pcr实验室基本要求

pcr实验室基本要求（共8篇）

pcr实验室基本要求 篇1

PCR实验室基本要求

1、主体结构：

主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。

2、标准的三区分隔和气压调节：

将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和 PCR 扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换气。

3、消毒：

在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。

4、机械连锁不锈钢传递窗：

试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。

5、地面

地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好。便于进行清扫，耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面，或大块的瓷砖（至少800mm×800mm）接缝需要小于2mm。

6、照明

灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。标准的PCR实验室在建设的过程中应注意： ●规范的安装流程和全面的服务流程。●严格按照规范科学设计的安装流程。

●安装前需要确定以下安装条件，如：电源电压，电源进线位置，电话网络线进线位置，进水水压，最小安装空间，地面平整度，通风孔、进水管和下水管的位置等，理想状态的空间尺寸和通风口尺寸。PCR 实验室基本要求

2.1 PCR 实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域。只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室，有上述前面三个区域即可。各区域应完全独立分隔，不应有任何的空气直通。

2.2标准的PCR实验室产物分析区或三个区域的最后一个区域（即扩增及产物分析区），空气流向应由室外向室内，可通过在室内设置通风橱、排风扇或其他排风系统达到空气流由室外向室内流动的要求。

2.3 PCR实验室各区域仪器设备配备通常如下： 2.3.1标准的PCR实验室 试剂准备区: 仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等。可使用超净工作台作为试剂配制操作台面。2.3.2 标准的PCR实验室 标本制备区

仪器设备主要应有生物安全柜（最好为B2, 可避免提取核酸在柜内反复循环，造成标本间交叉“污染”，出现假阳性结果。此外还应配备加样器、台式高速离心机（冷冻及常温）、台式低速离心机、恒温设备（水浴和/或干浴仪）、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。

2.3.3 标准的PCR实验室 扩增区 主要仪器就是核酸扩增热循环仪（PCR仪，实时荧光或普通的）。热循环仪的电源应专用，并配备一个稳压电源或UPS，以防止由于电压的波动对扩增测定的影响。此外，根据工作需要，还可配备加样器、超净台等。2.3.4 标准的PCR实验室 产物分析区：

本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪（槽）、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪和洗板机等。

在理想情况下，PCR实验室试剂准备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间。在缓冲间内，可设置正压，使室内空气不流向室外，室外空气不流向室内。PCR实验室平面布置示意图

一般实验室间隔材料分:彩钢板,不锈钢板,理化板等,价格依次而上, 主要考虑不产尘,不滋菌,容易清理就行

一般实验室间隔材料分:彩钢板,不锈钢板,理化板等,价格依次而上, 主要考虑不产尘,不滋菌,容易清理就行

**卫生部PCR研究员李金明(卫生部临床检验中心临床免疫室主任,研究员)的PCR建设方案再说吧！国外的资料不一定是最好。个人觉得李金明的实验室区正压（扩增分析区因为没有缓冲，所以为负压），缓冲间负压的作法可以更好的防止气体的外泄及防止试剂准备区、标本制备区、产物扩增区、扩增分析区四区之间的气体相互渗漏。PCR实验室也可以分为三个区，即第三、四区合为一区，必须设立缓冲间。有条件建设实验室采用三十万级的标准来建设。空调系统采用制冷剂各区独立循环，可以防止气流交叉。**疾病预防控制中心实验室建设之PCR 实验室基本要求: PCR实验室可以是分散形式，也可以是组合形式。完成一组PCR实验，通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程，若实验工艺需要，还应增加样品粉碎过程。

pcr实验室基本要求 篇2

【关键词】初中化学    演示实验    基本方法    理解    记忆

加强并规范演示实验，发挥演示实验的教学功能，是每位化学教师应具备的素质。现来谈谈在演示实验教学中的五个基本要求和四个基本做法。

一、五个基本要求

（一）实验目的性要明确

教师对每个实验应该明确：1.这个演示实验要说明什么问题？2.要得到什么结论？3.培养学生哪方面实验技能？4.实验的重点难点，主要现象是什么？5.操作过程中应注意哪些问题？均应加以深思熟虑，做到心中有数。

（二）课前预习，准备齐全

课前要做好预习工作，对所以演示实验预做一至两次，即使认为简单的实验，也不能忽视。先做哪步，后做哪步，要一清二楚，有条不紊;对容易发生事故的实验，要特别注意，仔细考虑在何种情况下会发生危险，做好一切安全措施。在预做过程将用到的药品仪器及其他用具一一备齐。若准备不充分，就会有一样无一样，走进教室就让学生跑趟趟，从而影响教学效果。

（三）物品正确，排列有序

演示台上应把仪器药品按实验次序排列整齐，把准备给学生观察的主要部分尽量突出，面对学生，利于观察。同时，要养成整洁、用后放回原处的习惯。教师要以身作则，切不可将废酸、废碱等废物乱倒乱扔;若仪器、药品乱放，灯火不灭，瓶塞不盖，桌面不洁等等都会给学生造成不良影响。

（四）实验演示，操作规范

教师的一举一动都会成为学生独立操作的依据和榜样。因而，实验操作中怎样组装仪器装置，怎样取药品，如何加热等等都有规范。如我曾听一位年轻老师的公开课，内容是二氧化碳的实验室制法，我见这位老师手抓石灰石丢进试管中，险些把试管打破。这种操作草率、鲁莽，不利于学生规范操作能力的培养。

（五）保证成功，减少失误

演示实验的成功与失败，都会直接关系到学生正确掌握知识和正确概念的形成。因此对于教科书的演示实验，要千方百计努力做好，使学生通过感官形成印象和概念。一旦实验失败，必须认真分析原因，并在下一课及时补做。

二、四点做法

（一）精心设计演示实验，激发学生学习兴趣

在学习了浓硫酸性质一节后，我设计了“魔鬼点灯”实验。即在酒精灯灯芯上涂适量高锰酸钾，用玻璃棒蘸浓硫酸并接触灯芯上的高锰酸钾，几秒钟后，酒精灯燃了;在学了指示剂能使酸碱变色一节后，我设计了一个有趣实验，用酚酞在滤纸条上画一只猫，把滤纸放在浓氨水上方，小猫渐渐消失，学生津津有味地看后茫然不知所措，产生了好奇，迫切要求我讲解其奥妙，听我讲完后，学生们豁然开朗，露出笑颜。通过我精心设计的这些实验，学生们既掌握了化学知识，也激发了他们学习化学的兴趣。

