薄层色谱扫描法（精选9篇）
薄层色谱扫描法 篇1
板蓝根、连翘为临床常用中药, 均具有清热解毒之功效, 临产上常用于治疗病毒引起的流感、上感、风热等症。入秋以来, 甲型H1N1流感疫情明显增多, 市场上的抗病毒中药日趋紧张, 为加强部队应对甲型H1N1流感及季节性流感的卫勤保障能力, 我院组织有关专家及技术人员研发了板连冲剂复方中药制剂保障部队使用。板蓝根的有效成分:靛蓝、靛玉红、喹唑酮酸、棕榈酸、苯甲酸、水杨酸、22氨基苯甲酸、丁香酸、脯氨酸、精氨酸、腺苷、尿苷、尿嘌呤、鸟嘌呤和次黄嘌呤[1,2,3]。《中国药典》中并未明确对板蓝根质量控制中的含量测定方法和指标, 而本试验采用了TLC法对复方板蓝根颗粒进行定性鉴别, 以便更好地控制药品的内在质量, 保证临床用药的有效性。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品、试剂与仪器:
靛玉红标准品 (中国药品生物制品检定所, 批号110717200204) ;靛蓝标准品 (中国药品生物制品检定所, 批号110716200610) ;板连冲剂 (武警河北总队医院制剂室研发, 规格10g/袋) ;硅胶HPTLC板 (青岛海洋化工有限公司) ;石油醚、乙酸乙酯、氯仿均为色谱纯。CS-930型薄层扫描仪 (日本岛津) ;DHG-9243BS型电热恒温鼓风干燥箱;AR64CN型电子天平 (奥豪斯仪器 (上海) 有限公司) ;微量进样器 (山东滕海分析仪器有限公司) 。
1.1.2 色谱条件:
薄层层析板:硅胶HPTLC板;展开剂:石油醚-乙酸乙酯-氯仿 (1∶1∶8) 。
1.2 方法
1.2.1 硅胶HPTLC板于105℃活化1h, 冷却后置干燥器中备用。
1.2.2 标准溶液的制备
靛玉红标准溶液的制备:精密称取靛玉红标准品10mg, 置于100mL容量瓶中, 加氯仿溶解, 定容至刻度, 摇匀。配成每毫升含0.1mg靛玉红的标准溶液。避光保存。
靛蓝标准溶液的制备:精密称取靛蓝标准品50mg, 置于250mL容量瓶中, 加氯仿溶解, 定容至刻度, 摇匀。配成每毫升含0.2mg靛蓝的标准溶液。避光保存。
1.2.3 供试品溶液的制备
将板连冲剂研磨, 过筛, 烘干。精密称取5g, 用氯仿100mL索式回流提取, 过滤, 滤液水浴蒸干, 残渣用甲醇溶解并定容至10mL。
1.2.4 标准曲线的绘制
精密吸取上述靛玉红、靛蓝对照品溶液1μL、2μL、3μL、4μL、5μL, 分别点于同一硅胶HPTLC板上, 依法展开[4], 并进行全程扫描测定各斑点的面积。以斑点面积积分值为纵坐标Y, 以点样量为横坐标X, 绘制标准曲线。
1.2.5 稳定性实验
精密吸取对照品溶液5μL点于硅胶HPTLC板上, 依上述条件层析展开, 显色, 每间隔0.5h测定一次峰面积积分值, 计算RSD。
1.2.6 精密性实验
精密吸取对照品溶液3μL在同一块薄层板上点样6次, 依法展开, 计算各斑点的峰面积积分值RSD。
1.2.7 样品含量测定
分别精密吸取不同供试品溶液2μL, 对照品溶液1μL和3μL, 交叉点于同一硅胶HPTLC板上, 按上述条件展开, 显色, 扫描测定各样品中靛玉红、靛蓝的含量, 以外标二点法计算含量。
1.2.8 加样回收实验
取5份已知含量 (0.496mg/g) 的供试品粉末2g, 精密加入靛玉红及靛蓝对照品, 按供试品溶液制备, 测定回收率。
1.2.9 统计学处理
数据以表示, 采用SPSS11.0统计软件进行分析。
2 结果
2.1 标准曲线
2.1.1 以靛玉红对照品浓度c对峰面积A进行线性回归分析, 得一不过原点的线, 因此使用外标两点法进行含量测定。靛玉红在点样量0.1～0.5μg范围内呈良好的线性关系, 得回归方程为:Y=9991X+1017.9, r=0.9999, 见图1。
2.1.2 同2.1.1方法得靛蓝标准曲线, 回归方程为:Y=19955X+2080.5, r=0.9998, 见图2。
2.2 稳定性及精密性实验
稳定性实验结果的RSD为1.18% (n=5) , 精密性实验结果的RSD为2.18%。
加样回收率试验结果测定板连冲剂中靛玉红与靛蓝含量的RSD分别为2.74%、3.54%和4.53%、2.96%, 见表1。
2.3 板连冲剂中靛玉红与靛蓝的含量, 见表2。
3 讨论
近些年来季节性流感的感染情况愈发严重, 年初以来据卫生部公布的数据已经有10万多人次感染甲型H1N1流感, 死亡300多例。随着国内外对板蓝根抗病毒作用的进一步研究, 传统中药板蓝根在预防与治疗病毒性流感方面的作用更加显著, 从而导致了这一类药物在市场上的紧俏[5,6]。目前关于板蓝根的质量控制标准尚无确切定论, 本实验参考了近些年来的研究, 通过检测板连冲剂中的靛玉红以及靛蓝的含量来对制剂进行治疗控制, 通过查阅相关文献资料本实验结果显示板连冲剂中的板蓝根有效成分含量较高[6,7], 因此下一步将按照申请新药的标准继续完善制剂的质量, 以期尽早形成量产。
摘要：目的 为确定我院研发制剂板连冲剂中靛玉红与靛蓝的含量, 以期对其药品质量实现可控, 特采用薄层色谱扫描法进行测定。方法 选取硅胶HPTLC板点样, 以石油醚-乙酸乙酯-氯仿 (1∶1∶8) 为展开剂, 在该色谱条件下对样品进行展开。结果 板连冲剂中靛玉红含量为 (0.567±0.325) μg/g、靛蓝含量为 (0.989±0.503) μg/g;RSD为4.53%、2.56%。结论 我院研发的板连冲剂所含有效成分浓度较高、质量较好, 应继续做好研发工作尽早形成量产服务部队。
关键词：板连冲剂,靛蓝,靛玉红,薄层色谱
参考文献
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薄层色谱扫描法 篇2
薄层扫描法测定万寿菊中叶黄素的含量
研究了薄层扫描法测定万寿菊中叶黄素含量的方法.确定以硅胶G薄层板为固定相,石油醚-氯仿-丙酮(12:5:4)为展开剂,扫描波长445 nm,参比波长700 nm,采用反射法锯齿扫描;万寿菊中叶黄素酯的提取与皂化条件为:正己烷-丙酮-无水乙醇-甲苯(10 : 7:6 : 7)为提取剂,料液比1:80,10%KOH-CH3OH溶液为皂化液,皂化温度为45℃,皂化时间为40 min,水浴后暗处静置80 min,再加8 mL正己烷并用10%Na2SO4溶液定容,振荡后静置30 min.实验表明,在0.336～2.016 μg范围内,叶黄素浓度与扫描峰面积呈良好的线性关系,该方法具有良好的`精密性和稳定性,可用于分析万寿菊中叶黄素的含量.
