荧光测定（共12篇）
荧光测定 篇1
硒是1817年瑞典学者Berzelius发现的一种元素[1], 人和动物如果吃了富含高含硒量的水和食物后, 就会引起中毒和死亡。有实验表明人体的生长发育离不开硒元素, 硒元素在有机体体内的物质能量代谢中发挥着重要作用。富硒植物有大蒜、洋葱等, 大蒜是天然的含硒植物。国际标准方法的测定原理是, 硒是以Se6+存在于动植物体内, , 将样品酸化, , 然后Se6+氧化为Se4+, 进行荧光强度测定。
用荧光分光光度法测定大蒜中硒含量, 方法快速、简便、准确。
1 材料和方法
1.1 供试材料大蒜购于沈阳某超市, 原料质量合格, 中间不会引入杂质, 影响金属含量。
1.2仪器与试剂AFS-2202型原子荧光光度计 (天津吉天仪器有限公司) ;硒标准工作液 (1μg/m L) ;硒标准储备液 (100μg/m L) ;所用试剂均为优级纯。
1.3 样品制备大蒜去皮, 清洗干净, 去除水滴, 搅拌打成均匀浆液。
1.4硒含量的测定称取大蒜试样0.5~2.0g, 置于250m L三角烧瓶或高脚烧杯中, 加10.0 m L混合酸 (将硝酸与高氯酸按9:1体积混合) , 静置12小时。在电热板上加热, 滴加硝酸到溶液中, 当溶液变为无色并且出现白烟时.将剩余溶液加热至2m L左右, 冷却, 再加1:1的盐酸溶液5.0m L, 在电热板上继续加热, 溶液变为无色并且出现白烟。, 然后Se6+氧化为Se4+。冷却, 将溶液转移至50 m L容量瓶中。加盐酸10.0 m L和铁氰化钾溶液6.0m L, 定容混匀待测。做空白试验。
计算公式:硒的含量 (m g/kg) = (C1-C2) VD/1000m
式中, C1为试样测定浓度 (μg/L) ;C2为试样空白测定浓度 (μg/L) ;V为试样定容体积 (m L) ;D为分取倍数;m为试样质量 (g) 。
1.5硒标准曲线的绘制分别吸取硒标准工作液0、2.50 m L于50 m L容量瓶中。加盐酸10.0 m L和铁氰化钾溶液6.0 m L, 定容混匀待测。设定标准曲线的浓度范围:0、5.00、10.00、20.00、30.00、40.00、50.00μg/L。仪器条件:负高压300V;灯电流80m A;载气流量300m L/min;屏蔽气流量600m L/min;原子化高度6min;测量方式为标准曲线法;读数方式为峰面积;延迟时间1.5s;读数时间8s。
2 结果与分析
2.1硒标准曲线的线性范围50.0μg/L硒标准溶液作为最高浓度, 将0μg/L硒标准溶液作为标准空白, 把, , 以荧光强度值 (I) 对硒浓度值 (C) 进行回归, 得到回归方程:I=19.848C+10.583, 相关系数R=0.9994。
2.2 样品测定结果
计算方法:将测定的荧光强度结果代入得到的标准曲线方程中, 计算硒含量。结果见表1。
3结语因为荧光强度变化很快, 为避免由于荧光强度随时间延长而导致含量减低, 应该尽快进行检测, 同时对反应过程中p H的调节也要准确。另外, 研究表明普通市售大蒜中含硒量很低, 我们还需要进一步对含硒量丰富的大蒜进行功能性研究。
摘要：用原子荧光分光光度法测定大蒜样品中的硒含量, 按照国家法定标准中的食物中硒的含量进行测定。大蒜中硒含量浓度在一定范围内与其荧光强度呈线性关系, 相关系数为0.9994, 硒平均含量0.0329μg/g。结果表明此方法可靠, 重现性好。
关键词：硒,大蒜,原子荧光分光光度法
参考文献
[1]孔祥瑞.硒的生物学作用及临床生化意义[J].国外医学临床生物化学与检验分册, 1982, 3 (4) :33-34.
[2]贾奎寿, 叶素芳.微量元素硒与人体健康的研究[J].广东微量元素科学, 2002, 9 (1) :4-6.
[3]解宏智, 周纪侃.荧光法测定蘑菇及其水解液中痕量硒的研究[J].分析测试学报, 1998, 1:61-63.
[4]段咏新, 傅庭治.大蒜对硒的吸收及硒对大蒜生长的影响[J].广东微量元素科学, 1997, 4 (11) :52-55.
荧光测定 篇2
双道原子荧光法测定地质样品中砷锑
本文采用AFS-830双道原子荧光光度计法对地质样品中砷锑的测定进行了研究.建立了一种准确测定样品中砷、锑的方法.该方法简便、快捷、结果令人满意.
作 者：陈思成 金丽 Chen Si cheng Jin Li 作者单位：吉林省有色金属地质勘查局测试中心,吉林长春,130012刊 名：魅力中国英文刊名：CHARMING CHINA年，卷(期)：2009“”(16)分类号：P5关键词：AFS-830 砷 锑
荧光测定 篇3
【关键词】乙肝病毒；PCR；HBV-DNA
【中图分类号】R512.6 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8231（2011）11-1985-01
乙型肝炎是世界上常见的传染病之一，乙肝病毒携带者约占正常人群的10％－15％，HBV者主要依靠血清标志物乙肝五项来检查发现，但由于检查方法多样性有时候会出现漏检和误检。随着科学技术的不断发展，出现了基因工程学，运用到临床检测乙肝病毒含量，出现了基因扩增检验技术（PCR）。