（二）充分挖掘教材中的演示实验，培养学生的探究意识

教师不仅要善于利用演示实验中学生得到的感性材料，启发学生，使他们积极思维，大胆想象，还要设法挖掘教材中有利于探索与创新的因素，去改进或增设一些实验，让学生在教师的启发和指导下有更多机会去思考，激发他们的思维。如在讨论“燃烧的条件”时，我演示了白磷燃烧的实验，师生共同探讨，提出问题：为什么铁片上的白磷能燃烧而盛水烧杯中的白磷不能燃烧？学生你一言我一语，课堂气氛顿时活跃了起来。要使水中的白磷燃烧起来行吗？怎么办呢？有人说通空气，有人说制取氧气并用玻璃管把氧气导入烧杯底部与白磷接触。我对学生的回答给予充分的肯定。所以在实验中教师要引导学生开动脑筋，对实验进行合理设想和改进，这不仅培养学生学习化学的兴趣，也培养学生的探究意识。

（三）演示实验也要创新和改进

教材中有些实验要适当改进和创新，如教材中碳粉与氧化铜的反应现象不明显，不易做成功。若改为“用玻璃棒将氧化铜和水在表明器皿上调成糊状，用玻璃棒蘸取氧化铜糊伸入一支试管底部并在下侧涂一薄层氧化铜糊，干后撒上适量碳粉，再加热”，可见黑色粉末逐渐变红，尾气通入石灰水，石灰水变浑浊。改进后的实验现象更明显;又如氢气燃烧实验中，若点燃导氢气的玻璃管，会看到黄色火焰;若将玻璃换成铁管或石英管，可见氢气燃烧产生淡蓝色火焰，这才是氢气燃烧时的火焰颜色。

通过改进实验告诉学生一个道理，不迷信教材，不迷信权威，要敢于创新。凡是改进后的实验具有现象明显、效果好、安全、无污染、节约原料等特点，我们都要敢于大胆尝试。

（四）加强演示实验与习题的联系，促进学生对知识的理解和记忆

纯粹讲解习题，有的学生难掌握解题要领、步骤和方法。若在讲解题目时，辅助演示实验，这样不仅能增加学生的理性认识，也能增加学生的感性认识，促进学生对知识的理解和记忆。如配制一定质量分数的某种溶液，怎样配制？经学生分析、讨论后我再演示整个实验过程，从而使学生轻松愉快地掌握解题要领和方法。

总之，演示实验是激发学生学习兴趣的最有效手段。成功的演示实验不仅能给学生很深刻的印象，激发学生学习化学的兴趣，培养学生的观察能力和分析理解能力，有利于对化学知识的理解和记忆，还有助于培养学生的实事求是、严肃认真的科学态度和科学的学习方法。相反，演示实验的失误很可能挫伤学生的学习积极性和学习兴趣。因此掌握演示实验的操作和要领，充分挖掘演示实验的教学功能，是我们每位教师应具备的素质和能力。

【参考文献】

实验教学基本要求及规范 篇3

一、总则

第一条 为加强实验教学(含计算机上机课)工作的科学化、规范化管理，建立良好的实验教学秩序，不断提高教学水平，保证高素质创新人材的培养质量，特制定本规范。

第二条 实验教学是高等院校教学工作的重要组成部分，对构成学生合理的知识和智能结构，启迪学生严谨科学的思维方法，培养学生创新意识和实践能力具有重要作用。其主要任务是：运用实验手段对学生进行科学实验方法和技能的基本训练，使学生较为完整、系统地了解科学实验和工程技术实践的主要过程和基本方法，培养学生理论联系实际的学风和实事求是的科学态度，提高学生分析问题，解决问题和创新能力。

第三条 努力提高实验教学质量是实现人材培养目标的根本保障。实验教学必须不断吸收和引进科学发展和教学研究的最新成果，深化实验教学体系改革，优化实验内容和结构，增加综合性、设计性和创新性实验项目，扩大开放性实验教学的比例，建立科学、先进的实验课程教学体系，实行科学化、标准化和规范化的管理。

二、实验教学计划与实施

第四条 实验教学计划是专业培养计划的有机组成部分。各教学院应按专业培养计划的制订原则与要求来制定（修订）实验教学计划，教务处负责审定和管理。经教务处审定编印的各本科教学计划中所反映的实验教学计划，是学院相关实验教学中心（室）开展本学期实验教学活动的法定依据。

第五条 专业培养计划中的实验教学课程体系，要体现具有高素质创新精神和实践能力人才的培养需要。相同（近）学科的实验课程应进行重组和优化，组成实验课群，建立循序渐进的实验教学模式，形成完整、系统、科学的实验教学体系。实验教学计划要有实验教学的课程名称、学时、学分和开课时间等，以便实验课程的教学组织与安排。

第六条 独立性较强且学时较多的实验课应独立设课，每24学时实验课计1学分，最小学分单位0.5学分。教学实验项目根据所需学时一般按2学时为最小基本单位。

第七条 专业培养计划中设置的实验课程，都必须制定相应的实验教学大纲。实验教学大纲是进行实验教学的指导性文件，应明确规定：

1．本课程实验教学在专业人材培养中的作用；

2．本课程实验教学应达到的基本要求；

3．学生掌握的实验技术及基本技能；

4．实验项目的选定，包括实验项目名称，应达到的目的和要求，实验内容，实验类型，每组人数。

5．采用的教材或实验指导书；

6．实验教学质量的考核方法。

未独立开设的实验课，其实验教学大纲作为课程教学大纲的子大纲附于课程教学大纲之中。

第八条 实验教学大纲的制定（修订）由各分院、实验中心（室）组织人员制定（修订），并组织专家论证，经教务处批准后实施。实验指导教师要根据大纲制定出详实的指导计划（即授课计划），并相应写出实验指导教案。

第九条 基础或覆盖面大的技术基础实验中心（室），实验教学大纲应根据所承担课程在各专业培养计划中的作用，分大类或分层次提出不同的训练目的与要求。按照循序渐进的原则，多模块地组合实验题目，形成不同专业的实验内容体系。

