氯酸钠法（共8篇）
氯酸钠法 篇1
复方枸橼酸钠合剂是我院研制的自制制剂 (制剂批准文号:北Z2011122) , 主要由枸橼酸钠、氯化钠、甘油等药物组成。临床主要用于治疗美尼尔综合征。为更好地控制该制剂的质量, 保证临床用药安全有效, 本文采用离子交换法对制剂中的枸橼酸钠进行含量测定, 结果较满意。报道如下。
1 仪器与试药
磺酸型阳离子交换树脂 (国药集团化学试剂有限公司生产) , BP-211D型电子分析天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公司生产) , 枸橼酸钠 (台山市新宁制药有限公司生产, 批号:20120201) , 氯化钠 (中盐宏博集团云梦云虹制药有限公司生产, 批号:20120105) 复方枸橼酸钠合剂 (由本院制剂室生产, 批号:20120513, 20120808, 20121126) 。
2 方法与结果
2.1 阳离子交换树脂的准备
取钠盐状态磺酸型离子交换树脂10~15g, 置水中浸湿, 在80℃加热约1h, 连同水移入离子交换柱中, 自顶端加入2mol/盐酸溶液30~40ml, 开启活塞, 使加入的盐酸溶液保持每分钟10ml的流速流出, 再用60~70℃的热水保持每分钟20~30ml的流速冲洗至洗液不含氯化物为止。然后用氯化钠溶液 (1-20) 30ml流过树脂柱, 再用水冲洗, 如此反复用2mol/L盐酸溶液、氯化钠溶液 (1-20) 处理2~3次, 临用前再用2mol/L盐酸溶液处理, 用新沸过的冷水约300~500ml冲洗至几乎不含氯化物, 并取最后的洗液100ml, 加酚酞指示液与0.1mol/L氢氧化钠溶液各1滴, 如显粉红色, 即可供试验备用[1]。
2.2 测定方法
2.2.1 氯化钠:
精密量取供试品10ml, 加水5ml, 铬酸钾指示液2滴, 用硝酸银滴定液 (0.1mol/L) 滴定至溶液显砖红色即得。每1ml硝酸银滴定液 (0.1mol/L) 相当于5.845mg的Na Cl。
2.2.2 枸橼酸钠:
精密量取供试品10ml, 置已处理好的阳离子交换树脂柱中, 静置5min, 开启活塞, 用新沸水过的冷水冲洗, 流速每分钟3~5ml, 收集冲洗液约100ml (此时用另一锥形瓶收集洗液约50ml, 考察是否有剩余酸液洗出) ;加酚酞指示液2滴, 用氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L) 滴定至溶液显微红色。计算时从消耗氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L) 毫升数中减去供试量中氯化钠所消耗的硝酸银滴定液 (0.1mol/L) 的毫升数。每1ml氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L) 相当于9.803mg的C6H5Na3O7·2H2O。
2.3 对照溶液的制备
2.3.1 枸橼酸钠对照品溶液:
取枸橼酸钠适量, 精密称定, 加水定容制成每1ml含1.42mg的枸橼酸钠对照品溶液。
2.3.2 氯化钠对照品溶液:
取氯化钠适量, 精密称定, 加水定容制成每1ml含4.25mg的氯化钠对照品溶液[2]。
2.4 供试品溶液的制备
按处方比例及制备工艺, 精密配制供试品溶液。
2.5 阴性样品溶液的制备
按处方比例及制备工艺, 制成不含枸橼酸钠和氯化钠的阴性样品溶液。
2.6 专属性试验
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液各10ml, 置已处理好的阳离子交换树脂柱中, 按“2.2”项下的测定方法测定, 阴性样品测定无干扰[3]。
2.7 标准曲线及线性范围
分别精密吸取“2.3.1”、“2.3.2”项下的对照品溶液4.0、7.0、10.0、13.0、15.0ml, 置已处理好的阳离子交换树脂柱中, 按“2.2”项下的测定方法测定分析, 结果表明枸橼酸钠在5.68~21.30mg范围内与消耗氢氧化钠滴定液的体积呈良好的线性关系, 标准曲线方程为Y=0.6456X-0.3442, r=0.9996。
2.8 精密度试验
分6次精密吸取供试品溶液10ml, 置已处理好的阳离子交换树脂柱中, 按“2.2”项下的测定方法测定枸橼酸钠的含量, RSD为0.86%。见表1。
2.9 加样回收率试验
分别精密吸取已知含量供试品5ml (共9份) , 再按低、中、高浓度分别精密加入枸橼酸钠标准品储备液 (1.42mg/ml) 4.0、5.0、6.0ml (各3份) , 并按“2.2”项下的测定方法进行测定。计算枸橼酸钠的含量和回收率, 结果平均回收率为100.3% (n=9) , RSD为0.96%。见表2。
2.1 0 样品含量测定
取3批复方枸橼酸钠合剂 (20120513, 20120808, 20121126) , 每批取3份, 精密吸取10ml, 置已处理好的阳离子交换树脂柱中, 按“2.2”项下的测定方法测定, 计算枸橼酸钠的含量。见表3。
3 讨论
采用离子交换法对制剂进行含量测定, 检测方法精密度好, 回收率高, 结果稳定可靠。可用于该制剂的质量控制方法, 适用于医院制剂分析。
摘要：目的 建立复方枸橼酸钠合剂中枸橼酸钠的含量测定方法。方法 采用离子交换法测定复方枸橼酸钠含剂中枸橼酸钠的含量。结果 枸橼酸钠在5.68~21.3mg (r=0.9996) 范围内与消耗氢氧化钠滴定液的体积呈良好的线性关系;平均回收率为100.3% (RSD=0.86%, n=9) 。结论 离子交换法测定复方枸橼酸钠合剂中枸橼酸钠的含量简便、准确、结果可靠, 可用于该制剂的含量测定。
关键词：复方枸橼酸钠合剂,枸橼酸钠,离子交换法
参考文献
[1] 中国人民解放军总后勤部卫生部.医疗机构制剂规范[M].北京:人民军医出版社, 2002:10.
[2] 中华人民共和国卫生部药政局.中国医院制剂规范[M].北京:中国医药科技出版社, 1995:43-44.
[3] 谭生建, 刘刚, 邱冬, 等.高效液相色谱法测定枸橼酸钾溶液中枸橼酸钾的含量[J].解放军药学学报, 2011, 27 (1) :69-71.
