银翘解毒颗粒（共4篇）
银翘解毒颗粒 篇1
摘要：目的建立银翘解毒颗粒中绿原酸含量测定方法, 以控制产品质量。方法采用反相高效液相色谱法, 使用DiscoveryC18 (4.6mm×150mm, 5um) 为色谱柱;甲醇-水-冰醋酸 (18:85:1) 为流动相;检测波长:327nm;流速1mL/min。柱温为室温 (25℃) , 以外标法测定银翘解毒颗粒中绿原酸的含量。结果样品中绿原酸得到很好的分离, 当绿原酸在2.368～28.416ug/mL浓度范围内呈线性关系 (r=0.9999, n=5) , 加样回收试验的回收率为98.3% (RSD=3.3%, n=6) 。结论本法简便、准确、可靠、专属性强、重现性好。
关键词：银翘解毒颗粒,绿原酸,反相高效液相色谱
银翘解毒颗粒收载于中国药典2005版一部, 标准中无含量测定方法。本文对银翘解毒胶囊的流动相进行了分析, 当减少三乙胺的量, 分离向好的方向移动, 最后去掉三乙胺, 使用甲醇-水-冰醋酸 (1 8:8 5:1) 为流动相, 对照品保留时间与峰形均理想, 阴性空白试验干扰小, 样品中主峰能与其他峰很好分离, 用此法对银翘解毒颗粒中绿原酸含量测定, 结果令人满意。
1 仪器与试药
岛津LC-10A高效液相色谱仪;检测器:SPD-10AVP紫外检测器;CBM-102工作站;CP-225D电子天平;KQ-100B超声波清洗仪。
绿原酸对照品:中国药品生物制品检定所, 批号:1 1 0 7 5 3-2000413;甲醇、冰醋酸、乙腈均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱:Discovery C18 (5um, 150mm×4.6mm) ;流动相:甲醇-水-冰醋酸 (18:85:1) ;检测波长:327nm;流速:1mL/min;柱温:室温 (25℃) 。
在上述条件下, 对照品保留时间与峰形均理想, 阴性空白试验干扰小 (1.3) , 样品中主峰能与其他峰很好分离。
3 方法学试验
3.1 检测波长选择
取绿原酸对照品溶液在2 0 0～4 0 0 n m作波长扫描, 样品在221nm、240nm和327nm有最大吸收。由于221nm、240nm的吸光度小于327nm, 故选择测定波长为327nm。
3.2 线性关系考察
精密称取绿原酸对照品适量, 加50%甲醇溶解并配制成浓度分别为2.368, 4.436, 9.472, 18.944, 28.416ug/mL的一系列溶液, 取样10uL, 注入液相色谱仪, 记录峰面积分别为:107770.7、215423.3、431073.2、867641.6、1313703.8。在2.368～28.416 ug/mL浓度范围内呈线性。回归方程为:Y=109569.5C-4552.694, r=0.9999 (n=5) 。
3.3 精密度试验
取样品含量测定以下的样品溶液6份, 各进样10uL, 注入液相色谱仪, 分别记录峰面积为:883602.5、892412.5、902172.1、904782、875884.7、894451.7、RSD=1.23%, 表明精密度良好。
3.4 专属性 (阴性对照试验)
取阴性颗粒0.5g, 置50mL棕色量瓶中。加50%甲醇稀释至刻度, 超声30min, 放冷, 过滤, 取续滤液即可。
取上述两种溶液各10uL, 注入液相色谱仪, 依法测定, 阴性对照溶液中在相对应的保存时间上有一小峰。测得阴性干扰为1.3% (<5%) 。
3.5 溶液的稳定性
取含量测定项下的样品溶液, 隔一定时间测1次, 观察其溶液的稳定性, 结果样品溶液至少在7h内是稳定的 (RSD=1.02%) 。
3.6 含量测定方法
色谱条件与适应性试验:用十八烷醛硅胶烷键含硅酸为填充剂;甲醇-水-冰醋酸 (18:85:1) 为流动相, 流速1.0mL/min;检测波长327nm。理论基板数按绿原酸峰计应不低于3000。
对照品溶液的制备:取绿原酸对照品适量, 精密称量, 置棕色量瓶中。加50%甲醇制成每1毫升含20ug的溶液, 作为对照品溶液。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品各1 0 u L, 注入液相色谱仪, 测定, 以外标法测定银翘解毒颗粒中绿原酸的含量。
