猪瘟活疫苗（共7篇）
猪瘟活疫苗 篇1
用猪瘟疫苗对猪只进行免疫注射是预防猪瘟的重要手段。
目前市场上使用的猪瘟疫苗有组织苗和细胞苗两大类, 细胞苗中有同源细胞苗和异源细胞苗。异源细胞苗主要使用的是牛睾丸细胞苗, 此苗在较长期的使用中暴露出一些难以克服的缺陷, 如易带牛的流行性腹泻/黏膜病病毒 (BVDV) , 而在临床中BVDV的污染是比较普遍的, 在疫苗生产中, 牛睾丸细胞培养和收毒都不很稳定, 常造成疫苗质量批间差异较大。脾淋苗也存在脾淋组织来源不足和质量问题。
为克服这些疫苗的不足, 中国兽药监察所组织研发了猪瘟活疫苗 (传代细胞源) , 即ST苗。此苗的特点主要是:使用的是从美国进口的克隆的同源 (猪睾丸) 细胞, 其亲和力强, 病毒接种后增殖快, 疫苗注射后被接种动物能较快地产生免疫力。克隆的同源细胞也不带猪常见的细小病毒、高蓝病毒、狂犬病毒等, 避免了使用异源 (牛睾丸) 细胞, 易污染BVDV等问题。
该疫苗病毒滴度高, 可达牛睾丸细胞苗的20倍以上, 成品苗RID可达15 000 个以上。RID含量高, 实际应用证明其不但免疫效果好, 还可以控制猪瘟亚临床感染, 对有一定量的母源抗体和上一次免疫余留较多抗体而又不能进行经常性的抗体监测、适时免疫的“盲打” (如一般实行的春防、秋防) , 其免疫效果也较好。
猪瘟活疫苗生产中收毒比较稳定、整齐, 疫苗质量批间差异小, 其免疫效果相对整齐、稳定。同时该疫苗生产工艺中低血清或无血清细胞培养, 疫苗中异源细胞含量极低或无, 疫苗注射后动物过敏反应极小。有的生产企业还配有专用稀释液, 其含有免疫增强剂和抗过敏成分, 因而免疫效果更好。
有专家指出此类疫苗的广泛应用, 解决了猪瘟传统疫苗滴度低、外源病毒污染、生产工艺落后、批间差异大、产品质量低、免疫效果差等问题, 是一种新型高效活疫苗。
不同猪瘟活疫苗免疫效果比较分析 篇2
本试验拟对来自不同厂家猪瘟疫苗,以不同模式和程序进行免疫,掌握生猪猪瘟抗体的消长规律,筛选出合理、省时、省力、免疫效果好的免疫组合,制订合理的免疫程序和技术规程,逐步在基层防疫工作中进行推广,以提高免疫速度和质量,提高养殖效益,减少死亡,节约免疫成本,从而产生深远的社会效益。
1材料
1. 1试验动物
选择30日龄左右的健康生猪370头,由宜昌市牧康牧业有限公司天兴养猪场提供。
1. 2疫苗
猪O型口蹄疫灭活疫苗( 缅甸98株) ,A公司生产; 猪瘟活疫苗,来自7个不同厂家; 高致病性猪蓝耳病疫苗,B公司生产。
1. 3诊断试剂
猪瘟抗体ELISA试剂盒,北京爱德士元亨生物科技有限公司生产。
2方法
2. 1试验分组与免疫方案( 见表1)
2. 2免疫剂量
猪瘟活疫苗首免剂量为1头份,二免剂量为1. 5头份; 猪O型口蹄疫灭活疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗免疫剂量均按照疫苗说明书进行。
. 3免疫副反应观察表1试验分组与免疫方案注: 1 ~ 10组已于10日龄免疫蓝耳病疫苗。
每次免疫后0. 5 h内不间断、72 h内间隔8 h对各组试验猪逐只观察并记录精神状况、采食、发病、死亡等情况,统计免疫副反应。如出现副反应需要治疗的试验组需对治疗方案进行讨论,严禁使用免疫抑制药物。
