广西合浦（精选8篇）
广西合浦 篇1
刘建/廉州雨过中国画68cm×68cm
杨家永 / 惠爱桥 中国画 70cm×89cm
前言
古韵汉风映合浦,“一带一路”耀南珠。
南国古郡合浦,面临北部湾,是南珠之乡和古代海上丝绸之路最早始发港。早在西汉,合浦就是重要的对外海上贸易的枢纽,经贸繁华,人文荟萃; 除了对外经贸活动,中华文明也通过这里传播海外,海外文化也从这里交流到我国。据考古发现, 合浦是我国目前存留汉墓最多最完整的地区。 2000多年的行政历史和多彩的自然、人文风貌,使合浦成为“南国明珠”。这里有以“珠还合浦”“廉山留名”名扬天下的吏治文化、以海上古丝路始发港为标志的海洋开放文化、以汉代墓葬群和城址为代表的古郡文化、以七大古珠为象征的珍珠文化;更有红树林、星岛湖、烟楼水儿出海口和石湾大浪古城、惠爱桥、大士阁、东坡亭、海角亭、文昌塔、曲樟客家土围楼。可谓物华天宝、人杰地灵、风景秀丽。
改革开放以来,合浦在经济、社会、文化、教育、 旅游等方面取得了飞跃的发展,使古廉州焕发出青春的活力。特别在习近平总书记提出“一带一路” 战略后,合浦更是获得了干载难逢的历史机遇,古海上丝路最早的始发港,将在新海上丝路的构建中发挥独有的作用。
为了贯彻落实“一带一路”战略,以文化建设促进合浦在新时期的全面发展,更好地为“一带一路” 建设服务,宣传合浦开拓奋进、深入改革开放的新形象,中共合浦县委、合浦县政府和广西美术家协会共同主办了“一带一路”耀南珠——全国美术名家走进海上丝路始发港合浦采风活动,邀请来自全国的50多名美术家到合浦采风写生。合浦深厚的历史文化和美丽的自然景观深深地吸引着美术家, 他们顶着酷热,深入到古海上丝路始发港遗址等名胜古迹、海港、古村落采风写生,以自己的热情和独特的艺术语言,创作了一批反映合浦历史文化、美丽山川、风土人情及建设成就的作品,为“一带一路”及合浦的文化建设做出了贡献。
这次展出的150多幅作品是美术家们这次采风的创作成果。生动鲜活的作品,充满了生活气息;个性鲜明的艺术语言,使作品富有艺术感染力。我们在绚丽的色彩和浓烈的笔墨中不但领略到了合浦多彩的自然和人文景观,还能欣赏到画家们不同艺术风格带来的视觉美感。这些作品充分表现了合浦人民的时代精神。作为古海上丝路的始发港的合浦,将以这次活动为契机,在“一带一路”新海上丝路的建设中发挥应有的作用,并取得新的跨越式的发展。
主办单位:中共合浦县委员会合浦县人民政府广西美术家协会
展览地点:广西博物馆
展览日期:2015年10月24日—11月2日
翁振新 / 苏东坡在合浦 中国画 138cm×68cm
张绍城 / 万里瞻天 中国画 135cm×61cm
王庆军 / 清风入怀图 中国画 180cm×80cm
苏蔚红 / 红树林之一 中国画 138cm×68cm
余永健 / 硕果满苑 中国画 138cm×68cm
←阳山/星岛湖胜景中国画68cm×138cm
姚震西/合浦璋嘉村写生之三中国画46cm×70cm
→熊丁/六湖即景中国画68cm×138cm
卢伟 / 红树林晨曦 中国画 192cm×92cm
周松 / 东坡亭 中国画 68cm×136cm
裴仲良 / 苏轼书合浦舟行 中国画 70cm×134cm
孔祥和 / 东坡荷塘 中国画 147cm×94cm
潘正华 / 合浦的阳光之二 中国画 180cm×97cm
徐裕颂 / 一带一路合浦写生记事 中国画 180cm×97cm
吴明珠 / 夏日渔村 中国画 70cm×69cm
陈中华 / 海丝遗址写生之一 中国画 39cm×39cm
周东东 / 印象曲樟之二 中国画 55cm×48cm
梁 文 / 璋嘉村拾趣 中国画 97cm×90cm
刘绍昆 / 这里曾经是古老的出海口 油画 70cm×80cm×2
谢麟 / 泊 油画 80cm×100cm
雷波 / 璋嘉古镇村口 油画 80cm×90cm
谢森 / 合浦望海楼 油画 70cm×80cm
黄菁 / 东坡亭写生之二 油画 70cm×80cm
范勃 / 曲樟的夏日 油画 60cm×60cm
秦秀杰 / 荷塘曲道 油画 80cm×100cm
张冬峰 / 门楼外的风景 油画 70cm×80cm
秦文清 / 围屋门楼 油画 70cm×80cm
陈毅刚 / 夏日的海风 油画 70cm×80cm
雷务武 / 养蚝船家 油画 80cm×100cm
刘南一 / 合浦出海口·夕照 油画 80cm×80cm
梁朝水 / 碧树华滋 油画 70cm×80cm
黄宗湖 / 海平线 油画 50cm×60cm
李福岩 / 古海角亭 油画 70cm×80cm
吕峰 / 乾江出海口劳作的渔民 油画 70cm×80cm
徐贵忠 / 午后阳光 油画 80cm×100cm
黄少鹏 / 东坡古亭 油画 70cm×80cm
张学 / 翠色垂芳 油画 80cm×100cm
庞凌宇 / 东坡亭一隅 油画 70cm×80cm
唐强 / 出海口 油画 70cm×80cm
李建平 / 大士阁写生 油画 70cm×80cm
孟远烘 / 大士阁 油画 70cm×80cm
邓乐民 / 静静的小路 油画 80cm×70cm
覃勇 / 山海口 油画 70cm×80cm
蔡群徽 / 有序的风景·东坡亭 油画 70cm×80cm
蒋文洁 / 休息 油画 80cm×80cm
韦 军 / 璋嘉的旧城门 油画 70cm×80cm
高峻 / 老码头 水粉画 54cm×64cm
杨诚 / 古海角亭 油画 70cm×80cm
王国豪 / 古土城门 油画 70cm×80cm
←肖畅恒/古村农家水彩画79cm×108cm
黄超成/老宅水彩画39cm×57cm↑
罗克强/悠水乡水彩画78cm×108cm
包建群 / 合浦廉州二街 水彩画 79cm×109cm
张虹 / 渔曲飘秋野 水彩画 50cm×71cm
杨业勋 / 蒌行街 水彩画 55cm×79cm
高建军 / 璋嘉人家 水彩画 71cm×94cm
傅刚 / 北海港 水彩画 50cm×71cm
黄小其 / 合浦东坡亭 水彩画 79cm×109cm
罗希 / 璋嘉古韵系列之三 水彩画 79cm×109cm
陈大华 / 北部湾海鸭 版画 63cm×107cm
合浦县农村沼气项目实施成效 篇2
1 农村户用沼气项目实施
目前, 合浦县农村新建以“一池三改”为建设内容的沼气池4.35万座, 年产沼气约3 045万m3, 开发和节约能源总量达1.67万t标煤, 年减排二氧化碳1.09万t, 减排二氧化硫0.01万t, 年处理生活污水总量36.46万t, 创造的直接经济效益达1.39亿元。户用沼气项目的实施, 使得合浦县农村发生了根本改观。一是改善了村容村貌, 使以往农村柴草乱垛、粪土乱堆、污水乱泼、垃圾乱倒、畜禽乱跑的“五乱”现象得到有效改善, 美化了农村生态环境和生活环境, 促进了合浦县马江村、廉北村、新圩村等生态文明示范村的建立。二是村民收入明显增加, 农户建设沼气池, 解决了一日三餐生活用能问题, 省去了燃烧煤气及用电煮饭、炒菜费用, 农户开展用沼肥淋菜、种果、养鱼等沼气综合利用技术, 减少了化肥、农药的施用量, 增加了农作物抗逆性, 提高了农产品产量和质量, 实现了农业生产无害化, 是农民增收的有效途径[1,2,3]。三是村民精神面貌大改变, 农村建设沼气池, 节约了大量农民砍柴工日, 减轻劳动强度, 解放农村妇女, 将沼气建设与改厨、改厕、改猪牛栏结合起来, 使得农村环境卫生大为改观, 流行性疾病明显减少, 农民体质得到增强, 农村面貌和农民的精神面貌焕然一新, 造就了合浦县廉北村、烟楼村、洋江村等文明村、小康村。
2 大、中型沼气项目工程实施
2008—2010年, 合浦县先后实施了东园生态农业科技有限公司、星福猪场、沙田科技示范场等5个企业的大、中型沼气工程建设, 共建沼气消化池5 850 m3, 日处理猪粪0.4 t、牛粪0.2 t、鸡粪0.3 t, 有效处理了养殖场畜禽排泄物及污水排放, 不但解决了养殖场晴天臭气熏、雨天脏水流、蚊蝇成群、群众意见大等难题, 而且养殖场通过开展沼气综合利用, 用沼气煮饭, 沼气保温灯育猪仔, 利用沼液、沼渣种果、种菜等实用技术, 为企业带来了可观的经济效益。合浦县东园生态农业科技有限公司就是一个成功的例子, 该企业探索出的“ (酒厂+饭店) - (酒糟+药渣) - (猪+牛) -沼气- (果+鸡+菜+草) - (塘+鱼+鹅+鸭) ”综合性立体生态循环发展模式, 利用酿酒产生的下脚料———酒渣和泡酒后剩下的动植物药渣、员工饭堂和东园饭店的泔水以及自种的牧草, 养殖畜、禽、鱼;通过沼气池处理畜禽粪便产生沼气, 利用沼气解决职工饭堂炊事、酒厂蒸酒车间烧锅炉和发电供给生产生活用电, 解决了600余人用餐的职工饭堂的炊事用气, 年节约炊事用能开支达10余万元。沼液沼渣则成了13.33hm2水果、6.67hm2蔬菜的优质有机肥, 还可用于肥水养鱼, 不但节省了大量的肥料钱, 还提高了农产品品质。2006年, 该企业率先安装使用了150 k W沼气发电机组和500 L沼气锅炉, 拓展了大、中型沼气工程综合利用的新空间, 这对该地区乃至全国其他地区都是一条成功的经验索引, 2007年, 该企业利用沼液进一步接种发酵制取EM生物菌肥水剂, 在水产养殖中推广使用并取得了较好的成效, 给企业带来了良好的社会、经济和生态效益[4]。
3 联户沼气工程项目实施
2008年以来, 合浦县新建联户沼气工程12处, 受益农户400户。在沼气需求迫切、养殖农户相对集中的村庄, 以养殖农户为核心, 以相邻户为单元 (一般10户为1单元) 建设沼气池, 配套进行改厕、改厨、有养殖的改圈, 通过输气管道实现集中供气。农户自愿组成联户体系并承担沼气池进出料、维修等日常管理工作, 分户承担费用, 实行集中供气、统一管理, 这种自愿联合、自主经营的沼气池建设模式, 打破了户用沼气池建设的局限性, 开拓了沼气产业化、规模化经营管理的新路子, 适应了当前农村沼气发展的需要, 为加快该县农村沼气发展找到了一条新的途径。
4 村级沼气服务网点项目实施
为确保合浦县沼气事业稳定持续健康发展, 全县已建成村级沼气服务网点68个, 沼气服务网点建设在全县形成了网络结构, 在县能源办制定的服务与管理条约的规范下, 实行公平竞争, 比质量、比服务、比信誉, 每个沼气服务队都要确定职责范围:一是多、快、好、省高标准高效率建设沼气池, 实行年度建池数量指标制和质量负责制。二是负责所建沼气池安装与维修, 教会用户正确安全使用及维护常识[5]。三是引导农民发展以沼气为纽带的有机生态种养农业, 发展高效庭院经济, 指导农民开展沼气综合利用。四是组织农产品购销流通, 为农民增收服务。沼气服务队在维修服务中, 通过电话联络上门服务, 就地清理沼液结壳、管道积水、炉具堵塞等问题, 解决了农民生产和生活用能的后顾之忧, 为该县沼气事业的可持续发展奠定了坚实的基础, 增强了农民建设沼气池的信心, 促进了该县沼气建设事业持续健康发展。
5 结语
农村沼气项目的建设, 改善了合浦县农村村容村貌, 促使农业增产, 农民增收, 企业循环发展, 取得较好的社会、经济、生态效益。
摘要：通过合浦县农村沼气项目的实施, 改善了该县农村村容村貌, 促使农业增产、农民增收和企业循环发展, 取得较好的社会、经济和生态效益。
关键词：农村沼气项目,实施,成效,广西合浦
参考文献
[1]刘清志, 邓鹏.中国农村沼气产业发展对策[J].中国石油大学学报:社会科学版, 2011 (2) :12-15.
