条件下搅拌而成, 又名水凝混凝土。

1.2 水泥混凝土的优缺点概述

水泥混凝土具有原材料丰富, 成本低的优点, 同时还具有良好的可塑性, 并且其强度高, 耐久性也好, 在一般情况下可用钢筋增强。水泥混凝土表现出来的缺点, 即自重大, 属于脆性材料, 因而应用受到了一定的限制。

1.3 混凝土类别的划分

根据胶凝材料的不同可以把混凝土分为以下几大类, 即水泥混凝土、石膏混凝土、沥青混凝土以及聚合物混凝土。

根据混凝土材料表观密度的不同可以分为特重混凝土 (>2 500kg/m3) , 普通混凝土 (1 900<<2 500kg/m3) 以及轻混凝土 (600<<1 900kg/m3) 。

根据用途的不同可以把混凝土分为结构用混凝土、道路混凝土、特种混凝土、耐热混凝土以及耐酸混凝土等。

1.4 骨料的划分

水泥混凝土中的骨料可以分为细骨料和粗骨料两种。人们通常把粒径在0.16~5m m的骨料为细骨料也叫细骨砂。细骨砂多是天然砂, 包括河砂、海砂及山砂等。

水泥混凝土中若用粗骨料作为骨料, 其常见的就是碎石和卵石。在自然界中, 人们把天然岩石或卵石破碎、筛分之后得到粒径大于5m m的岩石颗粒, 叫作碎石或碎卵石, 而把自然形成的粒径大于5m m的颗粒叫作卵石。

2 水泥混凝土中总碱含量以及骨料碱含量的测定

为了明确水泥混凝土的性质, 掌握其质量, 总碱含量测定以及骨料碱含量测定是水泥混凝土使用前人们常做的一项工作。

2.1 总碱含量的测算

本研究对水泥混凝土中总碱含量的测定以及骨料碱含量的测定都是以C EC S 53:93混凝土中碱含量限值标准为依据的。对于总碱含量的测定可以用以下公式来表达:

在公式 (Ⅰ) 中X代表的是水泥混凝土的总碱含量, X a代表的是水泥混凝土中由于水泥的介入而得到的的碱含量, X ac代表着水泥混凝土中由于加入外加剂而增加的碱含量, X m c的意义是水泥混凝土中由于加入掺和料而引起的碱增加含量, X cw代表着由于在水泥混凝土中加入骨料以及拌和水而引起的碱含量增加量, 这些碱含量的单位都是kg/m3。在本研究中讨论的拌和水是海水, 而所加入的骨料则是由于受到海水侵蚀和作用而形成的砂石。

(Ⅰ) 式所要表达的含义是在1 m3的水泥混凝土中加入各种物质之后而引起的有效的总碱含量。

在实际的总碱含量测定中, 对于不同物质引入的碱含量是由不同的方法进行测定的, 例如, 对于由水泥、掺和料以及混凝土膨胀剂引入的碱含量一般是利用G B/T176-1996的水泥化学分析方法进行碱含量的测定的;对于由化学外加剂加入而引起的碱含量测定一般是利用G B/T8077-2000的混凝土外加剂匀质性试验方法进行碱含量测定的;对于拌和水是海水, 所加入的骨料则是由于受到海水侵蚀和作用而形成的砂石时, 该种情况下引入的有效碱含量一般是利用以下方法进行测定的:

2.2 骨料碱含量的测定

直接测定骨料中碱含量十分困难, 一般情况下是先求算出骨料中氯离子的含量, 进而利用其他检验方式把它折算成骨料中的碱含量。

同样以C EC S 53:93混凝土碱含量限值标准为测定依据, G B/T 14684-2001建筑用砂中氯化物含量的测定方法是常用的检验骨料中氯离子含量的有效手段, 进行试样分析时, 要先把水泥混凝土试样处理之后制成容溶液的状态, 进而利用一系列的化学手段, 计算出骨料中氯离子的含量, 然后再利用上述提到过的有效碱含量=0.76×骨料氯离子含量×骨料用量的公式计算出骨料碱含量。该种方法计算出的碱含量往往是通常所说的以氯化钠形式存在的碱含量。

