葡萄糖含量测定（共12篇）
葡萄糖含量测定 篇1
摘要：目的:应用血糖仪法快速测定白米、糙米、红米、黑米中的葡萄糖含量。方法:各类米加水匀浆后, 离心收集上清液, 用血糖仪法测四种米中葡萄糖的含量。结果:白米组葡萄糖含量为 (1.45±0.08) mg/g, 糙米组葡萄糖含量为 (2.33±0.07) mg/g, 红米组葡萄糖含量为 (2.45±0.11) mg/g, 黑米组葡萄糖含量为 (6.19±0.15) mg/g。结论:四种米中葡萄糖含量差异显著, 黑米中最高, 糙米和红米葡萄糖含量相近, 白米中最低。
关键词：白米,糙米,红米,黑米,葡萄糖,血糖仪
葡萄糖是生命活动中不可缺少的物质, 为机体所需能量的主要来源, 并具有促进肝脏的解毒功能, 对肝脏有保护作用。在消化道中, 葡萄糖比其他单糖都容易被吸收。适量补充葡萄糖可以为大脑提供营养, 预防由于工作压力导致的脑力透支[1]。稻米为人体热量与矿质元素等营养素的主要来源之一。中国是世界水稻生产和消费大国, 近2/3人口以大米为主粮, 因而大米的营养价值与人民健康关系极大[2]。糙米具有抗氧化、降血压、降血糖、降血脂、预防肥胖等功能[3]。中医认为红米能滋阴补肾、健脾开胃, 是延缓衰老的保健食品[4]。黑米中蛋白质、必需氨基酸含量比普通白米高, 且富含铁、锰、锌、铜、钙、镁等矿质营养。黑米花色苷也具有多种药理学作用[5]。以往已有很多关于米类中营养成分的相关研究, 然而关于米类中葡萄糖含量的检测在国内尚未见报道。测定葡萄糖通常采用化学滴定法、高效液相色谱法、酶法等, 但其所用仪器和试剂较贵, 操作较繁琐, 不能快速测定。血糖仪法是一种能快速、简便地测定血液中葡萄糖含量的方法, 具有操作简单, 样品用量极少, 测定时间短等优点[2]。本研究采用血糖仪法检测米类中的葡萄糖含量, 有助于完善米类的营养谱, 为米类中葡萄糖的检测提供参考。
一、材料与方法
(一) 材料与仪器
白米、糙米、红米、黑米 (广东省东莞市大岭山天和贸易) 。JYL-CO51型料理机 (九阳股份有限公司) ;T6-16A-WS离心机 (广州湘仪机电设备有限公司) ;血糖仪、试纸条 (长沙三诺生物传感股份有限公司) ;电子天平 (福州科迪电子技术有限公司) 。
(二) 方法
取白米、糙米、红米及黑米各50g, 加蒸馏水至250m L, 蒸馏水浸泡2小时, 用料理机搅拌成浆液, 用料理机滤网过滤后, 取1m L滤液加入离心管中, 15000r/min离心30min, 离心后吸取10μL上清液滴加至试纸条上, 按照血糖仪说明书依次测量血糖含量。平行试验三次。
(三) 统计分析
试验数据用— (—数) ±S表示, 采用Excel建立数据库, 并用SPSS17.0数据处理, 两组间比较采用t检验。
二、结果
黑米中葡萄糖含量最高, 为 (6.19±0.15) mg/g, 高于红米、糙米、白米 (P<0.05) 。白米中葡萄糖含量最低, 为 (1.45±0.08) mg/g, 低于黑米、红米、糙米 (P<0.05) 。糙米中葡萄糖含量 (2.33±0.07) mg/g与红米中葡萄糖含量 (2.45±0.11) mg/g相近, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 但均低于黑米 (P<0.05) , 而高于白米 (P<0.05) 。
三、讨论
实验结果表明, 白米, 糙米, 红米, 黑米中葡萄糖含量各不相同, 各组间相比, 葡萄糖含量为黑米>红米≈糙米>白米。相较面粉, 米中含糖量更低, 因此糖尿病患者和肥胖, 应尽量少食面类食物, 可以以大米为主食, 有助于缓解病情。根据以上各种米类含糖量的高低, 在日常生活中也可以制定合理饮食表, 同时搭配其他种类食物, 做到饮食平衡。血糖仪测定葡萄糖含量的原理是葡萄糖与含有葡糖糖酶和氰铁化物的试纸接触后产生一个小电流, 电流通过血糖仪测定, 并显示相应数值。使用血糖仪测定米中葡萄糖含量, 具有快速简便、操作简单、样品用量少的优点。随着人们越来越关注食品安全, 目前的食品检测未能满足人们的需求, 把快速发展的医学便捷检测技术应用于食品成分的检测, 有助于促进提高食品检测的发展与普及[6,7]。
参考文献
[1]徐锦滨, 李江滨, 陈佛兰等.GOD法测定鸡蛋, 鸭蛋及鹌鹑蛋中葡萄糖含量[J].现代农业科技, 2013.
[2]张甲生, 房林相.四化大米的营养成分[J].农业与技术, 2001.
[3]张守文, 陈殊贤.发芽糙米抗氧化性质的研究[J].农产品加工·学刊, 2011.
[4]齐海鸥, 王辛, 程国霞等.陕西洋县红米营养成分分析[J].营养学报, 2013.
[5]权美平, 王现.黑米营养成分及药用生理作用的研究现状[J].价值工程, 2011.
[6]陈佛兰, 李江滨, 徐锦滨.血糖仪法快速测定禽蛋中的葡萄糖[J].科技风, 2013.
[7]谭荧飞, 蔡梦珊, 刘婷婷等.利用便携式血糖仪测定酱油中的葡萄糖[J].食品科技, 2013.
