蛋白尿方

蛋白尿方（精选6篇）

蛋白尿方 篇1

在临床中,慢性肾炎又称为慢性肾小球肾炎,该病属于一种原发性肾小球疾病[1]。从西医角度上看,慢性肾炎疾病的主要原因是肾小球功能受损,该病具有病因复杂、发展缓慢、病情严重等特点,主要导致患者出现蛋白尿、血尿、高血压及水肿等症状,严重者出现慢性肾衰竭而威胁生命健康[2]。从中医角度上看,慢性肾炎疾病的发病原因是肺、脾、肾等内脏器官功能出现障碍而导致的气、血、精、阴阳亏损[3]。据相关文献报道,中西医结合方法治疗慢性肾炎疾病具有较好的治疗效果。临床中用于治疗慢性肾炎疾病的常规西医治疗药物是科素亚。该研究选取2010年1月—2014年3月该院收治的72例患者为研究对象,比较了常规科素亚药物及蛋白尿方联合科素亚药物对于慢性肾炎疾病的治疗效果。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该研究中72例慢性肾炎患者的病例选用时间是在2010年1月一2014年3月。72例慢性肾炎患者中,男性39例,女性33例,年龄介于21～67岁之间,平均年龄为(44.24±3.65)岁,病程介于0.25～8年,平均为(3.82±1.25)年。所有患者均伴有不同程度的蛋白尿、血尿、高血压及水肿状等症状入我院检查、治疗,经尿化验检查结合症状及病史,发现检查结果出现异常(蛋白尿、血尿、管型尿)、水肿及高血压病史达一年以上,无论有无肾功能损害均应考虑此病,在排除继发性肾小球肾炎及遗传性肾小球肾炎后,临床上可诊断为慢性肾炎。

1.2 方法

将72例慢性肾炎患者随机分为A、B两组,各患者在性别、年龄及患病时间中比较时,P>0.05,因此患者之间具有可比性。每组患者的例数为36例。A组慢性肾炎患者在住院治疗期间利用常规科素亚药物治疗,50 g/次、1次/d;B组患者则选用蛋白尿方与科素亚药物联合治疗方法,科素亚剂量与A组相同,蛋白尿方200 mL/次,蛋白尿组方:黄芪25 g、米仁根25 g、炒白术25 g、徐长卿25 g、水蛭粉4 g、雪草20 g、匍伏20g、蓳各20 g、防风5 g、鬼箭羽25 g;根据患者症状加减。水肿病情重的患者需加入桑白皮和玉米须;白茅根和芦根可改善血尿情况。在治疗期间针对两组慢性肾炎患者进行常规药物指导、运动指导及饮食方面的指导(低蛋白饮食)并有效控制患者的血压、血脂,避免发生贫血等。两组患者治疗一个月后,比较慢性肾炎患者经不同方法治疗前、后的疾病评价指导及病情好转情况等,进而分析两组治疗方法对慢性肾炎疾病的治疗效果。

1.3 疗效判定

显效:治疗后的尿蛋白检查结果较治疗前少2个“+”或一天尿蛋白定量降低量超过40%,尿检中红细胞较少2个“+”或红细胞计数降低量超过40%,肾功能检查结果基本正常;有效:治疗后的尿蛋白检查结果较治疗前少1个“+”或一天尿蛋白定量降低量小于40%,尿检中红细胞较少1个“+”或红细胞计数降低量小于40%,肾功能检查结果明显好转或基本处于正常范围;无效:患者治疗后的尿检、肾功能检查结果未见好转。有效率=(显效+有效)/总数X100%。

1.4 统计方法

研究中的数据统计软件选用SPSS 17.0,其中计量资料采用的统计方法是t检验,计数资料采用的统计方法是c2检验,数据结果比较时具有明显差异时,且P<0.05,则该文研究得出数据具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗后的疾病评价指标比较结果

A组慢性肾炎患者在住院治疗期间利用常规科素亚药物疗方法,B组患者则选用蛋白尿方与科素亚药物联合治疗方法,在此期间针对慢性肾炎患者进行常规药物、运动及饮食方面的指导,治疗一个月后,比较慢性肾炎患者经不同方法治疗前、后的疾病评价指标,具体见表1。

结果得出,两组患者经治疗一个月后的24 h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐等评价肾功能的指标均明显低于治疗前,且B组患者经蛋白尿方联合科素亚药物治疗后的各指标数值均显著低于A组常规科素亚药物治疗,差异具有统计学意义,P<0.05,

2.2比较两组患者的病情好转情况

因此得出,两组慢性肾炎患者经不同方法治疗后的病情好转率比较时,B组优于A组,差异具有统计学意义(P<0.05),见表2。

3 讨论

从西医治疗角度讲,慢性肾炎疾病的发病机制包括有免疫系统异常导致的肾小球损伤、炎症反应、肾脏损害加重肾小球损伤等,由于其病因复杂,因此在疾病治疗上存在一定的难度[4,5,6]。其治疗目的主要是防止或延缓肾功能恶化、防治严重合并症、保护和维持肾功能,避免或减少药物不良反应,治疗关键是方法上科学合理、时间上长期坚持。从中医治疗角度讲,慢性肾炎的病因与肺、脾、肾等多种内脏器官功能有关,主要治疗目的是活血化瘀、流通血脉、消除炎症、祛除瘀滞[7]。常规的单一西医治疗方法可有效改善慢性肾病患者的血流变化情况,进而改善病情、延缓疾病,但无法从根本上缓解肾脏的损伤。而中医治疗方法则可有效改善患者的肾脏功能、提高患者的免疫力等,因此有助于慢性肾炎患者的脏器功能修复[8]。

注:一天尿蛋白定量(g)治疗后B组与A组对比,t=-4.421,P=0.012<0.05.尿素氮。(mmol/l)治疗后B组与A组对比,t=-5.312,P=0.002<0.05;血肌酐治疗后B组与A组对比,t=-4.648,P=0.0014<0.05.治疗前3个指标B组与A组对比,差异无统计学意义。