除此之外, 还可以利用JG J 063-2006《混凝土用水标准》中提到的拌和水加入之后而引起的碱含量变化计算方式来对骨料砂、骨料石试样的浸取液进行碱含量的测定, 在此基础上测定出由于骨料加入而引起的有效碱含量增加量。该方法的主要步骤是取一定量的水泥试样, 在马弗炉中熔融消解之后制备成一定浓度的溶液, 然后利用原子吸收中的火焰光度法测定溶液中钾离子、钠离子的含量, 进而计算出试样中氧化钾以及氧化钠的含量, 按照一定的转化比例计算骨料碱含量, 这种方法的计算一般适用于含量在0.1%~8.0%的试样。

3 结语

水泥和混凝土是由多种物质组成的混合物, 在实际的生活中, 水泥混凝土的应用十分广泛, 由于社会对水泥混凝土的需求量越来越大, 导致市场上性能不一的混凝土大量存在。因此为了保证混凝土的质量, 同时也为了完善我国在水泥混凝土质量上的监督检验力度, 需要国家尽快明确水泥混凝土用砂、石碱含量的检测方法标准, 只有这样, 对水泥混凝土中总碱含量以及骨料碱含量的测定才能更加准确。

参考文献

[1]边华英, 王保生, 马挺, 等.谈水泥混凝土总碱含量的测算与骨料碱含量的测定[J].河南建材, 2008, (1) :37-38.

DNS法测定红枣总糖含量 篇8

1 仪器与试剂

1.1 仪器

FA1104型分析天平,8X-4-10型箱式电阻炉,722型可见分光光度计,766型远红外烘箱、HH-S型电热恒温水浴锅。

1.2 试剂

DNS试剂的配制:称取6.5 g 3,5-二硝基水杨酸溶于少量水中,移入1000 mL容量瓶中,加2 mol·L-1氢氧化钠溶液325 mL,再加入45 g丙三醇,摇匀,定容至1000 mL。

葡萄糖对照品液的配制:精密称定于105 ℃干燥至恒重的葡萄糖100.0 mg,置100 mL量瓶中,溶解并稀释至刻度,混匀得1.00 mg·mL-1葡萄糖对照品溶液。所用其他试剂均为分析纯。

红枣(外购),临用前将其在50～60 ℃下烘至恒重后,粉碎,过0.178 mm筛放干燥器中备用。

2 方法与结果

2.1 DNS法测定波长的确定

取1.2 mL葡萄糖标准液及2.8 mL蒸馏水分别置于50 mL试管中,再各加3.0 mL DNS试剂,沸水浴加热5 min,流水冷却,蒸馏水定容。将葡萄糖显色液-水、DNS试剂-水(空白),葡萄糖显色液-DNS试剂,在波长440～600 nm范围内进行扫描,结果见表1。从表1可知,500 nm时葡萄糖显色液-水和葡萄糖显色液-DNS试剂的吸光度最大,故本实验选择500 nm为最大吸收波长。

2.2 DNS试剂制备及其放置时间的确定

在准确加入1.0 mL葡萄糖标准溶液的系列50 mL容量瓶中,分别加入不同量的DNS试剂,沸水浴加热5 min,流水冷却定容。在500 nm波长下测定不同时间的吸光度,相同条件下测定空白溶液,结果见表2。从表2可以看出,DNS的量在相同体积时所测的吸光度均无太大的变化,在100 min内DNS试剂很稳定,其浓度不随放置时间的变化而变化。故DNS量的选择可在1～5 mL,放置时间可在100 min内。

2.3 加热时间的确定

取葡萄糖标准溶液1 mL及蒸馏水2 mL于系列50 mL的容量瓶中,分别加入DNS试剂,置沸水浴中加热、反应,不同时间取出,流水冷却、定容。在500 nm波长下测定不同加热时间溶液吸光度,相同条件下测定空白溶液,结果见表3。随着沸水浴加热时间的延长,吸光度变大,但在5 min后变化不大,吸光度较稳定。故最佳水浴加热时间为5 min。