葡萄糖含量测定 篇2
试剂：硫代硫酸钠10% 二甲酚橙0.5% 盐酸1+1 氨水1+1
缓冲液—400g六次甲基四胺加水1000ml加100ml盐酸摇匀。
称取0.1—0.5g试样于250ml烧杯中，用水润湿，加10—15ml盐酸加热溶解完全，加3—5ml硝酸蒸发至试样分解完全，加入5ml(1+1)硫酸，蒸发至冒硫酸浓白烟并近干，取下冷却，加水冲洗杯壁至40ml左右(如铁含量低应加补硫酸铁溶液使铁含量在20—30mg左右)，加3—4g氯化铵加热使氯化铵溶解，加氟化钠0.1g加热溶解取下冷却，加25ml氨水加热加5滴过氧化氢加热至过氧化氢气泡消失，取下冷却。
面食制品中铝含量测定方法探讨 篇3
关键词：面食制品；铝；测定方法；铬天青S分光光度法
中图分类号：R155.5 文献标识码：A 文章编号：1671-864X（2014）08-0172-02
铝是人们熟悉的金属元素，是地壳中仅次于氧和硅的第三丰量元素，在环境中广泛存在。已有大量研究显示，铝是一种对人体健康有害的元素，可在人体内蓄积并产生慢性毒性；过量的铝摄入可干扰大脑的记忆功能，造成老年痴呆；铝直接作用于骨组织，引起骨病理改变；铝可引起红细胞低色素性贫血，影响多种酶系统的活性，对造血系统产生毒性；铝对免疫功能有明显抑制作用；铝还具有胚胎毒性和致畸性等。世界卫生组织和联合国粮农组织（WHO/FAO）已于1989年正式将铝确定为食品污染物加以控制[1]，提出人体铝的暂定摄入量标准为7 mg/kg B.W，我国也于1994年提出了面制食品中铝的限量卫生标准（≤100 mg/kg） [2]。因此，研究铝的测定方法，了解各种物质中的铝含量，对预防铝损害、提高人体健康水平有着十分重要意义。铝的检测方法比较多，主要有电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP）及ICP质谱法（ICP-MS）、石墨炉原子吸收光度法、荧光分析法以及极谱法。ICP及ICPMS法灵敏、准确、快速，精密度好、检出限低、干扰小，且能同时测定多个元素，是权威性很高的分析方法，但由于仪器尚未普及，应用受限。GB/T5009.182-2003《面食制品中铝的测定》是样品先经硝酸-高氯酸消解，然后以铬天青S比色法测定，该法的缺点是消解液中残留的高氯酸对显色影响很大，从面直接影响没定结果的准确性[3]。因此，我们采用干法消化样品，以铬天青S及溴化十六烷基三甲胺在抗坏血酸作用下与三价铝离子在乙酸-乙酸钠缓冲介质中反应形成蓝色三元络合物，于一定波长测定吸光度并与标准比较定量，此方法能简单、准确地测定食品中铝的残留量。
一、材料与方法
1.仪器和试剂。
紫外分光光度计：北京普析通用 TU1810PC；
微波消解仪；意大利仪器有限公司 ETH0S1；
GSB（G 62006-90）铝标准贮备液：1000μg/mL，国家标准物质研究中心；
铝标准使用液：吸取1mL铝标准贮备液，置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，再从中吸取5.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。该溶液每毫升相当于1μg铝。
乙酸-乙酸钠溶液：称取34g乙酸钠溶于450mL水中，加2.6mL冰乙酸，调PH至5.5，用水稀释至500mL。
0.5g/L铬天青S溶液：称取50mg铬天青S，用水溶解并稀释至100mL。
0.2g/L溴化十六烷基三甲胺溶液：称取20mg溴化十六烷基三甲胺，用水溶解并稀释至100mL。必要时加热助溶。
10g/L抗坏血酸溶液：称取1.0g抗坏血酸，用水溶解并定容至100mL。临用时现配。
1%（体积分数）硫酸溶液。
2%（体积分数）盐酸。
2.试验方法。
（1）样品前处理。
将试样（不包括夹心、夹馅部分）粉碎均匀，取约30g置于85℃烘箱中干燥4h，备用，按下面3种方法处理。
①湿法水解：称取样品1.000g～2.000g，置于100mL 锥形瓶中，加数粒
玻璃珠，加10mL～15mL硝酸-高氯酸（5+1）混合液，盖好玻片盖，放置过夜，置电热板上缓缓加热至消化液无色透明，并出现大量高氯酸烟雾，取下锥形瓶，加入0.5mL 硫酸，不加玻片盖，再置电热板上适当升高温度加热除去高氯酸，加10mL ～15mL水，加热至沸，取下放冷后用水定容至50mL，如果试样稀释倍数不同，应保证试样溶液中含1%硫酸。同时做试剂空白。②干法消解：称取样品2.000g～3.000g置瓷坩埚中，先在电炉上小火炭化至无烟，移和马弗炉中，高温525℃约4h完全灰化，取出放至室温，用2%盐酸溶解，转移至25mL容量瓶并用2%盐酸冲洗坩埚并定容。③微波消解：称取样品0.500g～1.000g，加硝酸8mL硝酸，2mL过氧化氢，微波加热消解至无色透明，于电热板上赶酸，加硫酸0.5mL尽可能除去高氯酸，定容至50mL。同时做试剂空白。
（2）标准曲线绘制。
吸取铝标准使用液0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0mL（相当于含铝0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0μg）别置于25mL比色管中，依次向各管中加入1mL1%硫酸溶液（因干法消解的试样未加硫酸，所以另取一组比色管，除不加1%硫酸，其他步骤相同）。吸取1.0mL消化好的试样液，置于25mL比色管中。向标准管、试样管、试剂空白管中加入8.0mL乙酸-乙酸钠缓冲液，1mL10g/L抗坏血酸溶液，混匀，加2.0mL0.2g/L溴化十六烷基三甲胺溶液，混匀，再加2.0mL0.5g/L铬天青S溶液，摇匀后，用水稀释至刻度。室温放置20min后，用1cm比色皿，于分光光度计上，以零管调零点，于640nm波长处测其吸光度，绘制标准曲线比较定量。
（3）结果计算。
式中：
X---试样中铝的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
A---测定用试样液中铝的质量，单位为微克（μg）；
m--试样质量，单位为克（g）；
V--试样消化液总体积，单位为毫升（mL）；
V--测定用试样消化液体积，单位为毫升（mL）。
二、结果
1.样品前处理方法的影响。
采用3种前处理方法测定，测定结果表明：湿法消解不完全残留的酸会影响测定结果，回收率偏低；微波消解取样量太少误差大，结果不平行；干法消化避免了PH值和残留高氯酸对显色反应的影响，并且降低了试剂的消耗，节约检测成本，并且解决了样品中油脂含量高、湿法消化样品时油脂难消化的问题。同时，不使用高氯酸，减少对实验操作人员可能产生的人体危害和环境污染。灰化-分光光光度法能快速准确地检测食品中的铝含量，该方法操作简单，对实验室仪器设备要求不高，且干扰小，准确度高、工作周期短，适合大批食品中铝的快速检测。结果见表1-2。
2.不同酸的影响。
由于溶液酸度（PH值）对显色反应有很大的影响，酸度的不一致会影响测定结果的准确性。试验中，分别采用盐酸、硝酸、硫酸不同酸溶液作为背景，试验表明：同样浓度的酸，硝酸的干扰最在，所以用湿法消解样品时硝酸赶不尽，就无法准确测定铝的含量。
3.掩蔽剂的影响。
加入10g/L的抗坏血酸1.0mL可消除铜、铁、钙、镁等元素的干扰。抗坏血酸需现配现用，加入体积要准确。
4.加标回收率。
准确称取已知含量的样品6份，按1.2.1中干法处理样品，按1.2.2测定，计算回收率。结果平均回收率为98.05%，RSD1.12%（见表3）
三、结论
采用干法灰化取代湿法水解，避免了GB/T5009.182-2003的方法中PH值和残留高氯酸对显色反应的影响，并且降低了试剂的消耗，节约检测成本[5]。干法灰化-分光光度法能快速准确地检测食品中铝含量，该方法操作简单，对实验室仪器要求不高，且干扰小、准确度高、工作周期短，适合大批食品中铝的快速检测。
参考文献：
[1]王林，苏德昭，王永芳，等.中国居民每日摄铝量及面制食品中铝限量卫生标准研究[J].中国食品卫生杂志，1996， （02）：1～5。