氯酸钠法 篇2
一．目的要求
1.掌握实验中药物特殊杂质的来源和检察原理。
2.掌握高效液相色谱法用于特殊杂质检查及含量测定的方法。
二、实验方法
有关物质取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；取地塞米松对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释成每1ml中约含1mg的溶液，作为对照品溶液；精密量取供试品溶液与对照品溶液各1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使地塞米松磷酸钠色谱峰的峰高为满量程的15%～20%，再精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中如有与地塞米松保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，含量不得超过0.5%；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液中地塞米松磷酸钠峰面积的1/2，其他杂质峰面积的和不得大于对照溶液中地塞米松磷酸钠峰面积的2倍。
【含量测定】照高效液相色谱法（附录V D）测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以三乙胺溶液（取三乙胺7.5ml，加水至1000ml,用磷酸调节pH值至3.0±0.05）－甲醇－乙腈（55：40：5）为流动相；检测波长为242nm.理论板数按地塞米松磷酸钠峰计算一般为7000，地塞米松磷酸钠与地塞米松的分离度应大于4.4。
测定法 取本品适量，精密称定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，用流动相定量稀释制成每1ml中含40μg的溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取地塞米松磷酸钠对照品适量，精密称定，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
四、注意事项：
五、思考题：
1.何谓反相高效液相色谱法？其常用的固定相和流动相有哪些？如何选择？
氯酸钠法 篇3
1仪器与试药
1.1 仪器
岛津高效液相色谱系统, LC-10AT高压泵, SIL-10A自动进样器, SPD-10A检测器, CTO-10A柱温箱。
1.2 试药
阿仑膦酸钠 (三水合物) 对照品 (批号:BFI9865) , 含量100.4%, 由韩国Yuyu Inc.公司提供;阿仑膦酸钠骨化三醇片 (批号:05487、05601、05602) , 由韩国Yuyu Inc.公司提供;FMOC (氯甲酸芴甲酯, 9-fluorenylmethyl chloroformate) 试剂为上海Medpep Co.Ltd.产品, 纯度:99%;乙腈、甲醇为HPLC级;二氯甲烷、磷酸氢二钠、枸橼酸钠、硼酸、氢氧化钠为分析纯试剂;水为去离子水。
1.3 柱前衍生化条件和色谱条件
1.3.1 柱前衍生化条件:
精密量取供试品溶液或对照品溶液5ml, 置50ml具塞离心管中, 加0.1mol/L硼酸钠缓冲溶液 (取硼酸6.2g溶于900ml水中, 用1mol/L氢氧化钠溶液调pH至9.0, 再用水稀释至1 000ml) 5.0ml, 混匀, 再加入0.1%FMOC试液 (取氯甲酸芴甲酯100mg, 用乙腈溶解并稀释至100ml) 4.0ml, 涡流混合30s后室温放置25min。随后加入二氯甲烷25ml, 涡流混合30～60s, 放置5min, 离心, 取上清液进样。
1.3.2 色谱条件:
色谱柱:Hamilton PRP-1柱 (5μm, 4.1mm×15cm) 。流动相:乙腈-甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠和0.05mol/L枸橼酸钠混合液 (用磷酸调pH8.0) (20∶5∶75) 。柱温35℃, 流速每分钟1.0ml, 进样量50μl, 检测波长266nm。色谱图见图1。
2方法与结果
2.1 线性实验
精密称取阿仑膦酸钠 (三水合物) 对照品6.53mg (相当于阿仑膦酸5mg) , 置50ml量瓶中, 用0.1mol/L枸橼酸钠溶液溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为储备溶液。精密量取储备溶液1、2、5、3、3ml分别置20、25、50、25、20ml量瓶中, 用0.1mol/L枸橼酸钠溶液稀释至刻度, 摇匀, 即得线性试验用系列浓度溶液。按浓度从小到大的顺序精密量取各溶液5ml, 按“1.3.1”项下方法, 自“置50ml具塞离心管中……”起进行柱前衍生, 取所得到的上清液50μl分别进样, 记录色谱图, 以峰面积 (Y) 对浓度 (X) 进行回归, 得回归方程为:Y=100 001.286 X-11 630.276, r=0.99998 (n=5) 。这表明阿仑膦酸钠 (以阿仑膦酸计) 在5～15μg/ml的浓度范围内线性关系良好。
A、对照品溶液;B、供试品溶液
2.2 回收率实验
2.2.1 对照品溶液的配制:
精密称取阿仑膦酸钠 (三水合物) 对照品6.53mg (相当于阿仑膦酸5mg) , 置50ml量瓶中, 用0.1mol/L枸橼酸钠溶液溶解并稀释至刻度, 摇匀, 再精密量取此溶液5ml置50ml量瓶中, 用0.1mol/L枸橼酸钠溶液稀释至刻度, 摇匀, 即得 (每1ml含阿仑膦酸约10μg) 。
2.2.2 回收率实验:
精密称取阿仑膦酸钠 (三水合物) 对照品约130mg (相当于阿仑膦酸100mg) , 置100ml量瓶中, 用0.1mol/L枸橼酸钠溶液溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为回收率实验用对照品储备溶液。分别精密称取片粉适量 (约相当于阿仑膦酸4、5、6mg) , 置100ml量瓶中, 分别精密加入上述回收率实验用对照品储备溶液4、5、6ml, 加0.1mol/L枸橼酸钠溶液50ml, 振摇30min后, 再超声5min, 用同一溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 再精密量取上清液5ml, 置50ml量瓶中, 用同一溶剂稀释至刻度, 摇匀, 即得浓度分别相当于测定浓度的80%、100%、120%的回收率实验溶液各3份, 共9份。取对照品溶液和各回收率实验溶液, 按“1.3.1”项下的方法进行柱前衍生后再依法测定, 结果见表1。
2.3 稳定性实验
取“2.2”项下的对照品溶液, 在室温下放置, 分别在0、1、2、3、5和7h时进样, 记录各次进样的峰面积, 计算各峰面积的RSD为0.7%, 表示溶液在室温放置7h内稳定。
2.4 精密度实验
取“2.2”项下的对照品溶液连续进样6次, 记录其峰面积, 计算得峰面积的RSD为0.3%, 表明方法的精密度良好。
2.5 样品测定
取本品20片, 精密称定, 研细, 精密称取细粉适量 (约相当于阿仑膦酸10mg) , 置100ml量瓶中, 加0.1mol/L枸橼酸钠溶液50ml, 振摇30min后, 再超声5min, 用同一溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 再精密量取上清液5ml置50ml量瓶中, 用上述枸橼酸钠溶液稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液。另精密称取阿仑膦酸钠 (三水合物) 对照品适量, 用0.1mol/L枸橼酸钠溶液溶解并制成每1ml中含阿仑膦酸10μg的溶液作为对照品溶液。取供试品溶液和对照品溶液, 按“1.3.1”项下的方法进行柱前衍生后, 再取所得到的上清液50μl进样, 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算含量。测得3批样品阿仑膦酸钠的含量 (以阿仑膦酸计) 分别为100.6% (批号05601) 、105.4% (批号05602) 、103.0% (批号05487) 。
