紫外分光光度计

紫外分光光度计（通用11篇）

紫外分光光度计 篇1

1 紫外分光光度计的原理

紫外分光光度计仪器分析法广泛应用于工农业各部门和科学研究的各个领域中, 它是利用物质分子吸收紫外可见光谱区辐射的一种仪器分析方法。其基本原理是依据朗伯·比尔定律, 即光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关, 光的吸收与吸收层厚度、溶液浓度、光吸收率成正比, 可用下式表示:

式 (1) 中:A为吸光度;k为摩尔吸光系数;b为光程, 即盛放溶液的液槽的透光厚度;c为溶液浓度。

当物质分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后, 会发生电子能级跃迁, 从而产生吸收光谱。各种不同的分子、原子和不同分子空间结构组成了自然界中形态各异的物质。因此, 物质吸收光能量的情况也不尽相同。依据物质特有的吸收光谱曲线上的某些特征波长处的吸光度, 即可判定或测定该物质的含量, 从而对物质进行定量和定性的分析。

2 紫外分光光度计的组成

紫外分光光度计型号种类繁多, 其基本结构由光学系统、电光系统、光电系统、电子系统、数据处理和输出打印系统等部分组成。

光学系统由转向平面镜、聚光镜外光路系统、单色器三部分组成。其中, 单色器是紫外分光光度计杂散光的主要来源, 直接影响着整机的分析误差;单色器和外光路系统有很多类型。

电光系统由氘灯、钨灯和相应的电源组成, 它直接影响着整机运行的稳定性。

光电系统由硅光电池、光电管、光电倍增管、晶体管阵列组成, 作用是将光信号转换为电信号, 反映了仪器整机的灵敏度和适用范围。

电子系统由A/D变换器、放大器等组成, 作用是对电信号进行相应的处理, 以适于显示和识别。放大器是产生仪器噪声的主要来源, 对仪器的稳定性、灵敏度和分析误差有较大的影响。

数据处理、输出打印系统负责显示和输出电信号, 特别是对软件部分, 决定了紫外分光光度计的可操作性和质量。

3 国内外的应用现状

国内外的应用现状分为以下8方面:1对环境水样进行快速在线监测。利用紫外可见光谱分析法可直接或间接地测定水中大多数金属离子、非金属离子和有机污染物的含量, 可实现对环境水样快速在线监测和对多种水质参数的检测。2由于大部分药物都能在紫外区产生吸收峰, 因此, 最大吸收波长和摩尔吸收系数可利用紫外分光光度计检定物质的常用物理参数。将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中, 在相同的测定条件下分别测定紫外可见吸收光谱, 可判定两者是否为同一物质, 准确性高。目前, 使用紫外分光光度计分析检测最多的药品有维生素、解热药、降血压药、抗生素、去痛药、腹泻药、镇咳药、滴眼药和某些妇科药等。3通过使用紫外分光光度计测定某些饮料或发酵产品, 从而使饮料产品的色差符合要求, 或确定发酵的完成程度、定性分析食品中的成分, 以便排除食品中违禁使用的食品添加剂或水产品中的有害物质, 从而对食品或某些水产品进行质量控制。4因氨基酸对紫外光的主要吸收波长为230 nm, 因此, 只需要采用紫外分光光度计的吸光度测量模式, 即可测算氨基酸的含量。但在检测分析时, 要注意防止氨基酸溶剂带来的干扰吸收线问题。5由于DNA/蛋白质分子内的嘌呤碱、嘧啶碱、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和肽键等, 及其由它们参与组成的核昔、核苷酸和核酸在一定波长范围内对紫外光具有吸收作用, 因此, 利用该特性, 可以准确、可靠地测定乳制品中的蛋白质含量。6对农药及其残留物中的有害物质含量进行分析。比如农作物中的某些农药原体、农药的有毒代谢物、农药的降解物和杂质等。7由于石油的两个特征吸收峰225 nm和254 nm是测定炼油厂污水中含油量时选用的吸收波长, 因此, 应用紫外分光光度计对石油油品进行分析, 可方便地测定石油的含量, 从而控制石油工业产品的质量。8紫外分光光度计分析法可方便地测定饲料的原料、添加剂、混合饲料中的各种维生素、苯甲酸、乙酸酯、胡萝卜素、氨基酸、钾、铁、硒、碘、铜、锰、皮蝇磷、磺胺类药物、灰黄霉素、二甲硝咪唑和普鲁卡因等的含量。

4 紫外分光光度计的发展趋势

紫外分光光度计的发展趋势分为以下6方面:1单色器、检测器、显示或记录系统、光源等分光光度计组件的不断发展和完善。特别是全息光栅技术的飞速发展, 使成本不断降低, 正在迅速取代机刻光栅。紫外分光光度计的显示设备已普遍配置了液晶显示屏等显示设备, 比如美国珀金埃尔默公司生产的555型分光光度计。2新型紫外分光光度计配备了种类丰富的附件产品, 比如积分球、试管架、蠕动泵进样、微量样品池架、特定样品池架、恒温池架、光纤探测装置和镜面反射附件等。3计算机控制技术正在不断被应用到紫外分光光度计中, 比如日本日立公司生产的340型紫外分光光度计, 大大改善了仪器的性能, 提高了自动化程度。4新型紫外分光光度计的性能在不断提高。比如, 我国北京瑞利公司生产的UV-2200型紫外分光光度计, 其杂散光可达到到1/100 000, 光谱带宽由0.1 nm到5 nm分6档可变, 具有最小0.1 nm的光谱分辨率。5紫外分光光度计的功能逐步增多, 实现了一机多用。比如, 岛津公司的UV-1240紫外分光光度计既具有常规光度检测功能, 又可以作为生物酶和水质分析的专用仪器。6紫外分光光度计不断向着小型化、便携化、分析高速化的方向发展。比如, 美国海洋光学公司2001年推出的USB2000型微型光度计, 其质量只有200 g, 可与PC机通过USB接口连接, 采用2 048位元的CCD检测器, 最快积分时间只有3 ms。

5 结束语

随着相关领域科学技术的不断发展, 紫外分光光度计仪器分析技术正迅速向着快速、准确、自动、灵敏和适应强等方向迅速发展。仪器科研工作者要熟练掌握各种常规分析仪器的性能和操作方法, 确保顺利开展祥光科研工作。

摘要：紫外分光光度计是一类很重要的分析仪器, 因此, 介绍了其基本原理和组成, 论述了紫外分光光度计当前在国内外的主要应用领域, 并对紫外分光光度计的发展趋势进行了分析。

关键词：光度计,分析仪器,光吸收率,透明介质

参考文献

[1]朱良漪.分析仪器手册[M].北京:工业出版社, 1997.