2. 4抗体检测
生猪免疫前全部采血进行母源抗体的检测,首免后21,51,72天采血进行猪瘟抗体检测。
3结果与分析
3. 1免疫副反应观察
试验猪免疫后,未发现明显的副反应症状。
3. 2猪瘟抗体检测( 结果见表2)
由表2可见: 猪瘟母源抗体检测抽检的364份血清中,阳性血清有332份,合格率为91. 21% ; 首免21天猪瘟抗体检测抽检的296份血清中,阳性血清只有88份,合格率仅为29. 73% ; 首免51天( 二免18天) 猪瘟抗体检测抽检的276份血清中,阳性血清200份,合格率为72. 46% ; 首免72天( 二免39天) 猪瘟抗体检测抽检的187份血清中,阳性血清145份, 合格率为77. 54% 。
4讨论
本试验采用的进口ELISA试剂盒具有灵敏性高、特异性强、稳定性好等特点,使检测结果更加可靠准确,能够真实地反映猪瘟抗体水平。在检测猪瘟母源抗体过程中发现仔猪30日龄左右时,其母源抗体普遍偏高,可能由于该猪场的母猪猪瘟防疫较好,母源抗体能在仔猪体内持续较长时间。王波等［2］报道,当仔猪在30日龄时,猪瘟抗体水平在保护水平之上,如果此时免疫猪瘟疫苗,会受到母源抗体的干扰,仔猪猪瘟母源抗体半衰期为6. 8 d。因此,为防止母源抗体的干扰,本试验将猪瘟免疫时间延后,在仔猪47日龄时进行首免。首免21天检测抗体水平发现,各组抗体水平普遍不高,抗体合格率仅为29. 73% ,远低于省部级要求。因此,在首免后33天进行了二次免疫,二次免疫18天( 首免51天) 再次采血检测抗体水平发现,各组抗体水平较首免21天检测时明显升高,部分试验组合格率甚至达到100% 。而二免39天( 首免72天) ,除3针同时免疫组,其他试验组抗体水平均超过70% 。对比发现, 3针同时免疫组抗体水平明显低于单针免疫组,说明采用3针同时进行免疫的程序对猪瘟抗体水平具有较大影响。由于在首免抗体水平不高时全部试验组都进行了二次免疫,因此无法判断随着时间的延长, 其抗体水平是否会逐渐升高并达到保护力水平,从而避免二次免疫。同时,由于时间、人员及试剂等原因的限制,试验未对高致病猪蓝耳病和猪口蹄疫抗体进行检测,其抗体水平如何,是否达到保护力水平不详。
首免过程中采用的免疫剂量为1头份,但防疫员反映1头份的剂量在实际操作过程中会有损耗,因此在二次免疫时免疫剂量增加到1. 5头份,从检测结果来看,免疫效果非常理想。
通过对不同厂家生产的疫苗进行对比发现,G公司的猪瘟细胞源疫苗效果最好,首免后其抗体水平明显高于其他疫苗,检测发现,其抗体合格率均达到了100% ; 其次是E公司的猪瘟细胞源疫苗,二免39天的整体猪瘟抗体水平明显高于二免18天的抗体水平,说明此时猪群抗体水平仍处于上升阶段,并逐渐达到峰值。
血清抗体水平的监测是目前对免疫质量进行评价或对疫情进行预警预报和风险评估的常用方法,定期对猪瘟进行抗体水平监测,对于了解猪场的猪瘟抗体水平变化和进行免疫效果评估,制订科学合理的免疫程序,指导生猪养殖,特别是对散养户,都是十分有利的。
参考文献
[1]向智龙,卓建华,程振涛,等.猪瘟RT-PCR一步法检测技术的建立及应用[J].黑龙江畜牧兽医,2011(04上):98-99.