常规用于治疗慢性肾炎的药物是科素亚。科素亚属于血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂,该药物具有24 h强效降压、长期平稳降压、改善血压昼夜节律、以及心血管及肾脏保护作用,安全性高等特点,可有效降低血压及蛋白尿,减少心血管风险,延缓终末期肾病[9]。近年来,随着对慢性肾炎疾病的深入研究,临床中逐渐发现蛋白尿方药物。蛋白尿方属于中药方,内含有黄芪、米仁根、炒白术、徐长卿、水蛭粉、雪草、匍伏、蓳各、防风、鬼箭羽等多种成分,还可根据患者症状的轻重改变其成分的定量或加入桑白皮、玉米须、白茅根、芦根等药物;该药方可起到活血化瘀、流通血脉、保护肺、脾、肾等内脏功能以及提高患者免疫力的作用[10]。当中药蛋白尿方与西药科素亚联合应用于治疗慢性肾炎疾病时,可有效缓解患者病情,且本文中研究的结果得出,两组患者经治疗一个月后的24 h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐等评价肾功能的指标均明显低于治疗前,且B组患者经蛋白尿方联合科素亚药物治疗后的各指标数值均显著低于A组常规科素亚药物治疗,差异显著;经统计两组慢性肾炎患者经不同方法治疗后的病情好转率比较时,B组优于A组。

因此得出结论,蛋白尿方可有效降低慢性肾炎患者的尿蛋白含量,与科素亚药物联合治疗慢性肾炎疾病时可促进科素亚药物的药效,进而显著改善慢性肾炎患者的病情,促进患者病情的好转,最终提高治疗效果。

参考文献

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[10]高淑清.中医治疗慢性肾炎96例临床观察[J].中国保健营养,2013,1(2):441.

蛋白尿方 篇2

1 资料与方法

1.1 一般资料

运用随机整群抽样的方法将笔者所在医院肾病科2013年12月-2014年12月收治的100例慢性肾炎蛋白尿患者随机分为观察组和对照组, 每组各50例。入选患者均符合原发性慢性肾炎及《中药新药治疗慢性肾炎临床研究指导原则》[3]中的相关诊断标准, 均知情同意;排除各种继发性慢性肾炎综合征患者;24 h尿蛋白定量在2 g以上者;使用肾上腺皮质激素和细胞毒药治疗者;血肌酐值>132.6μmol/L (1.5 mg/dl) 者;合并糖尿病及高血压者及其他伴发严重心脑肝等疾病者。观察组, 男31例, 女19例, 平均年龄 (38.6±14.2) 岁, 平均病程 (23.1±10.4) 个月;对照组, 男27例, 女23例, 平均年龄 (34.5±13.4) 岁;平均病程 (22.5±10.2) 个月。两组患者性别、年龄、病程等一般资料比较差异均无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

对照组采用常规疗法, 口服消炎痛 (广东华南药业) 25 mg/次, 3次/d;肌肉注射甲氨蝶呤 (北京斯利安药业) 10 mg/次, 1次/周;给予低盐、优质蛋白饮食, 忌海腥饮食;血压高者选用钙离子拮抗剂。观察组在对照组基础上加服自拟健脾活血方, 其药物组成:徐长卿30 g、白茯苓30 g、山药15 g、黄芪15 g、白扁豆20 g、晚蚕砂10 g、苏木15 g、鬼箭羽15 g、穿山龙30 g、鸡血藤15 g。面色苍白、腰腿酸痛者加制川乌12 g、炒苍术10 g;皮肤疮疡、咽喉肿痛者加半枝莲15 g、忍冬藤30 g;腰脊冷痛、全身浮肿者加制附片15 g、肉桂5 g;面色晦暗、腰痛固定者加制莪术15 g、天花粉15 g;头晕耳鸣、腰膝酸软者加女贞子15 g、白芍18 g, 1剂/d, 水煎取汁约400 ml, 分早、晚两次温服。观察比较治疗前后两组患者试验室检查各项指标变化。

1.3 统计学处理

采用SPSS 15.0软件对所得数据进行统计分析, 计量资料用均数±标准差 (±s) 表示, 比较采用t检验;P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

疗程结束后, 观察组患者的尿蛋白、尿红细胞、24 h尿蛋白定量均显著低于对照组, 血清白蛋白均显著高于对照组, 两组比较差异均有统计学意义 (P<0.05) , 详见表1。

a与治疗前比较, P<0.05;b与对照组比较, P<0.05

3 讨论

在各种原发性及继发性肾脏损害中, 蛋白尿均极为常见, 其会使肾脏恶化的速度加快, 而慢性肾炎蛋白尿则是由于肾小球通透性在肾小球毛细血管基底膜变态反应性损伤的作用下增强引发的, 肾脏的功能状态及病理改变能够在持续性蛋白尿中得到客观的反映, 促进尿中蛋白质含量的显著降低是临床治疗慢性肾炎蛋白尿的关键, 同时其在对肾小球硬化剂肾功能衰竭的预防中也具有极为重要的作用[4]。蛋白尿在中医文献中无明确记载, 多归于“尿浊”范畴。脾肾亏虚是慢性肾炎发病的基础, 而其中脾虚尤为关键, 因为脾虚不能制水, 水湿内盛, 必损其阳, 久则导致肾阳亦衰;肾阳衰不能温养脾土, 脾肾俱虚, 亦可使病情加重[5]。

慢性肾炎属中医“风水”、“水肿”范畴。认为风、寒、湿、热、毒、劳伤、产后及七情失调均为慢性肾炎发病的诱因。而“正气存内, 邪不可干”, 慢性肾炎发病主要内因是肝肾不足或劳累过度耗损正气, 致素体正气亏虚, 正气既虚外邪易入侵, 复感风寒湿, 久之损伤肝肾阴血[6]。笔者认为慢性肾炎的病机核心在于湿, 瘀血贯穿整个病程, 治疗法则应以祛湿和化瘀为重, 因此采用健脾活血法治疗慢性肾炎, 方中山药、白扁豆、黄芪、茯苓健脾益气, 利湿祛邪;晚蚕砂健脾和胃;苏木、徐长卿、鬼箭羽、穿山龙、鸡血藤活血化瘀[7]。本研究结果显示, 观察组患者的尿蛋白、尿红细胞、24 h尿蛋白定量均显著低于对照组, 差异均有统计学意义 (P<0.05) , 充分说明了健脾益气、清利活血类中药能够通过整体调节使原发性慢性肾炎蛋白尿患者的疾病进展得到有效延缓, 临床症状得到有效改善, 尿蛋白总量得到有效减少, 对其肾功能进行切实有效的保护, 安全有效。同时长期大量蛋白尿者发生肾衰的时间较早, 肾功能不全伴大量蛋白尿者其肾衰病程进展较快。清热利湿和健脾益气治疗后, 最初肾功能正常组与肾功能异常组的蛋白尿均明显下降。此后肾功能异常组尿蛋白波动范围较大, 这与肾功能异常者肾小球丢失的数量多, 对蛋白尿加重因素的自身调节能力差有关[8]。

