薄层色谱法定性鉴别（通用9篇）
薄层色谱法定性鉴别 篇1
摘要：目的 对薄层色谱法鉴别川芎、当归药材的方法进行分析,为今后的药学研究工作提供有价值的参考信息。方法 采用薄层色谱法对珍丸中川芎、当归展开定性鉴别。结果 在薄层色谱中,可准确检出川芎、当归。结论经薄层色谱法对川芎、当归进行定性鉴别,具有操作简单、方便快捷,重现性良好、专属性较强等诸多优势,值得关注。
关键词：八珍丸,薄层色谱,川芎,当归,定性鉴别,质量控制
在《中华人民共和国药典》2010年版一部中,收载了八珍丸中白芍、甘草等药材的鉴别,并未对川芎、当归的鉴别予以收录。研究证实,在川芎和当归中,均含有阿魏酸成分,单独进行川芎或者是当归的专属性鉴别效果不理想,因此,可以将二者作为整体进行鉴别。本文就薄层色谱法鉴别川芎、当归药材的方法进行分析,报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器多功能暗箱式紫外透射仪,自制浓度为4%氢氧化钠硅胶G薄层板,试剂均为分析纯。
1.2 试药对照品:川芎对照药材、当归对照药材,均购自中国药品生物制品检验所。样品:八珍丸样品购自三鹤药业有限公司,规格为9g×10/盒。供选择同一品牌3个不同的批次。
2 方法
2.1 溶液制备
2.1.1 对照药材溶液制备:
(1)称取当归对照药材0.3g,加入氨水2ml和乙醇25ml,振摇后静置30min,经过15min的超声后,滤过,滤液挥干,残渣中加入1ml乙醇溶解,并将其作为当归对照药材溶液。(2)称取川芎0.5g对照药材,加入氨水5ml、乙醇50ml,充分振摇后,静置30min,经超声处理15min后,滤过,将滤液蒸干,残渣中加入乙醇2ml,使其溶解,并作为川芎对照药材溶液。
2.1.2 阴性对照溶液制备:
按照处方配比模拟标准工艺,制出缺少当归、川芎两味药材的阴性对照样品,而后粉碎,粉末过5号筛,称取阴性对照样品粉末,共计9g,加入氨水5ml和乙醇50ml,充分振摇后,静置30min,超声处理15min,滤过后,将滤液蒸干,残渣中加入乙醇2ml,使其溶解,作为阴性对照溶液。
2.1.3样品溶液制备:称取八珍丸9g样品,剪碎后,加入硅藻土5g,研匀后,加入氨水5ml,乙醇50ml,充分振摇后,静置30min,而后经15min的超声处理,滤过,将滤液蒸干,残渣中加入乙醇1ml,使其溶解,并作为供试品溶液。
2.2 薄层色谱鉴别方法以《中国药典》201 0年版一部附录ⅥB中所示的试验方法为依据[1],开展薄层色谱鉴别。首先吸取上述配制的对照药材溶液、样品溶液和阴性对照溶液,各1 0 μl,分别点在同一硅胶薄层板上,展开剂选择乙醚-乙酸乙酯-甲酸(1 0∶50∶1),点好的硅胶G薄层板放置在展开剂中展开,完全展开后,取出,晾干,而后放置在紫外光灯下,分别在2 5 4 nm和365nm下检视。
3 结果
在供试品色谱中,与对照药材色谱相应位置上,显示出相同颜色的荧光斑点,阴性对照品液在相应位置上,无此斑点。结果见图1、图2。
4 讨论
当归属于伞形科当归属植物,当归的干燥根。现代药理学、药物化学研究证实,当归的主要有效成分为挥发油、水溶性成分,包括苯酞类化合物、当归多糖、脑苷类化合物、有机酸、丰富的氨基酸、微量元素等诸多有效成分。当归的药理作用比较广泛,其对人体生殖、神经、免疫、呼吸以及循环等多个系统均会产生明显的作用[2,3,4,5]。中药材川芎为伞形科蒿本属植物川芎的根茎,性温、味辛、微苦,主要功效为活血行气祛风止痛,对血瘀气滞引起的月经不调、痛经闭经、肝郁气滞引起的血行不畅,胸肋疼痛、风寒湿痹、头痛,跌打肿痛等疾病,具有良好的治疗效果[6,7,8]。临床上多应用于呼吸科、心脑血管科、泌尿系统以及妇科疾病[9,10]。八珍丸处方组成包括茯苓、党参、炒白术、甘草、当归、川芎、白芍、熟地黄等几味中药组成,临床主要作用为补气益血,多用于对气血两虚、面色萎黄、四肢乏力、食欲不振、月经过多等疾病。近几年,关于八珍丸等重要复方的质量标准研究、成分定性鉴别研究不断深入。
八珍丸处方中,含有川芎、当归,这两种药材中均含有阿魏酸成分,若是单独展开当归对照药材或者是川芎对照药材进行八珍丸薄层色谱鉴别,则会出现互相干扰,因此,在本次实验中,阴性对照药材中,无川芎、当归,对照药材同时应用川芎对照、当归对照药材。进而可以避免干扰。
本次研究就薄层色谱法鉴别川芎、当归药材的方法进行分析,为今后的药学研究工作提供有价值的参考信息。建立薄层色谱法,对八珍丸中当归、川芎药材展开了定性鉴别,结果发现,在供试品色谱中,与对照药材色谱相应位置上,应显示出相同颜色的荧光斑点,阴性对照品液在相应位置上,无此斑点。经重复试验,结果与之相同。这一结果充分证实,经薄层色谱法对川芎、当归进行定性鉴别,具有操作简单、方便快捷,重现性良好、专属性较强等诸多优势,值得关注。在今后的药学研究与临床药学服务工作中,应给予其足够的重视,尤其是在质量控制工作中,更应对其给予重视。
参考文献
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拳参薄层色谱的鉴别研究 篇2
【摘 要】 目的：改进拳参的薄层色谱鉴别方法。方法：以拳参对照药材为对照，通过改变提取方法和展开剂系统，改进其薄层鉴别方法。结果：在薄层色谱中检出拳参的特征斑点，所建方法操作更加简单。结论：该方法专属性强，可用于拳参的质量控制。
【关键词】 拳参；薄层色谱法；鉴别
【中图分类号】R282.5 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）13-0018-03
Abstract：Objective To improve the TLC identification method of bistort rhizome. Method Through the improvement of extraction method and expansion system， the feasibility of experimental was evaluated by TLC based on bistort rhizome control. Result Bistort rhizome in TLC had characteristic spots and the method was simpler. Conclusion The result showed the TLC method was highly specific. It was capable to control the quality of bistort rhizome.