第十条 实验项目要按层次设置：基本型实验教学（包括基本技术、基本方法和基本技能等）；提高型实验教学（包括综合性、设计性、应用性等实验）；研究创新型实验教学。各实验中心（室）应努力创造条件开设占计划总学时30%以上设计性和（或）综合性实验，逐步实现实验室的开放式教学。

第十一条 实验中心（室）必须建立建全实验项目卡片。实验项目卡片是实验教学的重要资料之一，是实验开出的基本依据。

第十二条 实验课程应根据实验教学大纲的要求，选用高质量的实验教材或实验指导书，也可根据课程自身特点和要求组织有丰富实验教学经验的教师和实验技术人员编写实验教材。实验教材的编写列入学校教材建设的范围，按照教材建设有关管理办法执行。实验教材或指导书基本内容应包括：实验目的、任务、原理、方法步骤和实验原理等。实验教材内容应与理论教学内容相结合，以适应当代科学与教育理论的发展趋势。

第十三条 实验教学应按计划执行，不得随意更改。实验项目的增减，实验内容和分组人数的变化，应由实验中心（室）开学初提出书面申请，经各分院主管领导审查同意后，报教务处审批。各实验中心要根据全院课程表编制实验课程表，并根据实验课表和教学计划编制出实验课程分组实验安排表，经系部同意后报实验主管部门备案。

三、实验教学过程与质量监控

第十四条 各分院、实验中心（室）应根据教学计划和（或）教务处下达的下学期实验教学任务书，于期末前具体落实教学任务。

第十五条 各分院、实验中心（室）应于每学期开学后两周内，将本单位本学期所承担的实验教学任务的详细安排，包括课程名称、实验项目名称、学时和学分、教学专业和班级、教学日历、课表与任课教师安排汇总报教务处。

第十六条 实验中心（室）应根据教学任务安排，认真准备和按时开出实验，保证实验教学质量。净化实验教学环境和教学场所是育人的需要。各实验室内部要布局合理，整洁卫生，配套设施（实验台、凳、黑板、器材、规章制度等）力求标准化和规范化，墙面无污损，通风设备完好，各项指标达到标准。

第十七条 实验中心（室）要加强管理，合理配置实验教学设施，及时维修仪器设备，提高设备完好率和利用率，保证教学需要，提高资源效益。实验设备应保证：基础实验课应达到一

人一组；技术基础课（含专业基础课）达到两人一组（特殊设备除外）；专业课达到开出实验的基本要求，原则上每组人数不应超过4人（特殊设备除外）。

第十八条 实验教学人员在实验教学中起主导作用。实验指导教师配备：原则上各类实验课15~18名学生配一名实验指导教师（特殊实验必须同时多名指导的除外）。

第十九条 学生要听从教师和实验技术人员的指导，严肃认真地进行实验，实事求是地做好实验记录，按要求写出实验报告。

第二十条 建立建全实验教学质量信息反馈和管理制度。每个教学实验室都要设置《实验教学日志》，实验指导教师和实验技术人员在实验结束后，必须如实记录实验准备、学生预习和实验教学进行情况，明确实验教学质量责任。定期组织专家对实验课教学质量进行听课检查，并认真填写《实验课听课表》；组织参加实验的学生进行问卷调查，由学生填写《实验课学生调查表》，对实验室和实验指导教师进行实验教学质量测评与监控。

四、实验教学人员资格与职责

第二十一条实验指导教师包括实验主讲和实验指导人员，任职资格为：

1．实验主讲人员应由副教授或高级实验师及其以上职称的有实验教学经验的人员担任，能够统筹、协调和指导实验指导人员各教学环节的工作。

2．实验指导人员可由具有高等学校教师资格的教师和专职实验技术人员担任。

3．首次上岗主讲或指导实验的教师与实验技术人员必须试讲和试做实验，提供教案、试作记录和实验报告等材料，分院、实验中心（室）考核合格后，方可独立指导实验。

4．实验教师任课须由本人提出申请，实验中心（室）选聘。

第二十二条实验指导教师职责：

1．努力贯彻执行党的教育方针，坚持教书育人，注意启发学生的思维和因材施教，注重素质教育和创新人材培养，以求实、严谨的科学态度完成实验教学任务。

2．要按教学大纲要求认真备课并写出实验教案。实验教案包括：实验的目的与要求，实验的原理或理论基础，实验的难点及易出现的错误，需要演示和规范基本操作，仪器设备出现异常和处理方法等。

3．实验前要与实验技术人员一起做好实验仪器设备、材料和教学资料的检查和准备工作，并进行预实验，确保实验教学顺利进行。

4．每班学生第一次上实验课前，负责宣讲实验守则和有关规章制度及注意事项，对学生进行安全、纪律教育。

5．提前一周将实验项目通知学生，并布置预习任务。实验前要检查学生实验预习报告，未预习或未达到预习效果者不准参加实验。

6．严密组织实验教学过程，实验中认真巡查学生操作情况，及时对学生进行引导与启发，认真考查学生的动手能力，实验态度和记录情况，进行必要的实验操作示范指导，检查学生的实验原始记录，要求学生完成规定的实验项目。学生实验的原始记录指导教师要有记载，以便批改

实验报告时进行核对。实验过程中实验教师不得擅离实验室或从事与实验指导无关的事情（如批改作业和实验报告等）。

7．实验结束后，组织学生搞好实验室整理和卫生工作，会同实验技术人员切断有关的电源、水源、气源，关好门窗，做好安全工作，认真并准确填写《实验室工作日志》。

8．认真批改实验报告，做好实验成绩的考核和登记，写出实验评语。批改和给出评语的实验报告要在一周内反馈给学生。不合格的实验报告退回重做；对抄袭他人者应予查处。

9．实验课程结束后，两周内将学生实验课成绩一式四份交实验中心（室）。

10．积极开展实验教学研究，更新陈旧实验项目、实验内容和实验方法，不断提高实验教学质量。

第二十三条实验技术人员职责：

1．积极参加实验中心（室）的建设和管理，认真完成实验中心（室）主任下达的各项工作任务。

2．掌握实验室的仪器、设备和相关实验的基本知识与操作方法，努力提高实验技术水平。

3．积极参加实验教学改革和教学研究工作，能够协助实验教师或独立完成学生实验技术、实验方法和仪器设备使用的指导工作。

4．实验技术人员要按照实验教学计划，按时完成实验前的各项准备工作（如药品、材料、试剂配制和仪器设备等的准备）。

5．实验过程中实验技术人员不能擅自离开岗位，要随时帮助学生解决实验过程中遇到的仪器设备、实验材料和试剂等实验用品出现的问题，保证实验的正常进行，并作好实验后的整理、检查和验收工作。