2.4 盐酸浓度的选择

取0.5 g红枣样品液于100 mL容量瓶中,沸水浸泡30 min,冷却后分别加入不同浓度的盐酸(0.1～10 mol·L-1),沸水浴加入30 min,冷却,氢氧化钠中和,定容,过滤,得待测液。每种待测液各取2 mL于50 mL容量瓶中,分别准确加入所确定的DNS的量,沸水加热,流水冷却,定容,在500 nm波长下测定吸光度,结果见表4。当盐酸浓度小于1 mol·L-1时,溶液吸光度增大,当大于1 mol·L-1时,溶液吸光度减小。故本实验盐酸采用1 mol·L-1。

2.5 葡萄糖标准曲线的制定

分别取葡萄糖标准液(1 mg·mL-1)0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL于50 mL容量瓶中,分别准确加入DNS试剂3.0 mL,用蒸馏水补至7.0 mL,沸水浴加热5 min,流水冷却定容。在500 nm波长下测定吸光度,结果见表5。

计算得回归方程:A=4.4×10-3+5.125C,r=0.9988。

2.6 样品的测定

在500 nm波长下,显色剂用量3 mL,水浴加热时间为5 min,盐酸浓度为1 mol·L-1,按照2.5方法测定样品溶液的吸光度A=0.450,按回归方程计算样品水解后还原糖,由公式:总糖(%)=(水解后还原糖×稀释倍数/样品 )× 0.9× 100,计算总糖的百分含量为19.56%。

3 讨论

3,5-二硝基水杨酸在中性或偏碱性条件下与多糖水解的还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在500 nm波长处具有最大吸收,DNS法测定红枣中总糖的最佳条件为:检测波长500 nm,显色剂用量1～5 mL,沸水浴中保持5 min,盐酸浓度为1 mol·L-1。红枣中总糖含量为19.56%。实验结果表明,精密度、灵敏度都能符合食品分析的要求,分析结果可靠。红枣中总糖含量较高,值得综合利用和开发。

摘要：对DNS法测定红枣总糖的各影响因素进行探讨,确定最佳条件为:检测波长500 nm,显色剂用量15mL,沸水浴中保持5 min,盐酸浓度为1 mol.L-1,红枣总糖含量19.56%。

关键词：红枣,DNS法,总糖

参考文献

[1]苏肖洁,牛鹏飞,仇农学.恒温微波辅助提取红枣总糖工艺研究[J].陕西农业科学,2007,(3):27-30.

[2]张雅利,郭辉.红枣补血作用的物质基础探讨[J].中国食物与营养,2005,(3):2-4.

细基丸叶和茎总三萜含量测定 篇9

1 仪器、试剂与材料

1.1 仪器

UV2600紫外分光光度计,上海国美科学仪器有限公司;EYEL4OSB-2100旋转蒸发仪,日本东京理化;索式提取器等。

1.2 试剂

质量分数95%乙醇,无水乙醇,香草醛,高氯酸,冰醋酸等均为国产分析纯;乌苏酸对照品购自上海顺勃生物工程有限公司(纯度大于98.0%)。

1.3 材料

细基丸采自海南省昌江县,经霸王岭自然保护区陈庆工程师鉴定为番荔枝科暗罗属植物Polyalthia cerasoides,标本现存于海南师范大学省部共建-热带药用植物化学教育部重点实验室。

2 实验部分

参照文献[7,8,9,10]方法并做改进。

2.1 对照品溶液制备

准确称取105 ℃干燥至恒重的乌苏酸对照品20.0 mg,置于50 mL容量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得浓度为0.400 g/L溶液,精确移取溶液2.5 mL,定容至100 mL,得浓度为0.01 g/L的对照品溶液。

2.2 供试品溶液制备

将粉碎过的细基丸叶和茎置于50 ℃烘箱干燥24 h,各准确称取2.0 g,用无水乙醇浸泡2 h后,用索式提取器提取8 h,提取液用TLC测定,至渣液与浓H2SO4反应不显紫色为止,回收乙醇后,提取液放冷至室温,用无水乙醇定容至100 mL,摇匀。分别准确吸取叶和茎提取液2.5 mL和5.0 mL于100 mL容量瓶中,再用无水乙醇定容,摇匀,制得供试品溶液。