美国用中国猪瘟疫苗喷雾预防猪瘟 篇3
美国用中国哈尔滨生物药品厂出产的猪瘟兔化活疫苗喷雾, 以发生的气溶胶预防猪瘟, 使其获得接种, 从而改变了抓猪、保定和需要头头进行肌肉或皮下打针的老法子。解决了即繁琐费工、费时而且效率又低的现实问题。这项试验, 起头在两个牧场, 同时用中国出产的兔化活疫苗, 对3 500头育肥猪进行了最初的一批试验。做法是把猪圈先封锁起来, 用做气雾室。使用前苏联制的圆盘型气雾发生器, 进行疫苗喷雾, 证实没有发现对健康有害的影响, 也没有发现对猪呼吸系统的任何损害。据研究认为, 这种喷雾接种有着较高的敏感性和特异性。在用这种猪瘟兔化活疫苗喷雾后的7~8 d即可发生接种力, 并可产生不少于10个月的保护。
猪瘟防制应用猪瘟疫苗的探讨 篇4
我国养猪业的庭院式饲养大量存在, 并且规模化的养猪场不够规范, 在养猪技术和相关的防疫管理措施上存在许多问题, 因此我国的猪瘟发病率较高, 而且一旦发病造成的影响范围较大, 不仅会给养殖户带来较大的经济损失, 而且还极有可能会造成恶劣的社会影响。当前很多母猪长期携带猪瘟病毒, 而且会持续感染到胎盘和仔猪, 如果仔猪成活就成为猪瘟病毒的持续感染者, 进而对猪瘟疫苗产生免疫力, 造成猪瘟疫苗免疫失败, 这也是目前我国猪瘟应用猪瘟疫苗免疫失败的主要原因[1]。
2 猪瘟防治应用猪瘟疫苗的相关探讨
根据不同的制造工艺将猪瘟疫苗分为不同的种类, 当前我国常用的猪瘟兔化弱毒株生产的猪瘟疫苗主要有两种, 即猪瘟活疫苗一号和猪瘟活疫苗二号, 其中猪瘟活疫苗一号包括猪瘟淋脾苗和猪瘟乳兔苗, 猪瘟活疫苗二号指的就是猪瘟兔化细胞苗[2]。为了提高猪瘟疫苗的防治效果, 在猪瘟疫苗的使用过程中要注意以下几个问题。
2.1 切实做好超前免疫工作
为了有效地防制猪瘟, 需要对仔猪进行超前防疫, 在这个过程中要切实做到仔猪不吃初乳, 这是超前疫苗阶段的重点, 也是在实际免疫过程中经常被忽略的一点。如果没有对仔猪的初乳进行控制, 猪瘟疫苗免疫效果会大打折扣。一般情况下, 使用猪瘟弱毒细胞苗对仔猪进行超前免疫, 但是根据实际情况有的时候也会采用淋脾苗。
2.2 科学的选择猪瘟疫苗
猪瘟疫苗的选择要与养猪的环境和相关设施条件进行结合。如果养猪场的条件、管理、疫病防疫工作都比较好, 可以选择猪瘟细胞苗或者是猪瘟组织苗, 这两种猪瘟疫苗的防疫效果差不多。如果养猪场一直使用猪瘟细胞苗进行免疫, 并且饲养环境和相关的管理条件都较差, 猪瘟的免疫抗体水平不同, 并且存在潜在的猪瘟散发性, 在这种情况下, 可以考虑用猪瘟组织苗代替细胞苗进行猪瘟免疫, 这样能够有效的提高猪群的整体猪瘟病毒抗体水平。
2.3 合理控制猪瘟疫苗的免疫剂量
不同的猪瘟疫苗所使用的猪瘟免疫剂量是不同的, 根据相关实践研究成果, 一般情况下, 猪瘟淋脾组织苗的免疫剂量不能少于150RID, 而猪瘟细胞苗的免疫剂量不能少于750RID[3]。在实际免疫过程中, 要根据猪群的实际情况对免疫剂量进行科学合理的控制, 不能盲目的增加免疫剂量, 否则不仅会增加免疫成本, 而且还有可能使免疫效果大打折扣。目前, 不同猪瘟疫苗生产厂家的每头份疫苗剂量是不同的, 在使用前要对所选择的每头份疫苗剂量进行确定, 保证免疫效果。如果自身无法确定的话, 最好通过电话、邮件等形式与猪瘟疫苗生产厂家进行联系咨询。
2.4 掌握猪瘟疫苗的免疫时间
科学的猪瘟免疫时间应当根据免疫抗体的监测结果确定。但是, 受到养殖条件、养殖技术和养殖理念的影响, 在实际免疫过程中, 很少会开展免疫抗体监测, 一般是按照仔猪22~25日龄首免, 60~70日龄二免的原则进行免疫。种母猪要在断奶后配种前进行免疫, 而种公猪每年要进行2次免疫。
2.5 猪瘟疫苗的管理
为了确保猪瘟疫苗的防治效果, 一定要选择信誉度较高的猪瘟疫苗生产厂家生产的疫苗产品, 而且要在猪瘟疫苗的运输、保存和使用等环节加强管理, 确保猪瘟疫苗的有效性。
3 结语
猪瘟防制应用猪瘟疫苗是一项综合性较强的系统工程, 在猪瘟防制过程中, 要坚持科学合理的免疫原则, 在超前免疫、疫苗选择、疫苗剂量、防疫时间和疫苗管理等方面做好工作, 确保猪瘟疫苗的免疫效果, 降低猪瘟的发病率, 为养猪业的发展提供保障。
摘要：猪瘟是猪养殖过程中最常见的传染病之一, 具有传播范围广、传播速度快的特点, 并且在各个地区都会发生。猪瘟疫苗的出现能够有效地防制猪瘟, 降低猪瘟带来的经济损失, 为猪瘟防治做出了巨大的贡献。但是有时猪瘟疫苗会出现防治失效的问题, 这除了不了解猪瘟发病特点以外, 还因为人们对猪瘟疫苗的认识程度不够。基于此, 对应用猪瘟疫苗进行了相关探讨。
关键词：猪瘟,猪瘟疫苗,防治
参考文献
[1]李毅, 郑仲金, 温富勇, 王国良.猪瘟疫苗在猪瘟防治上的应用技术.中国畜禽种业, 2008, (19) :40-42.