[2]倪一, 黄梅珍, 袁波, 等.紫外分光光度计的发展与现状[J].现代科学仪器, 2004 (3) :3-7.

紫外分光光度计 篇2

根据相关规定，现对紫外可见分光光度计进行单一来源采购，欢迎合格的供应商前来报价。

项目名称：紫外可见分光光度计 项目编号：HS-2017178 项目联系方式： 联系人：王翠红 联系电话：***

采购单位联系方式：

采购单位：华东师范大学设备处 采购单位地址：上海市东川路500号 采购单位联系方式：刘老师 021-54345242

一、拟采购的货物或者服务的说明: 紫外可见分光光度计用于常规有机物定性、定量检测，同时通过配备积分球附件可以用于不同温度下粉末、纸、布料、玻璃、薄膜等固体试样的漫反射、镜面反射等反射光谱测定。设备组成：紫外可见主机、温控系统、固体样品支架、样品池（用于固体、液体及粉末等不同样品）、积分球、电脑、打印机、附件及配件组成。该成套设备必须是进口原装，不接受由不同品牌、厂家模块组合的产品。

二、采用单一来源采购方式的原因及相关说明: 紫外可见分光光度计是超分子有机化学研究工作中进行手性化合物合成与分析，测定超分子化合物紫外吸收的必备分析仪器。作为绿色化学实验室全合成研究方向的学术骨干，在我们的研究工作中，每天都有大量合成化合物需要进行紫外吸收的测试，需要对样品在不同温度下漫反射和镜面反射进行研究，从而确定化合物的正确结构。这些工作要通过紫外分光光度计来实现。有机化学合成化合物的研究中，需要我们根据合成化合物的各种谱图进行结构分析，其中紫外光谱分析是其中一项。我们现有的质谱分析采用的是岛津公司的基质辅助激光解析质谱、制备型液质联用仪及气质联用仪等一系列仪器，研究数据中一般要求实验及表征数据进行统一性，所以采用同一厂家的仪器是数据统一的基础。考虑到数据的一致性，我们需要将紫外数据和荧光、红外以及质谱数据进行对比计算，得到理想的实验结果。这套仪器的配套不仅可以提高本小组的工作效率，同时还可以为重点实验室其他小组，甚至校内其他单位服务。

基于以上原因，结合样品在不同温度下漫反射和镜面反射研究的需要，我们申请采购岛津公司的配备温控装置和积分球的紫外可见分光光度计。

三、公示时间：

2017年 10 月 30 日至2017年 11 月 3 日 16点止

四、拟定的唯一供应商名称及其地址：

岛津企业管理(上海)有限公司 淮海西路570号

五、其它补充事宜

供应商对本项目有异议的，可于公示期内，以书面形式（加盖单位公章）向华东师范大学设备处提出。

六、预算金额

紫外分光光度计 篇3

关键词：乌药；总生物碱；分光光度法

中图分类号：R284.1；O657.32 文献标志码：A 文章编号：1002-1302（2014）03-0266-02

乌药[Lindera aggregata （Sims）Kosterm]系樟科（Lauraceae）山胡椒属（Lindera）植物，为传统的理气止痛药[1]，具有温中散寒、理气止痛的功效，最早记载于唐代陈藏器《本草拾遗》。现代药理学研究表明，乌药具有广泛的药理活性[2-3]。乌药根的主要有效成分为异喹啉类生物碱及呋喃倍半萜[4]，其中生物碱和呋喃倍半萜及其内酯类成分是乌药的特征性成分[5-7]，具有较强的专属性，也具有一定的活性。为了确保乌药的质量标准评价有具体的量化指标，根据乌药中所含成分的特点，本研究采用酸性染料比色法测定乌药中的生物碱含量。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

主要仪器：紫外可见分光光度计（尤尼柯UV-4802）；98-1-C数显控温电热套（天津泰斯特）；索式提取器；电子天平；三氯甲烷（AR）；溴甲酚绿（AR）；小檗碱标准品（成都领航者生物技术有限公司）；pH值45的醋酸-醋酸钠缓冲液；0.01 mol/L氢氧化钠溶液（用乙醇溶解）。

试验所用中药材乌药样品采自江西赣南。

1.2 试验方法

本研究所用试验方法参照文献[8-10]的方法并加以改进。

1.2.1 缓冲液的配制 pH值4.5缓冲液的配制：将 0.2 mol/L 氢氧化钠滴加至冰醋酸中，调节pH值为45，即得醋酸-醋酸钠缓冲溶液。0.04%溴甲酚绿溶液的配制：称取40 mg溴甲酚绿，加100 mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液溶解，过滤。

1.2.2 标准曲线的制备 称取2 mg干燥至恒重的小檗碱对照品于100 mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至100 mL，摇匀。分别取1.2、2.4、3.6、4.8、6.0、7.2 mL标准溶液于 20 mL 量瓶中，用三氯甲烷稀释至10 mL，分别加入5.0 mL pH值为45的缓冲液、2.0 mL 0.04%溴甲酚绿溶液，剧烈振摇5 min后静置30 min。取5 mL下层液体，加入1.0 mL 0.01 mol/L 氢氧化钠乙醇溶液，摇匀后于628 nm处测吸光度。以小檗碱含量（C）为横坐标，吸光度（D）为纵坐标制作标准曲线，得回归方程。

