三氯甲烷残留

三氯甲烷残留（通用3篇）

三氯甲烷残留 篇1

摘要：目的 建立丙硫异烟胺中三氯甲烷(CHCl3)残留量的测定方法。方法 顶空进样色谱法,采用DM-1毛细管柱(60m×0.32mm,5μm)。结果 空白溶剂无干扰,检测限为0.03μg/mL,0.006～0.018mg/mL的范围内线性关系良好(r=0.9992),平均回收率为99.7%(RSD=1.5%,n=9),3批样品三氯甲烷残留量均符合规定。结论 经方法学试验,该方法灵敏、准确、可靠,适用于本品三氯甲烷残留量的测定。

关键词：丙硫异烟胺,三氯甲烷,顶空气相色谱法

丙硫异烟胺(Protionamide)化学名称为2-丙基硫代异烟酰胺,对结核分枝杆菌有较强的抑菌作用,对耐链霉素、异烟肼、对氨基水杨酸、吡嗪酰胺的菌株均有抑菌力,与其他抗结核药联合用于结核病经一线药物(如链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇)治疗无效者[1,2]。丙硫异烟胺已列入WHO二线抗结核药采购目录。本品合成过程中使用了有机溶剂三氯甲烷,三氯甲烷是中国药典二部严格规定限度的有机溶剂。因此,本研究建立了丙硫异烟胺中三氯甲烷残留量的检查方法,操作简单,方法灵敏、准确、可靠。

1 仪器与试剂

GC-14C型气相色谱仪,ECD检测器(日本岛津公司);AE240电子分析天平(梅特勒-托利多公司)。

丙硫异烟胺原料药(由有关药厂提供,批号:080503,080506,080507)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

D M-1毛细管柱(1 0 0%二甲基聚硅氧烷,6 0 m×0.3 2 m m,5μm);柱温1 6 0℃;进样口温度2 2 0℃;检测器(E C D)温度300℃;载气氮气,压力100kPa;顶空瓶平衡温度85℃;平衡时间20min;进样量1.0mL。理论板数按三氯甲烷峰计算应不低于10000。

2.2 溶液配制

2.2.1 对照品溶液

取三氯甲烷约30mg,精密称定,置50mL量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺稀释至刻度,摇匀;精密量取1mL,置50mL量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺稀释至刻度,摇匀,精密量取5mL置顶空瓶中,密封,作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液

取丙硫异烟胺约1.0g,精密称定,置顶空瓶中,精密加入5mL N,N-二甲基甲酰胺使溶解,密封,作为供试品溶液。

2.3 理论板数

经试验,三氯甲烷峰理论板数为62247。

2.4 空白溶剂的干扰试验

精密量取N,N-二甲基甲酰胺5m L,置顶空瓶中,密封,按“2.1”项下条件操作,结果表明空白溶剂对三氯甲烷的测定无干扰。见图1。

2.5 最低检测限

精密称取三氯甲烷30.12mg,加N,N-二甲基甲酰胺逐步稀释制成0.12、0.06、0.03μg/mL的溶液,分别精密量取5mL置顶空瓶中,按“2.1”项下条件操作,记录为基线噪音三倍者为最低检测限。测得的最低检测限为0.03μg/mL。

2.6 线性关系

精密称取三氯甲烷30.09mg,加N,N-二甲基甲酰胺定容至50mL,作为贮备溶液。分别精密量取0.5mL、0.75mL、1.0mL、1.25mL、1.5mL置50mL量瓶中,用N,N-二甲基甲酰胺稀释至刻度,摇匀,分别精密量取5mL,置顶空瓶中,按“2.1”项下条件操作,结果见表1。

以浓度对峰面积进行线性回归,得到线性方程:A=2519600.0C+3005.8(r=0.9992)。可见三氯甲烷在0.006～0.018mg/m L的范围内线性良好。

2.7 精密度

精密称取三氯甲烷30.22mg,加N,N-二甲基甲酰胺定容至50mL,精密量取1mL,置50mL量瓶中,用N,N-二甲基甲酰胺稀释至刻度,摇匀。分别精密量取5mL,置6个顶空瓶中,按“2.1”项下条件操作,结果见表2。

2.8 回收率

精密称取三氯甲烷30.34mg,加N,N-二甲基甲酰胺定容至50m L,作为贮备液。精密量取贮备液1mL,置50mL量瓶中,用N,N-二甲基甲酰胺稀释至刻度,摇匀,精密量取5m L,置顶空瓶中,作为对照品溶液。分别精密量取贮备液0.75mL、1.0mL、1.25mL置50mL量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺稀释至刻度,摇匀,作为高、中、低浓度的溶液备用(浓度分别为0.009mg/m L、0.012mg/m L、0.015mg/m L)。