4 讨论
4.1 流动相的选择
本文的流动相进行了选择, 本文的流动相分离效果最好。
4.2 提取方法的选择
比较了加热回流提取方法和超声提取方法, 结果表明两种方法结果基本一致, 考虑到简便, 采用超声提取法。
4.3 超声时间考察
方法按超声提取法, 只改变超声时间, 20、30、40min, 结果表明:超声30min与40min的峰面积相当, 超声提取20min峰面积小于30min, 故超声时间定为30min。
4.4 溶剂浓度的考察
方法按超声提取法, 只改变溶剂浓度, 4 0%甲醇、5 0%甲醇、60%甲醇, 结果表明:溶剂浓度60%时含量低于40%与50%, 40%与50%的含量相当, 故溶剂浓度定为50%。
4.5
本法测定绿原酸的含量, 样品预处理简单, 样品中绿原酸主峰与其他杂质峰达到基线分离, 阴性无干扰, 本法可以控制银翘解毒颗粒的质量。
银翘解毒颗粒 篇2
关键词：银翘解毒颗粒,连翘苷,牛蒡子苷,含量测定
银翘解毒颗粒由金银花、连翘、薄荷、牛蒡子、甘草等组成, 具有疏风解表、清热解毒的作用, 用于风热感冒, 证见发热头痛、咳嗽口干、咽喉疼痛。其标准收载于《中国药典》2005年版增补本, 标准中收载了显微鉴别, 金银花、连翘、薄荷、荆芥、牛蒡子、甘草的薄层鉴别, 但未对其中的主药进行含量测定。连翘具有清热解毒、宣散风热、消痈散结之功效。近年来药理研究证明, 连翘具有较广的抗菌作用, 对G+、G-菌及流感病毒均有明显的抑制作用[1], 能有效地反映银翘解毒颗粒的药效。连翘中连翘苷为其主要有效成分, 化学性质稳定, 国内含连翘药材的中药制剂多以连翘苷为其含量测定的指标成分。方中牛蒡子具有疏散风热、宣肺透疹、解毒利咽之功效, 用于治疗风热感冒、咳嗽痰多、咽喉肿痛、痈肿疮毒[2], 其主要有效成分是以牛蒡子苷[3]为主的木脂素类化合物, 且牛蒡子苷含量较高, 易于测定。有报道对其中的金银花、连翘进行绿原酸和连翘苷的含量测定[4,5,6], 但同时测定连翘苷和牛蒡子苷含量的报道较少。为了更好地控制处方中有效成分的含量, 本文采用高效液相色谱法同时测定银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷的含量, 并对本实验方法进行方法学研究。
1 仪器与材料
1.1 仪器
LC-2010高效液相色谱仪 (日本岛津公司) ;BP211D电子天平 (德国塞多利斯仪器公司) ;KQ-300超声清洗仪 (昆山市超声仪器有限公司) 。
1.2 试药
乙腈为色谱试剂 (Fisher公司) , 水为双重蒸馏水, 其试剂均为分析纯。中性氧化铝 (100~120目, 国药集团化学试剂有限公司) 。连翘苷对照品 (供含量测定用, 批号:110821-200609) , 牛蒡子苷对照品 (供含量测定用, 批号:110861-20030) , 以上对照品均由中国药品生物制品检定所提供。银翘解毒颗粒由广西华天宝药业有限公司提供 (批号:20100578、20100123、20100689) 。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
采用Agilent C18 (4.6 mm×250 mm, 5μm) 色谱柱, 流动相为乙腈-水 (27∶73) , 流速为1.0 ml/min, 检测波长为280 nm。柱温为30℃。在本条件下, 连翘苷和牛蒡子苷能达到较好地分离, 样品其他成分对两者的测定无干扰。结果见图1。
2.2 溶液的制备
2.2.1 混合对照品溶液制备
精密称取连翘苷对照品10.71 mg置10 ml量瓶中, 加50%甲醇溶解稀释至刻度, 精密称取牛蒡子苷对照品10.46 mg置10 ml量瓶中, 加50%甲醇溶解稀释至刻度, 分别作为贮备液。分别精密量取连翘苷对照品贮备液1 ml和牛蒡子苷对照品贮备液8 ml置同一10 ml量瓶中, 加50%甲醇稀释至刻度, 摇匀, 即得。
2.2.2 供试品溶液制备