1.2.3 空白溶液的制备 取10 mL三氯甲烷溶液于20 mL容量瓶中，分别加入5.0 mL缓冲液（pH值4.5）、2 mL 004%溴甲酚绿溶液，剧烈摇动5 min后静置30 min。取 5 mL 下层液，加入1.0 mL 0.01 mol/L氢氧化钠乙醇溶液摇匀，作为空白溶液。

1.2.4 乌药中总生物碱的提取 准确称取0.5 g乌药，用适量氨水湿润后密封放置30 min，索式提取2 h后将提取液置于TLC（薄层色谱），滴加碘化铋钾溶液至不显色为止；回收三氯甲烷，将残留物放冷至室温，再用三氯甲烷溶解并定容至20 mL。分别取 0.2 mL 提取物于量瓶中，加三氯甲烷定容至10 mL，混匀作为样品液。分别取10 mL样品液于3个20 mL容量瓶中，再分别加入5.0 mL缓冲液（pH值4.5）和2 mL 004%溴甲酚绿溶液，剧烈摇动5 min后静置30 min；取5 mL下层液，加 1.0 mL 0.01 mol/L氢氧化钠乙醇溶液，摇匀后于628 nm处测定吸光度，计算生物碱含量与回收率，回收率计算公式为：

3 结论

本研究采用酸性染料比色法测定乌药中的总生物碱含量，其原理是生物碱盐的阳离子与酸性染料的阴离子定量结合生成有色的络合物，可以定量地被某种有机溶剂萃取，因此通过测定萃取液的吸光度可以测定药材中总生物碱含量。在本试验中采用的生物碱的酸性染料为溴甲酚绿。同时考察了本方法的线性范围、稳定性、精密度、回收率，结果表明本方法符合紫外可见分光光度法的测试条件，可以作为乌药中总生物碱含量的测试方法。

生物碱大多具有复杂的环状结构，具有显著的生物活性，是乌药中重要的有效成分。本试验测得乌药中总生物碱含量为0.301 4%（n=3）。本试验建立的乌药中总生物碱含量的测试方法可以为乌药种源质量的筛选提供试验方法和参考依据。

参考文献：

[1]肖培根. 新编中药志[M]. 北京：化学工业出版社，2002：230.

[2]国家药典委员会. 中华人民共和国药典：一部[S]. 北京：化学工业出版社，2005：53.

[3]中国医学科学院药物研究所.中药志：第二册[M]. 北京：人民卫生出版社，1981：926.

[4]程显隆，魏 锋，冯玉飞，等. RP-HPLC法测定乌药中乌药醚内酯和乌药内酯的含量[J]. 药物分析杂志，2003，23（3）：225-227.

[5]许海丹，顾霞敏，叶文国. 乌药化学成分的分布特性研究[J]. 时珍国医国药，2010，21（1）：100-101.

[6]Han Z，Zheng Y，Chen N，et al. Simultaneous determination of four alkaloids in Lindera aggregata by ultra-high-pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A，2008，1212（1/2）：76-81.

[7]Gan L S，Yao W，Mo J X，et al. Alkaloids from Lindera aggregata[J]. Natural Product Communications，2009，4（1）：43-46.

[8]蒋爱芳，杨义芳，黄文武. 酸性染料比色法测定总生物碱的研究进展[J]. 中草药，2006，37（增刊）：359-362.

[9]蔡大可，李 耿，彭绍忠，等. 酸性染料比色法测定痹痛消膏中乌头生物碱的含量[J]. 中药新药与临床药理，2007，18（1）：57-59.

[10]敖茂宏，刘 海，吴明开. 酸性染料比色法测定不同产地流苏石斛中总生物碱的含量[J]. 江苏农业科学，2012，40（10）：282-283.

紫外分光光度计 篇4

为保证紫外可见分光光度计在使用的有效期间内处于可靠的标准状态, 确保检测结果的质量, 因此对仪器设备实施期间核查。

二、核查要求

(一) 仪器基本情况。

本紫外可见分光光度计型号为759MC, 级别为Ⅱ级, 故可接受标准为Ⅱ级仪器标准。核查频率每1年一次, 时间为距上次外检6个月时。

(二) 波长范围。

本台仪器的波长范围为200～1, 000nm, 按照检定规程所述, 将仪器的波长范围划分为三段, 分别为A段 (200～340nm) , B段 (340～900nm) , C段 (900～2, 600nm) 。根据实际情况仅对A、B段进行验证。

(三) 温湿度要求。

温度 10～35℃, 相对湿度小于等于85%。

(四) 波长最大允许误差及波长重复性。

以空气为空白, 调整好仪器的零点和满度, 将氧化钬溶液 (或氧化钬滤光片, 在检定有效期内) 放入10mm比色皿中, 在波长范围为200～800nm内进行扫描, 连续扫描3次, 记录扫描谱图。选择下列标准吸收峰波长进行验证:241.16, 361.24, 451.28, 536.53, 640.42nm。用下列公式计算:波长示值误差:undefined;undefined次测量的平均值;λS——波长标准值;波长重复性:δλ=λmax-λmin;λmax, λmin——分别为3次测量波长的最大值与最小值。可接受标准:取A段、B段内最大差值为波长示值误差和波长重复性。波长最大允许误差:A段±0.5nm;B段±1.0nm;波长重复性:A段≤0.2nm;B段≤0.5nm。

(五) 比色皿的配套性。

用石英和玻璃比色皿装蒸馏水分别于220nm, 440nm下, 将一个比色皿放入仪器中, 调节透射比为100%, 测量其它比色皿的透射比值, 其差值即为比色皿的配套性。可接受标准:≤0.5%。

(六) 线性和测量准确性。

分别取紫外分光光度法和可见光分光光度法测量中国环保部标准样品研究所的标准样品, 验证分光光度计的线性和准确性。可接受标准:线性相关系数r≥0.999, 结果在标准样品的标准值范围内 (准确性) 。

