甲硝唑棒（通用3篇）
甲硝唑棒 篇1
甲硝唑(2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇)是通常用于治疗原生动物疾病如滴虫病和贾第虫病的一种合成的硝基咪唑衍生物。它具有广谱的抵抗寄生和细菌感染的活性,能有效地对抗毛滴虫,文森特生物和厌氧菌等[1]。然而,根据国际癌症研究署(IARC)在动物身上的试验表明,甲硝唑会引发癌症。灵敏并准确的检测各种药品中甲硝唑的含量对于食品安全,人类健康以及有关甲硝唑生物毒性的研究都是很有意义的。目前,已经报道的甲硝唑的检测方法有气相色谱法[2]、电泳法[3]、TLC-密度计法[4]、高效液相色谱法[5]、分光光度法[6]、荧光法[7]和电化学分析方法技术[8]等,但是这些方法普遍耗时或操作过程复杂。而电化学技术灵敏度高,操作简单,响应迅速,设备便宜,吸引了越来越多的人来研究。
石墨烯是单层碳原子紧密堆积形成的六方蜂巢状晶格结构的晶体,比表面积大、电子迁移率高、且不受温度影响、具有优异的电学热学力学及化学性质,使得其在诸多领域已得到广泛的应用。然而,由于石墨烯片层间存在较大的范德华力,易发生堆积和聚集,且难分散在水和其它常用溶剂,从而限制了石墨烯在许多方面的应用。金纳米棒(gold nanorod,AuNRs)是一种棒状金纳米材料,它的合成方法简单,产量高,可以通过调节金纳米棒的长径比来调控金纳米棒的局域表面等离子共振吸收峰,使其从可见光区调节到近红外区,提高其对周围的介电常数的敏感度,增强其在生物传感领域的信号放大效果。
本研究将制备的分散性良好的石墨烯/AuNRs复合材料为传感材料来修饰玻碳电极,建立了一种电化学快速灵敏测定甲硝唑的方法,研究了甲硝唑在该电极上的电化学行为,并对甲硝唑含量进行了测定。
1 实验部分
1.1 试剂和仪器
天然鳞片石墨(质量分数≥99%,Sigma有限公司);甲硝唑标准品(贵州迪大科技有限责任公司),0.2mol/L的PBS缓冲液。(其他试剂均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司)。电化学分析仪(CHI600B,上海辰华仪器有限公司);电化学工作站(CHI660D,上海辰华仪器有限公司);紫外—可见分光光度计(AquaMate Plus UV8.01);傅立叶红外光谱仪(Nicolet 460)。
1.2 材料的制备
1.2.1 氧化石墨(GO)的制备
在0℃下,将50mL的浓H2SO4加入到装有1g石墨粉和1gKNO3混合物的烧瓶中,再加入6g KMnO4,在室温下连续搅拌1h。向反应器内缓慢加入200mL水,继续搅拌15min,然后再加入30%的H2O2溶液。将所得物在超高速离心机中进行离心,除去未脱落的石墨和多余的氧化剂。用5%的HCl溶液重复洗涤剩余物,直到用BaCl2溶液检测不到洗液中存在SOundefined为止。进一步用超纯水重复洗剩余物至中性,然后在真空中干燥,得到黄棕色固体。
1.2.2 石墨烯(RGO)的制备
称取GO(200mg)分散于150mL水中,加适量NaOH调节pH至10,超声波处理1h,使其完全分散水中,溶液呈黄棕色。再在GO分散液中加入400mgNaBH4,充分搅拌30min,然后将混合物加热到135℃,维持5h,得黑色的分散均匀的石墨烯分散液。
1.2.3 石墨烯/AuNRs的制备
按照文献先配制金纳米生长溶液[9]:5mL100mmol/L的CTAB溶液中依次加入250μL的HAuCl4·3H2O,32.5μL10mmol/L的AgNO3溶液,25μL100mmol/L的抗坏血酸,再在该混合液中加入适量石墨烯,超声0.5h使石墨烯完全分散后,最后加5μL