2.3 测定波长选择

精确量取对照品溶液5.0 mL, 加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸溶液0.8mL显色后,进行全波长扫描,随行空白对照。结果表明,对照品溶液在546 nm处有最大吸收峰,试验结果见图1,故选择546 nm 作为样品测定波长。

2.4 标准曲线绘制

准确吸取对照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.6 mL 分别置于10 mL容量瓶中,沸水浴挥去无水乙醇,冷却后,加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸溶液0.8 mL,将容量瓶放人70 ℃水浴中加热15 min,冷却至室温,用冰醋酸定容到刻度,摇匀。在546 nm波长处测定吸光度值,随行空白对照液。以乌苏酸含量(μg/mL)为横坐标,吸光度值为纵坐标,作图得到标准曲线(见图2),标准曲线方程为:

A=0.1548C+0.0286

式中A为吸光度值,C为浓度(μg/mL),相关系数 r=0.9993,线性范围为0.2~1.6 μg/mL。

2.5 稳定性实验

取对照品和样品溶液各5.0 mL,按照2.2项下方法进行,每隔15 min测定一次,结果见表1,RSD值较小,表明本法在1.5 h内基本稳定。

2.6 精密度实验

取同一批样品液,进行5次平行实验,测定含量,结果见表2, 叶和茎的分别为RSD=1.20%(n =5)和RSD=1.41%(n =5),精密度良好。

2.7 加样回收实验

准确量取5份已知含量的细基丸叶和茎提取液各5.0 mL,准确加入一定量的的乌苏酸对照品,余下部分按2.4项下方法操作。实验表明,叶提取物平均回收率99.43%,RSD=1.380%(n=3),茎提取物平均回收率100.64%,RSD=1.51%(n=3)。

2.8 样品含量测定

准确量取各3份细基丸叶和茎的样品溶液5.0 mL于50.0 mL 容量瓶中,沸水浴挥去无水乙醇,冷却后加入5%香草醛-冰醋酸溶液1.0 mL,高氯酸4.0 mL,容量瓶放人70 ℃水浴中加热15 min,冷却至室温,用冰醋酸定容,摇匀,余下部分按2.4项方法操作。实验和计算结果见表3,细基丸叶中总三萜含量为1.684%,RSD=0.53%(n=3),茎中总三萜含量为0.5439%,RSD=0.17%(n=3)。

3 讨 论

(1)测量总三萜类时,文献报道[8,9,10]显色系统香草醛-冰醋酸和高氯酸溶液的是不同的,本文对质量分数为5%的香草醛-冰醋酸溶液与高氯酸溶液的比例进行了调整,结果表明,本实验显色稳定,重复性好。

(2)试验结果表明,在显色系统香草醛-冰醋酸和高氯酸溶液条件下,用紫外光分光光度法测定细基丸中的总三萜有良好的线性关系,干扰少,方法简便,测定结果准确可靠,是测定细基丸总三萜类化合物的较佳方法。

摘要：测定细基丸叶和茎中总三萜的含量。以乌苏酸为对照品,以质量分数5%香草醛-冰醋酸和高氯酸系统为显色剂,采用紫外分光光度法在546 nm波长处测定样品的吸光度。乌苏酸对照品在20～100μg/mL范围内呈良好线性关系,回归方程为Abs=0.1548C+0.0286,r=0.9993。细基丸叶和茎中总三萜的含量分别为1.684%和0.5439%.本法操作简便,结果稳定,重复性好,易于推广。

关键词：细基丸,三萜,紫外分光光度法

参考文献

[1]蒋英,李秉滔,李延辉.中国植物志第三十卷第二分册[M].北京:科学出版社,1979:170.