1 对象与方法
1.1 标本168份乙肝携带者血青来自本院2008-2至2008-10住院病人。
1.2 前SI抗原采用双抗体夹心法。
1.3 乙肝血清标志物采用ELISA法检验人五项标志物。
1.4 HBV-DNA检验采用荧光定量PCR法测HBV-DNA.
1.5 统计学处理 技术资料以例数和百分率进行描述。
2 结果
2.1 330份标本乙肝血清标志物、前SI抗原抗原和HBV-DNA检测结果根据5组不同乙肝血清标志物(HBV-M)标本中前SI抗原和HBV-DNA的检出数，计算出前SI抗原和HBV-DNA相关系数r=0.999,两者呈正的直线相关（t=38.70,p<.01）;前SI抗原和HbeAg相关系数r=0972，两者呈正的直线相关（t=7.165,p<0.01）.见表1。
表1 5组不同HBV－M、前SI抗原和HBV－DNA检测结果
2.2 HBV-DNA与前SI抗原的关系 HBV－DNA与前SI抗原检验结果存在相关关系（X2=294.82,p<0.005）,两者检验结果无差异（X2＝0.44，P）0.5）。
3 讨论
3.1 两种测定方法的应用价值
ELISA测定的是HBV DNA所编码表达的蛋白质(多肽)抗原或相应的抗体。FQ-PCR测定HBV DNA。已知HBV在患者血清中有三种存在形式:球形颗粒、管形颗粒和完整的病毒颗粒(Dana颗粒)。Dana颗粒中含HBV DNA,而球形、管形颗粒不含DNA。不论何种形式的HBV只要其达到一定浓度即可被ELISA检出,而只有当Dana颗粒存在时FQ-PCR才能出现阳性结果。在技术上, FQ-PCR采用荧光标记和闭管检测,克服了常规PCR扩增产物污染所致假阳性的缺点,使结果具有极高的特异性和敏感性。
3.2 ELISA与PCR的机制
HBeAg是乙肝病毒内核的主要结构蛋白,是HBV复制和传染性的标志。在本文6例HBeAg阳性标本中, FQ-PCR全部阳性,提示HBeAg与HBV DNA的存在是完全一致的,二者具有相似的流行病学意义。随着HBeAg消失,抗HBe的出现, FQ-PCR的阳性率、HBV DNA的拷贝数均降低,说明抗HBe出现后,病毒的复制减弱,传染性减低;抗HBc不是保护性抗体,单项抗HBc阳性提示机体既往感染或急性感染的“窗口期”。出现这种模式时应作PCR测定HBV DNA以确定该患者处于何种状态。本文6例单项抗HBc阳性标本有1例FQ-PCR阳性, DNA拷贝数2.3×106;抗HBs是重要的保护性抗体,仅抗HBs阳性提示机体感染乙肝病毒后已康复,或接种过乙肝疫苗至今仍有免疫力。在本文测定330例单项抗HBs阳性标本中,有1例FQ-PCR阳性, HBV DNA平均拷贝数2×105;表明虽然抗HBs已经出现,仍有少量HBV复制。在五项指标全部阴性的330例标本中,有2例PCR阳性, HBV DNA平均拷贝数为1×105。产生这种结果的机制是:①病毒感染早期,抗原、抗体尚未形成。②ELISA测定的敏感性低,使低浓度的HBsAg漏检［1]。③患者免疫功能低下,不产生免疫应答或患者出现免疫耐受现象, ELISA无法测定出相应的抗原、抗体。④HBV基因变异,S区变异导致HBsAg抗原性变异,不能被ELISA试剂检出;前C区变异时HBeAg不能表达［2]。160例同时出现两项或三项抗体的标本全部阴性,与文献报道的32%阳性率相差较大,可能是病例选择不同之故［3]。
由以上结果可以看出, FQ-PCR检测定量HBV DNA客观地反映了HBV感染、复制及病程变化,修正或补充了对ELISA测定结果的解释。特别是在病毒感染早期, ELISA不能检测到低滴度的病毒抗原时,FQ-PCR即可检测到HBV DNA的复制,有利于乙肝的早期诊断。对于用干扰素等药物治疗的患者,测定治疗前后病毒核酸的拷贝数,有利于疗效观察及预后判断.
参考文献
［1］ 杨绍基，任红，主编，传染病学【M】。第7版。北京：人民卫生出版社，2008.24-25。
［2］ 何华，张大志。乙型肝炎病毒前SI抗原的研究进展【J】.中华肝病杂志，2004，12（12）：765-766。
［3］ 蔡逸婷，谢松业，丁莉莉。501例HBV感染者血清前SI蛋白抗原检验【J】。解放军预防医学杂志，2003，21（5）：349。
冷原子荧光光度法测定土壤中汞 篇4
绿色、环保与人们的生活息息相关。然而培育农作物生长的土壤随时都可能受到外界的污染。人摄入含汞化合物后,慢性汞中毒会出现胃肠症状,包括反复发作的腹痛和腹泻;而有机汞具有脂溶性,危害性更大,严重时会危及人的生命。目前在环境监测领域中有关土壤中汞的测定文献资料尚不多见,汞的测量方法中,用的较多的是冷原子吸收法,样品的消解多采用湿法消解或微波消解。本文选用冷原子荧光光度法测定土壤中的汞,这种方法克服了冷原子吸收法中灵敏度低,再现性差等方面的不足。土壤样品的消解采用沸水浴中密闭进行,避免了传统土壤消解在敞开的酸体系中进行,酸耗用量大,对环境的污染较严重,消解时间长,消解条件不易掌握等特点,同时克服了微波消解样品数据的准确度不够理想。可以做到省时省力,减少实验成本,提高工作效率[1]。
2 材料与方法
2.1 方法原理
基态汞原子在波长为253.7nm紫外光激发下产生共振荧光,在一定的测量条件下,荧光强度与汞浓度成正比。
土壤样品用硝酸-盐酸混合试剂在沸水浴中加热消解,使所含汞全部以二价汞的形式进入到溶液中,再用硼氢化钾将二价汞还原成单质汞,形成汞蒸气,在载气(氩气)带动下导入仪器荧光池,通过测量荧光强度,求得样品中汞的含量。
2.2 仪器与试剂
AFS-830型双道原子荧光光度计、实验用氩气、温控式电热板、烧杯、50mL具塞比色管、50mL容量瓶;汞标准溶液(中国环境监测总站)、汞标准固定液(0.5g重铬酸钾溶于950mL水再加50mL硝酸)、硝酸-盐酸混合液(2mol/L硝酸～4mol/L盐酸:量取133mL硝酸和333mL盐酸混合后加水至1 000mL)、5%硝酸载流液、0.02%硼氢化钾(称取0.10g硼氢化钾溶于2g/L氢氧化钾溶液至500mL),以上试剂均为优级纯,实验用水为超纯水,所用玻璃器皿均用重铬酸钾-硝酸洗液浸泡24h以上。
2.3 样品消解
称取经制备完的土壤样品1g左右,置于50mL具塞比色管中,加入2mol/L硝酸-4mol/L盐酸溶液10mL,加塞充分摇匀,于沸水浴中加热消解1h。取出冷却,将试液移入50mL容量瓶中,用少量汞标准固定液冲洗残渣几次,洗涤液并入容量瓶中,并用汞标准固定液定容至标线,摇匀,过夜,待沉淀完全后尽快取上清液测量,同时作样品空白。
2.4 工作曲线绘制
取6只50mL具塞比色管,准确吸取汞标准使用液(25.0ng/mL)0.50,1.00,2.00,3.50,5.00,6.00mL置于50mL具塞比色管中,加入2mol/L硝酸-4mol/L盐酸溶液10mL,加塞充分摇匀,于沸水浴中加热消解1h。取出冷却,分别将试液移入50mL容量瓶中,用少量汞标准固定液冲洗比色管几次,洗涤液并入容量瓶中,并用汞标准固定液定容至标线,摇匀。以汞标准固定液为空白液进行空白测定,绘制工作曲线。
2.5 仪器工作条件
点火状态,负高压270V,灯电流25mA,原子化器高度8mm,载气400mL/min,屏蔽气1 000mL/min,测量方法为标准曲线法,读取方式为峰面积。
2.6 测试方法
方法检出限为0.010 0μg/L。实验表明,当土壤质控样品质量在1g左右时,样品的准确度较好,当样品的质量较少时,测量结果容易出现偏差。
开机后将测量方法选test,在test状态下进行仪器预热30min,然后,将测量方法选标准曲线法,根据需要输入各参数。接下来进行空白值测定,待空白值稳定后进行工作曲线的测定,最后进行样品浓度的测定。
2.7 结果计算
X=[(C-C0)×V]÷(M×1 000).