3讨论
3.1 实验中所用的对照品为阿仑膦酸钠三水合物, 换算为阿仑膦酸时应乘以系数0.7662, 该系数是根据The Merck Index 13版收载的阿仑膦酸和阿仑膦酸钠 (三水合物) 的分子量计算出来。
3.2 本品为肠溶片, 采用0.1mol/L枸橼酸钠溶液为溶剂将阿仑膦酸钠溶出, 经实验先振摇30min, 再超声5min, 已能使阿仑膦酸钠充分溶出, 振摇超声的时间太短则不能使阿仑膦酸钠充分溶出, 故试验时应保证振摇和超声的时间。
3.3 本检验方法为柱前衍生法, 衍生反应是在0.1mol/L的硼酸缓冲液 (pH9.3) 中进行, 用0.1%的FMOC试液反应产生衍生物, 然后用二氯甲烷提取掉多余的衍生试剂。衍生时的操作对结果的准确性影响较大, 衍生反应每步的试剂添加顺序、各步的反应时间、温度均应严格控制。
摘要：目的建立阿仑膦酸钠骨化三醇片中阿仑膦酸钠的含量测定方法。方法用0.1%FMOC的乙腈溶液进行柱前衍生, 色谱柱填料为苯乙烯-二乙烯苯共聚物 (Hamilton PRP-1柱适用) ;流动相为乙腈-甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠和0.05mol/L枸橼酸钠混合液 (用磷酸调pH8.0) (20∶5∶75) ;检测波长266nm。结果阿仑膦酸钠 (以阿仑膦酸计) 在5～15μg/ml的浓度范围内有良好的线性关系 (r=0.99998, n=5) ;平均回收率为100.8%, RSD=1.1% (n=9) 。结论该方法稳定, 准确度、精密度高, 重复性好, 可用于阿仑膦酸钠骨化三醇片中阿仑膦酸钠的含量测定。
关键词：柱前衍生,HPLC,阿仑膦酸钠,含量测定
参考文献
[1]孟迅吾.二膦酸盐防治骨质疏松症的进展[J].基础医学与临床, 1998, 18 (60) :11.
[2]林华, 包丽华, 韩祖斌, 等.双膦酸盐类药物治疗骨质疏松症[J].中国骨质疏松杂志, 2004, 10 (1) :77-79.
[3]张晓青, 徐智儒, 蒋晔.双膦酸类药物的分析[J].中国药学杂志, 2004, 39 (4) :249-252.
[4]谢智远, 廖锦红.高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠片的含量[J].中国药房, 2001, 12 (9) :558.
氯酸钠法 篇4
关键词：夫西地酸钠,HPLC,含量测定
夫西地酸钠是一种具有甾体骨架的抗生素,它通过抑制细菌的蛋白质合成而产生杀菌作用,对一系列革兰氏阳性细菌有强大的抗菌作用。葡萄球菌,包括对青霉素、甲氧西林和其他抗菌素耐药的菌株,均对本品高度敏感。夫西地酸钠与临床使用的其他抗菌药物之间无交叉耐药性。夫西地酸钠毒性极低,与临床使用的其他抗菌药物之间无交叉过敏性,因此可用于治疗对其他抗菌素禁忌的患者,如对青霉素或其他抗菌素过敏者。为了控制该产品的质量,本实验建立了用HPLC法测定夫西地酸钠的含量并证明其方法的可行性。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪:岛津LC-10AT高效液相色谱仪,日本岛津LC-10ATvp泵,SPD-10Avp型紫外检测器,CTO-6A型柱恒温箱;浙江大学N2000色谱工作站;色谱柱:Diamonsil®(钻石)C18(250×4.6mm 5μm),UV-1601PC紫外分光光度计(日本岛津)。
夫西地酸钠对照品:Fusidic acid sodium salt,minimum 98% HPLC 批号:036K1612 Product of DENMARK。MSDS;注射用夫西地酸钠:成都天台山制药有限公司,剂型:冻干粉针,规格:500mg/瓶,批号:20080201。甲醇、乙腈均为色谱醇;磷酸为分析纯;水为注射用水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适用性试验
色谱柱为:Diamonsil®(钻石)C18(250×4.6mm 5μm);流动相:0.05mol/L磷酸-乙腈-甲醇(40∶50∶10);检测波长:235nm;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;理论塔板数按夫西地酸钠峰计算应不低于2 000。
2.2 检测波长的确定
取夫西地酸钠对照品适量,加流动相溶解后并稀释至刻度,配制成3mg/L的溶液,以流动相为空白,在200～400nm波长范围内扫描。结果表明,夫西地酸钠在235nm波长处有最大吸收。
2.3 测定方法
取本品适量置容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1mL,置10mL量瓶中,用流动相溶液稀释至刻度,摇匀;精密量取10μL注入液相色谱仪,记录色谱图;另取夫西地酸钠对照品约50mg,精密称定,置50mL量瓶中,加流动相溶解后并稀释至刻度,摇匀;同法测定。按外标法以峰面积计算,即得。
2.4 方法专属性考察
照2.2项下的方法操作,供试品溶液、对照品溶液和空白溶液的色谱图见图1。流动相在夫西地酸钠峰处无干扰,夫西地酸钠与相邻杂质峰的分离度符合要求。
2.5 线性关系考察
取夫西地酸钠对照品对照品适量,精密称定,用流动相稀释制成1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、24.0、32.0mg/L系列浓度的溶液,照2.1项下条件,分别精密吸取10μL注入高效液相色谱仪,记录色谱图。以峰面积(Y)对浓度(X)进性线性回归,得线性回归方程为Y=362 978.671 5,X-4 988.97,相关系数为:r=0.999 9,结果表明:本品在4.0～32.0mg/L范围内,夫西地酸钠浓度与峰面积呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
取夫西地酸钠对照品对照品适量,精密称定,用流动相,稀释制成8.0、16.0、24.0mg/L溶液,分别精密吸取10μL注入高效液相色谱仪,重复进样5次。各浓度峰面积的RSD分别为0.66%、0.78%、0.85%(n=5),表明一切仪器精密度(进样与峰面积检测精密度)良好。
2.7 重复性实验
取同一批样品(批号:20080201)用流动相稀释制成每1mL中含夫西地酸钠100μg的溶液6份,照2.2项下方法,按外标法测定夫西地酸钠的标示百分含量,分别为99.80%、100.08%、99.96%、100.21%、99.78%、,100.35%,RSD为0.23%,表明本方法重现性良好。
2.8 稳定性试验
照2.2项下方法,对同一样品(批号:20080201)溶液(1mg/mL),在室温下于不同时间(1、2、3、4、6、8h)分别进样10μL,计算峰面积的RSD。结果:RSD=0.66%,说明供试品溶液在8h内稳定性良好。
2.9 回收率试验
于空白辅料中,按处方量加入夫西地酸钠对照品适量,用流动相制成低、中、高3种浓度夫西地酸钠溶液(7.6、15.8、30.5mg/L),按外标法分别测定并计算回收率及RSD。结果见表1。
2.10 样品含量测定
取3批样品,照2.2项下方法测定。结果各批样品中含夫西地酸钠标示百分含量分别为100.22%、99.85%、100.45%。
3 讨 论
精密称取本品对照品适量,3mg/L的溶液,以流动相为空白,在200～400nm波长范围内进行紫外扫描。结果表明,夫西地酸钠在235nm波长处有最大吸收,故选235nm为本品含量测定的波长。夫西地酸钠为碱性化合物,本文使用0.05mol/L磷酸为流动相能使夫西地酸钠的有效保留时间控制在适应的范围内,流动相中加入0.05mol/L磷酸也是因为磷酸为弱酸,因其性质比较稳定且有利于保护色谱柱;醋酸也为弱酸,不用醋酸是因为醋酸易挥发而且性质也不如磷酸稳定。
综上所述,本方法简单、快速、准确,重现性好,可用于注射用夫西地酸钠冻干粉针的含量测定。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[S].2005年版.北京:化学工业出版社,2005:141.
