非蛋白氮论文

2024-11-28

非蛋白氮论文(精选4篇)

非蛋白氮论文 篇1

摘要:主要是对非蛋白的种类、非蛋白氮的降解机制、非蛋白氮利用的影响因素以及缓解方法进行综述。

关键词:非蛋白氮,反刍动物

蛋白质是反刍动物营养的主要限制因素, 而富含蛋白质的豆科牧草却不能被广泛的种植, 植物蛋白补充剂又通常非常昂贵, 不适合用于大规模饲养生产。随着奶牛养殖业的不断发展, 对饲料的需要量也随之增加。饲料原料的不足, 特别是蛋白质饲料短缺与饲养需求之间的矛盾已经暴露的十分明显。因此, 寻找新型蛋白质原料成为生产中需要解决的首要问题。而众多研究结果表明, 非蛋白氮饲料原料是最直接、有效的蛋白质饲料替代品。

1 现有非蛋白氮种类

1.1 尿素及其衍生物类

尿素、缩二尿、缩三脲、磷酸尿、羟甲基尿素, 其中羟甲基尿素是比较新型的非蛋白氮产品。2007年李伟华等研究发现羟甲基尿素是稳定的化合物不但可以在瘤胃内缓慢释放自我调节瘤胃微生物菌群状态, 还可以使高效蛋白质受到保护直接被机体利用。

1.2 氨及铵盐类

液氨、农用氨水、磷酸铵、硫酸铵、氯化铵、甲酸铵、乙酸铵、丙酸铵、硝酸铵、聚磷酸铵、乳酸铵、氰酸铵、碳酸氢铵、氨基甲酸铵等。

1.3 酰胺化合物类

谷酰胺、天门冬酰胺、双氰胺等。

2 非蛋白氮在反刍动物体内的降解

反刍动物有一个类似于发酵罐作用的瘤胃, 在这个大发酵罐中充满着各种微生物。而在这些种类繁多的瘤胃微生物当中有80%能够以尿素等非蛋白氮等化合物为唯一氮源, 26%的细菌离不开氨, 50%的细菌即可以以氨也可以以氨基酸为氮源 (Bryant, 1961) 。当非蛋白氮饲料进入瘤胃, 就被微生物分泌的各种蛋白酶、肽酶、脱氨酶等降解酶所包围, 而迅速地溶解和水解, 分解成氨气和二氧化碳。同时碳水化合物在微生物酶的作用下生成挥发性脂肪酸和酮酸, 紧接着氨气又与酮酸在微生物酶的作用下结合成氨基酸。新合成的氨基酸被瘤胃微生物所吸收利用转化为菌体蛋白。瘤胃微生物随着食糜和瘤胃液进入真胃和小肠, 被胃蛋白酶和肠蛋白酶分解为游离氨基酸进而被小肠所吸收提供给反刍动物个体。 Clark (1992) 研究表明, 奶牛食糜蛋白质中的59%为微生物蛋白质[1]。由此可见瘤胃微生物蛋白为反刍动物机体起着提供主要蛋白来源的重要作用。在非蛋白氮的代谢过程中氨是主要的形式, 瘤胃内的氨除了被微生物利用合成蛋白质外, 其余部分被吸收经血液循环至肝, 在肝内经鸟氨酸循环变为尿素, 这种内源性尿素, 一部分经血液分泌于唾液重新进入瘤胃;另一部分通过瘤胃上皮扩散到瘤胃内, 其余随尿排出体外[2]。而进入瘤胃内的氨又被瘤胃所利用。在低日粮条件下反刍动物依靠尿素再循环节约氮的消耗, 保证瘤胃内适宜的氨浓度以利于微生物合成蛋白质。因此在奶牛的日粮中合理的添加非蛋白氮可以减少蛋白质的添加量, 这样既能节省紧缺的蛋白质资源, 又可大大降低生产成本。