10mmol/L的冰冷的NaBH4溶液。超声0.5h后再静置3h,使其反应完全。将得到的产物在10000rpm的转速下离心20min,弃去上清液,去除多余的CTAB和其它离子,将底物重新分散在二次水中,待用。
1.2.4 修饰电极的制备
将玻碳电极(GCE)在湿润的涂有0.05μm的Al2O3麂皮上抛光成镜面,然后依次用稀HNO3、无水乙醇、蒸馏水超声波清洗,自然晾干。用微量进样器取8μL石墨烯分散液或者石墨烯/AuNRs分散液滴加在玻碳电极表面,红外灯下烘干即制得石墨烯和石墨烯/AuNRs修饰的玻碳电极。将石墨烯、石墨烯/AuNRs复合材料分别分散于水溶液中。用微量进样器量取8μL分散液修饰于干净的玻碳电极表面,待晾干后再在其表面修饰5μL浓度为0.5wt% 的Nafion溶液以防止材料脱落。
1.3 实验方法
采用三电极系统分别对材料进行循环伏安及交流阻抗测试,检测甲硝唑的含量时使用差分脉冲伏安法。其中以玻碳电极为工作电极,Ag/AgCl电极为参比电极,铂丝为对电极。循环伏安测试:以pH=7.4的PBS配制浓度为1×10-3mol·L-1的甲硝唑溶液,扫描范围为-1.1～0.6V,电化学阻抗测试:采用含有0.3mol/LKNO3和5mmol/L的Fe(CN)undefined/ Fe(CN)undefined(1:1)的PBS溶液(pH=7.0)为测试底液,频率范围在0.1～105Hz。差分脉冲伏安法:初始电位-0.5V,终止电位为0.3V,电位增量为0.004V,脉冲宽度0.2s,检测不同浓度的甲硝唑溶液。每次扫描结束后,将修饰电极置于空白底液中循环扫描至无峰,用二次水淋洗后晾干,可重复使用。
2 结果与讨论
2.1 制备方法选择与优化
石墨烯的制备包括氧化石墨烯GO先后与NaOH和NaBH4的化学反应。NaOH作为一种强碱,会与层状的氧化石墨烯(GO)上的羟基、环氧基及羧基这些活性基团反应,使得氧化石墨烯带上大量的负电荷[10],从而使氧化石墨烯稳定的分散在水中,再经NaBH4进一步还原得到在水中良好分散的石墨烯。
在由文献制备AuNRs方法的基础上做一些改进,选择在还没有形成金棒之前将石墨烯分散在金棒的生长溶液中充分超声分散,使形成的金核附着在石墨烯上,再加还原剂将金核还原成AuNRs,确保AuNRs更牢固的锚在石墨烯的表面。
2.2 结构表征
氧化石墨烯(GO)、石墨烯(RGO)以及石墨烯/AuNRs的红外谱图如图1所示。可看到石墨烯的各功能团波长:νC=C1561cm-1、νOH3434cm-1和νC-O-C1110～1200cm-1在氧化石墨烯中1730cm-1出现的C=O特征峰在石墨烯中也消失了,由此表明,石墨烯已经被成功制备[11]。图2为氧化石墨烯、石墨烯及复合材料的紫外可见光谱,氧化石墨烯在233nm和300nm处出现特征峰,石墨烯在267nm出现特征峰与之前的文献相符[12],更能证明石墨烯的成功制备。单层的石墨烯仍包含C-O-C与C-OH,这些官能团与缺陷在一定程度上也增加了石墨烯的水溶性,使之更稳定分散于水溶液中。从图中可以看出,金纳米棒在570nm、843nm出现了特征峰,复合材料出现了266nm、560nm和823nm的特征峰,证明成功地制备了复合材料石墨烯/AuNRs。
2.3 不同电极的电催化性能
图3为相同修饰用量时,不同材料电极在Fe(CN)undefined/ Fe(CN)undefined中的电化学响应,可以看出复合材料石墨烯/AuNRs修饰的玻碳电极的响应明显强于裸玻碳电极,石墨烯修饰电极和AuNRs修饰的玻碳电极的电化学响应。