[2]李金怀, 魏世清, 陈桂生, 等.农村生态家园沼气集中供气工程效果分析[J].现代农业科技, 2009 (20) :273-374.
[3]王洪涛.广西农村沼气产业发展研究[J].河北农业科学, 2009 (9) :132-134.
[4]刘莹玉, 郑炎成.湖北省农村沼气产业发展前景分析[J].天津农业科学, 2010 (2) :96-99.
历代名人咏合浦诗词选 篇3
送周尚书弘正诗
【南北朝】庾
信
交河望合浦，玄菟想朱鸢。共此无期别，知应复几年。
少年新婚为之泳
【南北朝】沈
约
山阴柳家长，莫言出田野。丰容好姿颜，便僻工言语。腰肢既软弱，衣服亦华楚。红轮映早寒，画扇迎初暑。锦履并花纹，绣带同心苣。罗襦金薄厕，云鬓花钗举。我情已郁纡，何有表崎岖。托意眉间黛，申心口上朱。莫争三春价，坐丧千金躯。
盈尺青铜镜，径寸合浦珠。无因达往意，欲寄双飞凫。裾开见玉趾，衫薄映凝肤。羞言赵飞鸿，笑杀秦罗敷。自顾虽悴薄，冠盖曜城隅。高门列驺驾，广路从骊驹。何惭鹿卢剑，讵减府中趋。还家问乡里，讵堪持作夫。
珠还合浦
【唐】邓
陟
至宝含冲粹，清虚映浦湾。素辉明荡漾，圆彩色玢编。昔逐诸侯去，今随太守还。影摇波里月，光动水中山。鱼目徒相比，骊龙乍可攀。愿将车饰用，长得耀君颜。
题赠高闲上人
【唐】陈
陶
珠还合浦老，龙去玉州贫。鸳鹭输黄绢，场坛绕白蘋。鼎湖闲人梦，金阁静通神。海气成方丈，山泉落净巾。猕猴深爱月，鸥鸟不猜人。拂岳萧萧竹，垂空澹澹津。汉珠难觅时，荆璞本来真。伊傅多联壁，刘雷竞买邻。江边有国宝，时为劚星辰
合浦无明珠
【唐】李
贺
合浦无明珠，龙洲无木奴。足知造化力，不给使君须。越妇未织作，吴蚕始蠕蠕。县官骑马来，狞色虬紫须。怀中一方板，板上数行书。“不因使君怒，焉得诣尔庐？” 越妇拜县官：“桑牙今尚小。会待春日晏，丝车方掷掉。” 越妇通言语，小姑具黄粱。县官踏飧去，簿吏复登堂。
珠还合浦赋
【唐】陆复礼
珠行藏兮，与道为邻。政善恶兮，感物生神。私以务贪，必去土而若耀；光之崇俭，则还浦而归淳。我政无累，匪求则至。宛若中流，昭然明媚。对三光而分色，契一德而潜致。盈虚无关，不随月魄以哉生；往返有孚，殊异奔星之出使。徒见其表迹，罔知其奚自。睹映水之新规，谓沈泉之初弃。为人利也，且一贯以称珍；与众共之，虽十斛而一匮。然知此殊之感，惟政是随。当政至而则至，偶谷离而则离人而无道兮不去何以，人而有德兮不复何为。止旧浦而可采，同蛴投而在斯。质若累累，疑点缀于霄汉；色仍皎皎，终炫耀乎
涟漪。且夫彼邦政悖，我则为不居之物；彼邦政闲，我则能应道而还。岂专巨蚌是剖，实惟无胫而走。将不贪以共存，非甚爱之能守。浦之不吝，任变化以往还；珠之员来，辩政理之奸不。诚可以孚，明可以久。处沙泥而有光，知进退而不苟。利用薄博，何必取之于龙颔；报德宏多，奚由得之于蛇口。其来也所以辅正，其去也所以戒贪。警循良之夕惕，俾傲很以知惭。勿以珠为蕴蓄，勿以珠为珍好。且还浦而难期，且离邦而难宝。将守之而勿失，在闲邪以存道。
投珠于泉
【唐】独孤绶
至道归淳朴，明珠被弃捐。天真来照乘，成性却沈泉。不是灵蛇吐，非缘合浦还。岸傍随月落，波底共星悬。致远终无胫，怀贪遂息肩。欲知恭俭德，所宝在惟贤。
珠
【唐】李
峤
灿烂金舆侧，玲珑玉殿隈。昆池明月满，合浦夜光回。彩逐灵蛇转，形随舞凤来。甘泉宫起罢，花媚望风台。
送邢桂州
【唐】王
维
铙吹喧京口，**下洞庭。赭圻将赤岸，击汰复扬舲。日落江湖白，潮来天地青。明珠归合浦，应逐使臣星。
咏八十一颗
【唐】薛
涛
色比丹霞朝日，形如合浦圆珰。开时九九知数，见处双双颉颃。
投宛陵裴尚书
（节选）【唐】张
祜
碧江秋鸟聚，青漳瞑猿孤。月上连城壁，星环合浦珠。早凉生玉树，盛暑退冰壶。豹变真君子，龙钟浅丈夫。新知多巂彦，旧态只狂奴。敢望怜哀鸟，何烦敬朽株。已愁沾洒泪，还去海西隅。
赋得水怀珠
【唐】莫宣卿
长川含媚色，波底孕灵珠。素魄生蘋末，圆规照水隅。沦涟冰彩动，荡漾瑞光铺。迥夜星同贯，清秋岸不枯。江妃思在掌，海客亦忘躯。合浦当还日，恩威信已敷。
送韦信爱子归觐
【唐】钱
起
离舟解缆到斜晖，春水东流燕北飞。才子学诗趋露冕，棠花含笑待斑衣。稍闻江树啼猿近，转觉山林过客稀。借问还珠盈合浦，何如鲤也入庭闱。
合浦还珠赋
（节选）【唐】林
藻
珠之去兮，山无色兮。氛雾冥冥，海无光兮。山有媚兮，祥风习习。地有润兮，生物振振。
与南海韦尚书
【唐】黄
滔
昔石门酌泉之事，合浦还珠之风。日月迁绵，规程革易。
以尚书励辞玉留钱之节，执投香载土之心。用将揭二贤廉洁之波，新五岭崎岖之谷。俾以佩豹韬而直下，建龙节以遐征。非止镇监，且申龟镜。昭然足验，俨若可观。然后飞驿骑以徵黄，降鹄书而命说。恢张帝道，陶冶生灵。所以知高祖创基，太宗纂业更得无疆之祚，仍归有截之风。何以言之？伏以尚书万顷包含，千寻峭拔。膺岳峻河清之数，切饮冰食蘖之诚。识洞古今，居无喜愠。将以锵履声而朝紫殿，扩心秤而启洪钧。自然道臻於尧舜羲轩，时复於禹汤文武。百蛮向化，万国归心。
送王秀才注安南
【唐】杨
衡
君为蹈海客，客路谁谙悉。鲸度乍疑山，鸡鸣先见日。所嗟回棹晚，倍结离情密。无贪合浦珠，念守江陵橘。
追和戍寅岁上元
【唐】苏
轼
一龛京口嗟春梦，万炬钱塘忆夜归。合浦卖珠无复有，当年笑我泣牛衣。
题冯通直明月湖诗后
【宋】苏
轼
老衍清篇墨未枯，小冯新作语尤殊。呼儿净洗涵星砚，为子赓歌堕月湖。
闻道牂江空抱珥，年来合浦自还珠。
请君多酿莲花酒，准拟王乔下履凫。
诗寄东坡先生自朱崖量移合浦
【宋】郭祥正
君恩浩荡似阳春，海外移来住海滨。
莫向沙边弄明月，夜深无数采珠人。
海康书事之十
【宋】秦观
合浦古珠池，一熟胎如山。试问池边蜑，云今累年闲。岂无明月珍，转徙溟渤间。何关二千石，时至自当还。
自合浦还清湘寄虚中第
【宋】陈瓘
一
行彻天涯万里山，月明方照海珠还。瘴乡来往浑開事，聊为清湘一破颜。
二
三年已绝生还望，一日天恩到海涯。路过清湘犹间阔，当时何不住长沙。
三
曾近沧溟看飓风，波涛有尽海无穷。四年陈迹今何在，坐对湘云豁晩空。
四
瘴海只将梅作雪，湘山今见麦为春。睛空有月当如旧，岭北山南总照人。
成 都 行
【宋】陆游
倚锦瑟，击玉壶，吴中狂士游成都。成都海棠十万株，繁华盛丽天下无。青丝金络白雪駒，日斜驰遣迎名姝。燕脂褪尽见玉肤，绿鬟半脱娇不梳。吴绫便面对客书，斜行小草密复疏。墨君秀润瘦不枯，风枝雨叶笔笔殊。月浸罗衫清夜徂，满身花影醉索扶。东来此欢堕空虚，坐悲新霜点鬓须。易求合浦千斛珠，难觅锦江双鲤鱼。
送别陈廉州于一片潇湘
【宋】郭应祥
合浦名邦。风流太守，紫绶金章。
暂驻旌麾，来临祖席，一片潇湘。
且
须缓举离觞。
细看取、眉间点黄。
未到还珠，已闻赐玺，归近清光。
临 江 仙
【宋】黄 机
风翥寓飞空燕子，宝香犹惹流苏。
旧欢凄断数行书。
终山方种玉，合浦忽还珠。
天连合浦宝珠还
【宋】朱晞颜
地接三山真迹在，天连合浦宝珠还。重来忛似乘槎到，渐愧云门夜不关。天斫神剜不记年，洞中风景异尘寰。江波荡漾青罗带，岩石虚明碧玉环。
走珠石题记
【宋】 方信儒 底事明珠解去来，当时合浦已堪猜。贾胡不省何年事，老石江头空绿苔。
伯夷颂
【元】邓文原并书 先哲吾师表，斯文古鼎铭。义形扣马谏，书胜换鹅经。故事征皇祐，乡祠谒仲丁。登堂睹遗墨，山雨飒英灵。心国垂世远，手泽历年殊。谁购山阴序，真还合浦珠。身惟名不朽，书与道同符。诸老珍题在，犹堪立懦夫。
范文正公书伯夷颂并札卷
【元】笃列图
韩文称颂伯夷贤，黄素真书庆历年。
月照明珠还合浦，春风长共义庄田。
合浦珠诗
【明】屈大均
一
一唇有数珠，大小相连缀。采珠乘月圆，扬帆入龙穴。
二
珠母当秋孕，精华如月全。明珠无大小，都在口唇边。
三
水淡珠多白，水咸珠多黄。月光化为水，来养明月珰。
四
生长珠池旁，食珠如食米。日夕剖神胎，珠肉荐芳醴。
五
儿女抱珠筐，细珠弃不取。珠母肉微红，色似海棠乳。
六
家家养得采珠儿，兼采珊瑚石上枝。珠母多生珠子树，海中攀折少人知。
七
珠池千里水茫茫，蚌给秋来食月光。取水月中珠有孕，精华一片与天长。
八
暮春争赛白龙池，挂席乘潮采不迟。千尺赢筐垂海底，翻波不使巨鱼知。
珠池叹
［明］顾梦圭 孟尝美政龚黄班，今人反怨珠来还。玺书三年两次降，骊龙赤蚌皆愁颜。往时中官莅合浦，巧征横索如狼虎。中官肆虐去复来，谁诉边荒无限苦？
珍珠洞
［明］杨瑛
不信珠还合浦滩，洞门高倚白云端。一丛碧藓侵衣绿，七曜奇光照水寒。倾出鲛人泪点点，解来神女佩珊珊。澄波纵有骊龙卧，探取何妨掌上看。
书
题
［明］冯梦龙
一
夫妻本是同林鸟，大限来时各自飞。若是遗珠还合浦，却教拂拭更生辉。
二
珠还合浦重生采，剑合丰城倍有神。
堪羡吴公存厚道，食财好色竞何人！
光生合浦喜珠还
［清］曹雪芹
光生合浦喜珠还，此夜欣瞻旧玉颜。名向广寒通桂籍，秩从瑶阙领仙班。开奁喜拂重圆镜，探树疑逢隔世环。试问古今谁得似，漫言天上胜人间。
粤东诗与陈简亭同赋
［清］莫瞻菉
合浦还珠待孟尝，伏波横海旧开疆。吸筒春晓餐蕉露，曲簿秋睛晒蔗霜。浪靖蜃楼都敛息，时清蜑户亦驯良。六篷船倚槟榔树，处处飞红看佛桑。
州县集句诗
［清］宋湘
廉州土产实堪夸，东粤珍奇胜碧霞。至重连城仍有价，珠还合浦总无差。的皪合浦珠
谭嗣同 的皪合浦珠，款款郎君意。珠色与花容，两两生葳蕤。惘知蛱蝶身，欣然良辰此。奄忽晓梦惊，揽衣当轩立。
雅 泉 喷 珠
［民国］梁嘉树 半亩无声一雅泉，明珠颗颗喷更番。鲛人洒泪难相似，疑是源从合浦还。
《声津启蒙》句
车万育
昆山惟玉集，合浦有珠还。
阮籍旧能为眼白，老莱新爱着衣斑。
栖迟避世人，草衣木食。窈窕倾城女，云鬓花颜。
《西楼记》选曲
［清］袁于 合浦珠仍返，燕归旧巢，重与仙郎吹风箫。
如今于叔夜，可在家裏看书，还在外边游荡。
《卢镐藏书》诗
［清］卢 镐 劫后犹存书万册，浙东遗籍此楼孤。秦宫幸脱阿房火，粤海如还合浦珠。
合浦采珠歌五首
［清］冯敏昌
（一）白龙城外暮云行，珠母海南秋月明。明月渐圆珠渐好，好听船上蛋歌声。
（二）胎成拙肭偶然同，星半茫然在海中。倒却长空洗圆月，月行应入文昌宮。