3 非蛋白氮利用的影响因素

非蛋白氮在瘤胃中的降解机理主要是指非蛋白氮在瘤胃中降解为氨气提供给瘤胃微生物的过程。因此影响氨气和瘤胃微生物的因素都会对非蛋白氮的利用产生影响。

3.1 日粮中碳水化合物的浓度及其与蛋白质消化的同步性

有研究表明, 当反刍动物的日粮中只包含干草或其他草料的时候比饲喂淀粉或其他谷物类饲料时尿素的利用效率要低很多。Mills. (1942) 研究发现当在只有低蛋白的干草和尿素中增加淀粉的比例时瘤胃食糜中的真蛋白含量会有所增加[3]。McDonald (1952) 报道:在给绵羊饲喂含有酪蛋白的日粮后瘤胃中氨的含量达到很高的浓度时给瘤胃中添加淀粉, 瘤胃中氨的浓度会迅速下降。这表明淀粉提供了微生物利用氨时所需要的能量[4]。Hristov等 (1997) 用体外法研究了不同水平碳水化合物和同时供应氨以及α-氨基N对瘤胃微生物利用氨以及α-氨基N效率的影响。结果显示:随着碳水化合物水平的提高, 所有处理中, 微生物摄入氨和组入微生物蛋白质的氨数量提高[5]。这些试验都表明碳水化合物是瘤胃微生物降解蛋白的主要能量来源。一些研究指出, 快速降解的淀粉和蛋白质同步快速发酵可刺激瘤胃微生物蛋白质合成数量和合成效率的提高Herrera-Saldana等 (1990) 报道, 当快速消化的淀粉和蛋白质同步降解时, 进入奶牛十二指肠的瘤胃微生物蛋白量最大[6]。体内和体外试验的大多数结果都认为, 碳水化合物的消化速度是控制瘤胃微生物生长所需能量的主要因素。

3.2 日粮粗蛋白浓度和非蛋白氮浓度

有研究表明, 瘤胃中氨气浓度越高, 可饲用的非蛋白氮数量越少, 反刍动物对非蛋白氮的利用率越低。随日粮中天然蛋白质含量的增加和日粮中非蛋白氮用量的增加, 都会使瘤胃中氨的浓度上升, 使非蛋白氮利用率降低。

3.3 日粮中粗蛋白的降解度

降低日粮中粗蛋白的降解度, 增加过瘤胃蛋白质, 可提高非蛋白氮的利用率。

3.4 其他影响因素

Bentley et al. (1954) 报道钴能够提高尿素和消化纤维的利用率[7]。各种矿物质元素包括磷都是瘤胃微生物最佳生长和尿素最佳利用效率所需要的。另外, 瘤胃的状态、低级脂肪酸的供给、动物的年龄、生理状态等等都是非蛋白氮利用效率的影响因素。

4 改善NPN利用率的方法

由于NPN在瘤胃中具有溶解度高, 降解速度快的特点, 因此普通尿素在瘤胃中分解为氨的速度过快, 使瘤胃微生物对氨来不及利用, 于是剩余的氨被吸收入血。如果超过肝再合成的阈值, 血氨的浓度便升高, 达到一定程度时就会发生中毒症状, 严重时会造成死亡。因此要找寻能够安全有效利用非蛋白氮的方法。

4.1 脲酶活性抑制

尿素是脲酶的诱导物, 进入瘤胃中的尿素量高, 能促使脲酶的活性增强, 反之, 当尿素量很低时, 则脲酶活性减弱。因此, 当日粮蛋白质很低, 添加尿素时, 可促使脲酶的活性提高而增加氨的释放。微生物分解尿素产生氨气的速度, 是微生物利用氨合成菌体蛋白速度的4倍左右, 因此微生物脉酶的高活性, 极大地制约着非蛋白氮的利用。而至今对脲酶活性的影响因素了解的不多。为了提高尿素的利用效率, 对脲酶的抑制以降低瘤胃中氨的浓度已进行了不少研究。例如:磷酸盐, 乙二胺四乙酸等。此外, 氢醌等对脲酶也具有抑制效果[8]。