作 者：张志强 唐道城 张乃湛 梁顺祥 ZHANG Zhi-qiang TANG Dao-cheng ZHANG Nai-zhan LIANG Shun-xiang 作者单位：青海大学,高原花卉研究中心,青海,西宁,810016刊 名：化学世界 PKU英文刊名：CHEMICAL WORLD年，卷(期)：50(9)分类号：O657.99关键词：万寿菊 叶黄素 薄层扫描 方法
薄层色谱扫描法 篇3
【摘要】目的：薄层色谱法鉴别金乌骨通胶囊中的淫羊藿苷。方法：采用薄层色谱法对制剂中含有淫羊藿苷进行定性鉴别。结果：薄层色谱法检出淫羊藿苷，且斑点清晰。结论：该方法可作为金乌骨通胶囊中淫羊藿的定性鉴别方法，结果稳定性、重复性较好。
【关键词】金乌骨通胶囊；淫羊藿；薄层色谱
【中图分类号】R284.1【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2014）02-0012-02
金乌骨通胶囊是由金毛狗脊、木瓜、乌梢蛇、葛根、淫羊藿、姜黄、补骨脂等多味药组成，具有滋补肝肾，祛风除湿，活血通络的功效。用于肝肾不足，风寒湿痹，骨质疏松，骨质增生引起的腰腿酸痛、肢体麻木等症[1]。其中淫羊藿具有补肾阳，强筋骨，袪风湿的作用，用于肾阳虚衰，阳痿遗精，筋骨痿软，风湿痹痛，麻木拘挛[2]（P308）。淫羊藿药材中主要含有淫羊藿苷、淫羊藿次苷、巫山淫羊藿苷、宝藿苷VI、生物碱、挥发油等。本实验选用淫羊藿苷为对照对药品中的淫羊藿进行定性鉴别，该方法简便易操作，结果重复性较好。
1仪器与试药
SK250LHC超声波清洗器（上海科导仪器有限公司），梅特勒AG135电子天平，卡玛Linomat5半自动点样仪。淫羊藿苷对照品（批号：110737-200415）购于中国药品生物制品检定所；样品和缺淫羊藿阴性样品由贵州盛世龙方制药有限公司提供，硅胶G预制板（批号：20090406）和硅胶G（批号：0110916）（青岛海洋化工厂分厂）；水为纯净水（娃哈哈）；其它试剂均为分析纯。
2方法[3]与结果
2.1提取方法的考察分别称取金乌骨通胶囊内容物细粉1.0g，按下述方法处理：①加乙酸乙酯10ml，超声提取15分钟；②加70%乙醇溶液10ml，超声提取30分钟；③加甲醇10ml，超声提取30分钟；④加乙醇20ml，超声提取30分钟[2]（P307）。提取后，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml超声使溶解，静置，取上清液为供试品溶液①-④。取缺淫羊藿阴性1.0g，照方法④提取，作为阴性对照溶液。另取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。
取上述各供试品溶液、阴性对照溶液、对照品溶液各3μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水 （13.5：6：2 ） 静置至澄清的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃下加热至斑点显色清晰。结果方法①无对应主斑点，方法②③主斑点清晰但背景较深，方法④主斑点清晰且背景较浅，阴性对照无干扰。故选取方法④为淫羊藿苷薄层鉴别的提取方法。
2.2展开系统的考察取三个批号金乌骨通胶囊按提取方法④分别制成供试品溶液。取供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各3μl，点于薄层板上，分别在下述各展开系统中展开：①硅胶G板，氯仿-甲醇-丁酮 （1：2：2）；②硅胶G板，氯仿-甲醇-水 （13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液；③硅胶H板，乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水 （10：1：1：1）[2]（P307）。展开后，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃下加热至斑点显色清晰。结果系统①分离效果差，系统②分离效果较好，主斑点位置居中，阴性无干扰，背景干扰小，系统③主斑点位置对应不理想，阴性对照无干扰。故选取系统②为淫羊藿苷薄层鉴别展开系统。
2.3显色方法的考察取三个批号金乌骨通胶囊按提取方法④分别制成供试品溶液。取供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各3μl，分别点于硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，分别以下述各方法显色：①喷以5%三氯化铁乙醇溶液，晾干，日光下检视，显墨绿色斑点；②喷以1%三氯化铝乙醇溶液，晾干，在紫外灯（365nm）下检视，显橙红色荧光斑点；③喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃下加热，日光下检视，显黄绿色斑点。结果显色剂①斑点略显模糊边界不明显，色彩与背景对比不强；显色剂②斑点荧光较弱，与背景荧光混合较严重，斑点边界不明显，不易辨识；显色剂③斑点颜色鲜明，与背景颜色对比较强，斑点边界明显；阴性对照无干扰。故选取显色方法③为淫羊藿苷薄层鉴别的显色方法。
2.4点样量的考察取金乌骨通胶囊按提取方法④制成供试品溶液。取供试品溶液2、3、4、5、6μl、阴性对照溶液和对照品溶液各3μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水 （ 13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液为展开剂，