（三）铁作珠耙三百斤，蚌螺开甲肉如银。云头一霎风雷起，依旧连筐献海人。
（四）郎如天上月团圆，妾比明珠欲抱难。珠孕有时空白惜，月盟何幸不长寒。
（五）江浦茫茫月影孤，一舟才过一舟呼。舟舟过去何舟得，待得珠来泪已枯。
济南七十二泉南珍珠泉诗
神林南面有流泉，流出明珠颗颗圆。一脉清冷犹合浦，月明老蚌吐深渊。
幼学琼林・卷三
孟尝廉洁，克俾合浦还珠。相如勇忠，能使秦廷归壁。
合浦还珠亭联
［清］伊秉绶
太守昔称廉，千载还珠传威事。使君重起废，一亭流水喻澄怀。
幻出明珠合浦歌
［清］蔡抡科
明月窺人池上过，池光如镜月如波。流来素碧中天彩，幻出明珠合浦歌。
四野桑麻沾溉远，一城灯火笑声多。太清近日无尘滓，不用天河净挽弋。
合浦鲛珠泛海涔
［民国］徐松石
羊牁江水碧沉沉，百粤沧桑成古今。红豆有词添客梦，绿萝留曲统归心。伏波蟾鼓鸣山泽，合浦鲛珠泛海涔。云物不殊人事故，雄风犹是峒溪深。
雷州半岛
陈毅
海港湛江，冬犹暖，日与夜，秋如夏，勤劳无暇。
凉风动，看吞吐，炎氛化。
往来我汝，计经年二万。
欧非美亚。
火山爆炸。
人造天河施灌溉，留得湖光呈碧绿，长堤堵海盐滩大。
闻名我亦来言驾。
看今朝合浦果珠还，再十年人物与江山，真无价。
难描画。
方合浦白龙珍珠城旧址二首
田汉
（一）南来初看还珠记，当日珠民重可悲。碧浪曾翻千斛泪，夜光能换几餐炊。方城有址堆残贝，古寺无踪剩断龟。访古喜逢歌剧队，布帷丝幕白龙湄。
（二）双鲨闻说守杨梅，贯月奇光去得回。北海开池初结果，南康剖蚌半含胎。看来子好因娘好，毕竟他培赛自培。玉润星圆千百斛，南珠应夺亚洲杯。
唐·陈子昂
感
遇
翡翠巢南海，雄雌珠树林。何知美人意，骄爱比黄金？ 杀身炎州里，委羽玉堂阴。唐·杜甫
唐·王健
旖旎光首饰，葳蕤烂锦衾。岂不在遐远，虞罗忽见寻。多材信为累，叹息此珍禽。
客
从
容从南溟来，遗我泉客珠。珠中有隐字，欲辨不成书。缄之箧笥久，以俟公家须。开视化为血，哀令征敛无。
诸
将
其四
回首扶桑铜柱标，冥冥氛祲未全销。越裳悲翠无消息，南海明珠久寂寥。殊锡曾为大司马，总戎皆插侍中貂。炎风朔雪天王地，只在忠贞翊圣朝。27
海 人 谣
唐·元稹
唐·项斯
海人无家海里住，采珠役象为岁赋。恶波横天山塞路，未央宫中常满库。
采 珠 行
海波无底珠沉海，采珠之人判死采。万人判死一得珠，斛量买婢人何在？ 年年采珠珠避人，今年采珠由海神。海神采珠珠尽死，死尽明珠空海水。珠为海物海为神，神今自采何况人。
蛮 家 诗
领得卖珠钱，还归铜柱边。看儿调小象，打鼓试新船。醉后眼神树，耕时语瘴烟。不逢寒便老，相问莫知年。
唐·白居易
送客二十韵
已讶游何远，仍嗟别太频。离容君蹙促，赠语我殷勤。迢递天南面，苍茫海北漘。謌陵国分界，交趾郡为邻。蓊郁三光晦，温暾四气匀。阴睛变寒暑，昏晓错星辰。瘴地难为老，蛮陬不易驯。土民稀白首，峒主尽黄巾。战舰犹惊浪，戎东未息尘。红旗国弁便，紫绶裹文身。面苦桄榔里，浆酸橄榄新。牙樯迎海舶，铜鼓赛江神。不冻贪泉暖，无霜毒草春。云烟蟒蛇气，刀剑鳄鱼鳞。路足羁栖客，官多谪逐臣。天黄生飓母，雨里长枫人。回使先传语，征轩早返轮。应防杯里蛊，莫爱囊中珍。北与南殊俗，身将货孰亲？ 尝闻君子戒，“忧道不忧贫”。
唐·高骈
南 海 叙 怀
唐·陶弼
万里驱兵过海门，此生今日报君恩。回期直待烽烟静，不遣征衣有泪痕。
过 天 威 径
豺狼坑尽却朝天，战马休嘶瘴岭烟。归路险巇今坦荡，一条千里直如弦。
即
事
使君合浦来，示我海边石。千岩秀掌中，大者不盈尺。
望安南海口
喜逢睛日破阴霾，望极西南瘴海涯。夷狄古今常反覆，朝廷终始务绥怀。何时良将收铜柱？不日孱王弃藁街。惆怅藤桥兵死鬼，年年沙上哭坟骸。
钦州天涯亭
宋·苏轼
雾雨纷纷风益骄，天涯亭上觉魂消。一家生意付秋瘴，万里归心随暮潮。共送远人还海界，吏迎迁客入津桥。山公对此难酬饮，未免醒来两鬓凋。
三 海 岩
灵邑西南古洞天，我来方信海为田。无名不入州图载，有路空闻野老传。此日登山人采蚌，当时饮马客留钱。颜公昔记麻姑说，三变柔桑事果然。
六月二十日夜渡海
参横斗转欲三更，苦雨终风也鲜晴。云散月明谁点缀？天容海色本澄清。空余鲁叟乘桴意，粗识轩辕奏乐声。九死南荒吾不恨，兹游奇绝冠平生。
自雷适廉，宿于兴廉村净行院
荒凉海南北，佛舍如鸡栖。忽行榕林中，跨空飞栱枅。当门冽碧井，洗我两足泥。高堂磨新砖，洞户分角圭。倒床便甘寝，鼻息如虹霓。童仆不肯去，我为半日稽。晨登一叶舟，醉兀十里溪。醒来知何处，归路老更迷。
夜雨宿净行院
芒鞋不踏利名场，一叶轻舟寄淼茫。林下对床听夜雨，静无灯火照凄凉。
廉州龙眼，质味殊绝，可敌荔枝
龙眼与荔枝，异出同父祖。端如柑与橘，未易相可否。异哉西海滨，琪树罗玄圃。累累似桃李，一一流膏乳。坐疑星陨空，又恐珠还浦。图经未尝说，玉食远莫数。独使皴皮生，弄色映雕俎。蛮荒非汝辱，幸免妃子污。
合浦愈上人，以诗名岭外，将访道南岳，留诗壁上云： “闲伴孤云自在飞．”东坡居士过其精舍，戏和其韵
孤云出岫岂求伴，锡杖凌空自要飞。为问庭松尚西指，不知老奘几年归？
瓶 笙 诗
并行
庚辰入月二十八日，刘几仲饯饮东坡，中觞闻笙萧声，杳杳若在云霄间，抑扬往返，粗中音节。徐而察之，则出于双瓶。水火相得，自然吟啸。盖食顷乃已。坐客惊叹，得未曾有。请作瓶诗记之。
孤松吟风细泠泠，独茧长缫女娲笙。陋哉石鼎逢昭明，蚯蚓窍作苍蝇声。瓶中宫商自相赓，昭文无亏亦无成。东坡醉熟呼不醒，但云作劳吾耳鸣。
闻乔太傅换左藏知钦州，以诗招饮
今年果起故将军，幽梦清诗信有神。马革裹尸真细事，虎头食肉更何人？ 阵云冷压黄茅瘴，羽扇斜挥白葛巾。痛饮从今有几日？西轩月色夜来新。
欧阳晦夫遗接䍠、琴枕，戏作诗谢之
携儿过岭今七年，晚途更著黎衣冠。白头穿林要藤帽，赤脚渡水须花缦。不愁故人惊绝倒，但使俚俗相恬安。见君合浦如梦寐，挽须握手俱汍澜。妻缝接䍠雾縠细，儿送琴枕冰徽寒。无弦且寄陶令意，倒载犹作山公看，我怀汝阴六一叟，眉宇秀发如春峦。羽衣鹤氅古仙伯，岌岌两拄抉霜纨。至今画像作此服，凛如退之加渥丹。尔来前辈皆鬼录，我亦带脱巾欹宽。作诗颇似六一语，往往亦带梅翁酸。
留别廉州张左藏
编雚以苴猪，瑾涂以涂之。小饼如嚼月，中有酥与饴。悬知合浦人，长诵东坡诗。好在“真一酒”，为我醉宗资。
宋·郭功甫
苏子瞻移合浦寄赠
宋·熊
元·范椁
明·王翰
君恩浩荡似阳春，海外移来住海滨。莫向沙边弄明月，夜深无数采珠人。
越 州 道 中
野田秋溜正潺潺，新翠乔林绕舍环。淡日凝烟横别浦，斜风吹雨过前山。柴扉初放牛羊出，渔艇方携蟹蛤还。自笑平生爱游览，天教长在水云间。
登沓磊驿楼自此渡海
半生长与客为家，罢直初来瀚海查。始信人间行不尽，天涯更复有天涯。
赠李珪平海寇歌
明·朱勤 伞圆山下龙马迹，铁船入海苍虬立。珥江江外战尘飞，铜柱摧折土花碧。蛮酋矫首抗王师，天风怒扫蚩尤旗。富良一战百万破，破船南走占城栖。圣朝服远多恩泽，降者授官擒者释。四方玉马贡神京，万里华夷归禹迹。万宁蛇豕何怅怅，鼎镬之鱼徒跳踉。艨艟直捣白龙尾，片帆不许归蛮乡。覃怀大帅万人杰，谈笑挥兵静余孽。斩馘凶逆樯橹空，槛送俘囚献金阙。转首金风又报秋，长空一碧欃枪收。鲸鲵深藏海波息，好挂长剑归神州。紫风衔书九重下，祖帐高张满原野。安得吉甫颂清风，便拟车攻继周雅。
天 涯 驿 路
天涯有驿枕遐荒，南望交州去路长。
地接殊方山不断，境连边塞叶偏黄。来人络绎无虚日，行李充盈有裹粮。最喜华夷归一统，共沾圣化乐虞唐。
海 角 潮 声
孤亭近海海门隈，时听潮声海上来。万水有波俱喷雪，九天无雨自鸣雷。沙头震动鸥群散，枕上惊残客梦回。消长古今同一理，险夷犹自在灵台。
明·赵
瑶
还 珠 亭
瑞采含辉水一湾，天生老蚌济民艰。曾驱万命沉渊底，争似当年去不还！
明·饶秉鉴
南 浦 生 珠
南浦茫茫接海洋，明珠海底久珍藏。贝宫漫说生明月，鲛宝宁知有夜光。瑞采晓胜波潋滟，蚌胎时吐水苍茫。也知至宝难长晦，万斛于今拥帝旁。
阜 市 人 烟
阜市东来接海涯，市中烟火起楼台。几家骏宇相高下，无数征商自往来。民俗喜从今日厚，柴门应为故人开。圣朝自是多丰乐，常听欢声动六街。
天 涯 驿 路
天涯南去即交州，驿路迢迢阻且修。落日殊方来贡使，春风千里快骅骝。深山迥与人烟隔，地僻从教草树幽。却忆杨朱今不见，多歧谁为道途忧？
西 门古 渡
郡城西出是通津，津渡开来不记春。短棹尚随迎送急，扁舟宁厌往来频。一江碧水咸趋海，两岸青山半入云。逝者如斯长不息，眼前谁是济川人。
廉
江
长江来浩浩，何事得廉名？ 自是源常洁，因之流亦清。浪浮云影动，波静月华明。寄语沧浪客，于兹好濯缨。
明·林
锦
还 珠 亭
合浦还珠世所称，危亭移建事更新。若将物理论孚感，一代恩波一代人。
明·刘
烜
抚八寨诸“贼”
箪食壶浆远送迎，人心归向若为情。冥顽昔为饥寒迫，礼义今由富足生。深垌月明无犬吠，荒村雨过有农耕。抚绥自我无他扰，可保吾民乐太平。
行部钦州归途阻雨
驿程侵早发天涯，山路崎岖跬步移。方怪仆夫频告病，忽惊匹马又嘶疲。荒渠集水深过顶，苦雨沾衣湿透肌。民事勤劳吾分事，敢萌分寸怨尤私。
明·吴廷举
大 廉 山
危途疲马信间关，合浦埋轮十日间。国有仁贤惟宝在，家无担石比珠还。秋声近与江声接，景色宜兼曙色看。行李纷纷游宦子，几人不愧大廉山？
明·顾梦圭
珠 池 叹
有序
廉州平江、清婴、杨梅，乌坭、断网等池，雷州乐民池，皆产珠也。先朝卒十五六年或十年一采，间得美珠。迩者三年再采，所得皆碎小，藩臬有司并受诘责。不知此物钟秀毓奇，生息甚难，冥冥中有鬼神呵护，不容以人力强求者。而顽悍之民，因缘为盗，沿海骚扰。今雷、廉凋敝已极，将有他虞，大为寒心，余承乏摄此任，倘复议采，当效贾生痛哭“，疏闻于朝，必不以“无益害有益”也。
汉室嫔嬙无丽怖，南海逍遥养泉客。昭阳新宠斗新妆，照乘之珠苦难得。孟尝美政龚黄班，今人反怨珠来还。玺书三年两次降，骊龙赤蚌皆愁颜。往时中官莅合浦，巧征横索如豺虎。中宫肆虐去复来，谁诉边荒无限苦？ 野老村童不著裈，四山戎马夜纷纷。竹房无瓦瓶无粟，犹折山花迓使君。
明·汤惟允
永 安 城
