血清应激激素（精选7篇）
血清应激激素 篇1
摘要：为了研究高海拔对引进奶牛血清中三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量的影响, 试验采用罗氏E601全自动电化学发光免疫仪对从澳大利亚、天津引进到青海高原的奶牛和青海本地奶牛血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量进行了测定。结果表明:引进奶牛血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素均低于本地奶牛。说明从低海拔地区引进到高海拔地区的奶牛具有一定的应激反应, 应对引进奶牛及时观察并进行对症治疗以减少高原应激引起的不良反应。
关键词：奶牛,应激反应,三碘甲腺原氨酸,甲状腺激素,促甲状腺激素
随着畜牧业的快速发展, 环境因素成为制约畜牧业生产的重要因素。高海拔应激已成为青海省引进奶牛品种最普遍的应激因素之一。高海拔应激可引起动物神经内分泌及免疫功能紊乱, 伴随奶牛生理机能、营养代谢状况异常, 甚至引发疾病。
在动物机体复杂的系统调控中, 内分泌系统起着重要的作用。大量研究表明, 胰岛素、甲状腺激素对动物的补偿生长具有调节作用。甲状腺是动物体内十分重要的内分泌器官, 它分泌的三碘甲腺原氨酸 (T3) 、甲状腺激素 (T4) 、促甲状腺激素 (TSH) 是动物机体发挥正常生理机能所必需的重要激素, 对物质代谢和能量代谢、生长发育及神经系统、心血管系统和皮肤维持正常功能等都有重要作用。其分泌受到下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素 (TRH) 和腺垂体分泌的促甲状腺激素的调节[1,2,2,1]。
高海拔对于动物来说是一个重要的应激刺激, 从澳大利亚及天津引进到青海省乐都县的奶牛由于受到高海拔的刺激, 发生了不同程度的应激反应, 表现为食欲减退、咳嗽、呼吸困难、心跳加快、体温升高等, 个别还出现了肺炎症状。为了使引进奶牛迅速适应高原环境, 在进行对症治疗的同时对其血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素进行了测定, 现报道如下。
1 材料与方法
1.1 试验动物
由青海省天露奶牛有限责任公司从澳大利亚 (平均海拔700 m) 及天津 (平均海拔500 m) 引进 (10 d) 青海省乐都县 (平均海拔2 000 m) 的奶牛中分别随机选择30头作为试验组, 同时从本地奶牛中选择30头作为对照组。
1.2 血清的采集与测定项目
用真空采血器进行空腹颈静脉采血, 分别标号。每头牛每次采血15 mL, 分离血清, -25 ℃冷冻保存, 待测。
采用罗氏E601全自动电化学发光免疫仪测定血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量。
1.3 数据处理
试验数据采用SSPS17.0 软件进行分析。
2 结果
由澳大利亚及天津引进的奶牛和本地奶牛血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量见表1。
由表1可以看出, 从低海拔地区 (澳大利亚及天津) 引进到高海拔地区 (青海省乐都县) 奶牛的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量均低于本地奶牛。另外, 引进奶牛还出现了一系列食欲减退、咳嗽、呼吸困难、心跳加快、体温升高等临床表现, 个别还出现了肺炎等高原反应。
注:同列数据肩标字母不同表示差异显著 (P<0.05) , 相同表示差异不显著 (P>0.05) 。
3 讨论与分析
1) 甲状腺激素是一组含碘氨基酸, 对机体的生长、发育、代谢及组织分化具有重要作用, 全部由甲状腺合成和分泌, 是甲状腺的主要分泌产物;而三碘甲腺原氨酸只有20%由甲状腺合成和分泌, 80%由甲状腺激素在外周血转化而来。甲状腺激素本身活性很低, 只有转化成三碘甲腺原氨酸后才具有较强的活性, 其活性是甲状腺激素的数倍。甲状腺激素的合成和分泌受大脑垂体分泌的促甲状腺激素控制, 其分泌过程又直接与大脑皮层接受外界刺激程度有关[4]。哺乳动物对寒冷刺激的反应会引起下丘脑-腺垂体-甲状腺轴功能的改变。急性寒冷刺激经皮肤感受器通过传入神经传至下丘脑, 导致促甲状腺激素释放激素分泌增加[3]。本试验结果表明, 从低海拔的天津 (平均海拔500 m) 及澳大利亚 (平均海拔700 m) 引进到青海省乐都县 (平均海拔2 000 m) 的奶牛血清中三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素水平均低于本地奶牛, 说明引进的奶牛对高原应激没有及时产生相应的生理性反应, 因此出现了一系列食欲减退、咳嗽、呼吸困难、心跳加快、体温升高等临床表现, 个别还出现了肺炎等高原反应。
2) 提高奶牛的生产潜力是大力发展奶牛业的关键环节之一, 其中品种、营养、环境和防疫是影响奶牛生产潜力发挥的四大技术因素。在保证引进优良的奶牛品种、提供全价的营养水平和完善防疫措施的同时, 如何采取有效措施控制和改善引进奶牛对环境的适应性是当前青海省奶牛引进中存在的关键问题之一。对于本试验中出现不同程度高原反应的奶牛采取对症治疗, 特别是应用肾上腺皮质激素 (地塞米松、氢化可的松) 后, 症状得到了及时缓解, 减少了高原应激造成的损失。对高原应激奶牛在对症治疗的同时应用肾上腺皮质激素, 可以调节奶牛的内分泌, 有利于促进机体的生长发育、物质代谢和组织分化, 对提高机体抗应激反应具有重要意义。
参考文献
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血清应激激素 篇2
1 材料与方法