综上所述, 中西医结合治疗原发性慢性肾炎蛋白尿效果显著, 能有效降低患者的尿蛋白、尿红细胞、24 h尿蛋白定量, 改善患者临床症状, 值得临床推广。

参考文献

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[7]鲍玉芳, 周庆华, 房滢熙, 等.健脾益气清利活血方治疗慢性肾炎蛋白尿临床观察[J].陕西中医, 2012, 33 (4) :408-410.

蛋白尿方 篇3

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2013年1月-2014年9月期间在我院就诊并符合原发性慢性肾炎诊断标准[2]患者共80例。采用随机数字表法将其随机分为治疗组和对照组各40例, 治疗组中女性19例, 男性21例, 年龄18~65岁, 平均年龄 (38.6±14.2) 岁;病程6~40个月, 平均病程 (23.1±10.4) 个月。对照组中女性23例, 男性17例, 年龄21~63岁, 平均年龄 (34.5±13.4) 岁;病程10~48个月, 平均病程为 (22.5±10.2) 个月。两组患者的性别比例、年龄、病程等一般资料比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

治疗组患者予以益气活血方治疗, 具体药方为:白术20g、黄芪30g、益母草30g、白花蛇舌草30g、鱼腥草20g、党参20g、粉川芎15g、丹皮15g、连翘12g, 用水熬煎, 将300mL汁液取出, 每天3次, 每次100mL, 分别于三餐后1~2h服用, 2个月为1个疗程;对照组患者予以肾炎康复片 (天津同仁堂制药厂, Z10940034) 治疗, 1.5g/次, 每天3次, 2个月为1个疗程。

1.3 观察指标与疗效判定标准

检测两组患者治疗前后尿常规、血肌酐、血清白蛋白、24h尿蛋白定量等实验室指标。

尿蛋白疗效及临床综合疗效评价标准参照《中药新药治疗慢性肾炎的临床研究指导原则》[3]。其中尿蛋白疗效评价:患者尿常规检查蛋白转阴性, 或具有正常的24h尿蛋白定量为临床控制;患者尿常规检查蛋白减少2个+或24h尿蛋白定量减少至少40%为显效;患者尿常规检查蛋白减少1个+或24h尿蛋白定量减少40%以下为有效;患者尿蛋白未减少, 甚至有所增加为无效。总有效=临床控制+显效+有效。

临床综合疗效:患者尿常规检查尿蛋白转阴性, 具有正常的红细胞数, 或具有正常的24h尿蛋白定量为临床控制;尿常规检查蛋白减少2个+, 红细胞减少至少2个+或3个/HP, 尿沉渣RBC计数减少至少40%, 具有正常或基本正常的肾功能为显效;尿常规检查蛋白减少1个+, 红细胞减少1个+或2个/HP以内, 具有正常或有所改善的肾功能为有效;各临床表现及实验室指标没有明显改善, 甚至有加重的迹象为无效。总有效=临床控制+显效+有效。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行统计学处理, 计量资料以均数加减标准差 (±s) 表示, 比较采用t检验;计数资料采用率或构成比表示, 比较采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者尿蛋白控制情况比较

两组患者治疗后尿蛋白控制情况比较详见表1。治疗2个月后, 治疗组患者尿蛋白控制情况优于对照组, 组间比较差异具有统计学意义 (P<0.05) 。

[n (%) ]

2.2 两组患者综合临床疗效比较

两组患者治疗后综合临床疗效比较详见表2。治疗组患者临床总有效率为87.5%, 对照组患者临床总有效率为77.5%, 组间比较差异具有统计学意义 (P<0.05) 。

[n (%) ]

2.3 两组患者各实验室指标变化情况比较

两组患者治疗前后实验室指标详见表3。治疗前两组患者各指标比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。治疗结束后, 治疗组患者尿蛋白、尿红细胞、24h尿蛋白定量、血清白蛋白及肌酐等指标均较治疗前明显改善, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。对照组患者尿蛋白、尿红细胞及24h尿蛋白定量均较治疗前明显改善, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。治疗组患者治疗后尿蛋白、尿红细胞、24h尿蛋白定量、血清白蛋白、尿素氮及肌酐等指标改善情况均优于对照组, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。

(±s)

注:与同组治疗前比较, #P<0.05;与对照组比较, *P<0.05。

3 讨论

蛋白尿是原发性肾脏损害常见临床表现之一, 主要是由于各种原因引起的肾小球通透性增强所致, 持续存在的蛋白尿能够客观地反映肾脏病理改变和功能障碍, 因此降低尿中蛋白质含量是临床治疗慢性肾炎的关键, 同时也对预防肾功能衰竭具有重要意义。传统中医学中并无蛋白尿的病名, 根据临床表现可将其归于“尿浊”“精气下注”等病名, 并纳入“虚劳”和“水肿”的范畴。现代多数医家认为该病的病机以脏腑功能减退为主, 其中脾肾两脏功能失调在本病的发生中具有重要意义[4,5]。因此笔者在临床治疗中采用益气活血为主要治疗原则。方中黄芪、白术等的功效为健脾益气、利水消肿, 连翘、白花蛇舌草的功效为清热凉血解毒。慢性肾炎蛋白尿患者多反复发作, 中医认为久病多瘀, 且现代医学研究发现慢性肾炎患者存在血流动力学改变、微循环障碍及毛细血管狭窄等病理改变[6], 与中医学中“瘀血”的观点相符合, 因此在方中加入川芎、益母草等活血化瘀类中药可起到改善血液循环和血流动力学的作用, 诸药合用可起到益气健脾化湿、清利活血的功效。且现代药理学研究表明, 黄芪能使肾小球滤过膜通透性显著增加, 从而对肾小球功能进行切实有效的改善[7]。