黑云交蜃气，紫电射龙光。残埤山作障，断岸海为疆。深尊愁欲破，欹枕昼偏长。何尔驱驰急？风尘一剑铓。
明·何
御
春 兴
八首选一首
圣朝大将总元戎，十万风雷动地雄。不令尉佗专岭外，应教诸葛定黔中。明珠翡翠从天使，苜蓿蒲桃入汉宫。想及班师春正好，云台首勒镇南功。
明·甘
泽
孟 太 守 祠
为官合浦去珠还，万古流芳天地间。富责心轻犹敝屣，贞廉名重并高山。来时岭外神明惧，去日辕前父老攀。自是仁民恩到骨，至今祠屋祀天南。
明·汤显祖
阳江避热入海，至涠洲 夜看珠池作，寄郭廉州
春县城犹热，高州海似凉。地倾雷转侧，天入斗微茫。薄梦游空影，浮生出太荒。
乌艚藏黑鬼，竹节向龙王。日射涠洲郭，风斜别岛洋。交池悬宝藏，长夜发珠光。闪闪星河白，盈盈烟雾黄。气如虹玉迥，影似烛银长。为映吴梅福，回看汉孟尝。弄绡殊有泣，盘露滴君裳。
明·刘子麟
廉 阳 八 景
一、合 浦 晓 霞
万顷清波漾古今，霞光影映若关心。只从遗有还珠迹，留与骚人嗣好音。
二、廉 山 时 雨°
层叠峰峦峙翠城，大廉还自郡侯名。夜来忽见月离毕，流作清泉濯我缨。三、三 洞 天 光
水云深处结幽亭，恍若芙蓉接上冥。萧鼓喧腾鱼掷浪，一湾流绿浸疏星。四、五 池 云 影
极目汪汪盼五池，鲛人何事肯相知？
堪夸屏翳忘机念，来往波心绝所私。
五、古 寺 灵 钟
萧萧古刹法华寒，闻说崆峒也涅槃。架上晓来犹有湿，可知音响倒盂兰。
六、石 桥 仙 艇
架石浮河拟霁虹，巨人仙迹属神工。当年羽士飘飘去，遗下扁舟荡港中。
七、海 角 春 风
海角由来地尽头，殊方胜概温悠游。中流砥柱曾谁是？且看阳和拥蜃楼。
八、冠 头 秋 霁
巉岩壁立镇惊涛，独战商炎爽气高。多少艨艟冲巨浪，凭虚一览尽秋毫。
明·林兆珂
采 珠 行
有序
先大父少司马公之总制两粤也，疏罢采珠、搋中官柄，廉人至今尸祝之。兆珂来守是邦，故老犹读采珠中官作威状，咸颂先大父之徳不衰。兆珂不敏，不克承先志，俱承平日久，未悉中官恶焰，仍蹈前辙为民害，爰系以词，不计工拙也。
骊龙惊徙鲛人愁，冯夷海若声啾啾。七采珠玑闷不得，重重贝阙遭冥搜。汉家神武威荒服，越人来贡珊瑚熟。武皇南顾廑宸衷，节钺权寄貂珰属。太清明月薄蟾蜍，诏书南下大征珠。岁发金钱三百万，渤澥横天尾舳舻。倏忽狂飙吹浪起，舵折帆摧舟欲圮。哀哀呼天天不闻，十万壮丁半生死。死者长葬鱼腹间，生者无语摧心肝。群起争赴鼋鼍窟，那顾安流与急澜！鲛鳄磨牙竞相向，积血化为海水丹。恨不远从辽海戍，纵往死地死亦宽。今秋天半朱霞赫，内府奇珍应可得。万落千村半已残，后宫犹未增颜色。内使自称王爪牙，怒目恣睢限严勒。我祖白筒弹中官，九重天子变龙颜。诏下明光罢开采，貂珰失色旋长安。吁嗟乎！
“以人易珠”人不见，烟水茫茫寒一片。若使今日孟尝来，珠去无还翻所愿。
明·薛梦雷
里 巫 行
有序
廉郡巫风盛行，病者多不服药而好跳神。文诏频颁，仍执迷不悟。作《里巫行》，尚冀俗之一改也。
里人有病不饮药，神君一来疫鬼却。走迎老巫夜降神，白羊赤鲤纵横陈。男女殷勤案前拜，“家贫无肴神弗怪!” 老巫击鼓舞且歌，纸钱索索阴风多。巫言“汝寿当止此，神念汝虔赊汝死。” 送神上马巫出门，家人登屋啼招魂。
明·屈大均
采 珠 池
二首
合浦清秋水不波，月中珠蚌晒珠多。光含自露生琼海，色似明霞接绛河。
幕春争赛白龙池，挂席乘风采不迟。千尺螺筐垂海底，看波不使巨鱼知。
合 浦 珠 市
海上集珠市，城中尽竹房。居临鲛室近，望入象林长。野旷秋无边，江水清有霜。炎洲惟此地，风景最荒凉。
明·张国经
即
事
梅雨三旬水浸埤，苍茫气色起蛟螭。王程尽说天涯远，吏隐偏于海角宜。
多病所需惟调摄，有官何必问迁移。狎凭亲友渔樵话，谁道投荒是索居。
清·杜
臻
出雷州东门阅白鸽寨并双溪台
十里雷东道，清时氛祲消。楼船白鸽盛，锁钥锦囊遥。孤塔凌城堞，双溪带海潮。耕耘春正好，生计及渔樵。
清·张玿美
五月四日南郊劝农，过海角亭小憩
青郊翼翼稻苗齐，蒲酒慰劳过小溪。行近野田衣带绿，来仃海角陇云低。簿书聊得同疏放，稼穑何曾畏夏畦。打鼓画船催雨急，归时天际断虹霓。
清·李符清
登冠头岭炮台观海
我官北海家南海，居海今初上海门。大壑有时跳日月，洪波终古荡乾坤。
炮訇天半蛟龙舞，网集沙滩鸟雀喧。安得仙槎浮海去，直穷牛斗问仙源。
登冠头岭呈家幼文总戎
中原南徼尽廉州，南到冠头更尽头。明月五池疑甓社，青天一发是涠洲。渔人网晒高沙树，卤户家移断港舟。万里氛无波浪静，始知边帅足权谋。
清·冯敏昌
采珠歌五首
白龙城外暮云行，珠母海南秋月明。明月渐圆珠渐好，如听船外蛋歌声。
胎成朏肭偶然同，星斗茫茫在海中。倒却长空洗明月，月行应在水晶宫。
铁作珠耙三百斤，蚌螺开甲肉如银。云头一霎风雷起，依旧连筐献海人。
郎如天上月团圞，妾作明珠欲抱难。珠孕有时空自惜，明月何幸不常寒。
江浦茫茫月影孤，一舟才过一舟呼。舟舟过去何舟得？得得珠来泪已枯。
清·康基田
清·汪
清 乐 轩
白鸥海上来，偶逐孤云住。迁客本无家，乃有诛茅处。碧藻戏游鳞，明霞掠飞鹜。云构已云颓，清辉宛如故。真一酒曾倾，瓶笙诗独赋。神交溯前修，风流有余慕。缥缈化人台，烟空出江树。风泉泻幽壑，鱼鸟同旦暮，沧浪濯吾缨，试问芙蓉渡。
长 春 亭
孤亭屹中流，两岸交清樾。渚花张素锦，春芳无时歇。坡公海外来，结庐烟水窟。沉埋六百载，岁月飘以忽。怀古想胜游，苔藓剔残碣。仰止在高山，遗踪不可没。绣栭与芝楣，凌陂见突兀。
白云起蓬蓬，清泉流汩汩。灵旗庶来游，把酒酬江月。
钱别张明府
主宾互换此开筵，把酒临风胜事传。九曲河桥通碧汉，千家渔火出重渊。长春亭畔明如昼，清乐轩前醉欲仙。北辙南辕今昔异，风流儒雅似当年。
合浦南湾产海石，偶移一片
为屏山，诗以纪之
三山在海中，可望不可知。五岳在中土，可即不可移。神仙或幻妄，跋履苦奔驰。不如我屏上，坐卧皆见之。此石在珠海，磊磊藏瑰奇。得非惊涛凝，恐是流云垂？ 俗目讵肯顾，千年沉沙泥。好事偶遇我，颇觉惬怀私。大力负之走，波澜逐空飞。顿同偪仄地，庭宇生崔嵬。要当载归囊，炎海来棂扉。我本山中人，丘壑宜相随。意行足游历，一壶聊可栖。
形求抑末矣，芥子有须弥。
长春亭五首 选二首
过眼浮生水上沤，西归玉局自天游。长春何必当春见，海外移来序已秋。“万里瞻天”未谪归，闲云海角任孤飞。亭中看得春常在，到处安心愿不违。
清·韩
崶
和康茂园先生清乐轩、长春亭之作二首，同容川太史赋
广西合浦 篇4
家系选育是一种常用的选择策略
微卫星分子标记具有多态性丰富、分布广、共显性、符合孟德尔遗传、易检测等特点,可用于水产动物种质鉴定和遗传结构分析
1 材料与方法
1.1 实验材料
实验样品来自于2012年3月和6月构建的合浦珠母贝第三和第四批家系。家系构建的方式为完全双列杂交,每个家系用1雌1雄进行交配。第三批家系的亲本来自海南三亚(S3)、广东大亚湾(D3)和越南(Y3),第四批家系的亲本来自广东大亚湾(D4)、广西北海(B4)和广东雷州(L4)。2013年8月随机选取第三批选育家系中的Y3Y31、D3D313和S3S326以及第四批选育家系中的L4B46、L4B47、L4B48、B4D426、B4D427、D4B445等共9个家系(编码中第一个字母为雌性,第二个字母为雄性,下标数字代表家系批次,数字代表家系编号),每个家系随机选取40个个体,剪取闭壳肌组织,置于95%乙醇中保存。
用动物基因组DNA小量提取试剂盒(普博欣)提取样品DNA。用1%的琼脂糖凝胶电泳和NanoDrop 2000检测DNA的完整性和浓度。DNA质量浓度调至50 ng·μL-1。
选取6对自行开发的具有多态性位点的微卫星引物用于家系的遗传多样性分析
表1 微卫星引物序列及扩增情况Tab.1 Sequence and amplification of microsatellite loci
1.2 PCR扩增及电泳检测
PCR反应体系为20μL:10×PCR buffer(Mg2+free)2μL,Mg2+(25 mmol·L-1)1.6μL,d NTP(10mmol·L-1)1.6μL,正、反向引物(10μmol·L-1)各0.8μL,r Taq酶(Ta KaRa)0.2μL,基因组DNA0.8μL,dd H2O 12.2μL。PCR扩增程序为94℃预变性5 min后30个循环:94℃变性30 s,退火温度30 s,72℃延伸30 s;最后72℃延伸7 min。PCR产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行检测,银染,扫描后保存图像,用于基因型分析。
1.3 数据分析
根据聚丙烯酰胺凝胶图谱上扩增条带的位置判读个体的基因型。用Popgen 1.31
2 结果
2.1 微卫星位点遗传多样性分析
各个位点的遗传多样性参数见表2。6个微卫星位点在9个家系中共检测到32个等位基因,各位点的Na为3~8个,平均Na为5个;Ne为1.758 7~3.586 5,平均Ne为2.662 3。Ho为0.144 4~0.488 9,He为0.432 0~0.722 2,I为0.691 9~1.507 4,其中scd3.1-3的I最大。
使用MEGA软件UPGMA法对合浦珠母贝9个家系进行聚类分析,结果显示9个家系共分为3支,其中L4B48单独成一支,B4D426和B4D427聚集在一起,再与D4B445聚成一支,其余家系聚成一支(图1)。
表2 6个微卫星位点在9个合浦珠母贝家系的多样性指数Tab.2 Genetic diversity index analysis of six microsatellite loci in nine P.fucata families
图1 合浦珠母贝9个家系亲缘关系UPGMA聚类图Fig.1 UPGMA dendrogram of nine families of P.fucata
2.2 家系间遗传多样性分析