式中X为所测样品中汞的含量,mg/kg;C0为样品空白浓度,ng/mL;C为测定样品的浓度,ng/mL;V为样品溶液总体积,mL;M为所称样品的质量,g。
3 实验结果分析
3.1 仪器条件选择
(1)负高压、灯电流对荧光强度的大小都有影响,荧光强度随着负高压或灯电流的增加(或减少)而增加(或减少),实验证明,负高压为250～300V、灯电流为20～25 mA时荧光强度值重现性较好,本实验选择负高压270V、灯电流25mA。
(2)在点火状态下,样品的重现性及曲线的相关性都较好,不点火的情况下,样品的重现性及曲线的相关性均较差。0.02%硼氢化钾不能形成氩氢火焰,点火的目的赶去水蒸汽[4]。
3.2 硼氢化钾浓度的影响
实验表明硼氢化钾浓度对测定汞影响很大,经过多次、反复实验说明,当硼氢化钾浓度为0.02%时,仪器的灵敏度、测定样品的重现性、质控样的准确度均较理想。
3.3 工作曲线与标准曲线在样品测定中的差异
实验表明工作曲线的荧光强度明显高于标准曲线的荧光强度,工作曲线的斜率高于标准曲线的斜率,在土壤样品测定时,用工作曲线测定的土壤样品的质控样准确度好,而用标准曲线测定的土壤样品的质控样浓度偏高。工作曲线的相关系数范围:0.999 0～0.999 7,标准曲线的相关系范围:0.999 7～0.999 9。
3.4 方法的精密度和准确度
对2个质控样及两个土壤样品进行6次测定结果见表1。
3.5 加标回收率
对两个土壤样品加标进行测定,测定结果见表2。
4 结语
汞作为土壤污染的重要指标,应用冷原子荧光法测定土壤中汞的含量,分析方法的精密度、准确度均较为理想,分析样品的相对标准偏差为2.77%～5.08%,加标回收率为89.7%～104%;尤其是土壤样品的消解操作简便、无污染、酸的耗费量少,因此该方法是一种较好的土壤中汞的测定方法。
摘要：分析了在沸水浴中用2mol/L硝酸——4mol/L盐酸在密闭的玻璃器皿中将土壤样品进行消解,然后用冷原子荧光法测定土壤中的汞含量,实验表明:该方法与常规样品消解方法相比,样品消解时间短,所用酸的量较少,可操作性强,样品的准确度、加标回收率较高。
关键词：土壤,消解,汞,冷原子荧光
参考文献
[1]国家环保总局.水和废水监测分析方法[R].北京:国家环保总局,2002.
[2]中国环境监测总站.土壤元素的近代分析方法[R].北京:中国环境监测总站,2006.
[3]魏复盛.水和废水监测分析方法[M].北京:中国环境科学出版社,2002.
荧光测定 篇5
海水中低含量铵氮的高灵敏度荧光法测定
提出了一种改进的、可测定海水中低含量铵氮的高灵敏度荧光分析方法.其原理是在硼酸缓冲溶液的`作用下,海水中的铵氮与邻苯二甲醛(OPA)发生衍生化反应,通过测定生成的荧光产物来确定水体中铵氮的浓度.方法的检测限极低(0.002 5 μmol/L),重现性好,且水样用量少(10 mL),适用于海水中溶解有机物的光铵化研究及其他低铵含量水样的测定.
作 者：余翔翔 郭卫东 YU Xiang-xiang GUO Wei-dong 作者单位：厦门大学,海洋与环境学院,福建,厦门,361005 刊 名：海洋科学 ISTIC PKU英文刊名：MARINE SCIENCES 年，卷(期)：2007 31(4) 分类号：P734.4 关键词：铵氮 荧光法 溶解有机物 光铵化 海水荧光测定 篇6
1材料与方法
1.1仪器与设备
荧光分光光度计（日本日立，F-7000）、 涡旋混合振荡器（Ms3，广州仪科）、数显恒温振荡器（上海梅香，SHY-2）、千分之一电子天平（赛多利斯CP323S）、 万分之一电子天平（赛多利斯，BT224S）、超纯水仪（millipore）、离心机（湖南湘仪，TDZ5-WS）。
1.2主要试剂与材料
脱芳石油醚（色谱纯或分光纯，沸点60～90 ℃）；无水乙醇（色谱纯）；氢氧化钠（优级纯），氯化钠（优级纯），二氯甲烷（色谱纯）；
标准贮备溶液：购自国家海洋环境监测中心，浓度1 000 μg/mL，采用20号重柴油和润滑油为原料配制而成。
实验所用水为超纯水。
2实验方法
2.1样品预处理
贝类：用蒸馏水洗净贝壳外部附着物，取软体组织和体液匀浆后放入磨口玻璃瓶中，-20 ℃保存备用。
4讨论
4.1碱解条件
实验比较了两种条件下的碱解结果，（1）35 ℃恒温水浴振荡11 h；（2）35 ℃烘箱中放置11 h，每隔1 h 涡旋振荡60 min。实验发现，两种情况下的标准工作曲线的线性、回收率和相对标准偏差相差无几，但由于烘箱水解每隔1 h涡旋振荡一次，比较浪费人力，因此选用35 ℃恒温水浴振荡碱解条件。
4.2本方法相对于GB17378.6-2007中的石油烃测定做了以下改进
碱解温度由室温、每隔1 h振荡一次，改为35 ℃恒温水浴振荡，避免了温度变化的影响，同时节省了人力。
由50 ℃旋转蒸发浓缩萃取液后再氮吹至干改为40 ℃旋转蒸发至干，缩短了操作时间，增强了方法的可操作性。
由于定容后的溶液不一定澄清，定容后增加了离心过程。