[2]中华人民共和国标准GB15202-94 面食制品中铝限量卫生标准[S]北京：中国标准出版社 1997.114。
[3]钨化学分析方法 第11部分：铝量的测定 电感耦合等离子体原子发射光谱法。
[4]GB/T5009.182——2003食品卫生检验方法理化部分（二）[S].2004。
葡萄糖含量测定 篇4
1 材料与方法
1.1 试验材料
新鲜香菇、平菇、秀珍菇及金针菇 (广东省东莞市大岭山天和贸易) ;血糖仪、试纸条 (长沙三诺生物传感股份有限公司) ;T6-16A-WS离心机 (广州湘仪机电设备有限公司) ;JYL-CO51料理机 (九阳股份有限公司) 、电子天平 (福州科迪电子技术有限公司) 。
1.2 试验方法
取新鲜香菇、平菇、秀珍菇及金针菇各50克, 加蒸馏水至250m L, 蒸馏水浸泡2小时, 用料理机搅拌成浆液, 用料理机滤网过滤后, 取1m L滤液加入离心管中, 15000r/min离心30min, 离心后吸取10μL上清液滴加至试纸条上, 按照血糖仪说明书依次测量血糖含量。平行试验三次。
1.3 统计分析
试验数据用±S表示, 采用Excel建立数据库, 并用SPSS 17.0数据处理, 两组间比较采用t检验。
2 结果
香菇中葡萄糖含量最高, 为 (7.73±0.15) mg/g, 高于平菇、秀珍菇、金针菇 (P<0.05) 。金针菇中葡萄糖含量最低, 为 (2.14±0.08) mg/g, 低于香菇、平菇、秀珍菇 (P<0.05) 。平菇中葡萄糖含量为 (3.64±0.09) mg/g, 低于香菇 (P<0.05) 而高于秀珍菇、金针菇 (P<0.05) 。秀珍菇中葡萄糖含量为 (2.91±0.16) mg/g, 低于香菇、平菇 (P<0.05) 而高于金针菇 (P<0.05) 。
3 讨论
结果表明, 葡萄糖在各组菇类中的分布存在显著差异。四种菇类间比较, 葡萄糖含量为香菇>平菇>秀珍菇>金针菇。本试验针对最常食用的四种菇类进行葡萄糖含量的测定, 完善了菇类营养膳食谱, 同时也为人们在日常生活中对菌菇类食物的摄入提供了参考。根据试验数据发现菇类中葡萄糖含量偏低, 适宜于糖尿病多发人群。血糖仪法是一种新颖、独特的测定葡萄糖含量的方法。血糖仪测定葡萄糖含量的原理是葡萄糖与含有葡糖糖酶和氰铁化物的试纸接触后产生一个小电流, 电流通过血糖仪测定, 并显示相应数值。与其它测葡萄糖含量的方法相比, 操作方便、快捷, 可以自行进行温度校正, 测量干扰少[3,4]。把快速发展的医学便捷检测技术应用于食品成分的检测, 有助于促进提高食品检测的发展与普及。
摘要：目的:应用血糖仪法测定香菇、平菇、秀珍菇及金针菇中的葡萄糖含量。方法:各类菇加水匀浆后, 离心收集上清液, 用血糖仪法对四种菇类中的葡萄糖进行定量测定。结果:香菇中的葡萄糖含量为 (7.73±0.15) mg/g、平菇中的葡萄糖含量为 (3.64±0.09) mg/g、秀珍菇中的葡萄糖含量为 (2.91±0.16) mg/g、金针菇中的葡萄糖含量为 (2.14±0.08) mg/g。结论:四种菇中葡萄糖含量差异显著, 香菇中最高, 金针菇中最低。
关键词：血糖仪,香菇,平菇,秀珍菇,金针菇,葡萄糖
参考文献
[1]王真, 刘一建.葡萄糖的临床新用途[J].医药导报, 2000, 19 (3) :277.
[2]况丹.七种食用茵营养成分分析比较[J].食用菌, 2011 (4) :57-59.
[3]陈佛兰, 李江滨, 徐锦滨.血糖仪法测定禽蛋中的葡萄糖[J].科技风, 2013 (12) .
四乙基铅含量测定方法研讨 篇5
四乙基铅含量测定方法研讨
摘要：利用原子吸收法测定样品中四乙基铅的`含量,并对准确度、回收率进行了实验.该法测量便捷,减少了测定过程中误差,节约了时间,提高了测量的准确性.作 者：陈勇 叶晓新 CHEN Yong YE Xiao-xin 作者单位：泰兴市环境监测站,江苏,泰兴,225400期 刊：环境科学导刊 Journal：ENVIRONMENTAL SCIENCE SURVEY年，卷(期)：2010,29(2)分类号：X83关键词：原子吸收 四乙基铅 测定
葡萄糖含量测定 篇6
借助“问题导学法”，让学生验证拉瓦锡的实验结果，分层有序开展实验，有效帮助学生理解实验原理，提高学生思维能力及解决问题能力。
[关键词]
氧气含量；问题导学；反思
一、引言
作为辅助学生建构化学知识重要手段的演示实验，在整个教学过程中具有重要意义。只有充分挖掘演示实验背后的潜在价值，才能有效提高课堂效率。
笔者在给学生演示《测定空气中氧气含量》（人教版九年级上册实验2-1）的过程中，采取的多是演示加讲解的常规方法，结果发现，学生能从该演示实验中建构起来的知识非常有限。在大量研究了前辈们的优秀教案之后，笔者尝试着在该演示实验中运用“问题导学法”，并在一定程度上获得了较好的教学感受。现将其整理成文，希望能与各位同行分享。
二、案例描述
在学生当堂阅读教材中实验内容后，展开下列课程学习：
环节一：借助简单实验现象，理解实验原理
教师展示一个立有一根香的培养皿，问：“如果往燃着的香上扣一支试管，能看到什么现象？”
学生很轻松地回答：“香会熄灭。”
“为什么呢？”
依然很轻松：“因为缺氧。”
教师往培养皿中注水，再问：“如果往燃着的香上扣一支试管，除了香会熄灭，我们还能看到什么现象呢？”
学生稍作思考后，回答：“水面会上升。”
“为什么呢？”
部分学生很肯定的口吻：“试管内氧气被消耗，气压降低了。”……通过进一步讨论，学生达成一致看法：水上升的体积约等于气体减少的体积。
教师板书：水上升的体积=气体减少的体积。
环节二：引入实验装置，准备演示实验
教师讲授：“为了更为精准地验证拉瓦锡的实验结果，教材为我们提供了实验2-1的一套装置。请大家结合我们刚刚总结的这个等量关系（指向黑板），先研究一下这套装置的工作原理。”
学生小组讨论后，请代表总结发言：“这套装置的工作原理，主要是通过红磷燃烧，消耗集气瓶中的氧气，然后通过吸入集气瓶中水的体积，来确定集气瓶中氧气的体积。”
环节三：“问题导学法”在该演示实验中的应用
教师：“既然大家已经了解了该装置的工作原理，在老师进行演示实验前，请大家再思考下列几个问题。”
投影显示：
①实验前是否需要检验装置气密性？若需要，该如何检验？
②用什么方法，可以将集气瓶中的空间均分成五等份？
③集气瓶中预留少量水，可能是做何用？
④我们如何选择耗氧剂？蜡烛、小动物等都能消耗氧气，他们可否用于该实验？为什么？
⑤教材为我们提供了红磷，你觉得红磷燃烧的产物应该是什么状态？试验中，它的用量有什么要求吗？
⑥如果让你进行实验演示，你的操作流程如何？
⑦如果实验成功，你可能观察到什么现象？
学生小组讨论后，请学生代表发言。教师适时提示、补充，最后总结：
①需要检查气密性，方法与实验1-7类似；
②将集气瓶灌满水后，均分其中的水，就可以达到均分集气瓶中空间的目的；
③预留的水可能是为了保护瓶底，也可能是为了吸收磷的燃烧产物；
④耗氧剂的选择原则是：不仅只能充分消耗氧气，还不能产生其他气体；依此原则，蜡烛和小动物都不能用于实验。并且不难推测，红磷燃烧的产物不会是气态；而且，为了将氧气完全消耗，试验中必须放置过量红磷；
⑤实验操作中，为了防止氮气受热逃逸，实验前必须夹紧止水夹；为了试验后集气瓶能将水顺利吸入，打开止水夹前，必须等集气瓶冷却，瓶中氮气压强下降；
⑥如果实验成功，将能看到进入集气瓶中的水的体积，约占集气瓶总体积的五分之一。
……
教师进行验证性演示实验。
……
三、案例分析
在以前的教学过程中，每次学到这部分内容，笔者主要都是边演示、边讲解。结果，学生表面上看积极性非常高，但其中只有少部分同学能较好理解掌握，多数同学都是上课时看热闹，下课了再背实验。这样的教学模式，不仅老师教起来很累，而且学生学得也太被动，教学效果很不理想。通过“问题导学法”的引入，这种状况几乎被完全打破。