4.2 对尿素进行加工

利用淀粉具有发酵速度快, 能为瘤胃微生物提供较高可利用能的优点。将高淀粉谷物饲料与尿素混合均匀后, 通过一个特制的挤压器, 在一定的温度、湿度和压力下, 使淀粉糊化, 尿素扩展在其中, 使瘤胃微生物对能量和氨氮的利用更趋同步[9]。

通过某些化学反应生成比尿素分解速度慢的尿素衍生物。例如:加热尿素生成双缩脉, 尿素与异丁醛反应生成异丁基二脉, 与脂肪酸反应生成脂肪酸脉, 与甲醛反应生成经甲基脉, 与泥炭、褐煤反应生成硝基腐脉等[10]。将尿素用缓慢降解的物质进行包被, 使尿素被缓慢释放, 从而达到提高瘤胃微生物对尿素利用的目的。将尿素添加到青贮、黄贮饲料中, 可以提高其饲料品质, 提高其蛋白质含量, 起到补充蛋白质不足的效果。

5 反刍动物蛋白代谢的平衡

在反刍动物体内存在一个强大的蛋白质营养代谢稳衡控制机制来节约用氮, 虽然说到目前为止这一机制是如何运转的还不清楚, 但每种营养素都有着自己独特的代谢和营养稳衡机制。

当给反刍动物饲喂比需要量更多的蛋白质时, 瘤胃中剩余的氨气被吸收进入血液, 继而在肝脏中转化为尿素后排出体外。而当过度向生产环境中排放尿素会造成有害的后果。在集约化养殖业中, 过多的向环境排放氮对环境造成的污染已经是一个特殊性的环保问题。例如:进入河道, 烧伤破坏牧草。并且也会影响动物的健康, 尤其是生育方面[11]。在荷兰, 75%~85%的氮是由乳牛的粪尿中排出的。因此, 维持动物体的氮平衡不但是营养性的问题, 更使经济和环境性的问题。这就要求饲料能量载体物质和含氮物质在瘤胃内平衡和释放的同步性来减少反刍动物对体外尿素的排放。既满足动物机体本身的需要也满足环境的要求。

6 小 结

虽然非蛋白氮饲料的开发和利用目前还处于探索阶段, 但其综合开发利用能够节约大量的天然动植物蛋白质饲料, 可以缓解世界蛋白质饲料资源不足的矛盾。因此, 不断开发安全、饲喂效果好、成本

低廉的非蛋白氮饲料将有广阔的发展空间。

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非蛋白氮论文 篇2

1 非蛋白氮的作用机理机理

非蛋白氮在细菌酶的作用下生成氨气和二氧化碳, 碳水化合物在细菌酶的作用下生成挥发性脂肪酸和酮酸, 氨气和酮酸在细菌酶的作用下生成氨基酸, 氨基酸在细菌酶的作用下生成微生物蛋白质, 微生物蛋白质在反刍家畜的真胃利用小肠消化酶生成游离氨基酸, 游离氨基酸被小肠吸收转化为畜体蛋白质及产品蛋白质。

2 非蛋白氮的科学使用

非蛋白氮饲料是指尿素、双缩脲及某些铵盐的统称, 它们是化工合成的简单含氮化合物, 不能提供能量, 根据反刍家畜瘤胃氮素循环的生理特点, 其营养作用只是作为瘤胃微生物合成蛋白质所需的氮源, 从而起到补充蛋白质营养作用, 节省了蛋白质饲料。 (1) 将非蛋白氮饲料配制成高蛋白饲料, 如将其制成凝胶淀粉尿素或氨基浓缩物, 用以降低氨的释放速度。 (2) 将非蛋白氮 (尿素) 配制成混合料并将其制成颗粒料, 其中尿素占混合料的1%~2%为宜, 若超过3%, 会影响到饲料的适口性, 甚至还会导致中毒事故的发生。 (3) 在饲喂尿素的过程中, 应当采取由少逐步增加的方法, 以使反刍动物瘤胃中的微生物群逐步适应, 等其大量增殖后, 采食较大量的尿素也就较安全了, 又增强微生物的合成作用, 增进菌体蛋白的合成量。 (4) 可将添加非蛋白氮饲料添加剂的混合料压制成舔砖, 也可在青贮料或干草中添加尿素, 还可在采用碱处理秸秆时添加尿素。

