脂氧化酶（共9篇）
脂氧化酶 篇1
随着中国特色军事变革和军事斗争准备的不断深入,潜艇艇员在特殊的环境中长时间的受到高温、噪声、振动、颠簸、压力、电磁辐射、有害气体等各种有害因素的作用和影响,由于他们生活在密闭的仓室中,高负荷训练,远航的劳累,常会使他们的机体免疫功能降低,身体处于亚健康状态,保健疗养对他们来说至关重要,笔者对潜艇艇员在疗养前后作了血液过氧化脂质的检测,探讨在疗养环境中,通过各种疗养措施,促使他们增强抗氧化能力,恢复体力和增进健康
1 对象与方法
1.1 对象
来院疗养的潜艇艇员63例,入院疗养时间22~25d,均为男性,最小年龄为21岁,最大年龄35岁,平均年龄(31.3±2.57)岁。
1.2 标本采集
疗养入院时和疗养结束时,空腹静脉采血,分离血清当天测定血液过氧化脂质(B-LPO)。
1.3 检测方法
采用比色分析法检测,试剂由南京建成工程研究所生产。
1.4 统计学处理
计量资料用均数±标准差(x-±s)表示,显著性检验用t检验,以P<0.05为有统计学意义。
2 结果
潜艇艇员疗养后比疗养前的血液过氧化脂质,明显下降t=9.71,P<0.001,见表1。
3 讨论
(1)机体抗氧化能力与不断产生氧自由基和脂质过氧化能力之间保持动态平衡,若自由基和脂质过氧化产生过多或机体抗氧化能力下降,将导致机体损伤,大量的自由基和脂质过氧化的产生可直接损伤细胞膜或具有膜结构的内质网、溶酶体和线粒体,同时可损伤细胞DNA等结构,促进某些疾病的发生发展[1]。
(2)潜艇艇员的过氧化脂质疗养前显著高于疗养后,说明疗养前他们在特殊的环境中[2]各种有害因素促使他们体内脂质过氧化明显加剧。在疗养期间,疗养院采用各种疗养措施,如疗养体疗、理疗、游览、膳食、文化娱乐以及疗养院的各种自然疗养因子的集合作用,从而使他们消除疲劳、阻断有害因子对他们的连结作用,让他们情绪得以松弛,身心充分休息,加快了他们的肌体得到恢复,此研究结果表明疗养后的过氧化脂质低于疗养前,与周应玉等[3]报道的相符,疗养后他们的体内脂质过氧化反应明显减弱,那么血液过氧化脂质可以作为评定疗养效果的一个指标。为做好海勤卫生保障有重要意义。疗养不同于一般的休息,保健疗养是对艇员实行的一种健康保护制度,疗养院严格按潜艇人员疗养工作规定实施,完成疗养的全过程,通过保健疗养,使其达到在躯体上、心理上、社会上完好状态的健康水平。
(3)疗养效果是疗养质量综合效应的集中体现,评价疗养质量应具有较强的客观性、真实性、可比性、科学性。疗养效果评价有主观、客观、心理、体力等6个指标[4]。除了6个指标外,可增加反映机体氧化和抗氧化的指标,来达到保健疗养综合评价的可比性、科学性。
参考文献
[1]陈同武,赵维中,宋必已,等.芸番苷对缺血再灌注损伤的保护作用[J].中国药理学通报,1998,14:81～83.
[2]贾妙兴,陈赛铮.潜艇长航后艇员血液过氧化脂质的检测[J].海军医学杂志,2003,24:384.
[3]周应玉,李交杰.飞行员疗养前后血浆尿液过氧化脂质测定[J].中国疗养学,1997,6:12～13.
[4]曹国英.疗养技术常规[M].北京:人民军医出版社出版,1999.
脂氧化酶 篇2
蔓割病对甘薯叶片脂质过氧化及某些保护酶活性的影响
研究了不同抗性甘薯品种感染蔓割病病原菌后叶片细胞质膜相对透性、丙二醛(MDA)含量和某些保护酶活性的动态变化.结果表明:接种后第10天,病株质膜的相对透性、脂质过氧化产物MDA含量高于未接种的`健株,感病品种高于抗病品种;随着接种时间的延长,保护酶活性逐渐下降,且感病品种下降速率高于抗病品种;抗病品种金山57在感病后能使细胞内MDA、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的代谢基本恢复到正常状态,其自我调节能力显著大于感病品种岩薯8-6.
作 者：代红军 DAI Hong-jun 作者单位：宁夏大学农学院,宁夏,银川,750021刊 名：安徽农业科学 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES年，卷(期)：34(14)分类号：Q946-33关键词：甘薯蔓割病 脂质过氧化 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 质膜透性
脂氧化酶 篇3
[关键词] 青钱柳;提取物;脂质过氧化;自由基
文章编号:1003-1383(2009)04-0381-03
中图分类号:R 963
文献标识码:A
青钱柳[Cyclocarya paliurus(Batal) Iljinskaya](CPS)又名青钱李(江西),系双子叶植物纲(Dicotyledoneae)胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属植物,它是我国独有珍稀树种资源[1],分布于广西、江西、浙江等地的山区、溪谷或石灰岩山地,为广西特色植物。据《中国中药志要》记载,其树皮、树叶具有清热解毒,止痛功能,可用于治疗顽癣。长期以来民间用其叶片做茶,因其味甜有清热解暑、降糖、降压的功效,又称为甜茶,神茶等[2]。青钱柳干叶的主要成分有糖、氨基酸、有机酸、黄酮、酸性物质、内酯、香豆精、三萜及皂甙、甾醇等[2]。我国从1970年开始对青钱柳进行药用开发研究,发现青钱柳具有明显的降血糖、降血压、减肥、抗肿瘤、抗衰老、抗过敏、清热解暑、提高人体免疫力、促进新陈代谢等多种功效,尤其对治疗糖尿病有显著疗效[3]。本实验对青钱柳不同提取物的体外抗氧化性进行了研究,为更进一步开发青钱柳保健产品提供理论依据。
材料与方法
1.动物 昆明种小鼠,雌雄各半,体重(20±2)g,由桂林医学院实验动物中心提供。
2.实验材料与仪器 青钱柳采自广西阳朔县白沙镇青钱柳基地,752GW型紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)、FA2004电子天平(上海精科天平)、小型三用水箱(北京医疗设备厂)、XHB型旋涡混合器(江苏康健医疗用品有限公司)、LD0.8离心机(北京医用离心机厂)、旋转蒸发器(RE52型,上海亚荣仪器厂生产)。
3.试剂 丙二醛(MDA)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、无水乙醇、蒸馏水、邻二氮菲、硫酸亚铁、过氧化氢均为分析纯,PBS液为自制。
4.实验方法
(1)青钱柳不同溶剂提取物的制备 取烘干过筛的青钱柳粉末,分别按固液比1∶20加入去离子水,用旋转蒸发器提取2 h,过滤,去残渣。滤液分两部分,一部分加入80%乙醇提取后再用水提取,利用水提醇沉淀法[4]用三氯醋酸去蛋白质后得到青钱柳多糖合物,另一部分加入80%乙醇,提取1.5 h,分别用正丁醇、乙酸乙酯、石油醚萃取,得正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物,最后剩余的为水提物。各提取物均用真空浓缩至膏状,并于40℃真空干燥,冷藏备用。
(2)CPS对小鼠肝脏自发性脂质过氧化的影响 小鼠禁食12 h后摘除眼球放血处死,取肝,在0~4℃下用生理盐水制成5%肝匀浆。实验分为对照组(10%肝匀浆)、阳性组(VitC)和高、中、低3个剂量的青钱柳提取物组(10%肝匀浆和青钱柳不同溶剂提取物配液)。以硫代巴比妥酸法测定MDA含量,并计算抑制率:
抑制率(IR)=(对照组MDA-提取物组MDA)/对照组MDA。
(3)CPS对羟自由基的清除作用
采用亚铁离子催化过氧化氢产生(•OH)的方法。在样品管中加0.75 mmol/L的邻二氮菲溶液1 ml,PBS 2 ml和1 ml样品,旋涡混合器混匀后,加0.75 mmol/L的硫酸亚铁溶液1 ml,旋涡混合器混匀后,加0.01%过氧化氢溶液1 ml,置恒温水浴中37℃保温1 h。反应液置比色皿中,于分光光度计中在536 nm测定吸光度As。用1 ml蒸馏水代替1 ml样品,测定吸光度为Ap。吸光度为Ab的管不加过氧化氢和样品,都以蒸馏水代替。按以下公式计算羟自由基的清除率(d%):d%=(As-Ap)/(Ab-Ap)×100。
5.统计学处理 计量资料以均数±标准差(-±s)表示,采用EXCEL统计软件以t检验进行统计学处理,以P<0.05为有统计学意义。