精密称取已知三氯甲烷残留量的丙硫异烟胺原料1.0g,置顶空瓶中,共9份。再精密量取高、中、低浓度的溶液各3份,每份5mL,分别加入上述9个顶空瓶中,作为供试品溶液。取上述溶液,按“2.1”项下条件操作,按外标法以峰面积计算回收率,结果见表3。平均回收率为99.7%,RSD%为1.5%。

A:对照品;B:供试品;C:溶剂;1:三氯甲烷

2.9 样品测定

按“2.1”和“2.2”项下方法配制溶液和测定,按外标法以峰面积计算样品中的三氯甲烷残留量,结果分别为0.0001%、0.0001%、0.0001%。《中国药典》2005年版二部附录ⅧP项下规定的三氯甲烷限度为0.006%[3],三批样品检查结果均符合规定。

3 讨论

丙硫异烟胺在水中几乎不溶,因此采用N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,经研究其对试验无干扰。同时也进行了二甲基亚砜的溶剂研究,但因其干扰测定而未选择。

由于ECD检测器对含卤素元素的残留溶剂易得到较高的灵敏度,因此选择了ECD作为检测器。丙硫异烟胺的三氯甲烷残留量检查国内尚未见有关的文献报道,因此我们对相应的色谱条件如柱温、程序升温等进行了摸索,最终选定了色谱条件。

方法学研究的结果表明本方法操作简单、灵敏、准确和可靠,可有效地控制丙硫异烟胺中的三氯甲烷残留量。

参考文献

[1]国家药典会.临床用药须知[M].北京:人民卫生出版社,2005:584-585.

[2]国家食品药品监督管理局药品审评中心.药物临床信息参考[M].四川科技出版社,2005:302.

[3]国家药典委员会.中国药典2005年版二部[M].北京:化学工业出版社,2005:附录54-57.

三氯甲烷残留 篇2

阿莫西林合成工艺比较成熟, 但阿莫西林中二氯甲烷残留, 是所有国内生产阿莫西林厂家面临的主要问题。减少阿莫西林中二氯甲烷残留, 我们首先考虑分离过程中溶解于水中的二氯甲烷及分离效果。a.二氯甲烷微溶于水中, 调解萃取温度降低二氯甲烷溶解量;b.实验中采用静止分离, 发现由于萃取时快速搅拌, 产生许多二氯甲烷的小液滴附着在容器壁上或悬浮在水层中, 分层时分离不出去, 结晶时二氯甲烷就会包裹在阿莫西林中, 导致阿莫西林中二氯甲烷残留量高。c.二氯甲烷微溶于水, 结晶时加大水量二氯甲烷溶解于水, 同时避免二氯甲烷包裹在结晶中。d.改变阿莫西林洗涤用溶媒, 用乙醇洗涤滤饼, 因为阿莫西林不溶于乙醇中, 二氯甲烷溶于乙醇中。即可以洗去二氯甲烷又可以减少阿莫西林的损失。

实验部分

(1) 随着温度升高, 二氯甲烷在水中的溶解度发生变化。考虑到阿莫西林是-内酰胺类药物, 遇酸、碱、热都不稳定, 实验中, 由原来10℃~12℃ (b) 的萃取温度定改为20℃~23℃ (a) , 降低二氯甲烷残留量。

实验数据: (见表1)

通过实验对比考查, 萃取温度提高阿莫西林收率下降1.4%, 有浊度。阿莫西林中二氯甲烷含量有所降低, 但没有达标准。

(2) 萃取分层后, 用搅拌多次搅拌或向溶液中鼓泡, 附着在容器壁上或悬浮在水层中二氯甲烷的小液滴, 纷纷下落, 重新静止, 又可以分离出一部分二氯甲烷。 (见表2)

通过实验可以看到, 有几个批次二氯甲烷含量达到欧洲药典要求<0.06%, 而且阿莫西林质量、收率没有影响, 又不增加任何成本, 只是工艺时间长, 车间生产无法达到。

(3) 分层后, 向萃取层加入1/3倍的水, 加大结晶容积, 同时稀释萃取层的二氯甲烷量, 避免二氯甲烷包裹在结晶中。 (见表3)