首先，学生的学习不再被动。在这次试验过程中，课堂上没有了教师的权威性，而是通过合作对话来进行理性的分析。学生和教师之间不存在主体与主导的关系，而都是平等的合作者和分享者。在整个学习过程中，所有结论都是通过学生自己讨论分析得出，他们不仅可以清晰地记住实验的结论，还能较明晰地理解这个结论的来由，更重要的是，他们还同时学会了思考类似问题的方法。
例如，原来在学完本章内容后，当被问及：“为何木炭、硫等可燃物不适合用于本实验”时，学生总是很难答上来，因为在此前的学习中，并没有提及木炭和硫的燃烧。而通过本节课的讨论，学生已经知道：“选择耗氧剂的原则”，并且这个原则是他们通过讨论得出。那么，在以后的学习中就不难判断：反应后，有其他气体生成的碳和硫都不能直接用于本实验。甚至，在后来的学习过程中，他们还能判断：能与氮气反应的镁条，也不能直接用于该实验。以问题的形式引导学生思考、学习，真正达到举一反三之功效。
其次，这样的高效课堂，对教师的备课思维也提出了一定挑战。在整个备课的过程中，教师不仅要先明确目标，了解整个知识体系，还必须将自己的思维放低到学生的层面，将整个知识目标划分为一个个学生力所能及的阶梯，然后有针对性地设计相应的问题，引导学生去进行有效的知识建构。
在设计本堂课的导学问题时，笔者就在这方面颇费心思。首先，开篇的第一题不能太难，以免打击学生积极性，于是，笔者先安排了一个检查气密性的简单问题；随后，问题的难度慢慢增大，耗氧剂的选择，再到想象中的实验操作流程。这类问题，对学生来说是有一定挑战性的，毕竟，他们手上都没有真实的装置可以进行试验。至于止水夹何时关闭、何时打开的问题，则是笔者故意给他们设置的陷阱，只有当他们思维足够缜密时，才有可能被发现。事实也证明，在没有更多提示的情况下，大部分同学都将止水夹的作用忽略了。
[参 考 文 献]
[1]郑长龙.化学实验教学新视野[M].北京：高等教育出版社，2003.
[2]张升晖，杨春梅.化学实验[M].北京：中国计量出版社，2007.
葡萄糖含量测定 篇7
1 仪器与试药
1.1 仪器
Waters-2690型高效液相色谱仪及其色谱工作站（美国Waters公司）；UV-2550紫外可见分光光度计（日本岛津）。
1.2 试药
盐酸多巴酚丁胺对照品（批号：D-060102，上海紫源制药有限公司）；盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液（批号：060720C01、060720C02、060720C03,50 mg/100 ml，福州海王福药制药有限公司）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Waters-Symmetry ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm）；流动相：乙腈-磷酸盐缓冲溶液[磷酸调节pH值至pH=2.4]，梯度洗脱；检测波长：284 nm；流速：1.0 ml/min；柱温：30.0℃；进样量：10μl；理论塔板数按盐酸多巴酚丁胺计不低于3 000。
2.2 对照品溶液的制备
取盐酸多巴酚丁胺40.00 mg，精密称定，置10 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。精密量取对照品贮备液1 ml，置10 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
精密量取本品20 ml，置25 ml量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
2.4 阴性对照液的制备
取按处方比例并以相同工艺制备的缺盐酸多巴酚丁胺的葡萄糖注射液，按“2.3”项下方法制备阴性对照液，用0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得阴性对照液。
2.5 系统适用性
分别取盐酸多巴酚丁胺对照品溶液、供试品溶液以及阴性对照液，按上述色谱条件进行试验，考察系统适用性。HPLC色谱图见图1。盐酸多巴酚丁胺峰保留时间约为14 min，阴性对照液对测定没有干扰。
(A.对照品;B.供试品;C.阴性对照)
(A.Reference substance;B.Sample;C.Negative control)
2.6 线性范围考察
分别精密量取盐酸多巴酚丁胺对照品贮备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml于10 ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，依次吸取10μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定色谱峰面积，以对照品进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，计算回归方程，结果表明盐酸多巴酚丁胺进样量在1.86～9.34μg范围内，呈良好的线性关系。回归方程为Y=16.232 1X-77.310 8(r=0.999 9)。
2.7 精密度试验
精密吸取“2.3”项下供试品溶液10μl，重复进样6次，按上述色谱条件测定色谱峰面积，RSD=0.45%，结果表明本法精密度良好。
2.8 稳定性试验
取“2.3”项下供试品溶液，分别于放置0、1、2、4、8 h后，注入液相色谱仪，测定色谱峰面积，RSD=1.16%，结果表明供试品溶液在8 h内基本稳定。
2.9 重复性试验
取同一批样品（批号：060720C00），按“2.3”项下方法制备6份供试品溶液，分别测定色谱峰面积，RSD=0.58%（n=6）。结果表明本法重复性良好。
2.1 0 回收率试验
按处方量，精密称取盐酸多巴酚丁胺对照品适量，用含有辅料的水溶液配制成高、中、低三种浓度的溶液，按“2.3”项下方法制备供试液溶液，按上述色谱条件测定峰面积，计算回收率，结果见表1。
2.1 1 样品含量测定
取3批样品，按“2.3”项下方法制备样品溶液，用0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，按上述色谱条件测定色谱峰面积，结果见表2。
3 讨论
本文曾用乙腈-磷酸盐缓冲溶液分别为16∶84、20∶80、3070、40∶60等不同配比的流动相测定，盐酸多巴酚丁胺与5-羟甲基糠醛、中间体4-羟苯基-2-丁酮、盐酸多巴胺及其他辅料达不到分离要求。采用梯度洗脱，能实现有效分离，而且有关物质可在本文的色谱条件下进行测定。经紫外扫描，盐酸多巴酚丁胺在284 nm波长附近有较大吸收，故本实验选择284 nm为检测波长。使用离子对试剂时，流动相组分多、费用高，且分析完成后色谱柱需清洗较长时间。而本文采用的流动相组成简单，操作方便。
摘要：目的:建立高效液相法测定盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液中盐酸多巴酚丁胺含量的方法。方法:采用Waters-Symmetry ODS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-磷酸盐缓冲溶液[磷酸调节pH值至pH=2.4],梯度洗脱;检测波长:284nm;流速:1.0ml/min。结果:盐酸多巴酚丁胺在1.86～9.34μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.90%,RSD=0.11%(n=6)。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液中盐酸多巴酚丁胺的质量控制。
关键词：高效液相色谱法,盐酸多巴酚丁胺,盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液,含量测定
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京:化学工业出版社,2005:501.