结果
1.CPS对小鼠肝脏自发性脂质过氧化的影响 青钱柳各提取物对MDA的生成均有抑制作用,随着各提取物浓度增加,部分提取物的抑制率也会相应增高。五种提取物中对MDA抑制最强的为正丁醇提取物,在浓度为1.0 mg•ml-1时,对小鼠肝组织自发性MDA的抑制率大小为:正丁醇>石油醚>多糖>水>乙酸乙酯。见表1。
表1 CPS对小鼠肝脏自发性脂质过氧化的影响(-±s,n=6)
组别浓度(mg•ml-1)MDA(nmol•mgprot-1)抑制率(%)
对照组 11.388 ±0.306
VitC1.06.831±0.221※40.0
正丁醇提取物0.18.826 ±0.405※22.5
0.56.522 ±0.385※42.7
1.05.646 ±0.363※50.4
水提物0.19.742 ±0.164※14.5
0.58.715 ±0.325※23.5
1.07.844 ±0.386※31.1
多糖合物0.18.652 ±0.368※24.0
0.56.788 ±0.386※40.4
1.07.257±0.383※36.3
乙酸乙酯提取物0.18.531 ±0.459※25.1
0.58.848 ±0.317※22.3
1.08.528 ±0.388※25.1
石油醚提取物0.19.284 ±0.315※18.5
0.57.488 ±0.243※34.2
1.07.081 ±0.571※37.8
注:与正常对照组比: ※P<0.01
2.CPS对羟自由基的清除作用 CPS对•OH有清除作用,且作用较强。特别是正丁醇提取物、水提物和多糖合物,最高清除率可高达80%以上。随着各提取物浓度的增加,对•OH自由基的清除率不断增大。但到了一定浓度,再增加其浓度,反而清除率有所降低。
半清除率(IC50)指清除率为50%时所需样品的浓度,根据不同浓度样品的清除率作曲线求出。所需浓度越低,表明半清除率越高,清除效果越好。通过计算所得IC50值,可比较各青钱柳提取物对羟自由基的清除率:水>石油醚>正丁醇>多糖>乙酸乙酯。见表2。
表2 CPS对•OH自由基的清除作用(-±s,n=6)
观察项目水提物
石油醚提取物
正丁醇提取浓度(mg•ml-1)0.020.050.100.150.300.250.300.400.050.100.15
0.300.50
清除率(%)33.7±1.243.1±1.552.5±0.961.0±1.294.5±1.741.3±0.753.9±1.675.7±1.2
3.0±0.99.2±1.719.0±01.641.7±1.290.4±1.2
IC50(mg•ml-1)0.09
0.29
0.31
(续)表2
观察项目多糖合物
乙酸乙酯提取物
浓度(mg•ml-1)0.300.400.500.600.700.800.900.250.300.350.40
清除率(%)44.3±0.955.0±00.762.4±1.171.0±60.780.0±0.987.8±0.983.9±1.218.6±0.9
40.1±1.247.7±0.721.6±1.2
IC50(mg•ml-1)0.33
0.35
讨论
青钱柳为广西特有珍稀植物,对它的开发利用还十分有限,青钱柳既有明显的药理价值又具备一定的食品保健功能,进行工业化开发利用前景十分广阔。针对青钱柳叶中含有黄酮、多糖、内酯等多种有效成分,本实验提取了五种青钱柳提取物,考察青钱柳的体外抗氧化活性,为其药理作用提供科学依据。
脂质过氧化产物丙二醛等可导致人体细胞氧化损害、老化、致癌和动脉硬化等多种疾病。过氧化脂质大部分由肝细胞产生,其分解也主要在肝脏。MDA是过氧化脂质的主要降解产物,其含量可反映脂质过氧化的程度。故MDA的水平测定可用作检测抗过氧化作用。本实验结果表明,CPS可明显降低小鼠自发性MDA的生成,且活性与浓度有明显的量效关系。
羟自由基是反应药物抗氧化活性的重要指标。本实验利用Fenton反应产生羟自由基:H2O2+Fe2+=•OH+OH+Fe3+。Fe2+与邻二氮菲生成红色配合物,加入CPS后,减弱了•OH对Fe2+/邻二氮菲的氧化作用,引起自由基的变化,通过测定其吸光度值的变化,推断CPS对•OH的作用。结果表明CPS对羟自由基有较好清除作用,是天然高效的自由基清除剂。
CPS较高的体外抗氧化活性可能与其中含有黄酮类化合物有关。黄酮类化合物具有的多酚结构,能提供活泼质子,与自由基结合成稳定的产物,因而有较强的抗氧化作用[5]。黄酮类成分具有保肝、扩冠、抗炎、降低血管脆性,解除痉挛,增强心脏收缩,还有一定程度的抗菌及抑制肿瘤细胞等作用。同茶叶相比,青钱柳黄酮类化合物含量相对较高,可作为这些物质的补充源[6]。
参考文献
[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].第21卷.北京:科学出版社,1979,18-19.
[2]谢明勇,李 磊.青钱柳化学成份和生物活性研究概况[J].中草药,2001,32(4):365-366.
[3]柳板誉,梁彦兰.混交林中青钱柳生长规律的研究[J].江西农业大学学报,2004,26(3):381-385.
[4]王著禄,陈海生,郑钦岳,等.商陆多糖的分离和纯化[J].第二军医大学学报,1990,11(1):56.
[5]张培刚,郑鸿雁,昌有权,等.松针黄酮的体外抗氧化作用研究[J].食品科学,2005,26(9):506-508.
[6]谢明勇,王远兴,温辉梁,等.青钱柳中黄酮甙和维生素含量的测定[J].食品科学,2001,22(1):66-68.
(收稿日期:2009-05-18 修回日期:2009-07-15)
脂氧化酶 篇4
1 材料与方法
1.1 实验动物
80只昆明系小鼠,雌雄各半,体重18~20 g,由济宁医学院动物研究实验中心提供,动物质量合格许可证编号:SCXK(晋)2009-0001。
1.2 仪器与试剂
BFG 350粉尘采样器(江苏金坛医疗仪器厂),ND10型声级计(江西国营红产器材厂),ZD J-1型人体振动仪(北京同德创业科技有限公司),722分光光度计(上海第三分析仪器厂),恒温水浴箱,离心机(北京医用离心机厂),漩涡混匀器。MDA、SOD、GSH试剂盒均购自南京生物建成研究所。
1.3 方法
1.3.1 动物分组及染毒
80只小鼠随机分为4组,每组20只,低剂量组每天暴露2 h,中剂量组每天暴露4 h,高剂量组每天暴露8 h,对照组不接受暴露。于石雕作业现场的下风向暴露15 d后从每组取10只鼠立即采血检测,剩余小鼠脱离石雕作业环境继续饲养15 d后重复实验。期间小鼠无死亡。
1.3.2 样本的采集及测定
于末次暴露后,立即从每组取10只鼠摘眼球取血,枸橼酸钠抗凝,3500转/min,离心10 min(离心力为r=1300g),取上清液,按照试剂盒内说明书测定MDA含量和SOD、GSH-Px的活力;剩余的脱离石雕作业环境的小鼠,15 d后重复上述过程。
1.4 统计学分析
采用SPSS 18.0统计软件进行分析,数据以±s表示,对同一时间点不同剂量组的数据进行组间F检验,进一步LSD法两两比较;对同一染毒剂量不同时间点的数据进行t检验,检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 现场职业危害因素水平
石雕作业环境3个主要的职业危害因素的水平为:粉尘浓度(125.33±63.18)mg/m3,噪声强度90.0~91.7 d B(A),振动强度8.5~10.5 m/s2。
2.2暴露结束后0 d和15 d小鼠血浆MDA含量
暴露结束后0 d、15 d各暴露组小鼠血浆中MDA含量均较对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。相同染毒剂量暴露结束后0 d与15 d小鼠血浆MDA含量比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。见表1。
注:MDA—丙二醛;与同组内对照组比较,aP<0.05;同剂量组与0 d比较,bP<0.05。
2.3 暴露结束后0 d和15 d小鼠血浆SOD活力