展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃下加热至斑点显色清晰。结果点样量较小斑点不够清晰，点样量较大则背景颜色较深，点样量5μl时斑点显色清晰且背景干扰较小，阴性对照无干扰。
故选取5μl为淫羊藿苷薄层鉴别的点样体积。
2.5耐用性考察按照国家药典委员会“中药分析方法验证指导原则实施细则”的相关要求，进行以下耐用性考察：①温度的考察：进行了低温（4℃）、室温（24℃）、高温（40℃）的考察，分离结果均较好。②湿度的考察：进行了低湿度（25%）、中等湿度（60%）和高湿度（75%）的考察，结果表明在上述条件下都能较好分离。
3讨论
淫羊藿为金乌骨通胶囊中的重要组成药味，在生产中的质量控制和流通中监督检查均应将其作为药品质量的指标之一，而原标准中此项目暂缺，本方法可对其进行有效补充。根据上述不同条件下的实验结果进行组合，金乌骨通胶囊中淫羊藿苷的薄层色谱鉴别方法为：取本品内容物1.0g，加乙醇20ml，超声提取30分钟，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml超声使溶解，静置，取上清液为供试品溶液。取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13.5：6：2）静置至澄清的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃下加热，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄绿色的斑点。
展开系统的考察中，系统③为淫羊藿薄层鉴别的经典系统，但在反复试验后发现其展开效果并不理想，虽斑点清晰位置适中，但由于药品中其他物质的干扰，对照品主斑点位置总是明显高于样品中主斑点位置，故最终选用无此现象的系统②。缺淫羊藿阴性对照在此薄层色谱系统中无干扰，故可采用淫羊藿苷作为对照品溶液对药品中的淫羊藿进行定性鉴别；色谱中主斑点清晰明显，位置居中，无论是预制板还是手工板，结果稳定，重现性较好。此方法可作为金乌骨通胶囊中淫羊藿药材的薄层色谱定性鉴别。
参考文献
[1]WS-10140（ZD-0140）-2002，金乌骨通胶囊[S].
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.
薄层色谱扫描法 篇4
1 仪器与材料
三用紫外分析仪,超声波清洗机,瑞士Camag薄层扫描仪(TLC Scanner 3),高速中药粉碎机,层析缸;绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所110753-200413)所用试剂均为分析纯。猪殃殃(安徽源真堂中药饮片批号201016)经九江学院药学教研室高春华教授鉴定。
2 方法与结果
2.1 以绿原酸为对照品建立薄层色谱
(1)对照品溶液的制备:
取绿原酸对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液,作为对照品溶液。
(2)供试品溶液的制备:
称取药材粗粉5 g,加甲醇30 mL,超声处理50 min, 冷后,滤过,滤液作为甲醇提取供试品溶液。
(3)薄层色谱鉴别:
照薄层色谱法试验吸取对照品溶液及供试品溶液各10 μL,分别点于同一硅胶板上,以乙酸乙酯:甲酸:水(14:1:1)为展开剂,上行展开,取出,晾干,至紫外光灯(365 nm)下检视定位。结果,供试品色谱中,在与对照品相同位置上,显相同斑点。再喷以2% Fecl3溶液,供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上,显相同的亮黄色斑点。上述实验重复3次,结果见表1、图1。
2.2 以绿原酸为对照品进行薄层扫描
2.2.1 扫描条件
双波长反射锯齿扫描,对绿原酸斑点在200~600 nm范围内扫描,线性参数SX=3,灵敏度中度。
2.2.2 薄层扫描结果
由薄层扫描图谱,甲醇作溶剂提取猪殃殃中绿原酸时所得Rf值与绿原酸对照品Rf值基本保持一致,因此表明猪殃殃化学成分中含有苯丙素类化合物“绿原酸”,见图2、图3。
3 讨 论
3.1 绿原酸的不稳定性
绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸结合而成[咖啡酸(3,4-二羟基肉桂酸)的羧基与奎尼酸(1,3,4,5-四羟基环己羧基)]的3位羟基结合而成的酯类化合物,是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。该成分易于氧化和水解[7],中草药的提取工艺不同,有可能会造成绿原酸的提取不完全,或引起不同程度的降解和损失,从而影响绿原酸的薄层鉴别[8]。
3.2 绿原酸的保存
绿原酸分子结构中含有不饱和双键,酯键及多元酚等不稳定结构,在从植物的提取过程中,分子内酯基水解及不饱和双键迁移而发生异构化,所以提取时不能高温,强光及长时间加热[9]。绿原酸的供试品溶液放置于棕色瓶,冰箱(2 ℃)保存时最稳定[10]。
3.3 展开剂的选择
猪殃殃的薄层色谱鉴别,曾以2010版一部金银花药材的TLC展开条件对样品进行鉴别,发现Rf值较低,斑点间分离度较差,经反复试验,显示以乙酸乙酯:甲酸:水(14:1:1)为展开剂,展开后效果较好。
4 结 论