三、核查内容

(一) 对实验室环境温度进行核查。

经核查实验室温度为21.0℃, 湿度为46%, 该环境条件符合要求。

(二) 对分光光度计波长最大允许误差及波长重复性进行核查。

一是配制氧化钬溶液:称取已经干燥过的氧化钬 (基准试剂) 4g (准确至±0.1g) 于100毫升容量瓶中, 用10%高氯酸溶液定容, 待溶解摇匀后, 避光密封保存。二是将氧化钬溶液放入10mm比色皿中, 在波长范围为200～800nm内进行扫描, 连续扫描3次, 扫描结果如表1。三是将上述结果与五个标准吸收波长进行比较, 经计算得出五个标准吸收峰波长下的波长示值误差依次为:0.04nm, -0.04nm, 0.12nm, 0.27nm, 0.38nm, 标准吸收峰波长下的波长重复性测量结果依次为:0nm, 0.1nm, 0.2nm, 0nm, 0.2nm, 均符合标准要求。

(三) 对比色皿的配套性进行核查。

将石英和玻璃比色皿装蒸馏水分别于220nm, 440nm下, 放入仪器中。经测定, 一对10mm石英比色皿在220nm下测定的透射比值分别为100.0%, 99.7%, 透射比差值为0.3%, 小于0.5%, 符合标准;一对10mm玻璃比色皿在440nm下测定的透射比值分别为100.0%, 99.8%, 透射比差值为0.2%, 小于0.5%, 也符合标准要求。

(四) 对线性和测量准确性进行核查。

1.紫外光分光光度法测量标准样品。

在220nm和275nm处测定环保部标准样品研究所提供的总氮标准样品, 经测定, 编号为203226的总氮标准样品的测定值为0.832mg/L, 其标准浓度范围为0.788±0.066mg/L, 标准曲线相关系数r=0.9997, 符合标准要求。

2.可见光分光光度法测量标准样品。

在540nm处测定环保部标准样品研究所提供的二氧化氮标准样品, 经测定, 编号为206136的二氧化氮标准样品的测定值为0.397mg/L, 其标准浓度范围为0.404±0.018mg/L, 标准曲线相关系数r=0.9998, 符合标准要求。

四、核查结论

紫外分光光度计 篇5

分光光度计应用于高中生命科学实验,可以实现从定性到定量实验的转变.应用分光光度计实验的方法一般为比色法和分光光度法.本文以蛋白质含量测定为例介绍比色法,同时介绍了维生素C和葡萄糖含量的比色法测定;以叶绿体色素的.测定介绍了分光光度法.

作 者：陈云杰 申丽娜  作者单位：陈云杰(上海市育才中学,01)

申丽娜(上海市嘉定区安亭中学,201805)

刊 名：生物学教学  PKU英文刊名：BIOLOGY TEACHING 年，卷(期)： 34(9) 分类号： 关键词：分光光度计   生命科学实验   定量实验  

紫外分光光度计 篇6

【关键词】 二十五味余甘子丸；紫外分光光度法；总鞣质；含量测定

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）14-0013-02

Abstract：ObjectiveTo set up a method for determination total tannin in ershiwuwei yuganzi pill. Methods Gallic acid to be reference， and colored with Phos phorus molybdenum tungsten acid， the wavelength of detect was set at 760 nm. Results The linearity was obtained within the range of 1.024～10.240 μg （r=0.9996）；The average recovery（n=6） was 99.2%， and RSD was 0.6%. Conclusion The method is simple， accurate and repeatable. It could be adopted to determinate the total tannin in ershiwuwei yuganzi pill.

Keywords：ershiwuwei yuganzi pill； UV； total tannin； content determination

藏药二十五味余甘子丸为藏医传统验方，处方由余甘子、巴夏嘎、甘青兰等二十六味药材制成的复方制剂，临床用于多血症、高血压、肝胆疼痛、声哑目赤、口渴、口唇发紫、月经不调[1]。研究采用紫外分光光度法测定[2-3]十一批不同厂家的二十五味余甘子丸中总鞣质的含量，为其质量控制提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 TU1901双光速紫外可见分光光度计（北京普析通用公司）；XP205 微量电子天平（ 瑞士METTLER 公司）；KQ-250DE型数控超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）。

1.2 材料 没食子酸对照品（批号：110831-200803，中国药品生物制品检定所）；所用的试剂均为分析纯，二十五味余甘子丸样品（见表1）。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液制备 精密称取没食子酸对照品11.36mg，置20mL棕色量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取5mL，置50mL棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.0512 mg/mL的没食子酸对照品溶液。

2.2 供试品溶液制备 精密称取供试品细粉2.0g，置250 mL棕色容量瓶中，加入30% 的甲醇溶液150mL，超声提取40 min，放冷，加30%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液20 mL，置100 mL棕色容量瓶中，加水至刻度，即得。

2.3 标准曲线的制备 精密量取浓度为0.0512mg/mL没食子酸对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置25 mL棕色量瓶中，各加入磷钼钨酸试液1 mL，再分别加水11.5、11、10、9、8、7 mL，用29% 碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30 min，以相应的试剂为空白，在760 nm 处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线得回归方程Y=0.12163X+0.06147（r=0.9996），表明没食子酸在1.024～10.24μg范围内线性关系良好。

2.4 精密度试验 取供试品溶液（批号：101201）6份，分别制成供试品溶液，按照“2.3”项下方法操作，于760 nm 处测定吸光度，结果吸光度的相对标准偏差（RSD）为1.3%，说明仪器的精密度良好。

2.5 稳定性试验 精密吸取供试品溶液（批号：101201）1mL，按“2.3”项下方法操作，显色30 min后，每隔5min测定一次吸光度，共6次，计算（RSD）为1.2%（n=6），表明二十五味余甘子丸的鞣质在显色终止反应后30 min内测结果稳定。

2.6 回收率试验 取已知含量（批号：101201）的样品6 份，精密称取2.0g细粉，各加入没食子酸对照品20.0 mg，按照供试品溶液制备方法制备，并按“2.3”项下方法测定含量，结果6次测定的平均回收率为99.2%，RSD=0.6%，说明该测定方法回收率较好。见表2。