4.3实验中应注意的问题
样品的制备过程中避免接触塑料器具，尤其是对于定容后的浑浊溶液，应离心而不能用过滤膜。
样品称量时注意不要沾到皂化瓶口，否则会造成碱解不完全。
样品的均匀性对数据的影响非常大，由于鱼贝的不同部位富集石油烃的能力不同[6]，因此样品预处理和称样时均要注意保证样品的均匀性。
石油醚、无水乙醇、二氯甲烷的荧光强度：本实验选用了色谱纯或分光纯的试剂，其荧光强度在360 nm处无吸收，对检测结果不会造成影响。
所用分液漏斗为聚四氟乙烯活塞，不能使用涂抹了凡士林的磨口塞分液漏斗。
5结论
应用该法检测贝类中的石油烃含量，有的样品最终得到的上机液中会出现凝胶状物质，造成测定结果不准确；鱼虾检测的最终上机溶液澄清，回收率好。因此该法不完全适用于贝类等物质中石油烃的测定，但能很好地应用于鱼虾中石油烃的检测。
参考文献：
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[2] 贾小平，林钦，吕晓瑜，等.荧光分光光度法测定海洋贝类总石油烃的方法研究[J].湛江海洋大学学报，1999，119（4）： 30-35
[3] 尚龙生，许乙烈，马永安，等.荧光分光光度法测定海藻中的石油烃[J].分析化学研究简报，1997，25： 205-207
[4] GB17378.6-2007，海洋生物监测[s] 第6部分：生物体分析.北京：中国标准出版社，2008
[5] 张海燕，周德庆.荧光分光光度法测定水产品中石油烃的方法研究[J].海洋水产研究，2008，29（4）：106-111
[6] 杨广杏，万军明，麦志勤.鱼类石油烃污染剖析[J].环境与开发，1995，10（3）：25-26
原子荧光法快速测定土壤中的砷 篇7
关键词：原子荧光,土壤,砷
砷及其化合物对人体有强烈的毒性危害, 土壤中的砷经水体和农作物吸收, 由食物链进入人体累积且不易排出, 因此对土壤中的汞检测刻不容缓。本文介绍的方法具有准确、快速、成本低、环保等优点, 适用于大批量样品量的检测工作。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
1.1.1 仪器
AFS一3100双道原子荧光光度计 (北京科创海光仪器有限公司) , 高性能空心阴极灯。
1.1.2 试剂
本方法使用试剂均为分析纯, 用水为一级水。
还原剂:称取7g氢氧化钾和14 g硼氢化钾溶解于1L水中 (现配现用为宜) 。
载流液:5% (v/v) HCl。
硫脲-抗坏血酸溶液:称取硫脲和抗坏血酸各50g解于1L水中。
砷标准溶液:用在国家标准物质中心购买的编号为GSB04-1714-2004砷标准溶液1 000μg/m L逐级稀释到1μg/m L (介质为20% (v/v) HC) 备用。
1.2 分析步骤
准确称取0.1000g试样 (200目) 于25m L比色管中, 加入5m L稀王水 (HCl:HNO3:H2O=3:1:4) , 摇动比色管使样品充分悬浊于酸液中, 然后把比色管放入沸水浴中分解1h, 其间摇动1~2次, 取下冷却后, 加入硫脲-抗坏血酸[1]溶液5m L, 用20% (v/v) HCl稀释至刻度, 混匀。静置澄清。同批随带2个空白试验。
砷工作曲线绘制:分别吸取0.00, 0.50, 1.00, 2.00, 4.00, 6.00 m L砷标准溶液于50m L容量瓶中, 加入10m L加入硫脲-抗坏血酸溶液, 用20% (v/v) HCl稀释至刻度混匀。此标准系列砷浓度分别为0.0, 10.0, 20.0, 40.0, 80.0, 120.0μg/L。
2 结果与讨论
2.1 仪器条件选择
经过多次实验确定仪器的最佳测量条件见下表1。
2.2 硼氢化钾浓度的选择
硼氢化钾浓度过低时反应不完全, 导致砷的相对荧光强度低。浓度过高时, 背景值过高, 会对低含量砷的荧光强度产生干扰。经过多次实验确定选定浓度为14g/L的硼氢化钾溶液。
2.3 线性范围
在最佳仪器条件下测定砷的标准系列, 结果见表2。
2.4 方法的检出限
按试验方法测定砷的样品空白和10μg/L砷标准溶液11次, 按检出限公式DL=3Sb/K计算, 得出检出限为0.01μg/g。
2.5 方法的准确度、精密度和加标回收率
按本方法分析步骤, 分别对国家标准物质GBW07452~GBW07456各取12份进行测定, 由表3可以看出测定值与推荐值吻合, 方法精密度 (RSD, n=12) 为2.45%~5.32%, 方法加标回收率为95%~104%。
3 结论
本方法经过4年多的实际应用和多次国家能力验证, 检测结果满足实验室要求, 且便捷易操作, 适用于生产型实验室大批量土壤样品的检测工作。
参考文献
[1]樊孝俊, 龚娴, 彭刚华, 等.原子荧光法测定土壤中砷前处理方法影响因素的研究[J].中国环境监测, 2010, 26 (6) :25-28.
[2]国家环保总局水和废水检测分析方法 (第四版) [.M]北京:中国环境科学出版社, 2002.