取本品内容物1 g, 精密称定, 精密加入甲醇25 ml, 称定重量, 超声处理30 min, 放冷, 补足重量。滤过, 取续滤液10 ml, 蒸发近干。加中性氧化铝0.5 g, 拌匀, 加置中性氧化铝柱 (100~120目, 1 g, 内径1~1.5 cm) 上, 用70%乙醇80 ml洗脱, 收集洗脱液, 浓缩至干, 残渣用50%甲醇溶解, 转移至5 ml量瓶中, 并稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液, 即得[7]。
2.3 阴性对照溶液制备
取处方中缺连翘、牛蒡子两味药材制成的制剂内容物, 按供试品制备方法制备成缺连翘、牛蒡子的双阴性对照溶液。
2.4 线性关系考察
精密量取连翘苷对照品贮备液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml和牛蒡子苷对照品贮备液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml, 置同一10 m量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 分别精密吸取10μl注入液相色谱仪, 按上述条件测定连翘苷和牛蒡子苷峰面积, 以进样量为横坐标 (X) , 峰面积分值为纵坐标 (Y) , 绘制标准曲线, 得线性回归方程, 连翘苷回归方程:Y=6.12×105X-1.02×105 (r=0.999 9, n=5) ;牛蒡子苷回归方程:Y=7.8×104X-1.18×104 (r=0.999 9, n=5) 。连翘苷和牛蒡子苷在0.021 42~0.107 10μg与0.836 8~6.694 0μg范围内具有良好的线性关系。
2.5 精密度试验
精密吸取同一对照品溶液10μl, 重复进样5次, 连翘苷和牛蒡子苷峰面积的RSD分别为1.8%和1.7%, 结果表明本法精密度良好。
2.6 稳定性试验
精密吸取同一样品制备的供试品溶液 (批号:20100578) 10μl, 分别于 (0、2、8、12、24 h) 进样测定峰面积, 结果表明, 供试品溶液在24 h内稳定, RSD分别为2.2%和2.8%。
2.7 重现性试验
取同一批样品 (批号:20100578) 5份, 按供试品溶液的制备方法制备, 每份测定3次, 测定连翘苷和牛蒡子苷的平均含量分别为0.043 18 mg/g和1.073 00 mg/g, RSD分别为1.2%和1.8%。结果表明本法重现性良好。
2.8 回收率试验
精密称取已知含量的同一批号样品 (批号:20100578) , 连翘苷含量为0.043 18 mg/g和牛蒡子苷含量为1.073 00 mg/g, 共6份, 分别精密加入连翘苷贮备液 (0.010 71 mg/ml) 各1.6、2.4、4.8 ml, 牛蒡子苷贮备液 (0.836 8 0 mg/ml) 各0.6、0.8、1.6 ml, 按供试品溶液的制备方法制备, 并进样10μl测定, 计算回收率。结果见表1。
2.9 样品含量测定
分别取3批银翘解毒颗粒样品, 按供试品制备方法制备成供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl, 注入色谱仪, 按上述色谱条件测定, 计算样品中连翘苷和牛蒡子苷的含量, 结果见表2。
3讨论
本实验在参考其他文献的基础上, 分别考察了不同流动相 (甲醇-水系统、乙腈-水系统) 、不同柱温、不同检测波长下连翘苷和牛蒡子苷与其他成分的分离情况。甲醇-水系统时, 样品中连翘苷峰有干扰。实验结果表明, 乙腈-水系统基线平稳, 分离较好。连翘苷在205、228、277 nm波长处均有最大吸收, 牛蒡子苷在208、224、280 nm波长处均有最大吸收。采用280 nm波长测定时, 峰型较好。杂质干扰少。
供试品的制备曾采用甲醇超声提取后, 直接进样, 结果连翘苷和牛蒡子苷分离效果不好且干扰多。因而本文采用连翘苷常见的中性氧化铝柱对样品进行预处理。
参考文献
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金花解毒颗粒质量标准研究 篇3
1材料
1.1 仪器