Keywords：bistort rhizome； TLC； identification
拳参为蓼科植物拳参Polygonum bistorta L.的干燥根茎[1]，多生长在山坡草从阴湿处，产于华北、西北、河南、湖北、山东、江苏、浙江等地[2]，又名山虾子、倒根草、紫参、虾参、回头参、山柳柳等，具有清热解毒、消肿、止血的作用，用于赤痢、热泻、肺热咳嗽、痈肿、瘰疬、口舌生疮、吐血、衄血、痔疮出血、毒蛇咬伤。拳参含有黄酮、蒽醌、鞣质等化合物，具有一定的止血、抗菌和保护心脑血管的作用[3-5]。拳参中的没食子酸、儿茶素、表儿茶素等具有强抗氧化、抑制肿瘤生长和抗菌消毒等活性[6]；拳参水提取物能显著增强小鼠单核巨噬细胞吞噬能力，增强NK细胞的细胞毒作用，促进T淋巴细胞增殖，增加血清溶血素及血清IL-2水平，具有增强正常小鼠的免疫功能作用[7]。药典[1]十六味冬青丸、八味檀香散、感冒退热颗粒等处方中均含拳参，但均未收录其薄层鉴别方法。为更好方便地对该药进行薄层色谱鉴别，对拳参的薄层色谱鉴别方法进行研究，现报告如下：
1 仪器与材料
KQ-1060型超声清洗仪；自制硅胶G薄层板；Merck 硅胶G 薄层板；Apple 4s（薄层色谱拍照）；拳参药材（产地：云南，批号：150101、150102、150201）；拳参对照药材（批号：121569-201301，中国药品生物制品检定所）；甲酸、甲苯、乙酸乙酯、甲醇等均为分析纯；水为灭菌注射用水。
2 方法
2.1 拳参的薄层鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备 取本品0.5g，加水30mL，煎煮30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇15mL，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。
2.1.2 对照品溶液的制备 取拳参对照药材0.5g，加水30mL，煎煮30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇15mL，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为对照药材溶液。
2.1.3 阴性对照液的制备 取甲醇10mL，超声处理15min，滤过，滤液作为阴性对照溶液。
2.1.4 定性鉴别 照薄层色谱法（《中国药典》2015年版一部通则）方法试验，吸取上述三种溶液各5μL、分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5∶4∶1）为展开剂，展开，取出，待干后，喷以5%三氯化铁溶液，在日光下观察。供试品与对照药材色谱在相应的位置上显相同颜色斑点，阴性对照无相同颜色斑点。见图1。
2.2 拳参薄层色谱鉴别耐用性考察
2.2.1 不同薄层板的考察 取Merck硅胶G薄层板和自制硅胶G薄层板，分别按上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果显示，自制硅胶G薄层板及Merck硅胶G薄层板所得的色谱图斑点清晰，阴性无干扰，均可达到鉴别要求。见图2。
2.2.2 不同温度的考察 取已点样的Merck硅胶G薄层板，分别置于温度为5℃和25℃的条件下按上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果显示，该方法在不同温度下适应性较好。见图3。
2.2.3 不同湿度的考察 取已点样的Merck硅胶G薄层板，分别置于湿度为88%和32%条件下按上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果显示，该方法在不同湿度下适应性较好。见图4。
3 讨论
研究分别用Merck硅胶G薄层板和自制硅胶G对拳参进行实验，在T=25℃和T=5℃、RH=32%和RH=88%条件下展开，斑点清晰，色谱效果基本一致，均能达到鉴别要求，表明以上方法适用性良好，可用于拳参的鉴别。
拳参的薄层色谱鉴别按药典的方法展开条件为[1]：以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开后，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。但氨气是有强烈刺激性臭味的无色气体，与酸反应产生热，有燃烧爆炸危险，有腐蚀作用，属于危险化学品[8]。改进其方法后，Rf值适中，展开完成后就有可用于鉴别的斑点，但颜色较浅，不利于观察；喷显色剂后，放置1周依然显色清晰，且阴性对照无干扰，故未对其他显色剂进行比较性研究。且实验所用试剂安全性均较高，斑点颜色清晰，专属性较强，容易观察，显色稳定可靠。
研究没对其他产地的拳参进行试验，但避免使用危害性较大的试剂，对斑点判断有明显改善，且处理方法较简单、快捷，专属性强，可用于拳参的鉴别，具有一定的实用价值。
参考文献
[1]国家药典委员会. 中国药典（一部）[S]. 北京：中国医药科技出版社， 2015.