综上所述, 益气活血方能有效改善慢性肾炎患者临床症状及降低尿蛋白含量, 保护肾功能, 值得临床推广应用。

参考文献

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蛋白尿方 篇4

关键词：肺纤维化,基质金属蛋白酶-2,基质金属蛋白酶-9

肺纤维化是多种慢性肺疾病的共同结局, 表现为肺间质细胞大量增殖、细胞外基质 (ECM) 异常增生及肺组织结构的重构, 疾病早期表现为弥漫性肺泡炎, 肺泡结构破坏, 肺泡上皮细胞和基底膜的损伤是肺间质纤维化病理过程的特征性改变, MMP-2和MMP-9可以降解肺泡壁基底膜的重要成分Ⅳ型胶原, 因此, MMP-2和MMP-9在肺纤维化的发生过程中起着重要的作用。清肺化痰通络方是全国名老中医邱幸凡教授的临床经验方, 在临床应用中取得了较好疗效。本实验借鉴博莱霉素A5 (BLMA5) 诱发的大鼠肺纤维化模型, 利用免疫组化法检测肺内MMP-2和MMP-9的表达, 以探讨清肺化痰通络方防治肺纤维化的作用及可能机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

雌性Wistar大鼠72只, SPF级, 体重 (200±20) g, 购于武汉大学试验动物中心。

1.2 试验药物

清肺化痰通络方由黄芩、瓜蒌、桃仁、地龙、黄芪、当归、鱼腥草 (购于湖北省中医院) 组成;常规水煎后, 水浴浓缩药液至每1 m L含生药2 g, 4℃保存。将BLMA5 (8 mg/支, 天津太和制药有限公司, 批号:030705) 制成5 mg/m L的生理盐水溶液。MMP-2单克隆抗体 (产品编号:ZM-0330) 、MMP-9单克隆抗体 (产品编号:ZM-0335) 及Sp试剂盒 (产品编号:SP-9000) 由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。

1.3 肺纤维化模型制作

参照文献[1], 将大鼠麻醉, 趁动物吸气瞬间, 在额镜的直视下迅速将焊锡制成圆头的12号腰穿针头, 通过声带插入气管约3~4 cm, 缓慢注入BLMA5生理盐水溶液1 m L/kg。立即将大鼠直立旋转。

1.4 动物分组及处理方法

将72只大鼠随机分为三组: (1) 模型组 (24只) :造模2 h后, 生理盐水灌胃, 15 m L/ (kg·d) ; (2) 干预组 (24只) :造模2 h后, 清肺化痰通络方水煎剂灌胃, 15 m L/ (kg·d) ; (3) 对照组 (24只) :不造模, 生理盐水灌胃, 15m L/ (kg·d) , 灌胃前禁食4 h, 不禁水。以上各组动物分别在实验第3、7、14、28天各处死6只。

1.5 标本采集及处理

经0.5%戊巴比妥钠溶液腹腔内注射麻醉后, 称重;颈动脉放血处死, 10%甲醛溶液固定右肺上叶, 制作石蜡切片, 用于HE染色和Masson染色及肺组织MMP-2和MMP-9表达检测。

1.6 指标检测

1.6.1病理染色分析依据Szapiel等[2]方法, 确定肺泡炎及肺纤维化程度。 (1) 肺泡炎分级, 0分:无明显病变;1分:轻度肺泡炎, 病变占全肺20%以下;2分:中度肺泡炎, 病变局限在全肺20%~50%;3分:弥漫性肺泡炎, 病变范围超过50%。 (2) 肺间质纤维化分级, 0分:无肺间质纤维化;1分:轻度肺间质纤维化, 病变范围局限在全肺20%以下;2分:中度肺间质纤维化, 病变范围占全肺20%~50%;3分:重度肺间质纤维化, 病变范围超过50%, 肺泡结构消失, 肺组织结构紊乱。

1.6.2免疫组织化学分析Sp法测定肺组织的MMP-2和MMP-9表达, 采用HUMIAS-2000医学图文分析系统, 对免疫组织化学结果定量分析。每张切片在高倍视野 (×400) 下随机选择不相重叠的5个视野, 细胞核为蓝色, MMP-2和MMP-9阳性细胞为棕黄色, 阴性对照片以PBS替代MMP-2和MMP-9。测定阳性细胞的积分光密度, 观察MMP-2和MMP-9免疫阳性细胞的分布, 以反映各组肺组织中MMP-2和MMP-9表达的变化。

1.7 统计学方法

采用SPSS 12.0统计学软件进行数据分析, 计量资料数据用均数±标准差 (x±s) 表示, 三组间比较采用单因素方差分析, 用q检验进行不同组间的两两比较, 以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 清肺化痰通络方对肺纤维化大鼠肺组织的影响

2.1.1肉眼观察对照组可见大鼠肺呈粉红色, 表面光滑, 弹性良好。模型组第3、7天可见大鼠双肺呈鲜红色, 有数个的散在出血点, 体积增大, 第14天双肺可见暗红色陈旧出血, 第28天时双肺苍白、表面凸凹不平、体积缩小、弹性较差, 硬度增加。干预组与模型组病变基本一致, 但程度稍轻, 肺体积略增大, 弹性稍差。

2.1.2镜下观察对照组大鼠肺组织结构清晰, 肺泡壁完整, 肺泡上皮细胞形态正常, 均未见明显病变。模型组第3天时肺内出现肺泡间隔增宽、炎性细胞浸润等急性肺泡炎改变;第7天时炎症表现更明显, 镜下见大片炎性细胞浸润, 成纤维细胞开始增殖;第14天时肺泡炎持续加重, 纤维组织开始增生;第28天肺泡炎较前有所减轻, 部分肺泡腔消失, 被大量成纤维细胞、增生的胶原纤维所取代, 已基本呈现肺纤维化改变。干预组大鼠肺部病理表现的变化规律与模型组基本一致。三组间同时段的肺泡炎程度, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;干预组和模型组同时段肺泡炎程度差异有统计学意义 (P<0.05) , 特别是第7天和第14天干预组肺泡炎程度较模型组轻, 两组间差异有高度统计学意义 (P<0.01) 。干预组和模型组在第3天肺纤维化程度差异无统计学意义 (P>0.05) , 三组在第7、14、28天的肺纤维化程度, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;第28天干预组肺纤维化程度较模型组轻, 差异有高度统计学意义 (P<0.01) 。见表1。