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总生物碱含量 篇10

关键词：地桃花；总三萜；含量；测定

中图分类号： R284.1 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）03-0258-02

地桃花（Urena lobata L.）是锦葵科梵天花属多年生亚灌木状草本植物，别称肖梵天花、野桃花、野棉花、土黄芪、大迷马桩棵等[1-4]，分布于我国长江以南各省区[4]。地桃花根或全株均可入药，具有清热解毒、祛风利湿、益气补虚、活血消肿的功效，主治感冒、风湿痹痛、肾炎水肿、带下、淋病、疟疾、痢疾、乳腺炎、外伤出血等，是我国西南地区少数民族习用草药[1-5]。目前的研究表明：地桃花的化学成分主要为氨基酸和蛋白质、糖类、黄酮类、甾醇、鞣质、酚类、有机酸、皂苷等[4-7]。陈勇等的研究表明地桃花水提液在体外对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌和普通变形杆菌均有一定的抑菌活性[8]。国内外还未见有关地桃花总三萜测定的研究报道，本试验对地桃花根皮及叶的总三萜含量进行研究，以便为该民族药的进一步开发和扩大资源利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 材料 地桃花样品，采自云南省云龙县，标本保存于贵州民族大学化学与环境科学学院药学教研室。

1.1.2 仪器 756PC紫外-可见分光光度计（上海舜宇恒平科学仪器有限公司），METTLERAE240电子分析天平（上海天平仪器厂），BGZ-30电热鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂），SG3200HE超声清洗仪（上海冠特超声仪器有限公司），数显恒温水浴锅（常州博远试验分析仪器有限公司）。

1.1.3 试剂 无水乙醇、冰醋酸、高氯酸、香草醛均为分析纯，齐墩果酸对照品购自贵州迪大科技有限责任公司（纯度≥98%，批号：84650-60-2）。

1.2 试验方法

1.2.1 地桃花总三萜的提取方法 将晒干的地桃花根皮及叶在电热鼓风干燥箱中于（60±1） ℃烘干5 h，分别精确称取干燥、粉碎（过40目筛）的地桃花根皮、叶粉末各2.000 g，按 1 g ∶ 20 mL 的固液比用无水乙醇浸泡、超声提取2次。提取条件：时间60 min，超声频率40 kHz，功率150 W。提取结束后，合并提取液，过滤，冷却，用无水乙醇定容至100 mL，摇匀备用[9-11]。

1.2.2 标准溶液的制备及测定波长的选择[12-13] （1）标准溶液的制备。精确称取65 ℃干燥至恒重的齐墩果酸 20.00 mg，置100 mL容量瓶中，加无水乙醇适量使其溶解以无水乙醇定容、摇匀，每1 mL溶液含齐墩果酸200 μg。（2）测定波长的选择。分别精确吸取齐墩果酸标准溶液（200 μg/mL）、地桃花根皮、叶提取液各1.00 mL，分别置于3支10 mL比色管中，于85 ℃挥发干溶剂，冷却，分别精确加入5%香草醛-冰醋酸0.500 mL，再分别加入高氯酸1.00 mL，摇匀，于70 ℃水浴中反应20 min，取出，在冰水浴中冷却，用冰醋酸稀释至刻度，摇匀，静置5 min。以试剂空白建立基线，在400～700 nm波长范围进行波长扫描，得到齐墩果酸和地桃花根皮、叶提取液显色后的吸收光谱，以确定最大吸收波长。

1.2.3 齐墩果酸标准曲线的绘制 精确吸取质量浓度 200 μg/mL 的齐墩果酸标准溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 分别置于6支10 mL比色管中，测定波长的选择操作同“1.2.2”节，以试剂空白为参比，于540 nm波长下测定吸光度D540 nm，以吸光度为纵坐标、显色液中齐墩果酸的质量浓度C（μg/mL） 为横坐标，绘制标准曲线[12-13]。

1.2.4 样品测定 精确量取“1.2.1”节操作后所得地桃花根皮、叶乙醇提取液各1.00 mL，分别置于10 mL比色管中，测定波长的选择操作同“1.2.2”节，于540 nm波长下测得地桃花根皮、叶提取液的吸光度D540 nm，代入回归方程得地桃花根皮、叶的总三萜类化合物以齐墩果酸计算的质量浓度C（μg/mL），换算为干燥药材中总三萜酸的含量[12-13]。