[2]王仕凡.猪瘟疫苗临床应用时存在的问题及对策.湖北畜牧兽医, 2011 (08) :32-33.
猪瘟活疫苗 篇5
猪瘟细胞活疫苗在实际大规模细胞培养过程中遇到很多难题, 而其中在细胞消化过程中分散液的选择直接影响到细胞接毒后细胞毒收获液的效价, 因此细胞消化过程中一定要选择正确的分散液[3,4]。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 种毒
猪瘟兔化弱毒株 (C株) 由中国兽医药品监察所提供, 通过兔体继代, 采集定型热反应兔的脾脏作毒种 (简称脾毒) 。物品:5ml注射器、6号针头、250ml或500ml锥型瓶、120目铜沙网漏斗、眼科剪刀镊子、500ml大烧杯、大三角瓶 (500ml或1000ml) 、平皿 (中号) 、玻璃珠 (大些的) 、四层纱布漏斗、转瓶等。冻干毒:5瓶0.8g/瓶
1.1.2 犊牛睾丸
来源浙江金华
1.1.3 配液
乳汉 (欧) 液、7.5%碳酸氢钠溶液;2万U双抗溶液 (SP) 、磷酸盐缓冲溶液 (PBS溶液) 、0.25%胰酶溶液、EDTA胰酶 (0.02%~0.05%) 、0.4%酚红、血清 (NCS) 、原代细胞生长液、乳汉液+9%NCS+0.8%sp+0.5% (7.5%碳酸氢钠) 、维持液、乳汉液+2.0%NCS+0.8%SP+0.5% (7.5%碳酸氢钠) 、0.25%胰蛋白酶, 使用时调节pH值到8.0。
1.2 方法
1.2.1 细胞制备
操作:250ml瓶中取出牛睾丸—烧杯中洗一遍—平皿中去外皮—烧杯中洗两遍—睾丸中间一直线剪开, 用小剪刀将组织刮下—移至烧杯中洗两遍—剪碎后洗一遍—转至三角瓶中加入玻璃珠和适量的0.25%胰蛋白酶 (无需过多胰酶) —37℃水浴消化40-50min左右—弃去胰酶, 加入少量营养液摇动三角瓶 (此过程未用营养液洗去残留的胰酶) , 加入营养液通过四层纱布漏斗分散细胞至转瓶中 (一般每付牛睾丸分散两瓶细胞) —37℃温室、8.5r/h培养, 2~5d细胞生长至+++与++++之间时即可接毒。观察细胞时应尽量减少细胞瓶内液体的流动, 24h内不要观察细胞。
1.2.2 一接 (接毒比例0.3%)
操作:从冷库中取出预先冷冻的乳钵, 将半化开的脾毒称取所需重量置于乳钵中研磨、捣碎, 研磨后多加乳汉液, 继续研磨, 让组织中的毒得到充分释放。将种毒吸离心瓶中, 配平、2000r/min 20min离心。将脾毒上清按比例接入细胞瓶中, 继续培养。
1.2.3 一接一传 (带毒传代)
将分散液、PBS溶液放在37℃恒温水浴箱中预热。取细胞形态良好、分布均匀且长满单层的细胞瓶, 将瓶身用消毒液擦拭、瓶口用消毒酒精棉擦拭后在酒精灯外焰上烧1周, 打开瓶塞。将细胞瓶中原有的细胞生长液倒掉, 在火焰保护下向瓶内倒入适量PBS洗液, 转动细胞瓶, 使PBS洗液均匀漫过细胞面, 洗去细胞面上存留的血清和营养液, 然后倒掉PBS洗液。
向细胞瓶中加入适量细胞分散液, 水平方向转动细胞瓶, 使细胞分散液均匀漫过细胞面, 然后水平放置在桌面上, 进行下一瓶消化, 同时经常旋转细胞瓶并密切观察细胞面的变化, 当细胞面上出现肉眼可见毛玻璃样, 或出现针尖大小的缝隙, 或因细胞分散液在瓶内转动而出现细细的划痕时, 即可倒掉细胞分散液并尽量倒净, 将细胞瓶水平放在台案上, 待细胞面出现较大裂痕时, 细胞脱离瓶壁, 此时细胞在分散液的作用下仍继续消化。经漏钟连接营养液, 向瓶内加入含9%血清的细胞生长液, 将细胞摇下, 此时细胞停止消化。