[2]岳志华,张娜,李慧义.盐酸多巴酚丁胺葡萄糖注射液含量测定和5-羟甲基糠醛等有关物质检查方法的建立[J].中国药学杂志,2008,43(21):1661-1664.
[3]杨学谨,陈耳杰.“改进的凌柱形”优化系统在高效液相色谱中的建立和应用:“凌柱形”溶剂强度优化系统的改进[J].分析化学,1993,21(4):21.
[4]LI GD,ZHANG JM,XU F,et al.Determination of Dobutamine Hydrochloride Glucose Injection by HPLC[J].中国医药工业杂志,2002,33(10):497-498.
葡萄糖含量测定 篇8
但近些年来, 有些企业投机倒把, 从中牟取暴利。如果有用工业酒精酒精、香精和色素调配而成, 工业酒精中含大量的甲醇;有的葡萄酒在酿制发酵过程中也会产生甲醇, 如酿制不当, 就会产生大量的甲醇。甲醇对人体具有强烈的毒性, 其在人体新陈代谢中会氧化成比它毒性强得多的甲醛和蚁酸 (甲酸的俗称) , 饮用含有甲醇的酒可导致人头晕、头痛等, 还可造成失明、肝病, 甚至是死亡。葡萄酒中含有大量糖类、氨基酸、色素、维生素等多种难挥发成分。这些物质因极性大而在气相色谱毛细管色谱柱中死吸附, 造成色谱柱的污染和柱效大大降低, 从而使检测结果的精密度和准确性都受到影响, 造成色谱柱的使用寿命降低。加之葡萄酒中含有大量糖类, 从而使之粘度大大增加, 如果直接强行进样, 会使进样针损坏, 造成实验成本大大增加。GB/T15038-2006采用了蒸馏后对其行预处理, 去除样品中不挥发性物质以保护色谱柱, 直接进样-气相色谱外标法和由于甲醇的沸点比较低, 采用了气相色谱顶空法, 两种方法进行了比较。蒸馏-气相色谱外标法定量 (图1甲醇出峰时间:4.09min) , 并用75%色谱纯乙醇做了空白 (图3乙醇的出峰时间:4.51min) 。气相色谱顶空法定量 (图2甲醇出峰时间:1.97min) , 并用75%色谱纯乙醇做了空白 (图4乙醇的出峰时间:2.15min) (如图5~6) 。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
气相色谱仪 (附氢火焰离子化检测器 (FID) ) :GC-2010型, 日本岛津;
顶空进样器 (与GC-2010配套) :HSS86.50意大利丹尼;
电子分析天平:AEY-210型, 长沙湘仪;
无水乙醇、无水甲醇:色谱纯 (质量分数为99.9%) , 德国默克。
1.2 方法
1.2.1 色谱条件
色谱柱:30.0m×1.50μm (膜厚) ×0.53mm (内径) Rtx-1毛细管柱;
检测器:温度为:250℃, 附氢火焰离子化检测器 (FID) ;流速:载气 (N2) 30m L/min, 空气400m L/min, 氢气40m L/min;
温度:柱温60℃, 保留10min (蒸馏法-气相色谱外标法) 或4min (气相色谱顶空法) ;
气化室:温度为250℃, 分流进样 (分流比为1:10) ;
进样量:1μL;
顶空进样器炉温:70℃。
1.2.2 分析步骤
(1) 样品制备
(1) 蒸馏-气相色谱外标法:取葡萄酒样100m L于100m L容量瓶中, 倒入蒸馏瓶中, 分别用50m L超纯水洗涤容量瓶三次, 合并于蒸馏瓶中, 用原100m L容量瓶作接收瓶。当蒸馏接近100m L时停止蒸馏, 并用超纯水补齐至刻度。
(2) 气相色谱顶空外标法:用10m L容量瓶准确移取10m L的葡萄酒样品, 然后倒入20m L顶空瓶中, 用标配胶塞封口。上机备用。
(2) 测定:标准曲线制备:准确称取1.0110g色谱纯甲醇于100m L容量瓶中, 用75%色谱纯乙醇定容至刻度, 摇匀作储备液, 此时甲醇储备液浓度为10.11mg/m L。分别移取储备液0m L、2.00m L、4.00m L、6.00m L、8.00m L、10.00m L于50m L容量瓶中, 用75%色谱纯乙醇定容至刻度, 摇匀。此时的浓度分别为0μg/m L、404.4μg/m L、808.8μg/m L、1213.2μg/m L、1617.6μg/m L、2022.0μg/m L的甲醇标准溶液。
采用甲醇作为标准品进行分析检测, 以甲醇的质量浓度为横坐标, 相应的峰面积为纵坐标, 得到标准曲线图, 见图7~8。
甲醇标准曲线方程为:
甲醇标准曲线方程为:
该标准曲线在甲醇浓度在 (0~2000) μg/m L范围内线性良好。
1.2.3 甲醇结果计算
式中:w———葡萄酒样品中甲醇的含量, mg/L;
v———试样的体积, m L;
c———测定葡萄酒样品中甲醇的含量, μg/m L;
v定———样品的定容体积, m L。
2 结果与分析
2.1 两种方法测定葡萄酒中甲醇含量的测定
对六种不同葡萄酒样品中的甲醇含量进行了测定, 样品分别按蒸馏-气相色谱外标法和气相色谱顶空外标法的前处理进行了处理。上机备用。测定结果见表1~2。
由表1和表2可以看出, 气相色谱顶空外标法的结果明显高于蒸馏-气相色谱外标法, 这主要是在蒸馏-气相色谱外标法处理葡萄酒样品的过程中, 加入了超纯水洗涤装了葡萄酒样品的容量瓶, 另外葡萄酒样品中也含有大量的水, 我们知道甲醇中有羟基, 为极性溶剂, 它能与水形成氢键, 从而使范德华力增大, 导致甲醇未完全蒸馏出来, 导致结果偏低。
2.2 精密度和回收率的测定
蒸馏-气相色谱外标法:在已知质量浓度的葡萄酒样品取80m L于容量瓶中, 分别加入3种浓度的甲醇标准品溶液10m L, 用75%乙醇定容至100m L容量瓶中, 倒入蒸馏瓶中, 分别用50m L超纯水洗涤容量瓶三次, 合并于蒸馏瓶中, 用原100m L容量瓶作接收瓶。当蒸馏接近100m L时停止蒸馏, 并用超纯水补齐至刻度。每个样品连续测定6次, 测定精密度和加标回收率 (见表3) 。
气相色谱顶空外标法:在已知质量浓度的葡萄酒样品取8m L于容量瓶中, 分别加入3种浓度的甲醇标准品溶液1m L, 用75%乙醇定容至10m L, 再倒入20m L的顶空瓶中制成样品。由于本实验采用的是顶空法, 进入气相的是取的气体样, 不具备重复进样的性质, 每瓶样品只能进一针, 故而把每种浓度制备成样品6瓶, 对每一种浓度的6个样品分别计算各种浓度加标量的精密度和回收率, 检验方法具有稳定性和可行性, 所得结果见表4。
由表3~4可知, 气相色谱顶空外标法加标量的回收率和精密度都明显高于蒸馏-气相色谱外标法, 这进一步确认了气相色谱顶空外标法得可行性。
3 结语
葡萄糖含量测定 篇9
752C可见-紫外分光光度计 (上海第三仪器厂) ;克林霉素磷酸酯;克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液 (解放军第85医院制剂中心生产) ;碘酸钾、硫酸、环己烷均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 标准溶液的配置
精密称取克林霉素磷酸酯对照品适量, 加水溶解并稀释成2.5mg/m L的标准溶液。
2.2 标准曲线的绘制
