液基薄层细胞制片术

液基薄层细胞制片术（精选4篇）

液基薄层细胞制片术 篇1

关键词：液基薄层制片,痰液,细胞学检查

液基薄层制片 (Thin-Cytologic Test, 简称TCT) 是近年应用于临床细胞病理学诊断的一种新技术, 从根本上解决了常规脱落细胞制片技术难题, 如假阴性率高、涂片质量差和丢失细胞率高等, 为脱落细胞学诊断做出了重大贡献。TCT可全自动制备均匀的薄层标本, 采用机械、气动和流体动力学原理, 大大减少阻碍视野的血液、黏液和炎性细胞, 但在非妇科标本 (胸水、腹水、痰液等) 中的应用还处于初级阶段[1]。在呼吸系统肿瘤的诊断中, 痰液细胞学检查是一种简单有效的方法, 传统制片技术因细胞堆集、分布不匀、含黏液等原因, 恶性细胞检出率低, 易出现漏诊、误诊现象, 因此, 改进痰液制片的方法, 对于提高检查阳性率及诊断水平十分重要。我科将TCT技术用于痰液细胞学检查, 效果较好, 现报道如下。

1应用TCT技术对痰标本进行处理并制片

取2~3ml痰液加入TCT保存液, 振荡器震荡混匀后, 静置20min, 破坏其黏性, 充分液化, 利于细胞分散, 置入TCT自动制片机进行甩片, 制成直径约2cm的细胞薄片, 95%乙醇固定10min后进行HE染色。同时用传统细胞学制片法制成痰涂片2张。

2结果

TCT技术制成的涂片为直径约2cm的圆形薄层物, 细胞量多, 分布均匀, 细胞形态完整, 涂片背景清晰, 基本上无细胞变形及退变、染色鲜艳, 细胞图像清晰 (图1见181页) , 且肿瘤细胞形态结构清晰 (图3见181页) 。而传统涂片细胞易重叠, 厚薄不均, 背景不清晰, 混杂有红细胞、炎性细胞、细胞碎片及黏液等, 细胞形态不易观察 (图2见181页) , 肿瘤细胞成团、结构模糊, 影响诊断精度 (图4见181页) 。

3讨论

传统细胞学制片法对疾病的筛查和早期诊断起到了积极作用, 但因其受细胞量、制片技术情况等因素影响, 部分阳性细胞甚至被干扰物所覆盖, 易诊断错误, 出现假阴性或假阳性诊断结果, 从而影响诊断精度[2]。

TCT技术因改善了制片方法, 总体采量增加, 细胞集中, 保存了细胞的完整性, 涂片薄而均匀, 读片面积缩小, 除去了红细胞、黏液等, 而且背景清晰, 易于阅片, 而且阳性检出率高, 同时TCT技术规范制片, 实现了细胞学涂片质量标准化管理, 有效地提高了制片质量, 进而扩大了细胞病理学的应用范围, 提升了诊断价值, 对促进临床细胞病理工作的发展具有重要的现实意义[3]。

参考文献

[1] 李坚.一次性痰液收集器在危重患者痰培养标本采集中的应用研究[J].中国医药导报, 2013, 10 (20) :123-124, 127.

[2] 陈蓉, 蒋春樊.简易液基涂片技术在痰液检查中的运用[J].中国医药导报, 2011, 8 (10) :48-49.

[3] 张晏.细菌培养前痰液处理的观察[J].中外健康文摘, 2013, 27:170.

液基薄层细胞制片术 篇2

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取我院2012年2月至2013年2月收集的60例癌症患者脑脊液细胞, 所有细胞活性良好, 无相关差异, 具有可比性。

1.2 方法

观察组采用TCT技术进行操作:将标本放置于5℃的冰箱内35min, 取出倒去一半, 保留约40m L, 等量分为两组, 将两组标本分别置于离心管中, 按1∶1加入50%冰醋酸和乙醇溶液, 分离出黏液和红细胞, 离心速度为1800r/min, 时间为8min。结束后去除上清液, 并用吸管取出沉渣, 以1:3的比例加入细胞保存液, 震荡均匀, 15min后再次离心, 去除上清液, 震荡离心管, 并进行制片和HE染色。对照组采用传统涂片法进行操作:将标本放置于5℃的冰箱内35min, 取出倒去一半, 保留约40m L, 等量分为两组, 将两组标本分别置于离心管中, 离心速度1800r/min, 时间为8min。结束后去除上清液, 将沉淀物吸取至载玻片中, 进行涂片, 干燥后需用90%溶度乙醇进行固定8~12min, 再进行HE染色。将两组细胞进行镜检, 统计相关数据。