暴露结束后0 d组间小鼠血浆SOD活力差异有统计学意义(P<0.05),进一步两两比较,仅高剂量组与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。暴露结束后15 d组间小鼠血浆SOD活力差异亦有统计学意义(P<0.05),进一步两两比较,中、高剂量组与对照差异有统计学意义(P<0.05)。相同染毒剂量暴露结束后0 d与15 d小鼠血浆SOD活力比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。见表2。
注:SDD—超氧化物歧化酶;与同组内对照组比较,aP<0.05。
2.4 暴露结束后0 d和15 d小鼠血浆GSH-PX活力
暴露结束后0 d组间小鼠血浆GSH-PX活力差异有统计学意义(P<0.05),进一步两两比较,仅高剂量组与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。露结束后15 d组间小鼠血浆GSH-PX活力差异无统计学意义(P>0.05)。相同染毒剂量暴露结束后0 d与15 d小鼠血浆GSH-PX活力比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。见表3。
注:GSH-PX—谷胱甘肽过氧化物酶;与同组内对照组比较,aP<0.05。
3 讨论
噪声、粉尘、振动是石雕加工类作业最常见的3种职业病危害因素,这些因素混合在一起,可产生比单一因素更强的危害。本研究对石雕作业环境进行了检测,发现其噪声、粉尘和振动的强度均超过国家卫生标准。
在正常生理状况下,机体在代谢过程中可不断产生、·OH等自由基,自由基首先攻击细胞膜,造成细胞膜的脂质过氧化,生成脂质过氧化产物MDA,然后再进入细胞内,攻击细胞内的其他大分子物质,但在机体抗氧化系统的作用下,自由基又不断被SOD、GSH-PX等抗氧化物质清除,从而维持机体的动态平衡,一旦产生的自由基的量超过机体的清除能力,则会产生危害[5,6]。许多物理、化学因素都可导致机体产生的自由基攻击包括DNA、脂质、蛋白质、糖类等在内的几乎所有生物分子,从而影响细胞的增殖、分化、凋亡、坏死等重要的病理、生理过程,最终导致细胞死亡[6,7,8]。基于此,本研究将小鼠置于石雕作业环境中,观察其脂质过氧化在其发病中的作用。
本研究结果显示,暴露刚结束时与暴露结束15 d后小鼠血浆MDA含量、SOD及GSH-PX活力均发生了改变。暴露刚结束时,各剂量组小鼠血浆MDA含量与对照组比明显升高,且随剂量的增加逐渐增高。同时,各组反应机体抗氧化能力的SOD和GSH-PX活力较对照组降低。暴露结束后15 d,各剂量组小鼠血浆MDA含量均高于对照组,但与同染毒剂量暴露刚结束时相比,已有所降低;SOD活力也存在统计学差异,而GSH-PX活力则未出现统计学差异。究其原因,可能是毒物导致机体脂质过氧化增加,从而导致MDA含量升高[9],而SOD、GSH作为抗氧化物质在清除MDA过程中出现进行性消耗,导致活力水平下降[10]。相同染毒剂量暴露结束15 d后MDA含量与暴露刚结束时相比有所下降,而SOD和GSH-PX活力则无统计学差异,说明物理因素导致的自由基损伤得到了一定程度的修复,这时候由于无持续性的毒物进入,SOD和GSH-PX没有再被诱导产生。由于还在修复过程中,暴露结束15 d后MDA和SOD的水平仍与对照组不同,而GSH-PX恢复较快,已恢复正常。可以判断,在经过一段时间后,各指标均会逐渐恢复正常。
本研究表明,作为衡量脂质过氧化的指标,MDA、SOD和GSH-PX在职业危害的评价中具有特殊的作用[11]。将小鼠置于石雕作业环境15 d,分别测终止接触0和15 d两个时间点的MDA、SOD、GSH-PX的变化,有助于了解石雕作业产生职业危害的机制及其脱离后的可逆性变化,为职业健康检查和临床治疗提供理论依据。
作者声明 本文无实际或潜在的利益冲突
参考文献
[1]聂继池,张兆强,韩贵芝,等.某企业石雕作业工人疲劳度水平调查[J].环境与职业医学,2014,31(7):531-533.
[2]MUKHOPADHYAY P,SRIVASTAVA S.Evaluating ergonomic risk factors in non-regulated stone carving units of Jaipur[J].Work,2010,35(1):87-99.
[3]张丽菊,张兆强,聂继池,等.粉尘、噪声和高温联合作用对小鼠运动及抗疲劳能力的影响[J].职业与健康,2014,30(10):1334-1336.
[4]张兆强,公维磊,徐晶,等.石雕作业职业病危害因素对小鼠学习记忆能力的影响及其作用机制[J].职业与健康,2015,31(9):1176-1178.
[5]RAHMAN K.Studies on free radicals,antioxidants,and co-factors[J].Clin Interv Aging,2007,2(2):219-236.
[6]LOBO V,PATIL A,PHATAK A,et al.Free radicals,antioxidants and functional foods:Impact on human health[J].Pharmacogn Rev,2010,4(8):118-126.
[7]韩维举,陈星睿.噪声暴露引起耳蜗损伤机制的研究[J].中华耳科学杂志,2013,11(3):357-361.
[8]林立,张春之,隋桂英,等.局部振动对家兔外周血中脂质过氧化的影响[J].职业与环境医学,2004,21(3):218-220.
[9]ABOLAJI AO,ADEDARA IA,SOLADOGUN A,et al.Exposure to2,5-hexanedione is accompanied by ovarian and uterine oxidative stress and disruption of endocrine balance in rats[J].Drug and chemical toxicology,2015,38(4):400-407.
[10]BARONE E,CENINI G,DI DOMENICO F,et al.Basal brain oxidative and nitrative stress levels are finely regulated by the interplay between superoxidedismutase 2 and p53[J].Journal of neuroscience research,2015,93(11):1728-1739.
脂氧化酶 篇5
1 材料与方法
1.1 材料和仪器
25 mm×5 mm×3 mm氧化锆(ZrO2, 3 mol% Y2O3)、氧化铝(含95% Al2O3)陶瓷坯各48 片。高温陶瓷烧结炉(KSL1700X,MTI Corporation),BPS2型双笔式喷砂机(海德医疗设备厂,天津)。 Superbond C﹠B树脂超级粘接剂,陶瓷前处理剂Porcelain Liner M(SUN Medical,Japan); PanaviaTM F含氟树脂粘合剂,可乐丽菲露SE BOND Primer(Kuraray Medical,Japan); RelyXTMUnicem(3M公司,美国)。M350- 20KN CX型万能材料试验机(Testometric公司,英国),Shimadzu SS- 550扫描电子显微镜(岛津,日本),倒置显微镜(Olympus,日本)。
1.2 氧化物陶瓷片的制备
将压制好的ZrO2及Al2O3陶瓷坯切割成10 mm×5 mm×3 mm的条形并放于高温烧结炉中经过4 次升温至1 550 ℃烧结550 min,自然冷却后取出并检测断裂强度及密度。将烧结完成的瓷片用丙酮清洗,再依次用220、400、600 目砂纸打磨陶瓷表面(即5 mm×3 mm的粘接面)。
1.3 试件的制备
1.3.1 粘接前处理
将打磨好暴露新鲜瓷面的陶瓷片在0.4 MPa的压力下用110 μm的Al2O3距离10 mm喷砂15 s, 然后用无水酒精和蒸馏水分别超声清洗10 min并将2 种瓷片各自随机分为3 组,每组16 片。 Superbond C﹠B与Al2O3粘接为SA组,与ZrO2粘接为SZ 组;PanaviaTM F与Al2O3粘接为PA 组,与ZrO2粘接为PZ组;RelyXTMUnicem与Al2O3粘接为 RA组, 与ZrO2粘接为RZ组。各组吹干,待粘接。