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薄层色谱法定性鉴别 篇3
1 材料
1.1 仪器与试药
ZF-90型多功能暗箱式紫外透射仪;硅胶G薄层板为自制, 试剂均为分析纯。
1.2 对照品与样品
1.2.1 对照品
柴胡对照药材, 批号为120992-200906, 由中国药品生物制品检验所提供。
1.2.2 样品
补中益气丸三个样品为市场上销售产品。样品1为湖北午时药业股份有限公司 (60g*1瓶, 批号:120901) , 样品2为广州中一药业有限公司 (60g*1瓶, 批号:PF0001) , 样品3为北京同仁堂科技发展股份有限制药厂 (6g*10袋, 批号:12082695) 。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 样品溶液的制备
取样品补中益气丸各5g, 研碎, 加40ml甲醇加热回流1个小时, 滤过, 滤液蒸干, 加水20ml使溶解, 用水饱和的正丁醇振摇提取2次, 每次20ml, 合并提取液, 用氨试液洗涤2次, 每次20ml, 弃去洗涤液, 正丁醇液蒸干, 残渣加甲醇1ml使溶解, 作为供试品溶液。
2.1.2 对照药材溶液的制备
取柴胡对照药材0.5g, 加水20ml, 加热回流1小时, 放冷, 滤过, 滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次, 每次20ml, 合并提取液, 用氨试液洗涤2次, 每次20ml, 蒸干, 加甲醇1ml使溶解, 作为对照药材溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备
按处方配比模拟标准工艺制成缺柴胡的阴性对照样品, 按 (1) 项下的方法操作, 作为阴性对照溶液。
2.2 薄层色谱鉴别
按照薄层色谱法 (《中国药典》2010版一部附录VI B) 试验, 吸取上述三种溶液各10μl, 分别点于同一硅胶薄层板上, 以乙酸乙酯-乙醇-水 (8:2:1) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以2%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液, 在105℃加热至斑点显色清晰, 置紫外光灯 (365nm) 下检视, 供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的荧光斑点, 而阴性对照品液在相应的位置上无上述主斑点。重复试验, 结果相同。如图1。
薄层色谱图代码:1、2为阴性对照溶液;3为样品1溶液;4为样品2溶液;5为样品3溶液;6、7、8为对照药材溶液。
2.3 结果
经过考查, 以上方法简便易行, 斑点清晰, 结果明确。
3 讨论
本方法采用的乙酸乙酯-甲酸-水 (20:3:1) 展开剂分离效果不是好, 而改用乙酸乙酯-乙醇-水 (8:2:1) 为展开剂分离效果好。
显色剂参考有关文献, 喷2%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液[2], 在105℃加热后显色, 置日光下检视不是很清晰, 而在紫外光灯 (365nm) 下检视, 荧光斑点明显, 阴性对照没有干扰, 且分离效果较好。
采用薄层色谱法, 进行补中益气丸中柴胡的薄层鉴别, 经实验证明方法可靠, 斑点清晰, 分离效果好, 不失为补中益气丸中柴胡的有效定性鉴别方法。
参考文献
[1]中国药典[S].一部, 2010:781.
薄层色谱法定性鉴别 篇4
【摘要】目的：薄层色谱法鉴别金乌骨通胶囊中的淫羊藿苷。方法：采用薄层色谱法对制剂中含有淫羊藿苷进行定性鉴别。结果：薄层色谱法检出淫羊藿苷，且斑点清晰。结论：该方法可作为金乌骨通胶囊中淫羊藿的定性鉴别方法，结果稳定性、重复性较好。
【关键词】金乌骨通胶囊；淫羊藿；薄层色谱
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）02-0012-02
金乌骨通胶囊是由金毛狗脊、木瓜、乌梢蛇、葛根、淫羊藿、姜黄、补骨脂等多味药组成，具有滋补肝肾，祛风除湿，活血通络的功效。用于肝肾不足，风寒湿痹，骨质疏松，骨质增生引起的腰腿酸痛、肢体麻木等症[1]。其中淫羊藿具有补肾阳，强筋骨，袪风湿的作用，用于肾阳虚衰，阳痿遗精，筋骨痿软，风湿痹痛，麻木拘挛[2]（P308）。淫羊藿药材中主要含有淫羊藿苷、淫羊藿次苷、巫山淫羊藿苷、宝藿苷VI、生物碱、挥发油等。本实验选用淫羊藿苷为对照对药品中的淫羊藿进行定性鉴别，该方法简便易操作，结果重复性较好。
1仪器与试药
SK250LHC超声波清洗器（上海科导仪器有限公司），梅特勒AG135电子天平，卡玛Linomat5半自动点样仪。淫羊藿苷对照品（批号：110737-200415）购于中国药品生物制品检定所；样品和缺淫羊藿阴性样品由贵州盛世龙方制药有限公司提供，硅胶G预制板（批号：20090406）和硅胶G（批号：0110916）（青岛海洋化工厂分厂）；水为纯净水（娃哈哈）；其它试剂均为分析纯。
2方法[3]与结果
2.1提取方法的考察分别称取金乌骨通胶囊内容物细粉1.0g，按下述方法处理：①加乙酸乙酯10ml，超声提取15分钟；②加70%乙醇溶液10ml，超声提取30分钟；③加甲醇10ml，超声提取30分钟；④加乙醇20ml，超声提取30分钟[2]（P307）。提取后，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml超声使溶解，静置，取上清液为供试品溶液①-④。取缺淫羊藿阴性1.0g，照方法④提取，作为阴性对照溶液。另取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。
取上述各供试品溶液、阴性对照溶液、对照品溶液各3μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水 （13.5：6：2 ） 静置至澄清的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃下加热至斑点显色清晰。结果方法①无对应主斑点，方法②③主斑点清晰但背景较深，方法④主斑点清晰且背景较浅，阴性对照无干扰。故选取方法④为淫羊藿苷薄层鉴别的提取方法。
2.2展开系统的考察取三个批号金乌骨通胶囊按提取方法④分别制成供试品溶液。取供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各3μl，点于薄层板上，分别在下述各展开系统中展开：①硅胶G板，氯仿-甲醇-丁酮 （1：2：2）；②硅胶G板，氯仿-甲醇-水 （13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液；③硅胶H板，乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水 （10：1：1：1）[2]（P307）。展开后，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃下加热至斑点显色清晰。结果系统①分离效果差，系统②分离效果较好，主斑点位置居中，阴性无干扰，背景干扰小，系统③主斑点位置对应不理想，阴性对照无干扰。故选取系统②为淫羊藿苷薄层鉴别展开系统。
2.3显色方法的考察取三个批号金乌骨通胶囊按提取方法④分别制成供试品溶液。取供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各3μl，分别点于硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，分别以下述各方法显色：①喷以5%三氯化铁乙醇溶液，晾干，日光下检视，显墨绿色斑点；②喷以1%三氯化铝乙醇溶液，晾干，在紫外灯（365nm）下检视，显橙红色荧光斑点；③喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃下加热，日光下检视，显黄绿色斑点。结果显色剂①斑点略显模糊边界不明显，色彩与背景对比不强；显色剂②斑点荧光较弱，与背景荧光混合较严重，斑点边界不明显，不易辨识；显色剂③斑点颜色鲜明，与背景颜色对比较强，斑点边界明显；阴性对照无干扰。故选取显色方法③为淫羊藿苷薄层鉴别的显色方法。
2.4点样量的考察取金乌骨通胶囊按提取方法④制成供试品溶液。取供试品溶液2、3、4、5、6μl、阴性对照溶液和对照品溶液各3μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水 （ 13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液为展开剂，