荧光光度法测定戊唑醇的研究 篇8
荧光分析法已被广泛应用于工业、农业、医药、卫生和科学研究等各个领域的样品检测。它具有方法快捷、重现性好、选择性高、取样容易、试样需要量少等优点, 对农药的检测研究也有报道。李满秀等[8]用 β-环糊精增敏使荧光强度增强, 建立了荧光法测定残杀威的新方法。张国文等[9]在pH7.0 的Britton-Robinson缓冲介质中, 用十六烷基三甲基溴化胺 (CTMAB) 增敏的荧光强度与抗蚜威的浓度呈良好的线性, 测定食品中抗蚜威残留量。但是由于可发出荧光的农药种类很少, 荧光光度法在农药检测中有一定的局限性。戊唑醇本身几乎没有荧光, 其荧光法检测未见有报道。
血清白蛋白是血浆中含量最丰富的载体蛋白, 它能与药物结合通过血浆贮存和运输, 到达受体部位, 进而发生药理作用。牛血清白蛋白 (bovine serum albumin, BSA) 由于低价、易得, 是血清蛋白研究中最常用的蛋白质, 它本身具有较强的内源荧光。笔者利用BSA内源荧光法作为探针, 建立了荧光猝灭技术检测戊唑醇的新方法, 并优化检测条件, 为戊唑醇的检测提供了新途径。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
BSA (1 .0×1 0- 5mol /L, Si gma) ;乙醇 (安徽安特生物化学有限公司) ;戊唑醇 (0.5 μg/L, 安徽四达化工公司) ;Tris-HCl (p H=7.1, Sigma) ;其他所用试剂均为分析纯, 试验用水为二次蒸馏水。
F-4500 荧光分光光度计 (日本日立公司) ;UV-5500 型紫外- 可见分光光度计 (上海元西仪器有限公司) ;FC-1 04 电子天平 (上海精科天平厂) ;JK-400CDB型高功率数控超声波清洗器 (合肥金尼克机械制造有限公司) ;SC-15 数控超级恒温槽 (上海天平仪器厂) 。
1.2 试验方法
于10 ml具塞比色管中加入Tris缓冲溶液1.2 ml、BSA溶液1 ml, 用二次蒸馏水定容至刻度, 摇匀备用。取3ml此溶液于1 cm比色皿中, 用微量进样器加一定量的戊唑醇溶液, 摇匀静置, 5 min后测定。
设置F-4500 型荧光分光光度计的激发狭缝和发射狭缝宽度均为5.0nm, 光电管负高压为400 V, 响应速度为2.0 s, 波长扫描速度1 200 nm/min, 待测溶液于1 cm石英比色中, 280 nm作激发波长, 记录300~ 500 nm范围内荧光强度。于 Δλem=60 nm处进行同步扫描, 记录同步荧光光谱。
2 结果与分析
2.1 光谱分析
在激发波长 λex为280 nm, 发射波长 λem为350 nm, 扫描BSA溶液和加入戊唑醇后溶液的荧光光谱 (图1) 。BSA分子中包含有可发光的色氨酸 (Trp) 、酪氨酸 (Tyr) 和苯丙氨酸 (Phe) 残基使其本身有内源荧光, 残基的荧光强度之比为200∶18∶1, Tyr和Phe贡献较小。Δλ=15 nm和 Δλ=60 nm的同步荧光光谱, 分别代表BSA分子中酪氨酸、色氨酸残基的光谱特征 (图2) 。从图2a可看出, 色氨酸残基是BSA内源荧光主要贡献者, 戊唑醇几乎没有改变其峰位置。而从图2b可知, 戊唑醇加入后酪氨酸的荧光强度降低显著并伴随着发射峰蓝移, 说明戊唑醇与BSA的作用接近酪氨酸的残基并使其微环境的疏水性增强。因此, 戊唑醇加入使BSA的荧光发射峰强度降低, 表明二者之间有可能相互作用形成了复合物而使BSA的荧光有猝灭。
2.2 测定条件选择
2.2.1酸度和缓冲溶液用量考虑BSA在p H较低或较高时可能会出现蛋白质的变性, 盐效应也会影响BSA, 试验中选择Tris-HCl缓冲体系。控制其他条件不变, 调整缓冲体系在pH 7~9范围内对荧光强度的影响, 体系荧光强度的变化不明显, 因此选择在pH7.0。缓冲溶液用量在0~ 1 .2 ml荧光强度升高, 1.2 ml以后变化不大, 选择1 .2 ml 。
2.2.2 反应温度和体系的稳定性戊唑醇和BSA反应温度在25~ 40℃范围内随着温度的升高, 荧光发射强度略有降低, 变化不明显。考虑到高温容易使蛋白质产生变性作用, 可以选择25℃为反应温度。戊唑醇与BSA作用后, 反应体系的荧光强度在5 min之内有些波动;随着反应时间增加, 反应体系的荧光强度在5 min之后趋于稳定, 并且在保持2 h内体系的荧光基本不变, 为检测提供了充足的时间。选择反应后静置5 min开始测定。
2.3 共存物质的影响
在优化条件下, 当CBSA=1 .0×1 0- 6mol /L, C戊唑醇=7.0×1 0- 2mg/ml , 分别加入一定浓度的共存物质, 测定对体系的影响 (表1) 。从表1 发现, 在测定浓度下, Na+、K+、NH4+、蔗糖、葡萄糖对测定结果几乎无影响, Zn2+、Mg2+、Ca2+、Cu2+、Al3+对测定结果影响较小, 但是Fe3+影响较大, 在检测时要分离。
2.4 线性范围、检出限与模拟水样测定
在优化试验条件下, 在激发波长λex为280 nm, 发射波长 λem为350nm, 测定了戊唑醇的标准曲线 (图3) 。当戊唑醇浓度在8~102 μg/ml范围内, 与体系荧光强度变化 ΔF呈良好的线性关系, 其线性回归方程为:ΔF=2.03C (×10-2mg/ml) +18.65, R2=0.993 2, ΔF是BSA溶液与加入戊唑醇后BSA溶液的荧光强度差值。对18个空白溶液进行测定并计算标准偏差S, 用3S/k (k为标准曲线的斜率) 方法, 推导出该方法的检出限为0.66μg/ml。对浓度为50 μg/ml的戊唑醇标准溶液进行3 次平行试验, 相对标准偏差为2.9%。