1.3.2 试件的粘接
将与Superbond C﹠B配套的Porcelain Liner M以及与PanaviaTM F配套的SE BOND Primer分别对相应组陶瓷粘接面进行粘接前预处理。3 种粘接剂调拌均匀后严格按照使用说明涂布在每组中任意2 个瓷片的粘接面进行指压对位粘接,直至粘接剂完全固化,室温静置10 min后将各组试件放于37 ℃水浴,24 h后测试抗剪强度。以上所有操作均由同一个操作者完成,操作手法相同。
1.4 粘接抗剪强度的测定
用万能材料试验机分别对各组试样进行粘接抗剪强度的测试。测试时试件置于特制夹具中固定,剪切方向与陶瓷粘接面相平行,加载速度为1.0 mm/min(图 1),直至试样上的粘接面破坏,显示器上自动记录此时的剪切力值(N)。根据抗剪强度计算公式[3]t=P/S计算每个试件的粘接抗剪强度。其中t指抗剪强度(MPa);P指粘接破坏的最大剪切力(N); S指粘接面积(mm2)。对每组8 个试件所测得的结果取平均值即为其粘接抗剪强度。
1.5 统计学分析
实验结果使用SAS 9.12统计软件处理,进行单因
素方差分析以及2 组独立样本资料t检验,各项分析的检验水准均为α=0. 05, P<0.05时差异有统计学意义, P<0.01时差异具有高度统计学意义。
1.6 粘接断面观察
20×倒置显微镜下观察各组破坏后的8 个试件粘接断面的破坏形式。
1.7 扫描电镜标本的制作及观察
从喷砂后的Al2O3及ZrO2瓷片中任意选取1 个制作电镜标本,表面金离子溅射处理后用扫描电子显微镜观察表面超微结构。
2 结 果
2.1 烧结后2 种瓷的断裂强度及密度
结果见表 1。
2.2 各组试件的粘接抗剪强度结果
结果见表 2。
SAS 9.12统计软件分析数据,依照单因素方差分析比较3 种粘接剂与同一种陶瓷的粘接强度有无统计学差异,而同一种粘接剂对不同陶瓷的粘接差异则使用两独立样本资料t检验。结果显示,Al2O3陶瓷组间差异有显著性 (P<0.000 1),其中SA最高,RA最低,且两两比较后均为P<0.01。ZrO2陶瓷组间也有差异(P<0.000 1),SZ 与PZ均高于RZ且2 组间差异无显著性(P>0.05)。对于每一种粘接剂来讲,Superbond C﹠B对Al2O3的粘接强度高于ZrO2(P<0.05),PanaviaTM F对2 种陶瓷的粘接无显著性差异(P>0.05),RelyXTMUnicem对Al2O3的粘接强度显著高于ZrO2(P<0.000 1)。
2.3 粘接破坏形式
结果见表 3。
2.4 Al2O3与ZrO2喷砂后扫描电镜表现
从图2 a、b可以看到2 种陶瓷喷砂后呈现不同的表面形貌。Al2O3 (a)的表面结构特点是:晶粒小、孔隙多、晶粒排列比较疏松;而ZrO2(b)则晶粒大、孔隙少、排列紧凑。
a: Al2O3喷砂后表面结构; b: ZrO2喷砂后表面结构
3 讨 论
3.1 3 种树脂粘接剂的特点
Superbond C﹠B为粉液调和、化学固化型4- META/MMA- TBB水门汀,其中,扩散促进单体4- META(4- 甲基丙烯酰乙基偏苯三酸酐)分子内具有亲水性基团和疏水性基团,能与MMA 单体形成共聚物。引发剂TBB反应活性高,在少量氧或水的存在下使聚合速度大大提高。同时该粘接剂与陶瓷粘接需要选择与之配套的陶瓷前处理剂即硅烷偶联剂(Porcelain Liner M),其反应原理是通过混合硅烷偶联剂的A、B液使之水解成为硅醇基(Si- OH)与陶瓷表面存在的硅醇基发生化学反应,在A、B混合液涂布后生成的硅烷偶联剂膜上使用 Superbond C﹠B后两者间形成化学结合并聚合,完成与陶瓷牢固的粘接;此外Superbond C﹠B中的4- META分子可以和喷砂处理后的氧化膜发生反应并形成高度粘接。这使得Superbond C﹠B较另外2 种粘接剂形成很好的初期粘接。PanaviaTM F为自酸蚀、双重固化复合树脂型双糊状树脂水门汀,含有粘接性磷酸酯单体(MDP),MDP可以溶解切削微粒子层,通过自身扩散渗透到陶瓷,使陶瓷表面产生树脂浸润层并与粘接剂结合成一整体,提高陶瓷的粘接强度。又因该材料含有过多的无机填料和疏水性物质,所以其粘接强度稍差于Superbond C﹠B[4]。它调和后本身没有粘接性,必须在粘接面上涂抹预处理剂或粘接剂SE BOND Primer后才能发挥强大的粘接性能。实验结果表明PanaviaTM F可以与氧化物陶瓷产生良好的初期粘接,与ZrO2粘接强度较Al2O3高,其原因有待进一步研究。RelyXTMUnicem属于双固化、自酸蚀一步法粘接剂,它改进了以往树脂水门汀成分,加入了全新的异丁烯酸磷酸酯单体,新的超细填料和引发体系,临床操作非常简单,不需要任何表面处理。但是其粘接效果不如前2 种粘接剂,与姜婷等[2]得出的结论一致,这可能是由于RelyXTMUnicem自身酸蚀效果欠佳,而且经光照后流动性显著降低,从而导致其与粘接面之间形成很少且较短的树脂突所致。
3.2 2 种氧化物陶瓷的表面结构特点
从实验前测定及喷砂后2 种陶瓷的表面结构可以看出,Al2O3的致密程度远较ZrO2低,这决定了二者在施加相同处理方式的情况下表面活性的差异。由于ZrO2晶粒大、孔隙少、密度大、硬度高,所以在同样的条件下喷砂时Al2O3比ZrO2获得更加粗糙的表面,从而使得Al2O3的粘接效果优于ZrO2。
3.3 粘接破坏形式
一般而言,粘接体系的破坏方式有以下4 种[5]:界面破坏——粘接破坏发生在粘接剂与被粘体的界面上;粘接剂内聚破坏——破坏发生在粘接剂内部;被粘体内聚破坏——粘接破坏发生于被黏体内部;混合破坏——既有界面破坏又有内聚破坏。本实验未发现单独的陶瓷内聚破坏,SA、 SZ组全部为混合破坏;PA、PZ组以混合破坏为主,极少数为界面破坏及内聚破坏;RA、RZ组则界面破坏较为多见。说明Superbond C﹠B和PanaviaTM F与氧化物陶瓷之间粘接强度优于一步法自酸蚀粘接剂RelyXTMUnicem。
3.4 本实验中的不足之处
①粘接面是采用手磨、目测使其平整,可能对抗剪强度的测试有一定影响。②粘接时利用手指加压,虽然更加接近临床操作但是加入了人为不确定因素,增加了产生误差的机会。③本实验只测定了各种粘接剂的初期粘接强度,耐久粘接强度未涉及。
4 总 结
本实验结果表明3 种树脂粘接剂中 Superbond C﹠B和PanaviaTM F均与氧化物陶瓷之间具有较高的粘接强度,优于一步法自酸蚀粘接剂RelyXTMUnicem,可在临床氧化物陶瓷修复体的粘接过程中作为首选粘接材料。而对于陶瓷来讲,Al2O3 的粘接强度高于ZrO2, 这可能与陶瓷本身的表面结构有关系。有研究结果[6,7]证实磷酸酯类粘接剂能够使氧化物陶瓷具有更加耐久的粘接强度。关于本实验中3 种树脂粘接剂的耐久粘接强度我们将在后续实验中进一步探讨。
参考文献
[1]Begazo CC,Boer HD,Kle Ve rla an CJ,et al.Shear bondstrength of different types of luting cements to aluminum ox-ide-reinforced glass ceramic core material[J].Dent Mater,2004,20(10):901-907.
[2]姜婷,二阶堂澈,田上顺次,等.实用口腔粘结修复技术[M].北京:人民军医出版社,2008:35,44.
[3]张玮,姚畅旺,韩栋伟.表面处理对Cercon氧化锆陶瓷黏结强度的影响[J].实用口腔医学杂志,2007,23(2):272-275.
[4]应于康,张建中,吴伟力,等.两种树脂粘结剂对不同材料粘结性能的比较[J].口腔颌面修复学杂志,2007,8(2):127-129.
[5]陈治清.口腔粘结学[M].北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1992:17-18.
[6]Hummel M,Kern M.Durability of the resin bond strength to the alumina ceramic Procera[J].Dent Mater,2004,20(5):498-508.