TLC不需特殊的仪器,操作简便,加之近年来高效吸附剂、商品化的预制板、摄像装置的应用,极大的提高了分离效果、检出灵敏度、准确性和重现性,使TLC法已成为目前应用最多的生药理化鉴别方法。该鉴别方法对应的样品色谱斑点清晰,无拖尾、背景无干扰且重复性好。本试验用甲醇作溶剂提取猪殃殃中绿原酸。以乙酸乙酯:甲酸:水(14:1:1)为展开剂,2%FeCl3溶液为显色剂时对猪殃殃中绿原酸进行薄层色谱鉴定,结果与绿原酸标准品在同一位置显示相同斑点,薄层色谱扫描图谱基本一致,本方法可快速,准确地对猪殃殃中绿原酸进行鉴定。
摘要：建立猪殃殃中绿原酸的薄层色谱鉴别方法。猪殃殃药材经醇提,以绿原酸为对照品,以乙酸乙酯∶甲酸∶水(14∶1∶1)为展开剂,显色剂为2%Fecl3溶液。结果:甲醇作溶剂提取猪殃殃中绿原酸时所得Rf值与绿原酸对照品Rf值基本保持一致,呈亮黄色斑点。可快速,准确地对猪殃殃中绿原酸进行鉴定。
关键词：猪殃殃,绿原酸,薄层色谱,薄层扫描
参考文献
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薄层色谱法鉴定土霉素的研究 篇5
1 材料
1. 1 试验药物
正丁醇、冰醋酸、甲醇、浓氨水、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、4% 乙二胺四乙酸二钠( EDTA - 2Na) 、纯化水、土霉素对照品、四环素对照品、金霉素对照品,均由中国药品生物制品检定所提供; 土霉素片( 批号为100206) 、土霉素粉( 批号为100315 ) ,赤峰蒙欣药业有限公司生产。
1. 2 主要仪器
紫外灯箱,厦门德仪设备有限公司生产; 照相机,由吉林农业大学生命科学学院生物资源实验室提供;显色剂喷瓶,购自上海楚柏实验室仪器有限公司; 硅胶G薄层板,购自青岛胜海精细硅胶有限公司。
2 溶液的配制
2. 1 样品溶液的配制
取适量土霉素片去糖衣后研碎,称取1 mg并置1. 5 m L离心管中,加入1 m L甲醇,摇匀,即得样品溶液。
2. 2 对照品溶液的配制
取土霉素对照品、四环素对照品、金霉素对照品各1 mg,分别加入1 m L甲醇摇匀,置1. 5 m L离心管中,即得4 份对照品溶液,备用。
2. 3 混合标品对照溶液的配制
取土霉素对照品、四环素对照品、金霉素对照品各1 mg,加入1 m L甲醇摇匀,置1. 5 m L离心管中,即得混合标品对照液。
2. 4 展开剂系统
共采用3 种系统结构,即《中华人民共和国兽药典》规定的乙酸乙酯- 三氯甲烷- 丙酮( 2∶2∶1) 展开剂、《进口兽药质量标准》1999 年版规定的丙酮- 氯仿- 乙酸乙酯( 3∶1∶1) 展开剂、不同比例组合的正丁醇- 冰醋酸- 水展开剂。
3 探索试验
3. 1 《中华人民共和国兽药典》标准方法
分别吸取土霉素片、土霉素粉与土霉素对照品、金霉素对照品及四环素对照品对应的溶液各5 μL,分别点于同一薄层板上,取4% 乙二胺四乙酸二钠溶液( p H值为7. 0) 5 m L,加到乙酸乙酯- 三氯甲烷- 丙酮( 2∶2∶1) 展开剂( 200 m L) 中进行薄层色谱试验,展开、晾干,用氨气显色后置紫外灯( 365 nm)下检视。
3. 2 《进口兽药质量标准》1999 年版方法
吸取上述5 种溶液各5 μL,分别点于同一薄层板上,取4% 乙二胺四乙酸二钠溶液5 m L,加到丙酮- 氯仿- 乙酸乙酯( 3∶1∶1) 展开剂( 200 m L) 中进行薄层色谱试验,展开、晾干,用氨气显色后置紫外灯( 365 nm) 下检视。
3. 3 改进方法
分别吸取上述5 种溶液各5μL,点于同一薄层板上,取4% 乙二胺四乙酸二钠溶液( p H值为7. 0) 5m L,加到不同比例的正丁醇- 冰醋酸- 水展开剂( 200 m L) 中进行薄层色谱试验,展开、晾干,用氨气显色后置紫外灯( 365 nm) 下检视。
4 结果与讨论
4. 1 《中华人民共和国兽药典 》标准方法的探索结果
根据《中华人民共和国兽药典》标准方法的规定,以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶丙酮( 2∶2∶1) 为展开剂进行展开,结果见317 页彩图1。经多次重复试验验证,没有看到展开后的斑点,只有样品迁移的轨迹,分离效果不佳,尤其混合标品未完全分开,表明此类展开剂并未达到鉴定分离土霉素的效果。
4. 2 《进口兽药质量标准 》1999 年版方法的探索结果
根据《进口兽药质量标准》1999 年版的方法,以丙酮- 氯仿- 乙酸乙酯( 3∶1∶1) 为展开剂进行薄层色谱试验,结果见317 页彩图2。
由317 页彩图2 可知,此种方法比《中华人民共和国兽药典》标准方法要好,主要表现在土霉素粉、土霉素对照品和土霉素片都出现新的蓝色斑点,但对于混合标品却没有达到分离效果,完全没有任何分离斑点出现,因此需要改进以求达到完全分离的目的。
4. 3 改进方法的探索结果
研究发现,将正丁醇- 冰醋酸- 水三者混合可以改变展开剂的极性,但具体的比例却没有报道[3,4],因此为了获得满意的分离效果,本试验以不同比例、多种组合的正丁醇- 冰醋酸- 水作为展开剂进行薄层色谱试验,组合比例选用三者总和为10 的体系,配比体系及试验结果见表1,获得的最佳展开体系结果见318 页彩图3。
由表1 可知,多种组合体系表现的试验结果不同,以1,4,5 比例组合的体系结果表现不佳,供试的土霉素对照品、土霉素片、土霉素粉及混合标品不能达到完全分离的效果,尤其是1∶4∶5 配比体系未出现任何斑点,可见此体系的极性偏大,不适合土霉素的鉴定试验; 以2,4,4 比例组合的体系也没有达到好的效果,该配比体系也是极性太大,展开太快,没有分离出任何试验品,4∶4∶2 配比体系极性相对较小,结果显示土霉素对照品有浅色的斑点,其余供试品没有显示斑点; 以2,3,5 比例组合的体系,只有5∶2∶3 配比体系的效果最佳,所有供试品都有明显的斑点出现,完全符合定性鉴别的指标[5,6]。