展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃下加热至斑点显色清晰。结果点样量较小斑点不够清晰，点样量较大则背景颜色较深，点样量5μl时斑点显色清晰且背景干扰较小，阴性对照无干扰。
故选取5μl为淫羊藿苷薄层鉴别的点样体积。
2.5耐用性考察按照国家药典委员会“中药分析方法验证指导原则实施细则”的相关要求，进行以下耐用性考察：①温度的考察：进行了低温（4℃）、室温（24℃）、高温（40℃）的考察，分离结果均较好。②湿度的考察：进行了低湿度（25%）、中等湿度（60%）和高湿度（75%）的考察，结果表明在上述条件下都能较好分离。
3讨论
淫羊藿为金乌骨通胶囊中的重要组成药味，在生产中的质量控制和流通中监督检查均应将其作为药品质量的指标之一，而原标准中此项目暂缺，本方法可对其进行有效补充。根据上述不同条件下的实验结果进行组合，金乌骨通胶囊中淫羊藿苷的薄层色谱鉴别方法为：取本品内容物1.0g，加乙醇20ml，超声提取30分钟，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml超声使溶解，静置，取上清液为供试品溶液。取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃下加热，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄绿色的斑点。
展开系统的考察中，系统③为淫羊藿薄层鉴别的经典系统，但在反复试验后发现其展开效果并不理想，虽斑点清晰位置适中，但由于药品中其他物质的干扰，对照品主斑点位置总是明显高于样品中主斑点位置，故最终选用无此现象的系统②。缺淫羊藿阴性对照在此薄层色谱系统中无干扰，故可采用淫羊藿苷作为对照品溶液对药品中的淫羊藿进行定性鉴别；色谱中主斑点清晰明显，位置居中，无论是预制板还是手工板，结果稳定，重现性较好。此方法可作为金乌骨通胶囊中淫羊藿药材的薄层色谱定性鉴别。
参考文献
[1]WS-10140（ZD-0140）-2002，金乌骨通胶囊[S].
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.
丹墨胶囊的薄层色谱鉴别 篇5
关键词：丹墨胶囊,墨旱莲,女贞子,丹参,薄层色谱鉴别
丹墨胶囊由墨旱莲、女贞子和丹参等药材组成,具有滋阴补肾、活血祛瘀的功效,主要用于治疗以肾虚为主的慢性肾炎,治疗效果显著[1]。为了更好地控制药品质量,保证产品疗效,参照文献[2-7],笔者对处方中的主要药材墨旱莲、女贞子和丹参进行了薄层色谱鉴别,结果重现性好,专属性强,现报道如下:
1 仪器与试药
硅胶G薄层板(Merck板);墨旱莲对照药材(批号:958-9302),女贞子对照药材(批号:1041-9701),丹参对照药材(批号:120923-200610),丹酚酸B对照品(批号:110562-200807)均由中国药品生物制品检定所提供;供试品(批号:101001、101002、101003)由中山大学附属第一医院提供;所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 墨旱莲的薄层色谱鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备
取本品10粒(5 g),研细,加70%甲醇25 ml,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1 m使溶解,作为供试品溶液。
2.1.2 对照药材溶液的制备
取墨旱莲对照药材0.1 g,同“2.1.1”项方法制成对照药材溶液。
2.1.3 阴性对照溶液制备
按处方中药味比例,同丹墨胶囊制造方法制成墨旱莲阴性对照样品,取相当于供试品的量,再按“2.1.1”项方法制成墨旱莲阴性对照溶液。
2.1.4 方法
照薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液10μl、对照品溶液1μl,阴性对照溶液10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点(图1,见封三)。
2.2 女贞子的薄层色谱鉴别
2.2.1 供试品溶液的制备
取本品10粒(5 g),研细,加乙醚30 ml,加热回流1 h,放冷,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1 m使溶解,作为供试品溶液。
2.2.2 对照药材溶液的制备
取女贞子对照药材0.5 g,同“2.2.1”项方法制成对照药材溶液。
2.2.3 阴性对照溶液制备
按处方中药味比例,同丹墨胶囊制造方法制成女贞子阴性对照样品,取相当于供试品的量,再按“2.2.1”项方法制成女贞子阴性对照溶液。
2.2.4 方法
照薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液20μl、对照药材溶液5μl、阴性对照溶液20μl分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇(40∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以磷钼酸试液,在105℃加热至斑点显色清晰,置日光下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点(图2,见封三)。
2.3 丹参的薄层色谱鉴别
2.3.1 供试品溶液的制备
取本品5粒(2.5 g),研细,加70%甲醇30 ml,加热回流1 h,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1 ml使溶解,作为供试品溶液。
2.3.2 对照药材溶液的制备
取丹参对照药材0.5 g,同“2.3.1”项方法制成对照药材溶液。
2.3.3 对照品溶液
取丹酚酸B对照品,加甲醇制成每1 m含1 mg的溶液,作为对照品溶液。
2.3.4 阴性对照溶液制备
按处方中药味比例,按丹墨胶囊制造方法制成丹参阴性对照样品,取相当于供试品的量,再按“2.3.1”项方法制成丹参阴性对照溶液。
2.3.5 方法
照薄层色谱法试验,分别吸取供试品溶液1μl、对照药材溶液1μl、阴性对照溶液1μl、对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254 nm)或紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点(图3,见封三)。
3 讨论
墨旱莲、女贞子和丹参为丹墨胶囊中的主要成分,在成品中对其进行鉴别可控制药品质量。丹墨胶囊中墨旱莲药材鉴别时,以墨旱莲对照药材为对照,以正己烷-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;丹墨胶囊中女贞子药材鉴别时,以女贞子对照药材为对照,齐墩果酸对照品确认对应斑点,以三氯甲烷-甲醇(40∶1)为展开剂,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,但齐墩果酸对照品色谱相应位置上样品斑点太弱,故未将齐墩果酸对照品纳入标准中,而直接采用女贞子对照药材鉴别;丹墨胶囊中丹参药材鉴别时,以丹参对照药材为对照,丹酚酸B对照品确认对应斑点,以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶1∶1)为展开剂,供试品色谱中,在与对照药材色谱及对照品斑点相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。三种药材鉴别结果色谱斑点清晰,分离理想,重复性好,且阴性对照无干扰。在4℃、18℃、25℃三种温度和32%、68%、72%三种相对湿度下进行温度及湿度影响因素考查,结果显示温度和湿度的变化对于墨旱莲、丹参和女贞子的薄层色谱分析无影响,在不同的温度和湿度下均取得了较好的分离效果。综合分析,本试验方法灵敏,专属性强,结果准确,操作简便,可作为丹墨胶囊的质量控制方法。
参考文献
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[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:附录VIB.