1.3 统计学分析

上述两组检测数据采用SPSS13.0统计软件包进行统计学处理。计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 组间比较采用t检验, P<0.05为有统计学意义。

2 结果

观察组癌细胞阳性检测率为90%, 对照癌细胞阳性检测率为53.3%, 两组差异显著 (P<0.05) 。观察组细胞形态饱满, 核膜清晰且光滑, 细胞核呈椭圆形、圆形, 着色浅, 染色质匀细, 可见细小的核仁;对照组细胞量极少, 着色较深, 核仁不明显, 并存在细胞变形情况, 见表1。

注: (1) P<0.05

3 讨论

液基薄层细胞制片技术 (TCT) 是20世纪末兴起的一项新型制片技术, 该技术最早应用于妇科标本检测中, 目前, 正逐步向其他医疗标本检测领域发展, 如脑脊液和尿液检测中。

TCT制片过程在细胞采集时, 其细胞存量较大, 并且细胞的分布较为均匀, 形态较为完整[3]。TCT制片还可以避免因细胞过度干燥而形成检测失误的情况发生, 极大的保护了细胞的原有形态, 减少了检测的干扰因素, 尤其是减少了干燥和挤压带来的细胞变形情况[4]。TCT制片在镜检时极为清晰和准确, 这是因为制片时的清洁液、保存液可以保证细胞与黏液相分离, 极大的避免了阳性细胞丢失或者堆积情况的发生, 并且还可以去除血细胞、组织碎片、杂质、黏液等, 保证了诊断的准确性[5]。

本次研究中, 观察组癌细胞阳性检测率为90%, 对照癌细胞阳性检测率为53.3%。观察组细胞形态饱满, 核膜清晰且光滑, 细胞核呈椭圆形、圆形, 着色浅, 染色质匀细, 可见细小的核仁;对照组细胞量极少, 着色较深, 核仁不明显, 并存在细胞变形情况。综上所述, TCT制片技术对脑脊液细胞检测效果极佳, 癌细胞阳性检测率极高, 临床确诊率高。

参考文献

[1]俞志刚.李自强.胸腹腔积液传统苏木素-伊红涂片与液基薄层细胞检测涂片的对比分析[J].山西医药杂志, 2010, 39 (2) :12-13.

[2]李志娟, 王欣.超声快速处理仪快速病理诊断70例分析[J].蚌埠医学院学报, 2009, 34 (8) :21-22.

[3]窦敏, 蔡鵬威, 陈金花.UF-100全自动尿沉渣仪应用于脑脊液细胞计数可行性探讨[J].海南医学, 2010, 21 (23) :18-19.

[4]严海燕, 郭海霞, 曾华.脑脊液细胞计数Diasys尿沉渣工作站检测法与血细胞计数盘法的比较[J].中国现代药物应用, 2009, 2 (4) :54-56.

液基薄层细胞制片术 篇3

关键词：液基薄层细胞制片机,宫颈癌筛查,液基薄层细胞检测

宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤, 有文献报道全球范围内宫颈癌发病率在女性恶性肿瘤中居第二位, 仅次于乳腺癌, 占所有女性恶性肿瘤的13%[1]。宫颈癌发病原因明确且进程较缓慢, 早期发现进行干预治疗可以有效避免其发生发展。目前, 宫颈癌前筛查技术已在全世界范围内得以推广。2003年8月, 我国卫生部委托中国抗癌协会组织专家制定了中国宫颈癌及其前期病变筛查的策略。筛查年龄为21岁 (有性生活史或具有3年以上性生活的任何妇女) 至65岁。筛查间隔开始为1~3年[2]。

TIB-Autoprep 1800全自动液基薄层细胞制片机 (下称全自动制片机) 由机箱、液晶显示屏、功能按键、真空系统、废液槽、吸嘴架、离心管架、玻片固定板、染色针、样本转移针及微量工业加液泵等组成, 其前处理、制片 (转移、染色) 及后处理3部分的工作都可自动化。