精密量取标准溶液1、2、3、4、5mL, 分别置25mL容量瓶中, 加入1% (g/mL) 碘酸钾溶液4mL和30% (mL/mL) 硫酸溶液3mL, 环己烷10mL, 置60℃水浴中45min, 取出冷却, 将环己烷层分离放入另一25mL容量瓶中, 再用环己烷萃取3次 (5、5、3mL) , 合并萃取液并用环己烷稀释至刻度, 摇匀, 以溶剂为空白, 在520nm波长处分别测定吸收度[1]。以吸收度对浓度进行回归分析, 结果表明, 在0.1～0.5mg mL (以克林霉素计) 范围内吸收度与浓度呈良好的线性关系, 回归方程为C=1.164A+0.0041, r=0.9999。见表1。
2.3 回收率试验
精密称取克林霉素磷酸酯对照品适量, 加入其处方量辅料, 加水制成含克林霉素磷酸酯 (以克林霉素计) 6.0mg/mL的溶液。精密量取适量溶液, 分别置25mL量瓶中, 照上述方法操作, 在520nm波长处测定吸收度, 代入回归方程计算回收率, 结果见表2。
2.4 稳定性试验
取标准液一份, 分别在0、1、2、3、4、5h测定其吸收度, 结果表明, 吸收度基本没有变化, RSD为1%, 结果见表3。
2.5 样品的含量测定
取6份样品 (以克林霉素计6.0mg/mL) 以分别在不同的条件下测定其含量, 测定方法见“2.2项”。结果见表4。
3 讨论
3.1 本测定方法利用克林霉素磷酸酯分子中含有甲硫基团, 在酸性介质中用碘酸钾氧化硫原子释放当量碘被环己烷定量萃取的原理[2], 采用紫外分光光度法测定较方便, 简单, 快捷, 灵敏度较高。故本法可作为测定克林霉素磷酸酯葡萄糖溶液中克林霉素磷酸酯含量的常规方法。
3.2 本法不适用测定克林霉素磷酸酯氯化钠溶液中克林霉素磷酸酯含量, 因为溶液中的氯离子对上述反应的影响较大。
3.3 通过对不同条件下克林霉素磷酸酯氯化钠溶液中克林霉素磷酸酯含量的测定, 我们发现较理想的灭菌条件是湿热灭菌法, 而干热灭菌的温度不应该超过108℃、30min。
参考文献
[1]刘梅, 李祚宏, 贺建荣, 等.克林霉素磷酸酯注射液的分光光度法测定[J].中国医院药学杂志, 2001, 5 (21) :273.
葡萄糖含量测定 篇10
葡萄酒是一种以葡萄为基本原材料, 并经过一系列的发酵或者部分发酵而酿成的酒, 是属于发酵酒中的一种, 由于其口味鲜美、味道纯正而受到人们的广泛欢迎。在我国的食品卫生标准中, 对酒类的配制过程测定的方法进行了一系列的规定, 按照规定中指定的方法对葡萄酒进行测定, 其中的蛋白质与天然色素等体积较大的分子颗粒非常容易出现对色谱柱进行堵塞, 从而使柱压增大, 进而使得相应葡萄酒会由于时间变化大而出现柱效下降的问题, 这也会对色谱柱造成非常大的损伤, 不仅使其难以修复, 还会使其使用的寿命造成非常大的缩短。为此, 我们可以通过在实际测定之前对其测试样品先进行一系列的前处理, 从而对这种现象进行适当的解决。
2 测试仪器与方法
2.1 测试仪器
对于测试的仪器部分, 我们选择了LC-10A液相色谱仪;0.45μm微孔滤膜;纯化水机;超声波清洗器等等。
对于甲醇我们选择的是光谱纯类甲醇, 去离子水则保证其标准为18.23MΩ/cm。而对于亚铁氰化钾的制作, 我们先选取102.0g亚铁氰化钾, 并将其放入水中进行溶解, 一直稀释到1000m L为止。乙酸锌溶液则先称量217.0g乙酸锌, 并加入31m L乙酸融入到水中, 同样稀释到1000m L为止。对于氨水则使用一比一的比例进行选取。碳酸氢钠溶液制作则将2g的Na HCO3溶解到100m L水中;苯甲酸标准溶液我们将0.1g的苯甲酸中放入5m L的碳酸氢钠溶液中进行溶解, 并将其用纯净水进行稀释至100m L;对于山梨酸溶液的配置则参考苯甲酸溶液;另外对于山梨酸与苯甲酸则由我国的生物食品的制定检定所中进行购买, 作为测试主体的葡萄酒则在当地超市中购买即可。
2.2 色谱条件
色谱柱:对于色谱柱我们选取了规格为6*150mm的shim.pack CLC一ODSΦ, 而对于预柱则选取了shjm-Pack G一ODS。
流动相:使用的甲醇为0.02mmol/L, 而其乙酸铵的配比则选取为100。
流速方面则保证其每分钟的流速为1m L, 同时柱温度应当保持在25摄氏度。检测的波长则以220nm为宜。
2.3 样品预处理
首先, 应当称量10g的样品放置到容量为100m L的试验烧杯中, 并将其进行加热直至其体积为原来总体积的三分之二为止, 再将其转移到容量为50m L的比色管中, 并向其中加入20m L的水将其稀释。之后, 再使用氨水对其p H值进行调节, 当调节基本为7之后, 再向其中加入亚铁氰化钾溶液与乙酸锌溶液各5m L, 然后再向其中加水到相应刻度为止, 并对其进行后续的摇匀、静置步骤。最后再去清液经过滤膜过滤之后, 就可以安置在一旁等待测量。
2.4 制作标准曲线
在此环节中, 我们分别配置一系列浓度不同且从低到高顺序的溶液来进行相色谱仪测试工作, 并按照其峰面积与质量的浓度不同制作成相应的工作曲线。其现行范围由下表所示:
2.5 对样品进行测量
通过我们从市面中选取的三种不同品牌的葡萄酒, 并对其进行逐个的测定, 得到了下面的实验结果。从实验结果中我们可以看出, 这几种不同品牌的葡萄酒其山梨酸与苯甲酸的含量都符合标准, 处于正常水平, 可以放心的进行饮用。
3 结果讨论
3.1 流动相组分比列选择
对样品溶液、山梨酸钾溶液使用入不同流动相比列进行测试, 并对各组别的保留时间以及分离效果进行细致的观察, 在不同比例的比列 (60:40;70:30, 80:20;) 测试中, 我们发现当乙酸铵同甲醇的比为70:30时, 其工作流动线的基线分离情况比较合适, 同时其出峰的时间也令人满意。
3.2 样品处理
3.2.1 去除乙醇
在葡萄酒中, 乙醇是必定占有一定比例的。而从以往经验来说, 乙醇会在色谱测试中出现较大的宽风, 从而会对所测定样品的峰形产生影响。所以, 在我们对不同葡萄酒进行取样之后, 就应当以水浴的方式对其进行加热, 从而将乙醇去除。
3.2.2 调节PH值
在葡萄酒中, 有机酸的种类有很多, 这种情况的存在也会使得酒中含有一定的酸度。为了使我们测试样品物质的测试标准与测试时间相一致, 在实际的实验过程中就应当适当的使用氨水对其进行调节, 而当对p H值进行调节之后, 保留时间存在的偏差就可以忽略不计了。
3.2.3 大分子物质的沉淀
大分子物质使我们在测试过程中不能忽略的一部分, 而亚铁氰化钾则是一种对大分子物质以及蛋白质进行沉淀的物质, 在我们目前的食品含量测试工作中经常会被用到, 同时其使用方式也非常方便。在实验中, 我们以20%的加入量对其进行了使用, 而结果表明, 沉淀效果满足要求。
4 结束语
在本文中, 我们以高效液相色谱技术对葡萄酒中的山梨酸以及苯甲酸的含量进行了测定, 而且得到了较好的效果。在实际测试过程中, 则应当把握每一个细节, 从而得到更为准确的测试结果。
摘要：在本文中, 建立了高效液相色谱法对葡萄酒中苯甲酸和山梨酸含量进行测定, 并以实例检测表明, 用此方式对葡萄酒检验能够有着分离速度快、重现性强、分析结果准确的特点。
关键词：葡萄酒,苯甲酸和山梨酸,测定方法
参考文献
[1]黄慧芬, 辜华胜, 彭方.高效液相色谱法测定肉制品中苯甲酸和山梨酸[J].中国卫生检验杂志.2010 (07) :1686-1687.