氯酸钠法 篇5
1 仪器与试药
LC-2010高效液相色谱法仪(日本岛津);U-2001紫外可见分光光度计(日本日立公司);阿仑膦酸钠对照品(批号:100901-200601,中国药品生物制品检定所),阿仑膦酸钠片(固邦)(石药集团欧意药业有限公司,规格:每片10 mg,批号:007110201、007110401、007111001;每片70 mg,批号:152110501、152110801、152111001);9-芴基甲基氯甲酸酯为进口试剂,乙腈和甲醇为色谱纯,其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:PLRP-S 100A(4.6 mm×250 mm,8μm);流动相:缓冲盐(取柠檬酸钠14.7 g和磷酸氢二钠7.05 g加水溶解并稀释至1 000 mL,用磷酸调节pH值为8.0)-乙腈-甲醇(75∶20∶5);检测波长:266 nm;流速:1.0 mL/min。
2.2 溶液配制
2.2.1 供试品溶液
精密称取本品细粉适量(约相当于阿仑膦酸10 mg),用稀释液(取柠檬酸钠29.4 g,加水溶解并稀释至1 000 mL)溶解并稀释制成20μg/mL的溶液,摇匀,滤过,精密量取续滤液5 mL,置50 mL盛有5 mL硼酸盐溶液(取硼砂19.1 g,加水溶解并稀释至1 000 mL)的离心分离管中。加入5 mL 9-芴基甲基氯甲酸酯溶液(取9-芴基甲基氯甲酸酯,用乙腈溶解制成每1 mL含0.5 mg的溶液),振摇30 s,在室温下放置25 min,加入25 mL二氯甲烷,振摇1 min,离心分离(2 000 r/min)5 min,取上清液作为供试品溶液。
2.2.2 对照品溶液
精密称取阿仑膦酸钠对照品适量,用稀释液溶解并稀释制成20μg/mL的溶液,精密量取5 mL同法制成对照品溶液。
2.3 检测波长的选择
取阿仑膦酸钠对照品溶液,照分光光度法,在200～400 nm波长范围内扫描。结果阿仑膦酸钠在266 nm波长处有最大紫外吸收,故选择266 nm作为检测波长。
2.4 空白辅料干扰试验
按样品的处方配制空白辅料,制成空白辅料溶液。取对照品溶液、供试品溶液和空白辅料溶液按上述色谱条件进样分析,记录色谱图,见图1。结果表明辅料对测定无干扰。
2.5 标准曲线制备
精密称取阿仑膦酸钠对照品适量,用稀释液溶解并稀释制成1 mL含阿仑膦酸200μg的溶液,作为储备液。再分别用稀释液依次稀释成浓度(C)分别为84.2、42.1、21.0、10.5、5.3μg/mL的溶液,分别精密量取各溶液5 mL,按“2.2”项下方法制成对照品溶液。各量取20μL注入液相色谱仪并记录阿仑膦酸钠色谱峰面积(A)。将峰面积(A)与浓度(C)作线性回归,得标准曲线方程为:A=31 769C-25 538,相关系数r=0.999 9。结果表明:阿仑膦酸在5.3～84.2μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好线性关系。
2.6 精密度测定
取浓度为21.0μg/mL的对照品溶液,连续进样6次,记录色谱图,RSD为0.61%,符合精密度试验要求。
2.7 稳定性试验
取浓度为21.0μg/mL的对照品溶液,在0、2、4、8、12 h分别进样20μL,记录峰面积,结果峰面积与0 h相比基本不变,阿仑膦酸钠峰面积的RSD为0.74%,表明本溶液在12 h内稳定。
2.8 加样回收率试验
精密称取批号为007110201的样品细粉(约相当于阿仑膦酸10 mg)6份,置于1 000 m L量瓶中,分别加入阿仑膦酸钠对照品10 mg,用稀释液溶解并稀释稀释至刻度,照“2.2”项下方法制备样品溶液,测定含量6次。平均回收率为98.65%,RSD(n=6)为0.32%。
2.9 重现性试验
取同一批样品,照“2.2”项下方法制备样品溶液,测定含量5次。阿仑膦酸钠平均标示百分含量为99.4%,RSD为0.52%。
2.1 0 样品含量测定
取10 mg规格和70 mg规格各三批样品,按“2.2”项下供试品处理方法处理,在选定的色谱条件下测定,按外标法计算含量。本法与国家食品药品监督管理局局颁标准WS1-(X-312)-2004Z[6],测得结果基本一致。见表1。
3 讨论
阿仑膦酸钠因既无紫外吸收又无荧光吸收,不能直接用紫外分光光度法测定,原国家药品标准采用钼蓝比色法显色后采用紫外分光光度法测定,易受辅料影响造成含量测定结果异常。本文尝试用高效液相色谱法进行测定,方法学研究表明本法系统适用性良好,可以避免辅料的干扰,简化了试验步骤,且快捷,专属性好,含量测定结果准确可靠。目前国内生产阿仑膦酸钠片的厂家较多,含量测定可用于考察各厂质量情况,为临床选择提供依据。
摘要：目的 建立高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠片的含量。方法 色谱柱为PLRP-S 100A(4.6 mm×250 mm,8μm),流动相为缓冲盐(取柠檬酸钠14.7 g和磷酸氢二钠7.05 g加水溶解并稀释至1 000 mL,用磷酸调节pH值为8.0)-乙腈-甲醇(75∶20∶5),检测波长为266 nm,流速为1.0 mL/min。结果 阿仑膦酸的质量浓度在5.3～84.2μg/mL内呈良好的线性相关性,相关系数r=0.999 9,平均回收率为99.65%(RSD=0.62%,n=9),含量符合规定。结论 方法学研究表明本法系统适用性良好,该方法准确、可靠、简便、易行,可作为制剂的含量测定方法。
关键词：阿仑膦酸钠片,含量,高效液相色谱法
参考文献
[1]谢智远,廖锦红.高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠片的含量[J].中国药房,2001,12(9):558.