2.2 三组MMP-2和MMP-9蛋白表达比较

对照组肺组织中可见MMP-2少量阳性表达, 主要分布在肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、成纤维细胞和气道上皮细胞胞浆内。模型组、干预组第3天时, 肺内MMP-2阳性表达细胞均多于对照组, 肺泡间隔内可见少量成纤维细胞呈阳性反应, 血管、支气管周围及肺泡腔镜下内可见大量单核巨噬细胞呈强阳性反应, 三组间比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;第7天模型组和干预组MMP-2表达明显增强, 可见大量肺泡巨噬细胞和间质内的成纤维细胞呈阳性表达;第14天模型组和干预组肺内阳性细胞表达最强, 与第3、7、28天比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;第28天时, 模型组和干预组阳性细胞较同组第14天时明显减少, 但仍高于对照组。见表2。

对照组肺内可见MMP-9少量弱阳性表达, 表达主要分布于肺胞巨噬细胞和支气管上皮细胞。第3天时模型组、干预组大鼠肺内血管、支气管周围及肺泡腔内的单核巨噬细胞呈强阳性反应, 与对照组比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;第7天模型组和干预组肺内MMP-9表达增强, 除支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞外, 还见大量间质内的成纤维细胞和肺泡巨噬细胞呈阳性表达, 与同组第3、14、28天比较, 差异有高度统计学意义 (P<0.01) ;第14天模型组和干预组肺内阳性细胞略有减少;第28天模型组和干预组MMP-9表达较第7天时明显减弱, 但仍高于对照组 (P<0.05) 。干预组阳性细胞明显少于同时段模型组, 两组间差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表2。

3 讨论

现代医家根据肺纤维化临床表现及病机变化将其归为咳嗽、肺胀、喘证、气短、肺痿、肺痹、痰饮等范畴, 正气亏虚为本, 血瘀内阻为标, 正虚邪实为其基本病机, 其中, 痰阻肺络、肺阴不足、瘀血阻滞、内闭喘脱为临床多见的病变类型。消肿化痰通络方中黄芩、瓜蒌为君药, 黄芩味苦寒主入肺经, 可泻火解毒, 治肺热所致咳吐黄痰;瓜蒌药味甘、微苦, 性寒, 归肺、胃、大肠经, 清热化痰, 宽胸散结、痛疮肿毒, 两者相伍则肺之热清痰化而气机调畅;鱼腥草味辛, 性微寒, 归肺经具有清热解毒、消痈排脓功效, 肺萎之人久咳入络, 必兼气虚血瘀, 故以地龙、桃仁活血化瘀、通络, 且地龙性寒味咸, 善下行可平抑上逆之肺气而止咳平喘;佐以黄芪、当归养血补气, 与君药相配, 苦寒、甘温并用, 使肺热得清而不伤肺津, 共奏清热化痰、止咳平喘、活血益气之功。

实验结果显示, 造模大鼠均有不同程度的耸毛、活动减少、嗜睡, 少吃等症状。造模初期可见大鼠体重明显下降, 约3 d后逐渐缓解, 其中, 干预组体重恢复较快, 第28天时体重已与空白对照组相近, 而模型组体重恢复较慢, 第28天时仍明显低于对照组。通过HE光镜观察模型组早期即出现肺泡炎, 14 d后以肺纤维化病变为主, 28 d出现典型的肺纤维化改变, 符合肺纤维化的病理改变过程[3], 提示造模成功。干预组肺泡炎程度明显的轻于模型组, 提示清肺化痰通络方可以减轻早期肺泡炎的改变, 第14、28天干预组肺纤维化程度轻于同时段的模型组。提示清肺化痰通络方可以减轻模型动物的症状, 并在肺组织结构上减轻和延缓纤维化的发生。

组织纤维化的发生是由于ECM代谢失衡, 打破了脏器原有的组织结构, 纤维结缔组织大量增生的结果[4]。ECM包括纤维性成分、连接蛋白和间质成分, 主要为糖胺聚糖等, 其对细胞增殖和分化发挥重要调控作用, 合成和降解这些蛋白质的ECM代谢酶可分为基质金属蛋白酶类 (MMPs) 和基质金属蛋白酶组织抑制物 (TIMP) 。MMPs的明胶酶 (MMP-2、MMP-9) 主要降解Ⅳ胶原纤维、纤维连接蛋白、肺基膜等成分, 由于肺基膜及结构支架的损伤与肺纤维化密切相关, 因此, MMPs在肺纤维化发生中的作用日益受到重视[5]。有报道MMP抑制剂巴马司他等能降低MMP-9活性, 抑制TNF-α和TGF-β1释放, 减轻动物模型的肺纤维化[6,7]。Lemjabbar等[8]测定了肺间质纤维化患者支气管肺泡灌洗液中蛋白和MMP-2 m RNA的表达, 显示激素及免疫抑制剂治疗可以降低肺内MMP-2表达。上述研究均表明损伤肺组织可能通过持续性高表达MMPs, 使基膜不可逆性损伤断裂, 阻碍新生上皮组织重构正常肺泡腔, 最终导致肺纤维化。

本实验研究显示, 第3天开始模型组和干预组肺内MMP-2、MMP-9的表达均开始增加, 模型组和干预组MMP-9在第7天时已经达到高峰, 然后干预组快速下降, 到第28天时MMP-9水平基本接近正常, 模型组在第7天出现MMP-9表达高峰, 第14、28天也出现明显的下降, 但是28天时MMP-9的水平仍高于对照组。肺纤维化大鼠在造模的第3~14天以肺泡炎的病理改变为主, 提示MMP-9可能与早期上皮基底膜损伤有关, 参与了细胞外基质和基底膜的降解。干预组的MMP-9明显下降, 且在第14天时MMP-9的表达明显低于模型组, 推测清肺化痰通络方可能是通过抑制MMP-9表达, 从而延缓、减轻早期肺泡炎的发生。模型组和干预组MMP-2在第14天时达到高峰, 然后缓慢下降, 第28天时, 模型组和干预组仍高于对照组。第14、28天时以肺纤维化为主要病变, 提示MMP-2则可能在肺泡上皮细胞的再生与肺组织的异常修复中起重要作用。第14、28天MMP-2在干预组的表达低于模型组, 且干预组肺纤维化程度比模型组轻, 提示清肺化痰通络方通过延缓或者抑制MMP-2表达, 达到延缓以及抑制肺纤维化的目的。