1.1 试验动物
选用体况良好、成年的新西兰公兔12只。
1.2 试验设计
试验分为2组, 即高温 (31±2) ℃热应激组和适温 (18±2) ℃非热应激组, 每组6个重复。试验前对周边环境、兔舍、饲养工具等进行消毒处理。试验经1周预试后, 进入正试期。由专人饲喂, 每天早晚各喂1次, 自由饮水, 每天补充充足的青草。试验期间观察兔只的健康状况, 包括:活动、呼吸、精神状态等等。试验共进行了78 d。
1.3 试验日粮
基础饲粮参照推荐NRC (1977) 成年兔维持需要量[1]配制 (表1) , 其营养水平如2所示。
(%)
注:采用的复合预混料每千克产品中的物质含量:钙270g, 铜2 000.0~4 500.0mg, 碘30.0mg, 铁≥8 000.0mg, 锌≥7 000.0mg, 锰≥5 000.0mg, 镁≥10 000.0mg, 硒30.0mg。VA≥550 000IU, VD3≥280 000.0IU, VE≥2 000.0mg, 水分≤10.0%。
1.4 精液品质的测定项目及方法
实验兔在饲养2个月后, 进行人工采精。每3 d采1次精, 共采5次精。
1.4.1 采精量的测定。
采精量可由小试管上的刻度直接读出。
1.4.2 精子活力的测定。
将精液以1∶5或1∶10稀释后, 用移液管取1滴精液于载玻片 (已在37℃电恒温板上预热) 上, 盖上盖玻片, 将之放于显微镜的载物台上, 选择视野进行检测, 用计算机辅助精液分析系统中专用的CEROS分析软件分析精子的活力。
1.4.3 精子畸形率的测定。
用伊红染色法制玻片后, 置于显微镜下用600倍放大倍数观察, 精子总数记数200个, 并计数200个精子中畸形精子数, 最后算出其畸形率。计算公式:精子畸形率=畸形精子数/计数精子总数 (畸形数+正常数) ×100%。
1.4.4 精子密度的检测方法。
将精液稀释20倍后, 用红细胞计数法进行密度测定。
1.5 血清生化指标的测定
试验进行到78 d, 心脏采血, 离心析出血清, 于-80℃冰箱中保存待测。血清样本采用美国雅培 (Abbott) 制药有限公司的化学发光分析仪 (AXSYM) 和该公司的睾酮、皮质醇、T3试剂盒;其中皮质醇采用荧光偏振免疫分析法 (FPIA, FLUORESCENSCENCE POLARIZATION IMMUNASSAY) 测定。睾酮、T3采用微粒子酶免分析法测定 (MEIA, MICROPA RTICLE ENZYME IMMUNO ASSAY) 。
氧自由基相关指标的测定:血清丙二醛 (MDA) 、超氧化物岐化酶 (SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-PX) 、总抗氧化能力 (T-AOC) 以南京建成生物工程研究所提供的试剂盒进行检测。所用仪器主要为721型分光光度计。
1.6 数据统计
数据用DPS统计软件进行单因素有重复试验方差分析, Duncan法进行多重比较。结果用平均数±标准差 (X±S) 表示。
2 结果与分析
2.1 兔只表现
非热应激组兔只活泼好动, 精神状况良好, 毛色顺滑, 采食积极;热应激组兔只呼吸较非热应激组急促, 采食缓慢, 喜欢将身体舒展平躺在饲养笼里, 活动较少。
2.2 精液品质
由表3可知, 高温应激情况与适宜条件下相比, 采精量显著下降 (P<0.05) , 精子活力下降亦呈显著性 (P<0.05) , 精子密度明显减少 (P<0.05) , 畸形率明显上升 (P<0.05) 。
2.3 血清中激素
由表4可知, 热应激组与非热应激组相比, 血清中睾酮、T3 (三碘甲腺原氨酸) 含量明显下降 (P<0.05) , 而皮质醇含量显著升高 (P<0.05) 。
注:同列小写字母不同, 表示差异显著 (P<0.05) 。下表同。
(ng/d L)
2.4 血清中氧自由基相关指标
由表5可知, 热应激组与非热应激组相比, 数据显示差异显著 (P<0.05) , 表明夏季高温热应激可使兔血清中MDA含量升高, SOD、GSH-PX的活性降低, T-AOC值降低。
3 讨论
3.1 热应激对公兔状况的影响
热应激组兔只呼吸较非热应激组急促, 采食缓慢, 喜欢将身体舒展平躺在饲养笼里, 活动较少, 这主要是为了尽量减少活动增加的热量, 从而减轻机体的散热负担。
3.2 热应激对公兔精液品质的影响
徐海明等[1]通过对法系兔、德系兔、杂交兔进行研究发现, 高温对杂交兔、法系兔的采精量无显著影响, 但使德系兔的采精量显著下降;极显著影响这3个品种兔精子活力、精子密度, 并使其精子的畸形率显著升高。黄良虎[2]亦报道, 高温季节可使兔的采精量下降, 影响精子的活力和密度。该研究结果除与徐海明等报道的热应激对法系兔采精量无显著变化不同外, 在对精子活力、密度、畸形率方面的影响与上述学者报道的一致。
3.3 热应激对公兔血清激素的影响
该试验结果表明, 高温应激使兔血清中的睾酮减少, 这与李俊杰等[3]、Sanford等[4]和Sundby等[5]对公牛的研究相一致;高温热应激兔血清中皮质醇的含量与非应激状态相比升高, 这一结果与田树军等[6]、Lee[7]和Rhynes等[8]对公牛报道的不一致, 有待进一步研究。
该研究测得高温应激状态下兔血清中T3 (三碘甲腺原氨酸) 水平低于非应激状态兔血清中的T3。这一结果与田树军等[6]对公牛的研究结果一致。此外, 穆玉云等[9]研究报道, 高温下不耐热奶牛和耐热奶牛的T4水平均下降, 张乐萃等[10]也曾指出热应激使鸡的甲状腺分泌甲状腺素 (T3、T4) 减少, 以抑制体内的代谢功能, 减少产热, 维持机体在高温时产热与散热平衡。由此可见, 该试验结果与穆玉云等和张乐萃等的研究结果也是一致的。
3.4 热应激对种公兔血清抗氧化指标的影响