[3]赵晓春,郭惠娟.更年灵胶囊质量标准研究[J].中国药品标准,2004,5(4):42-44.
[4]范晓庆,杨钊,张春辉.海青胶囊中黄芪、大黄、丹参的薄层色谱鉴别[J].药物鉴定,2008,17(8):42.
[5]麦少霞.更年滋肾口服液的薄层鉴别[J].中药材,2009,32(8):1313-1314.
[6]余琰,黄燕,魏舒畅,等.二至胶囊质量标准研究[J].药物分析杂志,2010,30(2):291-293.
健脾灵糖浆薄层色谱鉴别 篇6
1 仪器与试药
GR202电子天平(日本AND);对照品及对照药材均来源于中国药品生物制品检定所,黄芪甲苷对照品(批号:0781-200311,含量测定用),麦冬对照药材(批号:121013-200607,鉴别),去氢木香内酯对照品(批号:111525-200505),党参对照药材(批号:121057-200504);样品:健脾灵糖浆(批号为090106、090507、090910),由广西壮族自治区靖西县人民医院提供;硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂);其它试剂为分析纯。
2 实验方法与结果
2.1.1 黄芪
取本品50mL,水浴蒸至约剩30mL,余液用水饱和的正丁醇萃取3次,30mL/次,正丁醇液用1%氢氧化钠溶液洗涤4次,40mL/次,弃去氢氧化钠液,再用正丁醇饱和的水洗正丁醇液至中性,取正丁醇液水浴蒸干,残渣加少量甲醇溶解后,上中性氧化铝柱(100~200目,5g,内径10mm),用50mL甲醇洗脱,弃去洗脱液,再用40%甲醇50mL洗脱,收集,水浴蒸干,残渣1mL甲醇使溶解,作为供试品溶液[1]。另取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成1mg/m L的溶液,作为对照品溶液。取按处方除去黄芪的阴性样品50mL,同法制成阴性样品溶液。吸取供试品溶液和阴性样品溶液各6μL、对照品溶液4μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷—甲醇—水(13:7:2)的下层液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,日光下显现相同的棕褐色斑点,紫外光灯(365nm)下显现相同的橙黄色荧光斑点。阴性样品液无干扰,见图1。
注:1为阴性样品溶液,2~4为不同批号供试品溶液,5为对照品溶液。
2.1.2 麦冬
取本品30mL,置水浴上蒸至约剩5mL,加入甲醇50mL,搅拌,滤过,取滤液,水浴蒸去甲醇,加稀盐酸2mL、水20mL,加热煮沸5min,放冷,用三氯甲烷20mL振摇提取,分取三氯甲烷液,浓缩至约1mL,作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g,加水20mL,煮沸30min,放冷,滤过,滤液“自加稀盐酸2mL”起,同法制成对照药材溶液。取按处方除去麦冬的阴性样品30mL,同法制成阴性样品溶液。吸取上述溶液各2μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷—丙酮(4:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显现相同的褐色斑点。阴性样品液无干扰,见图2。
注:1为阴性样品溶液,2~4为不同批号供试品溶液,5为对照药材溶液。
2.1.3 木香
取本品30mL,用三氯甲烷振摇提取2次,30mL/次,取氯仿层离心,分取三氯甲烷液,滤过,取滤液蒸干,残渣加甲醇1mL溶解,作为供试品溶液。取去氢木香内酯对照品,加三氯甲烷制成含0.5mg/mL的对照品溶液。取按处方除去木香的阴性样品30mL,同法制成阴性样品溶液。吸取上述溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷—环已烷(5:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显现相同的桃红色斑点。阴性样品液无干扰,见图3。
注:1为阴性样品溶液,2~4为不同批号供试品溶液,5为对照品溶液。
2.1.4 党参
取本品30mL,用乙醚20mL萃取,弃去乙醚液,水液中加入3mL盐酸,置沸水浴中回流1h,冷却,用三氯甲烷萃取2次,20mL/次,合并三氯甲烷液,水浴蒸干,残渣加三氯甲烷1m L使溶解,作为供试品溶液。另取党参对照药材1g,加水100mL煮沸30min,滤过,滤液浓缩至约30mL,加盐酸3mL,同时制得党参对照药材溶液。取按处方除去党参的阴性样品30mL,同法制成阴性样品溶液。吸取上述溶液各1μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯—乙酸乙酯—甲酸(20:4:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显现相同颜色的斑点。阴性样品液无干扰,见图4。
注:1为阴性样品溶液,2~4为不同批号供试品溶液,5为对照药材溶液。
3 讨论
在供试品制备过程中,对于糖浆剂中各检出成分的提取分离多采用萃取方法,由于健脾灵糖浆中含有挥发油、皂苷及乙醇,在萃取时极易产生乳化现象,或萃取液中含有树脂状、粘液状悬浮物,常影响分离,根据各成分性质的不同,我们采用加热样品的方法以除去其中的挥发油及乙醇,如黄芪的供试品溶液制备;或采用离心后再滤过萃取液方法,如木香供试品溶液的制备,有效地解决了乳化现象。为了除去水溶性成分及蔗糖等,采用水溶醇沉法先将样品置于水浴中蒸至只剩糖浆,再加入甲醇将其沉淀后滤除,解决了供试液粘稠难于点样的问题。
在黄芪供试液的制备中,曾采用水饱和的正丁醇提取后用氨试液洗涤的方法,结果其薄层色谱背景干扰大,斑点颜色与对照品不一致。后参照文献[1]中黄芪的鉴别方法,所得斑点清晰,分离良好,无杂质斑点干扰。
在党参供试液的制备中,曾参考文献[2]中的提取方法提取方中的党参炔苷,结果供试液的薄层色谱中未能检出党参炔苷,参考文献[3]中液相色谱条件检测其含量及其原料党参药材中党参炔苷的含量,均因党参炔苷含量太低使得薄层色谱未能检出,其具体原因尚有待进一步研究,本文用酸水解,再用三氯甲烷提取其水解后的苷元,结果色谱斑点清晰,能准确检出党参。
参考文献
[1]邓杨,黄志芳,刘玉红,等.归芪养血糖浆的薄层色谱鉴别[J].华西药学杂志,2005,20(1):82-83.