由318 页彩图3 可知,所有供试品都存在明显的两道蓝色斑点或条带,供试品溶液所显斑点的位置与相应的对照品溶液的斑点位置相同,而且荧光强度和样品的含量呈正比。
在上述试验基础上,将四环素、金霉素与土霉素类制品在同等条件下进行展开试验,观察展开剂的展开效果,结果见318 页彩图4。
由318 页彩图4 可知,四环素、金霉素在此展开剂中完全可以同等速度展开,没有任何不良影响,供试的土霉素类制品完全可以正常分离,达到定性鉴别的目的,实现以一块层析板、一种展开剂鉴定土霉素的效果,而且多次反复试验结果重现性好,准确性高。
5 讨论
对正丁醇- 冰醋酸- 水的多种配比体系结果进行分析发现,展开剂的极性是影响土霉素分离的决定因素[7],展开剂的极性过大,展开的速度过快,展开时间较短,供试品不能达到完全分离的效果; 极性相对过小,如在5∶4∶1 和4∶5∶1 两种配比体系中,只有土霉素对照品、混合标品有斑点出现,而且还存在拖尾现象,而对于土霉素片、土霉素粉这些含有多种填料的药品,分离的能力就较差,片或粉中的填料物质拖带土霉素的展开速度,使得片和粉没有分离斑点出现,分离效果不好。
改进方法中供试样品的用量与《中华人民共和国兽药典》标准方法规定的用量一致,并且展开速率快,一般仅需15 ~ 20 min,混合标品也可达到完全分离的效果,加上晾干,用氨气显色后置紫外灯( 365 nm) 下检视,全部时间在35 ~ 45 min之间,完全满足既准确又快速的要求。另外,原方法中的乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮三种试剂的价格均较贵,而改进方法中的正丁醇、冰醋酸、水的价格低廉。
6 结论
通过采用《中华人民共和国兽药典》的标准方法、《进口兽药质量标准》1999 年版方法、改进的方法对兽药土霉素的鉴定方法进行了探索对比试验,结果表明,以正丁醇- 冰醋酸- 水( 5∶2∶3 配比体系) 为展开剂可以满足对土霉素的鉴定试验,具有展开效果好、分离度高,操作方便、展开剂价廉、重现性好的特点,是快速准确鉴定兽药土霉素的方法。
1.土霉素片;2.土霉素对照品;3.土霉素粉;4.四环素对照品;5.混合标品;6.金霉素对照品。
1.土霉素粉;2.四环素对照品;3.土霉素对照品;4.金霉素对照品;5.混合标品;6.土霉素片。
1.土霉素对照品;2,5.混合标品;3,4.土霉素片;6.土霉素粉。
1,2.土霉素片;3.四环素对照品;4.金霉素对照品;5.土霉素对照品;6,8.土霉素粉;7.混合标品。
参考文献
[1]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典[M].北京:中国农业出版社,2006.
[2]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典(二部)[M].北京:中国农业出版社,2005.
[3]萧三贯.最新国家药用辅料标准手册[M].北京:中国医药科技电子出版社,2006.
[4]农业部兽药评审中心.兽药国家标准汇编[M].北京:中国农业出版社,2012.
[5]戴栗洁.土霉素微生物检定条件的改进[J].锦州医学院学报,2001,22(5):34.
[6]刘立军.盐酸脱氧土霉素有关物质检测方法的改进[J].药物分析杂志,1993,13(5):318-320.
薄层色谱法检查巴洛沙星有关物质 篇6
1 薄层色谱法的研究
1.1 仪器与试药
紫外光灯254nm检测器, 硅胶GF254薄层层析预制板, 巴洛沙星对照品 (含量99.8%) 及合成中主要中间体由研制单位提供。试剂均为分析纯, 水为重蒸馏水。
1.2 主成分与主要中间体
由于不同厂家的生产工艺不同, 主要有以下几种中间体:中间体A:1-环丙基-6, 7-二氟-1, 4-二氢-8-甲氧基-4-氧-3-喹啉羧酸乙酯 (环合酯) ;中间体B:1-环丙基-6, 7-二氟-1, 4-二氢-8-甲氧基-4-氧-3-喹啉羧酸;中间体C:螯合物。主成分D:巴洛沙星。结构见下图1。
1.3 色谱条件
展开剂体系1:水-二乙胺-甲苯-三氯甲烷-甲醇 (4:7:10:20:20) 。
展开剂体系2:二氯甲烷-甲醇-浓氨水溶液-乙腈 (4:3:3:2) 。
1.4 方法与结果
1.4.1 展开剂体系1检测方法
取本品 (D) 适量, 加适量冰醋酸溶解并用甲醇稀释制成制成每1毫升中含10mg的溶液, 作为供试液;精密量取适量用甲醇稀释成每1毫升中含0.3mg的溶液, 作为对照液 (I) ;另精密称取1-环丙基-6, 7-二氟-1, 4-二氢-8-甲氧基-4-氧-3-喹啉羧酸乙酯 (A) 、1-环丙基-6, 7-二氟-1, 4-二氢-8-甲氧基-4-氧-3-喹啉羧酸 (B) 和螯合物 (C) 各适量, 分别用冰醋酸溶解并用甲醇稀释制成每1毫升中含0.10mg的溶液作为对照液 (II) 。照薄层色谱法 (中国药典2000版二部附录VB) 试验, 吸取上述三溶液各5µL, 分别点于同一硅胶GF254薄层板上, 以水-二乙胺-甲苯-三氯甲烷-甲醇 (4:7:10:20:20) 为展开剂, 展开, 晾干, 置紫外光灯 (254nm) 下检视, 供试液如显与对照液 (II) 主斑点对应的杂质斑点, 其与对照液的主斑点比较, 不得更深;如有其它杂质斑点, 斑点个数不得多于2个, 与对照液 (I) 的主斑点比较, 均不得更深 (图2) 。