岛津20A高效液相色谱仪;SPD-20A紫外可见监测仪:威玛龙色谱工作站;LIBROR AEL-200电子分析天平。
1.2 药品与试剂
绿原酸对照品:中国药品生物制品检定所, 批号:10753-200212;大黄素对照品:中国药品生物制品检定所, 批号:110756-200110;金花解毒颗粒:由广西中医药研究院提供, 批号:20090715;缺味阴性样品:按处方分别配成相应的缺味处方药, 模拟制剂工艺加相应辅料制备而成。乙腈为色谱纯;其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
2.1.1 大黄的鉴别
取本品粉末2g, 加甲醇20ml, 浸泡1小时, 滤过, 取滤液5ml, 蒸干, 加水10ml使溶解, 再加盐酸1ml, 置水浴上加热回流30分钟, 立即冷却, 用乙醚振摇提取2次, 每次20ml, 合并醚液蒸干, 残渣加1ml氯仿使溶解, 作为供试品溶液。另取大黄对照药材1g和缺大黄药材的阴性2g, 同法制成对照药材溶液和阴性对照溶液。再取大黄素对照品, 加甲醇制成每ml含1mg的溶液, 作为对照品溶液。照薄层色谱法《中国药典》2005版一部 (附录VIB) 试验, 吸取上述四种溶液各5μl, 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上, 以环乙烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂, 展开, 取出晾干, 置紫外灯光 (365nm) 下检视。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显三个以上相同的橙黄色荧光斑点, 在与对照品色谱相应的位置上显相同的橙黄色荧光斑点。本法专属性强, 重现性好, 阴性对照试验无干扰。见图1。
1-3供试品 4大黄对照药材 5阴性对照
2.1.2 甘草的鉴别
取本品粉末2g, 加乙醚40ml, 加热回流1小时, 滤过弃醚液, 滤渣挥干乙醚, 加甲醇30ml加热回流1小时, 滤过, 滤液蒸干, 残渣加水20ml使溶解, 用水饱和的正丁醇20ml萃取, 弃水液, 正丁醇提取液用氨试液20ml振摇提取, 弃正丁醇液, 氨试液提取液稀盐酸调pH=2～3, 再用乙酸乙酯20ml萃取, 萃取液蒸干, 残渣加甲醇1ml使溶解, 作为供试品溶液。另取对照药材甘草1g, 同法制成对照药材溶液。再取缺甘草药材的阴性对照样品2g, 同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法《中国药典》2005版一部 (附录VIB) 试验, 吸取上述三种溶液各10μl, 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上, 以环己烷-乙酸乙酯-甲酸-水 (8:8:1:1) 的上层溶液为展开剂, 展开, 取出晾干, 喷以10%硫酸乙醇溶液, 再105℃加热到斑点清晰, 日光下检视, 供试品色谱中, 与对照药材色谱相应的位置上, 显一个以上相同颜色的斑点。本法专属性强, 重现性好, 阴性对照试验无干扰见图2。
2.2 绿原酸的含量测定
2.2.1 对照品溶液的制备
精密称取绿原酸对照品10.05g, 置50ml棕色量瓶中加50%甲醇使溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品储备溶液 (每ml含绿原酸201.00μg) 。
2.2.2 供试品溶液的制备
取本品粉末适量, 研细, 取约0.5g精密称定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入50%甲醇50ml, 称定重量, 静置15分钟, 超声处理5分钟, 取出, 放冷, 再称定重量, 用50%甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 弃初滤液, 取续滤液作为供试品溶液。
1-3.供试品 4.甘草对照药材 5.阴性对照
2.2.3 色谱条件