对不同浓度的戊唑醇模拟水样进行标准加入回收率试验, 相对标准偏差 (RSD) 低于4.1%, 回收率95.6%~ 104.1%。
3 结论
该文研究了用荧光光度法检测戊唑醇, 在pH 7.0 的Tris-HCl缓冲介质中, 戊唑醇在一定的浓度范围内, 能够有效地猝灭BSA的内源荧光, 戊唑醇浓度与BSA荧光强度猝灭量呈线性关系, 从而建立了一种简单、有效的检测方法。该方法使用条件简单、易操作。
参考文献
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荧光测定 篇9
在所有的过渡金属中, 金是较为重要的一种。与其他过渡金属相比, 金在导热性和导电性方面均有较大的优势。此外, 由于金具有较高的熔点和较好的延伸性, 其应用范围非常广, 因此, 相关人员必须加强对这一金属的研究。就目前金的应用情况来看, 其大多被用作装饰品加工和货币制造。可见, 在人们的生活中, 金是具有高价值的金属。由于矿石中金的含量较低, 在对金进行测定时, 不能采用直接测定的方法, 因此, 相关人员在测试之前必须先对金作富集处理, 然后再采取适当的方法测定。就目前的科学技术水平来看, 地质样品中微量金的测定方法有多种, 其中, 最常用的为溶剂萃取法、泡沫塑料吸附法和离子交换法等。除此之外, 在科学技术不断发展的今天, 原子吸收光谱法、发射光谱法和光度法等也被广泛应用于地质矿石金含量的测定中。每种测定方法都有其优缺点, 相关人员必须根据实际情况选择适当的测定方法, 为测定项目的顺利推进奠定好基础。原子荧光火焰法是一种新兴的测定方法, 与传统的石墨原子吸收光谱法相比, 其在成本上具有较大的优势。
1 试验过程
1.1 试验试剂
本次试验需要用到多种试剂。在试验之前, 试验部门应根据要求配制试剂, 在最大程度上保证试验项目的顺利推进。本次试验所用的盐酸和硝酸均为分析性纯酸, 所用的王水则由硝酸和盐酸混合而成。在试验前, 要将王水配制好, 并将其摇匀。另外, 本次试验还需要用到硫酸, 所取质量浓度为10 g/m L, 即用1 000 m L的水溶解10 g的硫酸, 注意要搅拌至完全溶解。金标准贮存溶液的制备对于本次试验来说至关重要。在制备时, 先将0.1 g高纯金放入烧杯中, 然后在烧杯中加入5 m L王水, 在低温加热条件下, 使金完全溶解于王水中;接着经冷却处理后, 再将混合液移到容量为100 m L的容量瓶中。此时, 溶液密度为1 000μg/m L, 金标准贮存溶液的质量分数为100μg/g。
1.2 试验设备
本次试验主要设备为原子荧光光谱仪, 其型号为SK-2002B。此外, 在试验过程中还需要用到配金高性能空心阴极灯, 其工作电流为60 m A。所有设备的运行温度均应保持在200℃左右。
1.3 样品处理
为了保证试验项目的顺利进行, 在试验前, 试验人员要对所选取的样本进行处理。具体步骤如下:试验人员称取10 g样品并放于瓷坩埚中;将瓷坩埚放到高温炉中, 对其进行加温处理, 温度应控制在650~700℃之间;加热2 h后, 将样品取出进行冷却处理, 冷却完成后再将样品放到锥形瓶中, 并将40 m L王水倒入锥形瓶中, 然后再将锥形瓶加热。加热设备可以选用电炉, 加热时间控制在40 min左右。上述工序完成后, 还要再次对样品进行冷却, 并加入70 m L蒸馏水和0.2 g的泡沫塑料, 利用震荡设备对混合物进行长约40 min的震荡;接着将泡沫取出, 挤干后放到25 m L的比色管中;在比色管中加入10 m L硫酸解脱液, 在沸水浴的条件下保持40 min;摇匀混合溶液待测, 并对金的吸光度进行测定。
2 试验结果
2.1 富集、分离条件分析
在测定微量金时, 需要先对金作富集和分离处理。目前, 在金的富集和分离过程中, 最常用的吸附剂为717阴离子交换树脂。为了更好地研究金的富集、分离条件, 对金的最佳酸度进行了试验。结果发现, 当HCl的质量分数为5%~30%或者王水的质量分数为5%~20%时, 金的析出和富集效果最为明显。此外, 如果吸附剂中存在H2SO4、H3PO4时, 吸附剂的富集能力将会下降。因此, 在试验过程中, 应尽可能地降低这两种物质出现的概率, 这对于试验项目的顺利进行具有重要意义。
2.2 吸附流速对金损失的影响
通过试验发现, 将吸附流速在1~5 m L/min时, 金的损失率最小, 基本接近于无损失;当吸附流速大于5 m L/min时, 金的损失率将会增大。因此, 为了保证试验结果的准确性, 本次试验需将吸附流速控制在2~4 m L/min之间。
2.3 标准曲线
所谓的“标准曲线”, 是指在最佳试验条件下, 利用原子荧光火焰法所测定的地质样品中微量金的良好线性关系。标准曲线的表达式为:
式 (1) 中:C为所测量的金离子的质量分数。
标准曲线线性相关系数F=0.999 9, 检出限为0.19 ng/g。对40 ng/g的金标准贮存溶液进行测定, 其相对标准偏差为0.13%.
2.4 工作曲线的绘制
在所有测定工作完成之后, 为了保障后续分析工作的顺利进行, 试验人员要将所获得的数据以曲线形式表达出来。在绘制曲线时, 要将金的质量浓度作为自变量, 吸光度作为因变量, 且在曲线绘制完成之后, 利用现代化的分析手段分析曲线的含义。
3 结束语
原子荧光火焰法是测定地质样品中微量金的主要方法之一。与其他测定方法相比, 该方法更经济、更具可操作性。因此, 检测部门必须加强对该方法的应用, 为地质矿石中微量金的探测创造条件。
参考文献
[1]姜海利.地质样品中微金的流动注射在线分离富集火焰原子吸收法测定地质样品中痕量金[J].黄金, 2014, 17 (1) :35-39.