1 材料与方法

1.1 材料

选取我院2013年妇科门诊有性接触史的1600例行宫颈液基薄层细胞检测 (Thinprep Cytologic Test, TCT) 的患者, 年龄20~69岁。

1.2 诊断方法

1.2.1 制片工作流程

(1) 标本采集与保存:妇科医师用特制的宫颈刷收集患者宫颈管外口鳞柱交接部位及宫颈管脱落的上皮细胞, 放入专用的、内有保存液的小瓶内, 送检病理科行TCT检查。

(2) 标本前处理:将样本转移至离心管, 经过梯度离心去除粘液、血液等杂质。

(3) 制片 (转移、染色) :将装有样本的离心管放入离心管座上, 放入玻片与染色槽, 玻片编号与离心管相对应, 放入吸嘴;根据需处理的样本选择样本数, 根据需要选择模式, 可选择单独制片, 或制片和染色同步完成;选择“充管”对机器进行充管;选择“运行”, 机器将自动进行移液、沉降;之后进行固定与染色;完成之后, 选择“排管”, 将染色液排回染色瓶中, 并冲洗管道。

(4) 标本后处理:丢弃染色槽, 将玻片放入异丙醇中浸泡5 min, 用二甲苯湿封玻片。

1.2.2 细胞学诊断标准

采用2001年国际癌症协会 (NCI) 推荐的伯塞斯达分级系统 (The Bethesda System, TBS) 进行诊断, 鳞状细胞类病变主要分为:①NILM:正常范围;②ASC-US:意义不明的不典型鳞状细胞;③ASC-H:不能排除高度鳞状上皮内病变的不典型鳞状细胞;④LSIL:低度鳞状上皮内病变;⑤HSIL:高度鳞状上皮内病变;⑥SCC:鳞状细胞癌。腺细胞类病变较少, 主要有AGC (不典型腺细胞) 、腺癌等。

1.2.3 宫颈组织活检

对TCT检查呈阳性的患者建议进行阴道镜活检, 行病理检查。活检标本经甲醛固定液固定、脱水机脱水、常规石蜡包埋、切片和HE常规染色, 在显微镜下进行诊断。诊断结果分类如下:①炎症:无上皮内瘤变;②CIN (I~III) :上皮内瘤变I~III级;③SCC:鳞状细胞癌。

1.3 分析方法

以活检宫颈组织的病理诊断结果为准, 将细胞学结果与其对比, 计算符合率。

2 结果

(1) 全自动制片机TCT检测阳性结果203例, 阴性结果1397例。TCT结果与年龄分布, 见表1。

(2) 对全部203例阳性细胞学涂片行进活检病理诊断后, 得到较高符合率。结果见表2。

3 讨论

随着宫颈癌发病率逐年上涨, 早期预防并治疗宫颈癌前病变显得尤为重要[3]。传统的巴氏细胞涂片法是筛选和诊断宫颈癌的最为实用和有效的方法, 但该方法受取材因素限制, 许多临床医师缺乏取材培训, 因此制片质量良莠不齐, 且该方法制备的图片含有过多的细胞和复杂的背景, 往往会影响医师做出正确诊断。薄层液基细胞学制片方法操作方法简易、灵敏度较高, 可制作出背景干净、细胞结构清晰的涂片, 能够较好地辅助医生诊断出宫颈癌前的一些病变[4], 对宫颈癌前病变的早期发现及降低宫颈癌的发生发展有重要意义。

随着制片机技术的不断革新和发展, 越来越多的新型制片机应用到临床。TIB-Autoprep 1800全自动薄层细胞制片机可一次性完成标本处理、制片和染片, 将传统的手工操作模式转变为全自动智能化模式, 降低了人为差错, 节省了人力物力, 缩短了检验时间, 具有良好的临床应用价值。本文1600例宫颈癌前筛查标本全部采用全自动制片技术, 阳性涂片例数为203例, 占12.69%;阴性涂片1399例, 占87.31%。阳性203例涂片中:ASC-US 91例, 占5.69%, 符合细胞诊断的比例范围[5];ASC-H 28例, 占1.75%;LSIL 64例, 占4%;HSIL 16例, 占1%;SCC 1例, 占0.06%;AGC 3例, 占0.19%。经阴道镜活检行病理诊断, 203例阳性涂片中:CINI级 (包括HPV感染) 及以上者171例, 占84.24%;炎症病变32例, 占15.76%。研究结果发现, 全自动制片机不仅保留了以往薄层液基制片机优良的制片优点, 并且可以更有效地节省人力;具有较高的阳性检出符合率, 可以应用于宫颈癌前病变的筛查[6,7,8]。早期涂片筛查结合阴道镜活检对于宫颈早期病变的早发现、早诊断、早治疗, 最大限度地降低宫颈癌的发病率和死亡率有着重要意义。

参考文献

[1]李霓, 郑荣寿, 张思维, 等.2003～2007年中国宫颈癌发病与死亡分析[J].中国肿瘤, 2012, 21 (11) :801-804.