6．作好仪器设备维护、保养、送检、报修和一般修理工作，保证仪器设备处于良好的状态。

7．负责制定实验室仪器设备的操作规程和注意事项，并做成实验台卡片便于学生阅读。

8．做好实验室的仪器设备、配件、器材、低值易耗品、材料、说明书及图书资料的管理工作，作到帐、物、卡相符。对进实验室的学生要把责任落实到人（如实验用品、仪器、仪表、玻璃仪器、实验台、实验凳等均要编号，按实验组落实到每个学生）。负责损坏丢失赔偿的收缴工作。每学期结束后作好仪器设备、材料的清理和核对工作。

9．负责新进仪器设备的验收、安装、调试工作。及时建立仪器设备档案和编制仪器设备的信息管理软件，落实计算机管理制度。

10．负责实验室日常管理工作。学生实验后要与实验教师交接，检查值日生的工作情况，使环境清洁、物品摆放整齐；认真检查水、电、气是否关闭；及时与实验教师沟通并记好实验室工作日志，方可离开实验室。

11．努力完成实验中心（室）主任交给的实验技术管理和实验室开放管理工作。

12．填好实验技术人员工作日志，包括工作内容、安全、环境检查情况及中心建设情况等。

五、实验考核与成绩评定

第二十四条对学生的基本要求：

1．遵守实验室各项规章制度，尊重指导教师，服从安排，自觉维持实验教学秩序。

2．上实验课应提前预习，并写出预习报告，经实验教师或实验技术人员检查合格后，方准进行实验。

3．严格遵守操作规程，独立完成规定实验内容，仔细观察实验现象，认真做好实验记录。

4．按教师规定的时间和要求，完成实验报告交指导教师批改。实验报告内容一般包括：实验目的，简明实验原理，所用仪器设备及实验装置，实验现象及实验数据，实验结果解释与分析讨论。

第二十五条 实验课必须进行考核，学生实验成绩合格后，才能获得该课程学分。

1．单独设立的实验课考核按百分制或五级分制评分，考核内容应包括基本理论、实验原理和实验两部分。其考核成绩单独记载，考核不及格的实验课，必须重修，并在学籍处理时计入不及格课程门次总数。

2．不单独设课的实验考核成绩，根据实验学时在课程总学时所占比重分别按10%~40%的比例计入课程总成绩。实验成绩不合格者，不能参加课程考试，待补做合格后方能参加考试。

3．实验考核内容包括：1）实验预习；2）实验操作；3）实验记录；4）实验态度和表现：5）实验报告等。原则上根据上述五个方面进行综合评定。学生未取得1）~4)项成绩时，第5）项成绩无效。

4．实验中心（室）可根据课程要求和实验课程特点制定考核的具体实施办法，以确保实验教学质量。

第二十六条实验课不及格者应重修，并按重修课程的规定执行。实验课程不得申请免修。

六、实验课程建设与教学研究

第二十七条实验课程的建设应立足于实验课程内容体系的改革与创新，构建学生合理的知识能力结构，在掌握科学实验方法和技能的基础上，突出综合运用理论知识分析、解决问题的能力和创新思维能力的培养，达到人才培养总目标的要求。

教学分院、实验中心（室）实验课程建设应包含以下内容：

1． 改革与创新实验课程结构体系；

2． 设置与更新实验项目，适当反映本学科的新知识和新成就；

3． 编制和修订符合教学要求，形式规范的实验教学大纲；

4． 编写具有鲜明特色的实验教材或实验指导书；

5． 改革与创新实验教学方法，广泛应用现代化教学手段；

6． 检查和监控实验课程教学质量；

7． 规划和建设实验仪器设备、教学场所等硬件设施；

8． 建立计算机管理数据库、基本信息计算机管理和网络系统，实现管理规范化和现代化；

9． 健全各项具有可操作性的管理制度；

10． 编制可持续发展的长远规划和计划及课程建设总结。

第二十八条实验中心（室）应加强档案管理，建立健全实验教学档案。实验教学档案资料包括：

1． 实验教学计划（包括变动情况）；

2． 历年教学任务安排表和课表；

3． 历年实验教学日历；

4． 历年实验教师和实验技术人员情况统计；

5． 实验教材或实验指导书；

6． 实验项目卡片；

7． 实验试作、试讲记录与教案；

8． 实验设备改造及实验内容、教学方法更新和改革情况；

9． 实验教学检查和课程建设总结；

10．近三年来实验指导教师实验课记分册、学生成绩单和有代表性的实验报告，实验指导教

师部分典型的实验教案。

第二十九条各分院、实验中心（室）要重视和开展实验教学研究，组织实验教师和实验技术人员对实验课程体系与实验教学模式、实验教学方法、实验室管理和运行机制、教学实验仪器设备的研制与开发等进行研究与探索，积极参与教学研究课题的立项、研究成果的鉴定和在实验教学中的应用。

第三十条计算机上机课：

1、无论课内上机还是单独设置的上机课，都要保证上机课时，按授课计划严格执行。

2、上机课教师要有指导书和授课教案，在指导上机课班级多需分机房上课时，每个机房教研室都要按排指导教师，不得一个教师同时指导多个机房的上机课。

3、上机课中指导教师不得擅离指导机房或从事与上机指导无关的事情。

2004年3月1日制定

pcr实验室基本要求 篇4

（试行稿）

1、明德实验学校总校长是明德实验学校第一安全负责人，督查全校安全工作；谭文静园长是幼儿园第一安全责任人，督查全园安全工作。

2、领导值班：早上到校时间为宿舍楼开门（6:20）前，离校时间为熄灯后10分钟，中间不能离校；及时开关宿舍楼大门，巡查宿舍安全；巡视校园安全，督查维持校园、教学楼、餐厅、宿舍纪律；发现隐患及时采取防范措施，遇紧急情况，迅速组织疏散；认真填写《安全巡查日志》，督查其他值班人员填写其它记录；负责当日学校日常工作，及时处理当日突发事件。