2.7 总鞣质含量测定

2.7.1 总酚 精密量取供试品溶液2mL，置25mL棕色量瓶中，加入磷钼钨酸试液1mL，再加水10mL，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，测定吸光度。

2.7.2 不被吸附的多酚 精密量取供试品溶液25mL，加至已盛有0.6g干酪素的100mL具塞锥形瓶中，密塞，于30℃水浴中保温1h，时时振摇，取出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2mL，置25mL棕色量瓶中，加入磷钼钨酸试液1mL，再加水10mL，用29% 碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min， 测定吸光度。结果见表3。

3 讨论

为了能够较为准确的测定总鞣质的含量，研究对供试品的制备方法进行了优选。通过比较水、50% 丙酮、30%甲醇超声提取制备的供试品中总鞣质的含量，发现50%丙酮和30%甲醇提取所得总鞣质含量最高，因此确定二十五味余甘子丸提取溶剂为30%的甲醇；而50%丙酮虽含量比30%甲醇高但是在试验过程中二十五味余甘子丸中有些药材在丙酮提取时对鞣质含量有影响。同时比较了超声提取和放置过夜提取两种提取方法，发现超声提取不仅提取完全，而且由于可以常温提取，不会影响鞣质的含量。因此，确定采用超声提取。

由于鞣质类化合物性质不稳定，所以对样品的制备、处理等均应考虑环境的影响，避免鞣质类化合物发生变化，如：样品制备和超声时注意温度的影响，提取液应避光保存，且宜迅速测定等。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准（藏药，第一册）[S]. 1995 ：148.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S] . 北京：中国医药科技出版社，2010：62.

[3]孙中文，刘汉青，黄一平，等. 藏药余甘子中总鞣质和没食子酸的含量测定[J].现代中药研究与实践，2010，24（3）：60 .

紫外分光光度计 篇7

1 波长示值误差项目检定中需注意的问题

波长示值误差是一项重要指标, 规程中对该项指标的检测, 给出了多种标准物质进行选择。选择哪一种标准物质, 要根据仪器的情况。一般最常用的波长标准物质是氧化钬玻璃滤光片、镨钕玻璃滤光片。因其使用最方便 (不用打开仪器光源部分) , 汞灯等波长标准需放到光源部分, 操作起来相对麻烦。但由于氧化钬玻璃等滤光片需要通过高等级紫外可见分光光度计对参考波长定值后才可用于对相对等级较低的仪器进行检测, 所以使用时需充分考虑定值时使用的紫外可见分光光度计的性能, 尤其需要考虑到仪器的光谱带宽, 定值用仪器的光谱带宽多设定为2nm。但大多数仪器的光谱带宽是固定的, 而且较大, 尤其是低档仪器, 如752型紫外可见分光光度计光谱带宽为4nm。表1、表2分别为同一台紫外可见分光光度计在其他条件不变下, 光谱带宽分别设定为0.5nm、2.0nm、5.0nm时使用氧化钬玻璃和镨钕滤光片扫描得到的峰值数据, 可见当仪器的光谱带宽发生变化时, 使用氧化钬玻璃或镨钕玻璃滤光片检测得到的波长误差存在着较大的差异, 对于光谱带宽较大的仪器甚至部分波峰检测不到。而且对于具备自动扫描功能的仪器, 扫描速度同样对检测结果有着不可忽视的影响。如表3所示。

所以如果我们的定值机构能够分别给出滤光片在不同光谱带宽下所对应的峰值, 详细描述定值所用仪器的各项参数。我们的检定员在检定过程中根据被检仪器的实际光谱带宽选择合理的参考值, 并尽量将仪器扫描速度等参数设定为滤光片定值时所使用的紫外可见分光光度计的参数, 将有效避免因定值仪器与被检仪器因参数设定的差异引入的测量误差。而且虽然镨钕玻璃滤光片的波长范围可以达到 (500~900) nm, 但并不适合将镨钕玻璃滤光片作波长示值误差判定的唯一标准, 原因是镨钕玻璃滤光片的峰值并不尖锐, 比较圆滑。仅可作为对某一空白波段的补偿。例如使用氧化钬玻璃滤光片作为主标准器检测 (200~700) nm范围的波长值, 再用镨钕玻璃滤光片补充 (700~900) nm波段的波长值。对于光谱带宽不可调且较大的仪器如果使用滤光片检定不合格时切不可急于判定, 而应该改用汞灯等自然标准重新对仪器波长误差进行检定, 以此为依据做出判断。

2 透射比示值误差检定中需注意的问题

透射比的误差反映了仪器测光的准确度, 使用的标准器通常为:标准溶液、金属镀膜滤光片和中性滤光片。实际检定中多使用金属镀膜滤光片和中性滤光片, 其中金属镀膜滤光片可以满足紫外光段和可见光段的检定, 中性滤光片仅可满足可见光段的检定。检定中经常会发现部分单光束低端仪器 (如721型分光光度计) 透射比示值误差超差的现象, 实际上造成这种结果可能是由下列原因造成的:

2.1 分光光度计入射光的光斑较大

大部分单光束紫外可见分光光度计入射光的光斑较大, 用滤光片检定时, 滤光片的支架的边缘遮挡了部分光, 造成检定结果超差。解决方法:以空气为参比, 对分光光度计透射比调节100%时, 在比色皿中插入未安装滤光片的空白支架。

2.2 检定用滤光片对光的反射引起的误差

这种现象主要发生在使用金属镀膜滤光片检定仪器透射比误差时。用于检定仪器透射比误差的理想滤光片应能够均匀的降低入射光的强度, 不存在对入射光的反射。但目前所使用的金属镀膜滤光片的表面均会对入射光产生一定的反射, 造成测量误差, 这个现象在对使用透镜式光路的低端紫外可见分光光度计检定中尤其明显。而且金属镀膜滤光片存在计量性能不稳定的问题, 由于该滤光片表面是一层镀膜, 如果镀膜表面受到污染, 在进行清理时是很容易对镀膜造成破坏, 改变滤光片原有数值的。解决方法:使用金属镀膜滤光片对紫外光段的透射比误差进行检定, 使用中性滤光片对可见光段的透射比误差进行检定, 当发现仅紫外光段透射比误差不合格时, 使用标准溶液进行复测, 以标准溶液的检定结果作为紫外光段透射比误差的最终检定结果。