电化学交流阻抗(EIS)是研究材料电子传导性的重要工具。图4为不同材料修饰电极的交流阻抗谱图。阻抗曲线由两部分组成。其中,半圆部分是表示修饰层的电子转移阻抗,而直线部分是表示电解质在修饰层的扩散电阻。由图4可以看出,由于导电性良好的金纳米棒“锚”在了大比表面积的石墨烯片表面上,很大程度地改善了材料的传导性,使得石墨烯/AuNRs修饰电极的电子转移阻抗最小,石墨烯修饰电极次之,裸玻碳电极的电子转移阻抗最大。
2.4 甲硝唑含量的测定
2.4.1 在不同材料修饰的电极上的电化学响应
图5为pH=7.4时,甲硝唑在裸玻碳电极(曲线1)、石墨烯修饰电极(曲线2)和石墨烯/AuNRs复合材料修饰电极(曲线3)上的循环伏安曲线。从图中可看出,甲硝唑在裸玻碳电极只有一个微弱的还原峰,Epc=-0.749V,ipc=1.406×10-5A,在石墨烯修饰电极上也仅能看到一个还原峰,Epa=-0.688V,还原峰峰电位右移61mV,但甲硝唑氧化还原峰电流明显增大,ipc=2.499 ×10-5 A,还原峰电流增大近两倍;而在石墨烯/AuNRs修饰电极上,Epc=-0.637V,Epc=0.291V,还原峰峰电位继续右移51mV,甲硝唑氧化还原峰电流继续增大,ipc=5.141×10-5A,ipa=-0.394×10-5A,电极反应的可逆性变好。由此可见石墨烯/AuNRs复合膜对甲硝唑有明显的催化作用,甲硝唑在复合修饰膜上的电子传递速率更快。
甲硝唑的5×10-5 mol/L溶液中的循环伏安图(扫速:80mV/s)
(1到11分别为:3×10-7,5.5×10-6,1×10-5,1.4×10-5,1.6×10-5,2×10-5,2.6×10-5,3×10-5,3.6×10-5,4×10-5,5×10-5 mol/L)甲硝唑溶液中的差分脉冲伏安图(插图为校准曲线)
2.4.2 线性范围及检测限
在低浓度时,通过差分脉冲伏安(DPV)测得的峰要比循环伏安法测得的峰更尖锐灵敏,而且背景电流更小,分辨率更好,因此选择差分脉冲伏安法来检测甲硝唑的含量。选用pH=7.4的磷酸缓冲液作为支持电解质,从所得结果(图6)来看,随着甲硝唑浓度的增加,峰电流随之线性增加,其在3×10-7～5×10-5mol/L这个浓度范围内呈现良好的线性关系,线性方程为Ip(A)=0.03151c(mol/L)+4.5091×10-6(r=0.9982),检测限为9.2×10-8mol/L(S/N=3)。
2.4.3 再现性、稳定性和抗干扰性
为了研究该复合材料修饰电极的再现性,分别选取六根用石墨烯/AuNRs修饰的电极检测浓度为1×10-5mol/L的甲硝唑溶液,得到的峰电流RSD为4.8%,表现出较好的再现性。将修饰后的电极存放在4℃的环境中,一周以后再检测,得到的峰电流认可保持初始峰电流响应的91.3%,有着良好的稳定性。在相同测试条件下,固定甲硝唑的浓度为1×10-5mol/L,发现加入200倍浓度的葡萄糖、蔗糖、柠檬酸,300倍浓度的KCl,NaNO3,BaCl2,50倍浓度的FeCl2,MgCl2,ZnCl2,十二烷基磺酸钠等,均对检测没有干扰,说明该方法具有较高的选择性。
3 结论
成功的制备了分散性良好的石墨烯/AuNRs复合材料,并构建了基于石墨烯/AuNRs的电化学传感器,该传感器对甲硝唑的电化学氧化具有明显的催化作用。在优化的条件下,该传感器可以实现对甲硝唑的灵敏、简便和快速的检测,并拥有较宽的线性范围及较低的检测限。此外,该传感器重现性好,稳定性好,利用该方法,可实现药物中甲硝唑的灵敏准确快速测定,可望将其用于药品分析的有效检测中。
参考文献
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甲硝唑棒 篇2