荧光测定 篇10
目前As、Se的测定方法主要有原子荧光法、ICP-AES、ICP-Ms、比色法, 样品消解以湿法、干法及微波消解法为主[4,5,6]。本文对水稻植株的稻米、谷壳、根、茎叶四个部位进行预处理, HNO3-H2O2-HClO4电热板分解样品, AFS测定As、Se两种元素含量。旨在建立准确测定水稻植株不同部位As、Se含量的方法, 为水稻质量安全提供依据。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
仪器:XGY-1011A型原子荧光光谱仪, 中国地质科学院地球物理地球化学勘查研究所, 工作参数为:炉温 200℃;灯电流 40mA;负高压 270V;载气 800mL/min。
JYL-6C九阳料理机, 山东省九阳股份有限公司;LTJM-12希霸精米机, 上海赛霸精密仪器有限公司;Human up 900 Human纯水器, 北京普析通用仪器有限责任公司;DRJ-□-□电热板, 湖北省地质实验研究所。
试剂:HNO3 (OR) , 德国默克公司;HClO4、H2O2、HCl (GR) , 广州化学试剂厂;29元素混标储备溶液 (10μg/mL) , 美国PE公司。
1.2 分析试样制备与硝解
样品经自来水洗净, 去离子水清洗3次后, 风干表面水分, 稻谷用脱壳机去谷壳, 根、茎叶、谷壳、稻米均用精米机或料理机粉碎, 分别存于塑料瓶中。
称取稻米2.000g, 茎叶、根、谷壳1.000g于聚四氟乙烯烧杯中, 少许水湿润样品, 加入20mL HNO3-HClO4 (5:1) 、5mL H2O2, 盖上表面皿, 于40℃的电热板上稍加热, 开始冒黄烟时, 关掉电热板。待黄烟减少时, 再次打开电热板, 从70℃～170℃逐步升温消解样品, 当溶液变为清亮并伴有白烟, 体积剩余1～2mL时, 水洗表面皿, 于电热板上蒸干, 加入2mL HNO3 (1+1) , 稍加热, 取下, 冷却, 25mL试管定容。
分取5mL溶液, 分别加入1mL浓HCl、3mL 5%硫脲、2mL 5%抗坏血酸, 放置30min后于AFS上测定As;
分取10mL溶液, 加入1mL HClO4于电热板上加热, 待HClO4冒烟时, 用水吹洗玻璃杯壁, 再次加热至溶液冒烟, 取下, 冷却, 加入2mL浓HCl, 稍加热, 取下, 冷却, 加入7 mL 20%HCl, 并滴入数滴10mg/mL Fe3+溶液, 摇匀后于AFS上测定Se。
2 结果及讨论
2.1 结果
对同一地区3个水稻样品不同部位进行As、Se的测定, 结果见表1。
从表1可以看出, 在水稻植株四个部位中, Se、As含量变化趋势是根>谷壳>茎叶>糙米, 两种元素在根部含量最高。因As不易被植物吸收转运[7];Se在植物体内运输时, 小部分运转到地上部枝叶中去, 大部分运转到根部[8], 所以两种元素主要累积于水稻根部。As在根部的含量约是其它部位的20倍, 可推出水稻种植土壤可能已受到重金属As污染。另外, 根据《食品中污染物限量》GB2762-2005中粮食As<0.15mg/kg, Se<0.3mg/kg的要求, 本实验所采水稻可食部分均低于限量值。
2.2 方法检出限及加标回收率
在优化的实验条件下, 用样品空白溶液连续测定12次, 计算得方法的检出限。Se、As的检出限是0.001mg/kg。同时, 对As、Se进行加标回收实验。结果见表2, 加标回收率在98.9%～114.8%之间, 满足微量元素测定要求。
2.3 利用国家标准物质对本方法的验证分析
为了进一步验证方法的准确性、可靠性, 把国家标准物质GBW10010 (GSB-1) 与样品同时溶样测定, 其标准值及本方法的测定值见表3, 分析元素测定值均在规定范围内。
4 结 论
(1) Se、As主要集中在水稻植株根部, 且以根>谷壳>茎叶>糙米变化趋势递减。
(2) 建立了HNO3-H2O2-HClO4分解样品, AFS测定As、Se两种元素含量的方法。结果表明, 该方法准确、可靠, 检出限低, 可满足植物样品中微量元素的测定。
摘要：把水稻植株的稻米、谷壳、根、茎叶四个部位进行预处理, 湿法消解后, 用AFS法测定As、Se两种元素含量。结果表明:As、Se主要集中在水稻植株根部。该测定方法对As、Se的检出限为0.001mg/kg, 加标回收率为98.9%～114.8%。对国家标准物质大米 (GBW10010) 的分析结果与所给的标准值吻合, 方法准确可靠, 结果满意。
关键词：水稻,As,Se,AFS
参考文献
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荧光测定 篇11
关键词：原子荧光光谱法 粮食 汞
中图分类号：TS207.51文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）14-0033-02
汞是一种生物毒性极强的重金属污染物，它进入生物体后很难被排出，长期食用汞含量超标的粮食，将严重威胁人类健康。原子荧光光谱法分析食品中的总汞是国家标准中的第一法，具有灵敏度高，基体干扰少、线性范围宽和分析速度快等优点。本文按照国家标准GB/T5009.17-2003中的原子荧光光谱法对粮食中总汞的测定进行了试验，对压力罐消解法和微波消解法两种样品前处理方法进行了研究，比较了这两种样品前处理方法的优缺点。
1 实验部分
1.1 仪器
AFS-2202型双道原子荧光光度计（北京海光仪器公司）；WX-8000微波消解仪；NC101型烘箱；高压消解罐100ml。
1.2 试剂
硝酸溶液（1+9）：取50mL硝酸缓缓倒入450mL水中，混匀。
硼氢化钾溶液（5g/l）：称取5g氢氧化钾，溶于 5.0g/l的氢氧化钾溶液中，并用5.0g/l的氢氧化钾溶液稀释至1000mL，混匀，现用现配。
汞标准使用溶液：由国家标准物质研究中心提供Hg标准贮备溶液1mg/mL。用移液管吸取汞标准贮备溶液1mg/mL，用（1+9）硝酸溶液逐级稀释至10ng/mL。
过氧化氢（30%）（A.R，天津市科密欧化学试剂有限公司）；硝酸（优级纯，江西同盟试剂化工厂）；高纯水（去离子水）。
1.3 仪器条件
试验了不同负高压、空心阴极灯电流强度以及载气流量对试验的影响，发现荧光信号强度随负高压、灯电流强度升高而增强，但荧光信号增大的同时，仪器噪声也随之升高。因此，试验经综合比较，选择最佳仪器条件为：负高压270V，灯电流为40mA，载气流量为600ml/min.