3、班主任是学生安全第一责任人，应始终监视学生的一举一动；学生打扫卫生、室外自由活动期间、学生就餐期间对学生安全负全责；经常巡视、检查教室及本班其他责任区，发现安全隐患及时采取防护措施并上报；对未到宿舍学生或生病学生，写好《请假条》或《生病学生通知单》；及时填写《安全巡查日志》。

4、全体上课教师：上早读老师在学生到教室前（6:20）到教室，幼儿园老师按幼儿园规定时间到，及时清点学生人数，有情况及时处理；上课期间对学生安全负全责，特别是体育教师更要加倍注意；室外集体活动期间、学生就餐期间对自己带领的学生的安全负全责。

5、门卫：24小时值班，及时开关大门，确保门开必有人看；严格按规定管理家长、学生、教职工出入，严禁非本校人员无手续进入；协助值班领导安排、疏通门前车辆；打扫大门内外卫生；及时打扫卫生间，清理垃圾池。

6、食堂操作间：负责学校食品安全与卫生防疫工作，确保学校食品及饮用水安全；及时认真填写台账，食品按要求留样；负责督促落实食品安全管理与疾病防控措施。

7、财务、后勤部：加强现金、印章、空白支票的保管和使用安全；为学校安全及时提供后勤保障；经常检查仓库，确保物品安全存放。

8、生活老师：经常排查宿舍安全隐患，如：检查床位扶手是否牢固，电线是否破损漏电，灯炮、水笼头是否损坏，检查寝室内有无管制刀具、棍棒、火源易燃易爆等危险物品，检查消防设施是否完善，消防通道是否畅通，检查楼房建筑有无不正常现象，发现隐患及时防范；随时观察学生身体、心理、情绪等是否有异常，及时处理；学生就餐期间对自己带领的学生的安全负责；随时检查公私财物，确保不丢失、不人为损坏。

9、安全部：协助总校长，带领其他领导，随时督查各项安全日常工作；落实《安全考核奖惩办法》，评估打分；及时做好总结反思。

10、交接班要求：（1）教师送学生进宿舍期间，若学生未进宿舍发生事故，由送学生老师承担；若学生进宿舍后再出来，发生事故，由生活老师承担。生活老师送学生进教室期间，若未进教室发生事故，由生活老师承担；若学生进教室后再出来，发生事故，由值班教师承担。（2）若期间当日值班领导有不尽职现象，再按规定另处罚值班领导。（3）课间相接：下课后5分钟为交接时间，教室内不能出现空岗。领导值班等其他交接班也不能出现空岗。

11、学校安排的其他日常安全事务。

明德实验学校

PCR实验室说明 篇5

PCR实验室分为四个区域，进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出，四区域分别为： 1.试剂配制区n 2.样品处理区n 3.核酸扩增区n 4.产物分析区n 如使用全自动分析仪，区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。

各区的功能是： 1.1.1 试剂准备区：扩增试剂的配制、分装和保存。1.1.2 样品处理区：样品登记、分装；核酸提取、保存和加样。1.1.3 扩增产物分析区：扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。1.2 扩增前区与扩增后区应严格分开，须使用不同的房间，两区之间最好有一定的间隔。1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。1.4 在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内： 1.4.1 在生物安全柜内操作。1.4.2 每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。1.4.4 用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。设计要求：

PCR实验室可以是分散形式，也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。完成一组PCR实验，通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程，若实验工艺需要，还应增加样品粉碎过程。

一、分散形式PCR实验室 所谓分散形式PCR实验室，是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远，呈分散布置形式。对于这种布置形式的PCR实验室，由于各个实验之间不易相互干扰，因此无需特殊条件要求。

二、组合形式PCR实验室 所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置，组成独立实验区域的形式。对于组合形式PCR实验室，由于各个实验间集中布置，容易造成相互干扰，因此，对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间，以减少室内外空气交换。

试剂配制室及样品处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。

核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品，可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。

在理想情况下，PCR实验室缓冲间内，可设置正压，使室内空气不流向室外，室外空气不流向室内。

PCR实验室进风由原有中央空调控制，要求将中央空调风口安装到指定定点，且高度为地面铺装好后2600mm处。

如果使用荧光PCR仪，扩增室和产物分析室可以合并。

若房间进深允许，可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面，缓冲间比专用走廊更有意义。各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好；所有阴角宜采用圆弧形线条过渡；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

如果使用荧光PCR仪，扩增室和产物分析室可以合并。

若房间进深允许，可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面，缓冲间比专用走廊更有意义。各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好；所有阴角宜采用圆弧形线条过渡；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。主要设备试剂准备区 仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等，加样器、天平除了要专用外，还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进行 扩增反应混合液应使用分子生物学级的，试剂制备好后应有质检：一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。标本制备区 仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等

扩增区 扩增区的主要仪器是核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯。扩增仪需进行校准。并配备UPS电源，以防止由于电压的波动，停电对扩增效果的影响。分析区 本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等

洁净实验区的缓冲间部分面积不能超过主实验室的八分之一,这是有规定的.1、主体结构： 主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。

2、标准的四区分隔和气压调节： 将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增，产物分析四个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。可打开缓冲区Ⅰ，缓冲区Ⅱ和 PCR 扩增区的排风扇往外排气，在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口，空气通过回风口向室内换气。

3、消毒： 在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯，供消毒用。在试剂准备区和标本制备区 还设置移动紫外线灯，对实验桌进行局部消毒。

4、不锈钢传递窗： 试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。

5、地面 地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面，整体性好。便于进行清扫，耐腐蚀。

6、照明 灯具要选用净化灯具，能达到便于清洗、不积尘的特点。在建设的过程中应注意： ●规范的安装流程和全面的服务流程。●严格按照规范科学设计的安装流程。●安装前需要确定以下安装条件，如：电源电压，电源进线位置，电话网络线进线位置，进水水压，最小安装空间，地面平整度，通风孔、进水管和下水管的位置等，理想状态的空间尺寸 样本处理区