胡国良[11]研究鸡热应激后发现, 血液中的GSH-PX、SOD活性明显下降, MDA含量明显升高, 其结果与笔者的研究结果一致。张霖[12]通过研究猪的热应激后发现, 热应激可使血液GSH-PX活性显著降低和血清脂质过氧化物 (LPO) 显著升高, 由于丙二醛 (MDA) 是脂质过氧化物 (LPO) 的最终分解产物之一, 因此血清中脂质过氧化物 (LPO) 的升高与丙二醛 (MDA) 升高是同步的, 可见, 对猪的研究结果与兔的是相同的。由此可见, 高温热应激可使动物血清中丙二醛含量升高, GSH-PX、SOD活性明显下降, 总抗氧化能力降低, 说明动物机体在热应激状态下, 与氧自由基的生成和清除相关的氧化、抗氧化系统遭到了破坏, 出现由于氧自由基产生过多的氧化应激现象。
4 结论
热应激状态下, 兔血清中睾酮、三碘甲腺原氨酸 (T3) 的含量减少, 血清中皮质醇、丙二醛含量升高, GSH-PX、SOD活性明显下降, 总抗氧化能力降低, 最终导致兔精液品质下降。
参考文献
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血清应激激素 篇3
1 材料
试验动物为4月龄健康的雌性北京白羽鹌鹑, 共300只, 由黑龙江八一农垦大学动物科技学院实验动物中心提供。
2 方法
预饲1周, 温度 (25±1) ℃, 湿度50%~60%, 自由采食, 自由饮水。随机选取30只, 空腹12 h后测定其各项正常 (冷应激0 h) 参数值, 作为对照。
2.1 急性应激试验
每组30只, 空腹12 h后于 (3.0±1.0) ℃条件下分别冷应激0.25, 0.5, 1, 2, 4 h, 自由饮水。应激结束后立即测定直肠温度、心率、呼吸频率, 然后采血。
2.2 慢性应激试验
每组30只, 空腹12 h后于 (9.0±1.0) ℃条件下分别冷应激1, 2, 4, 8 h, 自由饮水。应激结束后立即测定直肠温度、心率、呼吸频率, 然后采血。
2.3 血清样品的采集和制备
颈静脉采血2 m L, 置于已灭菌的5 m L离心管中, 37℃恒温水浴20 min, 4℃、3 500 r/min离心10 min, 收集血清。将血清样品分装于1.5 m L的Eppendorf管中, 置于冰箱中-70℃低温保存 (冻存时间不得大于6个月) , 用于酶活力检测。血清样品为无溶血血清。
2.4 检测指标
丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 、γ谷氨酸氨基转移酶 (γ-GT) 、肌酸激酶 (CK) 、乳酸脱氢酶 (LDH-L) 、碱性磷酸酶 (ALP) 和胆碱脂酶 (CHE) 活性, 用南京建成生物工程研究所生产的ZS-3型半自动生化分析仪试剂盒测定。
2.5 数据处理
应用Excel建立数据库, 用SPSS统计分析软件中的MEANS过程、ANOVA过程对数据进行描述性统计和多重比较。
3 结果
3.1 冷应激对鹌鹑呼吸频率、心率及直肠温度的影响
在急性冷应激条件下, 随着冷应激时间的延长, 呼吸频率整体呈现波动上升趋势, 冷应激0.25小时时最低, 冷应激2小时时最高, 且两者间差异显著 (P<0.05) , 但与其他组均无显著差异 (P>0.05) ;心率先上升后下降, 冷应激0.25小时时极显著高于其他组 (P<0.01) ;直肠温度整体呈现波动下降趋势, 冷应激0.25小时和2小时时极显著低于对照组 (P<0.01) ;冷应激0.5小时时出现死亡, 2小时和4小时时死亡率达到20.00%, 见表1。
注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 大写字母完全不同表示差异极显著 (P<0.01) , 小写字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。
在慢性冷应激条件下, 随着冷应激时间的延长, 呼吸频率整体呈现先迅速下降后快速上升的趋势, 冷应激2小时时极显著低于对照组 (P<0.01) , 冷应激4小时时极显著高于对照组 (P<0.01) ;心率先迅速下降后快速上升, 冷应激2小时时极显著低于对照组 (P<0.01) , 冷应激4小时和8小时时极显著高于对照组 (P<0.01) ;直肠温度先下降后上升, 冷应激1小时时最低, 冷应激4小时时最高, 且两者间差异显著 (P<0.05) , 但与其他组均无显著差异 (P>0.05) ;无死亡现象发生, 见表2。
注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 大写字母完全不同表示差异极显著 (P<0.01) , 小写字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。
3.2 冷应激对鹌鹑血清酶活性的影响
在急性冷应激条件下, 随着冷应激时间的延长, ALT先下降后上升, 冷应激0.5小时时最低, 4小时时最高极显著高于对照组 (P<0.01) ;γ-GT整体呈上升趋势, 冷应激4小时时极显著高于对照组 (P<0.01) ;CK先上升后下降, 对照组最低, 冷应激1小时时最高, 且两者间差异显著 (P<0.05) , 但与其他组均无显著差异 (P>0.05) ;LDH-L整体呈现波动上升趋势, 冷应激2小时和4小时时极显著高于对照组 (P<0.01) ;CHE整体略有上升, 但各组间差异均不显著 (P>0.05) ;ALP整体呈现上升趋势, 冷应激2小时和4小时时极显著高于其他组 (P<0.01) , 见表3。
注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 大写字母完全不同表示差异极显著 (P<0.01) , 小写字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。