按1:3分散率补足细胞生长液, 将细胞生长液充分混匀, 根据分散率均匀地分装在无菌的细胞培养瓶中, 塞好塞子, 加纸帽扎紧, 摇匀细胞生长液, 将细胞培养瓶放在转瓶机上, 转瓶机转速为8.5r/h, 置于37℃温室中继续培养。48h后镜检观察。
1.2.4 一传二接 (接毒比例不低于0.35%)
操作:从冷库中取出预先冷冻的乳钵, 将半化开的脾毒称取所需重量置于乳钵中研磨、捣碎, 研磨后多加乳汉液, 继续研磨, 让组织中的毒得到充分释放。将种毒吸离心瓶中, 配平、2000r/min 20min离心。将脾毒上清按比例接入细胞瓶中, 继续培养。
1.2.5 二接一收
5d后收获, 将细胞病毒液收于万瓶中, 每转瓶留30ml母液, 加维持液后继续培养, 4天一收, 二收、三收…直至细胞脱落或到八收左右弃去。
1.2.6 取样稀释检验
从收获的万瓶中取1ml样品, 分别稀释5万倍和10万倍, 且各检测5只常温正常且未受过毒兔子, 48h开始每6h测温并记录兔子体温, 直至96h。
2 结果 (见表1、表2)
3 讨论
(1) 从本试验细胞传代过程中如表1可以看出6种分散液消化现象中EDTA胰酶加0.4%酚红消化速度快, 且细胞呈单个, 未见团块;0.25%胰酶:EDTA胰酶=3:2 (一周前配, 刚化) 和0.25%胰酶:EDTA胰酶=4:1 (一周前配, 刚化) 消化速度慢, 未见片状脱落现象, 加液后都仍有团块。48h后观察细胞的生长情况, EDTA胰酶0.05%~0.02%和EDTA胰酶加0.4%酚红48h长满均匀致密的单层;0.25%胰酶:EDTA胰酶=3:2 (一周前配, 刚化) 细胞瓶上细胞非常稀, 弃去;0.25%胰酶:EDTA胰酶=4:1 (一周前配, 刚化) 48h细胞长满不到50%, 60h长满70%。
(2) 通过半成品检验结果表2得到用EDTA胰酶
0.05%~0.02%消化细胞的病毒收获液5万倍稀释检测兔子3只定型热, 2只轻热, 10万倍稀释检测2只定型热, 1只轻热, 2只无反应;用0.25%胰酶:EDTA胰酶=3:2 (现配) 化细胞的病毒收获液5万倍稀释检测兔子2只定型热, 1只轻热, 2只无反应, 10万倍稀释检测2只轻热, 3只无反应;用0.25%胰酶:EDTA胰酶=4:1 (现配) 消化细胞的病毒收获液5万倍稀释检测兔子2只轻热, 3只无反应, 10万倍稀释检测全被无反应;用0.25%胰酶:EDTA胰酶=4:1 (一周前配, 刚化) 消化细胞的病毒收获液5万倍和10万倍稀释检测兔子都无反应;用EDTA胰酶加0.4%酚红消化细胞的病毒收获液5万倍稀释检测兔子4只定型热, 1只轻热, 10万倍稀释检测3只定型热, 2只轻热。
注:++表示定型热;+表示轻热;—表示无反应
本试验中用EDTA胰酶加0.4%酚红消化细胞的病毒收获液检测兔子起温效果最好, 可见细胞消化中分散液对细胞消化的好坏及之后生长起着关键的作用。细胞生长的好坏就直接影响到细胞瓶接毒后细胞毒收获液的效价, 因此细胞消化过程中一定要选择正确的分散液。
参考文献
[1]张延龄, 张晖.疫苗学[M].北京:科学出版社, 2004, 5-8.
[2]佚名.中华人民共和国兽用生物制品规程[C].中华人民共和国农业部, 2000, 45-51.
[3]胡显文, 肖成祖, 李佐虎.细胞工程在生物制药工业中的地位[J].生物技术通讯, 2001, 12 (2) :117-119.
[4]鄂征.组织培养和分子细胞学技术[M].北京出版社, 1995, 76-79.