三、工作区域及设备要求

（一）试剂储存和准备区 1、2-8C和-15C冰箱

2、混匀器

3、微量加样器（覆盖1-1000ul）

4、移动紫外灯（近工作台面）

5、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）

6、专用工作服和工作鞋

7、专用办公用品

（二）标本制备区 1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱

2、高速台式冷冻离心机

3、混允器

4、水浴箱或加热模块

5、微量加样器（覆盖1-1000ul）

6、可移动紫外灯（近工作台面）

7、生物安全柜

8、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）

9、专用工作服和工作鞋

10、专用办公用品 如需处理大分子DNA，应具有超声波水浴仪。

（三）扩增反应混合物配制和扩增区

1、核酸扩增仪

2、微量加样器（覆盖1-1000ul）

3、可移动紫外灯（近工作台面）

4、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心）

5、专用工作服和工作鞋

6、专用办公用品(四)扩增产物分析区 视检验方法不同而定。基本仪器设备如下：

1、微量加样器（覆盖1-1000ul）

2、可移动紫外灯（近工作台面）

3、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头（带滤心）

4、专用工作服和工作鞋

5、专用办公用品 5.人员和样品的安全是由生物安全柜和定向气流共同来保证。PCR实验室设计规程中规定人员和样品必须单向流动。即从 “试剂准备区到样品制备区，再从样品制备走向扩增区和产物分析区”，绝对不能反向流动，以辟免交叉污染。气流方向只规定试剂准备区为微正压或常压，样品制备区为常压或负压，扩增区和产物分析区为负压，压力梯度是从试剂准备到产物分析区，是高到低的。规程并没有规定要做成全新风系统，但是为降低交叉污染的风险，建议做成全新风系统。概述 临床基因扩增实验又称PCR实验，是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法，测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点，因此被临床医生广为认可，已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。但是，这种实验需要有能保证绝对安全、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。近年来对临床基因扩增检验实验室的建设越来越得到重视，因为它对检测结果的可靠性、准确性和安全性起到至关重要的作用。本文主要从临床基因扩增检验实验室的平面布局，空调通风系统设计、气流控制和污染的防制几个方面对 实验室设计中的主要特点进行了阐述。临床基因扩增检验实验室设计的核心问题是如何避免污染。因此，实验室的平面布局、空调通风系统设计、气流控制等都是围绕这个核心问题进行的。下面就对这几个方面分别进说明。2 PCR实验室平面布局 临床基因扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。PCR实验室平面布置示意图如图1所示。图1 PCR实验室平面布置示意图 3 实验室空调通风系统设计及压力控制 PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。3.1 试剂贮存和准备区 该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的控制，本区并没有严格的要求。3.2 标本制备区 该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。3.3 扩增反应混合物配制和扩增区 该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区内进行。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。3.4 扩增产物分析区 该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测，此区域可不设。本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。4 污染的预防与控制 PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中，常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染；天然基因组DNA的污染；试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染，实验就必须停止，直到找到污染源为止，而且实验结果必须作废，需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐，浪费人力物力。因此要避免污染，首先应是预防，而不是排除。4.1 工作区域的严格划分（1）各个实验区域设置合理；（2）各个实验区域要有明显的标记（如醒目的门牌或不同的地面颜色等），以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆。4.2 合理的系统设置（1）合理的空调通风系统设置，尽量采用全送全排的空调系统；（2）严格的气流压力控制，保证不同的实验区内不同的压力要求。4.3 规范的操作（1）临床基因扩增检验实验室的技术人员必须进行上岗培训，经培训合格后才能从事临床基因扩增检验的工作；（2）在实验操作过程中，操作者必须戴手套，并经常更换。此外，操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施；（3）清洁工作及时、正确。实验工作结束后，必须立即对本区进行清洁。除常规的消毒液体对表面进行擦拭消毒或紫外线灯的照射消毒外，对一些实验设备还应进行高压消毒处理。4.4 严格的管理（1）严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进出实验室，有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门；（2）在各个实验区域使用带有明显区别标志的工作服（如不同颜色），当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域；（3）尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。（4）扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源，废液不能在实验室中倾倒，必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉，用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理，如焚烧等；（5）扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护。4.5 完备的实验室配套设施 完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件，应根据各个实验室实验内容的不同配备相应的设备和仪器，如超净工作台、离心机、加样器等。

PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。3.1 试剂贮存和准备区 该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的控制，本区并没有严格的要求。3.2 标本制备区 该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。3.3 扩增反应混合物配制和扩增区 该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区内进行。本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。3.4 扩增产物分析区 该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测，此区域可不设。本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。4.0传递窗口的尺寸：

数学教师课堂语言的基本要求 篇6

课堂教学语言是教师在课堂教学中向学生传递信息的最主要的手段。从某种意义上说，教育教学就是通过语言造就人才。著名教育家苏霍姆林斯基说：“教师的语言修养在极大程度上决定着学生在课堂上的脑力劳动的效率。”因此，教师应该掌握课堂教学语言艺术。

一、教学语言要积极健康富有思想性

“语言是思想的直接现实”，因此教师语言艺术的第一个基本要求就是思想性要求。思想性要求是指教师的语言应具有丰富的思想内容，对学生起到思想教育的作用。课堂教学是学校教育教学的主要环节。因此，教师必须寓思想教育与知识传授之中。

例如，一位教师在教学“年、月、日”这节课时，进行了这样的课堂小结：同学们，这一节课你们学会了这么多的知识，真了不起!老师想给你们猜一个古老的谜语：“最长又最短，最多又最少，最慢又最快，最便宜又最宝贵的是什么?”学生异口同声的说：“是时间”。教师追问一句：“既然时间这么宝贵，那我们应该怎样对待时间呢?”学生兴奋地说：“珍惜时间。”教师宣布：“下课。”这节课学生既认识了时间单位及它们的进率，启迪了思维，又受到了珍惜时间的思想教育。

二、教学语言要真实准确富有科学性

准确科学是数学教师语言的基本准则。教学用语的准确性很重要的一个方面是体现在概念的教学中。每个概念都有其确定的内涵和外延，每个定理、法则、公式都有条件制约其结论。教师首先要对概念的实质和术语的含义有个透彻的了解。在课堂教学中向学生传播这些知识时，要求语言必须准确无误，来不得半点儿含糊。很多数学概念往往是一字之差，便有不同的含义。如“数”与“数字”，有时我们习惯说诸如“26这个数字”，这是不准确的，因为在阿拉伯数字中只有0~9这10个数字，26是一个数而不是一个数字。再如“增加”与“增加到”“数位”与“位数”“除”与“除以”等。数学教师的语言应“像敲钉子——声声入耳”。如果使用不准确的语言，就会使学生概念模糊，导致判断上的错误。