在慢性冷应激条件下, 随着冷应激时间的延长, ALT先下降后上升, 冷应激2小时时最低, 冷应激8小时时最高且显著高于对照组 (P<0.05) ;γ-GT整体呈现上升趋势, 冷应激8小时时最高, 且显著高于对照组 (P<0.05) ;CK先上升后下降, 对照组最低, 冷应激2小时时最高, 且两者间差异极显著 (P<0.01) , 但与其他组均无显著差异 (P>0.05) ;LDH-L整体略有上升, 但各组间差异均不显著 (P>0.05) ;CHE整体略有上升, 但各组间差异均不显著 (P>0.05) ;ALP整体呈上升趋势, 冷应激8小时时极显著高于对照组 (P<0.01) , 见表4。
注:同列数据肩标含相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 大写字母完全不同表示差异极显著 (P<0.01) , 小写字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。
4 讨论
4.1 急性冷应激对鹌鹑呼吸频率、心率和直肠温度的影响
试验中, 鹌鹑在冷应激5分钟时开始出现呆立、缩颈、闭目、肌颤和聚群, 这是机体的一种御寒反应。当冷应激15分钟时, 心率显著升高、体温显著下降、呼吸频率下降到最小值, 这可能是机体处于应激状态惊恐阶段的休克相反应, 此时机体的抵抗力低于正常水平, 心率的增加有助于提高机体代谢率和产热。当冷应激0.5~1小时时, 呼吸频率、心率和直肠温度均略低于正常状态, 这可能是机体处于应激状态适应阶段的反应, 此时机体代谢率升高, 表现为适应和抵抗能力增强, 但有防御贮备能力的消耗。当冷应激2小时时, 体温显著下降至最低值, 呼吸频率上升至最大值, 心率下降, 死亡率突然显著升高, 这可能是机体进入应激状态的衰竭阶段, 再次出现惊恐阶段症状, 器官功能衰退。当冷应激4小时时, 呼吸频率、心率和直肠温度接近正常状态, 但死亡率仍居高不下, 这可能是机体仍处在应激状态的衰竭阶段。如继续延长应激时间, 很可能由于器官功能的进一步衰退导致死亡率急剧升高。该变化情况与姜冬梅等[6]的结果差异较大, 可能是由于试验动物不同造成的。试验所测定的体温与宋东亮等[7]的结果差异较大, 可能是由于测量部位不同造成的。
4.2 慢性冷应激对鹌鹑呼吸频率、心率和直肠温度的影响
试验中, 当冷应激1小时时, 呼吸频率、心率和直肠温度均开始下降, 仅略低于正常状态, 这可能是由于应激源相对温和, 加之鹌鹑可以通过自由活动提高机体代谢率和产热, 此时机体的抵抗能力仍较强。当冷应激1.5小时时开始出现呆立、缩颈、闭目和聚群的御寒反应。当冷应激2小时时, 呼吸频率和心率急剧下降且显著低于正常状态, 这可能是机体处于应激状态惊恐阶段的休克相反应。当冷应激4小时时, 呼吸频率和心率迅速上升且显著高于正常状态, 体温略高于正常状态, 这可能是机体处于应激状态惊恐阶段的反休克相反应, 此时的机体反应恰好与休克相相反, 表现为机体代谢率升高, 甚至超过正常状态。当冷应激8小时时, 呼吸频率和体温均接近正常状态, 但心率继续加快, 这可能是机体处于应激状态适应阶段的反应, 表现为较适应, 心率的增加有助于提高机体代谢率和产热。如继续延长应激时间, 心率可能逐渐下降至略高于正常状态, 直至进入应激状态的衰竭阶段再次出现剧烈变化。
4.3 冷应激对鹌鹑血清酶活性的影响
血清酶大多是组织特异性的, 血清中酶的活性代表着特定组织器官的代谢水平和功能状态。正常情况下, 一些细胞内的酶由于细胞膜的屏障作用不易逸出, 只有细胞受到损伤, 才使细胞内酶释放的速度加大, 血清酶活性升高。因此, 血清中酶活性的高低不仅可以反映体内代谢水平, 还可作为临床诊断的指标。
在急性冷应激试验中, 当冷应激1小时时CK活性显著升高。血清中的CK主要来自骨骼肌, 在体内主要促进磷酸肌酸转化为肌酸和ATP。冷应激后肌肉能量供应不足, 细胞膜的通透性升高, 可能导致细胞中CK逸出, 使血浆CK活性升高。当冷应激2小时时, γ-GT、LDH-L和ALP活性显著升高。γ-GT在肝细胞内合成并分泌, 血清中γ-GT活性下降表明肝组织合成功能严重受损。LDH-L广泛存在于动物机体的组织器官中, 血清LDH-L活性升高是机体组织细胞广泛损伤的结果。ALP主要来自肝脏、骨骼、胆囊, 参与脂肪代谢。随着冷应激时间的延长, 机体出现以肝脏为代表的主要器官细胞通透性增大、功能异常或受损, γ-GT、LDH-L和ALP逸入血清, 导致血清中三者活性升高。当冷应激4小时时, ALT活性显著升高。ALT主要存在于组织细胞中, 且在心脏、肝脏中活性最高。在整个冷应激过程中, CHE活性呈上升趋势, 这可能是由于冷应激使细胞膜通透性增加, 致使生理条件下定位于神经突触前后膜上CHE逸入血清[8,9,10]。
在慢性冷应激试验中, 当冷应激2~4小时时CK活性显著升高, 当冷应激8小时时ALT、γ-GT和ALP活性显著升高, 机理可能与急性冷应激试验相同。
5 结论
鹌鹑不同生理指标 (呼吸频率、心率和体温) 对冷应激的敏感性不同, 试验中从高到低的顺序为心率、呼吸频率、体温。
鹌鹑不同血清酶对冷应激的敏感性不同, 试验中从高到低的顺序为CK、γ-GT、ALP、LDH-L、ALT、CHE。
摘要：为了研究冷应激对鹌鹑生理指标的影响, 试验采用在自由活动和自由饮水条件下, 使北京白羽鹌鹑处于急性和慢性冷应激状态, 然后测定其在冷应激前后不同时间点的呼吸频率、心率和体温, 以及血清中丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 、γ-谷氨酸氨基转移酶 (γ-GT) 、肌酸激酶 (CK) 、乳酸脱氢酶 (LDH-L) 、碱性磷酸酶 (ALP) 和胆碱脂酶 (CHE) 活性。结果表明:鹌鹑不同生理指标对冷应激的反应敏感性不同, 从高到低的顺序为心率、呼吸频率、体温;鹌鹑不同血清酶对冷应激的反应敏感性也不同, 从高到低的顺序为CK、γ-GT、ALP、LDH-L、ALT、CHE。