[2]董志伟, 乔友林, 孔灵芝, 等.中国癌症早诊早治的策略与实践[J].中国肿瘤, 2008, 17 (4) :256-263.

[3]郎景和.迎接子宫颈癌预防的全球挑战与机遇[J].中华妇产科杂志, 2002, 37 (3) :129-131.

[4]Kuramoto H, Iwami Y, Sugimoto N, et al.Application of a new liquid-based procedure (TACAS) for the screening of cervical cancer:a preliminary study[J].Acta Cytol, 2012, 56 (1) :74-79.

[5]卑陈芳, 刘爱玲.液基薄层细胞学检测在宫颈病变筛查中的应用[J].检验医学与临床, 2007, 4 (3) :211-212.

[6]李淑莲, 李丽娟, 管桂杰.TIB-Autoprep 1800全自动液基薄层细胞制片机的原理与故障维修[J].中国医疗设备, 2011, 26 (8) :133-134.

[7]董彦军, 郑加荣.液基细胞学技术与传统细胞学涂片技术对宫颈病变细胞学的诊断价值[J].中国实用医刊, 2013, 40 (14) :63-65.

液基薄层细胞制片术 篇4

1.1 一般资料

选择2012年1月~2016年1月来本院妇科体检的人群,LPT 11301例、TCT 7029例、传统巴氏涂片18939例,在其中各选择5000例作为观察对象,分为A组、B组和C组。三组患者均有性生活史、非妊娠期,没有既往子宫切除史或是盆腔放疗史。

1.2 方法

1.2.1 A组应用LPT检查

应用美国利普系统对患者进行检查,首先由临床医生取样,使用专业的塑料毛刷取样器对患者宫颈外口和宫颈管中的脱落细胞进行取样;然后将细胞涮洗到专业保存液中送检。在实验室里,离心、取上层清液;将底部细胞团应用稀释液稀释到合适的比例,再次使用振荡器混合均匀,然后应用加样枪吸取50μl的细胞液放置在玻片上,通过顺时针涂抹成为直径为2 cm的薄片,自然干之后使用浓度为95%的酒精进行固定,然后通过巴氏染色。

1.2.2 B组应用TCT检查

由临床医生取材,应用塑料毛刷对患者宫颈外口和宫颈管中的脱落细胞进行采集,将细胞涮洗于装有Thinprcp送检。实验人员将标本瓶放入TCT制片机中,在过滤膜的高速旋转下,将细胞打散、混匀,然后将细胞吸附到过滤膜上,最后将其印在玻片上制作成为直径为2 cm,细胞个数在2万左右的薄片;然后立即使用浓度为95%的酒精固定处理,同样使用巴氏染色。

1.2.3 C组应用传统巴氏涂片检查

采集患者宫颈外口的脱落细胞,均匀的涂抹在玻片上,应用浓度为95%的酒精固定,然后使用巴氏染色和镜检。

1.2.4 阴道镜检查及活检

对于细胞学诊断为不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)或以上病变的患者应用电子阴道镜以及活检,阴道镜检查方法为:本组研究中应用电子阴道镜,将患者宫颈充分暴露之后使用面前将宫颈表面的分泌物轻轻拭去,使用卢氏碘以及浓度为3%的醋酸了解患者的病变范围,使用绿色滤光镜观察患者宫颈处的血管形态。根据国际阴道镜和宫颈病理会议中规范化标准进行阴道镜诊断,宫颈宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级或以上表达为组织学阳性。

2 结果

2.1 三组患者的细胞学诊断结果对比

B组患者ASCUS、低度鳞状上皮内病变(LISL)、高度鳞状上皮内病变(HISL)及鳞状细胞癌抗原(SCC)的阳性检出率为12.5%,高于A组6.9%和C组8.2%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表1,表2。