色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:乙腈-0.4%磷酸溶液 (11:89) ;流速:1.0ml/min;检测波长:327nm;进样量:10μl;柱温:室温。在此条件下, 样品中的绿原酸峰与相邻峰可达到基线分离, 阴性样品无干扰。见图3
2.2.4 线性关系考察
标准曲线的制备:精密吸取上述对照品储备液1、2、5、10、25ml, 分别置25ml量瓶中, 分别加50%甲醇稀释至刻度, 摇匀, 分别作为对照品溶液 (浓度分别为8.04、16.08、40.20、80.40、201.00μg/ml) 。按2.2.1项下的色谱条件分别进样10μg测定, 以绿原酸对照品进样量 (μg) 为横坐标 (X) , 相应的峰面积积分值为纵坐标 (Y) , 绘制标准曲线。得回归方程Y=272495X+11165.45, r=0.9999。表明:当进样量在0.0804～2.0100μg范围内时, 绿原酸进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系。
2.2.5 精密度实验
取同一供试品溶液10μl, 按2.2.3项下的色谱条件, 连续5次进样, 测定峰面积, 计算含量。结果峰面积积分值依次为5.21、5.06、5.19、5.09、5.15, RSD=1.25%, 表明仪器精密度良好。
2.2.6 重复性试验
取同一批金花解毒颗粒 (批号:9070710) , 平行取6份, 按2.2.2项下的方法制备供试品溶液, 按2.2.3项下的色谱条件测定, 样品含量依次为:5.29、5.15、5.11、5.23、5.19、5.25mg/g, RSD=1.28%, 结果表明样品的重复性较好, 适于定量。
2.2.7 稳定性考察
精密吸取同一批供试品溶液 (批号:070710) , 按2.2.3项下的色谱条件, 分别在0、2、4、6、8、10、12小时进行测定, 结果绿原酸含量的平均值为5.18mg/g, RSD为1.34%, 表明被检测物在12小时之内稳定。
2.2.8 加样回收率测定
精密称取绿原酸对照品13.05mg, 置500ml棕色量瓶中, 加50%甲醇稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品溶液 (浓度为26.1μg/ml) 。精密称取重复性试验项下的样品 (批号:070710) 6份, 按2.2.2项下的方法制备供试液, 按2.2.3项下的色谱条件测定, 计算回收率。结果表明平均加样回收率为99.27%, RSD为1.05%。
2.2.9 含量测定
见表1。
按2.2.2项下的方法制备供试品试液, 按2.2.3项下的色谱条件, 测定本品三批样品中绿原酸含量分别为:5.20、4.92、5.88mg/g, 平均值为5.33mg/g。
3讨论
3.1 实验对方中其他药材也进行TLC鉴别, 但由于特征性不强, 故未纳入正文。
3.2 中药复方制剂以绿原酸含量为测定指标的文献报道很多, 实验参考有关文献对多种流动相进行了选择, 最后确定乙腈与磷酸溶液比例为 (11:89) 为流动相, 绿原酸峰形对称, 样品分离良好。
3.3 金银花在方中为主药, 所以本文以绿原酸为指标, 进行了测定方法的研究, 采用HPLC法测定该制剂中绿原酸的含量, 方法简便、准确、选择性好、阴性无干扰, 可作为该制剂的含量测定方法。
摘要：目的:建立金花解毒颗粒的质量标准。方法:用薄层色谱法鉴别处方中的大黄、甘草;采用高效液相色谱法测定方中金银花的绿原酸的含量。结果:薄层色谱法可检出方中含有大黄和甘草, 薄层色谱斑点清晰, 重现性好。HPLC测定绿原酸的含量在0.0804～2.0100μg范围内线性良好, 平均加样回收率为99.27%, RSD=1.05%。结论:所建立的薄层鉴别和含量测定方法专属性强、重现性好, 可用于金花解毒颗粒的质量控制。
关键词：@金花解毒颗粒,质量标准,金花解毒颗粒/分析,绿原酸
参考文献
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[4]杜威, 靳守东, 陈善, 等.茵陈五苓丸的质量标准研究.解放军药学学报, 2009, 25 (6) :521.