[2]杨柳,余邦良.阿仑膦酸钠片含量测定方法学研究[J].海南医学,2010,21(5):59-61.
[3]林慧菁,杨乐,蔡烁佳,等.2,4-二硝基氟苯柱前衍生化HPLC法测定阿仑膦酸钠片的含量[J].广东药学院学报,2010,26(4):369-372.
[4]蒋晔,谢赞,张嫡群.离子对反相高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠片含量及其有关物质[J].分析化学,2006,6(6):835-838.
[5]The European Pharmaco Poeia Commission.European Pharmacopoeia[S].4 th edition.Strasboury:EDOM,2011:1782.
氯酸钠法 篇6
1材料与方法
1.1仪器与试剂
1.1.1仪器配有EGC淋洗液自动发生器,电导检测器和Chromeleon6.8色谱工作站的DIONEX ICS-2000型离子色谱仪(美国DIONEX);Synergy UV型超纯水系统(美国MILLIPORE);Ultrasonic Bath XB3超声波水浴 (英国GRANT );Heraeus Multifuge X1R离心机 (美国THERMOFISHER);手动固相萃取装置 (美国AGLIENT)。
1.1.2试剂1 000 mg/L氯酸盐标准溶液购自农业部环境保护科研监测所(SB05-223-2008),溶液均用电阻率为18.5 MΩ·cm超纯水配制;0.45 μm滤膜;C18小柱:美国AGLIENT。
1.2色谱条件色谱柱:Ion Pac AS19型阴离子分析柱 (250 mm×4 mm)、Ion Pac AG19型保护柱 (50 mm×4 mm);淋洗液自动发生器(EGC) 在线自动产生10~35 mmol KOH淋洗液梯度淋洗,流速为1.0 ml/min(梯度见表1);100 μl进样体积,ASRS-ULTRA-4 mm阴离子抑制器,抑制电导检测,抑制电流为80 m A;色谱运行时间为23 min,以保留时间定性,峰面积定量。
1.3测定方法
1.3.1样品前处理将龙眼样品剥壳去核后匀浆,称取制备好的样品5.0 g于50 ml的容量瓶中,加入约30 ml超纯水,超声提取30 min后用超纯水定容至刻度。离心20 min(最大离心力为24 700×g)取上清液过C18小柱净化处理,过柱后的液体经0.45 μm滤膜过滤,收集滤液直接进样检测。
1.3.2标准溶液的配制准确移取0.5 ml的1 000 mg/L氯酸盐标准溶液到50 ml容量瓶,用超纯水定容, 摇匀备用,此标准溶液的浓度为10 mg/L;依次移取0.05、0.1、0.2、0.4、0.8和1.0 ml新鲜配制的10 mg/L氯酸盐标准溶液倒10 ml的容量瓶中,用超纯水定容、摇匀,分别配制成浓度为0.05、0.10、0.20、0.40、0.8和1.00 mg/L氯酸盐标准系列溶液。
2结果与讨论
2.1样品的制备样品前处理技术对提高离子色谱测定结果的准确性、分离检测的选择性和灵敏度具有十分关键的作用,同时也避免了色谱柱的损坏。对于溶性固体样品中可溶性组分的提取,最简单有效的方法是溶剂萃取(浸取)法,即直接用超纯水或淋洗液提取,也可以用适量的酸、碱、盐或缓冲溶液提高浸取的效率。 另外,为了充分提取,辅以振荡或超声波处理[6,7]。基体干扰的去除:用固相萃取法,反相固相萃取是液相色谱中样品盒去除基体干扰的反过程,当样品溶液通过反相萃取柱时,有机杂质或亲脂性物质被色谱柱保留,而无极离子不被保留,从而达到有机物和无机离子分离、 除去基体干扰的目的[8]。
龙眼中的氯酸盐易溶于水,所以,龙眼样品选择用超纯水作为提取液,超声提取后离心,取上清液过C18小柱除去色素和有机物,获取相对净化的样品溶液,再经0.45μm滤膜除去颗粒物后直接进样检测。
2.2分离柱的选择本次实验选用的Ion Pac AS19柱是以氢氧化物为淋洗液的高容量阴离子交换柱。主要用于分析卤素含氧酸和饮用水、地表水、废水和其它复杂样品基体中的常见无机阴离子,包括F-、Cl O2-、Br O3-、 Cl-、NO3-、PO43-和SO42-。Ion Pac AS19柱是以氢氧化钾为淋洗液,梯度洗脱,抑制型电导直接检测。
2.3淋洗液浓度和流速的选择通常在分析卤素及其含氧酸时,色谱柱的淋洗液采用的是氢氧化钠或者氢氧化钾。不同浓度淋洗液对氯酸根在分离柱上的保留时间和检测有很大影响,增加淋洗液浓度,氯酸根的保留时间会缩短,但会出现与其他离子分不开的现象,影响分离效果;降低淋洗液浓度,会使氯酸根的保留时间增加,使分析周期延长。为保证氯酸根既能和其他离子完全分开,又能够尽量加快分析速度,本实验采用梯度淋洗的方式,见表1。
2.4标准及样品分析结果取浓度为0.1 mg/L的氯酸盐标准溶液进样,获取氯酸盐标准溶液检测的色谱图, 见图1。
共检测了不同地区市售的6份龙眼样品,每份样品平行测定,检测结果均 < 0. 3 mg/kg,其中1份样品检测结果见图2。
2.5线性与检出限配制浓度分别为0.05、0.10、0.20、 0.40、0.80和1.00 mg/L氯酸盐标准系列溶液,依次进样,对方法进行线性测定。以标准溶液的质量浓度为横坐标,相应峰面积为纵坐标绘制标准曲线,得到氯酸盐的线性回归方程为Y=0.444X-0.012,相关系数0.999 9, 见图3。以信噪比(S/N)为3和10分别计算,其检出限和定量限分别为0.03和0.10 mg/L。