关键词：冷应激,鹌鹑,呼吸频率,心率,血清酶活性
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隐睾患儿血清性激素水平的研究 篇4
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2014年1~12月我科收治的155例隐睾患儿, 均通过临床表现和超声检查确诊。年龄10个月~5岁, 平均2.5岁;其中单侧129例 (包括左侧62例, 右侧67例) , 双侧26例。并选取同期住院的其他疾病患儿作为对照组, 要求双侧睾丸位置、大小正常, 无内分泌相关疾病, 包括鞘膜积液、腹股沟斜疝病例, 共35例, 年龄1~4.5 (平均2.9) 岁。
1.2 检查方法
全部病例于上午7:00~9:00空腹抽外周静脉血, 检测睾酮 (T) 、双氢睾酮 (DHT) 、雌二醇 (E2) , 卵泡雌激素 (FSH) 、黄体生成素 (LH) , 用放射免疫法检测。将隐睾病例与对照病例、单侧隐睾与双侧隐睾的检测结果进行对比。
1.3 统计学处理
数据采用SPSS 13.0统计学软件进行处理。计量资料采用±s表示, 行t检验。P<0.05示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组血清性激素比较
隐睾组睾酮、双氢睾酮比对照组低, 有统计学差别 (P<0.05) 。卵泡雌激素、黄体生成素、雌二醇比对照组高, 有统计学意义 (P<0.05) 。见表1。
2.2 双侧隐睾与单侧隐睾血清性激素比较
双侧隐睾的睾酮、双氢睾酮比单侧隐睾低, 差别有统计学意义 (P<0.05) 。见表2。
3 讨论
关于隐睾的病因很多, 内分泌异常, 促性腺激素不足, 或睾丸对促性腺激素不敏感, 雄激素水平过低, 雌激素水平过高等等, 使睾丸缺乏下降的动力;局部解剖异常, 如引带异常或缺如, 局部粘连, 使睾丸下降受阻[1,7]。其中下丘脑-垂体-性腺轴的内分泌作用对睾丸的下降非常关键。下丘脑分泌促性腺激素释放激素, 腺垂体分泌黄体生成素、卵泡刺激素, 促使睾丸间质细胞 (Ledig细胞) 分泌睾酮, 部分转化为双氢睾酮, 促进睾丸的下降和发育, 内分泌异常将使睾丸下降动力不足, 导致隐睾。
睾酮是男性最重要的雄激素, 由睾丸间质细胞 (Ledig细胞) 分泌, 与睾丸下降关系密切。部分睾酮在5α还原酶作用下转化为双氢睾酮, 与雄激素受体结合后发挥作用。双氢睾酮与受体的结合力更强, 而分解率只有睾酮的1/5, 所以其活性更强[1]。睾酮、双氢睾酮与雄激素受体结合后, 促使睾丸引带、精索的发育, 促进睾丸下降。本研究发现隐睾组比对照组睾酮下降, 提示隐睾患儿睾丸Ledig细胞功能受损, 分泌睾酮能力降低。数据显示睾酮、双氢睾酮的变化成正相关, 说明隐睾患儿睾酮转化为双氢睾酮的过程不受影响, 不存在5 a还原酶的缺乏, 所以双氢睾酮水平低下, 主要是由睾酮不足引起, 导致睾丸下降不全。这些均表明睾丸下降与血清睾酮密切相关, 睾酮不足是造成睾丸下降不全的原因之一。Taneli Raiviv[2]发现生后3个月, 隐睾患儿测不到雄激素活性, 而非隐睾的孩子能测到雄激素生物活性, 认为隐睾的下丘脑-垂体-性腺轴异常, 雄激素活性下降, 内分泌受损。
垂体分泌两种促性腺激素, 卵泡雌激素 (FSH) 、黄体生成素 (LH) 。FSH作用于睾丸生精细胞、支持细胞, 促使睾丸产生精子、抑制素。LH作用于睾丸间质细胞, 促使睾丸产生睾酮。而睾酮浓度上升到一定水平, 可反馈抑制下丘脑、腺垂体, 减少FSH、LH的分泌。抑制素只对FSH有负反馈作用。本研究发现隐睾患儿的FSH、LH比对照组升高, 考虑是由于睾酮下降, 对垂体的抑制减少, 垂体分泌LH、FSH增多, 血清FSH、LH水平升高。证明隐睾患儿存在下丘脑-垂体-性腺轴功能紊乱, 其可能是导致隐睾的原因。
对于FSH升高, 也可能是睾丸支持细胞分泌的抑制素减少, 对FSH的负反馈减少, 导致FSH升高。Annc-Marrt Suomi[3]发现隐睾患儿抑制素B下降, FSH升高, 且隐睾越重, 变化越明显。
雌二醇是由睾丸支持细胞和肾上腺合成, 或外周组织转化而来。雌二醇对睾酮有抑制作用, 抑制下丘脑释放Gn RH, 抑制睾丸下降。本研究发现隐睾组雌二醇比对照组升高, 可能是隐睾的诱因之一。当下丘脑-垂体-性腺轴功能障碍时, 对雌二醇降解减少, 外周组织转化增多, 雌二醇升高, 抑制睾酮, 影响睾丸下降。M.Elicevik[4]报道隐睾患儿的睾丸旁组织存在雌二醇受体的过度表达, 在Ledig细胞里雌二醇会抑制雄激素的生成, 上升的胎盘雌二醇可能是隐睾的易发因素。
隐睾的治疗包括手术治疗和激素治疗, 激素治疗包括HCG肌注, 或Gn RH鼻粘膜喷雾吸入, 或两者结合治疗, 可以刺激睾丸分泌睾酮, 促使睾丸的下降和发育, 但对于是否应该使用激素、激素治疗的时机、术前用或术后用、用量仍有争议。Giannopoulos Michael[5]等分析了LH-RH、HCG综合治疗隐睾的效果, 对2467例治疗后, 59%睾丸下降, 认为合理的激素治疗可以收到良好的效果。而Ami VThorsson[6]认为, 激素治疗存在副作用, 不推荐隐睾患儿使用激素治疗。本研究发现, 双侧隐睾的睾酮、双氢睾酮比单侧低, 提示双侧隐睾的内分泌损害比单侧更重, 而隐睾患儿的睾酮、双氢睾酮都比对照组低, 均存在内分泌异常。HCG、Gn RH能促进睾酮分泌, 促使睾丸下降和发育。所以, 笔者认为隐睾可以使用激素治疗, 尤其是双侧隐睾的患儿, 内分泌受损更重, 激素治疗的效果会更好。