脂氧化酶 篇6
1 资料与方法
1.1 一般资料
2006年3月至2008年5月因脊柱疾患进行脊柱手术的老年患者40 例, 男20 例, 女20 例, 年龄61～79 岁, 平均68 岁。无严重心脑血管病、糖尿病及其他疾患。术前常规检查无明显异常, 近3个月内未用过激素类药物或者其他影响免疫系统的药物。患者随机分为四组, 每组10 例, 即对照组 (A组) , 维生素E组 (B组) , 1, 6-二磷酸果糖组 (C组) 及维生素E加1, 6-二磷酸果糖组 (D组) 。
1.2 手术方法
1.2.1 40 例患者采用全麻, 术前用药为鲁米那100
mg、阿托品0.5 mg, 术前30 min肌注。诱导用丙泊汾1.5～2.0 mg/kg, 芬太尼4～5 μg/kg, 阿曲库铵0.6～0.8 mg/kg静注, 气管内插管, 术中用丙泊汾4.0～6.0 mg/kg·h, 阿曲库铵0.6～0.8 μg/kg·h, 并根据情况加用芬太尼0.1～0.2 mg, 间断吸入七氟醚维持。
1.2.2 颈椎病
12 例根据患者情况行前路椎间盘切除、植骨融合与钢板内固定或后路椎管减压与脊柱内固定术。腰椎
间盘突出症13 例根据患者情况行后路椎板切除与髓核摘除脊柱内固定术。腰椎管狭窄症9 例行后路椎管减压与脊柱内固定术。腰椎滑脱6 例行后路椎管减压与复位、椎间植骨融合脊柱内固定术。手术均由同一组医生完成。术后常规抗炎预防感染, 逐步康复训练。
1.2.3 检测方法
A组为对照组。B组在手术前3 d开始口服维生素E, 每日3次, 每次100 mg, 至手术日晨。C组于手术开始后30 min FDP 10g静脉滴注;D组在手术前3 d开始口服维生素E, 每日3次, 每次100 mg, 至手术日晨, 同时于手术开始后30 min FDP 10g静脉滴注。各组均在手术前1 d、术后1、3、5、7、14 d抽取清晨空腹静脉血2 mL, 对照组抽取空腹静脉血2 mL。所有标本肝素抗凝置于-20℃冰箱内保存, 同批测定。丙二醛 (malondialdehyde, MDA) 试剂由南京建成生物研究所提供。将抗凝全血过棉柱洗脱, 去除白细胞、血小板, 再用生理盐水洗涤3次得红细胞。首先取1/2样品红细胞测定MDA的含量, 利用氧自由基与不饱和脂肪酸过氧化作用成比例增加的脂质过氧化物降解产物MDA间接检测氧自由基的变化, 根据脂质过氧化物在酸性条件下加热分解生成MDA, 可与硫代巴比妥酸缩合成红色色素, 以红色程度推算出脂质过氧化物的含量, 以 (MDA) nmol/mL单位表示, 结果反映机体内脂质过氧化程度。
1.3 统计学方法
统计学方法实验数据用均数±标准差表示undefined, 采用方差分析, 使用SPSS 13.0 软件进行处理, P<0.05 为差异有统计学意义。
2 结 果
A组10 例患者行脊柱手术后1、3、5、7、14 d, 红细胞中MDA的浓度含量明显较术前增高, 于手术后5 d左右升至最高, 术后7 d开始好转, 术后14 d逐渐恢复接近术前水平。数据结果见表1。
B组、C组及D组术后第1、3天MDA的浓度分别与术前相比稍有升高, 但无统计学意义 (P>0.05) , 在同一时间点与A组相比, 丙二醛的水平则明显低, 统计学处理P<0.05;但术后第5、7天, B、C组在同一时间点与D组及术前相比丙二醛浓度明显增高 (P<0.05) , 而D组与术前相比则无明显升高 (P>0.05) , 术后14 d接近正常。数据结果见表2。
3 讨 论
手术创伤、应激和麻醉等使患者的内环境发生改变, 机体通过神经内分泌调节产生大量氧自由基, 超氧化物岐化酶通过歧化反应清除体内氧自由基, 其活力强弱代表机体抗氧化能力[8]。而氧自由基是一种呈不稳定状态, 具有活性的化学性质, 细胞膜中的多价不饱和脂肪酸是最易受氧自由基影响的物质而发生脂质过氧化反应, 形成对细胞结构和功能有害的脂质过氧化物。因此脂质过氧化物的变化可反映组织代谢障碍, 细胞结构与功能损害。MDA是脂质过氧化物的代谢产物, 它是由能自发荧光的脂肪色素组成, 易于检测, 其含量反映机体内脂质过氧化程度, 间接反映细胞受损的程度。脂质过氧化物具有强烈的细胞毒性, 可损伤细胞膜及亚细胞膜并引起膜蛋白和酶类功能障碍。本研究提示脊柱手术术后红细胞脂质过氧化增强, 和文献报道一致[8,9]。究其原因可能为手术后交感性内分泌增加, 激活脂肪酶而使游离脂肪酸升高, 后者抑制氧化磷酸化偶联, 启动生物膜的脂质过氧化反应;此外, 下列因素也是可能的原因:a) 手术本身所带来的创伤、失血;b) 手术操作对血管造成的直接干扰, 如腰椎的前路手术[10];c) 术中俯卧对于下腔静脉、骼静脉和股静脉的压迫;d) 人工材料的植入, 如骨水泥[11,12]或人工骨的热量释放对血管的灼伤;e) 麻醉, 特别是脊髓麻醉或全麻[13];f) 脊柱创伤合并脊髓神经损伤[14], 或下肢瘫痪;g) 术后长时间卧床或制动。上述因素可造成血管损伤, 椎体附近肌肉缺血, 术后可能发生缺血与再灌注损伤, 这些都会导致氧自由基的大量释放, 造成红细胞的损伤。氧自由基可与Na+-K+-ATP酶的活性巯基作用, 影响其活性, 使细胞膜渗透性增加, 大量Na+及水分进入细胞内, 造成细胞肿胀, 体积变大。这些肿胀变形能力减弱的红细胞, 加之红细胞碎片等原因, 使血液中微栓颗粒增加, 导致循环淤滞, 从而引起深静脉血栓。以往认为, 术后较长时间卧床, 下肢静脉血回流缓慢, 血液淤滞是下肢深静脉血栓的主要原因, 近年的研究提出手术创伤、应激和麻醉可使红细胞过氧化损伤, 损伤变形及能力下降的红细胞是术后血栓形成的主要触发因素之一[6,7]。本研究发现红细胞脂质过氧化损伤术后比术前明显增加。统计学有显著性差异, 说明手术创伤可引起患者机体红细胞脂质过氧化增强。维生素E和FDP具有重要的抗氧化和保护细胞膜的作用, 前者能保护过氧化氢酶和谷胱甘肽氧化酶的活性, 预防和抑制生物膜脂质过氧化反应, 又通过多价不饱和脂肪酸竞争性与烷过氧基结合, 而终止过氧化的链式反应, 在抗氧化系统中起最后一层保护作用;后者作为糖酵解过程中的中间产物, 能激活糖酵解途径中的限速酶—磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶, 间接向细胞内供能, 且能直接进入细胞内作为能量底物供能, 使细胞内ATP含量增加, 并能激活Na+-K+-ATP酶, 促进细胞保钾排钠, 提高细胞内激化, 防止细胞水肿凋亡。由此可见维生素E和FDP在预防红细胞脂质过氧化方面的作用机制是不同的。本研究发现, 术前单用维生素E或术中单用FDP, 术后MDA含量在术后第1天和第3天与术前相比增高不明显, 但在术后第5天和第7天MDA的含量比术前提高, 提示单独应用维生素E或FDP不能在术后持久地预防红细胞脂质过氧化反应;而术前应用维生素E并联合术中应用FDP, 术后各时间点测量的MDA含量与术前变化不明显, 表明术前和术中联合应用维生素E和FDP能有效预防脊柱手术所引起的患者机体红细胞脂质过氧化和抗氧化能力降低。
摘要：目的 探讨脊柱手术对红细胞脂质过氧化的影响及维生素E、1, 6-二磷酸果糖 (fructose 1, 6-diphosphate, FDP) 对脂质过氧化的防治作用。方法 脊柱手术患者40例, 在全麻下行手术治疗, 随机分为四组:对照组、术前应用维生素E组、术中应用FDP组及术前应用维生素E联合术中应用FDP组。每组10例, 于手术前1 d、术后1、3、5、7、14 d抽取血样, 测定红细胞丙二醛含量。结果 脊柱手术后红细胞中丙二醛含量明显比术前增高 (P<0.05) ;术前应用维生素E联合术中应用FDP比单纯应用维生素E或FDP能在围手术期更有效地保护红细胞免受脂质过氧化的损伤 (P<0.05) 。结论 脊柱手术术前服用维生素E和术中应用FDP, 可以预防围手术期氧自由基和过氧化脂质等有害因子对红细胞的破坏, 以及因红细胞损伤可能出现的深静脉血栓形成等并发症。
脂氧化酶 篇7
1 资料与方法
1.1 一般资料