2.2 三组患者与阴道镜活检病理检查的符合率对比

A组患者中阴道镜下活检的患者有750例(其中LPT细胞学检查阳性患者74例),其中有50例细胞学诊断为发生炎症反应细胞学改变,25例LSIL为HSIL,26例LSIL为SCC,细胞学诊断和阴道镜活检阳性符合率为66.67%,假阳性率为3.33%,假阴性率为6.67%。B组患者中有800例进行阴道镜下活检(TCT检查为阳性的患者有325例),其中25例诊断为炎症反应细胞学改变,通过阴道镜诊断为LSIL;51例诊断为LSIL,阴道镜活检为HSIL;27例HSIL诊断为早期浸润癌,剩余均与结果相符。细胞学诊断和阴道镜活检阳性符合率为87.50%,假阳性率为0,假阴性率为3.13%。C组患者中876例进行阴道镜活检,细胞学诊断和阴道镜活检阳性符合率为50.00%,假阳性率为5.71%,假阴性率为22.86%。

3 讨论

自常规巴氏涂片面世以来,宫颈癌的筛查结果得到较大的改善,临床中报道其让宫颈癌的死亡率下降了70%以上但是应用该方法具有很高的假阴性报道,有资料甚至高达50%,本组中也有22.86%的假阴性结果。造成这一现象的主要原因有涂片的不均匀、材料中有血液、黏液和其他杂质影响检测结果,因此临床中该方法的使用率较低。液基细胞学对传统涂片的方式做出了很大的改善,能够保证对细胞及时固定,涂片清晰、阅读非常方便,能够显著改善细胞学诊断的正确率、降低漏诊和误诊的出现。TCT应用膜管吸附黏液与细胞印片,直径为2 cm的膜管中均匀的分布着7~8万个小孔,能够集中、均匀的印取细胞,避免出现重叠和遮挡现象的同时,有效去除炎症细胞。相对于传统涂片的方式做出了很大的改善,能够保证对细胞及时固定,涂片清晰、阅读非常方便,能够显著改善细胞学诊断的正确率、降低漏诊和误诊的出现。通过巴氏染色,LPT的细胞着色淡,不清晰。难以细致观察细胞核的形态,但是对于TCT来说,通过巴氏染色单个细胞平铺,染料非常容易均匀浸入,染色的结果鲜艳,细胞核浆的比例与核仁清晰,便于实验室检查人员的观察。但是同时也具有一定的缺陷,由于膜管的通透性因素以及黏液的影响,细胞的吸取不充分,容易发生堵塞,进而造成分布不均匀的现象。LPT在世界范围内的应用也非常多,其应用成本较低,不需要使用专用仪器,常规的实验室配置设备就能够实现细胞学检查,但是需要耗费较大的人工与时间,同时受到人工涂片技术的影响,其质量较差,细胞在涂片上的分布不均匀,有堆积现象,导致诊断结果出现较大的误差。

总之,三种检测技术,其各有优缺点,TCT对于宫颈病变的检查价值更高,而LPT的成本更加低廉。在临床筛查工作中应当取长补短,严格控制制片质量,为医生的治疗提供科学有效的依据。

摘要：目的 分析探讨利普液基细胞制片(LPT)、液基超薄细胞制片机制片(TCT)及传统巴氏涂片在宫颈细胞学检查中的应用价值。方法 应用LPT进行妇科常规细胞学筛查者作为A组,应用TCT进行妇科常规细胞学筛查者作为B组,应用传统巴氏涂片进行妇科常规细胞学筛查者作为C组,各5000例。对比诊断结果。结果 B组患者的阳性检出率为12.5%高于A组6.9%和C组8.2%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。A组细胞学诊断和阴道镜活检阳性符合率为66.67%,假阳性率为3.33%,假阴性率为6.67%。B组细胞学诊断和阴道镜活检阳性符合率为87.50%,假阳性率为0,假阴性率为3.13%。C组细胞学诊断和阴道镜活检阳性符合率为50.00%,假阳性率为5.71%,假阴性率为22.86%。结论 相对于LPT及传统巴氏涂片,TCT对于宫颈细胞学诊断具有更高的价值,是筛查宫颈病变最有效的方法之一,值得在临床中进一步研究和推广。

关键词：利普液基细胞制片,巴氏涂片,液基超薄细胞制片机制片,宫颈细胞学,临床价值

参考文献