各个家系的遗传信息见表3。每个家系都有单态,共有单态16个(占29.63%),其中家系Y3Y31的单态位点最多(4个),其次为家系S3S326(3个)。9个家系的平均Ho为0.129 2~0.466 7,平均He为0.155 0~0.439 6,平均I为0.248 5~0.712 2。Hardy-Weinberg平衡检验(卡方检验)结果表明,在检测得到的54个数据结果中,有19个(占35.19%)极显著地偏离了Hardy-Weinberg遗传平衡。
2.3 遗传距离及聚类分析
9个家系之间的遗传距离和遗传相似系数见表4。各家系之间的遗传距离为0.109 0~1.137 2,遗传相似性系数为0.320 7~0.896 8。家系L4B46与L4B48的遗传距离最大(1.137 2),遗传相似性系数最低(0.320 7);家系D3D313与L4B46的遗传距离最小(0.109 0),遗传相似性系数最高(0.896 8)。
表3 9个合浦珠母贝家系的遗传多样性分析Tab.3 Genetic diversity of nine families of P.fucata
注:Na.等位基因数;Ne.有效等位基因数;Ho.观测杂合度;He.期望杂合度;I.Shannon多样性指数;P.Hardy-Weinberg平衡的卡方检验;*.P<0.05/6=0.008 3;**.P<0.01/6=0.001 7Note:Na.allele number;Ne.effective allele;Ho.observed heterozygosity;He.expected heterozygosity;I.Shannon diversity index;P.HardyWeinberg equilibrium test
表4 9个家系间的遗传相似系数(上三角)和遗传距离(下三角)Tab.4 Genetic identity(above diagonal)and genetic distances(below diagonal)of nine families of P.fucata
3 讨论
遗传多样性是评价种质资源状况的重要指标。对合浦珠母贝进行遗传选育必须首先了解其遗传多样性。迄今为止,合浦珠母贝野生群体和养殖群体的遗传多样性都有研究报道,而且所采用的分子标记有微卫星、AFLP、RAPD、ISSR和SRAP等
杂合度是衡量群体遗传变异大小的指标,杂合度值越大,群体的遗传变异就越大,遗传多样性就越高,群体的稳定性也就越大。I越大,群体的离散性越高,即多样性越丰富。汤健等
在一个随机交配的、足够大的群体中,等位基因频率和基因型频率在不同世代保持不变,即处于Hardy-Weinberg平衡。在该研究中检测到有19个位点(占35.19%)极显著地偏离了Hardy-Weinberg平衡,说明在合浦珠母贝家系中的基因型频率发生了改变。在其他贝类中也存在类似现象
广西合浦 篇5
关键词：施肥,生态农业,影响,对策,广西合浦
土壤是农田生态系统的重要组成部分,土壤性状随农田生态系统的发展而演变,土壤的变化又为农田生态系统的演变打下基础。农田生态系统是以土壤为主体,以环境为条件,加上植物、微生物、动物,以及人类活动的影响等各种组成因素相互作用的产物。它既是一个相对独立的历史形成的自然系统,又是可以通过人类活动予以适当调控的人为系统。在人多地少、复种指数大、集约程度高的地区,人类活动的影响更为显著。
土壤生态系统是农田生态系统的基本子系统,其内容包括在土壤中的物质变化、生物代谢、根系的活动机制以及土壤温度、水分、空气的状况和变化等;耕作制度、栽培技术、灌溉、施肥等则是控制土壤生态系统的手段;而肥料的投入又是农业生产中对农田生态系统投入最多的生产物质。
1 施肥对农业生态环境的影响
1.1 施肥有利于构成良好的土壤生态环境
众所周知,施肥可以调节作物的营养状况,提高作物产量,改善其品质,还能改良土壤,培肥地力,优化农业生态环境。据联合国粮农组织估计,世界作物产量的提高,1/2是靠化肥增加。广西农业厅多年资料统计表明,全区水稻每666.7 m2平均产量与其化肥用量呈极显著整相关,相关系数r值为0.961**(n=25),回归方程Y=129.1+4.15X。大量生产实践证明:合理增加肥料投入是促进农业增长最普遍又有效的措施。
施肥由于有机肥的投入以及作物秸秆的增加,能提高土壤有机质含量,通过微生物作用形成腐植质,胶结土粒组成大小不同的土团结构,其间小孔隙保水、大孔隙通气,同时满足土壤微生物活动及作物根系发育对水、肥、气、热的协调供应。而且化肥有明显的生理酸性、中性及碱性之分,有利于土壤pH值的逐步调整矫正,保证作物生育和微生物繁殖适宜的pH值范围,以提高某些营养元素的有效性,这些都有利于构成良好的农田生态环境。
1.2 施肥造成土壤环境污染
虽然,施肥对农业生产产生的积极效应应充分肯定,但施肥不当对环境保护造成的负面影响也不能低估。农业施肥投入数量最大的三大元素是氮、磷、钾,有机肥料中所含的植物养分经微生物分解最终大多以氮、磷、钾离子状态为作物利用。在这3种主要元素中,对环境影响最大的是氮和磷。
氮在农业生产和环境影响中是最活跃的元素,它既是作物增产的主要元素,又对空气、水体、地下水等方面的污染有重要影响。各种含氮肥料施入土壤后都会转化为铵态氮或硝态氮。铵离子能被土壤胶体吸附,造成损失的主要是氨的挥发;硝酸根离子则不被土壤胶体吸附,溶于水随土壤溶液而移动流失;当土壤积水通气不良时,经反硝化细菌作用将NO3-还原为NO、N2O、N2,也散发于大气中。同时可能产生亚硝酸盐,这是一种致癌有毒物质,我国已规定腊肠等肉制品中亚硝酸盐的含量不准超过2 660 mg/kg,低的也达到474 mg/kg,因此施肥过多或施肥不当,不仅肥分损失利用率低,而且还会造成对空气、水源及食物的有害影响。
磷在土壤中易被土壤吸附与固定,移动性小。由于磷肥是以磷矿石为原料,磷矿除富含P2O5外,还含有其他数量不等的污染元素,其中主要是氟和镉的污染,对人体毒性大。随着磷肥使用量的增加,这些有毒伴随物质会在土壤中积累,一旦进入生物链,将对人的健康和养蚕业、畜禽业等的发展造成潜在的危害。人畜排泄物80%~90%的磷来自于粪便中,易溶于水,如管理不当也会造成磷的淋失和流失,使水体富营养化。
1.3 施肥造成水体富营养化
富营养化是指营养物质的富集过程及所引起的后果,它是一种自然过程,但人类活动会加速此过程,即人为富营养化。
引起富营养化起关键作用的元素是氮和磷,一般认为水体含磷量大于0.01 mg/L、含氮量大于0.3 mg/L,并产生恶臭、着色和死鱼现象,即是水体富营养作用产生的影响。水体中氮、磷等营养物质的来源有多种途径,如城市生活污水,施肥不当以及地表、地下径流水中沉积物的溶出等。但在以农为主的水域,施肥则是加速此过程的重要因素。如上所述,施肥对农田地表径流,以及营养物质通过土壤淋溶、渗漏进入地下径流等,都可以增加氮、磷养分的含量,使水体富营养化,导致水生植物如某些藻类急剧过量增长以及死亡以后腐烂分解,耗去水中溶解的氧,使水体脱氧,引起鱼、贝等动物大量窒息死亡,还使水体着色,并发生恶臭。如2001年及2002年5月初北海市涠洲岛附近海域连续2次出现赤潮,这些游走着的长约2 km、宽几十米甚至数百米的褐红色漂浮物,还不时飘来阵阵刺鼻的腥臭味。近10年来,我国其他海域也有赤潮频频发生,且有逐年上升的趋势。专家们一致认为是水中氮、磷等营养物质过多,造成水体富营养化引起的结果,渔民则对此谈虎色变。
以上说明化肥对土壤环境的污染,不仅难以保证食物供给的有效性和安全性,而且危及其他养殖业等,破坏资源环境的持续性,使资源难以合理和永续利用。
2 现有的土壤状况对合浦县生态农业发展的影响
合浦县现有土地面积23.8万hm2,耕地面积51 601 hm2,水田面积30 581 hm2,其中低产田面积21 009.15 hm2,占稻田面积68.7%。中低产田主要类型为咸酸田、黑泥田。由于其土壤养分含量低及土壤过酸等因素的影响,加上长期偏施化肥,不但阻碍了合浦县农业生产的高产稳产,一定程度上也制约了生态农业的发展。
2.1 单施化肥,污染生态环境
农业的增产与丰收离不开化肥,但大量的使用化肥造成了土壤板结,地力下降,农产品受到严重污染,质量逐步下降,果不香、菜不鲜是人所知。根据报道,我国占世界1/7的耕地使用了占世界25%的化肥,平均单位面积的化肥量最大,从1984—1994年10年间,我国的化肥量增加90.7%,而同期粮食仅增加9.7%。在合浦县,1980—1995年化肥用量增加2.5倍,1995—1999年化肥使用量增加0.49倍。发达国家的化肥利用率为40%,高的为60%。现在合浦县化肥利用率比20世纪80年代初相对下降6%~8%。2001年的化肥污染面积16 770 hm2,污染损失75.46万元。
2.2 中低产田的影响
一是咸酸型的土壤。它发育于海边滨海沉积母质围垦种植水稻而成,含硫化物质及0.1%以上的氯化钠盐分,面积305 hm2。该土壤受海水盐分及土体内红树林残体含硫化物的影响,又咸又酸,目前只有充足的淡水才能种水稻,当土壤受旱或夏秋季节刮大西南风时会反咸反酸,毒害禾苗甚至造成禾死。此类土壤目前由于水渠年久失修,淡水灌溉面积少,海水不断侵蚀,面积有扩大的趋势。二是黑泥型的土壤。面积9 129.6 hm2,其形成和分布与所处地形有密切关系,主要在台地的冲刷沟底、台地的面上“坡塘”的低洼二架田、台地的边缘与滨海河流沖积平原交界稍低处的地方。成土母质属浅海沉积物沼泽化,土壤呈黑色是它的主要特点。该类型土壤的有机质含量虽高,但已碳化无肥效,无肥田作用,其易冷易热,土质松散,缺乏团聚力,速效养分含量低,特别缺钾。
2.3 土壤养分缺乏的影响
一是有机质。合浦县水稻土有机质含量≤2.5%占88.5%,其中<1.5%的占57.5%;旱地<1.5%的占80.8%。二是速效磷。全县水稻土<10 mg/kg占46.2%,旱地<10 mg/kg占44%。三是速效钾。水稻土≤80 mg/kg占91.7%,其中≤40mg/kg占65.8%;旱地≤80 mg/kg占90.6%,其中<40 mg/kg占46.3%。