2.3 检定用滤光片入射面选择所造成的误差

由于滤光片制作工艺水平的限制, 滤光片的厚度不可能是完全均匀的, 更不能保证滤光片放入比色皿架后, 入射光能够完全垂直照射在滤光片上, 这就造成同一个滤光片, 选择的入射面不同时, 测得的透射比示值也是不同的, 造成测量误差, 甚至误判。解决方法:对滤光片定值时, 如果定值机构在定值时能够考虑到这个问题, 根据定值时的实际情况在滤光片上标明入射光的方向或入射面, 检定仪器时根据定值机构的标注选择滤光片入射面, 放置滤光片, 就可以有效减小因滤光片入射面选择不同造成的测量误差。

3 杂散光检定中需要注意的项目

杂散光是紫外可见分光光度计非常重要的关键技术指标。它是紫外可见分光光度计分析误差的主要来源, 它直接限制被分析测试样品浓度的上限。当一台紫外可见分光光度计杂散光一定时, 被分析的试样浓度越大, 其误差分析就越大。

杂散光的检测可以使用10g/L的Na I碘化钠溶液和50g/L的Na NO2亚硝酸钠溶液, 也可以使用截止滤光片, 只要该片在某区域的透射比 (或吸光度) 值与检定规程中的指标符合误差理论 (标准器与被检器的关系) 即可。

杂散光的来源有很多, 主要有一下几个方面1灰尘污染光学元件, 2光学元件被损伤或有其他缺陷, 3光学系统屏蔽不好, 4狭缝的缺陷等, 其中光栅是杂散光的主要来源, 它产生的杂散光占总杂散光的80%以上。杂散光一般有两种出现形式:一是, 被测量波长和杂散光波长相同, 会直接射到检测器上, 而没有经过样品。造成这种情况的主要原因是样品与其他光学接线零件的散射即反射。二是, 杂散光是测定波长之外的偏离正常光路到达检测器的光线, 这是因光学系统本身缺陷导致, 比如灰尘散射、光学系统像差、多余反射面等。在检定杂散光时, 标准滤光片法在实际检定中运用比较多, 在光谱透光率的检测器灵敏度较低、光强强度较弱时, 会加大杂散光比例, 因此, 首先应该对紫外分光光度计中 (200~220) nm区域内的杂散光进行检定。

4 小结

紫外分光光度计 篇8

所谓化学需氧量 (COD) , 是在一定的条件下, 采用一定的强氧化剂处理水样时, 所消耗的氧化剂量。COD是水体有机污染的一项重要指标, 能够反应出水体的污染程度[1]。化学需氧量 (COD) 的测定, 随着测定水样中还原性物质以及测定方法的不同, 其测定值也有不同。目前应用最普遍的是重铬酸钾氧化法和紫外分光光度计法[2]。但是, 重铬酸钾测定法在测定过程使用有毒物质硫酸汞、贵重的硫酸银试剂以及大量的浓硫酸, 不仅排放的废液容易造成环境污染, 而且费用比较高。因此, 紫外分光光度计法相比之下, 不仅节省成本, 更关键的是防止了环境污染。本文就紫外分光光度计法的准确性进行了试验, 证明了其在COD检测中的应用潜力。

2 材料和方法

2.1 试剂

本实验所用试剂均为分析纯。邻苯二甲酸氢钾标准溶液的理论COD值为500mg/L;试验用水为双蒸水。所取试样为来自于某污染源的10次水样。

2.2 紫外分光光度计法

使用紫外分光光度计前, 先进行30min的预热, 而后用塑料棒遮断光路调整零位, 然后用蒸馏水充满10mm比色皿, 接着将调整旋钮对齐100% 的位置后调整显示屏表示值100%, 并重复2次, 试样测试时将经过滤的试样水直接充满比色皿, 入射光波长选为254nm, 测出透光率, 并换算成吸光度。如果试样中有机物浓度过高, 则需经稀释后测定透光率, 而后换算成分析化学意义上的吸光率[3]。

2.3 重铬酸钾法

移取一定体积COD为500mg/L的标准水样于消化管中, 准确加入一定量K2Cr2O7标准溶液, 并加几粒沸石, 混匀, 加一定量的浓硫酸, 接好冷凝管, 充分混匀, 加热回流。冷却后, 加入2滴试亚铁灵指示剂, 用硫酸亚铁铵标准溶液滴至溶液由黄色经蓝绿色至红褐色为终点。同时进行空白实验, 以消耗硫酸亚铁铵标准溶液的用量计算COD。

3 实验结果分析

3.1 标准曲线的制作

用COD为500mg/L的邻苯二甲酸氢钾标准溶液分别配制浓度为25mg/L、50mg/L、75mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L的溶液。使用紫外分光光度计法, 在进行了30min的仪器预热后, 调整零位和100%, 并重复2次;在254nm下, 将经过滤的各浓度的标准溶液直接充满比色皿, 测出透光率, 并换算成吸光值, 做标准曲线见图1, 拟合曲线, 得方程y=0.009x+0.051, 线性相关系数R2=0.998。

3.2 用紫外分光光度计法测定污水样品浓度

在254nm下, 将经过滤的取自不同来源的污水液直接充满比色皿, 测出透光率, 并换算成吸光值, 同时根据上述标准曲线换算为COD, 其结果见表1。

3.3 用重铬酸钾法分别测定污水样品浓度

使用重铬酸钾法, 移取一定体积的不同来源的上述污染水样于消化管中, 准确加入一定量K2Cr2O7标准溶液, 并加几粒沸石, 混匀, 加一定量的浓硫酸, 接好冷凝管, 充分混匀, 加热回流。冷却后, 加入2滴试亚铁灵指示剂, 用硫酸亚铁铵标准溶液滴至溶液由黄色经蓝绿色至红褐色为终点。同时进行空白实验, 以消耗硫酸亚铁铵标准溶液的用量计算COD, 结果见表2。