糖尿病组, 按WHO1999年糖尿病诊断标准和中国高血压防治指南2005年修订版高血压诊断标准选择2008—01～2008—12在我院住院的2型糖尿病患者80例。其中血压正常组30例, 男16例, 女14例, 年龄31～72岁, 平均 (52.3±9.8) 岁, 糖尿病病程1～10年, 平均4.8年, 经体检及辅助检查排除心肝肾肺等合并症。合并高血压组50例, 男26例, 女24例, 年龄32～70岁, 平均 (53.1±9.6) 岁, 糖尿病病程2～12年, 平均4.9年, 高血压病程6个月～5年, 平均3.8年, 其中1期高血压29例, 2期高血压21例, 患者为初治或自动停服降压药2周以上者, 均排除继发性高血压。正常对照组30例, 男17例, 女13例, 年龄30～73岁, 平均 (52.9±10.1) 岁, 经体检及辅助检查排除心肝肾肺及其它疾病。三组性别、年龄、体质量指数无著显差异。
1.2 方法
1.2.1 血压测量
采用标准台式水银柱血压计, 清晨6:00平卧位测右上臂血压连续3次, 每次间隔2min取其平均值, 计算平均动脉压 (MAP) =舒张压+1/3脉压差。
1.2.2 给药方法
合并高血压糖尿病患者抽取血标本后给喹那普利 (哈药集团制药总厂生产, 批号080100116) 治疗, 剂量10mg每日一次, 早餐后服用, 连续2周, 不并用其它降压药或影响血压的药物。
1.2.3 标本采集及标本测定
对照组、血压正常糖尿病组实验前, 合并高血压糖尿病组治疗前后经禁食12h, 晨空腹采取肘静脉血6mL, 4℃离心分离血清, 分装-70℃保存待测。脂联素测定用酶联免疫吸附法, 药盒由深圳依诺金生物科技有限公司提供。一氧化氮, 一氧化氮合成酶测定用硝酸还原酶比色法, 药盒由南京建成生物工程研究所提供。所有检验指标均在同次实验用同批试剂完成, 各项质量控制指标均符合要求。
1.3 统计学处理
采用spss15.0软件进行数据分析, 计量资料以均数标准差undefined表示, 组间差异采用方差分析与q检验, 参数间的相互关系采用直线相关分析。
2 结果
2.1 3组血清脂联素、一氧化氮, 一氧化氮合酶测定结果
见表1。
*与正常对照组比P<0.01;△与血压正常糖尿病组比P<0.01。
结果显示, 血压正常糖尿病组、合并高血压糖尿病组血清脂联素明显低于正常对照组 (均P<0.01) , 合并高血压糖尿病组血清脂联素明显低于血压正常糖尿病组 (P<0.01) 。合并高血压糖尿病组血清一氧化氮, 一氧化氮合酶明显低于血压正常糖尿病组和正常对照组 (均P<0.01) 。
2.2 合并高血压糖尿病患者血清脂联素、一氧化氮、一氧化氮合酶水平与患者平均动脉压的相关分析
合并高血压糖尿病患者血清脂联素水平与患者平均动脉压呈明显负相关 (r=-0.517, P<0.01) 。血清一氧化氮水平与患者平均动脉压呈明显负相关 (r=-0.539, P<0.01) , 患者血清一氧化氮合酶水平与患者平均动脉压呈明显负相关 (r=-0.487, P<0.01) 。
2.3 合并高血压糖尿病患者血清脂联素水平与一氧化氮、一氧化氮合酶的相关分析
合并高血压糖尿病患者血清脂联素水平与血清一氧化氮水平呈明显正相关 (r=-0.651, P<0.01) , 与一氧化氮合酶水平呈明显正相关 (r=-0.536, P<0.01) 。
2.4 合并高血压糖尿病患者治疗前后平均动脉压、血清脂联素、一氧化氮, 一氧化氮合酶水平的变化
见表2。
*与治疗前比P<0.01。
3 讨论
糖尿病合并高血压是糖尿病常见的并发症, 是糖尿病患者致死致残的主要原因, 其发病机理至今尚未完全阐明。近年研究发现脂肪组织分泌的细胞因子对血管的功能结构有重要的调节作用[1]。脂联素就是近年新发现的由脂肪组织分泌的细胞因子。具有改善胰岛素抵抗, 增加胰岛素敏感性, 调节脂代谢, 抗动脉粥样硬化及抗炎等多种生理作用, 通过多种途径保护血管内皮组织[2]。本研究结果显示, 糖尿病合并高血压患者血清脂联素水平较血压正常糖尿病患者明显降低。合并高血压患者血清脂联素水平与患者平均动脉压呈明显负相关。合并高血压糖尿病患者治疗后随着血压的降低患者血清脂联素水平升高。提示血清脂联素水平变化参与了糖尿病合并高血压的发病。国外Iwashima等的研究显示, 在没有胰岛素抵抗或糖尿病的正常血压者, 随着血压的升高血浆脂联素水平呈显著降低, 认为低脂联素血症在尚无胰岛素抵抗的早期即参与与影响高血压的发生发展[3]。内皮细胞和血管平滑肌细胞在调节血压过程中发挥重要角色。离体和活体实验证实, 脂联素能抑制内皮细胞粘附分子的表达, 抑制血管平滑肌细胞的增值和迁移[4]。糖尿病合并高血压患者血清脂联素水平降低促进血管内皮细胞黏附分子的表达, 损伤血管内皮细胞和血管平滑肌细胞导致了高血压的发生。同时血清脂联素水平降低可诱导脂肪组织中的肾素-血管紧张素系统活性增加[5], 是导致糖尿病合并高血压的另一重要原因。一氧化氮是由血管内皮细胞合成的一种重要的舒血管因子, 具有强大的舒张血管抑制血管平滑肌细胞增值等多种生理作用[6]。本研究结果显示合并高血压糖尿病患者血清一氧化氮, 一氧化氮合酶水平较血压正常糖尿病患者明显降低, 合并高血压糖尿病患者血清一氧化氮, 一氧化氮合酶水平与患者平均动脉压呈明显负相关。糖尿病患者血清一氧化氮合酶活性降低, 一氧化氮减少, 血管舒缩功能障碍是糖尿病患者发生高血压的另一重要原因。有研究表明脂肪组织可内源性产生NO, 参与脂肪组织的内分泌调节功能[7]。本研究结果显示合并高血压糖尿病患者血清脂联素水平与患者一氧化氮, 一氧化氮合酶水平呈明显正相关。合并高血压糖尿病患者治疗后血清脂联素水平升高, 患者血清一氧化氮, 一氧化氮合酶水平也明显升高。提示合并高血压糖尿病患者血清脂联素分泌与一氧化氮, 一氧化氮合酶间存在密切的相互调节关系。体外实验发现, 重组腺病毒表达的脂联素能显著升高人血管内皮细胞eNOS的活性, 从而升高NO的水平[8]。Tan在人大动脉内皮细胞研究发现球形脂联素可促进eNOS的产生, 并减轻氧化型低密度脂蛋白对eNOS的抑制作用, 改善eNOS的活性[4]促进NO的合成。糖尿病合并高血压患者血清脂联素水平影响eNOS的活性, 影响NO的合成释放。NO, NOS也影响脂联素的合成分泌。Hattori等发现, NO缺乏大鼠主动脉NO生成减少, 超氧阴离子O2-生成增加, 血浆中脂联素, 脂肪组织中脂联素mRNA显著降低[9]。糖尿病患者脂联素与一氧化氮, 一氧化氮合酶间相互影响、相互调节共同参与了糖尿病合并高血压发病的病理生理过程, 因此阻断二者间的相互作用相互影响, 提高患者体内脂联素, 一氧化氮水平可能为防治糖尿病合并高血压的发生发展提供一条新的治疗途径。
摘要：目的:观察糖尿病合并高血压患者血清脂联素与一氧化氮、一氧化氮合酶水平变化, 探讨患者血清脂联素与一氧化氮、一氧化氮合成酶的关系。方法:应用酶联免疫吸附法及硝酸还原酶比色法测定50例合并高血压糖尿病患者及30例血压正常糖尿病患者血清脂联素与一氧化、氮一氧化氮合成酶水平。结果:合并高血压糖尿病患者血清脂联素, 一氧化氮、一氧化氮合成酶水平较血压正常糖尿病患者明显那降低 (均P<0.01) 。合并高血压糖尿病患者血清脂联素与一氧化氮、一氧化氮合酶呈明显正相关 (r=0.651, r=0.536, 均P<0.01) 。结论:血清脂联素, 一氧化氮、一氧化氮合酶水平降低, 脂联素与一氧化氮、一氧化氮合酶相互作用相互影响, 在糖尿病合并高血压的发病中发挥重要作用。
关键词：高血压,脂联素,一氧化氮,一氧化氮合酶
参考文献
[1]潘华, 余叶蓉.脂肪因子对血管内皮细胞功能的影响[J].现代临床医学, 2007, 332 (1) :72-74
[2]林伟, 刘礼斌.脂联素的内皮保护效应[J].医学综述, 2007, 13 (2) :90-91
[3]IwashimaY, KatsuyaT, IshikawaK, et al.Hypoadiponectinemia isan independent risk factor for hypertension[J].Hypertension, 2004, 43 (6) :1318-1323
[4]Tan RC, XuA, chow WS, et al.Hypoadiponectinemia is associat-ed with impaired endothelium-dependent vasodilation[J].J ClinEndocrinol Metab, 2004, 89 (2) :765-769
[5]Massiera F, Block-Faure M, CeilerD, et al.Adipose angiotensionis involved in adipose tissue growth and blood pressure regulation[J].Fasebj, 2001, 15 (14) :2727-2729