总之, 隐睾与下丘脑-垂体-性腺轴的关系密切, 隐睾患儿的睾酮、双氢睾酮下降, 雌二醇、卵泡刺激素、黄体生成素上升, 性腺轴的功能紊乱是导致隐睾的重要原因。隐睾可以使用激素治疗, 双侧隐睾患儿内分泌受损更重, 激素治疗的效果会更好。
摘要：选取2014年112月我院收治隐睾患儿155例。另选同期住院的病人35例作为对照。全部病例均抽外周静脉血, 检测睾酮 (T) 、双氢睾酮 (DHT) 、雌二醇 (E2) , 卵泡雌激素 (FSH) 、黄体生成素 (LH) 。结果隐睾组血清睾酮、双氢睾酮比对照组低, 有统计学差别 (P<0.05) ;隐睾组血清卵泡雌激素、黄体生成素、雌二醇比对照组高, 有统计学差别 (P<0.05) 。双侧隐睾的睾酮、双氢睾酮比单侧隐睾低 (P<0.05) 。隐睾与下丘脑-垂体-性腺轴的关系密切, 隐睾患儿的睾酮、双氢睾酮下降, 雌二醇、卵泡刺激素、黄体生成素升高, 下丘脑-垂体-性腺轴的功能紊乱可能是导致隐睾的重要原因;隐睾可以使用激素治疗, 双侧隐睾患儿内分泌受损更重, 激素治疗的效果会更好。
关键词：隐睾,性激素,水平
参考文献
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血清应激激素 篇5
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取进行腹腔镜修补术的37例胃穿孔患者为观察组, 并以开腹修补术治疗的37例患者为对照组。对照组的37例患者中, 男23例, 女14例, 年龄23~74 (45.7±6.8) 岁, 病程1.8~38.5 (15.2±2.9) h, 病灶直径6.0~25.0 (11.2±1.8) mm, 穿孔部位:胃窦处28例, 其他部位9例。观察组的37例患者中, 男24例, 女13例, 年龄24~74 (45.9±6.6) 岁, 病程1.7~39.0 (15.4±2.8) h, 病灶直径5.0~26.5 (11.4±1.7) mm, 穿孔部位:胃窦处27例, 其他部位10例。
1.2 方法
1.2.1 治疗方法
对照组按照常规的开腹手术对胃穿孔进行修补, 首先进行麻醉, 然后于上腹部做15~20 cm的手术切口, 然后依次进行各层组织及肌肉的分离, 并对腹腔进行全面探查, 然后将穿孔部位的坏死组织进行清除, 并以4号线进行修补, 然后将手术部位进行冲洗, 并留置引流管及其他其他后期处理。观察组则以腹腔镜手术对胃穿孔进行修补, 首先进行麻醉, 然后建立压力维持在10~12 mm Hg之间, 以常规三孔法置入腹腔镜等手术器械, 然后在腹腔镜辅助下对腹腔进行探查, 对于穿孔部位的坏死组织及脓液等进行去除冲洗等处理, 然后在可视条件下对穿孔进行常规修补, 修补完毕后进行其他后期处理。然后将两组患者手术前后的胃肠激素及应激指标进行比较。
1.2.2 检测方法
取两组患者手术前与手术后3 d、7 d及15 d的餐前静脉血进行检测, 取血清标本进行胃肠激素及应激指标的检测, 其中胃肠激素检测指标包括VIP、CKK及GAS, 应激指标检测项目为应激激素及炎性应激指标, 其中应激激素指标包括5-HT、NE、DA, 炎性应激指标包括IL-1β、IL-6及PCT, 其均采用酶联免疫试剂盒进行检。
1.3 统计方法
该研究中数据以软件SPSS15.0处理, 计量资料进行t检验, 计数资料以χ2检验。
2 结果
2.1 两组患者不同时间的胃肠激素水平比较
手术前两组的血清VIP、CKK、GAS比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 而手术后3 d、7 d及15 d观察组均高于对照组, 且中观察组术后3 d、7 d及15 d均高于术前, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表1。
注:与对照组比较, t=6.541, 5.885, 6.236, 6.587, 6.135, 6.279, 8.102, 7.305, 6.747, *P<0.05;与术前比较, t=6.138, 5.972, 6.117, 6.236, 6.497, 7.285, 6.929, 6.503, 5.785, #P<0.05。
2.2 两组患者不同时间的应激激素指标比较
手术前对照组与观察组的血清5-HT、NE、DA之间比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 而手术后3 d、7 d及15 d观察组均低于对照组, 且中观察组术后7 d及15 d均低于术前, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表2。
注:与对照组比较, t=5.543, 6.231, 6.675, 6.846, 5.636, 6.756, 7.008, 7.119, 6.756, *P<0.05;与术前比较, t=5.824, 6.669, 7.115, 6.207, 5.963, 5.874, #P<0.05。
2.3 两组患者不同时间的炎性应激指标比较
手术前对照组与观察组的血清IL-1β、IL-6及PCT之间比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 而手术后3 d、7 d及15 d观察组均低于对照组, 且中观察组术后7 d及15 d均低于术前, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表3。
3 讨论