综上所述, 本实验结果提示, BLMA5诱导的肺纤维化模型在不同时期MMPs的表达不同, 早期病变肺组织以MMP-9的增加为主, 晚期则以MMP-2增加为主, 与有关报道一致[9]。清肺化痰通络方可能通过抑制MMP-9在肺纤维化大鼠肺内的表达, 减轻早期的肺泡炎, 抑制MMP-2的表达, 延缓和抑制后期肺纤维化的发生。

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蛋白尿方 篇5

1材料与方法

1. 1实验动物

出生24小时内新西兰乳兔,雌雄不拘,由北京隆安实 验动物养 殖中心提 供, 批号: 11401400000095。

1.2实验药物

通阳活血方药物组成: 附子6 g、红参10 g、当归12 g、黄芪18 g、三七3 g,经水煎醇提法制成含1 g / m L生药的无菌中药原液。 含药血清制备方法: 取成年新西兰大耳白兔40只( 由北京隆安实验动物养殖中心提供,批号: 11401400000095) ,雌雄各半,用随机数字表法随机分为4组,每组10只,通阳活血方含药血清大剂量组按照每日生药量54. 96 g /kg·体质量( 相当于70 kg成人临床用药量12倍) 、中剂量组按照每日生药量27. 48 g /kg·体质量( 相当于70kg成人临床用药量6倍) 、小剂量组按照每日生药量13. 74 g /kg·体重( 相当于70 kg成人临床用药量3倍) ,分别用蒸馏水配置成混悬液给兔灌胃,每天2次,连续7天; 空白血清组给予等量正常饮用水。末次给药前禁食不禁水12小时, 给药后2小时,耳中央动脉取血,自然分离血清, 56℃ 水浴30分钟灭活处理,0. 2 μm微孔滤膜过滤除菌,分装为通阳活血方含药血清大、中、小剂量组和空白血清组,- 20℃冷存备用。

1.3试剂

DMEM / F12( 1 ∶ 1 ) 培养基 ( 美国Thermo公司产品,批号: NVJ0307) ; 胎牛血清( 美国Gibco公司产品,批号: 911585) ; 低糖DMEM培养基( 美国Hyclone公司产品,批号: DM121501D) ; 胰酶 ( 美晨公司,批号: C1401130) ; PI-Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒( 北京大学医学部制剂室) ; 一抗: Monoclonal Anti-Vinculin antibody( 美国Sigma公司产品,批号: SAB4200080) ; 二抗: Gote Anti-Mouse Ig G ( H + L) Rhodamine ( TRITC ) ( 美国Bioworld公司产品,批号: BS11502) 。

1.4主要仪器

酶标仪( 550型,美国) ; 流式细胞分析仪( BD, 美国) ; 激光共聚焦显微镜( TCS-NT型,德国) ; 防震台( TMC63544,美国) 。

1.5方法

1. 5. 1窦房结细胞的分离、培养新生24小时内的乳兔8只,吸入乙醚麻醉,用75% 酒精消毒乳兔皮肤及手术区。沿前正中线剪开胸腔,暴露心脏, 将心底部大血管剪断,游离心脏,尽量保留大血管, 用PBS充分清洗心脏,解剖镜下分离窦房结区域 ( 上腔静脉与右心房交界处) ,用PBS清洗分离的组织,剪碎呈约0. 5mm,置于15 m L离心管中,加入0. 1% 胰酶10 m L,37℃ 下,消化15分钟,消化完毕, 加入5 m L含血清培养基终止消化,用移液枪上下吹打70次,离心400 r/min,5分钟,将上清液移入另一50 m L离心管,将沉淀的组织块再加入0. 1% 胰酶10 m L,同前法消化,终止消化后,吹打,离心,取上清细胞悬液与第一次的细胞悬液合并,如此重复一次,将三次所得的细胞悬液合并至50 m L离心管, 1500 r / min离心10分钟,弃上清,用含血清培养基6 m L重新悬浮细胞。取4个10cm培养皿,各加入10 m L培养基,将细胞悬液等分移入培养基中,置于37℃ 、CO2浓度5% 的细胞培养箱中孵育1小时( 差速贴壁) ,光镜下观察,可见大量纤维细胞, 间质细胞贴壁,将上浮细胞取出置于另4个培养皿中培养,24小时后更换新培养基,之后每48小时更换培养基。

1. 5. 2模拟缺血再灌注模型建立及实验分组以缺氧缺糖模拟缺血,以恢复氧和糖的供应模拟再灌注,用不含胎牛血清的低糖培养基置换原培养基, 放入自制的密闭盒中,持续通以N2充分排尽盒内空气,以模拟缺血。放入培养箱中培养16小时后从密闭盒中取出,更换为正常培养基,以模拟再灌注培养3小时。

将细胞分为正常对照组、模型组、空白血清组、含药血清高、中、低剂量组。含药血清高、中、低剂量组及空白血清组分别加入相应兔血清( 终浓度10% ) , 预先培养过夜( 约8小时) 。造模更换培养基时加入相应含药血清,造模后取窦房结细胞进行实验。

1. 5. 3细胞活性检测将细胞种植于96孔板中,分组,每组取8个复孔,造模后,倒弃培养基,相应检测孔内加入噻唑蓝( methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT) 工作液100 μL,于培养箱内孵育3小时,取出吸除MTT工作液,加入DMSO100 μL,摇匀,待颜色变化,立即上酶标仪检测( 设定波长570mm) 。