2.6方法的精密度配制浓度为0.10 mg/L氯酸盐标准溶液连续6次进样测定,峰面积的均值为0.036 9 μS×min,标准偏差(RSD)为1.135 %,保留时间的均值为8.865 min,RSD为0.041%;表明低浓度样品连续进样峰面积及保留时间均可保持较好的重现性,见图4。
2.7方法的准确度取空白龙眼样品(氯酸盐检测结果 < 0. 3 mg/kg) 加入适量氯酸盐标准溶液进行加标回收率测定。分别取10 mg/L的氯酸盐标准溶液0.25、 0.5、1.0和2.5 ml加入同样的4份空白龙眼样品,使其含量分别为0.5、1.0、2.0和5.0 mg/kg,按1.3.1方法进行前处理,然后进样分析,每个样品进行6次平行测定,计算其回收率。结果回收率范围在86.2%~101.3%之间,平均回收率在91.6~96.9%之间,RSD<5%。见表2。
3结论
使用Ion Pac19柱、KOH等度淋洗、抑制电导的离子色谱检测方法即可简单快速地检测龙眼中的氯酸盐残留量。本方法100 μl进样时,检出限可达到0.03 mg/L(0. 3 mg/kg),定量限可达0.10 mg/L(0.10 mg/kg), 低浓度标准(0.10 mg/L)连续进样保留时间及峰面积均可保持 较好的重 现性 ,样品加标 平均回收 率在91.6%~96.9%之间,RSD< 5%(0.5~5 mg/kg)。所以本方法具有灵敏度高、准确度好、受干扰小、操作简单的特点。
氯酸钠法 篇7
目前,国内外研究各种降解高氯酸盐的方法开展较广[6—9]。其中,将金属作为还原剂来降解高氯酸盐为环境中的高氯酸盐污染修复提供了一种新的途径[[10,11,12]。铝的含水氧化物是一类重要的土壤矿物质,虽然在土壤中含量不大,但由于这类矿物质具有较大的比表面积和较高的反应活性,被认为是土壤中很多无机和有机污染物的重要的一个吸附载体[13]。Lang等[14]进行的电化学研究表明,铝对高氯酸盐污染物也有一定的还原去除效果,但是去除比例很小。另一方面,Sposito等[15]认为铝在反应过程中的腐蚀产物氢氧化铝可以作为吸附剂有效吸附去除高氯酸根离子。因此,为了能更好的研究这一种降解高氯酸盐的途径,本文将制备的氢氧化铝用于高氯酸盐的降解试验之中,开展了其对高氯酸盐的吸附性能研究,分析p H及投加量等因素对吸附效应的影响规律,研究其重复利用性,确立吸附反应的机制。
1 试验材料与方法
1.1 试验材料与仪器设备
1.1.1 试验材料
氢氧化铝:人工制备。
试验用水:人工配制2 mg·L-1的高氯酸根模拟废水。
1.1.2 试验试剂
铝粉、高氯酸钠、乙腈、浓硫酸、无水碳酸钠、氢氧化钠、盐酸。
1.1.3 试验仪器与设备
分析天平(赛多丽斯科学仪器有限公司)、台式恒温振荡器(金坛市医疗仪器厂)、优普超纯水制造系统(成都超纯科技有限公司)、IC双抑制型离子色谱仪(瑞士万通)、超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、冷冻干燥机(北京松源华兴科技有限公司)、p H计(上海洪富仪器仪表有限公司)、X射线衍射仪(D8 ADVANCE)、场发射扫描电子显微镜(JSM—7001F)。
1.2 试验方法
氢氧化铝制备及表征:将一定量的酸洗零价铝投加入含有适量去离子水的反应瓶中,置于台式恒温振荡器,45℃,40 r/min条件下,水热反应氧化12 h。样品进行XRD表征并在喷金后作SEM观测。
制备的氢氧化铝吸附高氯酸根研究:所用高氯酸根模拟废水体积为200 m L,初始浓度均为2 mg·L-1,反应温度25℃、振荡速率为180 r/min,反应时间3 h。主要进行以下试验:
(1)在p H=4.5下,氢氧化铝投加量分别为15g·L-1,25 g·L-1,35 g·L-1,恒温振荡,反应过程中每隔一段时间取样IC分析高氯酸根浓度变化。
(2)设立p H值为3、4.5、6.5、9、11,利用HCl或Na OH调节高氯酸根模拟废水p H值,氢氧化铝投加量为50 g·L-1,取样IC分析不同p H值下3 h后高氯酸根的剩余浓度。
(3)在p H=4.5下,氢氧化铝投加量为50 g·L-1,连续三次进行高氯酸根吸附试验;每次吸附后,用适量1.0 mol·L-1稀盐酸和大量蒸馏水先后清洗氢氧化铝,去除表面已吸附的高氯酸根,再生其吸附能力;弃其反应液,再次添加经p H调节的高氯酸根模拟废水,进行第二次试验;取样IC分析三次吸附试验的吸附效率。
2 试验结果与讨论
2.1 制备的氢氧化铝XRD表征
采用X射线衍射仪,扫描速度为5°·min-1,2θ范围为10°~80°。对制备氢氧化铝进行XRD表征,如图1所示。制备的氢氧化铝其XRD图谱在2θ=27.86°、38.14°、64.88°位置出现了分别对应于立方结构勃姆石[γ-Al OOH]的(120)、(140)、(231)晶面的特征衍射峰;在18.62°和20.14°位置上出现了对应于拜耳石[α-Al(OH)3]的(001)和(110)晶面的最强和次强衍射峰[16],说明制备的氢氧化铝主要是由勃姆石结构及拜耳石结构的氢氧化铝组成。
2.2 制备的氢氧化铝SEM表征
制备合成的氢氧化铝经扫描电镜观测,其SEM表征图谱,如图2所示。
图2采用扫描电镜(SEM)观测所制备的氢氧化铝的形貌,结果示于图2。由图2可见,所制备的氢氧化铝呈现为大小约1μm的片状颗粒,颗粒间存在轻微的团聚现象,整体分散性较好,其表面粗糙不平,结构疏松,暗示其具有较大的孔隙度和比表面积,有可能具有良好的吸附活性以有效地吸附高氯酸根离子。
2.3 投加量对吸附效率的影响