(1) 巴洛沙星对照品 (10mg·mL-1) ; (2) 巴洛沙星和中间体A, B, C的混合液 (0.1mg·mL-1) ; (3) 螯合物 (C) (0.1mg·mL-1) ; (4) 喹啉羧酸 (B) (0.1mg·mL-1) ; (5) 喹啉羧酸乙酯 (A) (0.1mg·mL-1)
1.4.2 展开剂体系2检测方法
取本品, 加适量冰醋酸溶解并用甲醇稀释每1mL含30.0mg的溶液, 作为供试品溶液;精密量取适量用甲醇稀释成每1 m L中含0.3 m g的溶液, 作为对照液 (I) ;另精密称取1-环丙基-6, 7-二氟-1, 4-二氢-8-甲氧基-4-氧-3-喹啉羧酸乙酯 (A) 、1-环丙基-6, 7-二氟-1, 4-二氢-8-甲氧基-4-氧-3-喹啉羧酸 (B) 和螯合物 (C) 各适量, 分别用适量冰醋酸溶解并用甲醇稀释制成每1毫升中含0.30mg的溶液作为对照液 (II) 。照薄层色谱法 (附录V B) 试验, 吸取上述两种溶液各10µL, 分别点于同一硅胶GF254薄层板上, 放入氨气中约15min, 取出, 以二氯甲烷-甲醇-浓氨水溶液-乙腈 (4:3:3:2) 为展开剂, 展开后, 晾干, 置紫外灯 (254nm) 下检视。供试液如显与对照液 (II) 主斑点对应的杂质斑点, 其与对照液的主斑点比较, 不得更深;如有其它杂质斑点, 斑点个数不得多于2个, 与对照液 (I) 的主斑点比较, 均不得更深 (图3) 。
(1) 中间体A, B, C的混合液 (0.3mg·mL-1) ; (2) 巴洛沙星对照品 (30mg·mL-1) ; (3) 螯合物 (C) (0.3mg·mL-1) ; (4) 喹啉羧酸 (B) (0.3mg·mL-1) ; (5) 喹啉羧酸乙酯 (A) (0.3mg·mL-1) ; (6) 巴洛沙星和中间体A, B, C的混合液 (0.3mg·mL-1)
2 讨论
薄层色谱法实验采用了一系列展开剂体系进行研究, 通过对固定相、流动相、点样量、展开条件以及显色条件的研究, 确定了以上两种展开剂体系, 建立了较为满意的TLC法。如以二氯甲烷-甲醇-浓氨水溶液-乙腈 (4:3:3:2) 为展开剂, 展开后, 晾干, 置碘蒸气中熏后呈色, 还可检测巴洛沙星中间体3-甲氨基哌啶。在上述色谱条件下进行测定时巴洛沙星的各中间体与主成分均能很好分离。以上TLC法最小检出量为3µg。HPLC法更适合于成品的杂质检查及含量测定, 而TLC法更适合生产过程中的半成品检测。
摘要：目的建立了巴洛沙星合成中间体检测方法检查。方法薄层色谱法:硅胶GF254薄层层析预制板, 展开剂分别为水-二乙胺-甲苯-三氯甲烷-甲醇 (4:7:10:20:20) 和二氯甲烷-甲醇-浓氨水溶液-乙腈 (4:3:3:2) 。结果在上述色谱条件下进行测定时巴洛沙星的各中间体与主成分均能很好分离, 最低检出量为3μg。结论TLC法方便, 快速可用于检查巴洛沙星合成中间体。
关键词：薄层色谱法,巴洛沙星,合成中间体
参考文献
[1]USP24 norfloxacin.
[2]USP24 ciprofloxacin.
[3]BP2000 norfloxacin.
[4]中国药典2000版.二部[S].北京:化学工业出版社, 2005:526.
薄层色谱法在化药分析中的应用 篇7
薄层色谱法利用待测各成分对同一吸附剂产生的吸附能力不同, 使在展开相流过固定相的过程中, 连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附过程, 从而达到各成分之间互相分离的目的。它可同时分离多个样品, 分析成本低, 样品预处理的要求低。可自由选择固相、展开剂。适用于分析含有不易从分离介质脱附或含有悬浮微粒的样品。薄层色谱法是一种快速、灵敏分离微量物质的色谱方法, 具有操作方便, 设备简单, 分离效率高, 专属性好, 分析速度快, 色谱参数易调整等特点, 在药物分析中应用较为广泛。
近年来薄层色谱法在化学药物成分研究中仍有很多应用。波兰J agiellonian大学的Starek等利用薄层色谱法对抗炎药吡罗昔康的多种剂型及其降解产物进行了研究测定。研究结果表明, 吡罗昔康的稳定性良好, 不易降解, 且在碱性环境下比酸性环境更稳定, 其降解产物为嘧啶-2- 胺和2- 甲基-2 , 3- 二氢-4 H-1 , 2- 苯并噻唑-1 , 1 , 4- 三酮。该方法稳定可靠, 快速准确, 可用于该类药物的分析鉴定。
波兰Jagiellonian大学的Ekiert等用薄层色谱法测定唑类抗真菌剂。该实验分别对联苯苄唑、酮康唑、伊曲康唑以及氟康唑4 种抗真菌剂进行测定, 前3 种分别用甲醇溶解并稀释定量, 伊曲康唑用三氯甲烷溶解, 并最终制成甲醇的溶液。经过筛选, 薄层板采用硅胶GF254 荧光板, 展开系统选用醋酸乙酯- 正己烷- 甲醇- 水- 冰醋酸 (40:42:15:2:1) , 紫外检测波长选用260nm。结果表明, 该法检测准确简便, 专属性强, 可作为抗菌素类药物薄层色谱法研究的参考。