胃穿孔是在临床中并不少见的一类急腹症, 其对患者的影响较大, 不仅仅胃内容物流入腹腔, 且对胃肠道功能状态也造成极为不良的影响, 因此对于胃穿孔的治疗主张极为对穿孔进行修补治疗, 而近些年来腹腔镜手术在胃穿孔中的应用率不断提升, 其微创的优势广受肯定, 同时对其的研究也不断增多[3,4]。而研究主要集中于其对于穿孔的修补效果与手术性创口的缩小方面额, 而对于由手术导致的机体其他方面, 如胃肠功能影响及应激程度的影响程度却相对少见。其中胃肠激素是有效反应机体胃肠功能状态的一个重要方面[5,6], 而中的VIP、CKK、GAS则是有效反应胃肠道及胆囊分泌功能的有效指标, 因此对其波动的研究可以有效反应胃肠道功能状态的受创程度。而应激状态中应激激素与炎性应激指标均是对反应敏感性较高的指标, 其可短时间内反应机体的综合应激程度, 对于疾病与手术引起的机体创伤的反应价值均较高, 因此临床对其研究较热, 但是鲜有其在腹腔镜胃穿孔修补术患者的变化研究, 因此此方面的探讨空间较大。
注:与对照组比较, t=7.063, 6.449, 6.259, 6.786, 7.153, 6.424, 7.097, 5.835, 6.323, *P<0.05;与术前比较, t=5.904, 5.869, 5.743, 6.124, 6.357, 6.662, #P<0.05。
该研究就腹腔镜胃穿孔修补术患者围术期胃肠激素及应激指标的变化情况进行观察研究, 发现其较开腹手术患者胃肠激素及应激方面的指标均表现出更佳的状态, 其中血清胃肠激素中的VIP、CKK、GAS呈现出持续升高的趋势, 说明其处于持续改善的状态, 应激激素指标指标中的5-HT、NE、DA及炎性应激指标中的IL-1β、IL-6、PCT则均呈现持续降低的趋势, 说明其对于患者造成的手术性创伤较小, 且恢复更快, 机体的不良应激改善更为明显, 从而进一步从机体应激的方面肯定了其微创性。上述研究也肯定了其综合的微创优势, 不仅仅体表手术创口较小, 且对于胃肠道及机体整体不良影响也较小。
摘要：目的 研究腹腔镜胃穿孔修补术患者围术期胃肠激素及应激指标的变化情况。方法 选取2010年9月—2013年4月该院进行腹腔镜修补术的37例胃穿孔患者为观察组, 并以开腹修补术治疗的37例患者为对照组, 然后将两组患者手术前后的胃肠激素及应激指标进行比较。结果 观察组术后的胃肠激素、应激激素及炎性应激指标也均优于对照组, P<0.05。结论 腹腔镜胃穿孔修补术患者围术期胃肠激素及应激指标的波动均优于开腹手术。
关键词：腹腔镜胃穿孔修补术,胃肠激素,应激指标
参考文献
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血清应激激素 篇6
1对象和方法
1.1对象
接触CS2女工60人为接触组,平均年龄(34.12±6.34)岁,平均工龄(11.23±4.57)a,同时排除各型糖尿病、神经系统疾病以及高血压患者;对照组为同一工厂中不接触CS2的后勤人员,如保安、清洁工等,平均年龄在(35.84±8.13)岁,平均工龄(9.48±5.26)a。两组在年龄、工龄、烟酒嗜好及文化程度等方面差异均无统计学意义(P>0.05)。
1.2生产环境CS2浓度检测
采用丹麦Bak公司1302型多功能气体红外线检测仪连续8 h定点监测。
1.3性激素测定
采用放射免疫法检测血清中性激素的水平。DFM-96型放射免疫γ计数器(中国科大中佳公司)、水浴恒温振荡器(国华企业SHZ-82)、微量加样器(德国eppendorf移液器)、Biofuge primo R型低温离心机(德国Heraeus公司)。CS2为分析纯,由上海试剂厂提供。促性腺激素释放激素(GnRH)、促黄体激素(LH)、促卵泡激素(FSH)、催乳素(PRL)放射免疫试剂盒均由北京北方生物技术研究所提供,测定过程严格按照药盒操作规程进行操作。
1.4统计学处理
所有数据均以x±s表示,采用Excel 2003建立数据库,用SPSS 12.0软件包对数据进行统计学分析,检验水平为α=0.05,以P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
结果2.1接触浓度接触组生产环境中CS2平均浓度为13.37 mg/m3(6.34～21.02 mg/m3),稍高于我国现行卫生标准10 mg/m3。
2.2研究对象血清中性激素水平表1显示,CS2接触组GnRH、LH、PRL水平均低于对照组(P<0.05),FSH则明显高于对照组(P<0.05)。
注:经统计学分析,与对照组比较,aP<0.05,Gn RH—促性腺激素释放激素;PRL—催乳素;FSH—促卵泡激素;LH—促黄体激素。
考虑到性激素的分泌具有昼夜周期变化性,亦会受到睡眠类型不同的影响[1],而CS2接触组工人多是下夜班后采血,这是与对照组不同的可能的混杂因素,经过对资料的再处理之后未发现轮班制度对所测激素产生统计学上的意义影响,即所测两组之间激素水平的不同是由于长期接触CS2所致。
3讨论
CS2作为一种重要的环境内分泌干扰物,对女性生殖功能的毒性至今已有大量报道[2,3,4],但其对女性生殖内分泌的干扰作用目前研究比较少,研究机制亦尚不清楚。
下丘脑-垂体-性腺轴是调节机体生殖内分泌的主要系统,对于维持正常的性功能具有至关重要的作用。Gn RH为下丘脑合成与释放的小分子多肽,其为连接脑组织和生殖系统的主要神经肽,对垂体前叶FSH与LH激素的分泌与合成具有一定的作用;FSH的主要生理作用是促进雌性动物子宫内膜生长、排卵、刺激多卵泡发育等;LH对促进卵泡发育成熟、排卵及黄体生成与分泌等均具有重要的作用;PRL由垂体前叶嗜碱性细胞分泌,又称黄体生成素,有促进黄体分泌孕酮(P)、维持机体内环境的稳定等作用。