3 注意事项

(1) 反刍动物在饲喂过程中, 应当注意不断供给一些富含淀粉的谷物饲料 (一般占10%) , 这是由于氨分解吸收快, 会经门静脉通过肝脏进入血液, 这样易引起反刍动物氨中毒。 (2) 非蛋白氮饲料添加剂只是一种辅助性添加剂, 其添加剂量以不超过日粮中所需蛋白质的1/3为原则, 加之用来饲喂的混合料本身有一定的粗蛋白质, 所以非蛋白氮含量一般应当控制在10%~12%为宜。 (3) 反刍动物合成菌体蛋白时必须要先合成氨基酸, 为此要在饲料中提供一定数量的硫、碳和其它矿物质, 以促进氨基酸的合成, 特别是含硫氨基酸的合成。 (4) 在添加非蛋白氮时, 不能同时饲喂含脲酶的饲料 (如豆类、南瓜等) 。饲喂0.5h内不能饮水, 更不能将非蛋白氮溶解在水里后供给反刍动物。 (5) 饲喂含非蛋白氮饲料添加剂的饲料时, 应将非蛋白氮饲料添加剂 (如尿素) 在饲料中充分搅拌均匀, 并分次来喂给反刍动物。 (6) 用非蛋白氮饲料添加剂饲喂反刍动物时, 若发生氨中毒, 成年牛应当立即用2%~3.5%的醋酸溶液进行灌服, 或采取措施将瘤胃中的内容物迅速排空解毒。对幼牛也可采取相同的方法, 但灌服醋酸量应当适当减少。 (7) 非蛋白氮中的氮更多地积累在动物的肌肉组织中, 而非用来合成奶, 在大多情况下, 肉牛要比奶牛多添加5%~8%。为此, 非蛋白氮的利用一般主要在肉牛或者处于休闲期的反刍动物饲养中, 这是由于因动物处于维持生长阶段, 利用非蛋白氮饲料添加剂, 可以节省很多蛋白质, 以达到降低饲养成本, 增加饲养效益的目的。

4 小结

牛、羊等反刍家畜能够利用尿素等非蛋白质含氮化合物合成蛋白质。尿素含氮量高达46%, 1kg尿素相当于7kg豆饼所含蛋白质的营养价值, 而且来源广, 成本较低, 是解决我国蛋白质饲料短缺的有效途径。尿素喂量一般按体重计算, 每100kg体重喂量为20~30g。一般成年牛喂量以不超过100g/d·头为宜。主要技术要点是:喂量准确, 训练采食, 搅拌均纭, 分次喂给, 不可饮服, 喂后2h内严禁饮水。发现中毒, 用糖、醋解救。也可按0.3%~0.4%添加秸秆中制成尿素青贮饲料喂牛。

参考文献

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[2]于丽萍.尿素喂牛应注意的几点问题[J].农学学报, 2001 (1) .