1. 5. 4细胞凋亡检测调整待测细胞浓度为( 5 × 105) ~ ( 1 × 106) 个/ m L。分组,每组6个样本,造模后,将细胞消化转移至流式离心管内,1500rpm,4℃ 离心5分钟,弃上清。加入1 m L预冷的PBS,轻轻震荡使细胞悬浮,同上法离心,弃上清,重复3 ~ 4次,加入200ul Binding Buffer,轻轻震荡,使细胞悬浮。加入10 μL Annexin V-FITC,轻轻摇匀,避光, 室温反应15分钟,加入5ul PI,即上机检测。

1. 5. 5细胞骨架蛋白tubulin形态观察14mm盖玻片放入24孔板中进行细胞爬片,细胞贴壁后,选取生长良好的细胞进行实验。分组,造模后吸除培养基,PBS清洗2次,以4% 多聚甲醛固定10分钟; 吸除多聚甲醛,加入0. 02% Triton,37℃ 培养箱内静置15分钟打孔。PBS清洗3次,加入一抗( 1 ∶ 500PBS溶液) ,放入湿盒内,4℃ 冰箱孵育过夜; PBS清洗2次,加入二抗( 1∶ 200PBS溶液) 常温孵育1小时,甘油封片后上机检测,每组取4个视野,图像采用Image-Pro Plus 6. 0进行平均荧光强度分析。

1.6统计学方法

采用统计程序包SPSS13. 0软件对数据资料进行统计分析,计量资料均用均数 ± 标准差(  ± s) 表示,各组数据均服从正态分布,方差齐,多组间资料比较采用完全随机方差分析,两两比较采用LSD检验,以P < 0. 05为差异显著,以P < 0. 01为差异极显著。

2结果

2.1通阳活血方含药血清对窦房结细胞活性的影响

MTT比色检测结果显示,模型组活细胞量明显低于空白对照组( P < 0. 01) ,证明造模方法可行。 空白血清组与模型组比较无统计学意义 ( P > 0. 05) ,表明兔血清对实验无明显干扰,含药血清高、 中、低剂量组活细胞量明显高于模型组( P < 0. 05) , 显示通阳活血方含药血清能保护窦房结细胞活性, 见表1。

2.2通阳活血方含药血清对窦房结细胞凋亡的影响

流式细胞分析仪检测结果如图1显示,模型组细胞凋亡率明显高于正常对照组( P < 0. 01) 。空白血清组与模型组无明显差异,含药血清高、中剂量组细胞凋亡率明显低于模型组( P < 0. 05) ,低剂量组凋亡率与模型组比较无统计学意义,见表1。

2.3通阳活血方含药血清对窦房结细胞骨架蛋白Vinculin的影响

激光共聚焦显微镜观察结果显示,空白对照组细胞内Vinculin显色明显,数量较多,均匀分布于细胞膜附近( 图D) ; 模拟缺血再灌注后的窦房结细胞质内Vinculin数量明显减少( 图C) ,平均荧光强度明显低于空白对照组( P < 0. 01) ( 表1) ; 含药血清高剂量组Vinculin数量较模型组明显增多,显色明显( 图D) ,平均荧光强度明显高于模型组( P < 0. 01) ( 表1) ; 中剂量组Vinculin数量较空白组有所减少,但明显优于模型组( 图E) ; 空白血清组及低剂量组Vinculin数量较模型组无明显差异( 图B、D) 。 可见通阳活血方含药血清能保护缺血再灌注窦房结细胞Vinculin的形态结构。

注: 与模型组比较aP < 0. 01; 与模型组比较bP < 0. 05; 与模型组比较cP > 0. 05。

3讨论

细胞凋亡在心脏传导系统的发育成熟中具有重要的作用,窦房结、房室结与传导阻滞细胞的胚胎发育及出生后数周的发育过程中均有细胞凋亡发生,在窦房结的发育、成熟过程中,凋亡不足可留下引发心率失常的基础,凋亡过度可引起病态窦房结综合征等病变[2]。模拟缺血再灌注可诱导培养窦房结细胞凋亡,且随缺血时间的延长,窦房结细胞凋亡率逐渐增加[3]。鉴于病窦的发病常伴随缺血性心脏病的出现,故窦房结缺血再灌注损伤所致的细胞凋亡可能是其病因之一。

心肌骨架系统破坏是缺血再灌注损伤主要的发生机制[4],Vinculin是细胞骨架系统中重要成分之一,Vinculin在细胞中与细胞微丝骨架相连,并将微丝锚定于细胞膜上,vinculin也介导细胞外基质与细胞骨架的连接,Vinculin在维持细胞形态、调节细胞粘附、运动、增殖及细胞膜内外信号转导等过程中起重要作用[5]。

通阳活血方是刘志明老中医临证70余年治疗病态窦房结综合征的有效经验方。刘老认为病窦的病机为心肾阳虚、瘀血阻滞,主要证候为阳虚血瘀。心阳不振,心脉失于温煦鼓动,气血运行不利; 心阳不能外达,导致阳气郁闭不通,属本虚标实之证,治宜以“通阳活血”为基本法则。通阳活血方由附子、人参、当归等组成。附子辛甘性热,能温心肾之阳; 人参大补元气,能助附子之温,振奋心阳,有扶正祛邪之功; 当归补血活血,温通经脉,使阳气外达。诸药相配,共奏“通阳活血”之功。

本实验MTT检测结果中,模型组与空白对照组存活细胞量有明显差异,表明造模方法可行; 空白血清组与模型组无明显差异,显示兔血清对实验结构无干扰。含药血清高、中、低剂量组存活细胞量都明显高于模型组,且呈浓度依赖的量效关系,表明药物浓度选取有效可行。流式细胞检测结果显示,模型组细胞大量凋亡,证实缺血再灌注是导致窦房结细胞的凋亡的可能原因; 含药血清高、中剂量组细胞凋亡率明显低于模型组,显示通阳活血方能减少细胞凋亡是其治疗病窦的可能机制之一。

蛋白尿方 篇6

1材料与方法

1.1实验动物自发性高血压大鼠28只,雌性,14周龄,体重180 g~200 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