2.4 土壤过酸的影响
合浦县土壤酸性强,强酸至弱酸的面积占水稻面积86%,旱地占89.6%,这些土壤不利于微生物及养分的分解和积累。同时,酸性强土壤释放的铁、铝离子多,水溶性的磷在土壤中易被固定,形成难溶性的磷酸铁铝。还有活性的铝离子多,直接为害作物的生长。
2.5 作物吸收养分对土壤肥力的影响
众所周知,任何作物的生长都要从土壤中吸收养分,消耗大量的有机质、氮、磷、钾和微量元素。按双季稻每年生产稻谷12 t/hm2计,则水稻从土壤中吸收:纯氮192~300 kg/hm2、五氧化二磷96~144 kg/hm2、氧化钾252~360 kg/hm2、硅2 100~2 400 kg/hm2;玉米、果树及其他作物产量则吸收更多。还有作物根系分泌物使土壤养分进行氨化、氮化、硝化作用,大大加剧土壤养分的消耗和流失。
3 合理施肥促进合浦县生态农业可持续发展的对策
针对合浦县的土壤状况和养分含量低的实际,为把该县建设成为生态农业县,必须抓好土壤及土壤养分的循环,实践证明,应采取如下几项行之有效的措施。
3.1 进行合理轮作
根据地域的情况,可用春花生—晚水稻、黄豆—黄豆—水稻、水稻—水稻—冬菜等的轮作方式。主要采用春花生—晚水稻的水旱轮作方式,因为花生的根系入土较深,可吸收土壤深层的养分和水分;花生还有其共生固氮的作用能把空气中的游离氮素固定下来,增加土壤的氮素;另外花生—水稻水旱轮作,能改善土壤的结构,协调土壤中的水、肥、气、热,能恢复和提高土壤的肥力。在土壤质地较适中的水稻土(如黑泥田、砂泥田)、半旱型坡地,用春花生—晚水稻的轮作制度,不仅产量高产稳产,而且又能培肥地力。实践证明,在黑泥田进行春花生—晚水稻的轮作,虽然晚水稻产量比双季稻产量减产,但却净增产花生,效益十分可观;还有花生藤回田作肥料或作饲料,经多年轮作,土壤的有机质磷、氮、钾等养分含量也相应提高。
3.2 大量积制优质农家肥,增加单位面积的施肥量
农家肥含有丰富的有机物、矿物质、腐殖酸以及作物所需要的氮、磷、钾及微量元素,有“作物粮食仓库”之称。其在改良土壤,提高土壤肥力,使农作物稳产高产、改善产品品质起着主要作用。农家肥的肥效持久而稳定,有利于土壤团粒结构的形成,保持土壤疏松,增强土壤渗透和通气性,提高保水、保温性能,同时可以减少养分的流失,延长土壤的适耕期,又能避免局部土壤中的化肥浓度过大对作物的危害。多年的实践表明:增施优质农家肥15 t/hm2作基肥,当造增产稻谷1 203 kg/hm2,后效增产607.5 kg/hm2,有机质提高0.25%;蔬菜增施农家肥15 t/hm2,比单施化肥发根快1~2 d,产量增加10%~15%,抗病、抗虫、抗逆性增强,且食用性好。1988—1998年在石湾汉马村对潴育潮泥田进行土壤养分动态变化监测,结果每造增施农家肥15 t/hm2的基础上,土壤的有机质及各种养分也逐年提高。
3.3 大力推广秸秆还田,增加土壤的有机质来源
合浦县稻草、花生藤统称秸秆的资源十分丰富,进行秸秆还田,是一种方法简单、群众容易接受的增加土壤肥料资源的途径。还田的方式有机械收获直接还田,割短留长还田、推沤后还田、过腹还田等,应根据不同情况进行选定。试验结果表明:水稻田连续5年还田稻草6 t/hm2,土壤的有机质从2.87%提高到3.28%,土壤的容重降低0.02%~0.11%,还大大提高磷素、钾素的利用率,改变了土壤中的硅、锌含量不足,水稻的产量增加8%~10%;稻草3 t/hm2+过磷酸钙300 kg/hm2推沤后还田比单施化肥年增产稻谷1 063.5 kg/hm2,有机质比原来提高0.23%。
3.4 推广应用生物有机肥料
如今,生物肥料再度兴起,并呈现良好势头。发展生物有机肥,不仅能有效地利用有机肥资源,变废为宝,同时治理和避免了日益严重的环境污染,而且在保证作物增产的情况下,减少化肥使用量,降低肥料投入成本,这对生态农业建设无疑起到积极促进作用。
2001年参与推广应用绿源牌生物有机肥,该肥料是根据当地的土壤条件和各类作物生长养分的需要,利用有机、无机相结合进行配方,经过科学工艺生产的有机多元复合肥,含有氮、磷、钾20%,有机质≥20%,有益活菌数2 000万个/g,是一种符合农业生态发展的肥料。通过1年施用该肥料的效果来看,对各种作物均有增产效果,质量也有所上升。结果表现出:一是能提高作物的产量,促进农民增收。在水稻上使用增产5.6%~8.3%,蔬菜增产12.7%~18.6%,甘蔗增产15.9%~32.1%,香蕉增产12.4%,西红柿增产14%,木薯增收逾7 500元/hm2。二是改善作物的产品品质。三是提高化肥利用率。水稻施用生物有机肥料,氮素化肥利用率提高7个百分点,钾利用率提高12个百分点。
4 合理施肥原则
以上论述表明:既然施化肥是农业增产的有效措施,同时又要尽可能防止和减轻施肥对环境污染的负面影响,应促进生态农业建设[1,2]。从施肥的角度说,必须经济、高效,主要是控制施肥总量,有机肥和化肥配合施用[3,4,5,6]。因时、因作物、因土施肥,讲究施肥技术,改变化肥剂型,提高化肥利用率,做到合理施用。
4.1 控制施肥总量
按照报酬递减率原理,并不是施肥愈多愈高产,作物产量只在一定范围内随施肥量增加而增加,而且每增加一个单位的肥料量,增产量是递减的,无论是化肥还是有机肥都有一个适度的限度,统称为经济适宜产量适肥里量。超过此限度,不仅经济效益降低,有时还有可能造成减产。
如何确定最佳施肥量,是一个比较复杂的问题,因为其取决于作物种类、计划产量水平、土壤肥力状况、肥料种类及其利用率以及气候等多种因素。目前估算作物施肥量比较可行的方法是通过多年多点的田间试验,寻求在当地条件下土壤供肥能力以及肥料利用率等,然后根据计划产量所需要养分总量估算作物施肥总量。现在各地历年对主要作物都进行了大量的肥料田间试验,对施肥种类、数量均有一个范围,提出推荐施肥方案,可提供控制施肥总量的科学依据,同时要做到多种营养元素平衡,以充分发挥增产作用。
4.2 有机肥和化肥配合施用
有机肥肥效稳长,化肥见效快而不持久,二者配合施用都可以相互取长补短。适时供应作物养分,改善土壤保肥供肥性能,减少化肥流失,提高化肥利用率,增加化肥肥效。据浙江省对玉米的研究,厩肥和化肥配合施用与单施化肥相比,氮、磷、钾化肥的利用率平均分别提高11.0%、10.5%、12.2%,化肥利用率的提高即表明同样的肥料可多增加作物产量或相同的产量可减少化肥的用量。至于二者的比例以氮、磷、钾有效成分计,在中等肥力的土块上,以1∶1为好,或厩肥氮与化肥氮各丰产量最高。
4.3 因时因作物施肥
总的原则是要根据作物的营养特点、吸肥规律,尽可能做到按作物吸肥旺季,适时适量分次施用。因为作物在不同的生育期对营养元素的种类、数量和比例等都有不同要求。一般生长初期吸收养分的数量强度都较低,随着作物的生长,对养分的吸收逐渐增多,后期趋于减少,最后停止吸收。因此,一定要掌握在作物对养分吸收量最多,肥料作用最大,经济效益最高的时期,即营养最大效率期作重点施与。据广西区农业科学院研究:大多数作物多出现在生育中期,如水稻在分蘖期、玉米在喇叭口至抽雄初期吸肥占总量的50%~63%,甘蔗在伸长初期至伸长末期,吸肥占总量的1/2,此时期应及时供应,能保证肥料中的养分最大限度被作物吸收利用,以减少在土壤中的残留。不同作物对不同营养元素数量要求也不相同,如块根、块茎淀粉类作物以及香蕉等要求较多的钾,收获以叶片为主的蔬菜、桑树、茶树等作物则需要较多的氮,豆科作物由于有固氮菌共生,需要磷多氮较少,因此不同作物需要施肥的配比也不尽相同。总之要根据作物营养特性及吸肥规律适量施肥,有时还可以采取测土和作物营养诊断等方法帮助指导施肥,保证全生育期能及时满足对养分的需要又不过量。同时要注意深施覆土,避免肥分挥发、流失。如氮肥深施,据多年多点比较,利用率平均可提高10%~30%。
4.4 因土施肥,选择适宜的化肥型
要提高化肥利用率,还必须因土选择化肥品种。比如水田选用铵态氮肥、旱地选用硝态氮和铵态氮肥均可;磷肥必须选在供磷水平低的土壤上,一般速效磷含量在5 mg/kg以下,增产特别明显。而且要根据土壤酸碱性选择不同磷肥品种,如酸性土(pH值5.5以下)可选用钙镁磷肥,pH值在6.5以上的土壤可选用过磷酸钙及重过磷酸钙为好。同时积极研制推广使用缓效肥料,如各种脲醛类肥料、包膜肥料均属于缓效氮肥。利用其在土壤中逐步释放养分的特点,既满足作物全期吸收又可减少氮素损失,又如增施消化抑制剂(又称氮肥增效剂),它与尿素、铵态氮混合施用能有效地抑制土壤中硝化细菌的活性,尤其能抑制其中亚硝酸细菌的活性,使这些氮肥较长时期保持NH4+的形态,供作物吸收,减少硝酸态氮的流失和反硝化脱氧。
5 结语
生态如生命。发展生态农业,不仅是我国农业和农村经济和社会发展的必然要求,而且是我国全面建设小康社会的现实选择和关键措施。运用生态系统中的生物共生和物质循环再生原理,加强生态农业建设,实现农业的可持续发展,实现经济、社会、生态三大效益的高度统一,有效地解决农业和农村经发展与生态环境保护之间的矛盾,已成为当前和今后一个时期十分紧迫的重要任务。作为农业行政主管部门,必须站在“三个代表”的高度,把发展生态农业作为当前及今后一个时期农业增效、农民增收、农村发展和全面建设小康社会的重要措施来抓,切实抓好,为人民造福。
参考文献
[1]北京土壤学会.土壤资源利用与科学施肥[M].北京:科学技术出版社,1991.
[2]陈彩贤.农业生态与环境保护[M].南宁:广西农业学校,1995.
[3]尹钧.农业生态基础[M].北京:经济科学出版社,1996.
[4]孙建,刘苗,李立军,等.不同施肥处理对土壤理化性质的影响[J].华北农学报,2010,25(4):221-225.
[5]朱霞,韩晓增,乔云发,等.长期施肥对不同热量带土壤供氮能力的影响[J].华北农学报,2009,24(5):174-178.