注射猪瘟疫苗防过敏 篇6
对急性全身性过敏性休克的治疗应争分夺秒, 首选盐酸肾上腺素进行肌肉注射。0.1%盐酸肾上腺素注射液的用量为每头初生仔猪0.1~0.2毫升, 每头断奶仔猪0.3~0.4毫升, 每头30千克以上体重的猪0.5~1毫升, 必要时可于第一次注射后2~60秒进行第二次注射。肾上腺素的注射剂量不可过大, 因为超剂量的肾上腺素会引起猪心动过速、心室颤动乃至猝死。也可肌肉注射糖皮质激素类药物, 如地塞米松注射液等, 以增强机体的抗休克能力, 其用量为每头初生仔猪2.5毫克, 每头断奶仔猪5~10毫克, 每头生长育肥猪10~30毫克, 必要时可于4~8小时后以首次用量的1/3进行重复注射。
用抗组胺类药物可以缓解或消除荨麻疹、眼睑水肿、腹泻及支气管痉挛等过敏症状。常用的此类药物有盐酸苯海拉明注射液, 肌肉注射剂量为20~60毫克/千克体重, 此药作用快、维持时间短, 每天可用药3~4次, 直至过敏症状消失。同类的药物还有, 可选用一些维持时间较长、镇静作用好的。也可肌肉注射扑尔敏, 以降低毛细血管的通透性, 减轻肿胀、渗出症状。还可注射钙制剂, 如维丁胶性钙, 每次每头1~5毫升, 每天1次, 连用数日。但对过敏症状严重的病猪, 特别是发生急性过敏休克时, 单独使用抗组胺类药物治疗效果不大, 它不能代替肾上腺素和地塞米松等药物。
若发生过敏反应的病猪体温超过40℃, 可注射复方氨基比林;若发生过敏反应的病猪心脏衰竭、皮肤发绀, 可注射安钠咖, 并注意保温, 将其置于安静通风处, 给予充足的干净饮水。对于发生轻度过敏反应的病猪, 将其置于适宜环境下1~2天症状即可自行减轻或消失, 最好不用任何药物。
猪瘟疫苗在猪瘟防治上的应用技术 篇7
猪瘟 (CSF) 是一种严重危害养猪业的古老传染病之一, 其流行范围之广, 几乎世界各地都有发生。在上世纪50年代, 我国经过改进, 利用猪瘟结晶紫疫苗来防治CSF的发生;随后我国兽医界科学家方世杰、周太冲和李继庚通过将CSF石门系强毒在兔体上传代几百代后培育成功了一株猪瘟兔化弱毒疫苗 (国际上称C株) , 为我国CSF防治做出了巨大的贡献, 甚至在世界上目前也是最好的猪瘟疫苗, 有的国家利用此疫苗已经消灭了CSF。
2 当前猪瘟免疫失败的主要原因
在我国, 由于庭院式饲养还占有很大比例, 规模化猪场规范程度差, 各猪场技术水平不高和防疫设施不健全, 长此以往便形成了CSF带毒母猪持续感染, 为CSF的水平传播和垂直传播提供了前提条件。而CSF带毒母猪持续感染, 可以产下经胎盘感染的仔猪, 这种猪如果存活则成为持续感染者, 并对猪瘟疫苗的免疫形成免疫耐受, 这就是当前造成猪瘟疫苗免疫失败的重要原因。
3 常用猪瘟疫苗介绍
目前, 在我国由于制造工艺的不同, 利用猪瘟兔化弱毒株生产的常用猪瘟疫苗有:猪瘟活疫苗 (Ⅰ) (包括猪瘟淋脾苗和猪瘟乳兔苗) 和猪瘟活疫苗 (Ⅱ) (就是猪瘟兔化细胞苗) 。
猪瘟淋脾苗, 是猪瘟兔化弱毒株接种成年家兔, 无菌收获含毒量高的淋巴结、脾脏制备而成的疫苗。其特点是免疫原性强, 免疫效果最好;免疫后抗体产生快, 持续时间长;淋脾苗中含有某些免疫相关因子, 起到免疫增强作用;可用于紧急预防接种, 效果好于细胞苗;使用计量相对较小, 一般是1~2头份;但由于用活体动物生产, 生产量非常少, 所以成本高。
猪瘟乳兔苗, 是猪瘟兔化弱毒株接种乳兔, 无菌收获乳兔的肌肉及实质脏器制备的疫苗。其特点是免疫原性较强, 免疫效果较好;免疫后抗体产生较快, 持续时间较长;淋脾苗中含有某些免疫相关因子, 起到免疫增强作用;使用计量相对小, 一般是1~2头份;但由于用活体动物生产, 生产量较少, 所以成本较高。