[6]Juteja W, Chandra M, Juteja R, et al.Nitric oxide as a uniquebioactive singnaling messenger in physiology and pathophysi-ology[J].J Biomed Biotechnol, 2004, 204 (2) :227-237
[7]冯雪娟, 姜志胜.一氧化氮和脂肪组织细胞生理功能调节[J].医学综述, 2008, 14 (7) :984-987
[8]李丙善, 郑丹, 邓华聪, 等.人脂联素重组腺病毒对内皮细胞增殖和一氧化氮合酶的影响[J].中华心血管杂志, 2006, 34 (2) :1122-1125
脂氧化酶 篇8
1 对象与方法
1.1 对象
选择专门从事镍电解作业工人100名为接触组,工龄均为≥10 a,平均工龄为(16±3.5) a;年龄为30～50岁,平均年龄为(41±5.8)岁。另选择当地无镍接触的健康人员80名为非接触组,年龄为28～50岁,平均年龄为(40±4.9)岁。两组人员均为男性,且生活习惯基本一致。
1.2 主要试剂与仪器
扶正解毒汤是兰州大学赵健雄教授自主开发研制的复方制剂,由红芪、茯苓、丹参、枸杞、当归、莪术、连翘按4∶4∶3∶3∶2∶2∶2组方,生药由甘肃省药材公司提供,经兰州大学药学院生药学研究所鉴定,均符合《中华人民共和国药典》(2005版)标准。将上述药物相混合,用蒸馏水洗涤3次,加蒸馏水浸泡3 h后煎煮1 h,过滤,药渣再加水同法煮2次,合并3次煎液,浓缩成含生药4 g/ml的药液,高温高压消毒后灭菌、密封,4 ℃以下保存备用。SOD、GSH、MDA试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供,722型可见分光光度计,上海精密科学仪器有限公司。
1.3 样本采集
受试人群均采取清晨空腹静脉血,立即分离血清,-20 ℃保存。
1.4 指标分析测定
严格按照试剂盒规定步骤及试验条件,分别测定血清中MDA、SOD、GSH;采用原子吸收分光光度法测血清中镍的含量。
1.5 工龄界定
将接触组人群按工龄分成10～19 a,20～29 a和≥30 a 3组分析。
1.6 统计学处理
采用SPSS 13.0软件进行t检验,并对接触组与对照组进行两两比较。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 血清Ni、MDA、SOD、GSH水平
表1显示:接触组MDA含量高于非接触组(t=53.35,P<0.01);SOD活力、GSH的活力低于非接触组(t=42.14,21.95,均P<0.01);接触组Ni含量高于非接触组(t=16.60,P<0.01)。服用扶正解毒汤后Ni、 MDA含量明显下降(t=12.49,25.04,P<0.01);SOD活力、GSH含量明显升高(t=13.91,11.48,P<0.01)。
注:MDA—丙二醛,SOD—超氧化物支化酶,GSH—谷胱甘肽;接触组与非接触组比较,aP<0.01;服药后接触组与接触组比较,bP<0.01。
2.2 不同工龄接触组血清中MDA、GSH、SOD、Ni水平
表 2显示:不同工龄接触组血清中MDA水平高于非接触组,且30 a以上工龄组比30 a以下工龄组高(P<0.01);SOD活力、GSH的活性,接触组均低于非接触组,且30 a以上工龄组比30 a以下工龄组低(P<0.01);血清镍含量随工龄的增加而增加(P<0.01)。
注:MDA—丙二醛;SOD—超氧化物岐化酶;GSH—谷胱甘肽。a表示与非接触组比较,Ni、MDA、GSH、SOD t值分别为15.18,28.23,27.88,15.63,均P﹤0.01;b表示与10～19a组比较,Ni、MDA、GSH、SOD t值分别为3.51,6.25,4.71,3.92,P﹤0.01;c表示与20～29 a组比较,Ni、MDA、GSH、SOD t值分别为4.93,5.63,2.41,2.82,P﹤0.05或P<0.01。
3 讨 论
SOD是体内重要的抗氧化酶,它在清除超氧阴离子、抗氧化损伤、调节机体氧化还原状态等方面均起重要作用。MDA为脂质过氧化终产物之一,MDA含量的增加可以反映脂质过氧化对细胞损害的程度。目前国内外有关镍致体内细胞氧化损伤的报道较多,许多研究证实,镍致体细胞的氧化损害是其毒性和致癌作用的主要机制之一[3]。因此,探讨职业性镍接触人群的氧化抗氧化系统的变化及其关系,为职业人群的健康监测和防护具有十分重要的意义。本次实验提示,接触组MDA、Ni的含量比非接触组高,而SOD、GSH比非接触组低。服用扶正解毒汤后 MDA明显下降;SOD活力和GSH含量明显升高(P<0.01),扶正解毒汤的7味中药红芪、当归、枸杞、茯苓、连翘、丹参、莪术,分别具有抑制脂质过氧化物的生成,保护细胞膜免遭脂质过氧化的损伤、降低MDA、活性氧含量、升高SOD活力水平、提高GSH-Px活力、增强机体抗脂质过氧化的作用。如当归可以恢复ATP酶的活力,保护膜脂质不受氧化;枸杞增强膜流动性,缓解线粒体氧化损伤程度,并呈量效关系;丹参不仅稳定细胞膜、亚细胞膜,而且还有抗氧自由基的作用等[6]。镍产生脂质过氧化的原因为:①镍可以攻击生物膜的不饱和脂肪酸,使其脱氧而形成脂质自由基和过氧化脂质自由基,使自由基启动氧化应激反应增强[7]。②镍可使自由基清除剂GSH氧化而成GSSH,使GSH的氧化率大于还原率,而使GSH耗竭[8]。③镍可使SOD降解速度加速,从而使代谢活性中间产物MDA的自由基清除作用减弱,引起脂质过氧化作用增强[9]。④有文献报道,镍可直接抑制GSH合成的能力,改变SOD和GSH酶蛋白生化结构、导致其变性、失活、使自由基和MDA不能及时被清除,而致体内自由基代谢失衡,加重镍所致细胞毒性损伤作用[9]。
镍和MDA含量随工龄增长而增加,接触人群血清中SOD活力和GSH含量随工龄的增长而降低。提示镍接触时间的增加除了可引起体内镍负荷加重,还对机体损害作用不断累积,同时大量消耗机体抗脂质过氧化损伤的能力。扶正解毒汤对机体脂质过氧化作用有一定的保护作用。
摘要：目的 研究从事镍电解工人体内镍负荷与自由基代谢变化的关系,并用扶正解毒汤干预体内脂质过氧化作用。方法 自2010年7月—2011年7月,以100名镍电解作业人员为接触组,以80名无镍接触的健康人作为非接触组,分别测定两组人员血清中镍含量作为体内负荷;同时测定接触组服用扶正解毒汤1个月后血清中镍、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)的水平。结果 镍作业组血清中MDA含量明显升高;SOD活力、GSH含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.01),服用扶正解毒汤后镍、MDA含量明显下降;SOD活力、GSH含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),结论镍具有增加体内脂质过氧化产物、降低机体抗氧化能力的作用;扶正解毒汤对体内脂质过氧化有明显的保护作用。
关键词：镍电解,镍,脂质过氧化,扶正解毒汤
参考文献
[1]刚葆琪,庄志雄.我国镍毒理学研究进展[J].卫生毒理学杂志,2000,14(2):129-135.
[2]朱玉真,赵健雄,王学习.硫酸镍致大鼠脂质过氧化作用及中医药防治作用的实验研究[J].中华实用中西医杂志,2001,14(7):1145-1147.
[3]张敬,刘艺敏,张军,等.维生素E对染镍肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的影响[J].环境与职业医学,2002,19(1):10-12.
[4]孙应彪,朱玉真.镍铬钴混合物对小鼠肝脏毒作用机制的研究[J].中国公共卫生,2003,19(2):161-162.
[5]朱玉真,王立荣,孙应彪.镍致大鼠肝损伤和脂质过氧化关系的研究[J].中国公共卫生学报,1997,16(2):112-114.
[6]谢大泽,湛学军,章涛,等.枸杞等5种多糖清除氧自由基的实验研究[J].江西医学检验,2002,20(4):195-196.