例如，在教学“三角形的初步认识”时，教师对三角形下定义，说：“由三条边搭的图形是三角形。”这是不准确的，因此在判断下列图形（图1）是不是三角形时，学生则把两组图形都认为是三角形，其原因就是三条边组成的图形可能是三条不相交的直线。而“由三条边围成的图形是三角形”则是准确的，“围成”说明是首尾相连，没有空隙的，教师应该让学生在理解的基础上，让学生说得更准确，理解得更深刻。

图1

三、教学语言要符合客观规律富有逻辑性

可以毫不夸张地说，离开逻辑的数学语言，数学就成了一大堆缺乏生机的数字、字母与符号的堆砌，数学的理论魅力也随之荡然无存。有逻辑的教学语言可以使讲解新课、定理论证以及纠正学生所犯的逻辑错误时具有更大的说服力，所以教师的教学语言必须具备一定的逻辑修养。数学是一门逻辑性很强的科学。教师的课堂语言是否严密，直接影响到学生对数学概念的理解和掌握，从而影响到对教学的判断、推理及解答实际问题的能力。因此教师应注意课堂语言的严密逻辑性。例如，有些教师说：“要求什么问题，就必须知道什么条件。”“要求三角形面积，就必须知道三角形的底和高；要求圆锥的体积，就必须知道它的底面积和高。”这样的说法当然不妥，因为求三角形的面积有时也可以不必找它的底和高。教师只能在不脱离公式的情况下说：“要利用公式求三角形面积，需要知道底和高。”这样，语言逻辑才严密。

四、教学语言幽默风趣、比喻恰当富有趣味性

同是数学课，为什么有些教师的教学让学生感到枯燥、生涩、味同嚼蜡，而有的却让学生感到有趣、生动，如食甘饴呢?究其原因，很大程度上与教师的教学语言技巧有密切关系。有些教师在课堂上只注意到数学语言的科学性，而忽视了数学语言技巧的运用。教师要善于运用自己巧妙、机智的语言来纠正、鼓励学生的回答，注意情绪导向，其实有很多带感情色彩的用语可以信手拈来，如：“今天你的表现真出色，只是说得还不够全面，我请其他同学帮你补充，好吗?”“你的说法不太确切，你若能换个说法，相信你一定能表达出来，愿意再试试吗?”类似以上这种亲切的话语既保护了学生的自尊心与积极性，同时又能积极引导学生进行深入思考，及时修正自己的错误，使整个课堂显示出和谐融洽的氛围。

教师的课堂语言艺术多种多样，远不止以上几点，语言艺术既体现了教师的教学能力，又和教学效果的好坏紧密相联，作为教师，要讲究教学语言艺术，善于运用语言技巧，使学生透过教师高超的语言艺术，探知到教师思维的过程，学习到思考问题的方法，从中体验到思维过程中的快乐，从而提高教学效果。◆（作者单位：江西省宜春市教育局教研室）

PCR室实验室污染分析流程 篇7

一、试剂污染：

1、排除方法

1）重新取用新的试剂盒进行检测，考虑当天用试剂盒污染。2）重新进新批次试剂盒进行检测，考虑本批次试剂污染。

3）换用其他医院用试剂盒进行检测，考虑本实验室试剂保存不当污染。

2、整改措施

1)若当天使用试剂污染，则查询污染原因，并采取相应措施消除污染影响，并重新取用新的试剂进行检测。

2）若本批次试剂污染，则除查找实验室试剂库房可能导致污染的原因，并与厂家联系，溯源污染原因并及时更换试剂，进行检测。

二、操作污染

1、排除方法

1）调换操作人员进行检测。2）评价操作人操作是否规范化。

3）使用耗材是否无菌，更换手套、枪头是否及时。微量管开盖、闭盖是否规范。4）加样枪操作是否规范到位。

2、整改措施

1）加强操作技能培训。

2）加强学习人员操作技能考核。

三、实验室及耗材污染

1、排除方法

1）更换实验室对同一批标本进行检测。

2）采用反应管，一支开盖放置30-60min，另一只闭盖，然后同时作为反应用管加入反应液进行扩增检测。

3）使用棉签蘸取生理盐水后，擦涂房间内把手、台面、设备表面、加样枪末端等处，作为样本进行检测。

4）检测消毒用酒精、巴士消毒液、次氯酸钠等有效性。5）检测室内或生物安全柜内紫外灯管效能。6）更换规范灭菌后耗材进行检测。

2、整改措施

1）各实验室分区日常清洁工作按照要求进行，各区用品清洁用抹布、拖把不可以混用。

2）及时更换紫外灯管。

3）定时对实验用金属浴或水浴箱进行消毒处理。4）定期浸泡实验用试管架及标本存放盘。5）按照规定进行实验室内消毒工作。

pcr实验室基本要求 篇8

PCR检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的DNA或RNA的检验实验室。聚合酶链反应（PCR）是一种在体外特异性扩增靶DNA序列的技术，其基本过程为模板双链DNA的变性、引物与模板DNA的退火和在DNA 聚合酶引导下的链延伸反应三个阶段的多次循环。每一次循环后的扩增产物均可作为下一轮循环的模板，理论上，扩增产物量呈指数形式上升，即经过n个循环后，产物量增加到2n倍。PCR操作简单，短时间内在体外可获得数百万个特异靶DNA序列的拷贝，为临床疾病的诊断、治疗监测和预后评估提供了一种极有帮助的实验室辅助手段。

PCR检验实验室是PCR试剂的生产企业在产品检验过程中不可缺少的工作环境，其环境控制水平和质量管理水平直接影响着最终产品的是否合格，能否放行。由于该产品本身的特殊性，《医疗器械生产质量管理规范附录体外诊断试剂》和《医疗器械生产质量管理规范体外诊断试剂现场检查指导原则》的条款中，明确对PCR试剂的生产和检验环境做出规定。本检查指南旨在帮助北京市医疗器械监管人员增强对PCR检验相关过程的认知和把握，指导全市医疗器械监管人员对PCR检验实验室设计建设与质量控制的监督检查工作。同时，为PCR类体外诊断试剂产品生产企业在PCR检验实验室的设计建造和管理要求提供参考。