猪瘟细胞苗, 猪瘟兔化弱毒株接种犊牛睾丸细胞培养, 收获细胞培养物, 冷冻干燥制成的疫苗。其特点是免疫后抗体产生慢于组织苗;一般使用剂量相对较大, 2~4头份, 甚至更多;细胞生产, 生产量大, 价格便宜;可用于超前免疫。
乳兔苗禁止与菌苗同时注射。该疫苗要在-15℃以下避光保存, 有效期为12个月。细胞苗大小猪都可使用。注射4天后即可产生免疫力, 注射后免疫期可达12个月。该疫苗宜在-15℃以下保存, 有效期为18个月。注射前应了解当地确无疫病流行。断奶前仔猪可接种4头份疫苗, 以防母源抗体干扰。淋脾苗在-15℃以下避光保存, 有效期为12个月。猪瘟活疫苗 (I) 稀释后, 应放在冷藏容器内, 严禁结冰, 如气温在15℃以下, 6小时内要用完;如气温在15℃~27℃, 应在3小时内用完。猪瘟活疫苗 (II) 随用随稀释, 稀释后的疫苗应放冷暗处, 并限2小时内用完。以上三种疫苗使用时按瓶签注明头份用无菌生理盐水按每头份1毫升稀释, 肌肉或皮下注射。注射以上三种疫苗后, 均可能有少数猪在1~2天内发生反应, 但3日后即可恢复正常。注苗后如出现过敏反应, 应及时注射抗过敏药物, 如肾上腺素等。疫苗注射的时间最好是进食后2小时或进食前。猪瘟活疫苗 (I) 建议在加强免疫 (如商品猪的第二次免疫和母猪的常规免疫接种) 时, 或者在紧急接种时使用。猪瘟活疫苗II建议在首次免疫或乳前免疫 (超免) 时使用。猪瘟疫苗与蓝耳病疫苗免疫至少要间隔一周以上时间。
4 对猪瘟组织苗与细胞苗的再认识
近几年来, 好多专家对猪瘟疫苗的免疫效果进行了大量的研究, 通过试验, 得出了对以上两类疫苗免疫特点。最有代表性的是广西大学的陆芹章和广西兽医研究所的吴健敏在对猪瘟牛睾丸细胞苗与兔体组织苗免疫效果的比较观察试验中发现, 无论是母猪产生的主动免疫, 还是仔猪获得的被动免疫水平, 1头份组织苗产生的免疫效果均达到或超过4头份细胞苗的免疫效果, 组织苗获得的母源抗体水平维持时间较长, 且离散度小, 猪场由细胞苗改为组织苗免疫后, 仔猪的成活率提高了6~8个百分点。广西兽医研究所蒋冬福和广西大学施万球等在兔脾淋组织液对猪瘟疫苗的免疫增强试验中发现1%的健康兔脾淋组织液对猪瘟兔化弱毒细胞疫苗有明显的免疫增强作用, 与用生理盐水稀释猪瘟细胞苗相比两者差异极显著, 原因是兔脾淋组织液中可能富含与免疫相关的细胞因子, 可以提高机体产生抗体的能力。江西科技师范学院专科部动物疫病防治实用技术研究所的刘新平和南昌大学医学院实验动物科学部的许宝华在兔脾淋组织液增强猪瘟细胞苗免疫抗体效价的试验中发现, 用兔脾淋组织液稀释猪瘟细胞苗免疫猪比用生理盐水稀释猪瘟细胞苗免疫猪可产生更高的保护性抗体效价, 两者的差异均极显著 (P<0.01) 。福建省清流县畜牧水产局的沈意兴和福建农林大学动物科学学院的王全溪在不同猪瘟疫苗对仔猪免疫效果对比试验中发现:猪瘟脾淋苗免疫效果最好 (P<0.O1) , 而猪瘟细胞苗和组织苗两者抗体水平差异不显着 (P>0.05) , 但从总体上看3种疫苗使用2头份剂量免疫都能使仔猪获得良好的保护力。
中国兽医药品监察所国家猪瘟参考实验室的王琴、宁宜宝在进行的猪瘟兔化弱毒疫苗对不同CSF野毒株的免疫保护相关性研究结果表明:虽然在我国不同地区所分离的CSFV野毒株在其病原生物学上有所差异, 但用我国目前使用的猪瘟兔化弱毒疫苗免疫的猪完全能够抵抗这些野毒的攻击。结果再一次证明:我国现用的猪瘟兔化弱毒疫苗对预防目前流行的CSFV是完全有效的。