由表2中数据可知, 重铬酸钾法测试获得的结果与紫外分光光度计法测得的结果吻合度很高, 说明紫外分光光度计法测得的结果有较高的准确度和精密度。

4 结语

实验结果表明, 采用紫外分光光度计法在波长为254nm的条件下, COD与吸光值呈现较好的线性关系, 可以较好地评估水体的质量。根据拟合曲线, 只要用分光光度计测出水样的吸光值, 就能计算出污水的COD。而且, 紫外分光光度计法测得的结果与重铬酸钾法测试获得的结果相比, 有较高的准确度和精密度。因此, 紫外分光光度法在水质实际监测中值得推广应用。采用紫外分光光度法测定COD的方法, 不仅减少实验费用、简化操作步骤, 更关键的是避免了重铬酸钾方法造成的环境污染。但使用该方法有一定的局限性, 在试样浓度高时或者色重的情况下直接使用本方法较为困难, 可采用稀释法应对。

参考文献

[1]李亚新, 赵晨红.紫外分光光度法测定焦化废水的主要污染物[J].中国给水排水, 2001, 17 (1) :54~56.

[2]孙熙, 刘震.COD测定方法的进展与发展趋势[J].黑龙江水专学报, 2006, 33 (2) :114~116.

[3]宋来洲, 李健, 运如艳, 等.紫外分光法测定污水厂出水中的COD[J].中国给水排水, 2002, (12) :85~86.

紫外分光光度计 篇9

但硝酸盐等食品添加剂有一定的毒性, 对人体有一定的危害。果蔬食品中通常也含有硝酸盐及亚硝酸盐类。因此硝酸盐的含量测定是食品卫生、防疫部门必须完成的检测项目。在有关教材中虽有介绍, 如镉柱法测定较繁, 用紫外分光光度法测定较为方便实用, 在有关标准中也有记载, 但介绍不详细。笔者根据多年教学实践在实验的基础上, 改进、简化了用紫外分光光度法测定硝酸盐含量的方法, 使该方法更方便实用。

1 目的要求

(1) 知道紫外分光光度计 (如UV755B) 的使用方法。

(2) 学会用紫外分光光度法测定食品中硝酸盐的含量。

2 实验内容

利用硝酸根离子在220 nm波长处的吸收而定量测定硝酸盐的含量。

(1) 标准储备溶液的配制。精密称取基准KNO30.020 0克, 置于小烧杯中, 溶解后定量转入100 ml容量瓶中, 用蒸馏水稀释至标线, 摇匀。此溶液含KNO30.200 mg/ml。

(2) 标准溶液的配制。取3支50 ml的比色管 (或25 ml的容量瓶) , 用吸量管依次加入KNO3 (0.200 mg/ml) 溶液0.50 ml、1.50 ml、2.50 ml, 用蒸馏水稀释到25 ml标线处, 摇匀。

所得标准系列的浓度依次为含KNO3:4.0、12.0、20.0μg/ml (可分别作为100、300、500浓度单位) 。

(3) 样品溶液的配制。准确称取样品约0.02克, 置于小烧杯中, 溶解后定量转入100 ml容量瓶中, 用蒸馏水稀释至标线, 摇匀。

另取一支50 ml的比色管 (或25 ml的容量瓶) , 用吸量管准确加入2.00 ml样品溶液, 用蒸馏水稀释至25 ml标线处, 摇匀。

(4) 测定。 (1) 将仪器的波长调节到NO3-的λmax=220 nm处。 (2) 将空白溶液 (蒸馏水) 与标准溶液、样品溶液分别盛于石英比色杯中, 按仪器使用说明书中的方法, 在紫外分光光度计上测出样品溶液的c值 (或A值作吸收曲线, 并从曲线上查出c值) , 用公式计算样品溶液中硝酸盐的含量。

紫外分光光度计 篇10

紫外吸光度法所使用的仪器价格便宜, 一般实验室均有配备。王秀君[2]等用紫外分光光度法对抽余油、航煤、直馏柴油等为原料制成的各种型号的溶剂油, 选取260nm和287.4nm处作为特定波长, 利用一定的数学算法建立模型, 可同时测定样品中单环及双环芳烃含量。栾立新等[3]用紫外分光光度计选取264.5和283.5nm处的吸光度做为单环芳烃等吸收点测量光谱, 建立双波长紫外光谱法对白油中单环及多环芳烃组分含量的同时测定, 获得了满意的结果。

一、实验部分

1. 实验仪器及试剂

实验使用日立公司UV3900紫外分光光度计, 石英比色皿厚度lcm;

异辛烷:AR;

单环芳烃标样Ⅰ:自配;

多环芳烃标样Ⅱ:自配。

2. 实验原理与方法

根据朗伯比耳定律由两种组分组成的混合物中, 若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质, 可根据相互间光谱重叠的程度, 采用相对应的方法来进行定量测定。

待测样品在1cm石英比色皿中, 以异辛烷为参比, 使用紫外分光光度计测量在266.5nm和288nm处的吸光度。由实验结果可知标样Ⅰ在288nm处无吸收, 而标样Ⅱ在288nm处有一定的吸收, 所以根据A288=εbλ1cbb建立多环芳烃浓度与吸光度线性方程。在同一浓度下, 多环芳烃在266.5nm处的吸光度和288nm处的吸光度是相同的, 可由A266.5一A288=A266.5单求出单环芳烃的吸光度, 并建立其浓度与吸光度的线性方程。将样品的吸光度代入线性曲线计算出样品中的单环类芳烃和多环类芳烃的含量。