[2]韩雪,刘养清,王富乾,等.RP-HPLC测定生脉饮(党参方)中党参炔苷的含量[J].中成药,2008,30(5):4-6.
壮腰止痛合剂的薄层色谱鉴别 篇7
1 样品与试药
壮腰止痛合剂(江苏省泰州市姜堰中医院)，阴性对照品，当归、防风、川芎对照药材均购于中国药品生物制品检定所，所用试剂均为分析纯，水为纯化水。
2 薄层色谱鉴别
2.1 当归薄层色谱鉴别[1]
取本品30 ml加乙醚60 ml振摇提取，分取乙醚层，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇2 ml溶解，作为供试品溶液。另取缺当归的阴性对照样品，同法制成阴性对照样品溶液。再取当归对照药材1 g加乙醚20 ml加热回流60 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2 ml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法[2]实验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂展开，取出晾干，置紫外灯365 nm下检视。供试品溶液与对照品溶液相应的位置上显相同颜色的亮蓝色荧光斑点。阴性对照色谱中相应的位置上，无此斑点。(见图1)。
1供试品2.当归对照药材3.缺当归阴性对照品
2.2 川芎薄层色谱鉴别
取本品30 ml加乙醚60 ml振摇提取，分取乙醚层，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2 ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺川芎的阴性对照样品同法制成阴性对照样品溶液。再取川芎对照药材1 g加乙醚20 ml加热回流60 min，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯2 ml溶解，作为对照药材溶液[3]。照薄层色谱[2]试验。吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂展开，取出晾干，置紫外灯365 nm下检视。供试品溶液与对照品溶液相应的位置上显相同颜色的蓝色荧光斑点。阴性对照色谱中相应的位置上，无此斑点。(见图2)
1供试品2川芎对照药材3缺川芎阴性对照品
2.3 防风薄层色谱鉴别
取本品30 ml加乙醚60 ml振摇提取，分取乙醚层，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇2 ml使溶解作为供试品溶液。另取缺防风的阴性对照样品同法制成阴性对照样品溶液。再取防风对照药材1 g加乙醚20 ml，加热回流60 min，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇1 ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法[2]试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂展开，取出晾干，置紫外灯365 nm下检视。供试品溶液与对照品溶液相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱中相应的位置上，无此斑点(见图3)。
1供试品2防风对照药材3缺防风阴性对照品
3 讨论
3.1 由于本制剂中挥发油含量较多，为了控制该制剂的内在质量，对处方中的当归、川芎、防风进行了薄层色谱鉴别，实验结果表明色谱斑点清楚，阴性样品无干扰。操作简单，结果准确可靠。可用于壮腰止痛合剂的质量控制。
3.2 该试验方法亦可用于这些药材的定性鉴别。
摘要：目的 鉴别壮腰止痛合剂中的当归、川芎,防风。方法 采用薄层色谱(TLC)鉴别制剂中的当归,川芎,防风。结果 薄层色谱法鉴别制剂中的当归,川芎,防风,专属性强,分离度好,色谱斑点清晰。结论 本方法简便灵敏,结果准确可靠,为本品的质量控制提供了简便的方法。
关键词：壮腰止痛合剂,当归、川芎,防风,TLC
参考文献
[1]何建华,李月琴.壮腰止痛合剂的制备及临床应用.江苏药学与临床研究,2005,13(5):50-51.
[2]中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典:一部.北京:中国医药科技出版社,2010:附录VIB.
冬杞明目胶囊的薄层色谱鉴别 篇8
1材料
1.1 试药
冬杞明目胶囊:批号060505、060516、060527, 由山西省中医院制剂室提供。人参皂苷Rb对照品 (批号:110704-200323) 、人参皂苷Re对照品 (批号:0754-200013) 、人参皂苷Rg1对照品 (批号:110703-200323) 、人参对照药材 (批号:120917-200507) 、枸杞子对照药材 (批号:120902-200509) 、甘草对照药材 (批号:120904-20051) :均购于中国药品生物制品检定所。其余试剂均为市售分析纯。薄层层析硅胶G:青岛海洋化工有限公司, 化学纯, 批号:070103。
1.2 仪器
UV-II型紫外分析仪:北京新技术应用研究所;BP211D电子天平:德国赛多利斯;CX-150型超声清洗机:北京市天海双龙医疗设备有限公司;RE-5298A旋转蒸发器:上海亚荣生化仪器厂。
2方法与结果
2.1 人参的薄层色谱鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备
取本品内容物6g, 研细, 加三氯甲烷80ml, 超声处理15分钟, 滤过, 弃去滤液, 药渣挥干溶剂, 加水饱和正丁醇80ml, 超声处理30分钟, 滤过, 滤液加1%氢氧化钠溶液洗涤2次, 每次50ml, 弃去碱液, 再加正丁醇饱和水洗至中性, 正丁醇液蒸干, 残渣加甲醇1ml使溶解, 作为供试品溶液。
2.1.2 阴性样品溶液的制备
本品处方去人参, 按制备工艺, 制成阴性样品溶液, 照供试品溶液制备方法, 制成去枸杞子阴性样品溶液。
2.1.3 对照品溶液的制备
精密称取人参皂苷对照品Rb1、人参皂苷对照品Re、人参皂苷对照品Rg1, 加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液, 作为对照品溶液。
2.1.4 人参对照药材溶液的制备
取人参对照药材1g, 加三氯甲烷40ml, 超声处理15分钟, 滤过, 弃去滤液, 药渣挥干溶剂, 加水饱和正丁醇40ml, 超声处理30分钟, 滤过, 滤液加1%氢氧化钠溶液洗涤2次, 每次50ml, 弃去碱液, 再加正丁醇饱和水洗至中性, 正丁醇液蒸干, 残渣加甲醇1ml使溶解, 作为人参对照药材溶液。
2.1.5 薄层色谱试验