1.4 标准曲线的绘制
根据国家标准GB 2762-2005，粮食中的汞的限量指标为0.02mg/kg。在实际工作中，如果称取汞含量为0.02mg/kg的样品0.200g经消化后定容至25.0ml，可计算出消化液中汞含量为0.16ng/ml，此数据低于国家标准中标准系列的最低点。因此结合实际，粮食中总汞的测定的标准系列宜采用0、0.1、0.2、0.4、0.8ng/mL的质量浓度较为适用。
分别移取10ng/mL的汞标准溶液0.0、0.5、1.0、 2.0、4.0mL于50mL的容量瓶中，加入（1+9）硝酸溶液定容至刻度，摇匀，各自相当于汞浓度为0、0.1、0.2、0.4、0.8ng/mL。
1.5 样品处理
（1）高压消解法：称取经粉碎混匀过40目筛的粮食干样0.3g置于聚四氯乙烯塑料内罐中，加5ml硝酸，混匀后放置过夜。再加7ml过氧化氢，盖上内盖放入不锈钢外套中，旋紧密封。然后将消解器放入烘箱中加热，升温至120℃后保持恒温3h，至消解完全，自然冷却至室温。将消解液用（1+9）硝酸溶液转移并定容至25ml容量瓶中，摇匀。同时做试剂空白试验，待测。
（2）微波消解法：称取经粉碎混匀过40目筛的同一粮食干样0.3g置于消解罐中，加5ml硝酸，2ml过氧化氢，盖好安全阀后，将消解罐放入微波炉消解系统中。设置微波炉消解系统条件：步骤1，升压时间30min，保压时间5min，压力343kpa，功率50%。步骤2，升压时间30min，保压时间7min，压力686kpa，功率75%。步骤3，升压时间30min，保压时间5min，压力1096kpa，功率90%。至消解完全，冷却后将消解液用（1+9）硝酸溶液转移并定容至25ml容量瓶中，摇匀。同时做试剂空白试验，待测。
1.6 样品测定
选择仪器的测定条件：灯电流30mA，光电倍增管负高压240V，原子化器温度300℃，氩气流速500ml/min，平行测定3次。设定好仪器最佳条件，将标准溶液系列引入氢化物发生系统中，测定汞的原子荧光强度，并绘制标准工作曲线。最后对样品进行测定。
将同一粮食样品，按不同消解方法处理测定其总汞含量，平行测量5次。结果见表1。
由表1可知，两种消化方法误差均在允许范围内，其中微波消解法样品测定结果整体要比压力罐消解法高，说明微波消解法处理待测样品更不会造成待测样品的损失，准确度更高。
1.7 加标回收率
移取1mL10ng/ml的汞标准溶液于消解罐中，分别按相同的样品处理方法进行处理，平行5组实验，测定加标回收的总汞含量，计算回收率，加标回收率的测定见表2。
表2數据说明，高压消解法回收率在85.5%～96.5%，微波消解法回收率为93.5%～103.2%，说明两种消化方法均能满足对样品的准确处理要求，微波消解法准确率要比高压消解法准确率高。
2 结语
汞是很容易挥发的元素，不同的样品前处理方法对测定结果会产生一定量的影响，用微波消解法测得的结果要比高压消解法的结果较为可靠。
高压消解法。
优点：消化时间长，操作步骤复杂繁琐，会造成待测元素损失。
缺点：装置简单，价格便宜，大部分实验室均能操作使用。
微波消解法。
优点：准确率高，消解时间短，操作简单，方便省力，样品处理方便、安全，回收率高，适合批量处理样品。
缺点：仪器价格较高，适合有条件的实验室使用。
参考文献
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氢化物原子荧光法测定鸡血清硒 篇12
1 材料与方法
1.1 仪器和试剂(所用试剂除注明外,均为优级纯)
AFS-930双道原子荧光光度计(北京吉天仪器有限公司),AS-Z高性能空心阴极灯(北京有色金属研究总院)。
硒标准溶液:取100 ng/mL硒国家标准溶液3 mL,用20%盐酸定容为30 ng/mL硒标准应用溶液。
还原试剂:1%硼氢化钠、0.5%氢氧化钠。
硝酸-高氯酸(4+1)混合酸。
1.2 试验方法
1.2.1 样品消化:
取1 mL鸡血清于50 mL锥型瓶中,加入(4+1)混合酸5 mL,摇匀,置于150℃电热板上,缓慢加热至溶液颜色呈淡黄色,逐渐升温至200℃,溶液颜色透明后,冒白烟5 min取下,冷却再加20%盐酸2 mL,放置于电热板上,冒白烟后取下,用20%盐酸定容至10 mL。
1.2.2 标准曲线:
配好的30 ng/mL硒标准应用溶液放置于自动进样板。AFS-930双道原子荧光光度计自动稀释完成标准曲线。样品空白消化液及试剂空白消化液在相同条件下上机测定,微机自动记录荧光强度、处理并打印结果,据此计算样品中硒的浓度。
2 结果与讨论
2.1 工作条件
负高压:280V;原子化器高度:8.0 mm;载气:Ar;载气流量:400 mL/min;屏蔽气:800 mL/min;灯电流:80mA;读数时间:7 s;延时时间:1.0 s;稀释液:标准空白;测量方式:标准曲线法;读取方式:峰面积。
2.2 样品的消化与预还原
目前测定硒的前处理主要采用湿消化,常用的消化液有:硝酸-高氯酸、硝酸-硫酸-高氯酸、硝酸-双氧水、硝酸-高氯酸-甲醛等,预还原有采用加入浓盐酸或稀盐酸水浴或直接加热煮沸及利用甲醛的方法,以达到使Se(Ⅳ)还原为Se(Ⅵ)目的。本文采用混合血清,用硝酸-高氯酸(4+1)消化及20%盐酸直接进行预还原。
Se是易挥发性元素(熔点217℃、沸点685℃),在前处理过程中需考虑以下几个要求:保证在处理过程中不造成Se的挥发损失,又要使Se从有机物中完成分解出来;将残存的硝酸除去,以免残留的硝酸干扰Se的测定;将Se(Ⅳ)还原为Se(Ⅵ),因为Se(Ⅳ)不能与硼氢化钠反应,Se(Ⅵ)才能与硼氢化钠反应生成硒化氢;处理定容后溶液已经处于最佳的发生氢化物的酸度。因此,样品的消化方法、消化温度、消化终点的判断、预还原方法、所用介质及酸度等都将影响结果的准确性。
2.3 干扰离子与取样量
据报道,对硒的测定干扰明显的元素有:Cu(Ⅱ)、Ag(I)、Pd(Ⅱ)、Au(Ⅲ)、Pt(Ⅳ)、Bi(Ⅱ)、As(Ⅲ)等,它们的含量在微克时有明显干扰。在预试验过程中,上机测定硒之前,先采用原子火焰吸收法测定血清Cu含量,发现Cu含量低于检出限,其他几种元素低于微克级。本法中取1 mL血清消化后定容为10 mL,稀释了10倍,低于干扰限,因此测定不必加掩蔽剂。
2.4 标准曲线及方法的检出限
鸡血清硒浓度在0.2 ~200 μg/L浓度范围内线性良好,回归方程相关系数范围为:0.9990-0.9998,相对标准偏差(RSD):0.6%~3.5%。样品空白及试剂空白按试验方法进行消化,各测定12次,同时做标准曲线,回归方程为I=120.6069×C-62.0648,相关系数为0.9990。按检出限DL=3×SD×K计算为0.54 ng/mL。
2.5 方法的精密度和回收率
取混合血清6份按试验方法测定,测定结果为146.3 ng/mL±6.8 ng/mL,RSD=5.8%。血清样品加标回收率范围92%~108%,平均回收率为100%,回收率RSD=2.1%。
3 小结
本文所采用氢化物发生原子荧光法测定鸡血清中的硒,用20%盐酸达到预还原及定容的目的,操作方便。试验结果表明,该方法灵敏度高、稳定性好、简便易行,可以用于分析肉鸡血清样品中硒的测定。
参考文献
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[2]Ebdon L,Wilkinson J R.The determination of orsenicand selenium in coal by continuous flowhydride-generation a-tomic absorption spectrometry and atomic fluorescence spec-trometry[J].Anal Chim Acta,1987(194):177-187.