扶正解毒颗粒制备工艺研究 篇4
人参为本方君药,主要含有人参皂苷、人参多糖,均具能显著提高虚证患者的免疫功能及显著的抗肿瘤作用。人参皂苷含量测定方法较为成熟、可靠,故本工艺以人参皂苷为优选指标进行工艺筛选较好。本文采用正交设计试验以人参皂苷为含量控制指标,优选本制剂最佳制备工艺。
1 仪器与试药
1.1 仪器
FA1104W电子天平,AS701KDT Ultrasonic Cleaner,SHZ-95A型循环水式多用真空泵,RE-52B型旋转薄膜蒸发器,UV-9200型紫外可见光分光光度计,SSI高效液相色谱仪(美国科学系统公司),YWG-C18键合硅胶柱(4 mm×150 mm,5μm)。
1.2 试药
红参、黄芪、北沙参、玄参、天花粉、生地黄、鳖甲、紫草、丹皮、蒲公英、紫花地丁、金银花、川赤芍等(泸州市荷花中药有限公司);人参皂苷Re(供含量测定用,约20 mg,中国药品生物制品检定所,批号为110753-200013);人参三九配方颗粒(三九集团制药公司,批号为20070211);甲醇(分析纯);多效蒸馏水(泸州医学院附属医院制剂室提供)。
2 方法与结果
2.1 人参皂苷Re色谱条件
色谱柱为YWG-C18(4 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇-水(72∶28);流速为0.8 ml/min;柱温为47℃;检测波长为203 nm。
2.2 人参皂苷Re标准曲线的绘制
精密称取人参皂苷Re对照品10 mg,用甲醇溶解并定容至10 ml,即得1.0 mg/ml的对照品溶液。精密吸取对照品溶液0.70、1.50、1.75、2.10、3.50 ml,置10 ml容量瓶中,分别用甲醇溶液定容,取不同浓度溶液分别进样,以进样量M为横坐标,峰面积A为纵坐标绘制标准曲线,人参皂苷Re在0.242 5~9.414 0μg范围内,峰面积A与进样量M呈现非常良好的线性关系,回归方程为A=3 922.7+699 292M,R2=0.997,n=6。
2.3 人参皂苷Re样品溶液的配制
按照考察因素表(表1)和正交设计表(表2)安排加水煎煮正交提取试验:精密称取红参等药材,共9份,按表1和表2安排加水煎煮正交试验,合并滤液,60℃减压浓缩为相对密度为1.30(25℃测定)的稠浸膏,50℃减压烘干为干浸膏,储存备用。精密称取该干浸膏4 000 mg,加入200 ml甲醇溶液回流提取3 h,滤液4 000 r/min离心10 min,取上清液置于250 ml容量瓶中,用甲醇溶液稀释至刻度。取10 ml溶液置于25 ml容量瓶中,用甲醇溶液稀释至刻度,即得供试品溶液。
2.4 样品中人参皂苷Re含量测定
依照“2.3”配制的人参皂苷Re样品溶液次序,按照“2.1”项人参皂苷Re-HPLC色谱条件进行测定,测定结果见表2。
2.5 正交试验优选提取工艺
2.5.1 正交试验方案设计
根据人参中人参皂苷Re、黄芪中的黄芪甲苷与黄芪多糖、北沙参中的沙参多糖、玄参中的环烯醚萜苷、生地黄中的环烯醚萜苷、阿胶中的高分子蛋白溶于水的性质,以及蒲公英、紫花地丁、天花粉常规采用加水煎煮提取方法较多,故这些药材以及上述乙醇超声提取后的药渣一并采用加水煎煮的方法提取有效基础物质[1,2,3]。以人参皂苷Re收率为指标(考虑到人参皂苷Re高效液相色谱含量测定方法成熟可靠,人参在本方里是君药,是抗肿瘤的主要药物),考虑加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数4个主要因素、3个水平,选用L9(34)正交表安排试验,因素水平安排见表1。
2.5.2 加水煎煮正交试验结果分析
精密称取红参等药材,共9份,按表1安排加水煎煮正交试验,结果见表2。由表2可知,对加水煎煮提取人参皂苷Re收率影响因素由大到小顺序为A>D>B>C,最佳工艺为A3B3C3D2。验证试验按照A3B3C3D2安排,加水煎煮提取人参皂苷Re的收率为(0.607 50±0.018 40)(mg/mg×100%)(n=6)。加水量为药材量的15倍,浸泡3 h,每次煎煮4 h,煎煮2次可使人参皂苷Re收率达到最高[4]。
2.5.3 流化喷雾制粒工艺优选
按上述乙醇超声提取、加水煎煮提取工艺条件制备药物稠浸膏,以合格颗粒(用20目和40目筛筛选)收率为指标,优选流化喷雾制粒工艺条件,见表3、4。