本检查指南主要以现行医疗器械和卫生行业的法规、标准以及相关文献中对于PCR检验实验室的规定为基础，尤其是以《全国临床检验规程》（第三版）的相关要求为主，部分借鉴了《医疗机构临床基因扩增管理办法》（卫办医政发〔2010〕194号）、《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》、《临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用》（WS/T 230-2002）等行业标准的相关要求，旨在帮助北京市医疗器械监管人员增强对PCR检验实验室的认知和掌握，同时为体外诊断试剂生产企业开展PCR检验实验室管理活动提供参考。

当国家相关法规、标准、检查要求发生变化时，应当重新讨论以确保本检查指南持续符合要求。

一、适用范围

本检查指南可作为北京市食品药品监督管理局组织、实施的体外诊断试剂产品注册质量管理体系现场核查、《医疗器械生产许可证》现场核查、医疗器械生产监督检查等各项涉及PCR检验实验室检查的参考资料。

基因测序检验实验室等涉及PCR实验的相关部分应当参照本检查指南执行。

二、检查要点及流程

以下检查要点的表述主要分为对现场情况和文件资料的检查两部分，但在实际检查过程中应当特别注意现场查看、询问、记录的情况与企业的规定、文件、记录的符合性。

（一）现场查看企业PCR检验实验室布局

企业应当提供PCR实验室设计方案和/或平面设计图（应当标明风向或压差梯度）。

1.PCR检验实验室与PCR产品生产区域应当在各自独立的建筑物或

空间内，保证空气不直接连通，防止扩增时形成的气溶胶造成交叉污染。

2.原则上PCR检验实验室应当设臵以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。

若使用实时荧光定量PCR仪且不需要进行后续产物分析工作，扩增区、扩增产物分析区可合并。若使用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。

3.各区域在物理空间上应当完全相互独立，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态。不应只是形式上的分区，不应一个区域嵌套一个区域。

4.各区域不应有空气的直接相通。扩增区与扩增产物分析区各区域宜采用独立直排方式出风。

采用空调机组方式的，PCR实验室应当具备独立空调机组；同时应当考虑停机后各房间空气连通的可能性，采取必要的控制措施。

5.按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向空气压力应当以递减的方式进行，使得PCR检验实验室的空气流向应当按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。

空气流向应当为单向，禁止下游污染上游。应当设臵合理的压差梯度，并安装压差监测装臵，以有效证明空气流向，压差梯度不宜低于5帕。

6.设臵缓冲间的，缓冲间内通向内实验室和走廊的门应当安装连锁装臵或采取相应措施，避免出现两个门同时打开的情况。

7.各区间若设臵传递窗，应当为双侧开门，要求密封严实，并且两侧的门应当为互锁装臵或采取相应措施保证两侧门不会同时开启。

（二）现场查看各区仪器设施配臵

1.试剂储存和准备区的功能：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。配套用品一般应当包括：

（1）2℃～8℃和-20℃以下冰箱。（2）混匀器。（3）微量加样器。（4）紫外消毒设备。

（5）消耗品：一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头。（6）专用工作服和工作鞋(套)。（7）专用办公用品。

2.标本制备区的功能：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及加样。配 套用品一般应当包括：（1）2-8℃冰箱、-20℃以下冰箱。（2）高速离心机。（3）混匀器。

（4）水浴箱或加热模块。（5）微量加样器。（6）紫外消毒设备。（7）生物安全柜。

（8）消耗品：一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带 滤芯）。

（9）专用工作服和工作鞋(套)。（10）专用办公用品。

（11）如需处理大分子DNA，应当具有超声波仪。

3.扩增区的功能：cDNA合成、DNA扩增及检测。配套用品一般应当包括：

（1）核酸扩增仪。（2）微量加样器。（3）紫外消毒设备。

（4）消耗品：一次性手套、一次性帽子、耐高压处理的离心管和 加样器吸头（带滤芯）。（5）专用工作服和工作鞋。（6）专用办公用品。

4.扩增产物分析区的功能：扩增片段的进一步分析测定。视检验 方法不同而定，基本配臵如下：（1）微量加样器。（2）紫外消毒设备。

（3）消耗品：一次性手套、一次性帽子、加样器吸头（带滤芯）。（4）专用工作服和工作鞋。（5）专用办公用品。5.设备的维护保养

应当建立设备维护保养规程，计量设备应当定期检定。例如核酸扩增仪、微量加样器、生物安全柜、离心机应当每年进行检定或校准工作。

（三）检查工作流程及注意事项

1.进入各工作区域应当严格按照单一方向进行，即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区。

2.各工作区域必须有明确的标记，不同工作区域内的设备、物品不得混用。

3.不同工作区域的工作服应当加以区分，不得混用（例如可以采用不同颜色）。工作人员离开各工作区域时，不得将本区域工作服带出。

4.实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应当有其各自的清洁用具并防止交叉污染。实验垃圾属于医疗废物的应当按《医疗废物管理条例》相关规定进行处理。

5.工作结束后，应当立即对工作区进行清洁及消毒。6.贮存试剂和用于标本制备的消耗品等材料应当直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过扩增检测区。

试剂盒中的阳性对照品及质控品应当保存在标本处理区。试剂应当使用分子生物学级别试剂，使用的纯化水应当高压灭菌。质检用于原辅料、半成品、成品检验用的PCR反应试剂应当有相应的质量标准及操作程序。

7.为避免样本间的交叉污染，加入待测核酸后，应当盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在传染危险性的材料，应当在生物安全柜内开盖，并有明确的样本处理和灭活程序。

8.应当避免气溶胶所致的污染，尽量减少在扩增区内的走动，扩增反应管不得在扩增区打开。

9.扩增产物分析区有可能存在某些可致基因突变和有毒物质如溴化乙锭、丙烯酰胺、甲醛或放射性核素等，应当注意实验人员的安全防护。

（四）检查人员培训情况

参与PCR检验工作人员应当具备相应的专业知识和技能，包括能熟练操作相关设备,明确整个工作的流程,掌握出现污染情况的处理方法以及实验室质量控制方法和检测结果的解释。

检查员可以通过询问或要求企业实际操作的方式对其进行评价，也可以通过查阅生产企业的培训记录的适宜性和完整性对其进行综合评价。

附件：理想的PCR检验实验室设计 图A 缓冲间为负压的理想PCR实验室设臵模式

图B 缓冲间为正压的理想PCR实验室设臵模式