高氯酸根模拟废水初始浓度为2 mg·L-1,p H调节至4.5,制备的氢氧化铝投加量分别为15 g·L-1,25 g·L-1,35 g·L-1,25℃,180 r/min下,恒温振荡,取样IC分析高氯酸根浓度变化,吸附率随时间的变化如图3。
由图3所示,制备氢氧化铝能够快速吸附反应液中的高氯酸根,15、25、35 g·L-1的制备氢氧化铝在30 min时的吸附率分别能够达到44%、52%、72%;30 min以后,吸附率均有一定程度的提高并趋于稳定,3 h内测得的高氯酸根最高吸附率分别为46%、52%、73%左右。投加量对高氯酸根吸附影响呈正相关,吸附率随着氢氧化铝投加量的增加而增大,这是由于氢氧化铝表面含有与高氯酸根离子作用的吸附位点,因此增大投加量能够提供更多的吸附点位,相当于提高了有效吸附面积,从而提高去除效率。
2.4 p H值对氢氧化铝吸附效率的影响
高氯酸根模拟废水200 m L,初始浓度为2 mg·L-1,氢氧化铝投加量为50 g·L-1,反应温度25℃,振荡速率180 r/min,试验设立p H值为3、4.5、6.5、9、11,反应3 h后,取样IC分析不同p H值下高氯酸根的吸附率如图4。
如图4所示,不同p H条件下,制备氢氧化铝对氯酚的吸附率随p H的升高而降低,呈负相关。在p H=3时,高氯酸根吸附率达到93%;p H=4.5时,吸附率达到85%左右;在p H=6.5偏中性条件下,吸附率为45%左右;在p H=9、11时,碱性环境下,吸附率不超过25%。由此可见,制备氢氧化铝在较低p H值条件下对高氯酸根具有更高的亲和力。
2.5 制备的氢氧化铝重复利用性研究
在p H=4.5下,制备的氢氧化铝投加量为50g·L-1,连续三次进行高氯酸根吸附试验,取样IC分析三次试验的吸附效率如图5。
如图5所示,在连续三次的重复吸附试验中,制备的氢氧化铝保持着良好的吸附能力,具有较好的重复利用性。第一次利用吸附率达到80%以上,第二次和第三次重复性用的吸附率有所降低,但也都达到70%以上;这可能是由于采用1.0 mol·L-1稀盐酸及去离子水对制备的氢氧化铝进行吸附能力再生时,造成了一定量的氢氧化铝物料损失,从而降低了吸附效率。
2.6 氢氧化铝对高氯酸盐的吸附机制
氢氧化铝的表面与铝原子相连的是两个独立的羟基官能团(也有可能是-OH2,具体取决于存在的环境p H),拥有很高的吉布斯自由能,反应活性很高,在化学反应中极有可能成为表面反应的位点[17]。氢氧化铝进入水溶液中可以吸附水分子,在其表面形成一层水化膜,表面的铝离子水化后形成不带电的表面羟基Al OH中性基团,在一定条件下,表面羟基可离子化而表现出Bronsted和Lewis酸碱性,其酸度取决于表面基团中心Al离子的酸度,并受界面静电场强度影响;不同的p H下,Al OH基团可吸附水中的H+或者OH﹣,从而形成Al OH2+或Al O﹣基团,使固体表面电位表现出带电性,反应方程式如下[18]:
氢氧化铝表面正电荷和负电荷的相对多少决定其净电荷表现为正或为负。而H+和OH﹣是特性吸附离子,表面电荷量可以表示为[18]
式(3)中,δ0为表面电荷量;F是法拉第常数(96 485C/mol);ΓH+和ΓOH﹣为表面的H+和OH﹣的电荷密度。由式(3)可见,氢氧化铝的表面特性与溶液p H密切相关。当体系的p H较小时,[H+]>[OH-]时,氢氧化铝以吸附H+为主,表面带正电荷;相反,在p H增大时,固体表面吸附更多的OH-,氢氧化铝表面带负电荷。氢氧化铝带正电的表面可以与溶液中的阴离子通过静电作用形成双电层离子对,反应式如下[19]:
本研究中,L-代表Cl O4-。氢氧化铝表面电位随着p H值的变大而变小,逐渐由正值变为负值,据相关文献资料记载,氢氧化铝的等电点(p H pzc)在7.7~9.4[20,21]。上文研究表明,在p H=3或4.5时,氢氧化铝高氯酸根吸附率分别达到到93%和85%;这是由于p H<p Hpzc时,氢氧化铝表面吸附了更多的氢离子带正电荷,可通过静电作用与高氯酸根离子形成离子对,高氯酸根吸附在离子表面,形成双电层,双电层的存在使粒子间相互排斥,提高其在溶液中的分散性,有利于吸附高氯酸根离子;而在p H>p Hpzc时,氢氧化铝表面吸附氢氧根带有负电荷,静电排斥溶液中的高氯酸根离子,同时OH-的电荷与Cl O4-相同,会与Cl O4-竞争吸附位,所以试验得出碱性条件下仅有15%~20%的高氯酸根被吸附。因此,氢氧化铝在较低p H下对高氯酸根具有更高的亲和力。此外,氢氧化铝对Cl O4-的吸附还可能包括配位体交换作用,反应式如下[18]:
在酸性条件下,高氯酸根的初始浓度影响着高氯酸根的吸附效率,这是由于,在一定浓度范围内,氢氧化铝正电表面通过静电作用吸附高氯酸根离子形成双电层,扩散层特性吸附大量高氯酸根离子,吸附率随着初始浓度的增大而增大;但随着高氯酸根浓度的进一步提高,溶液中的离子强度加大,压缩双电层的扩散层,使扩散双电层变薄,最终导致吸附率下降。
3 结论
本试验将经酸洗零价铝加入一定量的去离子水中,在45℃条件下,氧化12 h,制备合成氢氧化铝,探讨其对高氯酸根的吸附作用;开展投加量、p H值对吸附效率的影响及制备的氢氧化铝的重复利用性研究。主要结论如下:
(1)通过XRD表征显示制备的氢氧化铝特征衍射峰2θ角,主要成分为氢氧化铝。SEM形貌显示,制备的氢氧化铝表面粗糙不平,结构疏松,具有较大的孔隙度和比表面积。
(2)制备的氢氧化铝能够快速吸附反应液中的高氯酸根,15 g·L-1、25 g·L-1、35 g·L-1的制备氢氧化铝在3 h内测得的高氯酸根最高吸附率分别为46%、52%、73%左右。投加量对高氯酸根吸附影响呈正相关,吸附率随着投加量的增加而增大。