影响流化喷雾制粒因素由大到小顺序排列为A>D>C>B。直观分析可知,扶正解毒颗粒流化喷雾制粒最佳工艺为A3B3C2D2。验证实验按A3B3C2D2安排制粒,合格颗粒收率为(73.580±1.442)%(n=3),表明扶正解毒颗粒流化喷雾制粒工艺可行,即流化喷雾制粒膏粉比为2∶1,稠浸膏相对密度为1.30(25℃测定),喷液电压为120 V,每批料抖袋65个周期(每个抖袋周期来回抖袋2次)。
2.5.4 中试
2.5.4. 1 处方
红参0.6 kg、黄芪3.0 kg、北沙参3.0 kg、玄参1.5 kg、天花粉3.0 kg、生地黄3.0 kg、鳖甲3.0 kg、紫草3.0 kg、丹皮1.5 kg、蒲公英3.0 kg、紫花地丁3.0 kg、金银花1.5 kg、川赤芍1.5 kg等。
2.5.4. 2 工艺路线
上述药材川赤芍、丹皮、紫草、金银花、鳖甲(醋制)等粉碎为粗粉(过2号筛),加入15倍无水乙醇,45℃超声提取3次,每次40 min,合并提取液,减压回收乙醇,收集药液备用。红参(最好单独煎煮)、黄芪、北沙参、玄参、生地黄、阿胶(最好单独烊化后加入)、蒲公英、紫花地丁、天花粉及上述乙醇超声提取后的药渣,加水共煎。加水量为药材量的15倍,浸泡3 h,每次煎煮4 h,煎煮2次,合并滤液,并与上述乙醇超声提取药液合并,静置过夜,取上清液,减压浓缩成相对密度为1.30(25℃测定)稠浸膏,进行流化喷雾制粒。膏粉比为2∶1,稠浸膏相对密度为1.30(25℃测定),喷液电压为120 V,每批料抖袋65个周期(每个抖袋周期来回抖袋2次)。用20目和40目筛筛选合格颗粒,合格颗粒收率为72.33%,整粒,分装于铝塑薄膜包装袋中(规格:10 g),得扶正解毒颗粒约300袋[5,6]。
3 讨论
3.1 红参加水煎煮古今考证
中医药经典古籍记载:红参等滋补药材应水宽、小火慢煨、久煨、勤换水才能保证疗效。试验结果表明,红参煎煮时,加水量为药材量的15倍(加水量充足),浸泡3 h(药材充分浸透),每次煎煮4 h(煎煮时间长),煎煮2次(保持较高浓度差),可使人参皂苷Re收率达到最高。该结论与中医药经典古籍记载内容一致,同时该结论为中医药经典古籍记载内容提供了科学依据。
3.2 超声提取溶剂的选择
芍药苷为氧苷,易溶于水及含水醇中,在常用溶媒水、甲醇及乙醇中均有较好的溶解度。但考虑到水的极性较醇大,且水或乙醇提取物不能直接用于液相进样,一般要将水或乙醇挥干后用甲醇溶解才能进样,因此小试时可以直接用甲醇提取更为方便。但是考虑到甲醇的毒性和环境保护要求,中试和大生产中不能用甲醇提取,最好用乙醇提取。
3.3 提取温度的选择
考虑到超声波清洗仪在一定频率下所能达到的最低温度为45℃,甲醇的沸点虽为64.5℃,但在提取时不到60℃甲醇即会气化冲开瓶塞,在此温度之间选择等差的温度,45、50、55℃较为理想。
3.4 浸提方法的选择
超声波在媒质中传播可使媒质质点在其传播空间内进入振动状态,强化溶质扩散、传质,且超声波在传播过程中其能量不断被媒质质点吸收变成热能,导致媒质质点温度升高,同时,当大量的超声波作用于提取介质,在振动处于稀疏状态时,介质被撕裂成许多小空穴,这些小空穴瞬间即闭合,闭合时产生高达几千大气压的瞬时压力。正是由于超声波具有以上的机械作用机制、热学作用机制以及空化作用机制,它在提取时具有节约时间、不须加热、节能、提取效率高、溶剂用量少、提取有效成分含量高等诸多优点。结合人参皂苷的具体理化性质,选择超声波提取法较为经济合理[7,8]。
摘要：目的:优选扶正解毒颗粒的制备工艺。方法:以人参皂苷Re收率为指标,应用正交设计试验优选扶正解毒颗粒的提取工艺。结果:影响人参皂苷Re水提的主次因素由大到小排列依次是A>D>B>C(A为加水量、B为浸泡时间、C为煎煮时间、D为煎煮次数),优选的提取工艺为加水量为药材量的15倍,浸泡3h,每次煎煮4h,煎煮2次;优选的流化喷雾制粒工艺条件为流化喷雾制粒膏粉比为2∶1,稠浸膏相对密度为1.30(25℃测定),喷液电压为120V,每批料抖袋65个周期(每个抖袋周期来回抖袋2次)。结论:优选的制备工艺稳定、可行。
关键词：扶正解毒颗粒,正交设计试验,工艺研究
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