[2]白静.高效液相色谱法测定食品中的安赛蜜[J].食品科学.2011 (16) :245-248.
涂料中甲醛含量测定方法研究 篇11
【关键词】:涂料、甲醛、测定方法
中图分类号:TH833 文献标识码:A 文章编号:1003-8809(2010)-08-0195-02
1前言
2009年12月1日,《中国涂料行业管理准则》开始实施,在该准则的第六条和第七条,对涂料提出了环保要求,强调了环境效应、安全生产的重要性,开发低VOC含量涂料、环境友好型水性涂料,保证生产过程安全、平稳、有序进行,避免因环保不达标、安检不过关而"挂牌"督办,进而影响正常生产秩序的现象发生。
甲醛作为涂料空气污染的主要来源之一,在我国有毒化学品优先控制名单上高居第二位。涂料中含有的甲醛,会在涂饰时放出,亦会残留在涂层中慢慢释放。尽管甲醛能否使人致癌的实验尚不充分,但实验证实,甲醛与盐酸反应生成的二氯甲基乙醚是致癌物。甲醛检测的重要性可见一斑。
2甲醛的检测方法
2.1甲醛检测方法概述
检测甲醛的方法有电化学法、气相色谱法、高压液相色谱法、质谱法、分子荧光法、化学发光法、动力学法和可见光分光光度法,可见光分光光度法具有仪器价格便宜,操作简便等特点而得到广泛运用。
2.2可见光分光光度法的基本原理
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。其基本原理是当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:
根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:
A=abc 公式2-1
式中A为吸光度,b为溶液层厚度(cm),c为溶液的浓度(g/dm^3), a为吸光系数。其中吸光系数 与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。溶液中其他组分(如溶剂等)对光的吸收可用空白液扣除。
由上式可知,当固定溶液层厚度l和吸光系数 时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定最大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源,测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A,作出A~c工作曲线。在分析未知溶液时,根据测量的吸光度A,查工作曲线即可确定出相应的浓度。这便是分光光度法测量浓度的基本原理。
本文将探讨运用可见光分光光度法对甲醛进行检验的方法。
3实验
3.1实验仪器与试剂
实验中将用到以下仪器与试剂:(1)紫外可见分光光度仪(日立UV-3410);(2)蒸馏装置(500mL蒸馏瓶、蛇形冷凝管、用于接收馏份的烧杯);(3)乙酰丙酮,分析纯,进口分装;(4)甲醛标准使用液(约10μg/mL);
3.2試验方法
3.2.1乙酰丙酮法工作曲线及样品馏份分析
分别用移液管吸取5.0mL 甲醛标准使用液,加入1.0mL乙酰丙酮溶液,用水稀释至刻度 。在室温下显色2个小时后,用10mm吸收池在分光光度计413nm波长处测量吸光度。以5mL甲醛标准溶液中甲醛含量为横坐标, 吸光度为纵坐标, 绘制标准工作曲线, 计算回归线的斜率, 以斜率的倒数作为样品测定的计算因子B。
3.2.2甲醛含量的测定
称取搅拌均匀后的试样2g 置于已预先加入50mL 水的蒸馏瓶中, 轻轻摇匀, 再加150mL 水, 在馏分接收器中预先加入30mL 水, 浸没馏分出口, 馏分接收器的外部用冰冷却, 加热蒸馏, 收集馏分100mL, 取下馏分接收器, 把馏分定容至250mL, 从中吸取5 mL, 加入1 mL 乙酰丙酮溶液, 在室温下显色2个小时后,用10mm吸收池在分光光度计413nm波长处测量吸光度。
取5mL 水在相同条件下做空白试验。空白试验的吸光度应小于0.01, 否则应重配乙酰丙酮溶液。
甲醛含量的计算公式:
W=0.05×B(A- A0) /m 公式(3-1)
式中:
W=游离甲醛含量,单位为克每千克( g/kg);
A=样品溶液的吸光度;
A0=空白溶液的吸光度;
B=计算因子;
M=样品量, 单位为克(g);
0.05=换算系数。
根据上述方法,可以测定出相应的甲醛含量。根据计算,按照标准梯度制作的4支甲醛试剂含量分别为0.011mg/ kg、0.058mg/ kg、0.225mg/ kg和1.24mg/ kg,完全符合甲醛试剂的制作梯度。再来比较一下,同一样品按照这一方法的检验结果与按照GB18582- 2001的检验结果,见表3-1
表3-1 检验结果对比
通过表格,我们发现,两种方法的偏差不大,在可接受的范围之内。因此认为, 该方法的准确度较好, 而且简便易行, 具有较强的实用性。
4结论
实验结果证明,采用可见光分光光度法检测涂料中的甲醛含量,较为简易,具有安全、快捷的优点,而且结果也比较精确,完全能够满足基本的检测需要。采用可见光分光光度法检测涂料中的甲醛含量,也降低了检测的门槛,使涂料中的甲醛含量能够较为容易的检测出来,对于保障家居装饰安全,促进涂料生产厂商提高生产工艺,降低甲醛含量有着重要的意义。
参考文献:
[1]Frankel, L. S.; McCallum, K. S.; Collier, L. Environ. Sci. Technol., 1974 ,(8): 356
[2]李玉武,张卓.内墙涂料、胶粘剂、木器漆等材料中有害物质甲醛测定方法研究. 国家环境分析测试中心课题, 2002
[3]沈文洁,陈强,方永康,关丽军,翟翠萍. 水性涂料中甲醛含量测定方法改进初探.检验检疫科学,2005,(15):59
葡萄糖含量测定 篇12
关键词：盐酸赖氨酸,高效液相色谱法,含量测定
葡萄糖酸钙锌口服溶液系由葡萄糖酸钙、葡萄糖酸锌和盐酸赖氨酸组成的复方制剂。葡萄糖酸钙参与骨骼的形成与骨折后骨组织的再建以及肌肉收缩、神经传递、凝血抑制,并降低毛细血管的通透性。葡萄糖酸锌为体内许多酶的重要组成成分,具有促进生长发育、改善味觉等作用。盐酸赖氨酸为人体8种必需氨基酸之一,可促进钙吸收,增加骨结合蛋白的含量。盐酸赖氨酸为重要成分之一,但国家药品标准对其含量测定方法未作收录,目前葡萄糖酸钙锌口服溶液中盐酸赖氨酸的测定有PICO-TAG法[1]、LC-MS法[2]、离子对高效液相色谱法[3]、荧光液相色谱法[4],为更好地控制本品质量,本实验建立了盐酸赖氨酸含量的高效液相色谱分析方法[5,6],并进行相关的方法学考察,可用于葡萄糖酸钙锌口服溶液中盐酸赖氨酸的含量测定。