非蛋白氮论文 篇3

1.1 试验材料

尿素 ( (NH2) 2CO, 来自大庆化工总厂) 、钴 (CoCl2, 来自北京化工厂) 、羧甲基纤维素 (CH2OCH3COOR, 来自广州红光化工厂) 、磷脂、膨润土 (含有85%~90%的蒙脱石, 来自吉林省九台市膨润土加工厂) 、糖蜜 (含糖70%~80%, 粗蛋白质7%~9%, 粗灰份7%~9%) 、香草醛 (来自上海有机化工厂) 、硅酸钙 (Ca2SiO3, 哈尔滨红卫化工厂) 。

1.2 主要设备

膨化机由美国三福公司生产。

1.3 配方设计

1) 该研究的关键技术是螯合 (络合) 与乳化技术, 钴可提高利用尿素合成菌体蛋白的能力[1], 因此, 配方中的金属螯合剂使用了钴 (CoCl2) 。而磷脂既可溶于水, 又可溶于油, 是一种非常理想的乳化剂[2]。

2) 根据配方成份的理论用量范围, 设计了3组配方见表1。

kg

1.4 设备选择

为保证产品质量、对生产设备的要求是必须能严格控制一定的温度、湿度、压力和膨化时间, 我们选择了黑龙江省肇东大豆膨化厂进口的美国机组生产。

2 结果与分析

2.1 配方选择

通过表1配方进行对比试验 (加工方法使用图1的工艺) 得出最佳配方为第Ⅱ组, 按重量份数为非蛋白氮100、金属螯合剂1、大分子有机化合物1.5、乳化剂2、缩合剂2、能量包膜剂10、吸附剂10、疏散剂1.5、水1。

2.2 生产工艺选择

保证最佳的瘤胃氨的浓度, 是获得最大菌体蛋白合成量的关键。为此, 采取了螯合、乳化、吸附和包膜尿素的技术。在选择包膜尿素的物质上做了一些对比试验。采用特殊工艺用螯合、乳化工艺包膜尿素, 虽然能达到使尿素缓释的目的、但包膜技术难度大, 包膜不完全, 包膜后粘度高, 不易均匀;而用脂肪酸、聚乙烯等包膜, 其成本过高。最后选择了螯合、乳化、吸附和廉价易得的淀粉等复合物与尿素混匀后, 经高温高压, 膨化处理、使淀粉接近完全凝胶化程度并与非结晶状尿素紧密结合在降低氨释放速度的同时, 提高淀粉的发酵速度, 保持能氮的同步释放, 提高菌体蛋白的合成效率。在设备型号、螯合剂、乳化剂和吸附剂尿素包膜物质确定的情况下, 设计出合理的生产工艺。

3 讨论

在加工工艺过程中, 有2次加热过程, 但并不会因此而产生双缩脲 (也称缩二脲) 及三聚氰胺, 其依据是:

1) 双缩脲 (NH2-CO-NH-CO-NH2) 是2个分子脲即尿素必须经左右加热放出个分子氨 (NH3) 后得到的产物, 而缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂的加工过程中加热温度最高为150℃ (在生产过程, 加热温度被严格控制在150℃以下) , 并且是瞬间加热。

2) 尿素法生产三聚氰胺是目前较多采用的低成本生产方法, 该方法是用尿素以氨气为载体, 硅胶为催化剂, 在380~400℃温度下沸腾反应, 先分解生成氰酸, 并进一步缩合生成三聚氰胺, 其反应式为:

按照反应条件不同, 三聚氰胺合成工艺又可分为高压法 (7~10 MPa, 370~450℃, 液相) 、低压法 (0.5~1 MPa, 380~440℃, 液相) 和常压法 (<0.3MPa, 390℃, 气相) 3类。从以上反应条件来看, 缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂的加工过程中加热温度均达不到其最低温度。此外, 加热时间也非常短暂 (瞬间加热) 。

3) 经过黑龙江省兽药饲料监察所对缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂产品的定期检验, 并未查出三聚氰胺。

综上所述, 无论从理论还是实际检验, 缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂的加工过程中并不产生双缩脲, 也不生产三聚氰胺。