有关物质检查通常采用色谱法, 薄层色谱法设备简单, 操作简便。但因影响重现性和精密度的因素较多, 可用作一般有关物质检查。据报道, 采用反相薄层色谱方法建立阿德福韦酯的杂质的检查方法。以反相GF254 高效薄层板为固定相, 以甲醇- 水为展开剂, 在紫外254nm波长下检视, 阿德福韦醋与其有关物质能够有效分离, 灵敏度较高, 最小检测限达到0.1 微克。采用薄层色谱法, 建立了雌三醇有关物质检查方法, 以硅胶G板为固定相, 以氯仿- 乙腈- 丙酮- 冰乙酸 (9 :0.25 :0.5 :0.25) 混合液为展开剂, 展开后以30%的硫酸乙醇溶液为显色剂, 经过100℃高温加热。结果待检的3 种杂质均能与雌三醇完全分离, Rf值适中, 最小检测限达到0.2pg, 重复性良好。对复方氨酚烷胺颗粒中的有关物质 (对氯苯乙酞胺) 采用薄层色谱方法进行了检查, 使用GF254 硅胶板 (含0.5%羧甲基纤维素钠) , 以氯仿- 甲苯- 丙酮 (13:2:5) 为展开剂, 紫外光254nm波长下检视, 结果检出的氯苯乙酞胺斑点与其它主药成分的斑点能够有效分离, 空白样品溶液的斑点对杂质斑点无干扰, 重现性好, Rf值适中, 能有效检出有关物质。
薄层色谱新技术及其应用
最近几年, 通过围绕测定过程的标准以及自动化, 薄层色谱的技术应用有了全新的发展, 扩大了薄层色谱技术在化学药物的定性以及定量分析中的应用。
高效薄层色谱
高效薄层色谱的固定相板, 是由细颗粒的吸附剂经过喷雾法制成的。点样时采用了新装置, 可自动化或者半自动化完成, 在同一板上点样数大大增加。展开方式除了同普通薄层色谱一样直线展开, 还可以采用圆心式展开或者向心式展开。改进了点样技术, 大大提高了检测灵敏度, 分离能力有很大提高, 比普通薄层色谱提高3 倍。同时又保存了在敞开式床上进行分离的优点, 可逐步展开, 同步检测, 并不存在中毒问题。不仅可以定性, 还可用于定量分析。
假相薄层色谱
假相薄层色谱是低浓度的表面活性剂及环糊精的水溶液为流动相, 固定相一般采用聚酰胺薄膜。其有选择性溶解, 梯度洗脱, 并且进行光学检测方面的特点, 以及流动相配制简单、安全、无毒、成本低、处理方便, 引起了人们的兴趣。假相薄层色谱法能使不溶于水的物质或者芳烃异构体得到较好的分离, 并可用于药物中微量有关物质的限量检查及体内药物分析。
反相薄层色谱
在薄层色谱方法中, 流动相极性大于固定相的极性时, 就形成反相薄层色谱, 一般反相薄层色谱的固定相是化学键合相, 斑点扩散小, 广泛用于多种药品的分离, 特别适合于组分复杂的混合物的分离。化学键合相硅胶的硅烷化程度也可为分离提供选择性。可根据样品性质选择适当固定相材料, 实现最佳分离效果。主要用于极性成分复杂的样品, 又可用来考察摸索HPLC的分离条件。
薄层扫描法
薄层扫描法也称薄层光密度法。是将薄层色谱技术与微型电子计算机和光密度计相结合的一种新型仪器分析方法。用薄层光密度计, 可以同时对多种复杂的样品进行分离检测。鉴于其检测简便快捷、灵敏度高、准确性好、专属性良好, 因此在生命科学中得到了广泛应用。现在已被国内外的药典所采用。
结束语
传统薄层色谱技术由于精密度和重现性均较差, 曾经一段时间内被其他快速发展起来的分离分析技术取代, 然而自20 世纪80 年代以来, 随着薄层在点样技术、色谱固定板、展开技术方面等的快速发展, 薄层色谱方法的规范化和仪器自动化程度均有很大提高。加上其经济、直观、简便的特点, 将在化药分析中发挥更大的作用。
摘要：薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术, 也可用于跟踪反应进程。
关键词：薄层色谱法,化药分析,精密度
参考文献
[1]冯雅赋.薄层色谱法在药物分析中的应用及研究进展[J].疾病监测与控制, 2011, 5 (1) :61.
[2]吕长淮.薄层色谱法在药物分析中的应用进展[J].中国药房, 2006, (22) .
薄层色谱扫描法 篇8
1 材料与方法
1.1 仪器与药品
索氏提取器 (自行设计) 、薄层层析用紫外灯365nm (北京光学仪器厂) , 香连丸 (湖北香连药业有限责任公司) , 盐酸小檗碱标准品 (中国药品生物制品检定所) 。
1.2 方法
1.2.1 供试品溶液制备
取香连丸约20粒, 研成粗粉, 取约0.1g, 精密称定, 置索氏提取器中, 加95%乙醇适量, 连续回流至提取液无色, 再常压蒸馏提取液至约10mL, 放至室温, 将液体移至25mL容量瓶中, 用少许95%乙醇洗涤容器, 洗液并入提取液中, 加95%乙醇调至刻度, 摇匀, 为备用液。
取一支2.0cm×30cm层析柱, 柱底覆盖少许脱脂棉, 柱内加入一定体积95%乙醇, 打开活塞, 让溶液慢慢流出。此时将已搅拌混均的氧化铝95%乙醇悬液 (层析氧化铝120～140目, 25～30g) 不断加入层析柱内, 至加完后, 轻敲柱体, 使各部分氧化铝均匀紧密一致。待氧化铝沉降稳定 (表面应平整) , 表面保持有少量溶剂 (0.5cm左右) , 关闭活塞。吸取0.1mL备用液通过氧化铝柱, 连续加入95%乙醇洗脱, 至流出液无色, 收集洗脱液置容量瓶中, 用95%乙醇调至刻度, 为供试品溶液。
1.2.2 对照品溶液制备
精密称取盐酸小檗碱标准品, 加甲醇制成每1mL含15μg的溶液, 即得。
1.2.3 测定方法
吸取供试品溶液及对照品溶液各3μL, 点于同一硅胶G薄层板上, 用展开剂 (乙酸乙酯∶氯仿∶甲醇∶浓氨水∶二乙胺=6∶2∶2∶1∶0.5, V/V/V) 展开, 置紫外灯 (365nm) 下检识。
2 结果与分析
2.1 香连丸中盐酸小檗碱的分离与纯化
盐酸小檗碱为黄色针状结晶, 在热乙醇中溶解度较大。根据报道[5], 选择95%乙醇为溶媒, 采用连续回流提取法加常压蒸馏提取, 易与香连丸中其他成分, 如挥发油、木香碱等分离, 且提取盐酸小檗碱浓度较大;根据盐酸小檗碱的极性特点, 采用氧化铝柱层析方法, 可以达到分离纯化盐酸小檗碱的作用。
2.3展开剂的选择