1.2.5 重复性试验 精确称取地桃花根皮、叶样品各5份，按含量测定方法进行测定，计算平均含量及RSD值。

1.2.6 加标回收试验 精确量取地桃花根皮乙醇提取液 1.00 mL 5份，再分别精确加入齐墩果酸标准溶液（浓度为 200 μg/mL）1.00mL，按样品含量测定方法进行测定，计算加标回收率及RSD值。

2 结果与分析

2.1 测定波长的选择

由“1.2.2”节的试验结果可知齐墩果酸、地桃花根皮、叶提取液显色后在540 nm处均有最大吸收，故以540 nm作为总三萜的测定波长。

2.2 标准曲线

于540 nm波长下测定齐墩果酸标准溶液系列的吸光度D540 nm，以吸光度为纵坐标、显色液中齐墩果酸的质量浓度C（μg/mL） 为横坐标，绘制标准曲线（图1），经回归处理得方程：y=0.011 3x-0.017 7，相关系数：r2=0.999 1，齐墩果酸浓度在0～100 g/mL范围内吸光度与质量浓度线性关系良好。

nlc202309022340

2.3 样品总三萜含量的测定

由表1可知，地桃花根皮、叶样品中总三萜的平均含量分别为3.682%、9.297%，重复性试验RSD分别为1.79%和208%，精密度高。

2.4 加标回收率

由表2可知，加标回收率在96.29%～98.39%，RSD为0.880%，说明本试验所采用的方法适用于地桃花样品中总三萜含量的测定。

3 结论

地桃花是我国西南地区白族、纳西族、侗族等多个少数民族民间草药，目前其资源还未得到有效的开发利用。本试验首次对地桃花根皮、叶的总三萜含量进行研究，结果表明地桃花干燥根皮、叶总三萜含量分别为3.682%、9.297%，为该民族药的药用价值开发及扩大资源利用提供了一定的科学依据。

参考文献：

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循环水总铁含量测量方法的探讨 篇11

由于辽化公司的循环水系统处于高浓缩倍数下运行, 即使在投加水处理药剂的情况下, 也难免发生循环水系统设备的腐蚀结垢情况。而循环水系统的设备材质多为碳钢, 所以腐蚀结垢产物多以铁的各种化合物状态存在。及时准确的检测循环水中的总铁含量, 可以掌握设备的腐蚀结垢状况, 为循环水系统的运行管理提供技术支持。目前分光光度比色法测定循环水中总铁含量的代表方法有:邻菲罗啉法、磺基水杨酸法[1]、硫氰酸盐法[1]、二氮杂菲法[2]。其中HJ/T345-2007《水质铁的测定邻菲啰啉分光光度法 (试行) 》[3]成本低、灵敏高、比较适用于现有的工作需要, 下面针对该方法的实验条件进行探讨。

1 实验部分

1.1 方法原理

二价铁离子在p H值3~9的条件下与邻菲啰啉反应生成桔红色的络离子:3C12H8N2+Fe2+[Fe (C12H8N2) 3]2+。此络合离子在p H值3~3.4时最为稳定, 颜色的强度与二价铁离子含量成正比, 在铁离子浓度为5.0mg/L以下时, 浓度与吸光度呈线性关系[4]。水中三价铁离子用盐酸羟胺还原成二价铁离子, 即可测定总铁。

1.2 试剂和仪器

硫酸、过硫酸钾、盐酸羟胺、乙酸-乙酸铵缓冲溶液、邻菲啰啉、硫酸铁铵、可见分光光度计。

1.3 标准曲线的绘制

分别吸取2 0 m g/L铁离子标准溶液0.00m L、1.00m L、2.00m L、4.00m L、6.00m L、10.00m L于6个100m L的容量瓶中, 加水至40m L, 向各容量瓶中加几滴硫酸溶液、1 m L盐酸羟胺溶液、2 m L乙酸-乙酸铵缓冲溶液, 2 m L邻菲啰啉溶液, 稀释至刻度。在暗处15分钟后, 于510nm处用3cm比色皿, 以水为参比测其吸光度。此方法所做标准曲线见图1。