吸取供试品溶液、阴性样品溶液各15μl和对照品溶液、对照药材溶液各5μl, 按薄层色谱法 (中国药典2005版一部附录VIB) 试验, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以三氯甲烷-甲醇-水 (13:7:2) 10℃以下放置的下层溶液为展开剂, 展开, 展距12cm, 取出, 晾干, 喷以10%硫酸乙醇溶液, 在105℃加热至斑点显色清晰, 分别置日光和紫外光灯 (365nm) 下检视。供试品色谱中, 在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上, 日光下显相同的紫红色斑点, 紫外光灯下显相同颜色的荧光斑点;阴性样品色谱中, 在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上, 未见相应的斑点或荧光斑点, 见图1。
1～3.供试品 4.对照品 5.对照药材 6.阴性品
2.2 枸杞子的薄层色谱鉴别
2.2.1 供试品溶液的制备
取本品内容物8g, 加水60ml, 加热煮沸15分钟, 放冷, 滤过, 滤液用乙酸乙酯提取2次, 每次15ml, 合并乙酸乙酯液, 浓缩至约1ml, 作为供试品溶液。
2.2.2 阴性样品溶液的制备
本品处方去枸杞子, 照供试品溶液制备方法, 制成去枸杞子阴性样品溶液。
2.2.3 枸杞子对照药材溶液的制备
取枸杞子药材0.2g, 加水40ml, 照供试品溶液制备的方法, 制成对照药材溶液。
2.2.4 薄层色谱试验
吸取供试品溶液、对照药材溶液、阴性样品溶液各10μl, 按薄层色谱法 (中国药典2005版一部附录VIB) 试验, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以石油醚 (60～90℃) -乙酸乙酯-冰乙酸 (10:5:0.6) 为展开剂, 展开, 展距8cm, 取出, 晾干, 置紫外光灯 (365nm) 下检视。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的荧光斑点;阴性样品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 未见相应的荧光斑点, 见图2。
2.3 甘草的薄层色谱鉴别
2.3.1 供试品溶液的制备
取本品5g, 加乙酸乙酯80ml, 超声处理20分钟, 滤过, 滤液蒸干, 残渣加甲醇1ml使溶解, 作为供试品溶液。
2.3.2 阴性样品溶液的制备
本品处方去甘草, 照供试品溶液制备方法, 制成去甘草阴性样品溶液。
2.3.3 甘草对照药材溶液的制备
取甘草对照药材0.2g, 加乙酸乙酯40ml, 照供试品溶液制备方法, 制成对照药材溶液。
2.3.4 薄层色谱试验
用微量进样器吸取供试品溶液、阴性样品溶液各10μl和对照药材溶液5μl, 按薄层色谱法 (中国药典2005版一部附录VIB) 试验, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以正丁醇-乙醇-浓氨试液 (10:4:3) 为展开剂, 展开, 展距7cm, 取出, 晾干, 喷以10%硫酸乙醇溶液, 在105℃加热至斑点显色清晰, 置紫外光灯 (365nm) 下检视。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点;阴性样品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 未见相应的荧光斑点, 见图3。
1.阴性品2～4.供试品5.枸杞子对照药材
1～3.供试品4.甘草对照药材5.阴性品
3讨论
中药复方制剂中各药味的鉴别方法不同于单味药的鉴别。各药味因不同的组合, 其提取方法和纯化方法存在很大的差别, 因此在进行薄层色谱鉴别时, 应视具体情况, 摸索最佳提取方案, 选择优良展开剂, 以使实验达到预期效果。文中冬杞明目胶囊中枸杞子、人参和甘草的薄层色谱鉴别方法简便、重现性好, 可作为该复方制剂的定性鉴别质量标准。
摘要：目的:建立冬杞明目胶囊的薄层色谱鉴别标准。方法:采用薄层色谱法对冬杞明目胶囊中主要药味人参、枸杞子和甘草进行定性鉴别。结果:薄层色谱斑点清晰, 分离效果好, 去除鉴别药味的阴性样品无干扰。结论:本法作为冬杞明目胶囊的薄层色谱鉴别方法, 操作简便, 重现性好, 能准确鉴别冬杞明目胶囊复方制剂中人参、枸杞子和甘草, 可作为本品的质量控制标准。
止痛风湿丸的薄层色谱鉴别 篇9
1.1 仪器
KQ3200E型医用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；JA1203型电子天平（上海天平仪器厂）；
1.2 试药
黄柏对照药材（中国药品生物制品检定所，批号为121510-201105）；栀子苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110749-200714）；盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110713-200911）;
黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110842-201106）。
2 方法与结果
2.1 栀子的薄层色谱鉴别
栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。栀子主含栀子苷。
主要功效： (1) 泻火除烦：适于热扰心神。a.外感热病，邪郁上焦，心胸烦闷不眠。b.火毒炽盛，高热烦躁，甚至谵语。 (2) 凉血解毒：用于血分热毒证。a.血热妄行，吐血，衄血，尿血。b.咽肿目赤，热毒疮疡，属实热的。 (3) 清利湿热：适用于肝胆及下焦湿热证。a.肝经湿热郁火，心烦易怒，胁痛口苦。b.湿热黄疸及湿热下注，热淋涩痛。
2.1.1 供试品溶液的制备
取本品15g，除去糖衣，研细，加乙醚20mL，振摇提取10min，弃去乙醚，残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯10mL，置水浴上加热回流1.5h，取出后放冷，过滤后滤液放在水浴上蒸干，残渣加5mL甲醇使其溶解完全，作为样品溶液。
2.1.2 阴性对照溶液的制备
取不含栀子的阴性样品约15g，粉碎，加乙醚20mL，振摇提取10min，弃去乙醚，残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯10mL，置水浴上加热回流1h，取出，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为阴性对照溶液。
2.1.3 栀子苷对照品溶液的制备
称取栀子苷对照品约10mg，置经校正合格后的10mL量瓶中，加甲醇振摇使溶解完全，再加甲醇稀释到刻度，摇匀，作为栀子苷对照品溶液。
2.1.4 展开剂与显色条件