广西合浦 篇6
1 沼气建设中存在的新问题
1.1 村庄拆迁, 沼气建设受到影响
随着城镇化、道路交通等的发展, 合浦县至少有600座沼气池需要拆迁, 拆迁农户由原来的一家一户、独门独院变成由政府统一规划的住宅用地, 由于居住条件的改变, 部分农户没有多余用地建设新沼气池, 农村沼气建设受到影响。
1.2 农村外出人员多, 劳动力不足
现在合浦县农村有50%家庭的青壮年外出经商、务工, 留守在家的大多数是妇女、老人和小孩, 在劳动力不足、外出务工又能赚到钱的情况下, 一些家庭不愿建沼气池, 有沼气池的家庭由于劳动力不足, 沼气日常管理不到位, 也影响沼气池正常使用。
1.3 建池成本提高, 农户建设沼气池意愿降低
合浦县沼气池建设一般采用混凝土材料。近年来, 水泥、砂石等建筑材料和运输费用价格有所提升, 人工费用也在提高, 导致沼气池建设成本增加。合浦县几年前建设一座10m3沼气池的成本一般是1800~2100元, 现在是3000~3300元, 大大增加了建设成本。由于建池成本的增加, 虽然国家有部分补助资金, 但是农户建设沼气池的意愿降低了。
1.4 村级服务网点建设不完善, 病废池数量增多
目前合浦县已建成村级沼气网点68个, 但由于服务网点建设不完善、数量少、建设地点比较分散, 导致沼气池使用过程中出现问题不能得到及时解决, 再加上有的农户对沼气池缺乏日常管护知识, 使得病池废池数量增多。
1.5 大中型沼气工程迅速发展, 管理难度加大
大中型沼气工程在合浦县迅速发展, 目前全县已建设600m3以上大中型沼气工程5处, 100~200m3沼气池20座。水产畜牧局、扶贫办、教育局等部门都有沼气工程建设项目, 由于不能有效加强协作, 县能源办管理起来有种力不从心的感觉。此外, 有些养殖场建设一座或几座100~200m3的沼气池, 只供应养殖场本身使用, 造成资源的浪费。
2 推进农村沼气发展的措施
2.1 因地制宜, 大力推广多种沼气发展模式
要适应农业产业结构调整, 农村劳动力结构变化等农村发展的新形势, 做好调查研究, 因地制宜地选择推广适用的沼气发展模式。在农户原料不足或没有用地建沼气池的情况下, 可以采取下面几种方法获取沼气和优质沼肥:农户可以与相邻村庄的养殖场合作建设大中型沼气池, 养殖场通过收取一定的费用, 向农户供应沼气与沼肥, 实现企业农户双赢;可以以养殖农户为主体建设联户沼气池, 通过输气管道实现集中供气、统一管理;可以利用当地丰富的农作物秸秆建设大型秸秆沼气工程, 解决村民的生活用能。
2.2 加大宣传力度, 提高农民对沼气建设综合效益的认识
有的农户只知道沼气能煮饭、点灯, 忽略了沼气综合利用带来的可观的经济、生态和社会效益。因此, 我们要加大宣传力度, 培训农户掌握沼气的日常管理和综合利用知识, 调动农民参与沼气建设的积极性, 实现“要我建”到“我要建”的根本转变。另外, 积极争取上级项目资金发展沼气, 除国家资金外, 市、县资金配套要到位, 加大资金投入, 减轻农民负担。
2.3 完善村级服务网点建设, 加强后续管理服务
积极争取农村服务网点建设项目或鼓励扶持技术硬、能力强的技工建立沼气服务网点, 加快服务网点建设。不断完善村级服务网点建设, 向网点配备进出料运输车、安装和维修工具等设备, 加大网点建设投入。同时, 要加强网点技工的技能培训, 提高技工的服务水平。沼气池建设是前提, 管理是关键, 要做到建管并重, 切实加强后续管理服务, 保证用户安全、正常使用沼气。
2.4 加强部门协作, 大力发展大中型沼气工程
大中型沼气工程是一种较好的发展模式, 不仅解决了养殖场的环境污染问题, 而且解决了养殖场生产和生活用能, 还可以向周边农户输送生活用能和优质有机肥料。大中型沼气工程是一个系统工程, 各建设部门要加强协作, 要抓好施工方资质管理和实行公开招标制度, 要加强对备案单位和项目业主的监管, 以确保大中型沼气工程在合浦县健康持续发展。
参考文献
[1]刘清志, 邓鹏.中国农村沼气产业发展对策[J].中国石油大学学报, 2011 (02) .
广西合浦 篇7
1 进行大棚苦瓜秋延后栽培技术推广的重要性
1.1 满足当地人们的生活需求、倡导绿色环保苦瓜
大棚秋延后栽培技术是一种利用蔬菜的生理特点, 在气候转寒之前将蔬菜在大棚内进行种植, 以实现延长蔬菜的上市时间, 提升蔬菜的产量的一种种植技术。当前, 很多蔬菜都采用了这样的技术, 在提升蔬菜的产量同时, 保证冬季蔬菜的供应。当前, 在经济市场的大环境下, 应季蔬菜的价格不断降低, 利润也在慢慢下降, 而冬季的蔬菜市场则应当是当前蔬菜市场较为空白的地方[1]。
广西属于丘陵地带, 平坦的耕地很少, 而合浦县相对于广西来说, 属于少有的河流冲积平原地带, 它肩负着供给粮食和蔬菜的重要角色。就本文针对苦瓜的种植来说, 当前普遍的种植技术都是露天种植, 而合浦的气候决定着露天种植必然会有很多病虫害, 很多农民朋友为了保证种植的产量, 会喷施农药[2]。此外, 合浦县地处热带, 雨水较多, 所以喷施农药的频率也会较高。按照以往的露天种植, 不仅增加了农民朋友的工作量, 更提高了苦瓜农药残留的含量。所以, 在提倡绿色环保蔬菜的今天, 大棚种植苦瓜是必然趋势。
1.2 大力发展苦瓜, 将苦瓜运到北方市场, 开发更为广阔的市场。
北方市场的苦瓜普遍个小、味苦、肉质薄, 而合浦生产的苦瓜有它自己的特色, 既瓜肉厚、水分足、苦味轻、口感好, 与北方的苦瓜相比, 受众更广泛, 既销量更广。
合浦在石湾、石康、常乐等地都有大面积的豇豆种植历史, 种植出来的豇豆, 在满足当地需要之余, 都运往北方市场, 这给当地带来了巨大的经济效益。这个运输线路已经成熟。而豇豆不能一年四季都种, 且由于种植的面积不断增大, 导致市场趋于饱和, 价格下降, 农民朋友的收入也随之下降, 所以亟需另一种经济作物来填补空缺。而笔者认为, 当前比较合适的就是苦瓜。
但当前苦瓜供应的时节较为短暂, 所以通过当前的种植技术延长苦瓜的供应时节变得十分的重要。当前, 在传统的苦瓜种植无法供应的时节, 苦瓜有较为广阔的市场, 同时在这样的时节苦瓜的价格也相对较高, 苦瓜市场有巨大的市场潜力可以开发。合理开发这片市场可以为农户提供较为可观的经济利益, 推动当地农业的发展。合浦县应当抓住这次机会, 积极引进新型的技术, 将大棚苦瓜秋延后栽培作为农业发展的重点之一, 以新的栽培技术为突破口推动合浦县农业的发展。
2 合浦县大棚苦瓜种植现状
合浦县位于广西壮族自治区的南部, 临海地理位置较为优越。由于合浦县独特的地理位置和气候环境可以发展市场农业经济。合浦县沿海气候受季风的影响, 光照较为充足, 冬季的气温并不是很低, 适合在秋冬季进行蔬菜种植。
当前, 合浦县的苦瓜种植技术相对落后, 并没有进行相关的技术升级。苦瓜的种植技术过于传统, 造成当前合浦县的苦瓜种植行业并不景气, 苦瓜的产量少、苦瓜的质量不优。同时, 很多苦瓜种植户并没有进行相关的技术升级, 没有将苦瓜进行大棚种植, 这就造成了当前苦瓜的供应时节比较短, 并没有适应当前市场的需要。尤其是对于北方市场的忽视, 让合浦县的苦瓜销售市场变得狭窄。
大棚种植是当前较为成熟的种植技术, 而且成本也相对较低。普通的农户可以进行一定的投资, 进行相关的技术改造就可以进行大棚种植, 并在大棚技术的基础上进行秋延后栽培技术的相关拓展。但在技术层面, 当前合浦县并没有形成较为完善的技术体系, 技术的升级和输出相对困难。
而苦瓜的大棚秋延后栽培技术是一项具有广阔市场前景的技术, 可以适应当前的市场需要, 可以通过技术和农业生产等多个方面吸引社会资本, 帮助合浦县进行大棚苦瓜秋延后栽培技术的推广和技术升级。
3 大棚苦瓜秋延后栽培技术
大棚苦瓜种植是一项较为成熟的技术, 但秋延后栽培技术的技术含量比较高。合浦县还没有较为规范的实验型田地, 在实际的种植过程中, 要根据合浦县实际的种植情况进行相关的技术调整, 将大棚苦瓜秋延后栽培技术做到最细致。
3.1 种植前准备
苦瓜的种植与粮食种植不同, 与其他蔬菜种植也有略有不同。在大棚苦瓜种植领域要通过实际考察, 来确定相关的技术参数, 不断调整种植技术。大棚种植对各方面的要求比一般的蔬菜种植高, 在进行种植是要充分考虑苦瓜对环境的适应情况。
种植前首先要根据大棚可以达到的条件进行品种的选择, 结合合浦县的气候条件, 应当选择较为耐热生长期较为短的苦瓜品种。因为进行大棚苦瓜秋延后栽培, 要依据市场和行情的变化适时选择收获的时节, 选择收获期较短的苦瓜品种可以更好地选择收获的时机, 从而使苦瓜产业的经济效益最大化。
在苦瓜的种植前期除了要进行品种的选择, 还要进行相关的种植前的准备工作。首先, 要选择一个合适的田地, 田地要适合苦瓜的生长, 同时要有一定的保障措施适合搭建温室。种植的土地要事先进行翻耕处理, 在进行翻耕后对土地施以基肥。基肥的施用有严格的标准, 不可以太多, 既要防止基肥对苦瓜种子造成伤害, 又要保证前期苦瓜成长的养分供应。
种子的预处理也是十分重要的一步, 要用适当浓度的高锰酸钾对苦瓜种子进行消毒, 这样可以显著降低苦瓜在日后的生长过程中的发病率。播种要严格遵循相关的流程, 采用72孔标准穴盘播种, 每穴1粒种子, 且要平躺。在播种完成后覆基质, 同时浇水。浇水要透, 在浇水过后要及时用遮阳网覆盖, 做好防护措施。
3.2 苗期管理
大棚的苦瓜种植作重要的控制条件之一便是温度的控制。温度控制是整个大棚苦瓜秋延后种植技术的关键, 大棚的温度控制直接关系到苦瓜的生长状况。要结合合浦县当时的气候和温度条件适当的调整大棚的温度, 这样可以对苦瓜的生长状况做到更好的控制。
在出苗前要将白天的温度控制在30~33 ℃, 在大部分种子破土后要将遮阳网揭去。在种子破土后的一段时间里, 白天要保持较高的温度, 一般白天的温度控制在25~30 ℃, 在夜间要进行适当的降温, 可以利用通风的方式进行降温。
在苦瓜生长的苗期要注意肥水的控制, 尤其是水。在苦瓜的苗期如果浇水过多, 会造成苦瓜苗的徒长, 造成养料的浪费影响苦瓜接下来的生长, 从而影响苦瓜的产量。要加强田间的巡查, 观察苦瓜苗的长势, 依据苦瓜苗的长势合理的控制浇水。而在苗期, 苦瓜生长的养料大多是来自雨基肥的, 所以在苗期不必进行追肥。
在苗期之后要进行定植的工作, 将长势较好的苦瓜苗进行保留, 长势不好的苦瓜苗进行清除。适当追肥的同时, 可以适当增加定植的深度, 为苦瓜苗提供更好的生长空间。
3.3 田间管理
大棚苦瓜的田间管理是在定植以后进行的, 包括温度控制、肥水管理、病虫害防治。
温度的控制方面是通过遮阳网和通风来控制的, 简单来说通过这样网可以控制苦瓜苗的光照时间, 通过通风的方式降低大棚的温度。一般在定植结束3~5 d的时间里, 要加大大棚的通风量, 降低温度的同时为苦瓜的生长提供充足的氧气。
定植过后要浇定根水, 可以采用滴灌的方式先为田地浇水1~2 h, 在定植结束后3 d对田地进行一次灌溉, 灌溉的原则是浇透。为苦瓜的成长提供充足的水分。苦瓜的生长要求田地微湿, 所以要时不时地进行小灌, 勤浇水。要依据苦瓜实际的生长状况适当追肥, 但追肥一定要控制量, 以免对苦瓜的正常生长造成影响。
苦瓜的病虫害防治比较的复杂, 由于是大棚种植, 同时又是秋延后种植, 从虫害的防治方面看, 压力不大。当前情况下是要结合合浦县实际的气候条件, 对病虫进行相关的防治。在合浦县主要的病害有猝倒病、白粉病和病毒病, 虫害主要有斜纹夜蛾、瓜绢螟、蓟马、蛴螬、地老虎、螨虫和蚜虫。一般可以用阿米西达 (嘧菌酯) 1 000~1 500倍液、哒灵·炔特1 000倍液、高美施1 000倍液, 5~7 d/次, 叶面喷雾, 交替使用达到防治的效果。
4 结语
合浦县应当抓住当前的机遇, 对大棚苦瓜秋延后技术进行推广。提升苦瓜的产量和质量, 最重要的是要延长苦瓜的供应时节, 顺应市场的需要, 使苦瓜农业生产的经济价值最大化, 推动我县农业的转型和发展。
摘要：苦瓜是一种广受大众喜爱的蔬菜, 苦瓜的大棚栽培技术也在日益成熟。立足当前大棚苦瓜秋延后栽培的现状, 结合合浦县额的生产情况, 对大棚苦瓜秋延后栽培技术进行探究。
关键词：大棚苦瓜,秋延后栽培技术,广西合浦县
参考文献
[1]赵建锋, 王伟中, 孙玉东, 等.淮安地区苦瓜大棚秋延后高产栽培技术[J].长江蔬菜, 2013 (8) :8.