通过实验, 结晶时加1/3量纯化水阿莫西林收率下降1.0%~1.5%, 二氯甲烷残留量达到欧洲药典要求<0.06%。

(4) 用乙醇洗涤滤饼, 考虑到洗涤时, 需要用乙醇带出一部分水, 选择无水乙醇洗涤, 洗涤时发现阿莫西林一部分溶解变成无色半透明的固体, 经过分析原来是无水乙醇吸走阿莫西林结晶中的3个水, 后改用95%的乙醇洗涤滤饼。由于乙醇熔点高于丙酮的熔点, 改用乙醇后, 阿莫西林干燥时间变长一些。 (见表4)

通过实验, 用乙醇洗涤滤饼, 阿莫西林中二氯甲烷残留没有改变, 没有达到试验目的, 但阿莫西林晶型发生变化, 阿莫西林粉子变得松散, 易于干燥, 用乙醇代替丙酮可以解决生产中工业环境问题。

实验结论及讨论

通过以上实验, 可以看出实验 (2) 有的批次达到欧洲药典要求二氯甲烷在阿莫西林中残留量<0.06%标准, 说明附着在容器壁上或悬浮在水层中二氯甲烷的小液滴, 是二氯甲烷在阿莫西林中残留量的主要原因, 但在车间生产中无法达到实验那样直观, 应该考虑应用萃取分离一体的先进设备离心萃取机[2], 达到新标准。实验 (3) 达到了欧洲药典要求二氯甲烷在阿莫西林中残留量<0.06%标准, 但阿莫西林收率下降了1.0%~1.5%, 影响经济效益。总之, 减少阿莫西林中二氯甲烷残留是阿莫西林发展的方向, 也是国内阿莫西林打入欧洲市场的必须条件。

参考文献

[1]中国药典.2005年版二部附录残留溶剂测定.

三氯甲烷残留 篇3

1 试剂和材料

a) 乙腈

b) 丙酮, 重蒸

c) 已烷, 重蒸

d) 氯化钠, 140℃烘烤4h

e) 固相萃取柱, 弗罗里硅土小柱, 容积6ml, 填充物1000mg

f) 铝箔

g) 三氯杀螨醇标准品:100ug/ml, 购于国家标准物质研究中心

h) 六六六、滴滴涕标准品:100ug/ml, , 购于国家标准物质研究中心

i) 气相色谱仪, 具有电子捕获检测器 (ECD)

j) 匀浆机

k) 氮吹仪

2 实验方法

a) 制样:将茶叶用粉碎机打碎, 制成待测样。

b) 提取:将确称取5.0克试样放入匀浆机中, 加入50.0ml乙腈, 在匀浆机中高速匀浆 (10000转/min) 后用滤纸过滤, 滤液收集到6g氯化钠的100ml具塞量筒中, 收集滤液50ml, 盖上塞子, 剧烈震荡2min, 在室温下静置40min, 使乙腈相和水相分层。

c) 净化:从具塞量筒中吸取10.0ml乙腈溶液, 放入150ml烧杯中, 将烧杯放在80℃水浴锅上加热, 杯内缓缓通入氮气或空气流, 蒸发近干, 加入2.0ml丙酮, 盖上铝箔, 备用。将烧杯中备用液转移至10ml刻度离心管中, 再用约3ml丙酮三次冲洗烧杯, 并转移至刻度离心管中, 最后定容至5.0ml。如定容后的样品溶液过于混浊, 应用0.2滤膜过滤后再进行测定。

3 结果与讨论

3.1 十种农药的色谱图

十个农药峰均实现了较好的分离, 结果如图所示。

3.2 柱温的选择

经过试验不使用恒温, 采用梯度升温, 160℃, 保持者3min, 以每分钟5℃至260℃保持8分钟。

3.3 最低检同出限的确定

以仪器的两倍噪音对应的量为三氯杀螨醇的最低检出限。进样量为1ul时, 其他最低检出限为0.01ng。依据本方法的称样量及定容体积所得的最低检测浓度为0.01mg/kg。

3.4 准确度试验

选择不含三氯杀螨醇的本度的茶叶加入标准三氯杀螨醇标准储备液0.5ug/ml和1.0ug/ml, 经上述过程后, 再经色谱测出其实际浓度, 计算加标回收率。当加标为0.5ug/ml时, 实测浓度为0.45, 回收率为90.0%, 当加标为0.1.0ug/ml时, 实测浓度为0.93, 回收率为93.0%。

3.5 A类测量不确定度评定