本研究结果显示,接触低浓度CS2的女工血清中Gn RH、LH、PRL水平低于对照组,FSH含量则高于对照组,这说明接触CS2在一定程度上会影响女工血清中性激素的水平,进一步可能会干扰下丘脑-垂体-性腺轴的正常生理功能。江泉观等[5]认为CS2染毒对血清中LH水平的影响可能是由于CS2直接损伤垂体所致;血清中PRL下降亦表明垂体功能受到一定的影响;也可能是CS2在机体的代谢产物如二硫代氨基甲酸酯、硫尿及噻唑啉酮等与机体内Zn2+、Cu2+等金属离子络合,从而影响以Zn、Cu为辅酶因子的羟化酶的活力而影响激素的合成[6]。本次调查结果发现CS2接触组血清中FSH水平明显高于对照组,这与Wgar等[7]对CS2暴露男性的调查结果一致,下丘脑-垂体-性腺轴之间存在一系列的反馈系统。有学者研究表明,CS2染毒男性睾酮分泌量减少而产生负反馈使血清中FSH含量明显升高,而在女性中的作用机制有待进一步研究。由下丘脑分泌与合成的Gn RH含量的变化说明长期接触一定浓度的CS2亦会影响下丘脑的正常功能。
综上所述,接触低浓度的CS2对女性血清中性激素有一定程度的影响,但其具体机制尚待进一步的研究。
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血清应激激素 篇7
关键词：急性应激,胸腺,ACTH,胸腺肽
应激在我们的日常生活中非常普遍, 几乎每一个人都会遇到某些应激源的作用。过强或持续时间比较长的应激对机体是有害的, 影响机体的生理状态和免疫系统[1], 应激对机体健康的影响越来越受到重视。机体在应激状态下, 多出现以交感神经-肾上腺髓质轴和下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴反应为主的变化, 使血清肾上腺糖皮质激素含量增加, 这常常被视为应激的标志[2,3]。
胸腺是机体重要的中枢免疫器官, 是T淋巴细胞发育、成熟的场所, 对机体外周淋巴器官的发育和免疫应答的发生起着重要的调节作用[4]。应激反应可导致胸腺的退化萎缩[5], 并伴有免疫功能受损。目前, 对应激反应中血清胸腺肽浓度变化的研究较少。该研究试图通过急性应激探讨应激对大鼠胸腺指数和血清CORT以及胸腺肽浓度的影响, 为进一步探讨应激影响机体免疫功能的机制与途径奠定基础。测定胸腺指数旨在了解应激对大鼠胸腺体积、重量的影响;检测应激后血清胸腺肽浓度, 旨在了解应激对胸腺肽的影响, 为进一步探讨胸腺肽在应激影响胸腺结构过程中的作用及其机制提供理论依据, 现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
实验于2014年7—8月间以12只Wistar雄性大鼠 (山东大学动物实验中心提供) 为研究对象, 大鼠体重180±10 g, 6只一笼合养 (笼子尺寸为约为500 mm×400 mm×300mm) 。在实验室中在环境适应5 d, 昼/夜周期为12 h/12 h (光照时间为08:00~20:00) , 室内温度为 (23±2) ℃, 湿度为50%左右。适应期内所有动物自由摄食和饮水。适应期后对大鼠进行分组, 采用随机数表法选取6只作为正常对照组, 不作任何实验处理;另6只作为应激组。
1.2 方法
室温下将大鼠置入带有通气孔但可以限制其各个方向活动的束缚器中, 应激刺激持续6 h。应激结束后2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉, 后剖开腹腔, 自腹主动脉抽取血液5 m L, 室温静置30 min后3500 r·min-1离心15 min取上层血清, -20℃保存;剖开胸腔取出胸腺, 清除表面附着的脂肪等其他组织, 用滤纸吸干净其表面的血液, 后用电子天平称量其重量。
1.3 观察指标
(1) 胸腺指数胸腺指数=胸腺重量/体重, 胸腺重以mg为单位, 体重以g为单位。
(2) 血清CORT和胸腺肽的浓度酶联免疫吸附测定法检测血清CORT和胸腺肽的含量。
1.4 统计方法
采用SPSS19.0统计软件对数据进行统计学处理, 计量资料以据以均数±标准差 (±s) 表示, 采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 大鼠胸腺指数
应激后大鼠胸腺指数与对照组比较要低, 但差异无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。
2.2 大鼠血清CORT和胸腺肽的浓度
应激后大鼠血清CORT的浓度明显增高, 与对照组比较差异有统计学意义 (P<0.05) ;胸腺肽的浓度与对照组比较显著性减低, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表2。
注:与对照组比较#P<0.05。
3 讨论
胸腺是机体主要的免疫器官, 为T淋巴细胞的成熟和选择提供微环境, 在免疫功能的执行与维持中发挥重要的作用。胸腺随着年龄的增长而退化萎缩, 受性激素的影响[6,7], 因此本实验中研究对象选择的是青春期雄性Wistar大鼠。
各种应激刺激均可导致胸腺退化, 这种退化是在机体应激时, 通过下丘脑-垂体-肾上腺轴的作用而发生的[8]。这与该实验的结果类似, 大鼠急性应激6 h后血清CORT的浓度 (89.05±4.30) pg/m L明显增高, 与对照组 (67.82±4.76) pg/m L比较差异有统计学意义。
胸腺退化萎缩意味着在细胞免疫功能中起主导作用的T淋巴细胞的数目减少, 从而导致细胞免疫功能下降甚至抑制。胸腺指数是反映机体胸腺免疫功能的重要指标之一, 其数值高低的变化可以反映机体免疫功能的状态[9,10]。该实验中, 我们观察到大鼠急性应激6 h后, 胸腺指数出现降低 (1.99±0.15) mg/g, 但与对照组 (2.06±0.24) mg/g比较差异无统计学意义, 这可能是急性应激对胸腺体积、重量的影响需要一个反应过程, 可以通过延长观察时间点来予以验证;或者是短暂应激对胸腺体积、重量的影响较小, 需要一定的时间积累;也可能是应激强度相对较小, 对胸腺的影响有限, 可以加大应激的强度来进行验证。