广西合浦 篇8
合浦珠母贝 (Pinctada fucata) 是中国人工培育海水珍珠的最主要珍珠贝, 其所产珍珠量占整个海水珍珠产量的95%以上, 具有重要的生产价值。当前国内尚未见关于合浦珠母贝基因表达定量PCR分析内参基因筛选的相关报道。为此, 笔者研究选择合浦珠母贝18S rRNA、GAPDH、β-actin等3个常见的管家基因, 对其作为内参基因的效应进行检测和比较, 为后续q PCR最适内参基因的选择提供指导。
1 材料与方法
1.1 样品采集及处理
合浦珠母贝样品采集于深圳市大亚湾海区养殖群体, 由所在课题组进行常规养殖。试验共分为3个组:1) 组织分布组 (包括精巢、卵巢、外套膜、闭壳肌、鳃、消化腺、心脏) ;2) 性腺发育组 (包括休止期、增殖期、生长期、成熟期、排放期;部分样品固定于Bouin's液, 4℃保存用于常规组织学切片鉴定性腺所属时期) ;3) 胚胎发育组 (包括受精卵、2~4细胞期、32细胞期、囊胚期、担轮幼虫期、D型幼虫期、壳顶幼虫期) 。用于RNA提取的样品经液氮速冻并转移至-80℃保存。此过程所有用具均由DEPC处理或者180℃烘箱烘烤6h。
1.2 主要试验试剂及仪器
RNA提取试剂盒E.Z.N.A Mollusc RNA Kit购自OMEGA公司, DNase I和DNase I buffer均购自Fermentas公司, 反转录试剂盒Rever Tra Ace q PCR RT Kit SYBR Green Realtime PCR Master Mix购自TOYOBO公司。荧光定量PCR仪 (Roche Light Cycler 480) , 高速冷冻离心机 (Eppendorf 5810R) , 分光光度计 (Quawell Q5000) 。
1.3 方法
1.3.1 引物设计与合成
根据Gen Bank中合浦珠母贝的18S rRNA、GAPDH、β-actin、EF-1α基因的mRNA序列设计引物, 其中GAPDH合成2对引物。为确保荧光染料同PCR产物的结合, 所选序列均为线性mRNA序列, 引物的扩增长度在93~152 bp之间。所有引物均由华大基因生物工程有限公司合成, Nuclease-free Water溶解引物, 置于-20℃保存备用。
1.3.2 总RNA提取
每个样品取约100 mg, 按照OMEGA Mollusc RNA Kit说明书分别提取总RNA, Nuclease-Free Water溶解总RNA, 通过1.2%的琼脂糖凝胶电泳和分光光度计检测总RNA的质量和浓度。
1.3.3 c DNA合成
每个样品的总RNA分别取1μg, DNA酶Ⅰ (RNase-free DNaseⅠ, 美国Fermentas出品) 37℃处理30 min, 以去除基因组DNA的污染, 各加入1μL 10 mmol·L-1EDTA, 振荡混匀后, 65℃10 min以灭活DNA酶Ⅰ;参照ReverTra Ace反转录试剂盒 (日本TOYOBO出品) 说明书合成第一链c DNA。反应体系为10μL, 反应程序为37℃15 min, 98℃5 min, 4℃保存, 置-20℃备用。
1.3.4 PCR片段序列分析
将上述引物扩增得到的PCR产物进行亚克隆, 送华大基因公司测序, 并用DNAstar 5.0进行序列分析。
1.3.5 荧光定量PCR标准曲线的绘制和扩增效率分析
利用c DNA第一链为模板, 依次进行梯度稀释, 共设5个试验梯度, 每个梯度稀释10倍, 即c DNA初始模板浓度分别为100、10-1、10-2、10-3和10-4。分别进行荧光定量PCR, 根据定量结果以c DNA初始模板的log值为横坐标, 测得的Ct值为纵坐标, 绘制标准曲线, 计算其扩增效率。
1.3.6 荧光定量PCR
荧光定量PCR反应在Roche Light Cycler 480 real-time PCR system进行。参照SYBRGreen Real time PCR Master Mix (日本TOYOBO出品) 试剂盒说明书准备反应体系为SYBR Green mix5μL、上下游引物各0.2μL (10pmol·μL-1) 、反应模板0.5μL和Nuclease-free Water 4.1μL, 经试验摸索得到优化的PCR反应条件为94℃1 min;40个循环, 94℃15 s, 55℃15s, 72℃1 min;80~85℃ (收集荧光, 不同基因有所不同) , 反应完成后进行溶解曲线分析, 以确定PCR产物的质量和结果的可信度。组织样品和性腺发育样品各设3个生物学重复, 每个q PCR反应设3个上样重复。
1.3.7 数据分析和处理
数据由罗氏lightcycler-480-Software 1.5导出至Excel 2007和SPSS19.0, 利用Best Keeper、ge Norm和Norm Finder软件对各候选内参基因的表达稳定性进行分析。Best Keeper软件分析是基于Ct值, 并通过标准变异系数 (SD) 和变异相关系数 (CV) 来判断内参基因的稳定性, SD、CV值越小, 则该内参基因表达越稳定[11,20];VANDESOMPELE等[9]编写的ge Norm程序是根据M值 (某一个内参基因与其他所选内参基因表达水平的两两比值经对数变换, 计算其平均标准差, 作为基因表达稳定度的平均值[21]) 对选择的内参基因稳定性进行排序, 从而找出合适的内参基因。M值越小则说明该内参基因越稳定;NormFinder是ANDERSEN等[10]研发的另一种用于选择合适内参基因的程序, 原理是通过程序运行生成基因表达的稳定值, 稳定值越低则表明内参基因表达越稳定。
2 结果
2.1 内参基因的选择
根据文献记载及Gen Bank上已知的序列信息, 笔者研究筛选了4个功能不同的常用管家基因作为候选基因。利用Primer Premier 5.0和Oligo 6.0软件, 设计荧光定量PCR引物并进行检测, 其中GAPDH设计了2对引物。PCR扩增产物经测序均与目标序列100%一致。普通RT-PCR电泳检测均为单一条带 (图1) 。采用10倍梯度稀释后构建4个基因的标准曲线, PCR扩增效率和R2值见表1。PCR扩增效率显示, 4个看家基因的扩增效率在0.905~0.960, R2值均在0.99以上, 说明标准曲线的线性关系很好。而由EF-1α和GAPDH2的溶解曲线图 (图2) 看到2对引物得到的溶解曲线不是单峰, 说明这2对引物的反应特异性不高, 或者是引物和模板的匹配程度不高, 舍弃EF-1α和GAP-DH2, 由于马氏珠母贝中目前得到的EF-1α序列不完整 (AB205403.1) , 对引物设计有所限制, 因此对其他3个基因进行后续试验。
2.2 内参基因表达的稳定性分析
2.2.1 Ct值比较
一个基因的表达丰度越低, Ct值越大, 反之则越小。3个候选内参基因在各组别的Ct值如图3, 表明在不同组织及不同发育阶段, 每个内参基因的表达水平都有一定的变化。其中GAPDH在3个组别中平均值分别为30.92±3.85、23.06±2.17和24.88±2.84。Ct值所在范围均较大, 基因表达丰度低。18S在性腺发育组和胚胎发育组中的表达丰度最高, 均值为16.55±1.64和19.01±1.87;β-actin在组织分布组表达丰度最高, 均值分别为23.65±1.42。
2.2.2 Best Keeper软件分析
从表2数据可以看出, 在合浦珠母贝的不同组织中β-actin最稳定, 其次为18S rRNA和GAPDH;在性腺发育的不同时期, 18S rRNA表达最稳定, 其次为β-actin和GAPDH;在胚胎发育的不同时期, β-actin表达最稳定, 其次为18S rRNA和GAPDH。
2.2.3 ge Norm软件分析
将样本的相对定量值分别输入ge Norm软件, 根据软件分析结果, 18S rRNA、β-actin和GAPDH在合浦珠母贝外套膜、闭壳肌、性腺、鳃等组织中, 平均表达稳定度值M分别是3.449、3.425和5.236, 由高到低依次排序为β-actin>18S rRNA>GAPDH (图4-a) ;在合浦珠母贝雌、雄性腺发育的增殖期、生长期、成熟期和排放期, 18S rRNA、β-actin和GAPDH平均表达稳定度M分别是1.665、2.024和2.092, 表达稳定度由高到低依次排序为18S rRNA>β-actin>GAPDH (图4-b) ;18 S rRNA、β-actin和GAPDH在合浦珠母贝胚胎发育的不同时期如2~4细胞期、囊胚期、D型幼虫期等, 平均表达稳定度M分别是2.443、2.253和2.547, 表达稳定度由高到低依次排序为β-actin>18S rRNA>GAPDH (图4-c) 。
2.2.4 Norm Finder软件分析
软件分析结果与Best Keeper和Ge Norm软件分析结果基本一致。在不同组织中表达稳定性从高到低依次为β-actin>18S>GAPDH, 性腺发育不同阶段3个基因的表达稳定性从高到低依次为18S>β-actin>GAPDH, 胚胎发育的不同阶段3个基因的表达稳定性从高到低依次为β-actin>18S>GAPDH (图5-a) 。3个组别3个基因表达稳定值的均值分别为2.954±1.421, 1.219±0.728和1.176±0.486 (图5-b) 。
3 讨论
在实时荧光定量PCR中, 内参基因被用来作为数据标准化的对照, 以校正作为模板的c DNA所存在的数量差异[22]。近年来, 关于不同物种内参基因的选择已有很多报道[23,24]。当前, 在合浦珠母贝中使用较多的内参基因有GAPDH、18S rRNA、β-actin和EF-1α[25,26,27]等。笔者研究根据文献选择了这4个功能不同的管家基因 (其中EF-1α由于引物设计的原因没有后续研究) , 对其在合浦珠母贝不同组织中、性腺发育不同时期、胚胎发育不同阶段等样品中的表达差异进行探讨, 并分别采用Best Keeper, ge Norm、Norm Finder 3种算法对基因稳定性进行计算, 以筛选表达相对稳定的基因作为内参基因。为了尽可能减少试验误差, 样品制备的整个过程都严格按照试验要求进行, 总RNA制备、逆转录、荧光定量PCR均采用相同方法在同一试验仪器进行。荧光定量PCR使用SYBR Green DNA结合染料, 与其他荧光染料如Taqman、Beacon等相比, 具有试验设计简单, 不需合成特异探针, 通用型好, 成本低等优点, 并且能够通过溶解曲线分析检验扩增反应的特异性。ge Norm、Norm Finder和Best Keeper是目前内参基因筛选常用的几种工具。ge Norm通过基因配对的形式筛选最不稳定的基因, 将其余基因重新配对并筛选出适当数目合适的内参基因。ge Norm可以对任意数量管家基因进行筛选, 选出2个以上作为内参基因, 更有助于校正系统偏差。Norm Finder则是基于方差分析对内参基因的稳定性进行评价, 产生基因表达稳定值, 然后按照稳定值大小排序, 表达稳定值最小的基因最稳定, 缺点是只能选择一个合适的内参基因作为参照。Best Keeper是直接根据Ct值进行计算, 不但可以分析内参基因的稳定性, 还可以用于比较目标基因的表达水平。缺点是只能计算一次配对相关系数, 当排除某个基因后该程序不能重新计算[28]。因此笔者研究使用这3种软件进行分析, 有助于相互验证以确定试验结果的准确性。由数据可知, 3种内参基因筛选工具分析得出的结果一致, 即表达较为稳定的2个内参基因是18S rRNA和β-actin。其中在不同组织及胚胎发育不同时期β-actin表达最稳定, 而在性腺发育不同时期18S rRNA表达最稳定。YOKO等[27]对于合浦珠母贝几个内参基因的研究中18S为最稳定表达的基因, 与笔者的结论略有不同。YOKO等仅选择胚胎发育不同时间点及稚贝样品, 用3个内参基因的相对表达量分析其稳定性, 研究方法较单一且不够深入。而笔者研究中不仅比较了Ct值大小, 还利用几种专业的内参基因稳定性分析软件。另外所取样品时间点与之不同, 可能造成数据结论不同。虽然所选内参基因相同, 但是设计引物序列不同, 扩增所得片段位置不同, 因此扩增效率及Ct值变化均与笔者所用引物不同, 也会造成结论不同。
GAPDH在3个试验组均表现为稳定性最差, 在3个组别中GAPDH的表达水平差别最大 (表2) 。Ct值分别在23.51~39.29, 17.02~28.67和20.59~30.32变化。可见GAPDH并不适合广泛作为合浦珠母贝定量表达的内参基因。GAPDH是糖酵解和糖异生过程的关键酶, 参与糖酵解过程中第一个ATP形成, 在不同功能的细胞类型中表达差异较大。PEREZ等[29]和BUSTIN[30]发现GAPDH mRNA在不同癌组织 (包括肺癌、乳腺癌、肾细胞癌等) 中的表达比正常组织高, 在低氧、胰岛素、表皮生长因子、激素等因子的刺激下, 培养细胞的GAPDH mRNA表达水平也各不相同。另外笔者研究中GAPDH基因设计了2对引物, 第二对引物的溶解曲线不是单峰, 不符合实时定量PCR的要求, 推测该引物扩增的片段内重复序列较多或者引物与模板容易产生错配, 导致产物不单一。说明在实时定量PCR中引物的设计和验证至关重要。