二、实验结果

1. 建立标准曲线

标样Ⅰ、Ⅱ经过异辛烷适当的稀释配制4个系列的标准浓度, 得到多环芳烃线性方程为式 (1) , 相关系数R2=0.99996。

式中:f——稀释样品的质量浓度/ (g/L)

多环芳烃线性方程为式 (2) , 相关系数R2=0.99983。

建立标准曲线用数据见表1。

注:标样ⅠA=A266.5, 标样ⅡA=A288

2. 柴油样品中芳烃含量分析

取适量的柴油样品用容量瓶适当稀释, 使用测量标样的方法测量稀释样品的吸光度数据。测量结果与气质联用测量结果对比如表2所示。结果表明, 紫外分光光度计法的平均绝对相对偏差约为1.59%, 可用于样品的分析。

3. 回收率实验

将已知浓度的标准芳烃溶液加人到待测溶液中, 然后按实验方法测定, 进行回收实验, 并计算回收率, 实验结果见表3。

结论

使用紫外分光光度法, 建立标准曲线测量柴油的芳烃含量, 具有方便、快捷, 实验成本低等特点, 不需要繁琐的分离过程, 能够同时测量样品中单环和多环芳烃含量。实验结果表明回收率在98.13%~104.00%, 分析结果令人满意。

参考文献

[1]苟爱仙, 李晓刚, 苑俊杰, 刘玉珍, 柴油中芳烃含量的分析方法探讨, 炼油与化工, 2011, 22 (4) :60-62.

[2]王秀君, 郑连义等, 双波长紫外光谱法快速测定溶剂油中单环及多环芳烃含量, 河北化工, 2002, 3:43-44.

紫外分光光度计 篇11

土壤是人类赖以生存的主要自然资源之一,而在石油的生产、加工、运输等环节中由于操作不当及人为原因造成的泄露溢出事故,都会造成土壤的污染,进而破坏土壤的结构,破坏土壤的透水性,石油污染物与土壤中有效的氮、磷、钾发生反应,破坏土壤中富含的肥力。近年,世界各国开始重视污染土壤治理技术的研究。

测定土壤中石油的含量,则成为整个降解修复技术中的关键。目前比较广泛采用的测量方法主要有重量法、索氏提取法、超声波萃取法等,以下是根据石油组成中所含的具有共轭体系的物质在紫外光区有特征的吸收峰,研制出一种切实有效的测量土壤中柴油含量的方法。

2 原理与实验

2.1 原理

石油组成中所含的具有共轭体系的物质在紫外光区有特征的吸收峰。带有苯环的芳烃化合物主要吸收波长为250~260nm;带有共轭双键的化合物主要吸收波长为215~230nm。一般原油的两个吸收峰为225nm及256nm。而在该吸收峰下不同量的柴油对应不同的吸光度,由柴油和吸光度的一一对应关系,可以通过实验确立二者之间的线性关系。

2.2 实验

2.2.1 仪器及试剂

a.紫外分光光度计(具有2cm石英比色皿);

b.超声波振荡仪;

c.10ml移液管2只、5ml及2ml移液管各1只;

d.25ml容量瓶1个、50ml容量瓶1个、10ml容量瓶8个;

e.石油醚(60~90℃),柴油。

2.2.2 制备校准曲线步骤

a.柴油标准溶液的制备:取0.05222g柴油溶于石油醚中并定容至25ml,摇匀容量瓶并用移液管取5ml混合液定容至50ml,50ml容量瓶中的溶液浓度为208.88ug/ml。

b.取油标准溶液加入2cm比色皿中于220~300nm范围内扫描,得到柴油的最大吸收峰在波长为257λnm处。

c.用移液管分别加入柴油标准溶液2、3、4、5、6、7、8、10ml至8个10ml容量瓶中,并用石油醚定容至10ml。于257nm波长、用2cm石英比色皿、以石油醚为参比,测定标准系列的吸光度,其相应的浓度及吸光度如表所示,并绘制校准曲线。

得到吸光度与柴油浓度关系(如表1):

y:柴油浓度mg/ml;x:吸光度。

2.2.3 测土壤中柴油浓度的实验

a.首先用天平准确量测一干净烧杯质量,用采样器取少许土壤放在烧杯里并用天平准确称量烧杯与土壤的重量,得到土壤的质量。

b.加入大约2ml左右的蒸馏水稀释并用振荡器振荡成溶液,再用移液管量取2ml石油醚加在装有土壤的烧杯里,并用振荡器振荡2min,将土壤与石油醚的混合液体加入分液漏斗中,待沉淀2min后分液,由于重力作用含有柴油的石油醚将分层在水与土壤混合物的上方,分液得到石油醚与柴油的混合液体并放入另一干净的烧杯中。连续重复萃取三次,可以认为土壤中的柴油已经完全被萃取到石油醚中。

c.在萃取得到的石油醚与柴油的溶液中加入少许无水硫酸钠,以便吸收混合液体中的少量水,再放入10ml的容量瓶中并定容至10ml。

d.将容量瓶中石油醚与柴油的溶液摇匀,以使得溶液中各处浓度一致。准备好两个石英比色皿,取石油醚放到一石英比色皿中,另取上述得到的石油醚与柴油的溶液放入另一石英比色皿中,将两石英比色皿放入分光光度计中,在波长为257λm处,测两石英比色皿中溶液的吸光度,以纯石油醚做参比,测得容量瓶中混合液的吸光度,用式(1)计算即得到所取土壤中所含柴油浓度。

3 结果与讨论

该法简单易行,适用于测量被柴油污染土壤中柴油的含量,且精确度较高,采用的手段及需要的仪器设备也较为简单。是一种可以广泛推广的方法。

摘要：针对被柴油污染的土壤,研制一种简便宜用的办法测量土壤中柴油的含量。根据石油组成中所含的具有共轭体系的物质在紫外光区有特征的吸收峰,而在该吸收峰下不同量的柴油对应不同的吸光度,由柴油和吸光度的一一对应关系,通过实验确立二者之间的线性关系。利用这个关系式,测得不同量柴油的吸光度,得到柴油的实际量。