1 仪器与试药
Agilent 1100型高效液相色谱仪;盐酸赖氨酸对照品为中国食品药品检定研究院对照品( 批号140673—201006,供含量测定用);Zorbax SB—C18色谱柱(250 mm×4.6 , 5 μm); DELTA 320 pH计;AG—285电子天平;乙腈、三乙胺为色谱纯;无水醋酸钠、EDTA、冰醋酸为分析纯;水为双蒸馏水。葡萄糖酸钙锌口服溶液,南京海陵药业生产,批号:11021711, 11021911, 11021912。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性
色谱柱为Agilent Zorbax SB—C18柱(250 mm×4.6 , 5 μm)。以醋酸盐缓冲液(取无水醋酸钠11.45 g, EDTA0.5 g,加水溶解并稀释至1 000 mL,加三乙胺0.5 mL,用冰醋酸调pH值至6.0)-乙腈(940∶60)为流动相A。以乙腈-水(600∶400)为流动相B;梯度洗脱;检测波长为246 nm;柱温40 ℃;进样10 μL。
分别吸取对照品溶液、供试品溶液及空白辅料溶液各10 μL注入液相色谱仪。记录色谱图,供试品色谱图中,在与对照品色谱图相同保留时间有相应的峰,空白辅料溶液在相应位置无吸收,对测定无干扰,结果见图1—图3。
2.2 溶液的制备
2.2.1 供试品溶液的制备
取本品5 mL(约相当于盐酸赖氨酸50 mg),用0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液稀释成1 mg/mL,过滤,取续滤液25 μL置于小试管中,真空干燥后各加入25 μL干燥液溶解样品,再真空干燥,加25 μL入衍生剂,常温衍生化15 min,再次真空干燥2 h后取出,精密加入2.0 mL稀释液稀释并溶解样品,即得。
2.2.2 对照品溶液的制备
取盐酸赖氨酸对照品50 mg,加水溶解并稀释成1 mg/mL,过滤,取续滤液25 μL按供试品溶液制备法制备。
2.2.3 空白辅料溶液的制备
取90%处方量纯化水,加入处方量辅料,搅拌溶解,加入处方量葡萄糖酸钙、葡萄糖酸锌搅拌溶解,加纯化水至全量;取此溶液5 mL置50 mL量瓶中,超声数分钟,用0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液稀释至刻度,摇匀,过滤,取续滤液25 μL按供试品溶液制备法制备。
2.2.4 试验用干燥液、衍生剂及稀释液的制备
干燥液 甲醇∶三乙胺∶水=2∶1∶1;
衍生剂 甲醇∶三乙胺∶异硫氰酸苯酯∶水=7∶1∶1∶1;
稀释液 取Na2HPO471mg加水溶解并稀释至100ml,用10%磷酸∶乙腈(95∶5)溶液调pH值至7.4。
2.3 检测波长的确定
取对照品溶液10 μL注入液相色谱仪,在200～400 nm的波长范围内观察其紫外图谱。结果表明盐酸赖氨酸经衍生化后在246 nm处有最大吸收,故选246 nm作为本品中盐酸赖氨酸含量的检测波长。
2.4 含量测定的线性范围
精密称取盐酸赖氨酸对照品,加水稀释成一系列浓度0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、1.5 mg/mL、2.0 mg/mL作为供试品;分别取上述供试品溶液各25 μL置于小试管中,真空干燥后各加入25 μL干燥液溶解样品,再真空干燥后,加25 μL入衍生剂,常温衍生化15 min,再次真空干燥2 h后取出,精密加入2.0 mL稀释液溶解并稀释样品,取最终处理好的样品各10 μL注入液相色谱仪,记录色谱图,以测得的峰面积和对应的浓度计算回归方程,即得标准曲线,线性方程为Y=2369.1X+43.664,相关系数r2=0.9998 (n=5)。表明盐酸赖氨酸在0.25～2.00 mg/mL的浓度范围内,线性关系良好。如图4。
2.5 精密度试验
精密量取本品六份,照含量测定项下方法处理并测定,以峰面积计,计算RSD为0.40%,见表1。
2.6 溶液的稳定性试验
照含量测定项下方法处理样品1份,于自然光室温放置,分别于0、2、4、8 h各测定一次,以峰面积计,计算RSD为0.44%。结果表明:盐酸赖氨酸含量测定溶液在8 h内稳定,见表2。
2.7 回收率试验
精密称取盐酸赖氨酸对照品约8 g、10 g、12 g各三份,精密称取葡萄糖酸钙60 g九份,葡萄糖酸锌3 g九份,分别加入1 000 mL量瓶中,其他辅料按葡萄糖酸钙锌口服溶液标示量准确加入,最后加纯化水溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液 ,分别取上述供试品溶液,按盐酸赖氨酸含量测定项下的方法处理并测定,计算回收率为99.89%,RSD为0.33%,结果表明本法回收率高,不受辅料干扰,见表3。
2.8 三批样品中盐酸赖氨酸含量测定结果
按照上述含量测定项下方法处理样品,对三批葡萄糖酸钙锌口服溶液中盐酸赖氨酸的含量进行测定,结果见表4。
结论:三批自制样品盐酸赖氨酸的含量均在90.0%～110.0%范围内,符合规定。
3 讨论
实验结果表明,采用本方法测定盐酸赖氨酸的含量,可以避免葡萄糖酸钙锌口服溶液中葡萄糖酸钙和葡萄糖酸锌的干扰,有良好的精密度及较高的准确度,线性范围符合要求,能够有效控制葡萄糖酸钙锌口服溶液中盐酸赖氨酸的产品质量。为最终生产出优良的产品提供质量保证。
参考文献
[1]李瑞萍,蒋守规,等.PICO-TAG方法测定氨基酸的研究.氨基酸和生物资源,1998;(3):23—27
[2]李志伟,刘丽梅,等.LC-MS分析葡萄糖酸钙锌口服液中葡萄糖酸和盐酸赖氨酸的含量.分析测试学报,2007;(26):82—83
[3]王文清,沈新伦,等,离子对高效液相色谱法测定葡萄糖酸钙锌口服溶液中盐酸赖氨酸的含量.中国医院药学杂志,2010;(23):1993—1995
[4] Zhang L,Li Y,Zhou H,et al.Determination of eight amino acids inmice embryonic stem cells by pre-column derivatization HPLC withfluorescence detection.J Pharm Biomed Anal,2012;66:356—358
[5]董丽,杨洁,等,HPLC同时测定赖氨葡锌片中葡萄糖酸锌和盐酸赖氨酸的含量.中国现代应用药学,2009;(5):403—406