在配方、生产工艺确定的基础上, 生产了1 t的该产品进行饲喂效果及对比试验, 结果表明, 缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂不仅可以使反刍动物的瘤胃微生物利用尿素氨合成其自身菌体蛋白, 进而被机体吸收后合成蛋白质, 从而使血清总蛋白含量增加, 使血液中球蛋白含量增加[3], 提高了奶的质量[4], 还能使血清尿素氮的含量有所提高, 但血氨量仍在正常范围内。这说明包膜尿素复合物在瘤胃中的确可以缓慢释放氨, 不能产生氨中毒, 达到了使用安全[5]。

根据乳牛的营养需要, 缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂已经在配方中添加了必需的营养物质, 以满足产奶性能需要, 从而达到既提高乳牛生产性能, 又节约了蛋白质饲粮的双重作用。解决了我国尚不能直接利用尿素进行工业化生产非蛋白氮的系列饲料产品的问题。

摘要:介绍了缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂的加工工艺, 通过对比试验及饲喂试验, 设计出最佳配方及合理的加工工艺。在确定配方及加工工艺的情况下, 生产出部分产品, 进一步的饲喂试验结果表明, 缓释非蛋白氮膨化饲料添加剂对奶牛既达到了使用安全, 同时还提高了奶牛的血清蛋白总量、产奶量及乳质。

关键词:缓释,非蛋白氮,膨化,饲料添加剂,反刍动物,加工工艺,配方

参考文献

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非蛋白氮论文 篇4

1 材料

1.1 样品

按照《饲料采样》GB/T14699.1—2005标准要求, 分别从北京、河南、河北、内蒙古等地采集反刍动物常用粗饲料原料共3类4种22个样品, 其中苜蓿5种, 羊草3种, 玉米秸秆6种, 玉米秸秆青贮8种。玉米秸秆4~6号、玉米秸秆青贮1~2号、玉米秸秆青贮8号、苜蓿01号和苜蓿04号采自北京市沧达福奶牛场, 玉米秸秆青贮5~7号、玉米秸秆2~3号、苜蓿02~03号采自河南农业大学奶牛场, 玉米秸秆青贮3~4号、玉米秸秆1号和羊草2~3号采自河北察北管理区奶牛场, 羊草1号和苜蓿05号由内蒙古农业大学提供。

将采集的饲料样品自然晾干, 粉碎后过40目筛 (直径为0.45 mm) , 装入自封口袋中, 置干燥处保存备用。

1.2 主要仪器

分析天平 (型号为BT 224S) , 购自赛多利斯科学仪器有限公司;p H值计 (型号为PHS-25) , 购自上海鼎科科学仪器有限公司;电热恒温干燥箱 (型号为DHG-9146A) , 购自上海万锐实验设备有限公司;滤纸 (型号为Whatman#54) , 购自广州迈博生物科技有限公司;控温消煮炉 (型号为KXL-1010) , 购自北京市瑞帮兴业科技有限公司;凯氏定氮仪 (型号为HDY-9830) , 购自北京市瑞帮兴业科技有限公司。

1.3 药品

钨酸钠, 杭州盛利化工有限公司生产;三氯乙酸, 天津科密欧化学试剂有限公司生产。

2 方法

2.1 钨酸沉淀法

称取试样0.5 g置125 m L三角瓶中, 加纯化水50 m L、10%钨酸钠溶液8 m L, 在20~25℃条件下培养30 min;用0.5 mol/L硫酸调节p H值至2.0, 室温放置过夜;过滤, 用纯化水冲洗残留物2次;将滤纸及残余物转移到凯氏瓶中, 用凯氏定氮法测量残留物氮及样品总氮含量, 同时做空白试验。计算公式:非蛋白氮=总真蛋白-残余真蛋白。

2.2 三氯乙酸法

称取试样0.5 g置125 m L三角瓶中, 加50 m L纯化水, 静置30 min;加入10%三氯乙酸溶液10 m L, 静置20~30 min;过滤, 残渣用三氯乙酸溶液冲洗2次;滤纸及沉淀于105℃烘干, 转移至凯氏瓶中, 用凯氏定氮法测量残留物氮及样品总氮含量, 同时做空白试验。计算公式:非蛋白氮=总真蛋白-残余真蛋白。