1.2实验药品补肾活血方混悬液:桑寄生30g,川芎12g,丹参30g,淫羊藿30g,由山东中医药大学中药制剂室按正交试验法优选工艺制成,每克颗粒剂含6g。实验前加 生理盐水 适量 ,制备成浓 度为每毫 升0.8 g生药的混悬液,置于4 ℃冰箱保存备用,使用前振荡,充分摇匀。淫羊藿混悬液:制备成浓度为每毫升0.8 g生药的混悬液,置于4 ℃冰箱保存备用,使用前振荡,充分摇匀。吲达帕胺混悬液:药物为天津力生制药公司研制,制备成浓度为每毫升0.025 g生药的混悬液,置于4 ℃冰箱保存备用,使用前振荡,充分摇匀。

1.3主要实验仪器及试剂ALC-NIBP无创血压仪, 上海奥尔科特 生物科技 有限公司 生产;METTLER AE20型电子分析天平,海特勒-托利多(上海)仪器有限公司生产;康乐电热恒温水浴槽,上海医疗器件七厂生产 ;SFMC试剂盒 ,北京博奥森生物技术 有限公司 生产。

1.4实验方法

1.4.1分组及给药方法将28只大鼠随机分为吲达帕胺组、淫羊藿组、补肾活血组及空白对照组,每组7只。空白对照组每天给予蒸馏水8 mL/kg灌胃;吲达帕胺组每天给予吲达帕胺溶液灌胃,剂量:每千克体重0.08 mg生药;淫羊藿组每天给予淫羊藿溶液灌胃,剂量:每千克体重8 g生药;补肾活血方组每天给予补肾活血方溶液灌胃,剂量:每千克体重8 g生药。根据每周的体重变化调整给药量。每天用药1次,每周用药6 d,连续给药8周。末次用药后,禁食不禁水12 h,麻醉,取血备用。

1.4.2标本采取取血:对各组大鼠麻醉后行腹主动脉取血,取血量为5 mL~10 mL。离心:静置,待血液凝固后,将其平衡后离心(3 000 r/min,离心5 min~ 10 min),分离出血清,若不清亮或带有血细胞,则重新离心,分装加盖置于-20 ℃冰箱中冷藏备用。

1.4.3血清SFMC含量检测按SFMC试剂盒说明书采用双抗体夹心法ABC-ELISA测定,根据4组大鼠血清的吸光值 (OD)从标准曲 线上查出 相应样本 的SFMC浓度。

1.4.4统计学处理采用SPSS17.0进行数据处理, 计量资料以均数±标准差( ±s)表示,组间比较采用t检验。以P <0.05为差异有统计学意义。

2结果

与空白对照组相比,吲达帕胺组、淫羊藿组、补肾活血方组大鼠血清SFMC含量均明显降低,差异有统计学意义 (P <0.01)。与吲达帕胺组和淫羊 藿组比较,补肾活血方组SFMC含量降低,差异有统计学意义 (P <0.01)。吲达帕胺组与淫羊藿组相比差异无统计学意义(P >0.05)。详见表1。

mg/L

3讨论

血栓及高血压均被肯定是冠心病、心肌梗死等心血管疾病的重要危险因素,临床实践发现[5],抗高血压治疗可使高血压病患者心血管疾病发病的危险减少25%,而进一步加用抗血小板药物则能使高血压患者主要的心血管事件降低15%。同时,高血压病患者血液多呈高凝状态,这种状态随着血压的升高而逐渐加剧,高血压在一定程度上促进了血栓的生成[6]。高血压时氧自由基生成增加,出现湍流和切变力改变等血流动力学因素,使血管内皮细胞受损[7],其结果不但使局部内皮抗血栓活性丧失,而且暴露了内皮成分如胶原、微纤维等,使得损伤部位极易发生血小板黏附、白细胞聚集和平滑肌的异常增殖,极大地促进了血栓的形成。另外,在血栓的形成过程中,凝血酶具有极其重要的地位[8]。凝血酶可通过激发血小板聚集和诱导血管平滑肌细胞增殖而达到促进血栓形成的作用。

当血液中有凝血酶生成时,凝血酶将纤维蛋白原 (Fbg)分解,脱去纤维蛋白肽A(FPA)和纤维蛋白肽B (FPB),生成纤维蛋白单体(FM)。FM对分解初期的纤维蛋白降解产物(FDP)或寒冷不溶性球蛋白(CIg, 又名纤维结合蛋白)等有很强的亲和性,可与之形成复合物,此即可溶性纤维蛋白单体复合物[9]。SFMC并非单一结构,而是上述物质的结合,它以溶解状态存在于血液中,如SFMC含量呈阳性则说明血中有微量凝血酶的生成,标志着体内血栓 形成。因此,本研究以SHR血清SFMC含量作为研究指标,观察吲达帕胺、 淫羊藿、补肾活血方对其含量的影响,以期为论证高血压及血栓性疾病的关系和临床指导用药提供实验依据。

本研究结果显示,实验第8周,吲达帕胺组、淫羊藿组、补肾活血方组SHR血清中SFMC含量均较空白对照组有明显增高,而与吲达帕胺组和淫羊藿组比较, 补肾活血 方组SFMC含量降低 ,差异有统 计学意义 (P <0.01)。从而提示补肾活血方在发挥降压作用的同时,可以改善SHR血液高凝状态,且作用较西药(吲达帕胺)及单一用药(淫羊藿)更为显著。而补肾活血方对高血压患者发生血栓性疾病是否具有一定的防治效果,仍需要临床进行更加深入的研究。

摘要：目的 观察补肾活血方对自发性高血压大鼠(SHR)血清可溶性纤维蛋白单体复合物(SFMC)含量的影响。方法 将28只SHR随机分为空白对照组、吲达帕胺组、淫羊藿组及补肾活血方组,分别给予蒸馏水、吲达帕胺溶液、淫羊藿溶液、补肾活血方溶液灌胃,给药8周后,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定各组SHR血清SFMC的含量。结果 与空白对照组相比,吲达帕胺组、淫羊藿组、补肾活血方组大鼠血清SFMC含量均明显降低(P<0.01),与吲达帕胺组和淫羊藿组比较,补肾活血方组SFMC含量降低(P<0.01),吲达帕胺组与淫羊藿组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 补肾活血方、吲达帕胺及淫羊藿均能降低SHR血清SFMC的含量,其中补肾活血方作用最强。