标准曲线的回归方程为:Y=0.001+0.579X, 相关系数为r=0.9999

1.4 样品测定

取25m L酸化后的水样于烧杯中加5m L过硫酸钾溶液, 微沸约20min剩余体积不低于20m L冷却后转移至50m L比色管中, 并补加水至50m L。加入1m L盐酸羟胺溶液并充分摇匀, 加2 m L乙酸-乙酸铵缓冲溶液, 2m L邻菲啰啉溶液, 放在暗处静置15min。在波长510nm处用3cm比色皿, 以水为参比, 进行比色。

2 结果与讨论

2.1 显色剂用量的影响

取5个循环水样各25m L, 分别加入邻菲啰啉溶液0.5m L、1.5m L、2.0m L、2.5m L和3.5m L进行显色试验, 其余测试条件相同, 曲线见图2所示。

图2表明, 样品加邻菲啰啉溶液的体积从0.5m L到2.0m L时, 所测吸光度值上升, 从2.0m L到3.5m L时吸光度值下降, 说明当加邻菲啰啉溶液体积超过2.0m L时引入新的干扰因素使得吸光度下降。所以邻菲啰啉溶液最佳用量为2.0 m L。

2.2 玻璃器皿洗涤方法的影响

取标准样品25 m L进行试验, 试验前玻璃器皿采用洗涤剂涮洗和1∶1盐酸浸泡两种方法, 测量结果见下表。

表1两种方法比较表明器皿仅用洗涤剂洗, 做试样的铁测量结果平行性差, 做空白有时吸光度偏大, 在绘制标准曲线时没有线性。若用1:1盐酸将所有玻璃器皿浸泡30min左右再用水冲洗干净, 做试样的铁测量结果平行性好, 测定结果较为准确, 可见玻璃器皿的不同洗涤方法对总铁测定结果有影响。所以在每次做样前先把要用的器皿浸泡在盐酸中30min。

2.3 测定时间的影响

取4个循环水场的水样分别放置0.5h、1h、2h测定结果见表2。

表2表明测定循环水中总铁时, 由于取样器皿的吸附作用, 随着时间的增长, 测定结果逐渐减少。所以取样后应及时测定, 如无法及时测定, 应在取样后立即加入适量的H2SO4固定。

2.4 Fe3+还原不完全

依标准方法, 取4个循环水水样, 分别在煮沸前、后加入盐酸羟胺1m L, 其余测试条件不变, 测试结果见表3。

由表3可知, 在煮沸前加入盐酸羟胺测得结果均上升, 说明加入盐酸羟胺后再煮沸更有利于Fe3+的还原, 而且还能消除强氧化剂的影响。基于此, 在方法改进中采取了煮沸前加入盐酸羟胺溶液。

2.5 方法的精密度和准确度考察

分别取铁含量为0.3、0.6、0.9、1.5mg/L的标准溶液各25m L, 实验前所用器皿用1:盐酸浸泡30min, 显色剂加入量为2m L, 测定结果见表4。

由表4得知其回收率大于95%, 相对标准偏差小于等于1.8%, 说明回收率和精密度均较为理想。

3 结论

由上述实验结果可知, 测定循环水中铁离子含量的最佳试验条件是:显色剂邻菲啰啉溶液用量为2m L;玻璃器皿在使用前应用1∶1盐酸浸泡30min左右, 清洗干净后再用;测定循环水中铁离子含量应现取现做, 不宜放置过久;在煮沸前加入盐酸羟胺溶液, 该方法的测定回收率和精密度较好, 可以用于循环水总铁的测定。

摘要：通过实验对邻菲啰啉法测定循环水总铁含量的影响因素—显色剂用量、玻璃器皿洗涤方式、测定时间等进行了探讨。结果表明, 显色剂用量为2.0 mL时, 显色效果最好。采样后30min内测定为宜。玻璃器皿用1:1盐酸浸泡后再使用, 消除杂质干扰, 测量值更准确。

关键词：循环水,总铁,邻菲啰啉法

参考文献

[1]SY/T5329-1994, 碎屑岩油藏注水水质推荐指标及分析方法[S]

[2]GB5749-1985, 生活饮用水卫生标准[S].

[3]HJ/T345-2007, 水质铁的测定邻菲啰啉分光光度法[S]