据南京农业大学动物医学院蔡宝祥在《当前我国猪瘟防制中存在的问题和对策》中介绍, 用不同剂量的C株苗免疫猪, 证实免疫剂量与保护水平密切相关。剂量不足时, 攻毒后不能阻止强毒在体内复制和带毒。免疫剂量提高到80~100PD50 (约320~400 RID, RID为兔体反应量) , 攻毒后能制止亚临床感染, 所有耐过猪均不带毒。目前欧洲为消灭CSF亚临床感染, 多采用加大免疫剂量的方法。欧洲药典规定用C株疫苗免疫时, 肌肉注射剂量为100PD50 (400RID) 。以前我国猪瘟细胞苗规定的标准免疫剂量为150RID, 折算为37PD50。这一剂量远低于国际标准, 显然在CSF不稳定地区应用这一剂量, 不足以切断CSF亚临床感染引起的恶性循环。现在我国猪瘟细胞苗规定的标准免疫剂量为750RID, 折算为187PD50;猪瘟组织苗规定的免疫剂量为150RID, 折算为37PD50。但不要误认为1头份的细胞苗相当于5头份的脾淋苗。而恰恰相反, 在实际使用及初步的试验中表明1头份脾淋苗可当数头份细胞苗使用。因此, 近年来有的疫苗生产厂家, 已将C株牛睾细胞苗的每头份病毒的含量提高到不低于或等于7500个RID, 这已相当原来每头份150个RID的10倍, 所以不需要再增加剂量使用, 在生产中一般要咨询疫苗生产厂家所说的猪瘟疫苗每头份的免疫剂量做出决定。猪瘟细胞苗便于工厂化大量生产, 且成本较低。在每次免疫剂量不低于750RID的情况下, 已可达到既能防止临床发病, 又能保护不发生亚临床感染, 所谓达到了“双保护”的水平, 所以使用猪瘟细胞苗免疫在一般情况下即可以满足需要。
5 猪瘟疫苗使用注意事项
根据以上研究, 再结合蔡宝祥文中的方法以及疫苗生产厂家对猪瘟淋脾苗和细胞苗的咨询结果, 提出以下几点今后猪瘟疫苗使用注意事项, 供大家参考。
5.1 超前免疫
在进行超前免疫时一定要真正做到仔猪不吃初乳, 实现完全意义上的“超前”免疫, 如果做不到这点, 最后的效果还不如20日龄以后免疫。超前免疫一般使用猪瘟弱毒细胞苗免疫, 不建议使用组织苗, 但有的淋脾苗上也有超前免疫的说明, 所以这就要看疫苗使用说明书了。
5.2 猪瘟疫苗的选择
对于饲养管理条件较好、无疫病流行的猪场, 使用猪瘟细胞苗和组织苗的免疫效果相当。但对于一直使用细胞苗免疫的猪场, 如果饲养环境、管理条件较差, CSF免疫抗体水平参差不齐, 效价不高, 又有散发性CSF存在, 可考虑用组织苗替代细胞苗进行CSF免疫, 以提高猪群整体CSF抗体水平。也就是说对于没有CSF发生的猪场, 或者CSF发生可控的猪场, 选择猪瘟细胞苗来防治就可以了。对于CSF常发猪场, 也就是CSF难以控制的有CSF持续感染的猪场和对于紧急免疫的猪群, 应该选用猪瘟淋脾组织苗进行预防。至于猪瘟乳兔组织苗, 由于价钱较高, 免疫效果和细胞苗相差不大, 笔者认为不选用。
5.3 猪瘟疫苗的免疫剂量
猪瘟淋脾组织苗免疫剂量应以不低于150RID为易, 猪瘟细胞苗剂量应以不低于750RID为易, 不必要盲目的再加大免疫剂量, 造成养猪生产上的经费投入。目前, 由于猪瘟疫苗生产厂家生产的疫苗每头份的免疫剂量不尽相同, 所以, 在免疫前最好要了解所使用疫苗的每头份的免疫剂量, 可以通过疫苗生产厂家的技术咨询电话了解, 这样最为可靠。
5.4 猪瘟疫苗的免疫时间
最好要通过对免疫抗体的监测做出决定, 但多数人们采用:仔猪22~25日龄首免, 60~70日龄二免。种母猪在断奶后配种前免疫, 种公猪每年免疫2次。
5.5 加强疫苗的运输、保存和使用等环节上的管理
这是确保疫苗使用有效性不可忽视的环节。
5.6 选用信誉度高的疫苗生产厂家生产的疫苗
这是防止CSF免疫失败的前提, 必要时可以和该疫苗生产厂家的技术服务部门进行技术咨询, 进一步了解该疫苗的特点和使用方法。