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取我院2010年2月~2012年4月口腔科收治的牙周脓肿患者60例临床资料进行分析,其中男性36例,女性24例,年龄25~65岁,平均年龄(42.3±10.6)岁,临床症状:牙周袋深度大于4.0mm,患者牙齿有红肿疼痛,通过探诊容易出血,牙齿松动情况,Ⅰ°25例,Ⅱ°35例,牙周有溢脓,X线可见有牙槽骨有吸收,但是吸收的程度不超过牙根长度1/3。牙周脓肿患者60例依据治疗方式不同分为对照组(甲硝唑棒治疗组)30例和观察组(盐酸米诺环素软膏治疗组)30例,两组牙周脓肿患者一般资料无统计学差异,P>0.05。
1.2 方法
两组牙周脓肿患者在局麻下将患牙龈上牙石去除,通过超声细线器,加龈下刮治器对患牙进行龈下刮治和根面平整,通过3%双氧水及0.9%生理盐水对牙周袋进行反复冲洗。对照组将甲硝唑棒(四川锡成药业有限公司,生产批号:20100106)观察组将2%盐酸米诺环素软膏(新时代株式会社,生产批号:H20100107)注射器针头向牙周袋底,缓慢注入药物,药物充满到牙龈缘处,告知患者半小时内请勿漱口和进食。
1.3 观察指标
(1)观察两组牙周脓肿患者菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、牙周袋深度(PD)情况;(2)观察两组牙周脓肿患者临床疗效情况效果评价标准:痊愈:牙周脓肿患者自觉临床症状完全消失,牙周脓肿完全消失,牙齿没有叩击痛,龈沟出血指数恢复正常;显效:牙周脓肿患者症状明显减轻,牙周袋探诊深度小于2.0mm,牙齿松动度明显好转,龈沟出血指数小于3,牙周没有溢脓;无效:上述指标均未达到者。总有效率=痊愈+显效+有效。
1.4 统计学分析
采用统计学软件SPSS 15.0建立数据库,计量资料通过t检验和计数资料通过χ2检验分析,P<0.05,差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组牙周脓肿患者菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、牙周袋深度(PD)情况(如表1)
2.2 两组牙周脓肿患者临床疗效情况(如表2)
3 讨论
牙周脓肿属于牙周组织感染性疾病,牙周袋内感染向牙周组织的深部逐渐扩展,如果牙周袋内的脓肿液无法排出,对于临近组织损伤较大,从而对牙槽骨造成慢性的溶解性破坏,导致牙齿松动脱落[3,4],严重者可能引起全身炎性反应。临床治疗基础主要是对牙龈上、下结石和牙菌斑进行清除,将牙周袋袋口敞开,对牙周袋进行局部冲洗,将脓液引流[5,6]。然后盐酸米诺环素软膏和甲硝唑棒主要是装在专用注射器,将药膏直接注射到牙周袋,从而在牙周袋内遇到水形成一层变硬的膜,可以粘附在牙根的表面这样不容易被龈沟液从牙周袋冲出去,从而以活性状态下作用于炎性脓肿的位置,在局部大到较高的血药浓度发挥杀菌抑菌的作用[7,8]。甲硝唑棒体内抑菌试验结果表明[9,10]龈下菌群明显改变。在用药棒后与牙周炎关系密切的产黑色素拟杆菌、口腔拟杆菌以及具核梭杆菌等完全消失或明显减少。盐酸米诺环素软膏属于盐酸二甲胺四环素的一种牙周局部缓释剂,属于高效广谱半合成四环素,对于厌氧菌和兼性氧菌形成较强的抑制作用。盐酸米诺环素软膏中脂溶性较高,渗透性好,其低浓度时具有很好的抑菌作用而在高浓度时具有杀菌作用。盐酸米诺环素软膏通过调节宿主反应的非抗菌性,可以有效的降低龈沟液中胶原蛋白酶活性,对牙槽骨组织吸收减缓,促进成纤维细胞的增殖分化和结缔组织附着,利于牙周组织再生和重建,进而提高牙周脓肿患者的口腔免疫防御功能。笔者通过对我院收治的牙周脓肿患者临床资料进行分析,依据治疗方式不同分为对照组(甲硝唑棒治疗组)30例和观察组(盐酸米诺环素软膏治疗组)30例,结果表明,观察组PLI、GI、PD均优于对照组,观察组临床治疗总有效率明显高于对照组。