(3)在p H=3~11范围内,制备的氢氧化铝对高氯酸根的吸附率随p H值的升高而降低。在p H=3时,高氯酸根吸附率达到93%;p H=4.5时,吸附率达到85%左右;而在碱性环境下,仅有不超过25%的高氯酸根被吸附。
(4)制备的氢氧化铝连续三次的重复吸附试验中保持着良好的吸附能力,具有较好的重复利用性第一次利用吸附率达到80%以上,第二次和第三次重复性用的吸附率有所降低,但也都达到了70%以上。
(5)氢氧化铝有效吸附高氯酸根的主要机制是通过静电作用与高氯酸根阴离子形成离子对;在p H<p H pzc时,氢氧化铝表面均带有正电荷,可通过静电吸引作用有效吸附高氯酸根阴离子;在p H升高情况下,氢氧化铝表面带有负电荷,静电排斥溶液中的高氯酸根离子。
摘要：为了分析水热氧化法制备的氢氧化铝对高氯酸盐的吸附性能,开展了氢氧化铝投加量和pH值对高氯酸盐吸附效率的影响试验,以及氢氧化铝的重复利用性能研究。试验结果表明:水热氧化制备的氢氧化铝能够快速吸附反应液中的高氯酸根,投加量对高氯酸根吸附影响为正相关。pH=4.5条件下,35 g·L~(-1)的制备氢氧化铝在3 h内的高氯酸根吸附率为73%;在pH=4.5条件下,制备氢氧化铝在对高氯酸根的连续三次重复吸附试验中保持着良好的吸附效率,具有较好的重复利用性。此外,制备氢氧化铝对高氯酸根的吸附性能取决于溶液的pH值,吸附率随pH值的升高而降低,在pH=3,制备氢氧化铝投加量50 g·L~(-1)时,高氯酸根吸附率达到93%。氢氧化铝对高氯酸根的主要吸附机制为氢氧化铝正电表面通过静电作用与高氯酸根形成离子对。
氯酸钠法 篇8
实验
仪器与试剂
离子色谱系统
ICS-2000离子色谱仪 (Thermo) , 离子色谱系统配有EGC淋洗液自动发生器和Chromeleon6.8色谱工作站;
色谱柱:Ion Pac AS19, 7.5μm, 250×2m m (P/N:062886) ;Ion Pac A G 1 9, 1 1μm, 2 5 0×2 m m (P/N:062888) ;
柱温:30℃;
检测器:抑制型电导检测器;
抑制器:ASRS 300 2mm阴离子, 外接水模式, 16m A电流。
质谱检测器
API-3200三重四极杆串联质谱系统 (MS/MS) (美国ABI公司) , 配有电喷雾离子化源 (ESI) 和Analyst1.4.1工作软件。
试剂
氯酸钠、亚氯酸钠均为分析纯;
所用溶液均用电阻率为18.2MΩcm的超纯水配制。
分析条件
色谱条件
EGC淋洗液自动发生器在线自动产生KOH淋洗液, 采用淋洗液发生器产生的高纯KOH溶液, 浓度梯度洗脱, 浓度梯度程序:0~10min, 25mmol/L;10.1~20min, 60mmol/L;20.1min, 25mmol/L, 平衡4min;
流速:0.25m L/min;
进样量:200μL;
质谱条件
API-3200串联质谱联用仪;
负离子模式;源温度700℃;
离子源GS1:0.21MPa;离子源GS2:0.14MPa;气帘气压0.14MPa;碰撞气压0.034MPa;
离子喷雾电压-4 5 0 0 V;入口电压-10V;多反应监测 (MRM) 模式。
样品制备
样品前处理方法:不同品牌鲜牛奶购自本地超市, 取4m L牛奶于50m L小瓶中, 加入5m L乙腈沉淀蛋白, 涡旋振摇2min后, 将混合液转移至离心管中, 以6000r/min转速离心20min, 取上清液用去离子水稀释10倍过0.22μm的尼龙滤膜, 最后将清液过On Guard II RP前处理小柱 (美国Dionex公司) 后直接进样分析。样品加标处理方法相同。Dionex On Guard II RP柱填料是具有大孔结构的聚二乙烯基苯反相聚合物, 可以除去样品基体中的芳香染料、表面活性剂和一些大分子有机物, 以此来保护分析柱。
结果和讨论
实验条件的选择与优化
Ion Pac AS19分析柱的柱容量大、亲水性强, 背景低。本文以Ion Pac AS19为分析柱, EGC在线产生KOH为淋洗液, 串联质谱为检测器, 采用多反应监测模式 (MRM) 检测。MRM具有极高的选择性。采用KOH作为淋洗液, 淋洗液经抑制器16m A电抑制后进入质谱检测器, 从而消除无机酸和碱对质谱检测器的影响。质谱分析条件优化:首先针泵连续直接进样, 亚氯酸和氯酸Q1全扫描, 分别确定了亚氯酸根 (m/z 66.9) 和氯酸根 (m/z 83.8) 的母离子;进而对母离子进行二级质谱碎片离子扫描, 选择信号响应较高的确定为各母离子的子离子, 各得到两对离子对。然后分别优化Gas1、离子喷雾电压IS、气帘气Curtain Gas、解簇电压DP等参数, 选择最优参数使得信号稳定、灵敏度达到最佳。经过条件优化, 亚氯酸盐和氯酸盐能达到很好的分离和检测。
标准曲线与检出限
在选定的最佳条件下, 考察了该方法的检出限、精密度和线性范围。分别以66.9/51.0和83.8/67.0为亚氯酸盐和氯酸盐的定量离子对, 对峰面积进行定量, 两种离子的线性范围及检出限等参数列于表1。
实际样品分析
本文实际测定了3种品牌的牛奶样品。样品经前处理后进样分析, 并做加标回收实验。实际测定的3种牛奶样品中都没有检出亚氯酸盐, 而氯酸盐均检出, 但其含量均小于国家标准中对于饮用水中氯酸盐含量的要求 (见图1) 。
其分析结果及其加标回收结果列于表2。所测亚氯酸盐和氯酸盐的回收率分别在80%~110%和83%~91%之间。