[7]Borg K.Uptake of Ni in the central and peripheral nervous system of miceafter oral administration:Effects of treatments with halogenated 8-hydroxyquinolines[J].Toxicology,1989,54:59-68.
[8]ILO,Unep,R.F.Hertel.Nickel:Environmental Health Criteria SeriesNo 108[R].WHO,Geneva,1991.
脂氧化酶 篇9
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2014年10月-2015年12月在我院诊治的急性一氧化碳中毒患者212例, 男114例, 女98例;年龄14~80岁, 中位年龄46.1岁。其中轻度中毒102例, 中度中毒86例, 重度中毒24例。急性一氧化碳中毒诊断标准[1]:根据吸入较高浓度的一氧化碳的接触史, 急性发生的中枢神经损害的症状的体征, 结合及时血液碳氧血红蛋白 (COHb) 测定的结果, 按照国家卫生部《职业性急性一氧化碳中毒诊断标准及处理原则》 (GB8781-88) 做出急性一氧化碳中毒的诊断。根据中毒程度分为三级: (1) 轻度中毒:血液COHb浓度为10%~20%。患者有不同程度头痛、头晕、恶心、呕吐、心悸和四肢无力等。 (2) 中度中毒:血液COHb浓度为30%~40%。患者可有胸闷、呼吸困难、嗜睡或浅昏迷等表现。 (3) 重度中毒, 血液COHb浓度达40%~60%。迅速出现昏迷、呼吸抑制、肺水肿、心律失常或心力衰竭。急性一氧化碳中毒迟发性脑病诊断标准[2] (1) 有明确一氧化碳中毒病史。 (2) 有明确的假愈期。 (3) 以痴呆、精神症状、肌张力增高及震颤麻痹为主的临床表现。 (4) 影像学改变:透露CT及MRI改变主要发生在半卵圆中心和侧脑室旁, 苍白球病变常为对称性。 (5) 病程长, 治疗比较困难。
1.2 治疗方法
所有患者均在给予吸氧、高压氧、防治脑水肿、改善微循环、促进脑代谢、对症、支持等常规治疗的基础上加用神经节苷脂 (单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液, 齐鲁制药有限公司生产, 国药准字:H20046213, 规格20mg, 2ml/支) 60mg加入0.9%氯化钠注射液250ml中静脉滴注, 每天1次, 20d为1疗程。所有患者均常规检查血常规、尿常规、血COHb浓度测定、电解质、心肌酶、肝功能、肾功能、心电图、脑电图、头颅CT、胸部CT等。
1.3 观察指标
所有患者自入院当日算起, 并随访3个月, 观察患者症状体征的好转或消失时间、意识状态的恢复情况及时间、并发症的发生、不良反应、迟发性脑病的例数等。
1.4 疗效判定标准[3]
1.4.1 对预后进行量化判定:
利用四项评分标准:格拉斯哥昏迷评分 (GCS) , Barthel指数评分, 简易智力状况检查评分 (MMSE) , 改良的肌张力评分 (Ashworth) 。
1.4.2 康复状况判定及时间节点:
时间节点:急性一氧化碳中毒后1个月。康复状况: (1) 痊愈:①神志清楚, 临床症状消失, 无明显阳性体征, 常规实验室检查基本恢复正常。②GCS评分15分;MMSE评分30分;有智力障碍者恢复到发病前水平;Barthel指数评分100分或达到发病前水平;改良的Ash-worth分级0级。 (2) 恢复良好:①神志清楚, 临床症状明显改善, 生活大部分能自理, 可遗留部分后遗症。②GCS评分15分;MMSE评分14~24分, 或者未达到发病前的认知水平;Barthel指数评分61~95分或在原有基础上提高>30分;改良的Ashworth分级改善2级以上或者达0级。 (3) 好转:①神志清楚, 临床症状有所改善, 生活不能自理, 遗留较严重的后遗症。GCS评分15分;MMSE评分<14分;Barthel指数评分21~60分或在原有基础上提高了10~30分;改良的Ashworth分级改善1级。 (4) 未愈:神志不清, 临床症状无改善或者症状加重, 遗留严重后遗症。②GCS评分3~15分;MMSE评分0分;Barthel指数评分0分;改良的Ashworth分级无改善。 (5) 死亡。总有效率= (痊愈例数+恢复良好例数+好转例数) /总例数×100%。迟发性脑病发病率=迟发性脑病例数/总例数×100%。
2 结果
所有患者经治疗后均未发现明显不良反应, 痊愈148例 (69.8%) , 恢复良好46例 (21.7%) , 好转10例 (4.7%) , 未愈8例 (3.8%) , 死亡3例 (1.4%) , 迟发性脑病6例 (2.8%) 。总有效率为96.2%。迟发性脑病发病率2.8%。
3讨论
一氧化碳吸入体内后, 与血液中红细胞的血红蛋白结合, 形成稳定的COHb, 一氧化碳与血红蛋白的亲和力比氧与血红蛋白的亲和力大240倍, 其解离速度是氧合血红蛋白解离速度的1/3600。COHb能使血红蛋白氧解离曲线左移, 血氧不易释放给组织而造成细胞缺氧。缺氧使血管内皮细胞发生肿胀而造成脑部循环障碍, 脑内酸性代谢产物蓄积, 产生细胞间质水肿。脑血液循环障碍可致脑血栓形成、脑皮质和基底节局灶性的缺血性坏死以及广泛脱髓鞘病变, 致使部分患者发生迟发性脑病[1]。
高压氧是目前公认的治疗一氧化碳中毒的最有效、最常用的方法。高压氧能增加血液中物理溶解氧, 提高总体氧含量, 促进氧释放和加速一氧化碳的排出, 可迅速纠正组织缺氧, 缩短昏迷时间和病程, 预防迟发性脑病的发生[1], 并且高压氧能使颅内血管收缩, 血管通透性降低, 从而降低颅内压, 改善大脑缺氧症状, 促进脑组织功能恢复[4]。2002年国外曾有研究[5]观察152例不同意识状态的急性一氧化碳中毒患者, 随机分成高压氧组和常压氧治疗组, 观察认知后遗症发生率, 结果显示, 高压氧组发生率为19/76, 常压氧组发生率为35/76。2009年该作者再次发表文章, 强烈推荐高压氧治疗[6]。肖长娇等[7]应用高压氧治疗262例一氧化碳中毒患者发现不同时间、不同疗程的高压氧治疗, 患者迟发性脑病发病率也不同。高压氧治疗时间越早、疗程足够, 迟发性脑病发病率越低。但高压氧治疗有一定的局限性, 尤其是重度一氧化碳中毒患者, 昏迷时间长, 生命体征不稳定, 随时可能出现病情变化、呕吐、窒息等情况时, 不能立即进行高压氧治疗, 更易出现迟发性脑病。
神经节苷脂是位于细胞膜表面的一种含唾液酸的糖鞘脂, 主要位于髓鞘、神经元细胞膜和轴突。动物实验显示, 外源性神经节苷脂能够促进神经再生[8]。有研究[9]表明单唾液酸四己糖神经节苷脂是唯一可以透过血脑屏障的一种神经节苷脂, 神经受损后, 外源性单唾液酸四己糖神经节苷脂入血与脂蛋白结合, 可通过血脑屏障进入神经系统, 尤其高度局限于受损病灶区域, 对损伤后继发神经退化有保护作用[10]。王晓虹等[11]实验发现单唾液酸四己糖神经节苷脂是通过下调Nogo-A mR-NA的转录, 而减少Nogo-A蛋白质的表达, 实现神经保护作用, 从而降低一氧化碳中毒后迟发性脑病的发生率。Liu等[12]的研究发现, 单唾液酸四己糖神经节苷脂脑保护效果与用药起始时间相关, 用药越晚, 效果越差。校建波等[13]在治疗中也发现, 急性一氧化碳中毒患者早期即给予单唾液酸四己糖神经节苷脂, 可提高治疗总有效率, 降低一氧化碳中毒后迟发性脑病的发病率。肖丽等[14]应用神经节苷脂及依达拉奉联合高压氧治疗急性重度一氧化碳中毒发现, 治疗组意识恢复时间明显短于对照组, 迟发性脑病的发病率也明显低于对照组。国外报道近10年一氧化碳中毒迟发性脑病发病率为20%~60%, 国内约为0.2%~47.3%, 重度急性一氧化碳中毒患者可达10%~40%[15]。
本组212例患者经采用神经节苷脂联合高压氧治疗急性一氧化碳中毒取得良好疗效, 总有效率96.23%, 迟发性脑病发病率为2.8%, 低于国内外报道的发病率, 且无明显不良反应发生, 证实神经节苷脂联合高压氧治疗急性一氧化碳中毒疗效确切, 值得临床推广应用。