薄层色谱法对于样品能否实现满意的分离和检识, 取决于展开剂的选择。展开剂的选择主要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来考虑, 本次实验根据盐酸小檗碱的化学性质, 尝试选用中等极性的溶剂体系, 即由氯仿相组成, 加入乙酸乙酯、甲醇来调节, 根据三者不同配比对展开效果进行评定。展开剂分别采用表1中的各种配比。
2.2薄层色谱法检测
从图2、图3中可以看出, 供试品与对照品均出现斑点, 证明供试品中有与对照品相同的成分, 二者斑点位置高度相同, 证明供试品中盐酸小檗碱的含量与标准品相同, 说明此方法有应用的可能性。
采用1号展开剂时, 点的样基本不变, 没有展开, 这可能与展开剂极性太弱有关, 采用5号展开剂时, 也没有展开, 这可能与展开剂极性太强有关, 3号展开剂效果最好, 可以清晰地将供试品及样品展开, 所以实验中选用3号展开剂, 另外考虑到薄层层析需要在硅胶这种酸性物质分离检识, 在展开剂里再加一点点二乙胺、氨水这类碱性物质, 以中和硅胶的酸性。展开剂即为:乙酸乙酯∶氯仿∶甲醇∶浓氨水∶二乙胺=6∶2∶2∶1∶0.5, V/V/V。
注:1、3斑点为供试品;2、4斑点为对照品。
3 结论
用95%乙醇作溶媒, 利用连续回流提取法和常压蒸馏法处理香连丸, 并用氧化铝色谱柱层析法分离纯化, 再利用薄层色谱法将香连丸中盐酸小檗碱分离出来, 分离效果较好;根据盐酸小檗碱的化学性质, 采用硅胶G薄层板及中等极性的展开剂, 对盐酸小檗碱具有良好的吸附效果, 从而利用薄层色谱法进行定性分析, 能准确快速地鉴定出香连丸中是否含有盐酸小檗碱。通过与对照品斑点高度相对比, 能够检测出供试品中盐酸小檗碱的含量是否符合标准, 从而实现定量分析。
本检测方法具有良好的稳定性和重现性, 方法简便易行, 适合在国内广大基层检测部门普遍推广。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社, 2010.
[2]盛龙生.药物分析[M].北京:化学工业出版社, 2003.
[3]梁生旺.中药制剂分析[M].北京:中国中医药出版社, 2007.
[4]黄传俊, 李其兰.正交实验优选黄连提取工艺[J].中国药师, 2005, 8 (8) :699.
薄层色谱扫描法 篇9
1 材料
1.1 仪器与试药
ZF-90型多功能暗箱式紫外透射仪;硅胶G薄层板为自制, 试剂均为分析纯。
1.2 对照品与样品
1.2.1 对照品
柴胡对照药材, 批号为120992-200906, 由中国药品生物制品检验所提供。
1.2.2 样品
补中益气丸三个样品为市场上销售产品。样品1为湖北午时药业股份有限公司 (60g*1瓶, 批号:120901) , 样品2为广州中一药业有限公司 (60g*1瓶, 批号:PF0001) , 样品3为北京同仁堂科技发展股份有限制药厂 (6g*10袋, 批号:12082695) 。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 样品溶液的制备
取样品补中益气丸各5g, 研碎, 加40ml甲醇加热回流1个小时, 滤过, 滤液蒸干, 加水20ml使溶解, 用水饱和的正丁醇振摇提取2次, 每次20ml, 合并提取液, 用氨试液洗涤2次, 每次20ml, 弃去洗涤液, 正丁醇液蒸干, 残渣加甲醇1ml使溶解, 作为供试品溶液。
2.1.2 对照药材溶液的制备
取柴胡对照药材0.5g, 加水20ml, 加热回流1小时, 放冷, 滤过, 滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次, 每次20ml, 合并提取液, 用氨试液洗涤2次, 每次20ml, 蒸干, 加甲醇1ml使溶解, 作为对照药材溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备
按处方配比模拟标准工艺制成缺柴胡的阴性对照样品, 按 (1) 项下的方法操作, 作为阴性对照溶液。
2.2 薄层色谱鉴别
按照薄层色谱法 (《中国药典》2010版一部附录VI B) 试验, 吸取上述三种溶液各10μl, 分别点于同一硅胶薄层板上, 以乙酸乙酯-乙醇-水 (8:2:1) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以2%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液, 在105℃加热至斑点显色清晰, 置紫外光灯 (365nm) 下检视, 供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的荧光斑点, 而阴性对照品液在相应的位置上无上述主斑点。重复试验, 结果相同。如图1。
薄层色谱图代码:1、2为阴性对照溶液;3为样品1溶液;4为样品2溶液;5为样品3溶液;6、7、8为对照药材溶液。
2.3 结果
经过考查, 以上方法简便易行, 斑点清晰, 结果明确。
3 讨论
本方法采用的乙酸乙酯-甲酸-水 (20:3:1) 展开剂分离效果不是好, 而改用乙酸乙酯-乙醇-水 (8:2:1) 为展开剂分离效果好。
显色剂参考有关文献, 喷2%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液[2], 在105℃加热后显色, 置日光下检视不是很清晰, 而在紫外光灯 (365nm) 下检视, 荧光斑点明显, 阴性对照没有干扰, 且分离效果较好。
采用薄层色谱法, 进行补中益气丸中柴胡的薄层鉴别, 经实验证明方法可靠, 斑点清晰, 分离效果好, 不失为补中益气丸中柴胡的有效定性鉴别方法。
参考文献
[1]中国药典[S].一部, 2010:781.