吸取上述供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各8μL，照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（10∶7∶2∶0.5）作为展开剂，展开后小心取出，然后在阴凉处晾干，喷以13%硫酸乙醇溶液，一边加热，一边观察，直到斑点显色清晰为止。
2.1.5 结果
在供试品溶液所显主斑点的位置上，和对照品溶液相应位置上的主斑点颜色相同。阴性样品没有影响。
2.2 黄柏的薄层色谱鉴别
黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.的干燥树皮。黄柏主含盐酸小檗碱。
主要功效：清热解毒药；清热燥湿药。主治：湿热痢疾、泄泻、黄疸；梦遗、淋浊、带下；骨蒸劳热；以及口舌生疮；目赤肿痛；痈疽疮毒；皮肤湿疹。性味：苦；寒。黄柏与黄连同样含较多的小檗碱，故其药理作用亦大体相似，但含量较黄连低，并含有其他成分，作用亦有些差异。
2.2.1 供试品溶液的制备
取本品15g，除去糖衣，研细，加甲醇20mL，加热回流30min，滤过，滤液作为供试品溶液。
2.2.2 盐酸小檗碱对照品溶液的制备
称取盐酸小檗碱对照品约10mg，置经校正合格后的10mL量瓶中，加甲醇振摇使完全溶解，再加甲醇稀释到刻度，摇匀，作为盐酸小檗碱对照品溶液。
2.2.3 黄柏对照药材溶液的制备
取黄柏对照药材50mg，加甲醇5mL，加甲醇20mL，加热回流30min，滤过后，滤液作为黄柏对照药材溶液。
2.2.4 阴性对照溶液的制备
取不含黄柏的阴性样品约15g，粉碎，加甲醇20mL，加热回流30min，滤过，滤液作为阴性对照溶液。
2.2.5 展开剂与显色条件
吸取上述供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液、阴性样品溶液四种溶液各10μL，照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，分别点样于同一经活化40min后的硅胶G薄层板上，以正丁醇-甲酸-水（7.5∶1.6∶0.9）作为展开剂，展开后取出，然后在阴凉处晾干，放在三用紫外分析仪上（365nm）下检视。
2.2.6 结果
在供试品溶液所显主斑点的位置上，和对照品溶液和对照药材溶液相应位置上有相同颜色的荧光斑点。阴性样品没有影响。
2.3 黄芩的薄层色谱鉴别
黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根。黄芩主含黄芩苷。
主要功效：清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。用于湿温、暑温胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩的临床应用抗菌比黄连还好，而且不产生抗药性。我们借助广谱抗菌作用强的特点，用在真菌培养杂菌感染特厉害，用黄芩提取液效果很好。
2.3.1 供试品溶液的制备
取本品约15g，除去糖衣，研细，加甲醇约25mL，在超声波清洗器上超声处理约20min，放在室温冷却，滤过后滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇约5m L使完全溶解，作为样品溶液。
2.3.2 黄芩苷对照品溶液的制备
称取黄芩苷对照品约20mg，置经校正合格后的10mL量瓶中，加甲醇振摇使完全溶解，再加甲醇稀释到刻度，摇匀，作为黄芩苷对照品溶液。
2.3.3 阴性对照溶液的制备
取不含黄芩的阴性样品约15g，粉碎，加甲醇约25mL，在超声波清洗器上超声处理约20min，放在室温冷却，滤过后滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇约5m L使完全溶解，作为黄芩苷阴性对照溶液。
2.3.4 展开剂与显色条件
吸取上述供试品溶液2μL、对照品溶液5μL、阴性样品溶液5μL，照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，分别点于硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-冰醋酸-水（6∶3∶2∶1.5）为展开剂，展开剂预饱和25min，展开，取出，晾干，喷以1.5%的三氯化铁乙醇溶液。
2.3.5 结果
在供试品溶液所显主斑点的位置上，和对照品溶液相应位置上的主斑点颜色相同。阴性样品没有影响。
2.4
威灵仙的薄层色谱鉴别探讨，威灵仙为毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck、棉闭铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。曾参考《中国药典》2010年版一部威灵仙药材的薄层色谱鉴别方法，取本品5g，研细，加乙醇50mL，加热回流2h，滤过，滤液浓缩至约20mL，加盐酸3mL，加热回流1h，加水10mL，放冷，加石油醚（60～90℃）25mL振摇提取，石油醚蒸干，残渣加无水乙醇约15mL使溶解完全，作为样品溶液。另称取齐敦果酸对照品约5mg，置经校正合格后的10mL量瓶中，加无水乙醇振摇使完全溶解，再加无水乙醇稀释到刻度，摇匀，作为齐敦果酸对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述样品与对照品两种溶液各6μL，分别点样于经活化40min后的同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（20∶3∶0.2）为展开剂，薄层板置展开缸中预饱和30min，展开后小心取出，在阴凉处晾干，喷以15%硫酸乙醇溶液，放在电热恒温干燥箱里105℃一边加热，一边观察，直到斑点显色清晰。结果供试品溶液所显斑点不明显，主斑点与相邻斑点分离效果差，阴性对照有干扰，故未将该方法列入标准。
3 讨论
本研究建立了止痛风湿丸中栀子、黄芩、黄柏，威灵仙四种成分的薄层色谱鉴别，栀子的薄层色谱中，样品的处理中初步采取超声波处理，从点样斑点看没提取出来，然后采取了挥干乙醚，加热回流处理，结果效果非常好。黄芩的薄层色谱中，参考了其他文献中，正丁醇-甲酸-水（9∶0.5∶0.5）作为展开剂后，斑点效果不够明显，经过多次试验，改变展开剂比例，最后定为正丁醇-甲酸-水（7.5∶1.6∶0.9）后斑点效果非常好。黄柏主斑点清晰，阴性对照均无干扰。该方法条件稳定，重复性好，可以作为止痛风湿丸的专属鉴别。
摘要：目的 建立止痛风湿丸的薄层鉴别方法。方法 采用薄层色谱 (TLC) 法对止痛风湿丸中的栀子、黄柏、黄芩3味药材进行定性鉴别。结果 在薄层色谱中分别检出了栀子、黄柏、黄芩的特征斑点, 阴性对照无干扰。结论 该方法简便可行、专属性强、重现性好, 可用于止痛风湿丸的质量控制。