2.3 统计学分析

采用Excel 2003对试验数据进行初步整理, 计算相对偏差, 以确定测定结果的精密度。用SAS 8.1软件对三氯乙酸法和钨酸法的测定结果进行成对数据的t检验。

3 结果 (见表1) 与分析

%

注:在苜蓿的测量中, t=-22.04, P<0.000 1;在羊草的测量中, t=2.5, P<0.129 7;在玉米秸秆的测量中, t=1.04, P<0.344 8;在玉米秸秆青贮的测量中, t=-1.20, P<0.267 4。

3.1 不同方法对粗饲料中非蛋白氮的测定结果

由表1可知, 三氯乙酸法和钨酸法对不同粗饲料中非蛋白氮含量的测定结果有一定差异。对于苜蓿, 采用三氯乙酸法测定得到的非蛋白氮含量均高于钨酸法, 差异显著 (P<0.01) ;对于羊草、玉米秸秆、玉米秸秆青贮饲料, 三氯乙酸法与钨酸法相比差异不显著 (P>0.05) , 说明可以用三氯乙酸法替代钨酸法。

3.2不同方法对粗饲料中非蛋白氮精密度的测定结果

由表1可知, 钨酸法和三氯乙酸法测定粗饲料中非蛋白氮含量的相对偏差均较小, 符合国标规定蛋白质测定结果的要求。试验结果重现性较好, 精密度较高, 说明钨酸法和三氯乙酸法均达到了检测分析要求, 其结果是准确可靠的。

4 讨论

非蛋白氮是指饲料中蛋白质以外的含氮化合物的总称, 包括游离氨基酸、酰胺类 (amide) 、蛋白质降解的含氮化合物、氨及铵盐等简单含氮化合物。非蛋白氮的测定是指饲料经过特殊沉淀剂沉淀, 能滤过滤纸的那部分氮。三氯乙酸 (TCA) 是一种蛋白质沉淀剂, 它可以使蛋白质构象发生改变, 暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。钨酸也是一种蛋白质沉淀剂, 它和三氯乙酸沉淀的蛋白质分子质量大小有差异, 钨酸可沉淀3肽以上的含氮物质, 三氯乙酸法可沉淀十肽以上的含氮化合物, 因此三氯乙酸法测定非蛋白氮的结果偏高, 与可溶性蛋白含量相近。本研究中, 三氯乙酸法测定的苜蓿中非蛋白氮含量比钨酸法高, 这与U.C.Krishnamoorthy等[5]研究结果一致。N.A.Greenberg等[6]研究发现, 钨酸法更准确, 可以补偿肽在三氯乙酸法蛋白沉淀中的损失。

5 结论

三氯乙酸法和钨酸法对不同粗饲料中非蛋白氮含量的测定结果有一定差异。对于苜蓿中非蛋白氮含量的测定, 两种方法的测定结果有显著差异, 不能用三氯乙酸法替代钨酸法;对于羊草、玉米秸秆、玉米秸秆青贮饲料中非蛋白氮含量的测定, 两种方法的测定结果差异不显著, 可以用三氯乙酸法替代钨酸法。

摘要:为了探讨不同测定方法对粗饲料中非蛋白氮 (NPN) 的影响, 试验分别采用钨酸法和三氯乙酸法测定反刍动物常用粗饲料中非蛋白氮含量。结果表明:两种方法测定的苜蓿中非蛋白氮含量差异显著, 而测定的羊草、玉米秸秆和玉米秸秆青贮饲料中非蛋白氮含量相近, 所有测定结果的重复性强、稳定性高。说明在测定羊草、玉米秸秆和玉米秸秆青贮饲料中非蛋白氮时, 用三氯乙酸法替代钨酸法是可行的。

关键词:粗饲料,非蛋白氮 (NPN) ,三氯乙酸,钨酸,测定方法

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