参考文献
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甲硝唑棒 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2012年10月~2013年1月收治的100例慢性牙周炎患者作为研究对象, 所有病例均符合《临床口腔医学》的诊断标准, 经牙龈指数 (GI) 、牙周探诊 (PD) 及X线检查确诊。牙周袋探诊指数 (PD) ≥6mm或临床附着丧失 (AL) ≥4mm, 且牙齿松动度<Ⅲ度, 无牙合创伤, 全口余留牙在10个以上, 相应部位的牙龈红肿或牙周溢脓, X光片显示牙槽骨有不同程度的吸收。所有病例均签署知情同意书, 身体健康, 无胃肠道、心、肝、肾等主要脏器严重疾病, 无四环素过敏史。1年内未接受牙周治疗, 1个月内未服用过抗生素或非甾体抗炎药, 平时不适用含抗菌、抑菌、抗炎药的漱口水。排除妊娠及哺乳期妇女, 牙齿明显松动和牙槽骨吸收超过10个牙齿的重度牙周炎患者。其中男57例, 女43例, 年龄32~55 (42.5±10.2) 岁。将该组患者采用随机数字表法分为观察组和对照组各50例, 两组在一般资料方面具有可比性 (P>0.05) 。
1.2 方法
所有患者在纳入研究的前2w内进行系统的牙周治疗, 包括全口龈上洁治术及口腔卫生宣教, 行脓肿切除, 用3%双氧水、生理验收冲洗上药, 5~7d后复诊, 以此为基线进行牙周检查, 然后对所有受试牙行龈下刮治和根面平整术。观察组:采用盐酸米诺环素软膏 (日本株式会社) , 将注射器针的尖端轻轻放入牙周袋的底部, 然后注入药物直至牙周袋口有药物溢出 (给药量约0.05ml) 。每周给药1次。对照组:采用甲硝唑棒 (山东方明药业股份有限公司) 治疗, 将甲硝唑棒棒条折成小段, 镊子夹持, 塞入牙周袋内, 隔日给药。用药后1h内不得漱口、喝水、进食。两组均治疗4w。
1.3 观察指标
复诊时检查并记录患牙牙周情况, 4w后比较两组患者治疗前后的菌斑指数 (PLI) 、牙周袋探诊指数 (PD) 、龈沟出血指数 (SBI) , PLI、SBI、PD均采用牙周探诊方法计算, 详细方法见参考文献。
1.4 统计学处理
采用SPSS 16.0统计软件处理, ±s表示计量资料, 采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
两组患者治疗后的PLI、PD、SBI等均较治疗前显著改善 (P<0.05) 。但观察组的PLI改善显著优于对照组 (P<0.05) 。见附表。
注:组间相比, *P:<0.05;组内治疗前后相比, △P:<0.05
3 讨论
牙周炎是口腔科比较常见的疾病, 主要特征为牙周袋的形成及袋壁的炎症, 主要由牙菌斑中的微生物细菌引起, 是导致成年人牙齿丧失的主要原因, 盐酸米诺环素对牙周主要致病菌的抑菌效果较好, 脂溶性高, 抗菌作用强, 通过干扰细菌蛋白的合成而发挥抗菌作用。局部给药可在牙周袋内保持长时间高浓度, 减少给药频率, 牙周袋内1w左右可逐渐缓慢释放盐酸米诺环素, 延长了药物作用时间, 减少全身给药毒副作用, 方便安全[1]。盐酸米诺环素还能抑制胶原酶的活性, 促进牙周膜细胞在牙根面的附着和增殖, 加快细胞附着与生长[2]。结果显示, 虽然两种药物局部治疗后, 患者的PLI、PD、SBI均出现了明显改善, 但盐酸米诺环素患者的PLI改善显著好于甲硝唑 (P<0.05) 。
综上所述, 盐酸米诺环素软膏局部治疗能够显著改善牙周炎患者的炎性状态, 效果优于甲硝唑。
参考文献
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